Practica 3. Inhibición del crecimiento de microorganismos Objetivo Determinar si el microorganismo tiene desarrollada una resistencia a antibióticos o no. Introducción Es necesario controlar el crecimiento de los microorganismos para poder potenciar sus efectos beneficiosos o productivos y limitar los indeseables, contaminantes o patógenos. Para ello se cuenta con una serie de herramientas químicas y físicas. La destrucción de los microorganismos y la inhibición del crecimiento no es un proceso simple, debido a que la eficacia de un agente antimicrobiano es afectada por 6 factores. - Tamaño de la población.- debido a que la muerte es exponencial, una población muy grande requiere de mayor tiempo. - Composición de la población.- la eficiencia del antimicrobiano varia considerablemente con respecto a la naturaleza de los organismos que son tratados por que la suceptibilidad es distinta - Concentración o intensidad del agente antimicrobiano.- a menudo, pero no siempre entre mayor sea la concentración del agente quimico o mas intenso agente físico, mas rápidamente se destruyen los microorganismos. Pero generalmente la eficiencia no esta relacionada con la concentración o intensidad. - Tiempo de exposición.- cuanto mas tiempo se exponga una población a un determinado agente, mas organismos se destruirán. - Temperatura.- a menudo un aumento en la temperatura aumenta la actividad de un agente quimico. - Entorno.- la población que se quiere destruir no se encuentra aislada, esta rodeada de diversos factores ambientales que pueden protegerla o facilitarla su destrucción. Desarrollo la práctica se realizó en 3 pasos. Primera parte.En dos tubos con caldo nutritivo se sembró con dos cepas bacterianas, en un tubo se sembró utilizando la cepa 3 que era gram – mientras que el otro se utilizó la cepa 26 que era gram + ya realizadas dichas siembras colocamos los tubos en el shaker durante 24 horas. Segunda parte. En esta prueba parte de la muestra de los tubos los colocamos en cajas de Petri con agar Muller Hinton y realizamos una siembra de las muestras procediente de los tubos, lo dejamos esperar 15 minutos aproximadamente y después le colocamos un antibiograma a cada caja, en la caja de gram – in antibiograma color azul, mientras que en la caja con gram + el antibiograma color rosa. Los colocamos en la estufa a 28°C durante 24 horas y después vimos los resultados Resultados Antibiograma azul BHL C.F LEV E AM TE SXT CTX GE CXM FEP DC PE Antibiograma Gram + IND S S INDR S S R S R S R R Gram 0 10 MM 20 MM 7 MM 20 MM 14 MM 0 20 MM 10 MM 10 MM 0 0 rojo Agar nutritivo NF CL CRO AM AK SXT CTX GE CF EEP NET NET LEV + S S S S S S S S S S S S S Cuestionario 1.- Mecanismo de resistencia en bacterias Las bacterias de manera natural pueden ser La resistencia bacteriana es un fenómeno creciente caracterizado por una refractariedad parcial o total de los microorganismos al efecto del antibiótico generado principalmente por el uso indiscriminado e irracional de éstos y no sólo por la presión evolutiva que se ejerce en el uso terapéutico. Desde el principio de la era antibiótica los fenómenos de resistencia a estas sustancias han sido descritos. Cabe destacar la importancia inicial de cepas de Staphylococcus aureus capaces de degradar la penicilina y la posterior aparición de esta misma bacteria con resistencia a la meticilina. Inicialmente el problema fue resuelto con el descubrimiento o síntesis de nuevas sustancias que eran capaces de controlar las bacterias con este fenómeno, y aparecen medicamentos como los aminoglucósidos, macrólidos, glicopéptidos, entre otros. Sin embargo, esto no es suficiente y cada vez aparecen nuevos mecanismos que son difíciles de controlar por estos medicamentos. Se ha encontrado que la prevalencia de organismos patógenos humanos resistentes a los antibióticos es cada vez mayor, pero el descubrimiento y desarrollo de nuevos antibióticos que controlen éstos es mucho más lento. Son varias razones las que explican este hecho: 2.- Defina Resistencia, Sensibilidad e indiferencia ante antibiótico El fenómeno de resistencia tiene un sustrato genético intrínseco o adquirido que se expresa fenotípicamente por mecanismos bioquímicos. De esta manera puede observarse la resistencia desde el ambiente biológico y otro el bioquímico Resistencia relativa o intermedia: ocurre un incremento gradual de la MIC (concentración inhibitoria mínima) a través del tiempo. Para obtener un efecto terapéutico es necesario alcanzar niveles séricos y tisulares adecuados. La susceptibilidad o resistencia del germen es en este caso dependiente de concentración. • Resistencia absoluta: sucede un incremento súbito en la MIC de un cultivo durante o después de la terapia. Es inefectivo el incremento de la dosis clínica usual. Ejemplo de ello es la Pseudomonas spp. resistente a gentamicina y el Streptococcus pneumoniae altamente resistente a penicilina y uso de levofloxacina. • Seudorresistencia: ocurre una resistencia in vitro pero una gran efectividad in vivo. Se denomina tolerancia antibiótica al fenómeno en el cual la diferencia entre la MBC (concentración bactericida mínima) y la MIC es muy grande lo cual ocurre con relaciones MBC/MIC mayores de 8 lo que permite la persistencia del microorganismo. Sensibilidad. las cepas que presentan suceptibilidad intermedia tienen una respuesta variable a un antimicrobiano como consecuencia de la perdida o iniciativa de sus mecanismos de defensa. 3.- Cuales son los mecanismos de sinergismo y antagonismo en mezclas de antibiticos. el sinergismo indica que la actividad conjunta de dos antimicrobianos es mayor que la suma de las actividades individuales de los antimicrobianos. El efecto contrario al sinergismo, el antagonismo, es la actividad que presentan dos antimicrobianos juntos y es significativamente menor que la suma de las actividades de los dos antimicrobianos cuando actúan separados. 4.- Defina antibiótico Los antibióticos son moléculas derivadas del metabolismo de bacterias y hongos principalmente, pero también pueden ser compuestos obtenidos por síntesis química para inhibir el crecimiento o destruir a microorganismos causantes de infecciones. 5.- Exponga la problemática de la resistencia a los antibióticos y como puede evitarse. La resistencia antimicrobiana es la capacidad de las bacterias u otros microorganismos para contrarrestar el efecto antibiótico, esta resistencia sobreviene cuando la bacteria sufre algún cambio que reduce o elimina la efectividad de antibiótico, compuestos químicos o cualquier otro agente destinado para curar o prevenir alguna infección. La resistencia puede ser una consecuencia evolutiva via la selección natural, pero también es causada por el uso indiscriminado de los agentes microbianos. Conclusión Se pudo concluir en esta practica la importancia necesaria de saber los funcionamientos de los antibióticos y su utilidad en nuestro campo de trabajo, esto nos ayudara ala investigación o en la industria conociendo todo el funcionamientos y las ventajas de los antibióticos Bibliografía Articulo. Evaluación de la actividad de los agentes antimicrobianos ante el desafio de la resistencia bacteriana. Norma Margarita De La fuente Salcido. Jesus Ma. Villareal Prieto, Miguel Angel Diaz Leon, Ada Patricia Garcia Perez.