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MANUAL PRÁCTICO DE MICROBIOLOGÍA - Tomo II: Microbiología Ambiental II

Manacorda A. M., Cuadros D. P y Álvarez A. S.

Año 2007

Capítulo 10
MICROORGANISMOS DEGRADADORES DE HIDROCARBUROS*
Objetivos
 Tomar conocimiento de la existencia en el suelo de microorganismos con capacidad para
degradar hidrocarburos.
 Conocer las técnicas microbiológicas para realizar recuento y aislamiento de
microorganismos hidrocarburolíticos.
Introducción
La contaminación por hidrocarburos tiene un pronunciado efecto sobre las propiedades de los suelos,
derivando en procesos de salinización, toxicidad sobre la comunidad microbiana nativa y mortandad de
la vegetación por fitotoxicidad. Los hidrocarburos son compuestos orgánicos que contienen carbono e
hidrógeno.
Diversas bacterias, e incluso mohos y levaduras, pueden utilizar hidrocarburos como fuente de energía
y carbono para su crecimiento y reproducción. Este proceso, que se da en forma natural en el suelo, es
aprovechado y optimizado para lograr la recuperación de los suelos contaminados. De denomina
biorremediación al empleo de microorganismos y la incentivación de su metabolismo para eliminar los
contaminantes o al menos convertirlos en compuestos químicos menos agresivos.
La biodegradación puede realizarse por inoculación microbiana, bioaumentación, o por bioestimulación
de las actividades microbianas naturales. La bioaumenación constituye una estrategia donde son
incorporados al suelo microorganismos con probadas capacidades metabólicas de degradar el
contaminante implicado. Pudiendo ser estos autóctonos del suelo a recuperar, multiplicados en
condiciones controladas, o microorganismos alóctonos o exógenos, con capacidades genéticas
específicas para la metabolización del compuesto. Por otro lado, la bioestimulación consiste en una
modificación ambiental capaz de suprimir algún factor limitante que está restringiendo la velocidad de
crecimiento microbiano.
La finalidad de este Trabajo Practico es identificar microorganismos con capacidad de degragadar
hidrocarburos y aplicar técnicas de recuento a partir de diferentes tipos de suelos.
Procedimiento
Recuento de microorganismos degradadores de hidrocarburos
Realizar diluciones sucesivas de un gramo de la muestra (suelo- agua) en 9 ml de agua destilada (A.D)
–10
hasta obtener una dilución de 10
(1: 10.000.000.000).
Sembrar los tubos con Medio Mínimo para Microorganismos Hidrocarburolíticos (MMMH) con 0,1 ml
de las correspondientes diluciones de la muestra. El medio consiste en una solución de sales, con
elementos químicos que funcionan como elementos limitantes para el desarrollo de los
microorganismos.
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Sinonimia: microorganismos hidrocarburolíticos

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T.1 ml de kerosene estéril como única fuente de carbono y energía. Ecología Microbiana de la Comunidad Hidrocarburolítica en Suelos Regionales Contaminados con Petróleo. El mismo se aplica embebiendo papeles de filtro. Bibliografía Altamirano.. J.MANUAL PRÁCTICO DE MICROBIOLOGÍA . P y Álvarez A. Biología de los Microorganismos”. G. 2000. Fac. Madigan. Martinko. Aislamiento e Identificación De un tubo positivo de MMMH sembrar en placas con medio mínimo agarizado (Agar-agar 1.. 2 . M. 2004.Tomo II: Microbiología Ambiental II Manacorda A. Dichas placas deben tener kerosene como única fuente de carbono y energía. Parker. UNCo. Repicar una colonia a Agar en pico de flauta y otra a un mismo medio mínimo agarizado con kerosene. S. Año 2007 Agregar en forma aséptica 0. Tesis de Maestría..10 ª ed. Incubar a temperatura ambiente durante 40 días e interpretar los resultados. Cuadros D. Incubar de 7 a 10 días. “Brock. M. colocados en la tapa de la placa (antes de la esterilización de la misma.2 %). de Ingeniería. Editorial Prentice Hall INC. M. Maria Gabriela. Se toman como positivo aquellos tubos en los que se visualice desarrollo microbiano (turbidez del medio) y cambio de color (de rojo a amarillo) debido a la acidificación del medio producida por el metabolismo microbiano.