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INTRODUO A MICROBIOLOGIA

1-Fale sobre microorganismos.


So seres muito pequenos para serem vistos a olho nu importantes para a manuteno e equilbrio ecolgico da Terra. Alguns vivem
em seres humanos ou em outros animais e so necessrios para a manuteno da sade destes, outros causam doenas.

2- Comente o trabalho de Louis Pasteur.


A teoria da "gerao espontnea", na sua verso inicial, s foi refutada definitivamente no sculo XIX graas aos trabalhos de
Louis Pasteur. Este mdico francs, debruando-se sobre uma doena que dizimava a criao do bicho-da-seda, demonstrou
experimentalmente e de forma irrefutvel, que germes microscpicos pululam em toda a parte e que as geraes espontneas de
microrganismos resultavam, na realidade, da contaminao dos meios de cultura por germes vindos do exterior, isto , que a vida
no surge espontaneamente, mas tem origem em outras formas de vida preexistentes.

3- Vacinao serve para:


Imunidade, que conferida atravs da inoculao com uma vacina. Em 1798, Edward Jenner descobriu a vacina contra a varola.
Em torno de 1880, Pasteur descobriu a vacina contra clera em aves.

4-O que so bactrias?


So seres unicelulares , ou seja, constitudos por uma s clula (procaritica: no possui uma membrana envolvendo os
cromossomos).

5-O que justifica a resistncia dos micrbios s drogas?


Eles multiplicam-se com rapidez, simplesmente se dividindo por fisso binria, em condies adequadas uma simples clula pode
dividir-se a cada 20 min, dando origem a 5 bilhes de clulas em pouco menos de 11hs.

6-Quais so as 3 formas bsicas das bactrias?


Bacilos, cocos e espirilos.

7-O que so fungos?


Organismos heterotrficos com clulas eucarioticas fundamentais para a ecologia do planeta, atuando lado a lado com as bactrias
no processo de reciclagem da matria e so muito importantes na fabricao de produtos muito consumidos por ns como queijos
e pes.

8- Como os fungos obtm nutrientes para sua sobrevivncia?


Por meio da absoro de material orgnico do meio em que vivem, assim como os protozorios.

9-O que so protozorios, algas, vrus e helmintos?


Protozorios so seres eucariontes (ncleo delimitado por carioteca), unicelulares; as algas tambm so organismos eucariontes uni
ou multicelulares, os vrus so entidades acelulares que parasitam as clulas e os helmintos so os vermes chatos e os redondos.

10- Qual a relao dos micrbios com o bem estar humano?


Eles promovem a reciclagem de elementos vitais, tratamento de detritos, biorremediao (conjunto de processos e estratgias
que utiliza as enzimas produzidas por bactrias e fungos para promover a degradao de contaminantes presentes no solo ou nas
guas subterrneas.), controle biolgico de pragas (consiste no emprego de um organismo (predador, parasita ou patgeno) que
ataca outro que esteja causando danos econmicos s lavouras) , biotecnologia moderna (conjunto de tcnicas que permite
Indstria Farmacutica cultivar microrganismos para produzir os antibiticos) e engenharia gentica. A decomposio dos
cadveres de animais e plantas mortas depende das bactrias e dos fungos para poder reciclar os elementos para mais seres vivos
poderem surgir. Tambm realizam a fermentao necessria para a fabricao de produtos como vinagres e queijos. Algumas
realizam fotossntese, a fixao do nitrognio exclusiva das bactrias dos gneros Rhizobium e Bradirhizobium e a nica
fonte de nitrognio absorvvel para todos os outros seres vivos.
11- O que uma doena infecciosa?
Aquela na qual o patgeno invade o hospedeiro suscetvel. Nesse processo, ao menos uma parte do ciclo vital do patgeno acontece
dentro do hospedeiro e a doena freqentemente ocorre.

12- O que so doenas infecciosas emergentes?


So as doenas identificadas, que surgiram recentemente ou que j existiam, mas que sofrem rpido aumento na incidncia ou na
extenso geogrfica. Acometem tanto os humanos quanto os animais.

CRESCIMENTO MICROBIANO
1- Cite os fatores necessrios para o crescimento microbiano.
Fsicos: temperatura, PH e presso osmtica
Qumicos: gua, fontes de carbono, nitrognio, minerais, oxignio e fatores orgnicos de crescimento.

2-Classifique os microorganismos de acordo com a temperatura, ph e presso osmtica.


As bactrias podem crescem em uma variedade de temperaturas desde muito prximas do congelamento at prximas do ponto de
ebulio da gua. Aquelas que crescem melhor em temperaturas medianas neste espectro so denominadas mesfilas, as quais
incluem todos os patgenos e oportunistas humanos. Aquelas que crescem melhor em temperaturas mais baixas ou mais altas so
respectivamente denominadas psicrfilas e termfilas
PSICRFILOS: aqueles que tm temperatura de multiplicao entre 0C e 20C, com um timo entre 10C e 15C. multiplicam-se
bem em ambientes refrigerados, sendo os principais agentes de deteriorao de carnes, pescado, ovos, frangos e outros.
MESFILOS: aqueles que tm a temperatura tima de multiplicao entre 25C e 40C, mnima entre 5C e 25C, e mxima entre
40C e 50C. Os microrganismos mesfilos correspondem grande maioria daqueles de importncia em alimentos, inclusive a maior
parte dos patgenos de interesse.

TERMFILOS: aqueles que tm temperatura tima de multiplicao entre 45C e 65C, mnima de 35C e 45C, e mxima entre
60C e 90C. A maioria das bactrias termfilas importantes em alimentos pertence aos gneros Bacillus e Clostridium, incluindo
as espcies deterioradoras (Bacillus coagulans, Clostridium thermosaccharolyticum), quanto espcies patognicas (Clostridium
botulinum, Clostridium perfringens).
PH: Muitas bactrias crescem melhor em pH neutro. Contudo, certas bactrias podem sobreviver e mesmo crescer em condies
de pH muito baixo ou muito alto.
PRESSO OSMTICA: Fator extremamente importante, principalmente a partir do maior conhecimento sobre as Archaea, visto
que vrios membros deste domnio requerem altas concentraes de sais para seu desenvolvimento. Os microrganismos retiram da
gua a maioria dos nutrientes solveis (contedo celular 80 90 % de gua) Presso osmtica: retira a H2O dentro da
clula Reao Hipertnica: perda de H2O do meio intracelular para o extracelular, atravs da membrana plasmtica (meio com
concentrao de sais). Plasmlise: diminuio da membrana plasmtica da clula devido a perda de H2O por osmose.

3- Cite a influncia dos fatores qumicos no crescimento microbiano.


GUA: essencial para os microorganismos com disponibilidade varivel no ambiente. Os microorganismos presentes em ambientes
com menor concentrao de gua desenvolvem mecanismos para obter gua atrvs do aumento da concentrao de solutos
internos, seja pelo bombeamento de ons para o interior da clula ou pela sntese de solutos orgnicos (aucares, lcoois ou
aminocidos).
FONTES DE CARBONO: essencial para a sntese de todos os compostos orgnicos necessrios para a viabilidade celular
(elemento estrutural bsico para os seres vivos)
NITROGENIO, ENXOFRE E FOSFORO: sntese de protenas de DNA e RNA
OXIGNIO: extremamente importante no desenvolvimento microbiano
organismos classificados em:
AERBIOS
- Estritos (obrigados): necessitam de O

- Facultativos: no necessitam de O mas crescem melhor com O


2

- Microaerfilo: necessitam de O mas em nveis menores


2

ANAERBIOS
- Aerotolerantes: no necessitam de O mas crescem melhor sem O
2

- Estritos (obrigados): no toleram O (letal)


2

4- Conceitue meio de cultura e cultura.


O meio de cultura denominado o material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de microrganismos. A cultura
so os microrganismos que crescem e se multiplicam no meio de cultura.
5- Para que serve o gar?
Para proporcionar o crescimento microbiano em meio slido, pois ele um agente solidificante e poucos microorganismos podem
degradar.

6-Diferencie meio quimicamente conhecido de complexos.


MEIO DEFINIDO: TODA A COMPOSIO QUMICA CONHECIDA

MEIO COMPLEXO: COMPOSIO QUMICA NO CONHECIDA (composto por nutrientes como extrato de levedura, de carne
ou de plantas)

7- Exemplos de tcnicas especiais de cultivo:


Algumas bactrias exigentes ou parasitas devem ser cultivadas em animais vivos ou em cultivo de clulas. Os incubadores de CO2
ou jarras contendo vela so utilizados para o crescimento de bactrias que necessitam de concentraes mais altas de CO2.

8-Diferencie meios de cultivo seletivos, diferenciais e de enriquecimento.


O meio seletivo utilizado para favorecer o crescimento de um desejado organismo atravs da inibio do crescimento dos
outros, pela adio, ao meio de cultura, de sais, corantes ou outros compostos qumicos. O meio diferencial utilizado para
distinguir diferentes organismos e o meio de enriquecimento utilizado para favorecer o crescimento de um determinado
microrganismos presente em uma cultura mista.

9-O que uma colnia?


Uma massa de clulas bacterianas visveis, originadas, teoricamente, a partir de uma nica clula.

10-Qual o mtodo mais utilizado para obteno de culturas puras?


o mtodo de semeadura por esgotamento ou mtodo de semeadura em placa.

11- Como se d a diviso bacteriana?


Atravs da fisso binria que o mtodo normal de reproduo bacteriana, no qual uma nica clula se divide dando origem a duas
clulas idnticas e por brotamento, formao de esporos areos ou por fragmentao.

12- O que o tempo de gerao?


o tempo necessrio para uma clula se dividir ou uma populao se duplicar.

13- Cite as fases do crescimento microbiano.


Fase Lag um perodo em que ocorre pouca ou ausncia de diviso celular, que pode estender por uma hora ou at vrios dias.
Fase Log ou Fase de crescimento exponencial um perodo em que a reproduo celular encontra-se extremamente ativa onde o
tempo de gerao constante. Fase Estacionria um perodo em que o N de morte celular equivalente ao N de clulas novas

e a populao se torna estavl. Fase de Morte Celular ou Fase de Declnio um perodo em que o N de clulas mortas excede o
de clulas novas.
14-Quais so os mtodos para quantificar diretamente o crescimento microbiano?
CONTAGEM EM PLACAS tcnica mais utilizada na determinao do tamanho da populao bacteriana, pode ser realizado atravs
da tcnica de pour plate ou da tcnica de espalhamento em placa, sua vantagem a qualificao de clulas viveis e a desvantagem
a demora.
FILTRAO:< n de bactrias = pode ser utilizado o mtodo de filtrao para a sua contagem. Concentrao de bactrias sobre a
superfcie de uma membrana de filtro de poros muito pequenos aps a passagem de um volume de 100 mL de gua. filtro
posteriormente transferido para uma placa de petri contendo meio slido.
O MTODO DO NMERO MAIS PROVVEL (NMP) - utilizado para microrganismos que no crescem bem em meio slido.
CONTAGEM DIRETA AO MICROSCPIO - um volume conhecido de suspenso bacteriana colocado em uma rea definida da
lmina de microscpio, a amostra pode ser corada ou analisada a fresco, utiliza-se cmaras de contagem as desvantagens so
que no separa clulas mortas e vivas; pode haver erros de contagem; difcil contagem para bactrias mveis

15-Quais so os mtodos para quantificar indiretamente o crescimento microbiano?


TURBIDIMETRIA -monitoramento do crescimento bacteriano atravs da turbidez, o espectrofotmetro ou colormetro o
instrumento mais utilizado para se determinar a turbidez de uma amostra.
ATIVIDADE METABLICA - quantidade de um certo produto (como cido ou CO ) diretamente proporcional ao nmero de
2

clulas bacterianas PESO SECO -principalmente para fungos filamentosos


a) fungo removido do meio por filtrao
b) seco em dessecador
c) posterior pesagem.

CRESCIMENTO MICROBIANO

16- Porque controlar o crescimento microbiano?


Para prevenir a transmisso de doenas, evitar a decomposio de alimentos e a contaminao da gua e do meio ambiente. Isso se
d atravs de agentes fsicos e qumicos que possuem propriedade de matar a clula microbiana, ou de impedir sua reproduo.

17- Caracterize: Esterilizao, desinfeco, anti-sepsia, degerminao, sanitizao.


ESTERILIZAO: destri todas as formas de vida microbiana, incluindo os endsporos (formas mais resistentes), o mtodo mais
comum o aquecimento.
DESINFECO: processo que promove a inibio, morte ou reduo de vrios microorganismos patognicos e saprfitas sem
eliminar todas as formas de vida (somente a destruio dos patgenos vegetativos e no dos endsporos. Mtodos: substancias
qumicas(utilizao de desinfetantes), radiao ultravioleta, gua fervente e vapor.
ANTI-SEPSIA: quando este tratamento para um tecido vivo. Produto qumico = anti-sptico: menos txicos que os
desinfetantes.

DEGERMINAO: remoo mecnica dos microorganismos, em vez da morte em uma rea limitada, no mata os endsporos. Ex:
quando a pele esfregada com lcool antes de receber a injeo.
SANITIZAO: processo que leva a reduo de microorganismos, a nveis seguros de acordo com os padres de sade publica
(elimina 99,9% das formas vegetativas) Ex: lavagem de louas com alta temperatura ou aplicando desinfetante qumico.
SUFIXO CIDA: Nome dos tratamentos que causam a morte direta dos micrbios (MORTE), germicida, fungicida
SUFIXO STTICO/STASE: Inibem o crescimento e multiplicao, bacteriostase
SEPSE: Termo grego= estragado/podre (indica contaminao), assptico = sem contaminao

18- Como se d a morte microbiana?


Ocorre de forma exponencial. Aps uma rpida reduo da populao a taxa de morte torna-se mais lenta devido a sobrevivncia
de clulas mais resistentes. A taxa de morte normalmente constante, a cada 1min 90% da populao morre.

19- Comente os fatores que influenciam o tratamento microbiano.


TAMANHO DA POPULAO: quanto maior a populao maior tempo de tratamento.
NATUREZA DA POPULAO: observar a presena de endsporos e de Mycobacterium, estgio do crescimento.
CONCENTRAO DOS AGENTES: Quanto + concentrado o agente > a eficincia Exceo: lcool
TEMPO DE EXPOSIO: De acordo com a OMS (Organizao Mundial da Sade) o tempo mnimo de exposio = 30 min. (chance
de haver sobreviventes de 1 em 106 indivduos)
TEMPERATURA: quanto > a temperatura + eficcia no tratamento, 1 C aumenta 10 x a eficincia (potencializa o controle e em
conjunto com o agente pode-se diminuir sua concentrao.
CONDIES AMBIENTAIS: Presena de material orgnica: inibe a ao dos antimicrobianos qumicos - pH do meio e calor: cido
(potencializa o resultado)
20-Cite os mtodos fsicos de controle microbiano.
-CALOR (SECO OU MIDO): mata os microorganismos desnaturando suas enzimas, a resistncia ao calor depende do micrbio.
Ponto de morte trmica (PMT):temperatura em que todos os microorganismos sero mortos em 10min;
Tempo de morte trmica (TMT): perodo mnimo de tempo em que todos os microorganismos sero mortos;
Tempo de reduo decimal (TRD ou D): o tempo em min em que 90% da populao microbiana em uma determinada temperatura
sero mortas.
CALOR SECO:
-Incinerao: processo drstico de eliminao dos microrganismos e que destroem o produto.
-Flambagem: processo onde o material levado diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em lcool (utilizado na desinfeco de
alas de vidro).
-Estufa esterilizante: amplamente utilizada para as vidrarias e outros materiais (160 C/2 h ou 180 C/1 h).
CALOR UMIDO: mata os microrganismos pela coagulao das protenas (ruptura das pontes de h estrutura tridimensional)

- Fervura (100 C): Mata as formas vegetativas dos patgenos bacterianos, quase todos os vrus e os fungos e seus esporos (~ 10
min.)
-Vapor de fluxo livre: Equivalente a gua fervente, no mata os endosporos bacterianos e alguns vrus
-Autoclave: Esterilizao mais confivel: temperatura acima da gua fervente (atravs do vapor sob presso). Quanto maior a
presso na autoclave > a temperatura 121 C suficiente para matar todos os organismos e seus endosporos por 15 min
- PASTEURIZAO: Louis Pasteur descobriu como conservar a cerveja e o vinho atravs de um aquecimento lev suficiente para
matar microorganismos que causavam a deteriorao sem alterar o sabor do produto. Hoje principalmente usado por industrias
de lacticnios. Tratamento Clssico: 63 C por 30 min. medida que a temperatura aumentada, muito menos tempo necessrio
para matar o mesmo n. de micrbios.
Ex. Endosporos
- 115 C 70 min.
-125 C 7 min.
-63 C 30 min. (pasteurizao)
-72 C 15 s (HTST- Pasteurizao em Alta Temperatura e Curto Tempo)
-140 C - < 1 s (UHT)
- FILTRAO: Passagem de um lquido ou gs atravs de um material semelhante a uma tela, com poros pequenos o suficiente
para reter os microrganismos.
- Filtro de Partculas de Ar de Alta Eficincia (HEPA high efficiency particulate air). Ex: salas de hospitais com pacientes
queimados (0,3 m).
-Filtro de Membrana compostos por steres de celulose ou polmeros plsticos (normalmente usa-se filtro de 0,2 m).

- BAIXAS TEMPERATURAS: Depende do tipo de microrganismo e da intensidade de aplicao. Diminuio/interrupo do


metabolismo celular. Refrigeradores comuns (0 7 C): efeito bacteriosttico (atemperatura afeita a reproduo e o metabolismo
celular).
Psictrofos: crescem em baixas temperaturas.
Mesfilos: patgenos humanos (temperatura ambiente
- RESSECAMENTO:Na ausncia de gua, os microrganismos no podem crescer ou se reproduzir mas podem permanecer viveis
por anos atravs das formas de resistncia (endosporos/esporos) que varia de acordo com o microrganismo.
- PRESSO OSMTICA: processo semelhante ao ressecamento, onde h concentrao de sais (plasmlise) para conservar
alimentos. Ex: curar carnes (sal), conservar frutas (acar). Os fungos so mais resistentes, crescem em baixas concentraes de
gua e altas concentraes de sais.
- RADIAO: tem vrios efeitos sobre a clula dependendo do seu comprimento de onda, intensidade e durao, existem 2 tipos
que matam microorganismos: ionizante (destroem as pontes de hidrognio e as duplas ligaes) e no ionizante(comprimento de
onda maior que a ionizante a desvantagem que apresenta baixa penetrabilidade, no atravessa vidros, filmes escuros e outros
materiais).

21- Cite os mtodos qumicos de controle microbiano.


Controlam o crescimento em tecidos vivos e objetos inanimados, dificilmente se obtm a esterilidade. A maioria no reduz a
populao microbiana e nem removem as formas vegetativas dos patgenos

22- Quais so as caractersticas dos agentes qumicos?


Alta toxicidade para os microrganismos, solvel em gua, estabilidade elevada. incuo para o homem e animais ausncia de
afinidade por matria orgnica estranha, toxicidade para os microrganismos em temperatura ambiente, capacidade de penetrao,
no corrosivo e nem mancha, desodorante, detergente

23- Quais so os tipos de desinfetantes?


1-Compostos Orgnicos
Fenol: Pastilhas de Garganta: apresenta fenol que tem um efeito analgsico mas baixo efeito antimicrobiano. Em conc. > 1%
(sprays para garganta), > efeito antibacteriano.
Compostos Fenlicos:contm uma molcula de fenol quimicamente alterada para reduzir suas qualidades irritantes e aumentar sua
atividade antibacteriana em combinao com o sabo ou detergente ( bifenol, hexaclorofeno).
lcoois:Matam efetivamente as bactrias e fungos, mas no os endsporos e os vrus no-envelopados. Os mais utilizados: Etanol
(70 %) e Isopropanol
2-Halognios:Particularmente Iodo e Cloro (agentes antimicrobianos efetivos) I efetivo contra todos os tipos de bactrias,
muitos endosporos, vrios fungos e alguns vrus.
2

Cl como gs ou em combinao com outras substncias qumicas. Ao germicida causada pelo cido hipocloroso (HOCl)
2

3-Metais Pesados e seus compostos: Bastante utilizados como germicidas ou anti-spticos. Prata, Mercrio, Cobre e Zinco. Ao
Oligodinmica (oligo = pouco) = < [metais] - > atividade antimicrobiana. Nitrato de Prata 1 %, Cloreto de Mercrio, Sulfato de
Cobre, Cloreto de Zinco.
Agentes de superfcie: Agentes de superfcie (tensoativos ou surfactantes) podem reduzir a tenso superficial entre as
molculas de um lquido.
sabo: pouco valor anti-sptico (mais importante na remoo mecnica atravs da esfregao).
detergentes: nion da molcula reage com a membrana plasmtica (atuam sobre um amplo espectro de micrbios e no so txicos)
Antibiticos: Controle microbiano atravs da ingesto ou aplicao superficial. Alguns antibiticos so utilizados para controle de
produtos (bacteriocina).
4-Outros (Peroxignios, Quimioesterilizantes Gasosos, Biguanidas)

OBS: O tempo de gerao pode ser calculado quando uma cultura encontra-se em fase exponencial, pela frmula abaixo:
N=N .2 , onde N= nmero final de clulas, N = nmero inicial de clulas, n= nmero de geraes.
n

n= log(N) - log(N )/0.301


o

g = / , onde g= tmpo de gerao, t= tempo de crescimento e n= determinado acima.


t

http://www.google.com.br/search?hl=pt-BR&q=fatores+necessarios+pra+o+crescimento+microbiano&meta=&aq=o&oq=