1.

-METODOS DE DIAGNOSTICO VIRAL GENERAL

Los mtodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden
clasificarse en DIRECTOS e INDIRECTOS, segn persigan demostrar la
presencia del virus o de alguno de sus constituyentes (antgeno o genoma viral) o
bien la respuesta de anticuerpos especficos por parte del husped en el curso de
la infeccin.
Gran parte de las tcnicas utilizadas en el diagnstico clnico se basan en pruebas
serolgicas que identifican anticuerpos especficos frente a diversas protenas
antignicas. Sin embargo, existen circunstancias en las cuales son necesarias
pruebas que detecten precozmente la infeccin viral (tratamientos especficos,
medidas profilcticas, etc.).
En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antgenos
virales previamente al desarrollo de la seroconversin, siendo esta prueba la nica
evidencia de la exposicin al virus cuando no existe aumento de los niveles de
anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos).
Igualmente la deteccin del genoma viral puede favorecer la precocidad del
diagnstico viral y su confirmacin. En la ltima dcada se han desarrollado una
serie de tcnicas para el diagnstico viral basadas en la deteccin de cidos
nucleicos. De ellas la Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) es la ms
utilizada.
En el momento actual, la tendencia en el diagnstico virolgico consiste en
emplear nuevas y ms sensibles tecnologas de deteccin de antgenos y de
investigacin de cidos nucleicos con el propsito de lograr un diagnstico viral
ms rpido. El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta
tendencia que hace de la identificacin rpida, sensible y especfica de los virus,
una necesidad.
PRINCIPALES TCNICAS
METODOS DIRECTOS
Son aquellos que detectan:
1. El virus como agente infeccioso (aislamiento viral).
2. La presencia de antgenos virales (tcnicas inmunolgicas):
Inmunofluorescencia (IF), Enzimoinmunoanlisis (EIA), Test de Aglutinacin.

3.La presencia de cidos nucleicos virales (PCR, etc.).

4.El virus como partcula viral (microscopa electrnica).
1. Aislamiento Viral - Cultivos Celulares
La base del diagnstico viral es la deteccin del virus o de sus componentes. El
aislamiento del virus era la tcnica standard de oro sobre la cual se medan todas
las otras pruebas de diagnstico viral, pero hoy en da con el desarrollo de las
nuevas tcnicas de Biologa Molecular ya no es la ms sensible. De igual forma el
aislamiento de virus tiene una sensibilidad y una especificidad muy alta. Debido a
que slo se amplifica el virus, se aumenta la sensibilidad sin disminuir la
especificidad. Sin embargo, existen algunas desventajas en el aislamiento del
virus: El proceso suele ser lento, ya que demanda das a semanas para la
identificacin, y en consecuencia puede no estar disponible a tiempo para influir en
la atencin del paciente. Adems, es un proceso laborioso y caro. Por otra parte
requiere el uso de sistemas de cultivos adecuados, por ejemplo, se necesitan
varias lneas celulares para la deteccin ptima de virus.
Los cultivos celulares son, pues, los biosubstratos ms corrientemente empleados
para la propagacin de los virus.
Un cultivo celular es obtenido, de explantes de rganos o de embriones de
animales.
Estas clulas obtenidas aspticamente se disocian tratndolas con una enzima
(tripsina) que rompe el cemento intercelular. La suspencin de celulas libres as
obtenidas se coloca en la superficie plana de un recipiente de vidrio o plstico en
donde las clulas se adhieren y multiplican formando una fina capa de clulas que
se llama MONOCAPA CELULAR.
Esta monocapa de clulas crece en un medio de cultivo complejo que contiene
albmina, vitaminas, sales, glucosa, etc., en un sistema buffer. Se previene la
contaminacin bacteriana adicionndole al medio antibiticos adecuados.
Los cultivos celulares en monocapa son los ms usados, aunque hay otros
sistemas (cultivos en suspensin, explantos, cultivos de rganos, cultivos en
microcarriers, etc.).
Los cultivos celulares se dividen en:
Cultivos Primarios: Se obtienen a partir de clulas, tejidos u rganos tomados
directamente del organismo y pueden subcultivarse una o dos veces.

Lneas Celulares Diploides: Son aquellas que crecen en pasajes sucesivos

hasta aproximadamente 50 subcultivos y que conservan por lo menos en un
75% el cariotipo correspondiente a la especie de que provienen.
Lneas Celulares Continuas: Permite un nmero finito de subcultivos y son
heteroploides. Para considerar que se ha logrado establecer una lnea continua,
esta debe de haber sido subcultivada por lo menos 70 veces. Las lneas
celulares continuas ofrecen las siguientes ventajas:
Disponibilidad para todos los investigadores de stocks de clulas idnticas, ya
sea congeladas en ampollas o en monocapa de botella de cultivos, con la
posibilidad de reconstituirlas cuando sea necesario.
Facilidad relativa del pasaje y mantenimiento en todos los laboratorios.
Libre de contaminacin con agentes extraos.
Los distintos cultivos celulares varan en cuanto a su susceptibilidad a los
diferentes virus, ya que existe una relacin especfica husped-virus, y es en
funcin de los datos clnicos y del tipo de muestra que se elige el cultivo para
inocular el material.
Luego de inoculado el cultivo celular, se incuba a 35-37 C por un perodo de
hasta 14 das promedio, esperando la aparicin de efecto citoptico, toxicidad o
degeneracin celular, observando el cultivo al microscopio a las 24, 48, 72hs y
luego 2 veces por semana. Se usan cultivos celulares no inoculados para control y
comparacin con cualquier cambio morfolgico observado en los cultivos
inoculados. El efecto citoptico es la visualizacin de cambios morfolgicos ms o
menos caractersticos en las clulas inoculadas producidas por la accin del virus
sobre el cultivo celular.
Cuando los virus no producen efecto citoptico, se puede recurrir a tcnicas que
ponen en evidencia la presencia de aquel en el cultivo. Las ms usadas son:
hemadsorcin, hemaglutinacin y tinciones con anticuerpos monoclonales. (Ver 2)
Hemadsorcin: Hay virus que durante su multiplicacin intracelular, expresan en la
membrana de la clula husped elementos estructurales virales llamados
hemaglutininas, glicoprotenas capaces de unirse a receptores especficos en la
membrana de glbulos rojos de diferentes especies animales. De modo que si se
agregan glbulos rojos a un cultivo inoculado, se puede poner en evidencia la

infeccin de esas clulas a travs de la unin de los glbulos rojos a la superficie

celular.
Hemaglutinacin: Las hemaglutininas pueden ponerse en evidencia en el
sobrenadante de los cultivos utilizando el mismo fundamento que para la
hemadsorcin.
2. Deteccin de Antgenos - Tcnicas Inmunolgicas
Las siguientes tcnicas inmunolgicas pueden utilizarse tanto para la deteccin de
antgenos (mtodos directos), como de anticuerpos (mtodos indirectos). En el
caso de deteccin de antgenos, se utiliza un anticuerpo especfico antiviral (por lo
general IgG) a cuya fraccin Fc se ha conjugado una molcula marcada, que
puede ser isotiocianato de fluorescena (Inmunofluorecencia), un istopo
radioactivo 125I o 131I (RIA), o una enzima: peroxidasa, fosfatasa alcalina, o
biotina-avidina (EIA), para objetivar la reaccin.
Para el procedimiento indirecto (deteccin de anticuerpos), se emplea un antianticuerpo marcado y la reaccin se realiza sobre un cultivo celular infectado por
el virus en estudio.
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (ID)
Es una de las tcnicas ms antiguas y de uso ms difundido en el laboratorio
clnico. El principio bsico de la inmunofluorescencia directa . Muestras clnicas
apropiadas son recolectadas y colocadas sobre portaobjetos donde se dejan secar
y fijar. Luego se agregan anticuerpos especificos marcados con isotiocianato de
fluorescena que difunden a travs de la membrana celular y se combinan con los
antgenos vricos en el interior de las clulas. La reaccin antgeno anticuerpo se
visualiza con el microscopio de fluorescencia, por la aparicin de fluorescencia de
color verde manzana.
Esta tcnica se puede utilizar para una identificacin rpida del virus directamente
sobre la muestra (por ejemplo: clulas eluidas de un lavado nasal, o de un
hisopado nasofarngeo), o se la puede emplear para la confirmacin del efecto
citoptico observado en cultivos celulares.
Sin embargo la realizacin de la reaccin es laboriosa, depende mucho de la
calidad de los reactivos, requiere un microscopio de fluorescencia y de una
persona con experiencia para llegar a un diagnstico certero, as como una
recoleccin y preparacin de la muestra adecuada.
Aun as, el mtodo, en manos de una persona con experiencia resulta til para la
identificacin rpida de ciertos virus como los virus respiratorios, ya que nos
proporciona un diagnstico etiolgico en el curso de una jornada de trabajo.
Adems puede estudiar varias muestras simultneamente.

El advenimiento de los anticuerpos monoclonales, ha incrementado la

especificidad y en algunos casos la sensibilidad de estos ensayos. Esta tcnica
requiere slo 2-4hs, y se ha reportado una sensibilidad del 70-80 % comparada
con cultivos celulares para la identificacin de virus Herpes Simple, 80-95% para
VRS y 71% para Influenza A.
La tincin con inmunoperoxidasa es similar a la de la inmunofluorescencia y es la
tcnica de eleccin en algunos laboratorios. El procedimiento implica unos pocos
pasos adicionales ya que en este caso el anticuerpo monoclonal esta marcado con
una enzima que requiere la adicin de un substrato para evidenciar la reaccin por
un cambio de color que es visible micro y macroscpicamente.
TEST DE AGLUTINACION
El test de aglutinacin es un mtodo simple, de un solo paso, que a veces se usa
para la deteccin de antgenos virales en muestras clnicas. Los ensayos de
aglutinacin, dependen de la fijacin inicial de anticuerpos antivirales especficos
sobre eritrocitos o partculas de ltex. Luego este reactivo se incuba con la
muestra clnica en la cual se investiga el antgeno y las partculas se aglutinan si el
antgeno adecuado se encuentra presente. Estas pruebas en general se
complementan o se confirman por medio de otros ensayos debido al elevado
porcentaje de reacciones inespecficas.
El test de aglutinacin ha sido usado para detectar antgeno de Rotavirus en
heces (el ms importante) mostrando una buena sensibilidad cuando se lo
compara con el EIA para Rotavirus. Adems es una tcnica rpida y barata.
Tambin se la ha usado para detectar antgenos de Adenovirus.
RADIOINMUNOENSAYO (RIA)
Fue originalmente aplicado para identificar el antgeno de superficie de la Hepatitis
B (HBsAg) y el anticuerpo anti-HBsAg. Estos ensayos tienen una buena
sensibilidad y especificidad, pero la aparicin de un mtodo como el ensayo
inmunoenzimtico (EIA) con su mayor tiempo de conservacin de los reactivos, su
costo relativamente ms bajo y la ausencia de residuos radioactivos, ha
reemplazado las tcnicas de RIA en la mayor parte de los casos de deteccin de
antgeno viral.
ENZIMOINMUNOANALISIS (EIA)
Los EIA para la deteccin de antgeno se basan habitualmente en la captura del
antgeno por anticuerpos especficos unidos a una fase slida, en general el
pocillo de una microplaca o una pequea esfera de plstico. El antgeno viral
presente en la muestra clnica se combina con el anticuerpo fijado a la fase slida
y el antgeno viral se detecta mediante la adicin de otro anticuerpo especfico
conjugado a una enzima. La enzima conjugada suele ser peroxidasa o fosfatasa

alcalina. El substrato para esas enzimas vara. En la reaccin con la peroxidasa el

substrato es un perxido capaz de oxidar un compuesto qumico incoloro que en
su forma oxidada tiene un color caracterstico.
En el caso de la fosfatasa la desfosforilizacin es la responsable directa de la
aparicin del color. Por esta tcnica se puede procesar gran nmero de muestras
en forma rpida y automatizada, no requiriendo de un observador experimentado
para leer los resultados, ya que estos se leen por medio de espectrofotmetros
especialmente diseados, siendo entonces una tcnica ms objetiva. Fig. 2.
3. Tcnicas de Biologa Molecular
Investigacin de cidos nucleicos virales
Las tcnicas de estudio y diagnstico que a continuacin se
presentan, constituyen una herramienta ingeniosa
desarrolladas a partir de los estudios de la Biologa
Molecular.
SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS
Actualmente es posible extraer secuencias especficas de un fragmento de ADN
por medio de las endonucleasas de restriccin. Luego estas secuencias extradas,
se pueden desnaturalizar y marcar ya sea con una enzima o con un istopo
radioactivo. A estas cadenas marcadas y que tienen una secuencia conocida se
llaman sondas de cidos nucleicos. Hoy en da se estn produciendo sondas de
cidos nucleicos sintticas, con lo que se obtiene sondas de oligonucletidos de
muy alta especificidad que estn disponibles comercialmente y son las ms
usadas en los laboratorios.
DETERMINACION DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES POR SONDA SINTETICA
Es un ensayo de hibridacin molecular con una sonda marcada. Las hibridaciones
pueden ser: DNA-DNA, RNA-RNA y RNA-DNA.
Primero se trata a muestras con reactivos que solubilizan y desnaturalizan los
cidos nucleicos. Posteriormente se aade un DNA marcado, complementario del
DNA del virus y se incuba en condiciones para que se produzca la hibridacin. La
muestra se pasa entonces por una columna que contiene un gel que separa la
sonda ligada al DNA viral hibridado de la no hibridada.
Dependiendo de como este marcada la sonda, se detecta la hibridacin: Si est
marcada con un istopo radiactivo se puede hacer una lectura en un contador
gamma de manera que la cantidad de radiacin medida en la columna es
directamente proporcional a la cantidad de DNA viral presente en el suero
problema o tambin se puede realizar la electroforesis del DNA hibridado con la

sonda marcada en gel de poliacrilamida y detectar la radioactividad emitida por la

sonda mediante la aplicacin de una placa de rayos X (Autoradiografa). Si esta
marcada con una enzima se detecta por una simple evaluacin colorimtrica.
AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES MEDIANTE UNA
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
Una nueva tcnica, llamada Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR), fue
desarrollada por Saiki et al., para incrementar el nmero de molculas de DNA
blanco en las muestras. Tiene una sensibilidad tan alta que puede amplificar una
nica molcula de DNA y una sola copia de genes puede ser extrada, de mezclas
complejas de secuencias genmicas y visualizada como bandas diferentes en
geles de agarosa.
La PCR es, por tanto, una amplificacin de secuencias especficas del DNA. Se
basa en la utilizacin de secuencias cortas de nucletidos sintticos llamados
primers o cebadores, que se hibridan de forma especifica con cada una de las
cadenas de DNA , previamente desnaturalizadas, llamadas moldes o templados.
Para que la reaccin tenga lugar se usa una enzima, Taq pol (ADN Polimerasa
termoestable obtenida de la bacteria Thermus aquaticus) y deoxinucletidos
trifosfatos. La funcin natural de la DNA polimerasa consiste en reparar y replicar
el DNA. Los deoxinucletidos trifosfatos se necesitan como ladrillos para la
construccin. El nucletido al cual se una la polimerasa ser complementario de la
base en la posicin correspondiente de la cadena templado. Se sintetiza as una
cadena simple de DNA, complementaria y alineada a cada "primer ".
Se realiza una serie repetida de ciclos cada uno compuesto por 3 pasos bsicos:
a. Desnaturalizacin del ADN doble cadena por la elevada temperatura (95C).
b. Acoplamiento de los primers, desciende la temperatura (entre 55C-72C).
c. Elongacin del primers, aqu se eleva la temperatura a 72C permitiendo la
incorporacin de los deoxinucletidos.
Mientras tanto se van deplecionando los primers y los deoxinucletidos, y se van
sintetizando nuevas cadenas de DNA. Al final se consiguen miles de copias de
DNA del fragmento de DNA limitado por los "primers ". Los fragmentos de DNA as
obtenidos se pueden identificar por varias tcnicas: visualizacin en geles de
agarosa o poliacrilamida mediante tincin con bromuro de etidio y examen con luz
ultravioleta, o hibridacin con una sonda marcada. La combinacin de la PCR y las
sondas de cidos nucleicos marcadas promete ser el mtodo ms sensible para la
deteccin e identificacin de los virus.
4. Microscopa Electrnica

Mediante el microscopio electrnico es posible observar la morfologa de los

viriones presentes en muestras clnicas. La limitacin del mtodo adems del
costo del microscopio, es que necesita de una alta concentracin de viriones
(aproximadamente 109 partculas virales/ml, dependiendo del virus) presentes en
la muestra, por ello es poco sensible. Esto hace que sea una tcnica poco
utilizada, ms an con el desarrollo de tcnicas alternativas de utilidad similar.
Si la concentracin de virus en la muestra clnica es baja, y por tanto no visible
directamente por microscopio electrnico, se pueden utilizar tcnicas que
aumenten la visualizacin, por ejemplo, la inmunoelectromicroscopa, que consiste
en el agregado de anticuerpos especficos antivirales y la formacin de agregados
de partculas que son ms fcilmente visibles que las partculas solas. Fig. 5.
METODOS INDIRECTOS
Son aquellos que reconocen la respuesta inmune (humoral o celular) por parte del
husped: . Deteccin de anticuerpos especficos antivirales por tcnicas
inmunolgicas (EIA, IFI, WB, etc.). Produccin de anticuerpos in vitro.
En el curso de una infeccin varan las poblaciones de anticuerpos frente al
agente infectante. En una primera fase la clase predominante suele ser IgM,
mientras que con el transcurso del tiempo las IgM disminuyen hasta desaparecer o
quedar a baja concentracin residual y, en cambio, aumentan las IgG. La
bsqueda de anticuerpos clase IgM es de utilidad para hacer diagnstico de
infeccin reciente en una sola muestra de suero extrada en el perodo agudo de la
enfermedad. Este mtodo se emplea para el diagnstico de enfermedades como:
Rubola, Citomegalovirus, Hepatitis a virus A, etc.
La bsqueda de anticuerpos clase IgG en una sola muestra se utiliza como tcnica
de tamizaje, por ejemplo, para el diagnstico de la infeccin por el virus de la
inmunodeficiencia humana (VIH). Posteriormente los hallazgos positivos son
confirmados en la misma muestra de suero por otra metodologa.
La seroconversin es el aumento del ttulo de anticuerpos cuatro veces o ms
observado en dos muestras pareadas de suero. La primera muestra se obtendr
en el perodo agudo de la enfermedad y la segunda, 15 a 21 das despus de la
primera, en el perodo de convalesencia.
La seroconversin es til para establecer el diagnstico retrospectivo, pero no
para el diagnstico temprano de una infeccin, puesto que debemos esperar al
perodo de convalecencia para obtener la segunda muestra del suero.
Este tipo de diagnstico es til para estudios epidemiolgicos.
Las diferencias de ttulos deben ser mayores de cuatro veces para tener valor
estadstico y se debera estudiar ambas muestras simultneamente.

Las determinaciones serolgicas tambin nos pueden informar sobre el estado

inmune del paciente frente a muchas infecciones virales, como paperas,
sarampin y rubola, donde la presencia de anticuerpos especficos indica que el
individuo ha estado expuesto previamente al virus y que es inmune para una
nueva infeccin.
A veces el diagnstico serolgico tiene dificultades, por ejemplo: cuando se realiza
en recin nacidos para identificar la causa de una infeccin congnita. La
evaluacin de los resultados en este caso es difcil porque los ensayos serolgicos
detectan ante todo IgG, y mucha de la IgG presente en el suero del nio provino
de la madre por va transplacentaria y no es posible diferenciar la IgG del nio de
la IgG de la madre.
Tradicionalmente, el diagnstico de las enfermedades virales congnitas se realiza
mediante determinaciones seriadas de IgG en el suero. El descenso del titulo de
anticuerpos indica que los anticuerpos eran maternos y que el nio no est
infectado. El aumento en el ttulo de anticuerpos indica que el nio esta
produciendo anticuerpos y por lo tanto esta infectado. Sin embargo, hoy en da el
diagnstico serolgico viral se ha simplificado con las nuevas tcnicas que
detectan IgM, ya que la deteccin de IgM especfica en el suero del nio confirma
que el nio est infectado, porque la IgM no atraviesa la placenta y por tanto no
puede ser de origen materno.
A continuacin, se describirn los mtodos serolgicos ms comnmente usados
en el diagnstico viral.
Los mtodos tradicionales para el diagnstico serolgico de las infecciones virales
incluyen: la neutralizacin, la inhibicin de la hemaglutinacin (IHA) y la
hemaglutinacin indirecta (HAI). La confirmacin serolgica de una infeccin
aguda por cualquiera de estas tcnicas tradicionales esta dada por un aumento de
cuatro veces o mayor en el titulo de anticuerpos cuando se emplean diluciones al
doble seriadas.
En los ltimos aos se han desarrollado nuevos mtodos para la deteccin de
anticuerpos virales, y en muchos casos han demostrado ser mejores que las
pruebas tradicionales en trminos de economa, sensibilidad, especificidad y
rapidez.
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI)
La IFI, es un mtodo rpido y confiable para la determinacin de anticuerpos
antivirales en el suero del paciente. Se basa en la unin de anticuerpos antivirales
presentes en el suero del paciente a los antgenos virales expresados en la
superficie y citoplasma de clulas infectadas, que han sido fijadas a un portaobjeto
de vidrio. Como control de especificidad se usan clulas no infectadas.

El procedimiento es el que sigue: Se incuba el suero del paciente con las clulas
infectadas y no infectadas. Luego se realiza un lavado con PBS y se agrega
posteriormente anticuerpo anti IgG humana conjugada con isotiocianato de
fluorescena. El isotiocianato de fluorescena es una sustancia que se vuelve
fluorescente a la exposicin de la luz ultravioleta y emite una luz verde
caracterstica. El conjugado se unir a los anticuerpos del paciente si la reaccin
es positiva, leyndose la prueba en un microscopio de fluorescencia. La presencia
de Ac se evidencia por la aparicin de fluorescencia en el citoplasma y superficie
de las clulas infectadas, mientras que las clulas control no fluorescen.
ENZIMOINMUNOANALISIS INDIRECTO (EIA)
Los EIA indirectos se han aplicado de forma amplia en los ltimos aos al
diagnstico de anticuerpos virales.
Tiene las ventajas de ser un mtodo verstil, relativamente econmico, sensible y
de lectura objetiva (instrumental).
La metodologa es la siguiente: Los antgenos virales se inmovilizan sobre una
fase slida (esferita, policubetas para microtitulacin u otros elementos de
plstico) y se agregan los sueros en estudio; se incuban, se lavan y se revela la
reaccin Ag-Ac por el agregado de una inmunoglobulina antiespecie conjugada
con una enzima, seguida por el substrato apropiado para esta. Los resultados se
pueden leer con un espectrofotmetro y en algunos casos de forma visual.
TEST DE AGLUTINACION
El fundamento y el procedimiento de esta tcnica ya fue descripto para el estudio
de Ag viral (mtodo directo).
Ahora lo que buscamos es detectar anticuerpos antivirales, por eso se usan
partculas de ltex recubiertas con Ag viral. Fig. 8.
WESTERN BLOT (WB)
Las tcnicas inmunolgicas de Inmunoblot estn encontrando amplias
aplicaciones en el diagnstico virolgico. Son particularmente tiles para el
diagnstico del HIV.
La tcnica de WB se basa en la separacin electrofortica de protenas virales que
son posteriormente inmovilizadas en papel de nitrocelulosa con el objeto de
determinar la presencia de anticuerpos especficos contra cada una de esas
protenas.
Esta tcnica se realiza esquemticamente en 3 pasos:

1. Se produce en cultivos celulares grandes cantidades de virus que luego son

tratados qumicamente para su disgregacin e inactivacin. Los antgenos
resultantes del lisado viral se separan por electroforesis en gel de Poliacrilamida.
2. Se realiza una transferencia (blotting o electrotransferencia) de los Ag
separados a membranas de nitrocelulosa.
3. Se coloca el suero del paciente sobre la membrana de nitrocelulosa.
Posteriormente se aaden anticuerpos anti-inmunoglobulina humana unida a una
enzima (peroxidasa o fosfatasa alcalina) y, por ltimo, se agrega el substrato
enzimtico para la visualizacin de las bandas reactivas con un producto final
coloreado.
La tcnica es muy similar a un EIA, menos sensible pero ms especfica que esta.
En la prctica slo el 3er paso es el que se realiza en los laboratorios de
diagnstico, ya que los equipos comerciales proveen de las tirillas con los
antgenos. (Esto facilita la estandarizacin de las determinaciones).
PRODUCCION DE ANTICUERPOS IN VITRO
Se trata de una tcnica nueva que ha sido aplicada para el diagnstico de la
infeccin perinatal. Este procedimiento revela la presencia de anticuerpos
antivirales producidos in vitro a partir de los linfocitos B extrados de sangre total,
lo que indicara que el sistema inmune del paciente ha sido estimulado por el virus.
La produccin de Ac antivirales in vitro promete ser de gran valor en el diagnstico
temprano de nios infectados por VIH.

2.-TRATAMIENTO VIRAL EN GENERAL

LAS INFECCIONES virales en humanos, animales y plantas son causa de muerte,

dao y prdidas econmicas. Las mejoras en el nivel de salud pblica e higiene
personal contribuyen en forma muy importante y efectiva a controlar la
diseminacin de las enfermedades infecciosas, incluyendo las causadas por virus.
Sin embargo, las vacunas tienen un papel primordial en la prevencin activa de las
enfermedades virales en el hombre y en los animales. Las vacunas pueden ser

infecciosas (hechas con virus activos) o no infecciosas (hechas con virus

inactivados). El proceso de vacunacin se basa en la idea de que se puede lograr
inmunidad especfica contra una enfermedad, en particular si se provoca sta en
condiciones controladas de manera que el individuo no padece los sntomas
asociados con la enfermedad y el sistema inmune reacciona produciendo un
arsenal de anticuerpos y clulas inmunes con capacidad para destruir o neutralizar
cualquiera otra invasin por parte del mismo agente infeccioso.
El procedimiento de atenuacin permite obtener cepas de virus que tienen una
reducida capacidad para producir enfermedad; estas cepas se
denominan avirulentas, en contraste con las cepas virulentas capaces de producir
enfermedad. Las cepas avirulentas son obtenidas por mtodos empricos como el
pasar (propagar) un virus determinado en cultivos de clulas que provienen de una
especie animal diferente a la del hospedero natural de ese virus en particular.
Tambin la multiplicacin de un virus a temperaturas subfisiolgicas o la
coinfeccin de un mismo cultivo con cepas virulentas y avirulentas de un virus en
particular contribuyen a la atenuacin del virus. El uso de cepas emparentadas
antignicamente con una cepa virulenta, pero que provocan una enfermedad ms
leve en el hospedero, es una tcnica conocida desde el tiempo de Edward Jenner,
quien en 1798 utiliz preparaciones de virus de la viruela vacuna para inmunizar
humanos contra la viruela. Actualmente, se utiliza un virus de
la vacuna, descendiente del virus de la viruela vacuna, para "vacunar" contra la
viruela. De hecho, vacuna se ha convertido en sinnimo de cualquier substancia
inmunognica utilizada en la prevencin de enfermedades infecciosas.
Las vacunas preparadas a partir de virus muertos o inactivos deben carecer de
infectividad y, sin embargo, ser suficientemente inmunognicas para provocar
inmunidad protectora. Los agentes inactivantes utilizados para matar al virus
deben ser capaces de actuar sobre el cido nucleico viral. El formaldehdo y la bpropiolactona son dos de los agentes ms usados para inactivar preparaciones
virales. El formaldehdo produce entrecruzamientos entre las protenas virales y
tambin afecta a los grupos amino presentes en los nucletidos. La bpropiolactona inactiva a los virus por medio de la alkilacin de las protenas y
cidos nucleicos virales. Un problema fundamental asociado con la preparacin de
una vacuna muerta consiste en que se debe garantizar la completa inactivacin de
todas las partculas virales presentes en una dosis de la vacuna. Cuando se
preparan grandes lotes de vacuna se observa que una pequea fraccin de la
poblacin viral es inactivada con mayor lentitud debido a que algunas partculas
virales forman agregados y cmulos en los cuales se dificulta el acceso al agente
inactivante. Esto implica que debe incrementarse el tiempo de incubacin en
presencia del agente inactivante; esta situacin tiene el inconveniente de que

puede propiciar la prdida de la capacidad inmunognica de las partculas virales

inactivadas.
El principal problema de las vacunas preparadas con virus atenuados consiste en
garantizar la estabilidad gentica de la cepa avirulenta, de manera que no revierta
en forma espontnea o accidental al estado virulento. Esta reversin al estado
virulento puede ocurrir por causa de eventos de recombinacion gentica
espontnea entre el virus presente en la vacuna y algn otro tipo de virus que
pueda estar presente en forma natural en el individuo vacunado.
Las vacunas deben producir imnunidad suficiente y permanente, pues de lo
contrario el virus invasor puede ser capaz de multiplicarse. Esto ltimo ocurre en el
caso de vacunas, como la vacuna contra la fiebre aftosa del ganado, la cual slo
confiere inminidad parcial y por lo tanto acta como una presin selectiva que
favorece la propagacin de virus mutantes poseedores de nuevos variantes
antignicos no reconocidos por los anticuerpos inducidos por la vacuna. Con el
paso del tiempo, la cepa de virus resistentes substituye a los otras cepas del virus
y entonces se hace necesario desarrollar una nueva vacuna especfica contra esta
nueva cepa resistente a la vacuna anterior.
Las vacunas pueden ser administradas por va oral, va parenteral (inyectadas) o
por simple escarificacin de la piel con una aguja. La va de administracin
depende del tipo de preparacin y de la estabilidad fsica de la misma. Cuando se
prepara una nueva vacuna, adems de los factores biolgicos que determinan la
eleccin entre una preparacin muerta o una preparacin atenuada, deben
considerarse factores socioeconmicos relacionados con el costo, estabilidad a
largo plazo de los lotes de vacuna, facilidad en el modo de administrarse de la
vacuna y el nmero de dosis a ser administradas. Tambin debe considerarse el
efecto psicolgico asociado con las incomodidades y reacciones secundarias
(como fiebre, erupciones en la piel, etc.) derivadas de la administracin de la
vacuna.
El surgimiento de la teconologa del ADN recombinante o ingeniera gentica abre
las puertas a la posibilidad de desarrollar vacunas efectivas preparadas a partir de
los componentes virales causantes de inducir la respuesta inmune, pero sin los
inconvenientes asociados con la presencia de virus ntegros, ya sea que estn
inactivados o atenuados.
A diferencia de lo que sucede con las infecciones bacterianas, la quimioterapia de
las infecciones virales.todava se encuentra en etapas primitivas. La multiplicacin
de los virus est estrechamente ligada al metabolismo de la clula hospedera
debido a que el virus por lo general utiliza la propia maquinaria celular para su
replicacin. Por lo tanto, resulta difcil encontrar frmacos y compuestos qumicos

capaces de afectar las funciones virales sin afectar a la clula hospedera.

Sustancias qumicas con actividad antiviral han sido utilizadas con xito en el
tratamiento de infecciones causadas por virus ADN que afectan la conjuntiva y la
crnea del ojo. Estos agentes son pirimidinas halogenadas que son incorporadas
en elADN viral e impiden la transcripcin y replicacin del mismo. Debido a que
estos compuestos pueden ser incorporados tambin en el ADN celular, su uso
est limitado a las infecciones que afectan regiones pobremente vascularizadas y
con baja actividad metablica como la superficie del ojo. Por ejemplo, soluciones a
0.1% de 5'iodo-2'-desoxiuridina, un anlogo de la timidina, producen mejora en un
72% de los casos de infecciones oculares causadas por Herpes simplex tipo 1 y
adenovirus. En casos extremos como la rara encefalitis viral causada por HSV-1 o
por el virus de la vacuna, se pueden utilizar anlogos de la citidina (citosina
arabinosido) o de la adenosina (adenina arabinosido) con probabilidades de xito
teraputico. Estas sustancias son extremadamente txicas y slo deben usarse en
circunstancias cuando la otra alternativa es la rpida muerte del paciente.
La amantadina es un compuesto que se ha utilizado con xito en la profilaxis y
tratamiento de la influenza viral. Durante una epidemia de influenza el nmero de
casos en la poblacin sujeta al tratamiento profilctico fue equivalente a 21% de
los casos presentes en la poblacin no tratada con amantadina.
El ribavirin es un compuesto capaz de inhibir la enzima ARN polimerasa del virus
de la influenza y tambin interfiere con el mecanismo de iniciacin de la
transcripcin del ARNviral. De hecho, el ribavirin manifiesta accin antiviral contra
un amplio espectro de virus tanto de ADN como de ARN, pero esta accin slo es
efectiva en condiciones de laboratorio, por lo cual el ribavirin en aerosol ha sido
aprobado solamente para el tratamiento de infecciones por virus sincitial
respiratorio (RSV) en nios.
El aciclovir es un compuesto que fue desarrollado en aos recientes y que
manifiesta una potente accin antiviral contra los virus Herpes simplex tipo 1 y 2.
Esta accin selectiva se debe a que el aciclovir es un excelente sustrato para ser
fosforilado por la enzima timidina cinasa de estos virus. El resultado de esta
reaccin de fosforilacin es el monofosfato de aciclovir, el cual es a su vez
fosforilado por las enzimas cinasas celulares para formar trifosfato de aciclovir;
este compuesto tienen gran afinidad por la enzima ADN polimerasa de los
virus Herpes simplex y, por lo tanto, acta como inhibidor de esta enzima dando
como resultado la inhibicin de la sntesis de ADN viral.
El aciclovir se utiliza en el tratamiento profilctico del herpes genital y cutneo, y
tambin en el tratamiento de las lesiones causadas por el Herpes zoster. En
pacientes que sufren de infecciones recurrentes por estos virus, el aciclovir

disminuye la duracin y magnitud de las recurrencias. Sin embargo, es

relativamente frecuente el aislamiento de cepas de estos virus que son resistentes
al aciclovir, hecho que limita la utilizacin masiva de este compuesto. El ganciclovir
es un compuesto muy similar al aciclovir y tiene importante accin antiviral contra
el citomegalovirus que tambin forma parte del grupo de los herpesvirus. El
foscarnet es un potente inhibidor de las ADN polimerasas de los herpesvirus y se
utiliza al igual que el ganciclovir, para el tratamiento de la retinitis ocular causada
por citomegalovirus.
En aos recientes se han caracterizado o sintetizado diversos compuestos que
manifiestan una accin antiviral contra el virus de la inmunodeficiencia humana
(HIV oVIH) en condiciones de laboratorio (in vitro). De estos compuestos
solamente la azidotimidina (zidovudina o AZT) ha sido ampliamente utilizada en el
tratamiento del SIDA. La azidotimidina es un potente inhibidor de la transcriptasa
inversa (RT), enzima esencial para la replicacin del HIV. Sin embargo, como se
ver ms adelante, el HIV es un retrovirus y, como tal, su genoma de ARN debe
ser transcrito por la RT para convertirlo en una molcula de ADN que constituye el
provirus, mismo que se integra en el genoma de la clula hospedera en forma
permanente. La expresin de la informacin contenida en el provirus permite la
sntesis de nuevo ARN viral y de las protenas virales codificadas por este. La
azidotimidina no tiene ningn efecto sobre el provirus de HIV ya que slo es capaz
de inhibir la formacin del provirus, pero no es capaz de inhibir la expresin del
provirus en clulas que ya estn infectadas en forma persistente. Por otra parte, el
tratamiento prolongado con azidotimidina favorece la aparicin de cepas mutantes
de HIV que son resistentes a este compuesto. Desafortunadamente, la experiencia
acumulada en los ltimos aos demuestra que la azidotimidina dista de ser un
tratamiento efectivo contra elSIDA.
El interfern tiene actividad antiviral universal y alta actividad especfica; por lo
tanto, constituye potencialmente el agente ideal para el tratamiento de las
infecciones virales Sin embargo, la vida media del interfern administrado por va
parenteral es muy corta (alrededor de 3 horas) debido a que es una molcula
inestable que es rpidamente degradada cuando esta fuera de las clulas. Esto
impone la necesidad de utilizar dosis elevadas de interfern para obtener un
efecto teraputico. Quiz en un futuro cercano la metodologa
del ADN recombinante permitir obtener cantidades industriales de interfern,
adems de modificar las caractersticas moleculares del mismo, de manera que se
pueda utilizar el interfern para el tratamiento de las enfermedades virales.

VACUNAS VIRICAS:

Es una vacuna a virus vivos atenuados. Se presenta sola o combinada con

antirrubelica y antiparotiditis (Triple viral). La presentacin combinada slo con
antirrubelica se denomina Doble viral.
Aplicada antes de las 72 horas posteriores a la exposicin, previene la
enfermedad.
Los anticuerpos inducidos se elevan a los 5 o 6 das, y son protectores durante
mucho tiempo. Ciertos estudios los han detectado hasta despus de 20 aos. La
efectividad de esta vacuna es del 95% y es mxima a partir de los 13 meses. Los
anticuerpos maternos, pueden persistir en el beb hasta poco ms all de los 6
meses de edad; por lo tanto en lugares con alta circulacin del virus salvaje (o
brotes), debe evaluarse la posibilidad de disminuir la edad de aplicacin y repetir
la dosis, luego de los 13 meses (recordar el esquema de vacunacin previo a las
modificaciones de 1985).
En la actualidad se est trabajando en una vacuna en aerosol.
Indicaciones

Las mismas de la Triple viral. Se deben incluir los nios inmunocomprometidos o

con enfermedades respiratorias o cardacas graves, por el riesgo potencial de
enfermedad. Aunque en el primer grupo el nivel de anticuerpos inducidos es
menor, la respuesta es buena.
Los susceptibles de cualquier edad pueden vacunarse, especialmente el personal
de salud, educacin y fuerzas de seguridad. Los HIV+ tienen especial indicacin,
ya que los efectos del virus salvaje es ms grave que cualquier reaccin post-

vacunal.
Se aplica en forma subcutnea profunda.

Contraindicaciones
Efectos colaterales

Son poco importantes. Puede presentarse un rash morbiliforme leve entre el 5 y

12 da. El 5 a 15% de los vacunados presenta fiebre alta despus del 5 da, con
2 o 3 de duracin (en algunos nios pueden producirse convulsiones por
hipertermia, nunca con trastornos posteriores; por lo que debe asumirse el riesgo
y vacunar tomando los recaudos correspondientes). En un 1% pueden aparecer los
tres catarros caractersticos de la enfermedad, pero muy atenuados.
De las vacunas a virus vivos, es la que provoca ms episodios de hipertermia
post-vacunacin.

Estrategias de vacunacin

La mejor prevencin de un brote de sarampin es una buena cobertura de

vacunacin. En los pases con coberturas altas, la vacunacin debe establecerse
al ao de edad y slo disminuir sta edad en caso de riesgo cierto de brote
(cuanto mayor sea la cobertura de vacunacin a esta edad menor riesgo que los
susceptibles de mayor edad sean afectados). Controlando y bloqueando a stos,
la erradicacin del sarampin es posible aunque se necesita una cobertura de
vacunacin sostenida del 95 al 98%. (recordar: ataca slo al hombre; no hay
portadores y se transmite de persona a persona; deja inmunidad permanente;
vacuna efectiva).
En junio de 1996, en una reunin consultiva de la OPS, el CDC y la OMS, en
Atlanta; funcionarios de salud pblica de todo el mundo analizaron los resultados
de las estrategias y campaas realizadas y debatieron la posibilidad de
erradicacin del Sarampin entre el 2005 y el 2010, como complemento de los
esfuerzos y xito de la erradicacin de la polio.
El Programa de Eliminacin del Sarampin se basa en la vacunacin oportuna de

la poblacin susceptible. Para ello se siguen las siguientes pautas:

1) Coberturas sostenidas por encima del 95%.
2) Vacunacin del 100% de los nios comprendidos entre 1 y 6 aos.
3) Campaas masivas "de seguimiento" relacionadas con la acumulacin de
susceptibles.
4) Acciones de bloqueo ante brotes.

Conducta ante brote

Se debe vacunar, salvo expresas excepciones, a todos los susceptibles y no dejar

reingresar a los establecimientos a aqullos que no se hubieran vacunado, hasta
13 das despus del ltimo caso que pudiera haber contagiado.
Deben ser vacunados los lactantes y menores de dos aos en forma prioritaria,
aunque los adultos contacto tambin deben ser cubiertos si no estn vacunados.
Bajo ningn aspecto debe decidirse el cierre de una institucin, ya que de
seguirse las recomendaciones anteriores, slo tendra una generacin ms al
agotarse los susceptibles.
En el caso de presentarse en un lugar de internacin, el proceso debe ser
parecido, para evitar que los internados susceptibles pudieran ver agravada su
situacin por las complicaciones del sarampin. Debe considerarse tambin el
aislamiento del caso o casos, e indicar la cuarentena de los contactos
susceptibles.

Direccin editorial: Dra. Adriana O. DONATO

A virus vivos atenuados, se presenta en forma aislada o combinada con

antiparotiditis y antisarampionosa.
Se comenz a usar en 1969, con otras cepas distintas a la actual. La utilizada

desde 1979 a la fecha, contiene la cepa RA 27/3, obtenida del cultivo de clulas
diploides humanas.
La vacuna induce anticuerpos en ms del 95% de los vacunados. La inmunidad
que confiere es prolongada y casi con seguridad, de por vida. Actualmente, con
criterio similar que para elsarampin y parotiditis (falla primaria), se aconseja la
revacunacin, por los efectos potenciales de esta enfermedad: el sindrome de
Rubeola Congnita (SRC).
La prevencin por vacunacin debe ser dirigida a disminuir el SRC, y la estrategia
se basa en interrumpir la transmisin del virus rubeola entre los nios de corta
edad y garantizar que las mujeres adultas en edad frtil estn inmunizadas.
Vacunacin

Aqullos que han superado la edad incluida en esta nueva norma de vacunacin,
es aconsejable que sigan la siguiente estrategia:
1) Las nias y varones susceptibles pueden vacunarse al inicio de la pubertad.
Recordar que el diagnstico clnico excluyente no es confiable y no debe
aceptarse como indicador de inmunidad.
2) Debe vacunarse a las mujeres post-pberes que se ignora si son inmunes a la
rubeola. Debe advertrseles que no deben quedar embarazadas antes de 28 das
(MMWR - 12/01/2002 - [las normas anteriores sugeran 3 meses]). Si estn
embarazadas no deben ser vacunadas, pero deben serlo en forma inmediata
luego del parto (en el caso de la administracin de Inmunoglobulina anti-Rho(D),
puede ser aplicada simultneamente). La alimentacin materna no es una
contraindicacin.
3) Deben ser vacunados todos los individuos susceptibles de instituciones
educativas o de cuidado diurno, personal de salud, etc.; dnde pueden diseminar
o quedar expuestos al virus rubeola.
Otros aspectos:
Se sugiere:
a) Discriminar la notificacin de SRC y documentar.
b) Concientizar a nivel de las Sociedades Cientficas (Gineco-obsttricas y
Peditricas), para su prevencin desde el consultorio a travs de la consulta
rutinaria (puericultura, adolescentes, purperas). Elaboracin de Programas de

educacin y concientizacin de la poblacin.

c) Buena accesibilidad a la serologa.
d) Pesquisa rutinaria de rubeola en las embarazadas, a travs de la seguridad
social junto con Hepatitis B.
e) Incluir la pesquisa en el exmen prenupcial obligatorio.

Contraindicaciones
Efectos colaterales

Muy pocas, an en adultos, que pueden aparecer entre 7 y 21 das despus de su

aplicacin (porcentaje muy bajo). No hay reacciones importantes en personas ya
inmunes. Se han referido artralgias, parestesias y mialgias. En mujeres postpberes susceptibles se han reportado artralgias y artropatas menores (25%) o
artritis franca (10%), todas transitorias. No se han demostrado artropatas
crnicas relacionadas con la vacuna.
Otras consideraciones

No se recomienda su aplicacin durante el embarazo, aunque no se han

descripto trastornos en bebs cuyas madres fueron vacunadas con antirrubelica
accidentalmente durante su gestacin. A su vez distintos seguimientos descartan
la aparicin de alteraciones congnitas por vacuna (CDC).
La vacunacin de nios en contacto con embarazadas no constituye ningn
riesgo.
La vacuna despus de la exposicin no evita la enfermedad, pero de todas
maneras no est contraindicada la vacunacin de una persona que pudiera estar
incubndola.

A virus vivos atenuados. En 1948 se produjo la primer vacuna a virus muertos,

que luego de algunos aos fue desestimada porque generaba corta inmunidad. En
1967 se licenci en EE.UU. la vacuna usada actualmente, conteniendo la cepa
Jeryl Lynn, cultivada en embrin de pollo. Otras cepas usadas son la Urabe Am 9

(Europa y Japn) y Rubini (Europa, Suiza).

Su eficacia estriba en el 95% y la inmunidad es prolongada. Se presenta sola o
combinada con antisarampionosa y antirrubelica. Esta ltima es conocida en
nuestro medio como Triple Viral o Triple vrica.

Indicaciones

Las de la Triple Viral. En forma aislada, puede aplicarse en cualquier momento,

luego del ao de vida. En menores de 1 ao no se indica, por la persistencia de
anticuerpos maternos. sto puede modificarse ante circunstancias
epidemiolgicas especiales, pero debe revacunarse con una nueva dosis luego del
ao de edad.
Deben vacunarse los prepberes (especialmente varones) y adultos que no hayan
padecido la enfermedad (y no hayan sido vacunados), ya que luego de la
institucin de la vacuna, los susceptibles se han desplazado a edades mayores.
La inmunizacin de los contactos despus del contagio, no protege, pero no est
contraindicada (prevencin colectiva). El personal de guarderas, jardines,
escuelas, personal militar o institutos con grupos de riesgo, deben estar
inmunizados. Los viajeros deben asegurarse de ser inmunes, ya que la
enfermedad es endmica.
La inmunidad conferida por esta vacuna se estima que supera los 20 aos.
Los enfermos por HIV, sintomticos o asintomticos, deben cumplir con esta
vacunacin. Otros inmunocomprometidos, deben evaluarse individualmente.

Contraindicaciones

Falsas contraindicaciones: alergia a la Penicilina; tratamiento antibitico;

enfermedades menores; corticoides en bajas dosis; historia familiar de diabetes.

Efectos colaterales

Segn la cepa utilizada, puede dar fiebre en un 5% de los vacunados; en el 1%,

parotiditis leve unilateral (a las dos semanas), fiebre y/o rash. Es una de las
vacunas a virus vivos ms seguras.

Esta vacuna contiene 3 tipos de virus vivos atenuados, conformando as una

vacuna antisarampionosa, antiparotdea y antirrubelica en forma simultnea.
Cada una de ellas se han descripto en forma individual en los captulos
correspondientes.
El uso de una vacuna de este tipo, permite la oportunidad de aplicar 3 vacunas
simultneas, como prevencin de otras tantas enfermedades. La infraestructura
montada para el Control del Sarampin, facilita la incorporacin de esta vacuna:
sto permitir, de mantenerse altas coberturas, un gran avance en el control de
paperas y rubeola, adems del sarampin.
Nota: El 99% de los que reciben dos dosis, desarrollan inmunidad contra estas
tres enfermedades. No hay "edad tope" para el uso de esta vacuna ni de sus
componentes por separado. La vacuna oficial se presenta en frasco multidosis y
debe ser desechada luego de la jornada de labor. Se aplica en forma
intramuscular o subcutnea.
Indicaciones

Infeccin por HIV. Asplenia. Insuficiencia renal. Diabetes. Mucoviscidosis.

Cardiopatas congnitas.

Contraindicaciones

1) Absolutas:
Inmunodeficientes severos (en el caso de los nios, debe aplicarse
antisarampionosa).
2) Transitorias:
Las embarazadas. Esto es por el riesgo terico para el feto, ya que no hay

casos demostrados. En mujeres frtiles a vacunar, debe recomendarse evitar el

embarazo durante 3 meses.
Los afectados por enfermedades agudas. Una vez mejorados, s deben
vacunarse.
Las personas que hubieran recibido previamente sangre o derivados, o
inmunoglobulinas. stos entran en las generales de vacunas a virus vivos: para
evitar que los anticuerpos neutralicen el virus vaccinal, deben ser inmunizados 2
semanas antes o 3 meses despus de esas prcticas.
Los tuberculosos: la TBC puede ser reactivada por el sarampin. Aunque no se
ha demostrado que con la vacuna pasa lo mismo, no debera vacunarse a un
tuberculoso hasta un mes despus de tratamiento activo.
Los inmunocomprometidos: deben vacunarse los contactos susceptibles de
estos pacientes, ya que el virus vacunal no es transmitido. De entrar en riesgo de
contagio, deben ser inoculados con inmunoglobulina.
Alrgicos severos al huevo
Nota: recientes estudios referidos en el British Medical Journal (3/2000)
concluyeron que esta vacuna es segura an para estas personas. El mismo fue
hecho en el St. Mary's Hospital de Londres y afirma que se necesita 100 mil veces
ms cantidad de derivado de huevo que la presente en la vacuna para producir
una reaccin alrgica; y se basa en 6.000 dosis aplicadas en nios con
antecedentes de alergia al huevo.
No son contraindicaciones: dermatitis o enfermedades gastrointestinales;
enfermedades respiratorias o cardacas crnicas; tratamientos con corticoides a
dosis bajas por menos de quince das, o con corticoides inhalatorios; desnutridos.
Por el contrario, los riesgos que se asumen al no vacunar pueden ser muy graves.

Efectos colaterales

Fiebre: entre el 5 y 12 das (puede llegar a los 39.5 C. y no dura ms de 2

das). sto sucede en el 5-15% de los vacunados.
Rash: presente en el 5%.
Artralgias: en el 25% de mujeres jvenes susceptibles, que se atribuye al
componente rubeola.
Reacciones alrgicas: son muy raras. La preparacin actual de estos agentes

inmunizantes prcticamente las ha desterrado.

Nota: No debe usarse de rutina para acciones de bloqueo, ante el brote de

cualquiera de las tres enfermedades que previene.

A virus vivos atenuados, elaborada con una cepa atenuada (OKA) y cultivada en
clulas humanas MRC-5.
Desarrollada por Takahashi a partir del lquido vesicular de un nio infectado en
la dcada del '70, fue licenciada en Japn y Corea a partir de 1988. Recin fue
autorizada en EE.UU. por la FDA en 1995, para mayores de un ao que no
hubieran padecido varicela.
Genera un 95 a 100% de inmunidad duradera en la mayora de los casos (pasados
los 10 aos desde su aplicacin, se detecta buen nivel de anticuerpos). Se estima
que la duracin de la inmunidad sera similar a las otras vacunas a virus vivos
(sarampin, rubeola, paperas) y se encuentra en estudio la necesidad de agregar
otra dosis (al igual que aqullas) para evitar el fallo vacunal.
Se recomienda la vacunacin de nios desde los 12 meses hasta los 12 aos, que
no hayan padecido la enfermedad, con una sola dosis. El momento ideal sera
acompaando a la Triple Viral (antisarampionosa, antirrubelica y antiurliana),
pero aplicada en sitios diferentes (se avanza en la combinacin con sta vacuna,
constituyendo una cudruple viral). Puede administrarse desde los 9 meses si las
circunstancias lo indicaran; aunque siempre - como toda vacuna a virus vivos con una nueva dosis luego del ao de edad.
A pesar que la seroconversin negativa es del 5%, la inmunidad mediada por
clulas, contribuye a la prevencin, ya que la infeccin por virus salvaje sera
leve y sin riesgos de complicaciones severas.
Los mayores de 12 aos, deben recibir dos dosis con un intervalo de 30-45 das ya
que la respuesta inmunolgica es menor. No hay lmite de edad para los

susceptibles. Se aplica por va subcutnea y puede hacerse en forma simultnea

con otras vacunas (junto con la Triple viral sera el momento ms indicado). Con
respecto a otras vacunas a virus vivos, de no aplicarse en el mismo momento, el
intervalo de espera es de 30-45 das.
La vacuna se presenta liofilizada. Una vez diluida, debe ser aplicada dentro de
los 30 minutos posteriores.
Nota: existen antecedentes de nios vacunados que sufrieron a posteriori,
infeccin por virus varicela zster. Segn un trabajo realizado en Japn, la
incidencia de varicela o herpes zster en nios vacunados, es de 14 casos cada
100.000 personas. Por otra parte, se especula con la posibilidad de que la cepa
responsable no fuera la Oka (presente en la vacuna). Existe la posibilidad
adems, de fallo primario de la vacuna o el padecimiento pre-vacunacin de una
varicela sub-clnica o intra-tero.

Indicaciones

Como proteccin individual, a partir del ao de edad. Adolescentes o adultos

susceptibles durante brotes. Como vacunacin post-exposicin, tiene buena
eficacia antes de transcurridos los 3 das y probablemente hasta cinco.
En el caso de adultos susceptibles, debe indicarse en trabajadores de la salud y
maestras prioritariamente; mujeres en edad frtil no gestantes; militares;
viajeros habituales. En todos los casos, debe advertirse que se puede producir un
"rash" hasta 6 semanas despus de la vacunacin y que ste puede contagiar el
virus vacunal a otros susceptibles.
Indicaciones en grupos de alto riesgo:
Pacientes con transplantes programados; enfermos crnicos y personas o
familiares en contacto con stos; RN de madres con varicela perinatal; personas
en tratamiento crnico con salicilatos; enfermos cutneos o pulmonares crnicos.
No deben vacunarse inmunodeficientes celulares (leucemias, linfomas,
deficiencias congnitas de clulas T). Con indicacin del mdico tratante,
pueden vacunarse pacientes con leucemia linfoctica aguda y nios HIV positivos
clase 1 (clasificacin CDC).
Los inmunocomprometidos humorales y adultos presentan una prdida de

anticuerpos ms rpida; pero an as, la eficacia es alta. Los vacunados que

desarrollan la enfermedad, en general, lo hacen en una forma atenuada, con
pocos elementos vesiculares.
Precauciones:
1) No administrar salicilatos durante al menos 6 semanas posteriores a la
vacunacin (aunque no se han demostrado efectos adversos).
2) Como en las otras vacunas a virus vivos, luego de la vacunacin, debe evitarse
la gestacin por lo menos hasta 3 meses despus.
3) Ante la aparicin de un exantema post-vacunal, debe evitarse el contacto con
gestantes susceptibles e inmunocomprometidos.
4) No debe ser administrada junto con otras vacunas vivas atenuadas en
pacientes inmunocomprometidos.

Contraindicaciones

Las comunes de las vacunas a virus vivos. Fiebre; inmunosuprimidos en fase

aguda; HIV; embarazo; alergia a los antibiticos que contiene; tuberculosis activa
sin tratamiento.

Efectos colaterales

Los habituales de vacunas inyectables: dolor, enrojecimiento y tumefaccin en el

lugar de aplicacin (20% en nios y 25/30% en adultos). Puede aparecer un rash
variceliforme en un 5% de los vacunados con no ms de 50 vesculas.
En los inmunocomprometidos esta ltima reaccin aparece en el 50% de los
vacunados. Fiebre en el 5-10%.
En EE.UU. se han reportado 50 casos de Herpes Zoster en vacunados, aunque
pocos fueron identificados como virus vacunal. En nios se han presentado 18
casos sobre 100.000 vacunados ( la tasa de infeccin por virus salvaje es de
77/100.000 ). Por otra parte, todos los casos son leves y atenuados.
La transmisin del virus vacunal estara relacionada a la aparicin de rash
(evitar el contacto con inmunocomprometidos y embarazadas susceptibles).
No hay casos adversos referidos al uso de salicilatos post-vacunacin. De todas

maneras, los productores de vacunas recomiendan no usarlos al menos por 6

semanas.
Si se ha administrado inmunoglobulina especfica para Varicela-Zoster, se debe
diferir la vacunacin por lo menos 5 meses. De haber sido inmunoglobulinas de
pool o transfusiones, se debe demorar 3 meses.

Antgeno inmunizante: PVO (cepa Sabin) y PVI (cepas Salk o Lepine).

PVO (Poliovirus Oral): a virus vivos atenuados de tipo I, II y III, cultivados en
clulas de rin de mono. Es conocida como Sabin oral, haciendo honor al
apellido de quin la desarroll, el Dr. Albert Sabin.
Las primeras vacunas comenzaron a utilizarse en 1955, aunque su uso masivo se
implement en el inicio de los '60. En 1962 ya inclua las tres cepas. La cepa 3 es
la ms inestable y la responsable principal de las polio post-vaccinales (por
rpida mutacin al estado salvaje durante la replicacin); aunque presenta
mucho menos riesgo de afectar al SNC (esta posibilidad es ms alta en las dos
primeras dosis, con prevalencia de la primera).
La inoculacin oral infecta orofaringe y tracto gastrointestinal, induciendo la
formacin de IgA secretoria a nivel local. El antgeno vaccinal se excreta en
heces durante varias semanas, produciendo una circulacin efectiva en forma
secundaria: sto es una barrera epidemiolgica para el PV salvaje, con resultados
ptimos en la vacunacin de bloqueo (deja anticuerpos en la mucosa intestinal y
circulantes). Esta capacidad de recirculacin de las cepas atenuadas, contribuye
a que la cobertura de vacunacin sea mayor que la reflejada estadsticamente:
es la vacuna ideal para inmunizacin masiva, por esta accin indirecta.
La interferencia de otros enterovirus (Coxsackie, Echo, etc.) puede disminuir la
respuesta inmunitaria a la vacuna.
PVI (Poliovirus Inactivados): tambin incluye 3 tipos, pero los PV son
cultivados en clulas diploides humanas o Vero, e inactivados con formalina.
En uso desde 1954, fue la culminacin de las investigaciones del Dr. Jonas Salk;
logrando hacer frente a la pandemia que asolaba el mundo en esos aos, y cuyas

secuelas an hoy son sufridas por millones de personas.

Esta vacuna se aplica en forma subcutnea o intramuscular y produce inmunidad
sistmica a travs de anticuerpos circulantes; por lo tanto es muy efectiva como
inmunizacin individual (100% de eficacia). Por la misma causa, no puede usarse
operativamente como barrera epidemiolgica. La combinacin estructurada de
ambas vacunas, en pases con alta cobertura de vacunacin, protege al individuo
y a la comunidad. Este principio ha sido adoptado por algunos pases y su
discusin ha generado polmicas en el mbito de la OMS, entidad que previene
sobre los riesgos que se presentaran con la desactivacin de la inmunizacin con
PVO.
Se presenta en forma individual o en las llamadas Quntuple y Sxtuple:
a) combinada con DPT y anti-Haemophilus
b) combinada con DPT y anti-Hepatitis B
c) combinada con DPT, anti-Hepatitis B y anti-Haemophilus
En EE.UU. algunos Estados utilizan un esquema que incluye ambas vacunas: dos
dosis de PVI y 2 dosis de PVO, en ese orden, en su esquema habitual primario.
Otros, utilizan un esquema completo con PVI, de acuerdo con recomendaciones
del ACIP y la AAP. Una posicin similar adoptaron los CDC canadienses. Esta
administracin disminuira el riesgo de incidencia de polio post-vaccinal en las
primeras dosis; pero, y de acuerdo a lo planteado ms arriba, segn la OMS slo
podra hacerse si no hay circulacin de virus salvaje demostrada y se cumple con
una cobertura de vacunacin mayor al 90% en la tercera dosis.
La ltima recomendacin de la ACIP, que reemplaza a la de 1997, determina el
uso de la PVO para control de brotes, nios sin vacunar que viajen antes de 4
semanas a pases con polio y en aqullos que no aceptan las inyecciones (pero
slo para la 3a. y/o 4a. dosis).

Indicaciones

Debe vacunarse sistemticamente a toda la poblacin susceptible.

Epidemiolgicamente, la vacunacin interrumpe la cadena de transmisin. Las
coberturas deben acercarse al 100% para cumplir con el objetivo de erradicacin.
El esquema bsico es de 3 dosis a los 2, 4 y 6 meses de edad (o con un intervalo

mnimo de 30-45 das segn se use PVI o PVO). Un refuerzo al ao de aplicada la

ltima dosis y un segundo refuerzo al ingreso escolar (total: 5 dosis). No se
recomienda su uso rutinario en adultos y embarazadas, porque la mayora ya no
es susceptible.
La PVI tiene como indicaciones fundamentales:
a) Adultos que deban completar o reforzar su esquema por mayor riesgo de
exposicin (viajeros a zonas endmicas o epidmicas, contactos, personal en
contacto o manipulacin del virus).
b) Pacientes con inmunodeficiencia primaria o secundaria, y sus contactos
familiares ante el riesgo de parlisis asociada a PVO.
En aquellos pacientes que han recibido tratamiento inmunosupresor, deben
respetarse ciertos tiempos (Argentina - Normas Nacionales de Vacunacin):
1) Transplantados: 6 a 12 meses.
2) Quimioterapia: 3 meses.
3) Corticoterapia: 1 mes.
4) Radioterapia total: 1 mes.
c) Adultos no vacunados previamente o que no hayan completado el esquema
bsico de inmunizacin con PVO (la tasa de infeccin post-vacuna PVO, es
levemente ms alta en adultos que en nios). Los adultos no inmunizados
previamente pueden cumplir un esquema de 0-1-6 o 12 meses.
d) Pacientes internados.
Nota: La interrupcin del esquema no implica reiniciarlo, sino completar la
serie de dosis necesarias.

Contraindicaciones

La PVO y la PVI en el embarazo, durante el primer trimestre (aunque no hay

certeza de efectos teratognicos); enfermedad febril aguda.
La PVO en inmunodeficiencias primarias o secundarias (si se vacuna
inadvertidamente a un contacto cercano de un inmunosuprimido, debe aislrselo
por lo menos durante un mes, mximo de excrecin).

Pueden ser aplicadas junto con otras vacunas, excepto la PVO que no debe
administrarse simultneamente con vacunas anticolrica ni antitifoidea.
Falsas contraindicaciones: lactancia; diarrea leve; antibioticoterapia. La
aplicacin de gammaglobulinas dentro de los tres meses previos a la vacunacin
parecen no interferir en la respuesta inmunitaria.

Efectos colaterales

Salvo los ya enunciados, no presentan reacciones secundarias en forma general.

La presencia de estreptomicina y neomicina (en la PVI), deben ser tenidas en
cuenta en alrgicos reconocidos a esas substancias.

A virus vivos atenuados, provoca una seroconversin del 95% entre los 7 y 21 das,
lo que la convierte en una de las vacunas ms eficaces. Se refuerza, si es
necesario, cada 10 aos (los certificados de vacunacin internacionales, tienen
esta validez).
Fue introducida en 1935. Desde 1969, la OMS recomienda la cepa 17D. Estudios
realizados en Brasil y Colombia, en ms de un milln de vacunados, demostraron
la efectividad de esta vacuna y la persistencia de la inmunidad por largo tiempo.

Indicaciones

Poblacin rural de zonas epidmicas; viajeros hacia esas regiones; brotes. Puede
aplicarse desde los 9 meses de edad. En menores y en embarazadas no est
recomendada, aunque situaciones especiales pueden obligar a evaluar su
aplicacin (brote, endemia alta y viaje hacia estas zonas). Algunos pases exigen
esta vacunacin para el ingreso de viajeros (ver listado de pases en la
publicacin de la OMS: International Travel and Health).
Se aplica en forma sub-cutnea. La vacuna liofilizada, una vez reconstituida,
debe ser aplicada antes de una hora. Su eficacia es del 100% y da anticuerpos

protectores que se mantienen por 10 aos.

En la primovacunacin, la inmunidad comienza luego de 10 das, por lo tanto, es
importante manejar estos tiempos antes de un viaje programado. En el refuerzo,
la inmunidad es inmediata.

Reacciones adversas

Leves. En menos del 5% de los vacunados pueden aparecer cefaleas, dolores

musculares y/o febrcula entre los 5-12 das posteriores.
Contraindicaciones

Inmunodeprimidos en general. Alrgicos a la neomicina y polimixina o

antecedentes de anafilaxia (alergia severa) al huevo. Embarazadas (salvo que
hayan cumplido el sexto mes y se dirijan a una zona de alta endemia o tengan
contacto con un enfermo confirmado). Menores de 4 meses de edad. No debe ser
administrada junto a la vacuna anticolrica, pues disminuye la respuesta de
ambas (separar por ms de tres semanas).
Estrategias de vacunacin

Ciertos pases afectados seriamente, incluyen la vacuna antiamarlica en la

vacunacin habitual: Guayana francesa, Guyana, Trinidad y Tobago. Per y Bolivia
estudian la posibilidad de hacerlo. Ecuador y Brasil vacunan sistemticamente en
las zonas de alto riesgo.
Este ltimo pas, por ejemplo, tiene una alta incidencia en algunos Estados;
como por ejemplo Gois y Tocantins, dnde en 6 meses del 2000 se registraron 99
casos con ms del 50% de mortalidad`. En el 2001, Rio Grande do Sul, en sus
fronteras con Argentina, present casos en monos (segn datos del CENEPIFUNASA. Ministerio de Salud de Brasil).