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Citoplasma bacteriano:

Sede del metabolismo de las bacterias, en el tienen lugar todas las reacciones biosinteticas y
degradativas precisas para el crecimiento y actividad de la bacteria, incuida la sntesis de sus
propias protenas.
Es una masa de materia viva delimitada por la membrana citoplasmtica. Tiene en su interior:
Cuerpos nucleares (nucleoide)
Plsmidos (no en todas)
Ribosomas
Inclusiones (no en todas)
Orgnulos (no en todas)
Al igual que en los dems seres vivos, el citoplasma es un sistema coloidal cuya fase dispersante es
el agua, (sustancia en la cual se encuentran dispersadas otras), y la fase dispersa esta constituido por
macromolculas y conjuntos supramoleculares.
Su observacin:
Tincin Gram
Es poco de lo que podemos distinguir con el telescopio. En clulas jvenes se tie de forma
uniforme teniendo un carcter basfilo (abundancia de ARN) en la clulas viejas se tie de forma
irregular debido a la aparicin de inclusiones y acumulacin de sustancias de desecho.

Citosol
Llamamos
citoplasma a todo el volumen
de la clula
comprendido entre la membrana citoplsmica y la cubierta nuclear. Engloba numerosos organelos
y otras estructuras
especializadas. En las
bacterias, puesto
que carecen de
ncleo verdadero y de otros
organelos
limitados
por membranas, el
citoplasma es
el
nico compartimiento intracelular.
Llamamos Citosol a la soluci n acuosa concentrada que constituye la baseno estructurada
del
citoplasma. Es un
gel
de base acuosa que contiene
gran
cantidad de mol culas
grandes y pequeas y en el cual se hallan suspendidos los organelos en los organismos
eucariotes. En el
citosol
se producen muchas
de las
funciones ms
importantes
de
mantenimiento celular, como las primeras
etapas de
descomposicin n de
molculas nutritivas y la sntesis de muchas de las grandes mol culas que constituyen la clula.
En general, a
pesar de su naturaleza
acuosa, el
citosol
es
una estructura
ordenada
con una cuidadosa organizacin interna que
acta como
marco para dar eficiencia a la sntesis y destruccin
de grandes
molculas y
canaliza muchas de las reacciones qumicas celulares a lo largo de vas restringidas.

Matriz Citoplasmtica o Citosol


Aunque el agua es su componente bsico, el citosol es una masa coloidal
qumicamente muy compleja: consta: contiene prote nas, lpidos, cidos nucleicos, hidratos de carb
ono, sales minerales y otras sustancias metablicamente importantes.
La parte perifrica del citosol ,vecina a la membrana plasmtica, es
preciablemente menos densa y ha sido llamada exoplasma .Por el
contrario, la parte central, vecina al ncleo celular, ms densa, recibe el nombre de endoplasma.
En algunas regiones puede presentaraspecto homogneo, pero normalmente es granuloso y en l
se encuentran inmersos todos los organelos del citoplasma.
En el citosol se lleva a cabo una gran cantidad del
procesamiento metab lico de la c lula: se sintetizan compuestos primarios
importantes (amino cidos, sacarosa, lpidos) y compuestos secundarios como alcaloides.
Incluye todos los elementos necesarios para la s ntesis de prote nas (ribosomas, RNA mensajero, R
NA soluble y las enzimas vinculadas con este proceso).

La membrana citoplasmtica
Es similar a la de la celula eucariota, una bicapa de fosfolpidos en la que se incluyen diversas
protenas, pero, salvo en el gnero mycoplasma, las membranas citoplasmticas bacteriana no
contiene esteroles. Lpidos que estn siempre prexsentes en la membrana eucaritoa. La principal
funcin de la membrana citoplasmtica es el transporte de nutrientes del medio externo hacia el
citoplasma y de residuos metablicos, exoenzimas y otros productos cuitoplasmaticos hacia el
exterior.
No existen orgnulos membraa fosforilacin oxidativa y otros procesos de obtencin de energa en
el caso de las bacterias van ligados a la membrana citoplasmtica. La membrana es tambin la que
se relaciona directamente con el medio externo cambiante y posee protenas capaces de sentir la
concentracin externa de diversas sustancias. Las copias del cromosoma se unen a la membrana
citoplasmtica durante la fisin binaria para asegurar su reparto equitativo.

ORGNULOS PROCARITICOS CITOPLSMICOS


Como ya dijimos, en procariotas no existen por regla general orgnulos citoplsmicos
rodeados por unidad de membrana. Las nicas excepciones estn constituidas por los
tilacoides de las Oxifotobacterias. En algunos grupos bacterianos se pueden encontrar
orgnulos citoplsmicos no rodeados por unidad de membrana (o sea, sin bicapa lipdica).
Muchos de ellos presentan envueltas basadas en subunidades de protenas:
1. Carboxisomas
2. vacuolas de gas
3. clorosomas

4. magnetosomas.
CARBOXISOMAS (= CUERPOS POLIDRICOS)
Estructuras presentes en bacterias fotoautotrofas (Cianobacterias y ciertas bacterias
purpreas) y quimioautotrofas (nitrificantes, Thiobacillus), de apariencia polidrica con
tendencia a esfrica. Su dimetro oscila entre 50 y 500 nm, y estn rodeadas de envuelta
monocapa proteinica de unos 3,5 nm. El interior tiene aspecto granular, debido a la
acumulacin de la enzima ribulosa-bifosfato-carboxilasa (RuBisCo, la carboxidismutasa, el
enzima clave en el ciclo de Calvin de asimilacin de CO2). Aunque se pens que eran los
sitios de fijacin del CO2, parece ms bien que se trata de reservas de dicha enzima.
2. VACUOLAS DE GAS
Son orgnulos muy refringentes al microscopio ptico, que al electrnico muestran una
estructura a base de agrupaciones regulares de vesculas de gas. Cada vescula tiene una
forma de cilindro bicnico (200-1000 nm de longitud y unos 70 nm de dimetro), rodeado
de una monocapa de unidades globulares de protena ensambladas helicoidalmente que dan
un aspecto a bandas (costillas). Est envuelta es impermeable al agua, pero permeable a
los gases, por lo que la composicin y concentracin del gas dentro de la vescula depende
de las que existan en el medio. Conforme se sintetizan y ensamblan las vesculas, el agua va
siendo eliminada del interior.
Las vesculas de gas estn constituidas por dos tipos de protena: la mayoritaria GvpA es
una pequea protena rgida y muy hidrfoba. Su rigidez est en la base del hecho de que
las vesculas y vacuolas de gas aguanten presiones externas. La protena minoritaria GvpC
tiene como funcin reforzar las vesculas de gas.
La funcin de estas vacuolas es mantener un grado de flotabilidad ptimo en los hbitats
acuticos a las bacterias que las poseen, permitindoles alcanzar la profundidad adecuada
para su modo de vida (segn los casos, para obtener una intensidad adecuada de luz,
concentracin ptima de oxgeno o de otros nutrientes).
Las vacuolas de gas son muy frecuentes en eubacterias fototrofas (Cianobacterias y
bacterias fotosinttiocas purpreas y verdes); tambin se dan en algunas arqueas
(Halobacterium, algunas metangenas) y en bacterias prostecadas (Ancalomicrobium,
Prosthecomicrobium).
3. CLOROSOMAS
Son vesculas oblongas situadas por debajo de la membrana citoplsmica, que contienen los
pigmentos antena de las bacterias fotosintticas verdes (antigua familia Chlorobiaceae).
Son invisibles a microscopa ptica; miden 100-150 nm de longitud y unos 50 nm de
anchura, estando rodeadas de una monocapa de protenas. Se disponen por debajo de la
membrana citoplsmica, sin estar en continuidad con ella, aunque en muchos casos
aparecen conectadas a travs de un pednculo de naturaleza no lipdica.

4. MAGNETOSOMAS
Son orgnulos sensores del campo magntico terrestre, que aparecen en ciertas bacterias
acuticas flageladas microaerfilas o anaerobias (p. ej., en Aquaspirillum
magnetotacticum). Consisten en cristales homogneos de magnetita (Fe3O4), de formas
cubo-octadricas o de prisma hexagonal delimitados por una envuelta protenica. Los
diversos cristales suelen disponerse en filas paralelas al eje longitudinal de la bacteria, o en
otras agrupaciones regulares de varios unidades, hasta varias decenas.
Fueron descubiertas en 1975, y se sabe que permiten la orientacin magntica a las
bacterias que las poseen (bacterias magnetotcticas), determinando la orientacin de su
natacin. En el hemisferio Norte, el campo magntico est orientado hacia abajo, y en el sur
hacia arriba. Las bacterias magnetotcticas del hemisferio septentrional se orientan al N, y
las del meridional, al S. Por consiguiente, cuando las bacterias son removidas de los fondos
donde viven, por magnetotaxia pueden volver al fondo, que es donde encuentran las
concentraciones de oxgeno adecuadas para su modo de vida.
MATERIAL GENTICO: EL NUCLEOIDE
El ADN es el material gentico de los procariotas, al igual que del resto de seres vivos
(celulares). Dicho ADN est contenido en una regin concreta del citoplasma, denominada
nucleoide, en la mayora de los casos sin estar separado por membrana (hay un par de
bacterias en las que se ha descubierto una membrana rodeando al nucleoide). El genoma es
el conjunto de genes y secuencias de ADN de un organismo. En el caso de bacterias, el
elemento obligatorio del genoma es el cromosoma, aunque es frecuente encontrar unidades
de replicacin autnomas llamadas plsmidos, que son dispensables (si se pierden, la
bacteria sigue siendo viable).
EL CROMOSOMA PROCARIOTA
Los cromosomas aislados muestran una composicin de un 60% de ADN, 30% de ARN y
10% de protenas.
El ADN sigue el modelo clsico de Watson y Crick: dos hebras antiparalelas en doble
hlice de 2 nm de dimetro, paso de rosca de 3,4 nm y 10 pares de nucletidos por cada
vuelta de la espiral. La mayor parte de este ADN est en conformacin B, aunque existen
zonas donde se puede dar la configuracin Z.
En la mayor parte de las bacterias este ADN constituye un solo cromosoma circular,
cerrado covalentemente (ADN c.c.c.). Existen algunas excepciones, en el sentido de que
podemos encontrar cromosomas lineares o incluso ms de un grupo de ligamiento (ms de
un cromosoma):
En el gnero Borrelia el cromosoma es lineal con los extremos cerrados covalentemente

(es decir, los extremos forman una especie de bucle de horquilla);


Bacterias del gnero Streptomyces tambin poseen un cromosoma lineal, pero sus
extremos contienen secuencias cortas repetidas y estn acomplejados con protenas, lo
que recuerda de algn modo los telmeros eucariotas;
Algunas bacterias parecen poseer dos o ms cromosomas:
Rhodobacter sphaeroides, Vibrio ,Leptospira y brucella presentan dos cromosomas
circulares.
Sinorhizobium melitoti presenta tres cromosomas circulares
Distintas cepas de Burkholderia cepacia presentan entre 2 y 4 cromosomas.
Agrobacterium tumefaciens cuenta con un cromosoma lineal y otro circular.
Las bacterias son organismos haploides: poseen un solo cromosoma. Sin embargo, cuando
las clulas bacterianas se encuentran en crecimiento activo, y debido al desfase de la
divisin celular respecto de la replicacin, cada individuo puede albergar varias copias de
ese cromosoma. Por ejemplo, E. coli puede llegar a 10 copias. Azotobacter puede llegar
hasta las 100 copias al final de la fase de crecimiento exponencial. Un caso extremo lo
constituye la bacteria gigante Epulopiscium, que aumenta el nmero de copias en cuatro
rdenes de magnitud (unas 10.000 veces), aunque se desconoce el significado de este
descomunal exceso.
TAMAO DEL CROMOSOMA
Una bacteria tpica, como Escherichia coli posee un cromosoma con 4.700 pares de
kilobases (kb). Pero los rangos de tamao oscilan entre las 700 kb de Mycoplasma
genitalium(una bacteria carente de pared y parsita) y las ms de 12 000 kb de ciertas
bacterias capaces de diferenciacin celular y fenmenos de multicelularidad
(cianobacterias, actinomicetos).
PLSMIDOS

Definicin y conceptos generales


Aunque en general es adecuado decir que el genoma de los procariotas consta de un solo
cromosoma, muchas bacterias poseen, adems, uno o varios elementos genticos accesorios
extracromosmicos, a los que denominamos plsmidos.
Se definen como elementos genticos extracromosmicos con capacidad de replicacin
autnoma (es decir, constituyen replicones propios). Todos los plsmidos bacterianos
estudiados son de ADN de cadena doble. La inmensa mayora son circulares cerrados
covalentemente (c.c.c.) y superenrollados (aunque en Borrelia y algunos Actinomicetos
existen plsmidos lineares). Algunos plsmidos poseen, adems, la capacidad de integrarse
reversiblemente en el cromosoma bacteriano: en esta situacin se replican junto con el
cromosoma (bajo el control de ste), y reciben el nombre de episomas.
En cuanto al tamao, existe una amplia gama: desde plsmidos muy pequeos (de unas 2
kb) hasta plsmidos muy grandes (ciertos plsmidos de Pseudomonas tienen 500 kb).
Incluso existen megaplsmidos en ciertos Rhizobium que llegan a tener 1600 kb. (De
hecho, ciertos megaplsmidos se ha visto que son imprescindibles, por lo que se han
recalificado como cromosomas).
Cada tipo de plsmido tiene un nmero medio de copias por clula caracterstico. Por regla
general, los grandes plsmidos tienen una o dos copias por clula (plsmidos con control
estricto de la replicacin), mientras que los pequeos suelen estar presentes como varias
copias (>10), denominndose plsmidos de control relajado.
En funcin de que los plsmidos sean o no transmisibles de una bacteria a otra por medio
de contactos intercelulares, se pueden distinguir:

Plsmidos conjugativos (autotransmisibles), que son aquellos que se transfieren entre


cepas por medio de fenmenos de conjugacin. Algunos de estos plsmidos no slo se
transfieren entre cepas de la misma especie, sino que son capaces de hacerlo entre
especies y gneros muy diversos, recibiendo el muy apropiado nombre de plsmidos

promiscuos o de amplio espectro de hospedadores, permitiendo transferencia horizontal


de informacin gentica entre grupos bacterianos filogenticamente alejados.

Plsmidos no conjugativos, carentes de esta propiedad de conjugacin. Dentro de


esta categora existe un subgrupo, el de los plsmidos movilizables: son aquellos no
autotransmisibles que pueden ser transferidos por la accin de un plsmido conjugativo
coexistente en la misma bacteria.
Fenotipos determinados por los plsmidos
Los plsmidos no suelen ser indispensables para la viabilidad de la bacteria, y muchos de
ellos se pierden en ausencia de una presin selectiva. Una bacteria puede ser curada de
su(s) plsmido(s), es decir, se le pueden eliminar, bien de forma espontnea, bien por una
serie de tratamientos en el laboratorio (incubando las bacterias a temperaturas cercanas a la
mxima o por agentes qumicos como el naranja de acridina, que se insertan entre las bases
del ADN). La razn de esta curacin de los plsmidos es que esos tratamientos interfieren
con su replicacin sin afectar a la replicacin del cromosoma. Esto hace que en sucesivas
divisiones de una bacteria, el plsmido se vaya diluyendo en la poblacin resultante.
Los plsmidos no suelen determinar productos esenciales para el crecimiento (por eso son
dispensables), pero en la naturaleza parece que resultan favorecidas las bacterias con algn
plsmido, quiz porque acarrean ventajas selectivas en determinados ambientes o en
determinadas condiciones. Existe una variedad de fenotipos y funciones determinados por
plsmidos:
Resistencia a antibiticos (plsmidos R; los estudiaremos en la seccin de Gentica).

Resistencia a metales pesados (por ejemplo, resistencia a mercurio).


Plsmidos de virulencia: produccin de toxinas, factores de penetracin en tejidos,
adherencia a tejidos del hospedador, etc., en ciertas bacterias patgenas.
Produccin de bacteriocinas (protenas txicas producidas por bacterias que matan a
otras de la misma especie).
Produccin de siderforos (quelatos para secuestrar iones Fe3+).
Utilizacin de determinados azcares.
Utilizacin de hidrocarburos, incluyendo algunos cclicos recalcitrantes (degradacin de
tolueno, xileno, alcanfor, etc.) en Pseudomonas.
Induccin de tumores en plantas (plsmido Ti de Agrobacterium tumefaciens).
Interacciones simbiticas y fijacin de nitrgeno en ciertos Rhizobium.
etc...
Obsrvese que la mayor parte de estos fenotipos no estn directamente relacionados con el
proceso de crecimiento bacteriano, sino que se pueden calificar como funciones para
ocupar nichos ecolgicos y resistir circunstancias adversas. Los dos fenotipos de
utilizacin de... (Fuente alternativa de C) nos recuerdan que muchas bacterias estn
sometidas a perodos alternos de hambrunas y de festines de comida: ciertas bacterias,
como Pseudomonas se adaptan a los perodos de hambre de las fuentes habituales de C
recurriendo a fuentes exticas, como hidrocarburos cclicos. La informacin para los
enzimas degradativos correspondientes la llevan en plsmidos.
Por qu, entonces, si determinadas propiedades conferidas por plsmidos son tan tiles, no
han pasado a lo largo de la evolucin a ser codificadas por el cromosoma? No podemos
contestar a ciencia cierta a esa pregunta, pero cabe especular que resulta ventajoso que
algunas poblaciones bacterianas dispongan de ciertos genes en replicones distintos del
cromosoma, de modo que los cromosomas no lleguen a ser demasiado grandes. Cuando no
hay presin selectiva para los rasgos conferidos por un plsmido, ste se puede perder de

parte de la poblacin. Pero cuando existe dicha presin selectiva (p. ej., un antibitico),
sobreviven y se multiplican preferencialmente las bacterias portadoras del plsmido, de
modo que en poco tiempo, la poblacin contiene mayoritariamente dicho elemento.
Adems, como muchos plsmidos son autotransmisibles o movilizables, pueden transferirse
a cepas que originalmente carecan de ellos. En resumen, se logra una gran flexibilidad
adaptativa sin cargar demasiado el cromosoma o replicn principal.
Hay plsmidos que, aunque se pueden evidenciar por mtodos fsicos (p. ej., electroforesis),
no se ha podido demostrar que determinen ningn rasgo fenotpico: tales plsmidos se
califican como crpticos, constituyendo un ejemplo de ADN egosta (slo se mantienen
por su capacidad de replicacin, sin necesidad de aportar ventaja selectiva clara a la
bacteria que los alberga).
Replicacin de los plsmidos

La replicacin del ADN de los plsmidos se origina siempre en el mismo lugar y utiliza un
mecanismo denominado de crculo rodante. En el punto de origen, sobresale una
protuberancia en forma de horquilla de cabello donde se engancha la protena RepB para
iniciar la replicacin. Lo que han descubierto los investigadores es que la protena
iniciadora es un hexmero en forma de anillo y, por lo tanto, contiene seis centros activos y
seis motivos de unin al ADN que, adems, son mviles. Estas caractersticas le confieren
varias habilidades: reconocer el lugar de origen de la replicacin, cortar una de las cadenas
de ADN, rodear la otra y desenredarla para que la maquinaria de replicacin -el replisomapueda avanzar a lo largo del ADN y, finalmente, volver a atar la cadena de ADN cortada,
completando el crculo.
La estructura de la protena RepB muestra similitudes con la familia de protenas helicasas
de tipo anillo que intervienen en diversos procesos relacionados con el ADN, por ejemplo,
en la replicacin de los virus. En particular, los investigadores han visto que una parte de
RepB tiene una estructura muy similar a los iniciadores de la replicacin de dos virus que
provocan cncer en humanos: el virus del papiloma humano (tero) y el virus SV40

(mesoteliomas). Segn Coll, esta coincidencia estructural muestra la relacin evolutiva


entre los mecanismos y las protenas de replicacin de los plsmidos y los virus.
Regulacin del nmero de copias
La regulacin del nmero medio de copias de cada plsmido en cada bacteria es una
propiedad caracterstica dependiente de cmo se controla el inicio de replicacin, siendo
diferentes los mecanismos en los plsmidos de alto nmero de copias (con control relajado)
y en los plsmidos de bajo nmero de copias (de control estricto).
En general, los plsmidos de control relajado tienen mecanismos que inhiben el inicio de
replicacin slo cuando el nmero de copias ha llegado a un cierto nivel.
En cambio, los plsmidos de control estricto tienen mecanismos que logran que slo se
repliquen una vez o un pequeo nmero de veces en cada ciclo celular.
Reparto de las copias a las clulas hijas
Muchos plsmidos poseen sistemas de reparto (= particin), que tienden a asegurar que una
vez que el plsmido ha sido replicado, cada una de las clulas hijas va a recibir al menos
una copia. A falta de un tal sistema, y si el reparto fuera aleatorio, de vez en cuando, las
propias fluctuaciones de la segregacin aleatoria haran que parte de la progenie no
recibiera una copia, con lo que quedara curada de ese plsmido.
El reparto de las copias a las clulas hijas se suele deber a las llamadas funciones par, que
estn cerca de los genes rep y de la zona ori. Se trata de cortas secuencias de ADN que de
alguna manera an no aclarada, debe unirse a alguna zona de la membrana de la bacteria
que se duplica durante la divisin celular, de modo que cada copia, unida a una de esas
zonas, se segrega a una clula hija.
Incompatibilidad entra plsmidos y grupos de incompatibilidad
Cada plsmido, dentro de la amplia diversidad de los que se conocen, se suele clasificar
segn el grupo de incompatibilidad al que pertenece (los grupos de incompatibilidad se
suelen denominar con las siglas Inc seguidas de una letra mayscula (por ejemplo IncP,
IncFII, etc.). Se dice que dos plsmidos son incompatibles cuando no pueden coexistir
establemente en la misma bacteria en ausencia de una presin selectiva permanente. Grupo
de incompatibilidad es el conjunto de plsmidos incompatibles entre s. La
incompatibilidad depende del hecho de que los distintos miembros de un mismo grupo
poseen el mismo tipo de sistema de control del nmero de copias y de reparto de dichas
copias a las clulas hijas. En cada clula con dos plsmidos distintos del mismo grupo de
incompatibilidad, el nmero total de copias nA+nB = N (determinado por el sistema de
control) no vara, pero por fluctuaciones aleatorias en el reparto, algunas clulas heredan

ms copias de uno de los plsmidos que del otro, y tras varias generaciones aparecen
clulas carentes de uno o del otro plsmido (nA = 0 y nB = N, o viceversa).

Ribosomas
Libres en el citoplasma, estn compuestos por protenas y cido ribonucleico (ARN); su coeficiente
Pueden presentarse aislados o como polirribosomas, asociados a ARN mensajero (ARNm) y a ADN
cromosmico. Un mismo ARNm puede ser traducido por varios ribosomas simultneamente
durante la sntesis proteica. Los ARNm bacterianos difieren en el nmero de protenas para las que
codifican. Algunos representan un nico gen (monocistrnicos), otros, la mayora, tienen secuencias
que codifican para ms de una protena (policistrnicos).
Su funcin es la sntesis proteica y su cantidad aumenta cuando la bacteria crece en medios ricos.
Su alto contenido de sustancias cidas los hace sensibles a la tincin con colorantes positivos o
bsicos como el cristal violeta y el azul de metileno.
Los ribosomas son partculas de ribonucleoprotenas que se ocupan de traducir la informacin
gentica al lenguaje de las protenas. Los ribosomas bacterianos no estn unidos a una membrana
porque no existe el retculo endoplsmico y son ms pequeos que los eucariotas: de tipo70S,
formados por dos subunidades de 30S y 50S.
Tanto el ARNr como las subunidades de los ribosomas se suelen nombrar por su coeficiente de
sedimentacin en unidades Svedberg. En las clulas eucariotas, los ribosomas del citoplasma alcanzan
80 S. En plastos de eucariotas, as como en procariotas, son 70 S. Los ribosomas mitocondriales son de
tamao variado, entre 55 y 70 S.

Inclusiones De Reserva
Son acmulos de sustancias orgnicas o inorgnicas, rodeadas o no de una envuelta limitante de
naturaleza protenica, que se originan dentro del citoplasma bajo determinadas condiciones de
crecimiento. Constituyen reservas de fuentes de C o N (inclusiones orgnicas) y de P o S
(inclusiones inorgnicas).

Inclusiones orgnicas
1. inclusiones polisacardicas
2. grnulos de poli--hidroxibutrico (o, en general de poli--hidroxialcanoatos)
3. inclusiones de hidrocarburos
4. grnulos de cianoficina

Inclusiones inorgnicas:
1. grnulos de polifosfato
2. glbulos de azufre

INCLUSIONES ORGNICAS
INCLUSIONES POLISACARDICAS
Son acumulaciones de a (1-->4) glucanos, con ramificaciones en a (1--> 6), principalmente almidn
o glucgeno (segn especies), que se depositan de modo ms o menos uniforme por todo el
citoplasma cuando determinadas bacterias crecen en medios con limitacin de fuente de N, pero
donde an sean abundantes las fuentes de C y energa. En esta situacin, se detiene prcticamente la
sntesis de protenas y de cidos nucleicos, y la mayor parte del C asimilado se convierte
rpidamente en estos materiales de reserva. Cuando a estas clulas las pasamos a un medio rico en
N, pero carente de fuente de C, estas inclusiones se usan como fuente interna de C para la sntesis
de cidos nucleicos y protenas.
Estas inclusiones actan, pues, como sistemas de almacenamiento de carbono osmticamente
inertes (la clula puede albergar grandes cantidades de glucosa que, si estuvieran como molculas
libres dentro del citoplasma, podran tener efectos osmticos muy negativos).
Sntesis (veamos el ejemplo del glucgeno):
fosfoglucomutasa
Glucosa-6-P --------------------------------> Glucosa-1-P
ADP-glucosa-pirofosforilasa
Glucosa-1-P + ATP ---------------------------------------> ADP-glucosa + PP
glucgeno sintetasa
ADP-glucosa + {a ,1-->4 glucano aceptor}n -----------------------------------------> {a ,1-->4
glucano}n+1

Sobre este polmero lineal acta la enzima ramificadora (que introduce enlaces a (1-->6) con
glucosa), de modo que se forma el glucgeno maduro.
Degradacin:
glucgeno fosforilasa
Glucgeno --------------------------------> n {glucosa-1-P}

Para la total degradacin del glucgeno se requieren tambin enzimas desramificadoras, capaces de
romper los enlaces a (1-->6).
Observacin:

Para observarlas se recurre a la tincin con una solucin de I2 + IK:


glucgeno: aparece de color pardo-rojizo
almidn (amilopectina): color azul.

GRNULOS
DE POLI--HIDROXIBUTRICO
HIDROXIALCANOATOS (PHA)

(PHB)

DE

POLI-

Los grnulos de poli-b-hidroxibutrico son acmulos del polister del cido -hidroxibutrico (= 3hidroxibutrico), rodeados de una envuelta protenica, y que al igual que en el caso anterior, se
producen en ciertas bacterias como reserva osmticamente inerte de C en condiciones de hambre de
N. Adems de la proteccin osmtica, estos grnulos suponen la ventaja de neutralizar un
metabolito cido (el grupo carboxilo de cada unidad de -hidroxibutrico desaparece como tal, al
intervenir en el enlace ster con la siguiente unidad). En las especies de Bacillus constituye la
fuente de carbono y energa al inicio de la esporulacin. Una funcin semejante parece implicada a
la hora del enquistamiento de Azotobacter.
Una clula puede contener de 8 a 12 de estos grnulos, que miden unos 0.2-0.7 mm de dimetro, y
que van provistos de una envuelta proteica de unos 3-4 nm de grosor. Pueden llegar a representar el
80% en peso de la clula.

Sntesis:
Se produce por una rama lateral de la ruta de sntesis de los cidos grasos, a travs de hidroxibutiril-CoA. En los grnulos, el polmero queda asociado a un sistema complejo que ser
utilizado en la degradacin, pero este sistema habr de activarse antes.

Degradacin:

La degradacin comienza con la actuacin de un enzima proteoltico que desorganiza la


envuelta proteica de los grnulos

Los grnulos as "activados" sufren ahora la accin de una despolimerasa, que va generando
dmeros de hidroxibutrico.

Actuacin de una dimerasa especfica, que genera -hidroxibutrico a partir de los steres
dimricos.

Observacin:
A diferencia de los acmulos de polisacridos, los grnulos de PHB son visibles a microscopio
ptico en fresco, debido a su elevado ndice de refringencia. Se tien bien mediante Negro-Sudn.
Grnulos de poli--hidroxialcanoatos (PHA):
En los ltimos aos est quedando patente que los grnulos descritos de PHB son un ejemplo de
una clase ms amplia de grnulos de poli--hidroxi-alcanoatos.
Por ejemplo: cuando determinadas especies de Pseudomonas crecen en n-octano como fuente de
carbono, se acumula un polmero de steres del cido -hidroxi-octanoico, con una funcin
metablica semejante a la del PHB.
Ciertas cepas de Alcaligenes eutrophus, cuando crecen en glucosa y propinico producen
copolmeros aleatorios de unidades de b-hidroxibutrico y b-hidroxivalrico (=3-hidroxipentanoico).
Existen interesantes perspectivas de aprovechamiento econmico de estos polmeros, ya que los
PHA se comportan como excelentes termoplsticos biodegradables. Por ejemplo, la empresa
britnica ICI tiene patentados procesos industriales para fabricar PHA donde casi el 90% de las
unidades son de hidroxivalrico, que da un polmero flexible comercializado con el nombre de
Biopol . Los polmeros a base de 4- o 5-hidroxibutrico y 3-hidroxibutrico son ms largos, ms
elsticos y ms biodegradables (se han empleado en la fabricacin de envases)

INCLUSIONES DE HIDROCARBUROS
Son acmulos de reserva (con envuelta protenica) de los hidrocarburos que determinadas bacterias
(especialmente Actinomicetos y relacionados) usan como fuente de C.

GRNULOS DE CIANOFICINA
Muchas cianobacterias (Oxifotobacterias) acumulan grandes grnulos refringentes de reservas
nitrogenadas cuando se acercan a la fase estacionaria de crecimiento. Estos grnulos de cianoficina
son acmulos de un copolmero de arginina y asprtico: consta de un ncleo de poliasprtico, en el
que todos los carboxilos de las cadenas laterales estn unidos con L-arginina. Su sntesis no est
basada en el mecanismo habitual en ribosomas, ya que no se ve inhibida por el cloramfenicol.

INCLUSIONES INORGNICAS
GRNULOS DE POLIFOSFATOS (GRNULOS DE VOLUTINA, O GRNULOS
METACROMTICOS)
El nombre de "metacromticos" alude al efecto metacromtico (cambio de color): cuando se tien
con los colorantes bsicos azul de toluidina o azul de metileno envejecido, se colorean de rojo. A
microscopio electrnico aparecen muy densos a los electrones.
Son acmulos de polifosfato, polmeros lineales del ortofosfato, de longitud variable (por trmino
medio, unas 500 unidades), que representan un modo osmticamente inerte de almacenar fosfato.
Parece ser que la parte central de estos grnulos constituye un ncleo formado por lpidos y
protenas. En algunos casos pueden constituir una fuente de energa, en sustitucin del ATP (se
trata en este caso de una especie de "fsil bioqumico?")
Se acumulan cuando algn otro nutriente distinto del fosfato se hace escaso (sobre todo cuando va
desapareciendo el sulfato). En estas condiciones se detiene la sntesis de los cidos nucleicos, y la
volutina se acumula a la espera de su utilizacin para esta sntesis de nucleicos, cuando aparezca el
nutriente originalmente limitante.
Su sntesis se produce por adicin secuencial de restos de P a PP, actuando el ATP como donador:
P-P + ATP ------> P-P-P + ADP;
(-P-)n + ATP -----> (-P-)n+1 + ADP.
Los grnulos de polifosfatos tienen un interesante aspecto aplicado, en la eliminacin de fosfatos en
las aguas residuales. En los lodos activados de las plantas de procesamiento de aguas y residuos es
muy abundante la bacteria Acinetobacter, que puede llegar a acumular el 24% de su biomasa bajo la

forma de polifosfatos. Durante los periodos de aerobiosis, esta bacteria se asegura la energa a partir
de sustratros extracelulares, y mientras tanto acumula grnulos de polifosfatos; en anaerobiosis, los
niveles de ATP los mantienen a expensas de usar esos grnulos de polifosfato, por lo que el lodo
libera fosfatos. Esto se aprovecha para eliminar concentraciones problemticas de fosfatos en aguas
residuales, derivadas del uso de fertilizantes y detergentes (proceso "Renpho").

GLBULOS DE AZUFRE
Las inclusiones de S aparecen en dos grupos de bacterias que usan sulfuro de hidrgeno (SH2):

las bacterias purpreas del azufre (que usan el SH2 como donador de electrones para la
fotosntesis)

bacterias filamentosas no fotosintticas como Beggiatoa o Thiothrix, que lo usan como


donador de electrones para sus oxidaciones.

En ambos casos, el sulfuro de hidrgeno es oxidado a azufre elemental (S0), que en el citoplasma se
acumula como glbulos muy refringentes y rodeados de envuelta protenica. Estos glbulos son
transitorios, ya que el S0 se reutiliza por oxidacin hasta sulfato, cuando en el medio se agota el
sulfuro.

OTRAS INCLUSIONES
INCLUSIONES DE SALES MINERALES
Acmulos grandes, densos y refringentes de sales insolubles de calcio (sobre todo carbonatos) que
aparecen en algunas bacterias (como Achromatium), cuyo papel parece consistir en mantenerlas en
el fondo de los lagos y ros.
FICOBILISOMAS
Son estructuras supramacromoleculares, en forma de cilindros o bastones, adosadas a la superficie
de la membrana tilacoidal de las Oxifotobacterias, confiriendo a sta un tpico aspecto "granuloso"
en las micrografas electrnicas.
Como se puede ver en el esquema, estn constituidas por pilas de discos a partir de
ficobiliprotenas, cromoprotenas que sirven como "antenas" para la captacin de luz en la
fotosntesis de estos procariotas. Los grupos cromforos son: ficocianinas, aloficocianinas y
ficoeritrina. Como veremos oportunamente, la disposicin ordenada de los distintos pigmentos tiene
un papel central en la "canalizacin" de la energa de la luz hacia los centros de reaccin (ubicados
ya en plena membrana tilacoidal) donde se localizan los complejos fotosintticos protenasclorofilas.