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Laboratorio Clnico

UNIDAD DIDCTICA

FTAM

Puri del Diego

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MICOLOGA

I.- GUIN DE CONTENIDOS


I.

II.

III.

IV.

Introduccin
a. Patgenos oportunistas
b. Dermatofitos
c. Mecanismos de patogenicidad
d. Clasificacin de las micosis segn su localizacin
Morfologa y estructura de los hongos
a. Estructura vegetativa
b. Crecimiento
Levaduras
Hongos filamentosos
Hongos dimrficos
Clasificacin de los hongos
a. Reproduccin asexual
Esporangiosporas
Artrosporas
Blastosporas
Clamidosporas
b. Reproduccin sexual
Zigosporas
Ascosporas
Basidiosporas
c. Clasificacin//Reproduccin asexual//Morfologa microscpica
Zigomicetos
Ascomicetos
Basidiomicetos
Deuteromicetos
Hongos oportunistas causantes de micosis profundas
a. Candida
Morfologa e identificacin
Patologa
Epidemiologa y control
b. Cryptococcus
Morfologa e identificacin
Patologa
Epidemiologa y control
c. Otras levaduras
d. Aspergillus
Morfologa e identificacin
Patologa
Epidemiologa y control
e. Zigomicetos
Morfologa e identificacin

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V.

VI.

VII.

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Patologa
f. Otros hongos filamentosos oportunistas
Hongos productores de micosis cutneas y superficiales
a. Dermatofitos
Morfologa e identificacin
Patologa
Gneros
Microsporum
Trichophyton
Epidermophyton
Epidemiologa y control
b. Trichosporon, Malasezzia, Exophiala y Piedraia
Procesamiento de las muestras para el diagnstico de las principales
micosis
a. Toma de muestras
b. Exmen microscpico
c. Cultivo
d. Identificacin de levaduras
Pruebas morfolgicas
Pruebas fisiolgicas
Auxograma
Zimograma
Aspecto macroscpico de las colonias
Morfologa microscpica de los cultivos
e. Identificacin de dermatofitos
Aspecto macroscpico de las colonias
Morfologa microscpica de los cultivos
Microcultivos o cultivos en portaobjetos
f. Identificacin de Aspergillus
Aspecto macroscpico de las colonias
Morfologa microscpica de los cultivos
Tratamiento de las micosis

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I.- INTRODUCCIN
La micologa es el estudio de los hongos. Existen muchas especies de
hongos y la mayor parte son benficos para la humanidad. Se encuentran
en la naturaleza y son imprescindibles para descomponer y reciclar la
materia orgnica. Algunos aumentan nuestra calidad de vida pues
contribuyen a la produccin de alimentos y bebidas, otros han servido como
medicamentos. Ejercen su mayor impacto econmico como fitopatgenos
(enfermedades causadas por hongos en las plantas). Solo unas pocas
especies participan en enfermedades humanas y originan las llamadas
micosis.
Los hongos causantes de procesos patolgicos se pueden dividir en tres
grupos:
Levaduras,
aspergillus
(patgenos
oportunistas)
y
dermatofitos.
La mayora de los hongos de inters clnico se comportan como patgenos
oportunistas y la infeccin se origina por una alteracin del equilibrio normal
entre su presencia y el husped. Los mecanismos de patogenicidad por
parte del hongo son reducidos: variaciones fenotpicas, produccin de
enzimas proteolticas, produccin de toxinas y poder de adherencia; por
parte de husped, los factores que favorecen la adquisicin de micosis son
diversos: nutricin inapropiada, falta de higiene, enfermedades graves,
contacto con animales y personas enfermas, etc.
Durante la infeccin, la mayor parte de los pacientes desarrollan una
respuesta inmunitaria significativa a los antgenos del hongo.
Hasta hace pocos aos las micosis constituan una parte de la patologa
infecciosa a la que se daba poca importancia, pero en el ltimo decenio se
ha incrementado la incidencia de infecciones micticas y han aparecido
nuevos procesos que han impulsado a un estudio ms profundo. La mayor
parte de las micosis son difciles de tratar.

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Las micosis se clasifican segn su localizacin en:


Tipo de
micosis
Superficiales

Cutneas

Subcutneas

Enfermedad

Microorganismo causal

Pitiriasis versicolor
Piedra

Malasezia furfur
Trichosporum beigeii (blanca)
Piedraia hortai (negra)
Tia
del
cuero Dermatofitos
(Microsporum,
cabelludo, piel sin vello Trichophyton, Epidermophyton).
y uas.
Candidiasis de la piel, Candida albicans y especies relacionadas
membranas, mucosa y (levaduras).
uas.
Cromoblastomicosis.
Phialophora
verrucosa,
Fonsecea
pedrosoi y otros.
Micetoma.
Pseudalleschia
boydii,
Madurella
mycetomatis y otros.
Rinosporidiosis.
Rhinosporidium seeberi.
Esporotricosis.
Sporothrix schenckii.
Infecciones por hongos
patgenos:

Histoplasmosis.
Blastomicosis.
Paracoccidiodomicosis.
Coccidiodomicosis.
Sistmicas

Histoplasma capsulatum.
Blastomyces dermatitidis.
Paracoccidiodes brasiliensis.
Coccidiodes immitis.

Infecciones por hongos


oportunistas:

Criptococosis.
Aspergilosis.
Mucormicosis.
Candidiasis sistmica.

Cryptococcus neoformans.
Aspergillus fumigatus.
Mucor y otros zigomicetos.
Candida albicans.

Estas categoras reflejan el sitio inicial de afeccin, sin embargo, a veces,


las micosis sistmicas pueden mostrar manifestaciones subcutneas, y
viceversa.

II.- MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA DE LOS HONGOS.


Los hongos son microorganismos eucariotas, uni o pluricelulares. Cada
clula fngica se asemeja estructuralmente a las clulas animales y
vegetales: pared constituida por celulosa o quitina, distinta de la pared de
las bacterias, membrana citoplasmtica conteniendo esteroles, citoplasma
granuloso y vacuolar con inclusiones de almidn y ncleo con membrana, a
veces centrado o marginal, nico o mltiple, segn las especies.
La estructura vegetativa de un hongo se llama generalmente talo (del
griego "thallos": vstago) y suele estar formado por filamentos, casi

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siempre ramificados. Cada filamento individual se llama hifa, y el conjunto


de hifas se denomina micelio. El micelio se origina durante el crecimiento,
bien por ramificacin o bien por fusin de las hifas.
Los hongos pueden crecer como clulas aisladas (levaduras) o como
filamentos multinucleares (hongos filamentosos). Algunos hongos
patgenos para el hombre son dimrficos, es decir, pueden crecer como
levaduras y como hongos filamentosos. Se desarrollan como levaduras
cuando crecen a 37C y como hongos filamentosos cuando crecen a 25C.
Las levaduras son hongos unicelulares (talo unicelular) que, salvo raras
excepciones, se reproducen por gemacin o fisin. Muchas levaduras, en
determinadas circunstancias y dependiendo de la especie, pueden producir
seudohifas. Estas disposiciones recuerdan a las de los hongos filamentosos,
pero se diferencian en que no estn tabicadas, son simples
estrechamientos. Presentan morfologa esfrica o elptica. Las colonias
generalmente son blandas, opacas, cremosas o pastosas. Las especies de
levaduras se identifican mediante pruebas fisiolgicas y unas pocas
diferencias morfolgicas claves.
Los hongos filamentosos producen colonias velludas, algodonosas o
pulverulentas. Son hongos de talo pluricelular. Las hifas pueden presentar
paredes transversales llamados septos. En el micelio se distinguen dos
partes: una que penetra en el medio de cultivo y se extiende por su
superficie siendo responsable de la nutricin, micelio vegetativo, y otra
que se proyecta en superficie y contiene las esporas, micelio areo o
reproductor (reproduccin por esporas). Las esporas pueden dispersarse
con facilidad, son ms resistentes a las condiciones adversas y germinan
cuando las condiciones de crecimiento son favorables. La forma en que se
producen las esporas, su estructura, tamao y forma, as como la de las
hifas y de los rganos productores de esporas, son las caractersticas
bsicas que se utilizan para la identificacin de estos hongos.

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III.- CLASIFICACIN DE LOS HONGOS.


Los hongos pueden reproducirse de forma asexual (por diferenciacin del
micelio) o de forma sexual (por fusin de dos ncleos y formacin de un
zigoto sexual).
La reproduccin asexual se caracteriza por la formacin de
esporangiosporas y conidias. Las esporangiosporas se producen en el
interior de una estructura denominada esporangio, al llegar a la madurez
este se rompe y libera las esporas. Las conidias pueden nacer directamente
de una hifa vegetativa o de estructuras diferenciadas llamadas conidiforos;
si se forman por fragmentacin de la hifa en clulas individuales se habla de
artroconidias o artrosporas, si se produce una protuberancia a partir de
una clula madre, que posteriormente se separa, como ocurre con las
levaduras, se habla de blastoconidias o blastosporas, y si se forman por
condensacin del citoplasma y espesamiento de la pared reciben el nombre
de clamidoconidias o clamidosporas.
Habitualmente, la identificacin de los hongos filamentosos se realiza
basndose en el estudio del estado asexual ya que el sexual suele ser difcil
de observar, por ello a los hongos perfectos se les asigna con dos nombres,
uno para el estado sexual y otro para el asexual.

La forma de reproduccin sexual mediante zigosporas, ascosporas y


basidiosporas es la base de la clasificacin de los hongos perfectos en:
zigomicetos, ascomicetos y basidiomicetos. Dentro de los deuteromicetos se
incluyen todos los hongos en los que se desconoce la reproduccin sexual.

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Los hongos que poseen reproduccin sexual (estado teleomorfo) se


denominan hongos perfectos. Los hongos imperfectos son los que no
poseen reproduccin sexual o bien se desconoce (estado anamorfo).

Clasificacin de los hongos


Ejemplo

Reproduccin
asexual

Zigomicetos

Zigosporas

Rhizopus

Esporangios
poras dentro
de
esporangios

Ascomicetos

Ascosporas
en el
interior
de ascas

Estado
teleomorfo
de la gran
mayora de
hongos Ej.
Aspergillus

externas o

Basidiosporas en la
extremidad
de basidios

Estado
teleomorfo
de C. neo
formans

Esporas
externas o
conidias

Micelio con
tabiques
o
son
levaduras

Hongos
imperfectos
verdaderos
y estado
anamorfo de
todos los
hongos

Esporas
externas o
conidias

Micelio con
tabiques o
son
levaduras

Clase

Basidiomicetos

Deuteromicetos

Reproduccin
sexual

Desconocida

Esporas
conidias

Morfologa
microscpica

Micelio sin
tabiques
o septos

Micelio con
tabiques o
son
levaduras

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IV.-

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HONGOS OPORTUNISTAS CAUSANTES DE MICOSIS

PROFUNDAS.
Son el grupo de hongos ms importante en la actualidad tanto por la
gravedad como por la frecuencia de las infecciones que producen.

CANDIDA.
Las especies del gnero Candida son miembros de la flora normal de
la piel, las mucosas y del aparato gastrointestinal, colonizan las
superficies mucosas durante o poco despus del nacimiento, el riesgo
de infeccin endgena siempre est presente.
La especie ms virulenta y de mayor inters en patologa humana es
Candida albicans, pero tambin otras especies (C. tropicalis, C.
parapsilosis, C. glabrata, C. krusei) pueden producir infecciones
oportunistas.

Morfologa e Identificacin.
Las especies de Candida crecen como levaduras ovales en gemacin.
Tambin forman seudohifas. La C. albicans es dimrfica.
Sobre medio de agar, en las primeras 24 horas a 37C o temperatura
ambiente, las especies de Candida producen colonias blandas de color
cremoso con olor a levadura.
Dos pruebas morfolgicas diferencian la Candida albicans de otras
Candidas:
o La incubacin en suero durante 90 minutos a 37C forma
verdaderas hifas en la C. albicans (prueba de filamentacin)
o En medios nutricios insuficientes C. albicans produce
clamidosporas grandes y esfricas.
Se emplean las pruebas de fermentacin de carbohidratos para
confirmar la identidad y asignar especie a las Candidas ms comunes.
Las muestras para las pruebas diagnsticas de laboratorio incluyen
frotis y raspado de lesiones superficiales, sangre, lquido
cefalorraqudeo, biopsias de tejidos, orina, exudados y materiales de
catteres.
El examen microscpico se puede realizar mediante frotis teidos con
gram si las muestras son esputos, orinas, exudados, lquido
cefalorraqudeo, etc. La piel o el raspado de uas se examinan en una
gota de hidrxido de potasio al 10%.

Patologa.
La candidiasis superficial se establece a consecuencia de un
incremento en la poblacin local de Candida y del dao a la piel, o al
epitelio, que permite la invasin por la levadura y las seudohifas. La
candidiasis sistmica se presenta cuando la cndida penetra al
torrente sanguneo y las defensas del husped son inadecuadas para
contener su crecimiento y diseminacin. Desde la circulacin puede
infectar los riones, fijarse a las prtesis cardiacas y producir
infeccin candidisica en cualquier parte.

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C. albicans causa infecciones, sobre todo en individuos


inmunocomprometidos: diabticos, neonatos, leucmicos. Es causa
frecuente de vaginitis en las mujeres, produciendo enrojecimiento,
escozor y secrecin vaginal. Son factores predisponentes el
embarazo, la diabetes, el tratamiento con antibiticos de amplio
espectro y el uso de anticonceptivos orales.
En neonatos es frecuente la candidiasis muco cutnea, caracterizada
por placas en la mucosa bucal (muguet). Muchos pacientes de SIDA
desarrollan candidiasis orofarngea y un porcentaje alto esofagitis
candidisica. La erradicacin de la mucosa oral es difcil y las
reinfecciones son frecuentes.
Afecciones oculares, tromboflebitis, osteomielitis e infecciones de piel
y uas son otras infecciones que puede causar esta levadura.
Tradicionalmente las otras especies de Candida se consideraban de
baja patogenicidad pero cada vez es mayor el nmero de casos de
infecciones producidos por las mismas. Candida parapsilosis se ha
asociado a endocarditis, C. glabrata, C. krusei y C. tropicalis a
infecciones urinarias.

Epidemiologa y control.
La medida preventiva ms importante es evitar alteraciones del
balance normal entre la flora microbiana y las defensas intactas del
husped. La candidiasis no es transmisible.

CRYPTOCOCCUS.
El Cryptococcus neoformans es una levadura caracterizada por una
cpsula polisacrida gruesa.
Se encuentra en todo el mundo y es muy abundante en las heces
secas de palomas.
Generalmente se relaciona con inmunodeficiencia, SIDA o un proceso
maligno, pero tambin puede aparecer en huspedes aparentemente
normales.

Morfologa e Identificacin.
En estado teleomorfo C. neoformans pertenece a los basidiomicetes.
Existen varias especies no patgenas de Cryptococcus, el C.
neoformans difiere de estas por su capacidad para crecer a 37C y
por la produccin de fenoloxidasa. En medio de Saboraud, a los 5-7
das las colonias adquieren un tono amarillo marrn, debido a la
produccin de este pigmento.
Es sensible a la actidiona.
Hidroliza la urea, no fermenta azcares, y asimila el inositol, entre
otros carbohidratos.
La cpsula se pone de manifiesto en el examen microscpico en
fresco mezclando una suspensin de clulas con una gota de tinta
china.

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Las muestras para las pruebas diagnsticas de laboratorio incluyen


lquido cefalorraqudeo, tejido, exudados, esputo, sangre, orina y
suero.

Patologa.

La infeccin pulmonar es la forma clnica ms frecuente de


criptococosis, aunque a menudo es asintomtica y pasa clnicamente
desapercibida. Es consecuencia de la inhalacin de las clulas de
levadura que se encuentran secas en la naturaleza, y que con
facilidad forman aerosoles.
Por el contrario, la meningitis y la forma diseminada de la
enfermedad
cursan
con
elevada
mortalidad
y
afectan
preferentemente a pacientes inmunodeprimidos.
Los pacientes sometidos a tratamiento con corticosteroides son muy
susceptibles a la criptococosis.

Epidemiologa y control.
Las excretas de las aves son el reservorio de dicha infeccin.
Adems de los pacientes con SIDA o con enfermedades malignas, los
sometidos a tratamiento con corticosteroides son muy susceptibles a
la criptococosis.

OTRAS LEVADURAS.
Existen otras muchas levaduras consideradas menos virulentas que
tambin pueden causar infeccin diseminada en los enfermos
inmunocomprometidos.
Se aslan con menos frecuencia de las muestras clnicas y pertenecen
a los gneros Rhodotorula, Saccharomyces, Hansenula, etc.

ASPERGILLUS.
Estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y se diseminan por
va area. El aire contiene esporas en casi todo el mundo, aunque
existen diferencias cuantitativas y cualitativas segn el clima, la
regin y la poca del ao.
Se distinguen cuatro especies patgenas: A. niger, A. flavus, A.
fumigatus y A. nidulans. El A. fumigatus es el patgeno humano ms
comn.
Los procesos infecciosos que originan son raramente contagiosos
debido sobre todo a la estimulacin antignica. Afectan a individuos
inicialmente sanos o a inmunodeprimidos. El desarrollo de la infeccin
est condicionado por diversos factores: ingestin de alimentos
contaminados con micotoxinas, contacto frecuente y abundante con
esporas (campesinos, cosechadores, etc.), colonizacin de cavidades,
invasin de tejidos e inoculacin traumtica de esporas. La va
respiratoria constituye la principal va de penetracin.

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Morfologa e Identificacin.
Los Aspergillus son hongos filamentosos, crecen con rapidez,
producen hifas areas que poseen estructuras conidiales
caractersticas: conidiforos alargados con vesculas terminales. Las
conidias varan segn la especie, en forma, tamao y color.
Las especies del gnero Aspergillus se identifican por el aspecto
macroscpico de sus colonias y por su morfologa microscpica.
Las muestras para las pruebas diagnsticas de laboratorio son los
esputos, otras muestras del aparato respiratorio o el tejido de biopsia
de pulmn.
En el examen directo de esputo con KOH, o en los cortes histolgicos,
las hifas de las especies de Aspergillus son hialinas, septadas, de
anchura uniforme y con ramificaciones dicotomizadas.

Patologa.
Existen tres tipos de aspergilosis pulmonar:
o Aspergilosis pulmonar alrgica: produce asma, eosinofilia y
elevacin del ttulo de IgE.
o Aspergiloma: el hongo crece en una cavidad preexistente
(cavidad tuberculosa, seno paranasal) formando una bola
fngica. No hay invasin pulmonar.
o Aspergilosis invasiva: el hongo se extiende invadiendo el
pulmn y dando lugar a neumona cicatrizante, hemoptisis y
diseminacin secundaria a otros rganos. Ocurre sobre todo en
individuos inmunocomprometidos.

Epidemiologa y control.
Las personas con riesgo de enfermedad alrgica o de aspergilosis
invasora deben evitar la exposicin a los conidios de Aspergillus.
En la mayor parte de las unidades de trasplante de mdula sea se
emplean sistemas de aire acondicionado filtrado, vigilancia de la
contaminacin atmosfrica en la habitacin de los pacientes,
restriccin de visitas y diferentes medidas para aislar a los pacientes
y reducir el riesgo de exposicin a los Aspergillus y a otros hongos.

ZIGOMICETOS.
Los principales patgenos de este grupo son las especies de los
gneros Rhizopus, Absidia y Mucor, aunque cada vez se describen
con mayor frecuencia infecciones producidas por otros zigomicetos de
los gneros Cunninghamella, etc.
Las micosis causadas por estos hongos se conocen como
mucormicosis.
Son hongos filamentosos saprofitos termotolerantes.

Morfologa e Identificacin.
Poseen grandes hifas, sin tabiques, muy caractersticas; con esporas
asexuadas en el interior de vesculas especiales-esporangios.

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Crecen rpidamente en la mayor parte de los medios de cultivo, son


sensibles a la cicloheximida y producen colonias algodonosas.
La identificacin se basa en las estructuras esporangiales.
Las muestras para las pruebas diagnsticas son las secreciones
nasales, tejidos o esputos.

Patologa.

Las mucormicosis hasta hace poco se consideraban infecciones raras


que se asociaban a diabetes mellitus descompensada. Actualmente,
adems de haber aumentado su frecuencia, se asocian tambin con
transplantes,
linfomas
tratados
con
inmunodepresores
y
drogadiccin. Son de evolucin rpida y de mal pronstico.
Los zigomicetos tienen tendencia a invadir las paredes arteriales
produciendo mbolos y necrosis en los tejidos adyacentes
presentando
afecciones
rinocerebrales,
pulmonares,
gastrointestinales y cutneas.

OTROS HONGOS FILAMENTOSOS OPORTUNISTAS.


Existe un gran nmero de hongos filamentosos que en determinadas
condiciones (rotura de las barreras cutneo mucosas, ciruga, uso de
catteres intravenosos, inmunodepresin, etc.) pueden ocasionar
infecciones sistmicas.
Los
que
poseen micelio
hialino
pigmentado
causan
las
faeohifomicosis, mientras que los de micelio hialino no pigmentado
causan las llamadas hialohifomicosis.

V.-

HONGOS PRODUCTORES DE MICOSIS CUTANEAS Y

SUPERFICIALES.
DERMATOFITOS.
Son hongos filamentosos que slo infectan las porciones
queratinizadas de la piel (estrato crneo, uas y pelo) y que
pertenecen a los gneros Trichophyton (cualquier localizacin),
Microsporum (rara vez en pliegues y uas) y Epidermophyton (pies,
ingles y axilas).
Las dermatofitosis son las micosis ms frecuentes en el mundo,
pueden ser persistentes y problemticas pero no son debilitantes ni
ponen en riesgo la vida.

Morfologa e Identificacin.
Todos los dermatofitos poseen una morfologa similar en su estado
parasitario. Cuando se observan con KOH los pelos, uas o escamas
de la piel infectada, aparecen como filamentos ramificados y

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tabicados; cuando las hifas van envejeciendo, el nmero de tabiques


se multiplica y se ven largas cadenas de artroconidias que se
desprenden.
Para identificar las especies se requiere cultivo. Las muestras se
inoculan sobre agar de Saboraud con cicloheximida y cloranfenicol
para suprimir el crecimiento de otros hongos y bacterias, y adems,
el medio contiene un indicador de pH (rojo fenol) que hace posible el
viraje del color amarillo al rojo cuando crecen los dermatofitos. Se
incuban de 1 a 3 semanas a temperatura ambiente. Si es necesario
se realizarn adems cultivos en portaobjetos para favorecer la
esporulacin. Algunas especies tienen requerimientos especiales, bien
trmicos (37C) o nutritivos (vitaminas).
La diferenciacin primaria entre los tres gneros y sus especies es
esencialmente morfolgica:
o Microsporum posee macroconidias de paredes gruesas y
rugosas, fusiformes y de tamao variable segn la especie,
pero en general grandes. Presenta de 4 a 15 septos
transversales. M. canis forma una colonia con una superficie
blanca algodonosa y un color amarillo intenso por el reverso.
o Trichophyton se caracteriza por sus macroconidias claviformes,
paredes finas y extremidades cilndricas. El nmero de septos,
generalmente, es inferior a 5. En la mayor parte de las cepas
las macroconidias son escasas o estn ausentes; por el
contrario, las microconidias son muy abundantes, presentando
forma esfrica, piriforme o en espiral. Segn la variedad las
colonias pueden ser algodonosas o granulares.
o Epidermophyton presenta exclusivamente macroconidias, de
menor tamao que las de los otros dos gneros. Generalmente
no presenta ms de 4 septos y suelen estar agrupados en
racimos. E. floccosum, el nico patgeno del gnero, crece
lentamente, sus colonias tienen aspecto aterciopelado, con el
tiempo aparecen pliegues radiados a partir de un centro ms
elevado; su color es amarillento verdoso o de color marrn, el
reverso tambin es amarillento o cobrizo, puede terminar con
aspecto blanco o indiferenciado.

Patologa.

Las infecciones por dermatofitos se denominan errneamente tia o


Tinea debido a las lesiones circulares prominentes.
Debido a que hay especies diferentes que pueden invadir las mismas
estructuras cutneas, dando lugar a cuadros clnicos similares, las
dermatofitosis o tias se describen por la regin anatmica en donde
se localizan ms que por el agente causal.

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Caractersticas clnicas de la infeccin por dermatofitos.


Enfermedad
de la piel

Localizacin
de las
lesiones

Placas circulares con


bordes vesiculados
crecientes y
descamacin central.
Pruriginosa
Aguda:
prurito
y
vesculas.
Crnica:
prurito
descamacin y fisuras.
Lesion
descamativa,
ezcematosa,pruriginosa

Tinea corporis
(circinada)

Piel lisa
lampia

Tinea pedis
(pie de atleta)

Espacios
interdigitales
de los pies

Tinea cruris

Ingle

Tinea capitis

Cuero
cabelludo,cejas
y pestaas.

Tinea barbae

Vello
de
barba.

Tinea
unguium.
(onicomicosis)

Ua

Aspecto clnico

la

Hongos causantes ms
frecuentes
Trichophyton rubrum,
Epidermophyton floccosum.
Trichophyton
rubrum,
T.mentagrophytes,
Epidermophyton floccosum.
T.rubrum,T.mentagrophytes,
E. floccosum.

Placas de alopecia con


cabellos de tallos cortos
o rotos en los folculos
pilosos.
Lesin edematosa.

T.mentagrophytes,
M.canis.

Uas
distalmente
engrosadas
o
quebradizas;alteraciones
del color.Habitualmente
acompaada de tinea
pedis.

T.rubrom,T.mentagrophytes
E.floccosum.

T. mentagrophytes.

Epidemiologa y control.
La prevalencia de las dermatofitosis en los distintos pases varia, no
slo con la distribucin geogrfica y ecolgica de las especies, sino
tambin con el clima y con el estado inmunolgico, nutricin y
condiciones higinicas de la poblacin.
Las infecciones se inician en la piel despus de un traumatismo y por
contacto.
La susceptibilidad del husped puede ser incrementada por la
humedad, el calor, la composicin de la grasa y de la piel, la edad, la
exposicin intensa y la predisposicin gentica.
La fuente de infeccin es el suelo o un animal infectado en el caso de
los dermatofitos gefilos y zofilos. Las especies antropfilas se
pueden transmitir por contacto directo o a travs de fmites como
toallas o ropa contaminada, compartir duchas, piscinas, etc.

TRICHOSPORON, MALASEZZIA, EXOPHIALA Y PIEDRAIA.


Trichosporon beigelii es una levadura responsable de una infeccin
superficial y asintomtica denominada piedra blanca, caracterizada
por ndulos blandos, de color amarillento adheridos al tallo del pelo
de la barba, pestaas y pubis. En individuos inmunocomprometidos
causa infeccin diseminada.

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Crece rpidamente en medio Saboraud a temperatura


ambiente. Las colonias, al envejecer, forman surcos radiales,
elevndose en el centro. Contienen hifas que se fragmentan en
artrosporas rectangulares.
Malasezzia furfur es una levadura lipoflica que precisa para su
desarrollo una fuente de lpidos. Es dimrfico; la fase levaduriforme
se considera como residente normal de la piel, y la fase filamentosa
como causante de la pitiriasis versicolor, infeccin crnica
caracterizada por mculas hipo/hiperpigmentadas, redondas y
localizadas en el tronco. Puede causar infeccin diseminada por
contaminacin a travs de la piel en la alimentacin parenteral.
En medios suplementados con aceite de oliva estril produce
en 3-5 das pequeas colonias a modo de burbujas que
contienen clulas hialinas, globosas y de paredes gruesas. En
el examen directo de las lesiones se observan, adems, hifas
cortas rara vez ramificadas.
Exophiala werneckii causa la tia negra, caracterizada por la
aparicin de lesiones blandas de color marrn localizadas en las
palmas de las manos y en ocasiones en los pies. Es frecuente en
Amrica latina y en el Caribe.
Piedraia hortae causa la piedra negra, infeccin frecuente en zonas
hmedas y tropicales, caracterizada por la aparicin de ndulos en
los tallos de los pelos.

VI.-

PROCESAMIENTO

DE

LAS

MUESTRAS

PARA

EL

DIAGNSTICO DE LAS PRINCIPALES MICOSIS.


Adems del aspecto ms o menos caracterstico de las lesiones micticas,
para establecer la etiologa de un proceso es necesario aislar e identificar el
hongo causal.

TOMA DE MUESTRAS.
La metodologa para la toma de muestras es diferente segn la localizacin
de la lesin:
Las escamas se recogen despus de pasar un algodn empapado en
alcohol al 70% sobre el rea de la lesin, para eliminar detritus y
bacterias contaminantes.
o Si la lesin es seca se recogen sobre una placa de Petri o un
frasco de boca ancha, mediante raspado suave con un
portaobjetos, bistur o esptula, procurando desprender las del
borde de la lesin. Tambin se puede efectuar la toma
mediante almohadillas de lana, terciopelo o cinta adhesiva
transparente.
o Si la lesin es hmeda se suele utilizar un escobilln para la
recogida.
Los pelos se arrancan con pinzas o se cortan con tijeras, eligiendo los
ms cortos, ms frgiles o los deteriorados.

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Las uas se raspan en el borde y zona interna, con ayuda de un


bistur, procurando que se alcance el tejido invadido, o bien se cortan
con tijeras. Si la lesin produce un surco periungueal se toma la
muestra de esta zona.
Los exudados, esputos, sangre, lquidos de drenaje y otras muestras
se recogen siguiendo la metodologa habitual en las infecciones
bacterianas.

EXAMEN MICROSCPICO.
La identificacin en una muestra clnica comienza por el examen
microscpico directo. Este permite poner en evidencia las estructuras
fngicas: clulas levaduriformes, elementos del micelio y esporas. Un
estudio ms detallado, a partir del cultivo, establecer la especie; por lo
tanto la morfologa microscpica ser la primera observacin a tener en
cuenta para la diferenciacin de los hongos levaduriformes y filamentosos.
En los pelos se diferencia la infeccin por esporas ectotrix, que
forman una vaina alrededor del pelo o masas irregulares sobre su
superficie, y la infeccin endotrix, en la que aparece el pelo
engrosado y lleno de esporas.
La observacin en fresco de pelos, escamas y uas se facilita
aadiendo aclarantes: hidrxido potsico glicerinado al 20%, azul de
lactofenol y otros.
La adicin de tinta china o nigrosina posibilita la observacin de la
cpsula de Cryptococcus en muestras como el lquido cefalorraqudeo.
La tincin de gram es til para la identificacin de levaduras gram
positivas. Otras tinciones como la de hematoxilina-eosina, Giemsa,
azul de metileno, metanamina de plata o la de PAS (perydico
Schiff), son tambin apropiadas para confirmar la morfologa
levaduriforme en biopsias tisulares. Si se usa la tincin de blanco de
calcoflor, los hongos se observarn de color verde fluorescente en el
microscopio de fluorescencia.

CULTIVO.
La mayora de los hongos, a excepcin de Malasezia furfur (se cultiva en
agar glucosa peptona con lanolina o cido oleico), se desarrollan bien en los
medios comunes, a temperaturas de 25-35C, y algunos productores de
micosis profundas se desarrollan tambin a 35-37C. Los medios deben de
contener los suficientes nutrientes para asegurar su desarrollo: fuentes de
carbono, nitrgeno, vitaminas y oligoelementos. El pH debe ser ligeramente
cido para inhibir el crecimiento de otros microorganismos. El medio ms
utilizado en microbiologa es el Saboraud a pH 5,6.
Es aconsejable la adicin a los medios de antibiticos, tales como el
cloranfenicol y la gentamicina, para evitar la proliferacin de
bacterias; y actidiona para impedir la contaminacin por hongos
ambientales.
La inoculacin se realiza raspando las escamas y uas directamente
sobre el medio de cultivo, o bien depositando la muestra sobre la
superficie del medio e introduciendo los fragmentos con la ayuda de

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una esptula micolgica. Si las uas son grandes se trituraran


previamente.
El crecimiento de levaduras se detecta normalmente a las 48-72
horas; los mohos tardan unos das ms en desarrollar el micelio
areo; los dermatofitos pueden crecer a partir de las 72 horas de
incubacin, pero hasta los 6-15 das no forman una colonia con
caractersticas apreciables.

IDENTIFICACIN DE LEVADURAS.
Existen numerosas pruebas para la identificacin de levaduras, la eleccin
de la combinacin adecuada depende de las caractersticas de cada
laboratorio, bastara con realizar unas 15-20 pruebas para llegar a una
buena identificacin.
Las pruebas de identificacin pueden agruparse en dos categoras:
1. Pruebas morfolgicas:
a. Aspecto de las colonias.
b. Observacin microscpica de los cultivos.
c. Presencia de blastosporas.
2. Pruebas fisiolgicas:
a. Temperatura mxima de crecimiento.
b. Crecimiento en presencia de actidiona.
c. Capacidad de utilizacin de diversos hidratos de carbono como
fuente nica de carbono en condiciones de aerobiosis
(auxograma).
d. Capacidad
de
fermentacin
de
diferentes
azcares
(zimograma)
e. Actividad ureasa
f. Capacidad de crecimiento con altas concentraciones de
glucosa.

Aspecto macroscpico de las colonias.


El aspecto morfolgico de la colonia no representa habitualmente un
carcter distintivo importante entre las diferentes especies, aunque en
algunos casos permiten orientar el diagnstico de gnero.
La inoculacin se lleva a cabo sobre una placa de agar Saboraud a
partir de un cultivo fresco de levaduras (24-48 horas).
Se incuba en estufa entre 28-30C; si fuera necesario se reincuba
otras 24 horas.
Ver el aspecto de las colonias y comparar con la siguiente tabla:

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Especie
Candida albicans
Candida krusei
Candida parapsilosis
Candida pseudotropicalis
Candida tropicalis
Torulopsis glabrata
Cryptococcus spp
Rhodotorula spp
Trichosporon spp

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Caractersticas morfolgicas
Colonias blancas ,lisas y brillantes, con
variantes secas,y de aspecto ms o menos
creo.
Colonias secas,planas y muy extendidas
sobre la superficie.
Colonias brillantes,de cremosas a
amarillentas,de aspecto hmedo y liso,o
plegadas.
Colonias blancas y brillantes o bien de
aspecto mate y con pliegues.
Colonias
mates,secas,blancas,cremosas,lisas o
plegadas.
Tamao variable,pequeas o grandes y
aplanadas,cremosas,lisas y brillantes.
Colonias ms o menos mucoides,secas y
lisas brillantes,mates con el pase del
tiempo.
Colonias rosas,anaranjadas o
asalmonadas,mucoides y lisas,o secas y
plegadas.
Colonias de blanco a cremoso,lisas y
mucosas,o bien de aspecto seco muy
plegadas.

Morfologa microscpica de los cultivos.

Consiste en preparar un cultivo de levaduras sobre medios adecuados para


la esporulacin, filamentacin y germinacin de estos hongos.
Los medios ms adecuados son medios a base de cereales, sin aporte
extra de glucosa ni otras sustancias nutritivas, como el medio agar
cornmeal (CMA) y el agar rice-cream (RC).
Los cultivos van cubiertos con un cubreobjetos para facilitar la
observacin posterior al microscopio.
La inoculacin se hace a partir de un cultivo reciente (24-48 horas),
realizando estras en tres zonas de la placa, sin retomar nuevo
inculo entre una y otra.
Las placas se incuban a 28-30C, o a temperatura ambiente en la
oscuridad, durante 48 horas. (No incubar a 37C porque se inhibe la
formacin de clamidosporas).

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IDENTIFICACIN DE DERMATOFITOS.
Todos los dermatofitos son resistentes a la actidiona y se desarrollan bien a
25-30C. La diferencia primaria entre las especies es esencialmente
morfolgica, por el tipo de colonia, la velocidad de crecimiento y las
caractersticas microscpicas de las macroconidias.

Aspecto macroscpico de las colonias.


Las colonias de los hongos dermatofitos son grandes, vistosas, de aspecto
muy variado y, a veces, de diferentes colores, lo que permite identificar
cada especie con facilidad:
Especie
Trichophyton mentagrophytes

Trichophyton rubrum
Trichophyton tonsurans
Trichophyton verrucosum

Trichophyton violaceum
Microsporum audouinii
Microsporum canis

Microsporum gypseum

Epidermophyton floccosum

Caractersticas morfolgicas
Crecimiento rpido.Colonia blanca
algodonosa,pulverulenta al envejecer,a
veces con botn central y estras
radiadas.envs amarillo.
Crecimiento lento.Colonia plana o
elevada,superficie blanca que pasa a crema
o rosada,vellosay a veces
pulverulenta.Envs de rojo a prpura.
Desarrollo lento.Colonia crema o
canela.Envs amarillento o rojizo.
Crecimiento muy lento.Colonia pequea al
principio,lisa y de consistencia dura,color
blanco grisceo o amarillo tostado, y de
vieja pulverulenta y blanquecina.
Crecimiento muy lento.Colonia de superficie
lisa,elevada y verrucosa,al principio crema y
ms tarde prpura intenso.
Crecimiento lento.Colonia plana con hifas
areas cortas,superficie gris, crema o
tostada.Envs rosa salmn o marrn rojizo.
Crecimiento rpido.Colonia blanca
pulverulenta o algodonosa,con un botn
central y anillos concntricos,micelio
areo.Envs amarillo claro.
Crecimiento rpido.Colonia plana con borde
dentado y superficie pulverulenta.Envs
amarillo.
Crecimiento lento.Colonia de superficie
algodonosa,color tostado que se vuelve
pulverulenta.Envs amarillo

Morfologa microscpica de los cultivos.

Los principales mtodos para la observacin microscpica son:


observacin en fresco, con una solucin adecuada, y las preparaciones
cinta adhesiva; pero en ocasiones estos mtodos no permiten revelar
principales caractersticas morfolgicas de una especie determinada.

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la
en
las
En

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estos casos se recurre a un tipo de preparacin ms compleja, como es la


realizacin de micro cultivos o cultivos en portaobjetos:
Se coloca sobre un portaobjetos una pequea porcin de agar de
Saboraud tomado de una placa (1cm aproximadamente).
Se siembra el hongo en los laterales de esta porcin y se coloca un
cubreobjetos.
El conjunto se dispone en una placa de Petri, en la que se ha
depositado un papel de filtro humedecido y unos capilares que
separen el portaobjetos de la base de la placa (cmara hmeda).
La placa precintada se incuba a temperatura ambiente (25-27C)
durante el tiempo adecuado (24-48 horas).
La observacin microscpica se puede efectuar directamente a travs
del cubreobjetos, o bien se desprende el cubre con las estructuras
adheridas y se coloca sobre otro portaobjetos que contiene azul de
lacto fenol.
Al microscopio se observan los filamentos del micelio con los septos,
las macro o microconidias, las artrosporas y las formaciones
ornamentales como zarcillos, ndulos, etc.

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IDENTIFICACIN DE ASPERGILLUS.
Debido a que los aspergillus son contaminantes frecuentes de los cultivos
en el laboratorio y a que sus esporas pueden colonizar las vas respiratorias
altas en condiciones normales, los cultivos slo tienen valor si son
reiteradamente positivos.
Los Aspergillus se inhiben en los medios que contienen actidiona, lo
que los diferencia de los dermatofitos.

Aspecto macroscpico de las colonias.


Las colonias que originan son planas, aterciopeladas, pulverulentas, con
manojos de micelios areos de diferentes colores segn las especies:
Especie
A. niger
A. fumigatus
A. flavus
A. nidulans

Caractersticas morfolgicas
Color marrn oscuro a negro y reverso
incoloro o amarillo plido.
Color verde a azulado o grs,a veces
blanco;reverso de incoloro a amarillo o rojo
oscuro.
Color de amarillento a verde y reverso de
incoloro a amarillo o marrn.
Color de verde a castao rojizo y reverso
rojo oscuro.

Morfologa microscpica de los cultivos.


Al microscopio se observan filamentos septados, sinuosos, separados y
bifurcados, con conidiforos en un extremo. Los conidiforos estn
compuestos por vesculas que dan nacimiento a esporas externas alargadas,
que a su vez dan conidias o esporas.

VII.- TRATAMIENTO DE LAS MICOSIS.


Los antimicrobianos eficaces en las infecciones bacterianas no tienen
ninguna accin frente a los hongos. El tratamiento fngico est limitado por
el hecho de que la clula mictica es eucariota, igual que las del husped, y
contiene quitina en su pared celular; por lo tanto los agentes antifngicos
deben de interferir la proliferacin celular del hongo sin afectar al
metabolismo de las clulas del husped, realizando una actividad intensa
sin elevar su toxicidad.
Las opciones para el tratamiento son, por este motivo, escasas. Se utiliza:
Anfotericina B y 5-fluorocitosina para las micosis profundas.
Imidazoles (ketoconazol, econazol, cotrimazol, miconazol) y
triazoles (fluconazol, itraconazol) para todo tipo de micosis.
Nistatina para piel y mucosas.

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Alcohol yodado al 1% y solucin de tiosulfato sdico al 20% para


el tratamiento de la pitiriasis versicolor.
Solucin de violeta de genciana para el tratamiento del muguet.
El estudio microbiolgico de las infecciones por hongos levaduriformes debe
incluir pruebas de susceptibilidad a antifngicos, a pesar de la escasa
correlacin de los resultados in vitro con los obtenidos in vivo.
Los mtodos utilizados para el estudio de la sensibilidad a antifngicos son
similares a los usados para los antibacterianos pero ms difciles de
estandarizar.

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