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____________________________________________________________________________
Abstrac
Obtaining bioethanol from waste fermentable Mango (Mangifera indica), using Saccharomyces
cerevisiae as a leavening microorganisms, applying for the first phase Completely Randomized
Design (DCA) factorial arrangement 3x2, with the variables to the concentration of yeast (0.1
and 0.2% v / v) ratio of water: Wort (0: 100, 35:65 and 50:50% v / v). Characterization of
fermentable residues are: pH = 4.02 0.2, Brix = 17 1.2; Reducers = 110 2.2gr / L sugars,
titratable acidity = 0.5 0.1% humidity = 79 2.1, 3.5 0.1 ashes =% recovery and pulp =
7.8%, applying the methods of analysis of AOAC. The fermentation of waste (must), was
performed in a bioreactor 2 Lt capacity (working volume 1.5 Lt); T = 27 C and atmospheric
pressure; obtaining optimal parameters: yeast = 0.2% and a water: Mosto (35:65); with an
ethanol concentration (5.25%).
Obtaining Bioethanol is performed by distillation rectified continuous driving as varying the
feed flow (3, 4 and 5 L / h) and reflux ratio (0.2, 0.5 and 0.8), resulting 9 treatments of which is
determined a feed flow of 3 L / h and a distillate reflux 0.8 in a rectification column starting
with 4 Lt. fermented, best distillate is obtained with a volume of 994 625 mL, with an alcohol
concentration of 64.25% ( w / v) and yields 60.85% Ethanol.
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Aurora, E., Barrera, E. Obtencin de bioetanol a partir de los residuos fermentables de mango y determinacin de
parmetros ptimos de destilacin Rev. Ingeniera: Ciencia, Tecnologa e Innovacin VOL 2/N 2, ISSN: 23131926/ Diciembre 2015
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Una de las opciones para producir etanol es por fermentacin a partir de materias primas ricas
en carbohidratos (azcar, almidn, celulosa, etctera). Por tal razn, es comn designar al etanol
obtenido por esta va bioetanol. Entre estas materias primas se encuentran las frutas y
vegetales como la caa de azcar y la remolacha, los cereales (trigo, maz, sorgo), los tubrculos
(papas, yuca) y en general, materias provenientes de ligno-celulosas o de residuos orgnicos.
Por otro lado, una de estas alternativas es la obtencin de etanol, teniendo como materia prima
los residuos de frutas provenientes de procesos agroindustriales, en este caso los residuos del
procesamiento del mango (Mangifera Indica), con lo que buscaremos por una parte aprovechar la
disponibilidad, ya que se constituyen en una alternativa viable, que ampla las posibilidades de
solucin a la contaminacin ambiental, al ser esta una fuente de energa de costo ambiental bajo
y que puede ser utilizada durante un perodo de tiempo ms amplio si se lo compara con los
combustibles fsiles.Es conveniente que los residuos agroindustriales del mango (Mangifera
Indica), sean sometidos a un pre-tratamiento y un proceso de extraccin donde se puedan liberar
los azcares fermentables.
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Se determin la humedad por secado y por diferencia de los pesos de acuerdo al mtodo 934.06
(37.1.10) del A.O.A.C (1996). Las Cenizas por incineracin de la muestra a 650C por 3 horas
segn A.O.A.C (1995) El ndice de Acidez se determin por el Mtodo de Titulacin directa.
As como la acidez total se determin en las muestras utilizando Hidrxido de Sodio al 0.1N,
utilizando como indicador fenoltalena, el contenido de Azucares Reductores, por el mtodo
DNS, a una longitud de onda de 540 nm. Para la determinacin de la densidad se utiliz el
mtodo del picnmetro y los grados brix con un refractmetro ABBE, el pH con un
potencimetro porttil marca Hanna Instruments. Y por ltimo para la determinacin de Grados
Alcohlicos se utiliz un cromatgrafo de gases.
2.2. Descripcin del proceso
Obtencin de Residuos Fermentables de Mango: Los residuos de Mango fueron los generados
en la industria agroexportadora de Mango Congelado IQF variedad Kent, proveniente de la
Empresa Chavin de Huantar S.A, ubicada en la Ciudad de Casma. A continuacin se describen
los pasos hasta la obtencin del Mosto de Mango. Extraccin: se realiz manualmente retirando
de la cascara y pepa con un cuchillo, la cantidad posible de residuos representando el 8% de los
residuos orgnicos totales. Licuado, a fin de homogenizar el tamao de las partculascon la
ayuda de una licuadora. Separacin de la fibra: Separacin de Fibra con la ayuda de un colador,
con la finalidad de eliminar las fibras contenidas y as obtener un mosto homogneo;
Pasteurizado: a una temperatura de 70C por 5 minutos, Enfriamiento: a 30C, de tal modo de
realizar un choque trmico. Al mosto obtenido se realiz los anlisis fisicoqumicos
anteriormente mencionados. Almacenamiento: a T= 5C, a fin de poder utilizar posteriormente
en la Fermentacin.
2.3. Parmetros para la evaluacin de las Condiciones ptimas de Fermentacin
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Tabla 1
Tratamientos para la evaluacin de la fermentacin
Levadura
Relacin Agua :
(gr/L)
Mosto
0:100 (0)
0.1%
35:65 (0.5)
50:50 (1)
0:100 (0)
0.2%
35:65 (0.5)
50:50 (1)
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Posteriormente la mezcla mosto-agua-microorganismo de cada uno de los sistemas fue aireada (la
aireacin se llev a cabo mediante adicin de O2) durante dos horas, esto con la finalidad de
aumentar la concentracin de oxgeno disuelto en el medio, esencial para el desenvolvimiento de
las levaduras. La temperatura se mantuvo en el intervalo de 29 a 31 C, en el caso de la
Saccharomyces cerevisiae se tiene un desarrollo ptimo entre 28 a 35C, recomendable 30 C. A
lo largo de la fermentacin, se tomaron muestras a ciertos intervalos de tiempo, para determinar la
cantidad de azucares reductores totales.
2.4.
Una vez detenida la fermentacin se determin la concentracin final de etanol en cada una de los
tratamientos estudiados, as el rendimiento en azucares reductores, y volumen de fermentado, con
la finalidad de determinar los mejores parmetros de fermentacin Una vez seleccionado el mejor
tratamiento, se llev a cabo la centrifugacin a 4500 rpm por 20 minutos y posteriormente la
destilacin (a condiciones de trabajo antes mencionadas), con la finalidad de determinar los
parmetros ptimos de destilacin rectificada en continuo, en la UDCA/EV; El diseo estadstico
que se va a usar consiste en un diseo completamente al azar con un arreglo factorial de 3x3, es
decir 9 tratamientos con 27 experimentos, cuyos resultados sern evaluados estadsticamente a fin
de determinar las diferencias significativas entre ellos. Teniendo como variables independientes:
flujo de alimentacin (3, 4 y 5 L/h), razn de reflujo (0.2, 0.5 y 0.8); variable dependiente:
concentracin de alcohol del destilado. Las muestras obtenidas de las destilaciones del mosto se
almacenaron en refrigeracin hasta su posterior anlisis por cromatografa de gases.
Se utiliz el programa Statgraphics para optimizacin, el diseo a emplear es superficie de
respuesta con una (1) variable de respuesta y dos (2) factores experimentales; y se empleara el
diseo completamente al azar con arreglo factorial.
Las Condiciones cromatogrficas, temperatura del inyector 200C; temperatura del detector
200C, velocidad de gas de arrastre (He) a 30mL/min; flujo de hidrgeno 40.0mL/min; flujo de
aire 399.8 mL/min; radio de divisin (split) de 300.
3. Resultados
3.1. Caracterstica Fisicoqumica de la Residuos Fermentables de Mango:
Los resultados de los anlisis fisicoqumicos de los residuos fermentables de Mango (pulpa) se
muestran en la Tabla 2.
Tabla 2
Caracterizacin fisicoqumica de la materia prima
Anlisis
Resultados
79 2.1
3.5 0.1
2
0.5 0.2
64.32 1.5
17 1.2
4.02 0.5
1.02 0.2
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Humedad (%)
Cenizas (%)
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4.2
18
4.1
16
14
12
BRIX
pH
3.9
3.8
10
8
3.7
3.6
3.5
3.4
20
40
60
10
20
30
40
50
60
TIEMPO (h)
TIEMPO (h)
C1:R1
C1:R2
C1:R3
C2:R1
C2:R2
C2:R3
C1:R1
C1:R2
C1:R3
C2:R1
C2:R2
C2:R3
Figura 1
Comportamiento del pH y Brix durante el proceso de Fermentacin.
RELACION
AGUA:
MOSTO (%)
CONCENTRACION
DE ETANOL
PRODUCIDO (%)
0.1
3.95
0.1
0.5
4.68
0.1
2.95
0.2
4.25
0.2
0.5
5.25
0.2
3.15
0.1
3.45
0.1
0.5
4.5
0.1
2.85
10
0.2
4.15
11
0.2
0.5
5.35
12
0.2
3.05
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MUESTRA
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Tabla 4
Anlisis de Varianza (ANOVA) para el modelo matemtico que evala la concentracin de
etanol.
Fuente
A:Concentracin de
Levadura
B:Relacin Agua : Mosto
AB
BB
Bloques
Error total
Total (corr.)
Suma de
Cuadrados
Gl
0.6627
1.805
0.045
5.7624
0.0645
0.1831
8.5227
1
1
1
1
1
6
11
Cuadrado
Medio
RaznF
ValorP
0.6627
1.805
0.045
5.7624
0.0645
0.0305
21.72
59.16
1.47
188.86
2.12
0.0035
0.0003
0.2702
0.00001
0.1961
Del anlisis estadstico mostrado en el Tabla 4, se tiene que el valor de F para los factores
Concentracin de Levadura y Relacin Agua: Mosto son altos lo que indica que son
estadsticamente significativos, a un nivel de error del 5%, as mismo los valores de P menores a
0.0500 muestra que los variables A, B y BB son significativos.
As mismo de este anlisis se obtiene que R2 = 97.85, lo cual es aceptable para determinar una
respuesta significativa. De esta manera se ha definido la ecuacin Final del Diseo Estadstico
para la concentracin en alcohol. Siendo:
Concentracin de Etanol = 3.02 + 6.2*Concentracin de Levadura + 5.38*Relacin Agua:
Mosto - 3.0*Concentracin de Levadura*Relacin Agua: Mosto - 5.88*Relacin Agua:
Mosto^2
Ecuacin 01(*)
En la Figura 2, muestra que la interaccin de la la concentracin de Levadura y la Relacin
Agua: Mosto influye Concentracin de Etanol, siendo as que para una Relacin Agua: Mosto al
50%, Concentracin de Etanol aumenta, al utilizar una concentracin de Levadura al 0.2%.
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Figura 2
Efecto de la interaccin de la concentracin de levadura y la relacin agua: mosto para la
concentracin de etanol.
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Muestra
Condicin De
Reflujo
0.2
Condicin De
Flujo De
Alimentacin
(L/H)
3
0.5
30534
0.2060
49.4439
0.8
125712
0.7731
66.6452
0.2
22675
0.1592
31.8385
0.5
43517
0.2834
34.0042
0.8
74335
0.4670
40.2570
0.2
26565
0.1943
41.1238
0.5
52283
0.3356
46.9835
0.8
123567
0.7603
57.0229
rea
(*)
Concentracin
De Etanol (%)
15302
0.1153
34.5793
Tabla 5
Determinacin de la concentracin de etanol empleando la curva patrn.
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4. Discusin
El mango es una fruta con una humedad del 0.80%. (Sansen y Vargas, 2009). Del contenido de
humedad de los residuos fermentables (pulpa) estuvo prximo a la de la literatura en donde se
report un valor de 0.81% para el mango. (USDA, 2006).
El contenido de agua en un fermentado es importante porque est en proporcin de la cantidad
de solidos (Brix) y porque en fermentacin es un medio que proporciona oxgeno, que es una
fuente de alimentacin de las levaduras. (Sansen y Vargas, 2009).
El valor promedio obtenido en esta investigacin para el pH fue de 4.02%. El pH es un factor
limitante en el proceso de la fermentacin ya que las levaduras se encuentran afectadas
claramente por el ambiente, bien sea alcalino o cido. Por regla general el funcionamiento de las
levaduras est en un rango que va aproximadamente desde 3.5 a 5.5 pH. Se procura mantener
los niveles ptimos de acidez durante la fermentacin usualmente mediante el empleo de
disolucin (Gutirrez S, 2009).
El mango es una fruta con un pH entre 3.6 y 4.6 segn ficha tcnica del CEPICAFE. Por otro
lado, este resultado es comparable con la de la bibliografa pH = 3.86 (Sansen L y Vargas F,
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2009), similar al de este trabajo. Con respecto al pH se pueden observar que existen
fluctuaciones, esto puede ser generado por diversos factores, principalmente a la actividad
enzimtica de las levaduras quienes degradan los agentes acidificantes, produciendo de esta
manera un aumento del pH, o la produccin de otros agentes acidificantes dentro de la reaccin
(Peynaud y Blouin 2004)
Actualmente, si revisamos los reporte de produccin de todas las empresas de Mango
Congelado IQF, nos daremos cuenta que su RENDIMIENTO esta entre 42 a 46%, y segn
bibliografa el 46% del mango representan la cascara y pepa del Mango, por lo que verificamos
que existe un % de Pulpa de Mango que se est desperdiciando (residuo), siendo este
aproximadamente el 8%, el cual sirvi de Materia Prima para la Presente Investigacin.
En la Figura 1 se puede observar la descendencia del pH con respecto al tiempo de
fermentacin del mosto, registrado al inicio as como a lo largo de la fermentacin. De esta
figura, se puede observar como el pH inicial de 4.075 va disminuyendo lentamente a lo largo
del proceso de fermentacin hasta llegar a un pH de 3.504, a las 30 horas de fermentacin. A
mayor tiempo de fermentacin, la disminucin del pH es lenta debido a que la concentracin de
azcares es muy baja, por lo que su conversin a etanol es mnima, por lo tanto, al no haber
cambios en la concentracin de azcares y etanol el pH se mantiene prcticamente
constante. Entre los tratamientos se verific que el tratamiento C1:R3, presenta valores ms
altos de pH, mientras que el tratamiento C2:R1, es el que presento valores ms bajos de pH, esto
est en relacin del contenido de azcares.
De los datos de la Figura 1 podemos deducir que la mayor disminucin de grados Brix se da
entre los das 12 y 36 horas, a partir de la 36 horas vuelve a ser lenta la disminucin lo cual es
correcto debido que a medida que el curso de la fermentacin alcohlica avanza y la
concentracin de etanol aumenta la accin de las enzimas se ve frenada por este ltimo factor
(Hansen, 2000).
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Teniendo en cuenta que la fermentacin alcohlica se inici con 14Brix y termino con 3.2Brix
podemos hablar de un buen rendimiento de etanol al final de la fermentacin de 5.25G.L
(aproximadamente 95%). Jacques et al 1999, manifiesta que segn Pasteur, solo puede lograrse
un mximo de 95% del rendimiento terico, es decir, que a partir del azcar reductor que
ingresa al proceso solo el 95%, mximo ha de ser convertido a alcohol por parte de la levadura.
El 5% restante es empleado para crecimiento celular, produccin de otro metabolitos como
cidos orgnicos, consumo por parte de la contaminacin bacteriana, conversin en productos
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fermentables, entre otros; esto se pudo verificar en la experiencia, pues tuvimos un rendimiento
aproximado del 95%.
Segn Sansen L y Vargas M, 2009, refieren que en el proceso de fermentacin de Mango se
puede observar una disminucin de los grados Brix, debido al consumo de los azcares
fermentables por parte de las levaduras. Es importante sealar que a partir del cuarto da, los
grados Brix se mantienen constantes, indicando que la fermentacin ha cesado. Con respecto al
pH se pueden observar que existen fluctuaciones, esto puede ser generado por diversos factores,
principalmente a la actividad enzimtica de las levaduras quienes degradan los agentes
acidificantes, produciendo de esta manera un aumento del pH, o la produccin de otros agentes
acidificantes dentro de la reaccin.
Jacques et al 1999, manifiesta que segn Pasteur, solo puede lograrse un mximo de 95% del
rendimiento terico, es decir, que a partir del azcar reductor que ingresa al proceso solo el
95%, mximo ha de ser convertido a alcohol por parte de la levadura. El 5% restante es
empleado para crecimiento celular, produccin de otro metabolitos como cidos orgnicos,
consumo por parte de la contaminacin bacteriana, conversin en productos fermentables, entre
otros; esto se pudo verificar en la experiencia, pues tuvimos un rendimiento aproximado del
95%.
5. Conclusiones
Se obtuvo etanol por medio de la fermentacin alcohlica de los residuos fermentables del
Mango, usando la levadura Saccharomyces cerevisiae, en un periodo de una semana,
alcanzando una concentracin de etanol de 5.25% (p/v).
La caracterizacin fisicoqumica de los residuos fermentables del Mango, dio como
resultados valores adecuados: 17Brix, Humedad =79%, pH = 4.02 y Densidad (kg/cm3)=
1.02, % Recuperacin = 7.8% que permitieron obtener bioetanol de calidad.
Los resultados Fermentativos obtenidos en este trabajo demuestran que a una
concentracin de Levadura de 0.2% y una Relacin Agua: Mosto de 0.5 (35:65) se obtiene
una mayor Concentracin de Etanol de 5.25%.
Del presente trabajo se puede observar que la cantidad aproximada de azcares va
disminuyendo lentamente en las 12 primeras horas, esto se debe a que los
microorganismos, en ese tiempo comienzan a reproducirse. Mientras que de las 16 a 34
horas, la disminucin fue ms rpido, y es directamente proporcional a la cantidad de
solidos solubles ( Brix).
Se observ el comportamiento del pH es forma descendente debido al aumento de los
cidos producto de proceso de fermentacin.
Los parmetros ptimos determinados a partir del presente trabajo para la obtencin de
Bioetanol mediante destilacin rectificada en continuo en una UDCA/EV son: 3L/h de
flujo y 0.8 de reflujo de destilado, obteniendo 994.625 mL de Destilado a 64.25G.L, con
un rendimiento de 60.85% de Etanol.
Se cuantific la Cantidad de Etanol presentes en los diversos tratamientos de trabajo de
Destilacin, cuyo valor ptimo fue 64.25% (p/v)
6. Referencias
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2.
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