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DNA FORENSE

JULIO TORRES

GENOMA HUMANO

Autossmicos x Sexuais
99%
1%

EXEMPLO - ELETROFEROGRAMA

ALELOS POSSVEIS X GENTIPO

Allele
possibilities

Sample

Genotype

EXEMPLO

EXEMPLO

ARTEFATOS DOS STRs

STUTTER
Deslise da DNA polimerase ; resulta num pico que tem quatro
pares de bases ( uma unidade de repetio ) menor ou maior
do que o pico do alelo original.

ALELO MENOS A
Adio incompleto de nucletidos "A" por DNA-polimerase,
resulta num pico que representa um par de base menor do que o
pico de alelo original.

PULL-UP
Algumas vezes chamada a infiltrao - uma falha do software de
anlise de discriminar entre os diferentes cores de corantes
utilizadas durante a gerao dos resultados dos testes . Um pico
observado em um corante (por exemplo, azul ) registada pelo
sensor para um outro corante ( tal como verde ou amarelo ) e gera
um segundo pico que um artefato tcnico.

DESBALANCE DE PICOS

DNA DEGRADADO

MISTURA DE DNA

BLOB E NOISE
Blob Causado por gotas de corantes
Noise Causado por bolhas de ar, cristais de ureia e
contaminao da amostra.

SPIKE
Spikes so picos de artefatos tcnicos causados por picos de
tenso durante a anlise. Spikes normalmente exibem um
pico de forma excepcionalmente fina.

DROP OUT
Heterozygous alleles
are well balanced

6 8

Imbalance in allele
peak heights

6
8

*
8

2002 Academic Press

Allele 6 amplicon
has dropped out

DROP OUT x ALELO NULO

EXCESSO DE DNA

EXCESSO DE DNA

CONTAMINAO

ALELOS MICROVARIANTES
Nem todos os alelos tm unidades de repetio de
comprimento completo.
Os alelos com unidades de repetio parciais so designados
pelo nmero de repeties completas e, em seguida, um ponto
decimal, seguido do nmero de bases na repetio parcial
Example: TH01 alelo 9.3
(AATG)6(-ATG)(AATG)3

MICROVARIANTES

Microvariant
allele

PRESENA DE TRS ALELOS

D8S1179

D21S11
D18S51

MUTAO

14,18

15,17

15,18

Normal Transmission of Alleles


(No Mutation)

14,18

15,17

13,17

Paternal Mutation

ESTATSTICA
importante o calculo da frequncia allica de cada populao
especfica.
Um alelo no muito frequente aumenta o poder de
discriminao de um marcador
Existem programas que realizam os clculos da probabilidade
de hipteses selecionadas pelo operador
O perfil gentico de cada indivduo nico

PATERNIDADE CRIMINAL

Y STR

VISO CLSSICA DO CROMOSSOMO Y

Herana patrilinea
Nenhuma
em NRY

recombinao

Recombinao no PAR

STRs Y

Caractersticas importantes:
Tambm contm regies polimrficas que permitem a
individualizao;
Homens recebem apenas do pai permite traar a linhagem
paterna de um homem

Crossing-over com o crX em regies homlogas entre os 2


cromossomos.

CROMOSSOMO Y

UTILIZAO DE Y-STRs

Identificao de paternidade sem o pai (p/ filhos);


Elucidao de estupro (mistura de DNA);
No identifica um indivduo especfico;

Estudos histricos ou evolutivos;

HAPLTIPO
Um hapltipo uma combinao de alelos em loci adjacentes,
que fazem parte do mesmo cromossomo e so transmitidos
juntos. Um hapltipo pode ser formado por um ou vrios alelos,
ou at pelo cromossomo inteiro.
No estudo da evoluo molecular , um haplogrupo um
grupo grande de hapltipo, que so sries de alelos em lugares
especficos de um cromossomo
Em gentica humana, os haplogrupos mais comumente
estudados so os haplogrupos do cromossomo y e
haplogrupos do DNA mitocontrial DNAmt, os quais podem ser
usados para definir populaes genticas.

EXEMPLO

Suspeito 1

Swab Vaginal da Vtima

EXEMPLO
MARCADOR Y

PAI

FILHO

TIO

IRMO

DYS392

13

13

14

12

DYS398

24

24

14

23

DYS385

12,14

12,14

14,15

12,14

DYS393

13

13

12

13

DYS389I

14

14

14

14

DYS391

10

10

10

11

DYS389II

32

32

30

32

DYS19

14

14

12

13

DYS439

13

13

12

10

DYS438

12

12

11

14

DYS437

14

14

12

12

DNA MITOCONDRIAL

mtDNA
Caractersticas importantes:
Tambm contm regies polimrficas que permitem a
individualizao;

Descendentes recebem apenas da me permite traar a


linhagem materna de uma pessoa;
mais resistente degradao que o DNA nuclear.
Taxa mutacional do mtDNA 5-10 vezes maior que a do DNA
nuclear poucos mecanismos de reparo permitem que as
variaes nos nucleotdeos sejam acumuladas

DNA MITOCONDRIAL
mitochondria

Uma ferramenta importante para a


gentica da populao humana
Eukariotic cellule

16569 pb de DNA circular

Herana materna
Ausncia de recombinao
D-Loop:
HVS I
and HVS II segments

Elevada taxa de mutao em


comparao com o DNA nuclear

mtDNA

mtDNA

Utilizado quando a amostra em questo tem uma


quantidade pequena ou no tem DNA nuclear;

Ex. Ossadas, cabelos sem bulbo

mtDNA
Utilizado na identificao de corpos em grandes desastres
comparar a sequncia de interesse com a obtida nos
possveis irmos ou ascendentes maternos;

Identificao de maternidade sem o pai (p/ filhos e filhas)


No identifica um indivduo especfico;
Estudos histricos ou evolutivos.

PADRES DE MIGRAO EM CERTAS


REAS GEOGRFICAS

MITOCHONDRIAL HAPLOGROUPS

SNPs

OCORRNCIA DE SNPs

Mutaes gnicas: mudanas em um ou poucos


nucleotdeos;
So Mutaes Espontnea;
SNPs esto dispersos por todo o genoma, podendo
ocorrer tanto em regies codificadoras como em no
codificadoras;
SNP em regies codificadoras: so denominados
sinnimos e no sinnimos (SNPns);

SNPs:

Frequncia de ocorrncia:
1 entre 1000 bases;
1 entre 100 a 300 bases;
A abundncia dos SNPs e a facilidade com que podem
ser medidos faz com que essas variaes genticas
sejam significativas;
SNPs de determinado gene atua como um marcador
para esse gene;
SNPs em regies codificantes podem alterar a estrutura
da protena produzida por essa regio.

Y SNP

RVORE
FILOGENTICA
COM BASE EM
MARCADORES
BINRIOS - Y SNP

NCLEO DE DNA FORENSE


2006 - Criao do Laboratrio de DNA Forense do Estado do
Cear;
2009 Implantao do sistema CODIS no BRASIL
Lei 12.654 de 28 de maio de 2012.
30 de outubro de 2014 Incio da Coleta de Condenados no
Cear

CRIMES SEXUAIS

CRIME SEXUAL

O Inimigo quase sempre est por perto


Crianas e vulnerveis
O machismo no Brasil x Cultura do estupro
O medo da denuncia

Impunidade (< 10% dos estupradores esto presos)

CRIMES SEXUAIS
Os vestgios permanecem por 72h
Importncia de fazer o exame de corpo de delito o mais breve
possvel
O local do crime fala
Vestes, objetos e suportes
Apoio psicolgico para vtimas

CRIMES SEXUAIS
Lei 12.015 de 2009: Art. 213. Constranger algum, mediante
violncia ou grave ameaa, a ter conjuno carnal ou a praticar ou
permitir que com ele se pratique outro ato libidinoso.
Pena - recluso, de 6 (seis) a 10 (dez) anos.

Exame mdico Legal


Exame em outros hospitais
Importncia da coleta : Swab oral, vaginal, anal, peniano, unhas;
Vestes: calcinha, cueca, lenol, vestimentas em geral.

CRIMES SEXUAIS
Importncia do exame de DNA
Limitao do exame em alguns casos
Quando a vtima do sexo masculino
Excesso de material da vtima

Mistura de perfis genticos


Comparao com suspeitos
CODIS ( Vestgios x Condenados)

ANLISE DE RESULTADOS
DE CRIMES SEXUAIS

EXCESSO DE MATERIAL DA VTIMA

O CROMOSSOMO Y A SADA

EXTRAO DIFERENCIAL

QUANDO A VTIMA DO SEXO MASCULINO

INCLUSO DE UM SUSPEITO

UNHAS

EXCLUSO DE UM SUSPEITO

EXCLUSO DE SUSPEITO

PERFIL DO SUSPEITO EM VESTES

ANLISE DE PELOS PUBIANOS

CRIMINALSTICA BIOLGICA

A PERCIA DE LOCAL DE CRIME


Segundo Rabelo (1996) local do crime pode se definir como:
"Local de crime constitui um livro extremamente frgil e delicado,
cujas pginas por terem a consistncia de poeira, desfazem-se,
no raro, ao simples toque de mos imprudentes, inbeis ou
negligentes, perdendo-se desse modo para sempre, os dados
preciosos que ocultavam espera da argcia dos peritos."

A PERCIA DE LOCAL DE CRIME

Corpo de Delito
Vestgios (V,I,F)
Evidncia
Indcio

FASES DO EXAME PERICIAL E A IDONEIDADE DA


PROVA

A requisio da percia;
A equipe de percia que vai atender o exame;
Na chegada ao local dos exames;
Antes de comear os exames;
O exame propriamente dito;

CUSTDIA DA PROVA E PROCEDIMENTOS DO


PERITO
BUSCA
RESULTADOS

ANLISE

ENCAMINHAMENTOS

CONSTATAO

REGISTRO

IDENTIFICAO

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Representa o tipo de anlise mais frequente no Ncleo de
DNA Forense
Elevado nmero de amostras

Contaminao de amostras
Diversidade de materiais analisados
No subestimar nenhuma amostra
CODIS (Vestgios)

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Marcas de violncia no cadver
Amostras de smen e saliva contidos na face, mamilos
Pelos pubianos ou fios de cabelo

FIO DE CABELO EM UM CELULAR

ELETROFEROGRAMA DE CARRO

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Anlise de arma branca
Perfil da vtima

Perfil do suspeito

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Anlise de arma de fogo
Projteis

ELETROFEROGRAMA DE ARMA DE FOGO

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Borda de copo
Cigarro
Chiclete
Latas de cerveja

ELETROFEROGRAMA EM OBJETO

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Manchas de sangue
Trilhas de sangue

Dinmica de cena de crime

ELETROFEROGRAMA DE MANCHA DE SANGUE

CRIMINALSTICA BIOLGICA
Percias em veculos
Percias em residncias

ELETROFEROGRAMA EM RESIDNCIA

CRIMINALSTICA BIOLGICA

Smen
Preservativo
Smen em roupa de cama, peas ntimas

ELETROFEROGRAMA DE PRESERVATIVO

IDENTIFICAO HUMANA

IDENTIFICAO HUMANA

Achado de Cadver
Reconhecimento de Corpos sem Identificao

Corpos Putrefeitos e Carbonizados

IDENTIFICAO HUMANA
Dificuldade de conseguir perfis
Coleta de familiares
Preferncia para parentes de primeiro grau
Excluses de paternidade

Identificao por objetos da vtima


Estatstica

DESASTRES EM MASSA
Vtimas de desastres em massa onde a identificao fsica
impossvel, podem ser identificadas em casos como:
Acidentes areos
Atos de terrorismo

Catstrofes naturais

INCLUSO

EXCLUSO

AUSNCIA DE PERFIL