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Microbiologa: Bacterias

Bacterias

El nombre bacterias proviene del griego bastn, stas son clulas procariotas que, como tal, tienen
todas aquellas caractersticas de este tipo celular, el cual se halla ampliamente diferenciado de las
clulas eucariotas, diferencias que se consignan a continuacin:

Ncleo

DNA
extracromosmico
Organelos
Membrana
citoplasmtica
Pared celular
Esteroles
Ribosoma

Organismos
Clulas Procariotas
Clulas Eucariotas
Sin membrana, con un cromosoma

circular (nucleoide)
A menudo en forma de Plasmidio

No
Muchas funciones (respiracin y
sntesis)
Capa rgida de peptidoglicano (Pg.)
Ausentes (exp. Mycoplasma)
70S, en el citoplasma

Bacterias
*ms pequeos
Con membrana y varios cromosomas

En organelos

Si
Semipermeable sin muchas
funciones
No hay peptidoglicanos (Celulosa)
Generalmente presentes
80S, en Retculo Endoplasmtico
Rugoso (RER)
Clula animal y vegetal, hongos
filamentosos y hongos
levaduriformes

Dentro de las estructuras permanentes se encuentra la pared celular, la membrana citoplasmtica,
incluyendo los mesosomas, que corresponden a invaginaciones de esta ltima; otra estructura
permanente es el citoplasma, el que contiene inclusiones, ribosomas y DNA. Existen adems
estructuras variables, las cuales son: flagelo, permite motilidad; fimbrias o pili, relacionadas con dos
funciones celulares, la conjugacin y la patogenia, la primera se refiere a la transmisin de material
gentico de una bacteria a otra, y la segunda debido a que regula la unin de la bacteria con las
clulas del hospedero; otras estructuras variables son los exopolisacridos, componentes de la pared
celular y glucoclix; y tambin las esporas.
Susan Arias Donoso
Estructuras permanentes

Pared Celular
La pared celular es un componente exclusivo de las bacterias cuyo componente bsico es
peptidoglicano (pg) o murena, el cual es un polmero de N-acetil glucosamina (NAG o G) y N-acetil
murmico (NAM o M); sus funciones son: conferir rigidez a la membrana, siendo responsable de la
forma bacteriana, adems es esencial para la replicacin y para la sobrevivencia en condiciones
adversas, ya que se comporta como barrera contra agentes txicos, interfiere con la fagocitosis y
tiene actividad pirognica; tiene implicancias en la resistencia osmtica, en la patogenicidad y en la
comunicacin.
La sntesis de la pared celular ocurre a partir de precursores solubles en el citoplasma, NAM y NAG,
los cuales se unen a lpidos de membrana; la formacin de los polmeros lineales ocurre fuera de la
membrana, posteriormente estos polmeros se unen entre s por medio de puentes transversos o
uniones intercalares. El bacilo Prenol es un carrier lipdico que transporta el disacrido pentapptido
desde el citoplasma al periplasma y lo inserta en la pared celular en crecimiento, en un proceso
denominado transpeptidacin que es inhibido por la penicilina. La pared se abre por autolisinas
permitiendo que se depositen nuevos peptidoglicanos.

Lipoprotenas

Susan Arias Donoso
Existen bacterias que pueden carecer de esta pared, aquellas que si la poseen se clasifican en Gram
negativos (Gram-) y en Gram positivos (Gram+) de acuerdo a la afinidad tintorial con la tincin de
Gram. Esta tincin fue desarrollada por Hans Christian Joachim Gram, la cual es una tincin
diferencial que distingue las clulas con superficies externas distintas: pptido cido teicoico (AT) en
Gram+ y pared trilaminar con lipopolisacridos en Gram-. Esto sucede porque las primeras retienen el
cristal violeta, de modo tal que se vislumbran de este color o bien de color prpura; por otro lado las
bacterias Gram negativas pierden dicho cristal tindose de una tonalidad roja debido a una tincin
de contraste con Safranina. As esta tincin constituye una importante base de clasificacin e
identificacin bacteriana, siendo una tcnica de gran ayuda prctica en el diagnstico de infecciones y
en la orientacin teraputica con drogas antimicrobianas.

Las bacterias Gram+ se caracterizan por poseer una gruesa capa de peptidoglicanos, que regula el
potencial hdrico de la clula; adems posee polisacridos cidos y cido teicoico y lipoteicoico,
exclusivos de las bacterias Gram+, donde el acido teicoico nace de la pared celular, mientras que el
lipoteicoico nace de la membrana citoplasmtica atravesando completamente la pared; estos ltimos
son polmeros solubles en agua, que por tanto permiten a la bacteria habitar en medios acuosos,
adems actan como antgenos de superficie, otorgando as serotipos bacterianos, tiles para su
identificacin; permiten la adhesin a otras bacterias as como a receptores especficos en la
superficie de las clulas de mamferos, estabilizan el peptidoglicano y dan
carga negativa a la envoltura bacteriana. Estos cidos son factores
importantes de virulencia pues inician la actividad de tipo endotxica,
participando en el aporte de Mg a la clula por unin con Mg+2.

El cido lipoteicoico es un polmero de Glicerol fosfato anclado a la
membrana citoplasmtica; por otra parte el cido teicoico es un polmero
de Ribitol fosfato unido de manera covalente a los peptidoglicanos. Estos
polmeros marcan diferencias entre las distintas especies de
estreptococos, permitiendo clasificarlos.
Los polmeros de peptidoglicano se encuentran unidos entre s por
uniones intercalares grandes establecindose puentes entre NAM y NAM,
por esta razn la red de murena es ms gruesa.

Las bacterias Gram- tienen una pared celular ms delgada y adems
poseen una membrana externa por sobre la red de murena que cumple

Para realizar la tincin de Gram se
utilizan un mechero, un asa y un
portaobjeto. Se procede tomando con
el asa una colonia que se pone en una
gota de agua y se fija al portaobjeto
con calor, mediante un flameo con un
mechero durante un minuto, luego se
agrega el cristal violeta, que se une al
peptidoglicano, dejndolo actuar por
otro minuto, posteriormente se lava la
preparacin y se agrega Lugol,
dejndolo por 1 minuto a
continuacin se aade alcohol
acetona, por 30 segundos, el cual es un
decolorante que quita el cristal violeta
de las especies Gram-, una vez
realizado este procedimiento se lava y
se aade, directamente sobre la
bacteria, Safranina, que es repelido
por el cristal violeta y retenida por la
membrana externa, de modo que solo
se une a las bacterias Gram-; se vuelve
a lavar la preparacin y se deja secar.
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con las mismas caractersticas de la membrana citoplasmtica, caracterstica exclusiva de las bacterias
Gram-. Esta membrana tiene lipopolisacridos (LPS), lipoprotenas y protenas integrales, receptores y
otras protenas llamadas porinas, las que la atraviesan y actan como canales para metabolitos tanto
del exterior como del interior, constituyendo una especie de filtro, al tener permeabilidad selectiva,
tambin genera fuerza prolocomotriz y participa en la sntesis de pared y estructura extracelular. El
espacio que se encuentra entre ambas membranas se denomina espacio periplsmico o periplasma,
el cual contiene una especie de gel donde circulan molculas y enzimas; la porcin interna de la
membrana externa se halla adherida al peptidoglicano a travs de lipoprotenas, la porcin externa
de esta membrana contiene lipopolisacridos, cuya porcin lipdica (lpido A) est embebida en la
membrana; la porcin polisacrida (polisacrido O) emerge a la superficie.

La toxicidad bacteriana est dada principalmente por la endotoxina que se encuentra en el lpido A
del LPS, esta es una toxina termoestable que solo acta cuando hay lisis celular, pudiendo producir
shock o muerte, provoca la activacin de mediadores inflamatorios del complemento y
prostaglandina, tambin activa macrfagos para secretar citoquinas IL-1, IL-6 y TNF-, esta toxina
adems crea un ambiente densamente hidroflico, es pirgeno y provoca agregacin plaquetaria,
mientras que el polisacrido o antgeno somtico O es cepa especfico, de modo que permite
identificar y diferenciar entre s a las especies bacterianas. El lipopolisacrido adems posee una
porcin polisacrida Core que no vara.

Las uniones intercalares que unen los polmeros de peptidoglicano al igual que en Gram+ se
establecen entre M y M pero de un tamao ms pequeo, lo cual se traduce en una red de murena
ms delgada.

Existen tambin paredes celulares atpicas como ocurre con los gneros Mycobacterium y Nocardia,
estas son bacterias de tipo cido alcohol resistente, cuya pared celular es similar a la de las bacterias
Gram+, con lpido cido miclico, Factor M o Factor oncotal, que le confiere virulencia; se diferencia
en que el NAM se encuentra sustituido por Glicosilmurmico, lo cual no permite una correcta tincin
con la tincin de Gram, requirindose por tanto el empleo de un tipo de tincin diferente,
denominada tincin de cido resistencia; estas bacterias poseen patogenicidad y un alto grado de
resistencia a ciertos qumicos y colorantes. La pared rica en lpidos de Mycobacterium produce cido
resistencia, crecimiento lento, resistencia a detergentes, a ampicilina y vancomicina, y tambin
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provoca clumping. En estas bacterias el cido miclico queda expuesto al exterior siendo base para la
tincin de Ziehl Neelsen.

Asimismo existen tambin bacterias que no tienen pared celular como las del gnero Mycoplasma,
llamadas formas L, de modo tal que al carecer de esta estructura su forma es pleomrfica. Dado a su
caracterstica de difcil aislamiento requieren mtodos de cultivo especiales, y debido a su pequeo
.

Gram (+)
Gram (-)
Membrana externa
Pared celular
Lipopolisacrido (LPS)
Endotoxina
Acido Teicoico
Esporulacin
Lisozima
-
Gruesa
-
-
A menudo presente
+
Generalmente sensible
+
Fina
+
+
-
-
Resistente

Membrana citoplasmtica
Es una bicapa de fosfolpidos con inclusiones de protenas y carente de esteroles que sigue el
modelo de mosaico fluido; sus funciones son la generacin de energa por fosforilacin oxidativa,
asumiendo la funcin que cumple la mitocondria en las clulas eucariontes; esta membrana contiene
enzimas para la sntesis y transporte de la pared celular y de otros metabolitos; as ejerce un control
de la permeabilidad (semipermeable), transportando molculas al interior y al exterior, por osmosis,
difusin pasiva y activa; otras funciones de ella son: regular la divisin celular, la secrecin de enzimas
y toxinas, la sntesis de DNA y adems da origen al mesosoma. Es decir acta bajo el concepto de BEF
(Barrier, Energy Production and Transport).

Citoplasma
El 80% del citoplasma es agua, cidos nuclicos: DNA, mRNA, tRNA, rRNA (5S, 16S y 23S), protenas,
carbohidratos, lpidos e iones inorgnicos entre otras molculas, a diferencia del citoplasma de las
clulas eucariontes, ste no posee citoesqueleto.

DNA
El DNA es nico, de doble hebra, circular y sper enrollado, carente de histonas (excepto Archaea),
ubicado en el citoplasma en la zona denominada nucleoide, este se fija al mesosoma en la etapa
previa a la divisin celular. En algunas especies como Burkholderia pseudomallei existen dos
cromosomas de 3,6 Mb y 2,4 Mb. Algunas veces el cromosoma es lineal, como es el caso de
Streptomyces, algunas espiroquetas y Borrelia burgdoferi. El hecho que el cromosoma sea lineal o
existan dos molculas de DNA implica informacin extra, lo que provee a la clula de ciertas
condiciones que son distintas a las dems, como es el nivel de patogenicidad.
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El DNA bacteriano es haploide y acta como un elemento gentico autorreplicable, es decir que
posee la informacin suficiente para dividirse solo, poseyendo su propio replicn, que es el punto de
inicio de la replicacin. Durante la fase exponencial de crecimiento se pueden encontrar de dos a
cuatro copias de DNA debido a la duplicacin. El tamao del cromosoma en general oscila entre 1 000
y 6 000 Kb, E. coli posee un cromosoma de 5 000 Kb; existen algunas bacterias que tienen un
cromosoma de hasta 10 000Kb.
En algunas bacterias hay protenas asociadas al cromosoma, estas se denominan pseudohistonas o
protenas asociadas al nucleoide, como es el caso de la HU en E. coli, estas protenas estn
involucradas en empaquetar el cromosoma, de modo de mantener la molcula sin ocupar grandes
espacios; por tanto deben existir tambin protenas que desdoblen el DNA para permitir la
transcripcin.

Mesosoma
Corresponde a una invaginacin en la membrana plasmtica de forma irregular que aumenta la
superficie de membrana, lo cual puede ser til como un sitio para actividad enzimtica en respiracin
y transporte.

Ribosoma
Los ribosomas son 70S, compuestos por dos subunidades: 30S y 50S. Su funcin es la sntesis de
protenas, de modo que constituyen dianas para la accin de antibiticos, como es el caso de la
tetraciclina que acta sobre la subunidad 30S; el cloranfenicol y la eritromicina que actan sobre la
subunidad 50S; y los aminoglicsidos que actan sobre el rRNA 16S y 30S.
Estn compuestos en un 40% por protenas y en un 60% por RNA y rRNA.

Estructuras variables

Estas estructuras no las poseen todos los microorganismos, sino que son caractersticas de cada
gnero y especie, definiendo estructura y funciones especficas; y tambin su clasificacin
taxonmica.
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Glucoclix
El glucoclix corresponde a un polisacrido bacteriano no soluble y flexible (en menor proporcin
contiene polipptidos) que confiere gran adherencia a la superficie celular, a otras bacterias y a
objetos inanimados, un ejemplo de bacterias que poseen este polisacrido es el Streptococcus
mutans de las placas dentales cariognicas. Debido a su caracterstica de flexibilidad se encuentra
protegido de la accin de los fagocitos, antimicrobianos y del sistema inmune; adems se halla
protegido de la desecacin y de los virus.
Este glucoclix permite la formacin de biofilms; estos son sustancias de mucopolisacrido que
permiten a la bacteria protegerse del medio ambiente, evitando la unin de anticuerpos, antibiticos
y fagocitos, as tambin pueden bloquear otros patgenos, protegiendo al hospedador; esta
estructura tiene una gran importancia desde el punto de vista clnico, ya que invade los tejidos y por
ende son difciles de tratar y erradicar. Un ejemplo de bacterias que producen biofilms es la especie
Stafilococcus epidermidis, que se adosa a catteres intravenosos, por lo que continuamente ingresan
bacterias al torrente sanguneo pudiendo producir un cuadro septicmico; otros representantes de
este tipo de bacterias son la Listeria monocytogenes y el Streptococcus mutans el cual se encuentra
habitualmente en la boca y es una de las principales productoras de caries dentales, mediante la
degradacin de carbohidratos presentes en la boca, produciendo cidos que degradan el esmalte
dental. Los biofilms se forman sobre sustratos slidos en contacto con humedad, como catteres y
dispositivos implantados, en la superficie de tejidos suaves de organismos vivos o bien en interfaces
humedad-aire.
Si el glucoclix es laxo se denomina slime layer, si por el contrario es firme se llama cpsula, siendo
la mayora de este ltimo tipo; sta es una sustancia rgida, viscosa y mucosa que tiene funciones
antifagocitarias, de adherencia y que acta como factor de virulencia; posee antgenos capsulares K y
se compone por polisacridos que se sintetizan en la membrana citoplasmtica. Debido a su
estructura fibrilar hidratada no se tien con las tinciones habituales, por lo cual se usa una tincin
negativa o tinta china.
Algunas bacterias que poseen esta estructura son Klebsiella (siempre presente, constitutiva),
Neisseria meningitidis y Streptococcus pneumoniae (deben estar infectando para producir la capsula).
Las bacterias que poseen cpsula en medio slido constituyen colonias lisas (S), a menudo mucoides
(Klebsiella), mientras que las variantes acapsuladas producen colonias de desarrollo ms lento siendo
colonias rugosas (R) o no mucoides, estas ltimas tienden a ser no virulentas

Esporas (endospora)
Es un estado de latencia de las bacterias Gram+, un periodo de animacin suspendida, caracterizado
por formar partculas deshidratadas, refrctiles y con DNA genmico resistente; la alta resistencia de
las esporas se debe a un compuesto llamado dipicolicato de calcio. stas se originan dentro de la
clula vegetativa y se liberan por lisis celular cuando las condiciones del medio le son adversas,
evitando daos por altas temperaturas, radiacin y desecacin; la activacin para su formacin puede
darse por situaciones de estrs y dependiendo de la disponibilidad de nutrientes, disparando la
germinacin y el crecimiento. Los gneros ms representativos de bacterias que producen esporas
son Bacillus y Clostridium, dentro de este ltimo se encuentra Clostridium perfringens y Clostridium
tetani, los que producen gangrena gaseosa y ttano respectivamente.
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Las esporas ;
en ocasiones pueden ser deformantes como en Clostridium difficile, que produce diarrea
pseudomembranosa asociada a infecciones intrahospitalarias; o no serlo como en Bacillus; en el caso
de Clostridium perfringens la forma de la espora es intermedia y no deforma la bacteria, por tanto se
; as la forma de la endospora y tambin su posicin ayudan a clasificar
la cepa bacteriana observada.
Al ser observadas en un microscopio de
campo claro no se observa color ni textura,
sino que tienen apariencia birrefringente o
refringente, y no se tien con los colorantes
habituales. Las esporas tienen DNA,
ribosomas y protenas solubles dentro de
ellas; externamente tienen una estructura
de protenas llamada exosporium y por
dentro de sta una corteza de
peptidoglicano.
La produccin de esporas o esporognesis se compone de siete fases, incluyendo una fase cero:
ETAPA 0:
La clula vegetativa se encuentra en la etapa final de crecimiento exponencial
y contiene dos cromosomas
ETAPA 1:
El DNA celular se hace ms denso y ocupa el centro de la clula.

ETAPA 2:
Se forma un tabique (septo) cerca del polo celular a causa de la invaginacin
de la membrana citoplasmtica. El DNA es segregado en dos compartimentos
(la espora en desarrollo y la clula madre).

ETAPA 3:
El citoplasma de la espora en formacin queda delimitado por dos
membranas debido al crecimiento de la membrana citoplasmtica alrededor
del protoplasto. La membrana ms interna se transformar en la membrana
citoplasmtica de la espora en germinacin.

ETAPA 4:
Comienza a formarse la corteza de la espora por el depsito de un
peptidoglicano esporoespecfico entre la membrana interna y externa. La
espora aparece como un cuerpo refractario, empieza a acumularse calcio y a
sintetizarse cido dipicolnico.

ETAPA 5:
Aparece el exosporio. La membrana exterior se transforma en la capa cortical
por incorporacin de protenas ricas en cistena. Esta capa le confiere a la
espora resistencia frente a agentes antimicrobianos
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ETAPA 6:
Maduracin de la espora. Su citoplasma se vuelve homogneo y electrodenso.
La capa cortical se completa.
ETAPA 7:
La endospora es liberada por la lisis de la clula.

Las esporas se encuentran diseminadas en el ambiente, contaminndolo.

Fimbrias o pili
Son microfibras de estructura proteica similares a pelos que rodean a algunas bacterias Gram-
principalmente, que juegan un importante papel en la patogenia de algunas enfermedades, ya que
estn relacionadas con la virulencia bacteriana. Estn constituidas por el ensamblaje de una protena
estructural llamada pilina, la cual posee propiedades adhesivas; as permiten adherirse a dientes,
piedras, plstico y catteres en hospitales; tambin se relacionan con la patogenicidad bacteriana. Las
fimbrias se clasifican en distintos tipos segn su capacidad de unirse a determinados tipos de
residuos, como es el caso de las fimbrias tipo 1 que se adhieren a residuos de manosa presentes en
las clulas del cuerpo.
Existen tambin los llamados pili sexual, que participan en el intercambio de material gentico entre
las bacterias, en un proceso llamado conjugacin, al permitir el contacto entre ellas; intercambio que
es unidireccional. Este tipo de pili es ms largo y puede haber de dos a tres por clula; pudiendo
comportarse tambin como adhesinas.

Plasmidio o plsmido
Los plsmidos son elementos genticos accesorios que codifican para funciones adaptativas, estos
estn compuestos por DNA estable, extracromosomal de doble hebra, circular, pequeo, sper
enrollado y autorreplicante, que puede estar libre o integrado al cromosoma, en esta ltima
circunstancia se denomina episoma, proporcionndole ventajas a la bacteria que trasmite esta
informacin a la descendencia, existe tanto en bacterias Gram- como Gram+; generalmente se
duplica junto con la bacteria. Existen plsmidos lineales como los que se hallan en Streptomyces y
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Borrelia burgdorferi, asimismo se pueden encontrar plsmidos de simple hebra como en Myxococcus
xanthus, bacteria que no tiene importancia desde el punto de vista clnico.
Esta estructura no es esencial para la viabilidad celular, siendo por tanto un elemento gentico
accesorio, sin embargo porta informacin importante para funciones adaptativas, generalmente
relacionado con la conjugacin, la virulencia (invasin y produccin de toxinas), la simbiosis, la
degradacin de sustratos y principalmente con la resistencia a antibiticos; produciendo impactos,
como son: la diseminacin de enfermedades infecciosas, la diseminacin de la resistencia a
antibiticos, la tolerancia a metales txicos, enzimas y toxinas; adems permiten la transferencia de
material gentico de una clula a otra, lo que es til en ingeniera gentica.
Existen plsmidos pequeos, de entre 5 y 10 Kb, de estos se pueden encontrar entre 50 y 100
copias, cifra que incluso puede llegar a 1000 en algunos plsmidos de Streptomyces. De la misma
manera existen plsmidos grandes cuyo tamao oscila entre 50 y 200 Kb, pudiendo encontrarse entre
1 y 10 copias en cada clula.
Estas estructuras poseen un limitado rango de hospederos, es decir que se han especializado en
estar en determinadas especies bacterianas, sin embargo existen algunas excepciones, denominadas
plsmidos promiscuos que pueden hallarse en muchos tipos bacterianos, habindose descrito en
bacterias Gram+ y Gram-. Plsmidos distintos pueden encontrarse en un mismo microorganismo, por
ejemplo en E. coli se han descrito hasta 7 tipos distintos coexistiendo en una misma clula, es decir
que hay compatibilidad. Asimismo algunos plsmidos se pierden rpidamente en presencia de otro, lo
cual indica incompatibilidad, las bases de esta incompatibilidad no se entienden pero se cree que
tienen relacin con la replicacin.

Flagelos
Son estructuras pilosas que permiten la movilidad de las bacterias, otorgando una ventaja
competitiva respecto a otras bacterias, al permitir que quienes los poseen puedan buscar un
ambiente adecuado y alejarse de ambientes txicos. Estn compuestos de subunidades proteicas
denominadas flagelinas. Poseen antgenos H que son tiles para la serotipificacin de cepas
bacterianas.
Los flagelos se encuentran en la superficie de las clulas, bajo su membrana externa; estn
adheridos a protenas gancho y se anclan a la pared celular y a la membrana plasmtica a travs del
cuerpo basal, existiendo diferencias entre el mecanismo con que se unen entre Gram- y Gram+. Para
observarlos al microscopio se requiere una tincin especial que permite engrosar el flagelo y hacerlo
visible.
Generalmente tienen movimiento de tipo rotatorio, movindose como un tirabuzn, permitiendo
movilizacin dentro de los fluidos corporales. La fuerza protomotriz proviene del citoplasma.
Existen distintos tipos de flagelos, clasificndose segn nmero y posicin:

Montrico:
Un flagelo ubicado en uno de los polos.
Anftrico:
Dos flagelos, uno en cada polo.
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Loftrico:
Gran cantidad de flagelos en un mismo polo.
Pertrico:
Gran cantidad de flagelos ubicados en toda la periferia de la bacteria.
Flagelo periplsmico, endoflagelo, o filamento axial:
Se ubica dentro del soma bacteriano de las espiroquetas permitiendo
un movimiento ms enrgico que los dems tipos de flagelo; que
facilita la movilizacin en ambientes viscosos. Ejemplos: Treponema
pallidum (sfilis) y Leptospira.

Formas y agrupaciones bacterianas

Cocos
Forma redondeada.
Relacin superficie-volumen
mnima, por tanto estn
menos expuestos.
Se transmiten por el aire
debido a su pequeo tamao.
Viven en medios ricos en
nutrientes.
Muy resistentes.
Patgenos generalmente.
Bacilos
Forma alargada o cilndrica
Mayor relacin superficie-
volumen.
Tienen mayor adaptacin al
medio ambiente.
Viven en medios pobres de
nutrientes (suelos, agua) pero
los obtienen de manera ms
eficaz.
Saprfitos generalmente (no
producen dao)
Espirilos y Vibrios
Forma helicoidal y de coma,
forma que les permite
moverse en ambiente viscoso.
Poseen dimetro pequeo.
Atraviesan fcilmente las
mucosas (penetran en punto
de contacto)
Patgenos por contacto
directo o por vectores.
Cocos o cocceas: se clasifican en cuatro grupos dependiendo de su agrupacin, su tamao

1 plano:
Si se agrupan de a dos se denominan diplococos (Neisseria
gonorrhoeae); si la agrupacin contienen de 4 a 2000 cocos, en
cadena, se denominan estreptococos (Streptococcus pneumoniae).
2 planos:
Conforman ttradas (Micrococcus).
3 planos:
Forman sarcinas, cuya forma asemeja un cubo, es una forma poco
frecuente.

Planos Mltiples:
Tienen forma de cluster o racimo, se denominan estafilococos
(Staphylococcus aureus).

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x Bacilos: se pueden agrupar de a dos (diplobacilos), aislados o en cadena (estreptobacilos),
existe una variante intermedia entre bacilos y cocos que se denomina cocobacilos. El tamao
de los bacilos es de aproximadamente 0,2--
x Vibrios: tienen forma helicoidal y poseen flagelo, que les confiere motilidad.
x Espirilo: tienen forma de espiral, su tamao vara entre 0,01--
x Espiroquetas: tienen motilidad gracias a un endoflagelo.

Existen agrupaciones especiales, como la agrupacin en empalizada de las corinebacterias, en letras
.

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Metabolismo bacteriano

El metabolismo es la sumatoria de los procesos que tienen que ver con el anabolismo (construccin;
gasto de energa) y catabolismo (destruccin; liberacin de energa), mediante reacciones redox;
reacciones que utilizan algunas pruebas bacterianas; muchas de estas reacciones requieren la
utilizacin de energa en forma de ATP, la cual puede provenir de dos vas distintas, la energa
luminosa o qumica, esta ltima puede provenir de compuestos orgnicos o inorgnicos, conforme a
esto los organismos se pueden clasificar, segn la fuente de energa, en:
x
Quimitrofos: usan compuestos qumicos.

o Quimiorgantrofos: usan compuestos qumicos orgnicos.
o Quimiolittrofos: usan compuestos qumicos inorgnicos.

Fottrofos: usan la energa luminosa (fotosntesis).

Otra forma de clasificar a un organismo es segn la fuente de carbono en:
x
x
Auttrofos: usan el compuesto directamente desde el ambiente, los nutrientes son

sustancias inorgnicas, mientras que los productos finales son orgnicos; por tanto se
dice que son productores.
Hetertrofo: aprovechan los compuestos orgnicos producidos por otros organismos,
por tanto se dice que son consumidores. Dentro de este tipo de bacterias se encuentran
la mayora de los patgenos humanos.
Clasificacin
Fuente de carbono
Fuente de energa
Auttrofos
Hetertrofos
Quimitrofos
Quimiolittrofos
Quimioorgantrofos
Quimioauttrofos
Quimiohetertrofos
Fottrofos
Fotoauttrofos
Fotohetertrofos
CO2
Compuestos orgnicos
-------
-------
-------
CO2
Compuestos qumicos
-------
CO2
Compuestos orgnicos
-------
-------
Compuestos qumicos
Compuestos qumicos inorgnicos
Compuestos qumicos orgnicos
Compuestos qumicos
Compuestos qumicos
Luz
Luz
Luz

En los organismos quimiohetertrofos existen distintas va metablicas para la formacin de energa
de tipo catablicas, es decir que se destruyen molculas grandes para producir unas ms pequeas
donde el fin de de ambas es obtener energa y poder reductor; por tanto estas vas son de tipo
oxidativas y exergnicas; estas son:

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RESPIRACIN

La glucosa que pasa a piruvato e ingresa al ciclo de Krebs, sigue la ruta y el

poder reductor es utilizado en la cadena transportadora de electrones
donde las molculas transportadoras se oxidan y reducen en un proceso de
cascada, en ella, los electrones del NADH, FADH pasan a una quinona (CoQ),
luego a los citocromos, que contienen hierro y posteriormente a un aceptor
final de electrones. Los transportadores consisten en: deshidrogenasas, que
ingresan los electrones desde el transportador soluble, Quinonas, que
transfieren los electrones a la oxidasa y extrae el hidrogenin; y citocromo
oxidasa o reductasa, que transfiere los electrones al aceptor final soluble.
La citocromo oxidasa tiene valor taxonmico, pues a travs de esta enzima
se pueden hacer diferencias entre familias bacterianas. Un mismo
microorganismo puede tener ms de un tipo de transportador lo que es un
avance evolutivo que le permite adaptarse mucho mejor a las condiciones
medio ambientales. Finalmente existe un aceptor de electrones que vara
segn la respiracin sea aerobia o anaerobia.

o
Respiracin aerobia, el aceptor final de electrones es el oxigeno,

que al captarlos forma agua, que es el producto final. Los sustratos principales
son carbohidratos y lpidos, siendo glucosa la ms usada.

Respiracin anaerbica, el aceptor final de electrones es una molcula
inorgnica diferente del oxgeno, ya sea nitrato, sulfato o carbonato, entre otros,
formando as como producto final compuestos inorgnicos, ejemplo
Pseudomonas.

FERMENTACIN

Es un catabolismo parcial, donde el aceptor final de electrones es una molcula orgnica y

los productos finales son sustancias orgnicas tambin. La fermentacin puede ocurrir en
presencia de oxigeno, pero ste pero no se ocupa, sin embargo es ms eficiente en
ausencia de ste. Este proceso es realizado por las clulas eucariontes y algunas
procariontes como las levaduras. En la fermentacin la primera etapa es la glucolisis,
donde lleva la glucosa hasta piruvato seguido de una segunda etapa en que las coenzimas
reducidas, como el NADH, donan sus electrones para formar un compuesto orgnico final.

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Existen distintos tipos de fermentacin segn su producto final: homolctica (cido

lctico), alcohlica (alcohol etlico) cido mixta (acido actico, cido succinico, cido
etlico), propinica (cido propinico), entre otras, donde la ms frecuente es la cido
mixta.

As existen bacterias que se han especializado en producir cido lctico, como
Streptococcus, Lactobacillus, esta ltima muy utilizada para producir yogurt. Otras
bacterias como Saccharomyces es la levadura que produce la fermentacin de la cebada
con producto final alcohol etlico o etanol. Por otra parte Clostridium produce compuestos
orgnicos putrefactos, que se caracterizan por su mal olor; Escherichia coli puede producir
acido lctico, etanol, acido succnico, acido actico, entre otros; de esta forma es
importante conocer el producto final formado para la identificacin de una bacteria,
siendo por tanto un elemento de utilidad taxonmica.
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16
La mayor parte de los microorganismos que se pueden aislar en productos patolgicos
poseen fermentacin de tipo cido mixta, donde los productos finales son cidos
orgnicos dbiles, que disminuyen ampliamente el pH, variacin que es posible identificar
a travs de pruebas bioqumicas, como el test rojo metilo y el test Voges Proskauer.

La ventaja de un proceso de respiracin, es que energticamente
es ms rentable. Se producen 38 molculas de ATP versus 2
molculas de ATP producidas en la fermentacin. Los
microorganismos segn la batera enzimtica que tienen, derivan
sus molculas a respiracin o fermentacin.

Todas las bacterias utilizan otros hidratos de carbono adems de

glucosa, tales como lactosa, sacarosa, maltosa, entre otros; adems
muchas de stas tienen al menos dos posibilidades para generar
energa, mediante la combinacin de procesos, ya sea: respiracin
aerobia/fermentacin, respiracin anaerobia/fermentacin, etc.;
adems poseen otras vas que permiten generar energa a partir de
protenas, lpidos e inclusive plsticos y petrleos. Dentro de estas
bacterias las ms peligrosas son las anaerobias facultativas, es decir
pueden crecer o no en presencia de oxgeno, como las
enterobacterias, stas fermentan la glucosa, y reducen nitrato a
nitrito.

Para producir energa a partir de protenas se ven involucrados tres procesos que son: desaminacin
oxidativa, transaminacin y descarboxilacin, siendo este ltimo proceso importante para la
identificacin de bacterias. Las bacterias presentan proteasas que al destruir las protenas originan
aminocidos, luego se produce la descarboxilacin de stos, principalmente: arginina, lisina y
ornitina, la prdida del grupo carboxilo de los aminocidos se produce por accin de la
descarboxilasa, la que requiere piridoxal fosfato como coenzima, en esta reaccin el producto
obtenido es una amina, que presentan caractersticas bsicas, produciendo cambios de pH lo que se
puede determinar usando indicadores. En laboratorio se utiliza mayormente descarboxilacin de
lisina y de ornitina. Los productos de la descarboxilacin de estos son:
x Lisina: cadaverina
x Ornitina: putrescina
x Arginina: putrescina y urea

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17
De acuerdo a la diversidad metablica de las bacterias se pueden realizar distintas pruebas

bioqumicas para identificarlas en el laboratorio de diagnstico, as se pueden encontrar bateras de
pruebas fisiolgicas (metablicas) de identificacin: que miden la utilizacin de glucosa por distintas
vas metablicas, la utilizacin de otros azcares, de aminocidos y de nitratos; la movilidad, tipo de
metabolismo, entre otros.

Test de oxidasa
Determinacin del metabolismo fermentativo
Una colonia bacteriana se embebe en el filtro

con reactivo. Si la bacteria tiene la enzima
citocromo oxidasa se produce un color azul, de
lo contrario queda de color amarillo (color
original).
Tubos con indicador de pH y con un indicador

(rojo de fenol). Cuando se produce acido el
indicador cambia a amarillo, lo que indica que
al inocular el medio con glucosa la bacteria
tiene un metabolismo fermentativo y por lo
tanto produce cidos.
Nutricin bacteriana

Los nutrientes son sustancias que se emplean en la biosntesis y produccin de energa, siendo por
tanto necesarios para el crecimiento microbiano, estos son obtenidos por un proceso llamado
nutricin, en el cual las sustancias qumicas (nutrientes) son adquiridos desde el ambiente y usados
para la actividad celular. Existen nutrientes denominados esenciales que deben ser provistos a un
organismo ya que estos no los pueden sintetizar, dentro de estos encontramos dos categoras:
x Macronutrientes: son requeridos en grandes cantidades y tienen un rol preponderante
en la estructura y metabolismo de las clulas. Dentro de estos se encuentran: C, N, P, S,
K, Mg, Ca, Na y Fe (protenas, carbohidratos y lpidos).
x Micronutrientes o elementos traza: son requeridos en pequeas cantidades, se
involucran en funciones enzimticas y mantencin de las protenas; dentro de estos se
encuentran: Mn, Zn, Ni, Co, Cu, Mo, Se, V, los cuales son metales que tiene una funcin
estructural en varias enzimas
x Factores de crecimiento: Son compuestos orgnicos que se necesitan en muy pequeas
cantidades y solo por algunas clulas, son vitaminas, aminocidos, purinas y pirimidinas.
Elementos que la mayora de los microorganismos son capaces de sintetizar, aunque
existen algunos que requieren incorporarlos a su organismo, de stos son las vitaminas
se necesitan con mayor frecuencia, las que funcionan formando coenzimas, las ms
importantes son la vitamina B1 (tiamina), biotina, cobalamina y piridoxina.

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18
Monmero
Macromolculas
Estructuras celulares
Monosacridos
Aminocidos
polisacridos
Protenas
cidos grasos
Bases nitrogenadas
Lpidos
cidos nuclicos
Pared celular y glucoclix

Membrana, ribosoma, flagelo
pili, fimbrias y enzimas
Membrana
Cromosomas, ribosomas y
plsmidos
Agua

CHO, Protenas, lpidos y

cidos nuclicos

Macronutrientes

Sales

Micronutrientes

Factores de crecimiento
Vitaminas
y cofacto-
res

Anlisis qumico del citoplasma microbiano
(basado en E. coli)
Composicin qumica en base al peso seco

(basado en E. coli)

Elemento
C
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Proporcin peso seco

50%
Ubicacin / Funcin
Componente estructural bsico de compuestos
orgnicos: en aminocidos, cidos grasos, cidos
orgnicos,
azcares,
bases
nitrogenadas,
compuestos aromticos y un sinfn de compuestos
orgnicos de otro tipo.
20%
14%
8%
3%
Na
S
1%
1%
1%
Cl
0,5%
Mg
0,5%
Ca
0,5%
Fe
0,25%
19
En muchos compuestos orgnicos e inorgnicos.

Aceptor final de electrones en la respiracin
aerobia. Constituye el 20-21% de la atmsfera. Es el
principal componente de carbohidratos, lpidos,
cidos nuclicos y protenas.
Aminocidos y nucletidos. El 79% de la atmsfera
de la tierra es N2. La mayora de las bacterias son
capaces de utilizar NH3 como nica fuente de N, y
otras muchas pueden utilizar NO3- y NO2-. El N2
puede ser usado como fuente de nitrgeno por
algunas bacterias, como las bacterias fijadoras de
nitrgeno (Rhizobium).
En compuestos orgnicos; mantencin de pH.
Formacin de puentes de hidrgeno entre las
molculas. Sirve como fuente de energa libre en
reacciones de xido-reduccin de la respiracin.
Como PO4-3 en cidos nuclicos, fosfolpidos,
algunas coenzimas, y ATP.
Para mantencin del balance elctrico de clulas.
En aminocidos cistena y metionina, puentes
dislfuros. En algunas vitaminas, como tiamina,
biotina, cido lipoico y Coenzima A.
Mantencin del balance elctrico dentro de las
clulas; cofactor de algunas enzimas.
Mantencin del balance elctrico dentro de las
clulas.
Componente de la clorofila; cofactor de algunas
enzimas. Funciona como estabilizador de los
ribosomas, las membranas celulares y los cidos
nuclicos.
Responsable en parte de la termorresistencia de las
endosporas; cofactor de algunas enzimas. Ayuda a
estabilizar la pared celular bacteriana
En citocromos de la cadena transportadora de e-;
cofactor de algunas enzimas: Catalasa, Peroxidasa y
todas las nitrogenasas
Cofactores de algunas enzimas.
Micronutrientes
0,25%

El hierro en condiciones anaerobias se encuentra en estado de oxidacin +2 y es soluble, mientras
que en condiciones aerobias suele estar en estado de oxidacin +3 y forma varios minerales
insolubles, por tanto para obtener sales minerales las clulas bacterianas producen quelantes
llamados siderforos, que solubilizan el hierro y lo introducen en la clula, esto debido a que este
mineral es muy relevante para la patogenicidad bacteriana, estos siderforos compiten con la
transferrina (sangre y linfocitos), y la lactoferrina (mucus y leche) por hierro, capturndolo en
igualdad de condiciones pues tiene prcticamente la misma afinidad. Existen tres tipos de
siderforos: catecoles (bacterias), hidroxamatos (hongos) y hidroxicarboxilatos (bacterias). Algunos
ejemplos de estas enzimas son la enterobactina y aerobactina de Escherichia coli, Shigella spp,
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20
Klebsiella spp y Yersinia spp. En Gram+ los siderforos capturan el hierro que est circulando, se
asocian a ciertas protenas que estn en la superficie de la bacteria y a travs de un transportador
proteico ABC el siderforo junto con el Fe ingresa al citoplasma, luego, mediante una serie de
procesos bioqumicas este hierro es utilizado por la bacteria, finalmente el siderforo vuelve al
espacio extracelular. En Gram- el proceso es ms complejo debido a que estas bacterias tienen
membrana externa. El siderforo se asocia a una protena receptora que est presente en la
membrana externa, es ingresado al espacio periplsmico y se asocia a otro tipo de protena que
ingresa por el transportador ABC, liberando el hierro en el citoplasma para luego volver al medio
extracelular. En Gram- existe otro tipo de siderforo similar llamado hemforo, el cual es
especializado en capturar el hierro presente en la hemoglobina, ste es una molcula proteica que se
une a la hemoglobina, ingresndola completa a la bacteria, liberndose el grupo hemo en el interior
de sta, el grupo hemo libera el Fe y la molcula vuelve a salir.

Las necesidades nutricionales derivan de mutaciones que han suprimido la capacidad de originar
enzimas relacionadas con la produccin de estos nutrientes, as encontramos bacterias:
x
Prottrofas: son capaces de producir todos los nutrientes que necesita la bacteria para
su desarrollo, sintetiza vitaminas, aminocidos, nucletidos y lpidos. De acuerdo a esto
requiere cultivos mnimos de sales inorgnicas. A partir de molculas muy simple pueden
desarrollar molculas mucho ms complejas porque tiene toda la batera enzimtica
Auxtrofas: es un microorganismo que carece de la capacidad para sintetizar nutrientes
esenciales, as requiere factores de crecimiento, purinas, pirimidinas, vitaminas
(coenzimas) y aminocidos. Algunos son muy exigentes lo que significa que es mutante
para muchos factores. Por convencin la nomenclatura para denominar si una bacteria
que es capaz o incapaz de sintetizar un aminocido, emplea la primera letra del
aminocido en mayscula y las dos siguientes en minscula seguida de un signo -en el
caso de no poseer el gen que cod en caso de poseerlo el
cual se sita como superndice, ejemplo: una bacteria incapaz de producir histidina se
denomina His-. Existen bacterias que son incapaces de fermentar algn carbohidrato por
mutacin de alguna enzima involucrada en este proceso metablico, la nomenclatura
para nombrarlas es similar al utilizado para los aminocidos (malt (-) o lac (-)).
Factores que influencian el crecimiento bacteriano

Existen distintos factores ambientales que afectan fundamentalmente la funcin de las enzimas
metablicas, los que corresponden a la temperatura, los requerimientos de oxgeno, el pH, las
radiaciones electromagnticas, la presin baromtrica y presin osmtica; siendo crticos los tres
primeros.
La temperatura es el principal factor que afecta el crecimiento y se pueden encontrar tres funciones
cardinales:
x Mnima: es la ms baja temperatura que permite el crecimiento y metabolismo de un
microorganismo.
x Mxima: es la ms alta temperatura que permite el crecimiento y metabolismo de un
microorganismo.
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21
x ptima: permite la tasa ms rpida de crecimiento y metabolismo de un

microorganismo.
Conforme a esto se pueden distinguir distintos grupos de adaptacin a la temperatura en base al
ptimo crecimiento bacteriano.
x Psicrfilas: afinidad por el frio (0-15C)
o Psicrotrficas: producen deterioro de alimentos.
x Mesfilas: a este grupo pertenecen la mayora de los patgenos humanos (30-40C)
o Psicrotolerante: crecen a 0C pero tiene temperaturas ptimas de 20-40C.
Ejemplo: Listeria.
o Termotolerante: crecen mejor a temperatura mesfila, pero toleran
temperaturas superiores, ejemplo: Campylobacter.
x Termfilas: afinidad por el calor (45-80C). Ejemplo: Thermus aquaticus (Taq
polimerasa)
El pH interno de una clula debe permanecer relativamente cercano al neutro an cuando el pH
externo es altamente cido o alcalino. La mayora de los microorganismos crecen mejor a pH entre 6
y 8, pero algunos han evolucionado para crecer mejor a bajo o alto pH, como es el caso de la Listeria
que soporta pH entre 4 y 10. De acuerdo a esto se clasifican en:
x Acidfilo: (1-5,5) organismos que crecen mejor a bajo pH. Ejemplo: hongos y levaduras.
x Alcalfilos: (8-11,5) organismos que crecen mejor a alto pH, como es el caso de las
bacterias que descomponen la urea.
x Neutrfilos: (6-8) bacterias patgenos humanas.
La presin osmtica tambin ejerce un efecto sobre el crecimiento bacteriano, esta presin
depende de la concentracin de soluto presente y de la disponibilidad de agua, es generalmente
(AW), la cual se ha definido como el cociente
entre la presin de vapor de aire en el alimento (P) y la presin de vapor de agua pura (P 0) a la misma
temperatura. Los valores de AW van de 0 a 1, donde mientras menor sea AW, menos agua disponible
hay para permitir el crecimiento. A medida que en una solucin se concentra la presin de vapor de
agua en el alimento disminuye y por tanto la actividad de agua desciende. Una gran cantidad de
mtodos de conservacin utilizan estos conceptos, la deshidratacin es uno de ellos, donde se reduce
AW, al igual que la adicin de soluto (salado, almbar).

AW = P

P0
En medios isotnico (solucin salina 0,85-0,9 %) la bacteria permanece viable, mientras que en una
solucin hipotnica (agua destilada) el agua tiende a entrar a la bacteria para equilibrar la presin
osmtica de ambos medios, por otra parte en un medio hipertnico (NaCl 1%): El agua tiende a salir
de la bacteria para equilibrar presiones, por tanto se produce un efecto de plasmlisis que finalmente
genera un shock osmtico que destruye a la bacteria. De acuerdo a esto las bacterias se clasifican en:
x
Halfilo: microorganismos que tienen la capacidad de crecer en condiciones de

soluto altas, es decir con un potencial de agua reducido con presencia de sal, en
tanto que algunos de ellos requieren concentraciones altas de sal para su
crecimiento.
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22
x
x
Halotolerantes: son capaces de soportar alguna reduccin de la AW del medio, pero

generalmente crecen mejor en ausencia de sal. Ejemplo: Staphylococcus aureus.
Osmfilos: son capaces de crecer en ambientes con alta concentracin de azcares.

Otra caracterstica que condiciona el crecimiento bacteriano son los requerimientos de gas que
stas poseen, conocer esta caracterstica permite trabajar con ellas en el laboratorio. La presencia de
oxgeno puede permitir o inhibir el crecimiento, ya que este no siempre es beneficioso, pues las
bacterias al utilizar este gas producen varios metabolitos txicos: oxgeno atmico (O2), anin
superxido (O2-), perxido de hidrgeno (H2O2) y radicales hidroxilos (OH-); por esta razn la mayora
de las clulas han desarrollado enzimas que neutralizan el efecto txico de estos qumicos, estas
enzimas son: superxido dismutasa, peroxidasa y catalasa, esta ltima permite distinguir entre
bacterias de gneros distintos, pudiendo citarse como ejemplo Staphylococcus y Streptococcus,
donde la primera es catalasa positivo y la segunda catalasa negativo.
Perxido de Hidrgeno
a. Catalasa
2 H2O2 J 2 H2O + O2
b. Peroxidasa
H2O2 + NADH + H+ J 2 H2O + NAD+
Superxido
a. Superxido dismutasa
2 O2- + 2 H+ J H2O2 + O2
b. Superxido dismutasa/catalasa en combinacin
4 O2- + 4 H+ J 2H2O2 + 3O2
c. Superxido reductasa
O2- + 2 H+ + cit creducido J H2O2 + cit coxidado

En base el requerimiento de oxgeno los microorganismos se han clasificado en:
x
Aerobios: utilizan el oxgeno y pueden detoxificarlo, dentro de estos se encuentran:

o Obligados o estrictos: requieren oxigeno para crecer, no pudiendo vivir sin l, con
una tensin de 21%. Ejemplo: Acinetobacter, Pseudomonas, Neisseria y la mayora de
los hongos.
o Facultativos: pueden vivir con o sin oxgeno pero crecen mejor sin l. Ejemplos:
Staphylococcus, Enterobacteriaceae, levaduras.
o Microaerfilos: requieren un nivel reducido de oxgeno, menor al 15% y una
atmsfera con CO2. Si se dispone una vela dentro de una jarra se obtiene una tensin
Prueba de la catalasa
Se ponen en un portaobjeto dos gotas de H2O2, se coloca una colonia de bacterias en una de las gotas, si en esta se producen
burbujas se dice que es catalasa positivo, el burbujeo se debe a la produccin de oxgeno, si el burbujeo es dbil se considera
negativo.
Test para determinar el requerimiento de oxgeno

Se realiza un cultivo en un caldo de tioglicolato, este contiene un agente reductor y provee de condiciones aerbicas y anaerbicas
simultneamente. Donde los aerobios obligados crecen solo en la superficie, los microaerfilos tienden a crecer en zonas cercanas a
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la superficie, los aerobios facultativos en todo el tubo y lo anaerobios al ser sensibles al oxgeno crecen en el fondo.
23
del 17%, lo cual es til para poder realizar cultivos de estas bacterias. Ejemplo:
Campylobacter, Heliobacter, Streptococcus.

Anaerobios: no utilizan el oxgeno, dentro de estos se encuentran:

o Aerotolerantes: toleran una tensin de oxgeno de hasta un 8%, pero crecen mejor
sin ste, estas bacterias tienen enzimas superxido dismutasa y catalasa o peroxidasa,
y son estas enzimas las que le permiten tolerar el oxgeno. Ejemplo: Streptococcus
pyogenes.
o Obligados: no requieren oxgeno, muriendo en presencia de este ya que no tienen la
batera enzimtica para detoxificarlo.
Moderados: soportan tensiones de oxgeno entre 2 y 8%, pero solo pueden
estar expuestos al aire entre 60 y 90 minutos sin perder viabilidad. Ejemplo:
Clostridium, Bacteroides.
Estrictos: toleran solo hasta 0,5% de oxgeno, perdiendo viabilidad
rpidamente, sin embargo estos no son de importancia clnica.

Superxido dismutasa Catalasa Peroxidasa
Aerobios obligados y la mayora de los
+
+
-
aerobios facultativos. (Enterobacterias)
La mayora de aerotolerantes (Enterococcus)
+
-
+
Aerobios obligados
-
-
-

Algunos enterococos presentan peroxidasas que en pruebas de laboratorio pueden confundirse con
catalasa, una enzima que no presentan estas bacterias.

Existen otros requerimientos de gas y de acuerdo a esto se encuentran los capnfilos, los cuales
requieren una tensin de CO2 entre 5 y 15% para su crecimiento inicial, ejemplo: Streptococcus
pneumoniae.

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Cultivo de organismos

El objetivo del cultivo de microorganismos es proveer de un medio adecuado para el crecimiento,
permitiendo identificar la susceptibilidad de la bacteria a determinados agentes qumicos y proveer
una herramienta teraputica, por medio de la obtencin de un cultivo puro de dicha bacteria, un
cultivo puro se basa en que un organismo da origen a una colonia, este organismo recibe el nombre
de unidad formadora de colonias (UFC), se obtienen realizando siembras por: estras por
agotamiento, diluciones seriadas, dilucin y siembra en profundidad.

Pera este objeto se han desarrollado distintos tipos de medios de cultivo, estos contienen los
nutrientes esenciales para que la bacteria pueda crecer, as existen medios definidos, es decir que su
composicin qumica y la concentracin exacta de sus nutrientes es conocida, lo cual tiene
implicancias en investigacin. En clnica se suelen usar medios complejos o no definidos, los que son
sustancias nutritivas que contienen algunos componentes, de composicin qumica no totalmente
definida, dentro de estos se encuentran:
x Simples: tienen bajos requerimientos nutricionales, en ellos crecen la mayora de las
bacterias, ejemplo: Agar Peptona.
x Enriquecidos: tienen adicin de sangre, suero, vitaminas u otros aditivos, ejemplo:
Agar Sangre.
x Selectivos: favorecen crecimiento de algunos tipos de organismos, inhibiendo el
crecimiento e otros, ejemplos: Agar SS, Agar Mac Conkey, Agar XLD, Agar Thayer
Martin, Lowenstein Jensen.
x Diferenciales: destacan caractersticas propias de un organismo, generalmente usan
un indicador de pH y lactosa, ejemplos: Agar SS, Agar Mac Conkey.

Los medios de cultivo pueden poseer distintas propiedades fsicas, pudiendo encontrarse medios:
x Lquidos: caldos, permiten un crecimiento homogneo pues no busca aislar sino que
su objetivo es propagar un cultivo puro, ejemplo: Infusin Cerebro Corazn.
x Slidos: permite aislar bacterias pues inmoviliza las clulas originndose colonias,
ejemplo: Agar Mac Conkey, Agar SS, Agar Sangre. Para realizar un medio de cultivo
slido se debe adicionar entre un 1 y 1,5% de Agar-Agar al medio lquido, luego se
funde a 80 o 90C, para luego solidificar a 40C. el Agar-Agar es un carbohidrato que
se obtiene de un alga, este es relativamente inerte y que por tanto no aporta
nutrientes, de modo que no se licua en presencia de bacterias al no ser digerida por
los microorganismos. El plaqueo de este tipo de agar se realiza a 50C, no debiendo
realizarse en caliente debido a la prdida de vapor de agua.
x Semislido: inmoviliza las bacterias hasta cierto porcentaje, permitiendo la movilidad
de las bacterias que poseen capacidad para ello, las que difunden en el medio; posee
alrededor de un 0,5% de Agar-Agar. Ejemplo: medio MIO, medio O/F, medio CTA.

Los medios de transporte evitan la muerte de los microorganismos de inters, pues mantienen el pH
y la humedad, por su composicin permiten la viabilidad de los microorganismos pero no su
multiplicacin, ejemplos: Stuart, Cary y Blair, Amies, etc.

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La morfologa de las colonias obtenidas permite identificar el

microorganismo, se puede citar como ejemplo Pseudomonas cuya colonia
tiene forma umbilicada, Nocardia con colonias de forma filamentosa o
rizada, Stafilococcus de forma circular y las colonias de cocos que son
puntiformes.

El crecimiento microbiano involucra la duplicacin del nmero de clulas y
por tanto la biparticin de su biomasa, la biparticin o fisin binaria
corresponde a la duplicacin de su material gentico y posterior divisin,
llamada citocinesis, en dos clulas hijas que poseen la misma informacin
que su predecesora, para esto la clula progenitora se agranda, duplica su
DNA y se forma un septum que separa las clulas hijas, este proceso de
multiplicacin es denominado gemacin en las levaduras.

El tiempo requerido para completar el ciclo de fisin binaria es llamado Tiempo Generacional o
Tiempo de Duplicacin, el nuevo ciclo de fisin aumenta la poblacin en un factor de dos, conforme a
esto las poblaciones microbianas muestran un crecimiento exponencial de base 2, es fcilmente
observable graficando el nmero de clulas en relacin con el tiempo en un grfico semilogaritmo. El
tiempo generacional vara desde minutos a horas:
Vibrio parahaemolyticus
Escherichia coli

Staphylococcus aureus
Campylobacter

Mycobacterium tuberculosis
Listeria monocytogenes
10-15 minutos
20 minutos

30 minutos
1,5 horas

13 horas

1,5 das

El crecimiento se puede medir realizando recuentos de clulas totales en cmaras de recuento, por
mtodos electrnicos o bien por absorciometra. Los recuentos de clulas viables se realizan en
medios slidos en profundidad o superficies. Otra forma de realizar los recuentos es por medio de
filtracin, proceso en el cual se filtra el medio para separar las bacterias de ste, lo cual se realiza
normalmente en agua potable y permite monitorear la calidad microbiolgica.

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El patrn de crecimiento de los microorganismos cuando son inoculados en un medio de cultivo
fresco es caracterstico.
a: FASE DE LATENCIA, el caldo presenta poca cantidad
de bacterias metablicamente activas, es un periodo
de adaptacin al medio y preparacin enzimtica.
b: FASE EXPONENCIAL, aumenta la turbidez,
crecimiento equilibrado a velocidad constante.
Ejemplo: E. coli se divide en dos cada 20 minutos.
c: FASE ESTACIONARIA, caldo turbio con gran
densidad ptica, se observa un botn de clulas en el
a b
c
d
fondo debido al agotamiento de nutrientes, de
oxgeno y de la acumulacin de desechos
metablicos, no hay crecimiento neto pues la tasa de
crecimiento iguala a la tasa de muerte celular.
d: MUERTE, las bacterias muertas se acumulan en el
fondo, esta muerte celular se debe a la falta de
energa para el mantenimiento celular, la disminucin
de clulas en el cultivo es exponencial y generalmente
hay lisis celular.

El Qurum sensing es un mecanismo evolutivo mediante el cual los miembros de una poblacin
bacteriana pueden comportarse cooperativamente alternando sus patrones de expresin gnica
(transcripcin) en respuesta a la densidad de la poblacin, expresando as ciertos tipos de
caractersticas, de esta forma la poblacin entera puede responder de una manera prctica ms
estratgica dependiendo de cun escasa o densa sea la poblacin. A medida que las bacterias de una
poblacin crecen, secretan una molcula de seal de qurum en el ambiente, cuando esta seal
alcanza una concentracin suficiente, o concentracin umbral, se desatan acciones poblacionales
concertadas, como ataques al organismo hospedero (Salmonella) o activacin de ciertos genes
codificantes de factores de virulencia. Ejemplos: Pseudomonas aeruginosa mediante qurum sensing
adquiere la capacidad de producir biofilms, Staphylococcus aureus, produce toxinas y en Bacillus
subtilis se estimula la esporulacin.
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Gentica bacteriana

La gentica es el estudio de los mecanismos por medio de los cuales los caracteres pasan de un
organismo a otro, este intercambio gentico incluye la transferencia de genes a travs de
recombinacin gnica, esta recombinacin es un proceso parasexual, en que no hay formacin de
gametos, sino que generalmente involucra la interaccin del genoma intacto de una bacteria con un
fragmento de otro genoma resultando una clula recombinante, se denomina Endogenote al
cromosoma original de la bacteria y Exogenote a la nueva secuencia de genes que se inserta en el
endogenote. La recombinacin gnica es unidireccional, pasando de un donante a un receptor,
incluso entre especies distintas, sta se produce por tres procesos: transformacin, conjugacin y
transduccin.
La transformacin es un proceso en que el DNA libre
proveniente del exterior se incorpora a una clula
bacteriana y se recombina con el cromosoma de esa
clula, para lo cual debe estar presente la enzima RecA
que permite la insercin de la nueva secuencia, as no
hay contacto entre clulas ni vectores. Cuando el
endogenote recibe al exogenote, la bacteria donante
pasa a llamarse transformante y la que la recibe es
llamada transformada. La transformacin ocurre solo en
bacterias que pueden captar un DNA de alto peso
molecular, captando incluso porciones de cromosomas o
cromosomas completos, estas clulas se denominan
competentes, antiguamente solo se haba descrito en
bacterias, sin embargo ocurre tambin en clulas
animales y vegetales, este proceso fue descubierto por
Fred Griffith cuando estudiaba Staphylococcus aureus, al
inyectar a unos ratones una mezcla cepas no capsuladas
con patgenas capsuladas muertas por calor, el ratn
muri, pese a que la cepa no capsulada no era virulenta,
habiendo comprobado previamente que la cepa
patgena muerta por calor era inocua para el animal;
esto se explica porque el cido nuclico de las bacterias
patgenas qued libre a causa del calor, y fue
incorporado a las no virulentas, traspasndose los genes
para la formacin de cpsula.
La transformacin ocurre en bacterias de los gneros Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus,
Acinetobacter, Haemophilus, Neisseria, etc. Las etapas de la transformacin son:
x Desarrollo de competencia y adsorcin del DNA transformante a la superficie bacteriana.
x Penetracin e incorporacin al citoplasma, donde protenas se unen y protegen al DNA
monotecario.
x Recombinacin, el cromosoma de la bacteria de rompe por accin de enzimas
determinadas y se incorpora la nueva secuencia, en regiones homlogas por medio de la
protena RecA.
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Las bacterias as transformada adquieren caractersticas nuevas, como es la expresin de antgenos,
la capacidad de fermentacin o la resistencia antimicrobiana.

a)
b)
c)

d)

La conjugacin es un mecanismo en el cual dos clulas se aparean,
transfirindose el material gentico directamente desde una bacteria a otra;
sta se lleva a cabo solo si la clula presenta plsmido F o factor F el cual
contiene la informacin que codifica para el pili sexual, el cual es un canal
tubular que permite el paso del cido nuclico del donante al receptor. La

no basta con tener el plsmido F para traspasar la
informacin, la bacteria donante que posee el plsmido F se llama F+ y la
receptora que no lo posee se denomina F-; cuando el plsmido F se integra al
cromosoma la bacteria se designa HFR (alta frecuencia de recombinacin), lo
cual significa que la bacteria adquiere una alta capacidad de transferencia y
eficiencia, siendo su frecuencia de conjugacin 1000 veces superior. Cuando
HFR se conjuga con una bacteria F- se transfiere adems parte del cromosoma
bacteriano, pues al liberarse el plasmidio de ste puede llevarse un fragmento
& &
transfiere a otra bacteria, este proceso se denomina Sexduccin. La
importancia de este proceso para las bacterias es la rpida diseminacin de la
resistencia contra antimicrobianos y produccin de factores de adherencia en
Gram+.

En la transduccin el DNA es transportado por un virus a la bacteria receptora, stos son virus
especficos llamados fagos bacterianos o bacterifagos, los que se hallan especializados para infectar
bacterias. Su estructura est conformada por una cabeza, un cuello retrctil, una capa basal y una
cola. La incorporacin del material gentico a la bacteria se puede realizar por dos tipos de ciclos:
ciclo ltico y ciclo lisognico.

x Ciclo ltico o Transduccin Generalizada, el virus se adosa a la bacteria e ingresa su
informacin al citoplasma bacteriano, el cual empieza a replicarse usando toda la maquinaria
Susan Arias Donoso
29
de la clula, que termina por destruirse. Este proceso es de baja frecuencia y en l cualquier
gen de la bacteria donante puede ser transferido.
Ciclo lisognico o Transduccin Especializada o Restringida, el

DNA del virus, se inserta en el cromosoma bacteriano, el cual
es replicado junto con el exogenote, luego el material gentico
viral puede escindirse del cromosoma y la bacteria puede
entrar al ciclo ltico o permanecer en el lisognico. Este mtodo
de transduccin tiene una frecuencia mayor y requiere
interacciones especficas.

Susan Arias Donoso
30
Los elementos genticos transferibles son secuencias de DNA capaces de mudarse de una
localizacin a otra, cuyas propiedades son poseer un movimiento al azar, y por tanto se denominan
, no poseen autorreplicacin, se han descrito en races, fagos, bacterias, hongos,
insectos y virus. Existen dos tipos de secuencias transferibles:
-
Secuencias de insercin (IS): son elementos que portan solo los genes de
transposicin o de insercin, como el gen de la enzima transposasa, la importancia de
estos radica en que en un opern se puede inactivar la expresin del gen y de los que
estn por delante del opern, ya que poseen secuencias de trmino de la
transcripcin o traduccin.

Transposones (Tn): son elementos que portan otros genes adems de los de
transposicin, los que pueden entrar y salir de los plasmidios, como genes de
resistencia a antibiticos.

Funciones de los genes bacterianos:

20% regula el metabolismo

10% transporte pasivo y activo.
10% regulacin de la replicacin del cromosoma y otros componentes celulares.

5%
estructural

5%
sntesis de protenas
50% funcin desconocida, presuntamente relacionados a mecanismos de resistencia y
patogenicidad.

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31
Las bacterias pese a ser de una misma especie pueden traducir distintos tipos de protenas, lo cual
determina la ubicacin anatmica especfica y patogenicidad de estas. As E. coli se clasifica en tipos
de acuerdo a las protenas que expresan; si se comparan los tipos O157, productora de enteritis
hemorrgica y Sndrome Hemoltico Urmico, MG1655 no patgena y CFT073, uropatgena; se puede
observar que existe un conjunto de protenas compartidas por todas ellas, correspondiente a un
39,2%; as mismo se encuentran protenas que son exclusivas de cada tipo de E. coli.

Del mismo modo las distintas especies bacterianas contienen distinto nmero de genes lo cual las
hace ser ms o menos patgenas, hallndose que E. coli posee alrededor de 4288 genes, contra 2100
genes en Neisseria meningitidis y 3924 en Mycobacterium tuberculosis; sin embargo, a pesar de que
E. coli tiene una mayor cantidad de genes no es la ms patgena, siendo N. meningitidis la ms
importante desde el punto de vista clnico; lo que da a entender que la calidad de los genes tiene
mayor trascendencia que la cantidad.

La regulacin de la expresin gnica est dada por induccin y represin, fenmenos que se
observan a nivel transcripcional y traduccional, esta regulacin es explicada por el Modelo del opern
propuesto por Franois Jacob que seala que la expresin de un grupo de genes estructurales est
regulada por genes de control (promotor y operador) y genes reguladores. El operador controla el
acceso de la RNA polimerasa al promotor, mientras que el gen regulador controla la velocidad y el
tiempo de transcripcin de los otros genes, codificando para protenas represoras que se unen al
operador obstruyendo al promotor, finalmente los genes estructurales codifican para las enzimas que
se necesita sintetizar.

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32
-
Opern lactosa; el inductor es la lactosa, existe una protena represora activa unida al
represor, al unirse la lactosa a sta protena, se libera, permitiendo el inicio de la
transcripcin de los genes que codifican para la B galactosidasa.
Opern triptfano: el triptfano es la molcula correpresora, por tanto al estar

presente y acoplarse al represor, este se une al opern e impide la transcripcin.

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33

La secuencia de bases del DNA de una bacteria puede sufrir cambios estables y heredables producto
de la adaptacin al medio, lo que da cuenta de la evolucin, estos cambios reciben el nombre de
mutaciones, llamndose, por tanto, mutante a cualquier microorganismo que difiera de la clula de
tipo silvestre, presentando al menos una mutacin, visible o no. las mutaciones pueden clasificarse de
acuerdo a su origen, tamao o calidad:

TAMAO
x Mutaciones puntuales: cambio de un nucletido en particular o un par de ellos. Dentro de
ellas se encuentran:
o SILENCIOSAS, en que ocurre una sustitucin de uno o dos nucletidos pero el
codn sigue codificando el mismo aminocido.
o CON SENTIDO EQUIVOCADO, el codn produce un aminocido distinto por el
cambio de una base o dos.
o SIN SENTIDO, generacin de un codn de trmino de la transcripcin donde puede
resultar una protena no funcional por el trmino abrupto de su sntesis.
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34
o
POR CORRIMIENTO DE MARCO DE LECTURA: numerosos codones equivocados se

transcriben sin sentido y se producen protenas afuncionales.

CALIDAD
x Mutaciones estructurales: cambios en el contenido de nucletidos del gen.
o SUSTITUCIN, es un cambio de un nucletido por otro el cual puede ser de dos
tipos:
Transicin: se cambia una purina (Adenina o Guanina) por otra purina o bien
una pirimidina (Citosina o Timina) por otra pirimidina.
Transversin: se cambia una purina por una pirimidina o viceversa.
o DELECIN, se pierden porciones del gen.
o INSERCIN, se agregan nucletidos extras en el gen y por lo tanto se produce una
expresin completamente distinta.

ORIGEN
x Mutaciones espontneas: permiten a la bacteria mantenerse en ambientes restrictivos. Su
origen es desconocido y ocurren al azar durante la replicacin del DNA al incorporarse nuevos
nucletidos, la frecuencia de estas mutaciones es baja.
o Tasa de mutacin: es la probabilidad de que se produzca una mutacin por clula
por generacin, es constante para una tasa de crecimiento elevado. Una tasa de
mutacin igual a 1x10-8 significa que una bacteria cada 100 000 000 muta en forma
espontnea.
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35
x Mutaciones inducidas son provocadas por un elemento externo qumico o fsico, el que
recibe el nombre de mutgeno, aumentando la frecuencia de mutantes.
o MUTGENOS FSICOS
Radiaciones ionizantes: cambian la valencia qumica de los elementos.
Ejemplos: Z y
Radiaciones No ionizantes: elevan los niveles de energa de los tomos
hacindolos inestables. Ejemplos: Radiacin UV o calor, los rayos UV producen
dmeros de Timina, perdiendo el emparejamiento especfico y produciendo
transiciones y transversiones por errores en la replicacin.
MUTGENOS QUMICOS
Acridina, se utiliza para teir bacterias (RNA naranjo, el DNA verde) la que se
observan bajo microscopia de fluorescencia, ste se intercala entre las bases
produciendo adicin o delecin.
Acido nitroso: convierte la adenina en hipoxantina y la citosina en uracilo.

5-bromouracilo: reemplaza a timina en el DNA por analoga con ella. Provoca
d'
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36
Aflatoxina B: es una toxina producida por algunos hongos (Aspergillus flavus y

Aspergillus parasiticus), sta genera un sitio apurnico (se pierde G) perdindose el
emparejamiento especfico y mutando al codn del represor del gen relacionado
con la gnesis de tumores.
Los mutantes pueden ser resistentes o susceptibles a antibiticos, metales pesados, salinidad, pH,
temperatura, bacterifagos, entre otros. Se denomina resistente a toda aquella bacteria capaz de
crecer en un medio restrictivo, por el contrario aquellas que mueren en un medio de estas
caractersticas se denominan susceptibles. As tambin pueden hallarse cepas mviles e inmviles,
capsuladas y acapsuladas, pigmentadas y apigmentadas, etc.
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37
Clasificacin y taxonoma bacteriana

La taxonoma es la ciencia de la clasificacin, se encarga de describir y denominar a individuos en un
determinado ordenamiento, reuniendo a los individuos con caractersticas comunes en taxas; para la
microbiologa la unidad taxonmica bsica es el clon, el que se obtiene en un cultivo puro.

En 1866 Haeckel agrup los organismos en tres reinos: Animalia, Plantae y Protista, donde el ltimo
englobaba a todos los organismos unicelulares. Luego en 1950 si introducen cambios en esta
clasificacin, establecindose cuatro reinos: Animalia, Plantae, Protista y Monera/Procariota este
inclua a los organismos microscpicos. Finalmente en 1967 Whittaker establece cinco reinos:
Animalia, Plantae, Monera, Protista y Fungi, el reino Protista estaba compuesto por los organismos
eucariontes unicelulares y Fungi por los eucariontes pluricelulares que no son animales ni plantas.

Actualmente, basado en los estudios filogenticos de Woese sobre el rRNA 16S, se han eliminado
los reinos, establecindose en su reemplazo 3 dominios:
- Eukaria: organismos con ncleo y compartimentalizados, incluye todos los organismos
multicelulares y algunos unicelulares, agrupando as a los reinos Protista, Fungi, Plantae y
Animalia.
- Bacteria: organismos no compartimentalizados. Contiene organismos que antiguamente
pertenecan al reino Monera.
- Archae: agrupa los organismos unicelulares con membranas caractersticas y genoma
muy alejado del bacteriano. Tambin posee organismos que antiguamente pertenecan
al reino Monera.

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38
Los taxones o taxas renen a los individuos que comparten una caracterstica en comn y son
considerados como una unidad en cualquier rango del sistema de clasificacin, estos rangos son:
x
x
x
x
x
x
x
x
Dominio
Phylum
Clase
Orden
Familia
Gnero: grupo bien definido de una o ms especies que est claramente separada de
otros gneros.
Especie: grupo taxonmico bsico, es la coleccin de cepas que comparten numerosas
propiedades estables y que difieren de forma significativa de otros grupos de cepas.
Sub-especie: Las categoras para la clasificacin a nivel de subespecies o tipificacin
son:
Serovariedad o serotipos: antgenos distintos.
Fagovariedad: tipificacin por fagos.
Biovariedad: diferencias bioqumicas y fisiolgicas.
Patovariedad: patogenicidad.
Morfovariedad: diferencias morfolgicas.
Genomovariedad: grupos con DNA similares.

Una cepa bacteriana es una poblacin de microorganismos que desciende de un nico organismo o
de un aislamiento en cultivo puro.

La taxonoma rene tres elementos fundamentales que son: la clasificacin, la nomenclatura y la
identificacin. La primera corresponde al ordenamiento de los microorganismos en taxas en base a
semejanzas e interrelaciones; la nomenclatura es la asignacin de nombres a los microorganismos, los
cuales cumplen con el sistema binomial del botnico sueco Carl von Linneo, donde el nombre se
asigna en latn y se escribe en cursiva, estando el nombre genrico escrito con mayscula y el nombre
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39
de la especie con minscula, ejemplo: Escherichia coli; la identificacin es la realizacin de distintas

pruebas para llegar al nombre de las bacterias.

>
^ . Bergey sistematiz, en 1923, la clasificacin
bacteriana de acuerdo a los requerimientos nutricionales, caractersticas de cultivo y pruebas
bioqumicas, hallndose una forma determinativa, basado en caractersticas fenotpicas y una forma
sistemtica, basado en caractersticas genticas. El manual de Bergey (ver Anexos) contiene tablas
comparativas que diferencian entre taxas y tablas descriptivas que aportan informacin adicional.

El phylum proteobacteria agrupa bacterias Gram negativas y se divide en cinco:
(Rickettsia), E proteobacteria (Neisseria), Enterobacter),
Campylobacter y Helicobacter).

Existen dos sistemas imperantes de clasificacin de los microorganismos, uno fentico, que agrupa a
los microorganismos en funcin de sus semejanzas fenotpicas, como forma, color, etc.; y otro
filogentico, que los agrupa de acuerdo a sus probables relaciones evolutivas, de acuerdo a ancestros
comunes.

El sistema fentico presenta dos tipos de taxonoma, una clsica y una numrica. La primera
pondera caractersticas fenotpicas utilizando llaves de colonias, tambin llamadas claves
dicotmicas; la numrica establece la similitud en funcin la proporcin de caractersticas comunes,
donde cada caracterstica tiene igual peso, asignndoseles un nmero a cada una en caso de que el
microorganismo posea dicha caracterstica; as el taxn es definido con el mayor nmero de
caractersticas posibles, las que son independientes de la filogenia.

Las caractersticas que evala el sistema fentico son:
o Luminiscencia.
x Genticas:
o Mecanismo de conversin de energa.
o Posibilidad de recombinacin gentica
o Movilidad.
por conjugacin o transformacin.
o Tolerancia osmtica.
o Presencia de Plsmidos.
o Relaciones con el oxgeno.

o pH ptimo de crecimiento.
x Ecolgicas:
o Pigmentos fotosintticos.
o Ciclo vital.
o Necesidad y tolerancia a la sal.
o Relaciones simbiticas.
o Metabolitos secundarios.
o Patogenicidad.
o Sensibilidad a antibiticos.
o Preferencia del hbitat

o Necesidad de temperatura, pH.
x Morfolgicas:
o Necesidad de oxgeno.
o Forma celular.
o Necesidad de concentracin osmtica.
o Tamao de las clulas.

o Morfologa de las colonias.
x Fisiolgicas y Metablicas:
o Caractersticas ultraestructurales.
o Fuentes de C y N.
o Tincin: Gram (forma agrupacin,
o Componentes de la pared celular.
morfotipo), Ziehl-Neelsen, esporas,
o Fuentes de energa.
bitralbina, Neisser.
o Productos de fermentacin
o Cilios y flagelos.
o Tipos de nutricin.
o Mecanismos de movilidad.
o Temperatura de crecimiento.
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40
o Forma y localizacin de las endosporas.
o Inclusiones celulares.
o Color.

x Pruebas bioqumicas:
o Pruebas de familia: catalasa y oxidasa (de
mucho peso taxonmico)
o Pruebas para cocos Gram +:
Enterococcus: Bilis-esculina+

Pruebas realizadas
Fermentacin de
Glucosa
Sacarosa
Lactosa
Fructosa
Manosa
Arabinosa
Galactosa
Ramnosa
Celobiosa
VP
RM
Lectinasa
DNAsa
Catalasa
Citocromo oxidasa
Reduccin de NO3-
1

+
+
+
+
-
-
-
+
+
+
+
+
-
-
-
-

Matriz de Similitud
OTU
1
1
1
2
0,5
3
0,69
4
0,25

Susan Arias Donoso
Cepas (OTU)
2
3

+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
-
+
+
-
-
+
+
-
+
-
+
-
+
-
-
-
4

+
-
-
-
-
+
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
Staphylococcus: coagulasa, manitol

Glucosa aerobia y anaerobia.
Streptococcus: tolerancia a la sal.
Nipurato, sensibilidad a bacitracina
Gram-:
IMVIC, Urea, Nitrato, Citrato, TSI,
etc.
x Serologa: permiten reconocer
especies.
Para la clasificacin de cepas bacterianas por

el mtodo numrico se deben seguir los
siguientes pasos:
1. Eleccin de unidades taxonmicas
operativas (OTU)
2. Eleccin de caracteres/codificacin de
datos
3. Construccin de la matriz bsica de datos
(MBD)
4. Obtencin de un coeficiente de similitud
para cada par de OTU:
Coeficiente de apareamiento simple (SSM):
SSM = no. de carac. que coinciden
no. de carac estudiadas

5. Construccin de un dendograma o Mtodo

de Ligamiento Promedio, el cual
corresponde a una representacin grfica
que permite visualizar rpidamente las
relaciones entre las distintas OTU.
Dendograma
2

1
0,43
0,62
3

1
0,19
4

1
41
El sistema filogentico se basa en los estudios de Woese sobre el rRNA 16S,

el que junto con el gen RecA y el gen de la enzima ATPasa se han mantenido
altamente conservados pese a las distancias evolutivas, actuando como
marcador de evolucin, el rRNA 16S se halla presente en la subunidad 30S
del ribosoma 70S, es de distribucin universal, estando presente en todos
los organismos con funcin homloga y conocida en todos ellos; por otro
lado no existe transferencia horizontal, es decir que no existe transferencia
de material gentico desde una bacteria a otra en el mismo hbitat que
compartan, transfirindose solo a la descendencia.

El ribosoma 70S se halla compuesto por protenas y RNA y est compuesto
por dos unidades de diferente peso, una 50S o subunidad mayor y una 30S o
subunidad menor, el primero est constituido por 31 protenas, rRNA 23S y
rRNA 5S; el segundo contiene 21 protenas y rRNA 16S. La principal ventaja
de su utilidad es la presencia de un gran nmero de copias en el citoplasma
bacteriano.

Primero se debe aislar el material gentico del microorganismo
obtenindose el gen que codifica para el rRNA16S, luego se realiza un PCR
para amplificar la muestra obtenida y se establece por secuenciacin la
estructura del gen, el resultado obtenido se compara con la secuenciacin
de otro organismo, establecindose las relaciones filogenticas.

El porcentaje de guanina (G) ms citosina (C) es una caracterstica empleada para determinar cun
emparentados estn los microorganismos, donde a mayor porcentaje, ms cercanos evolutivamente
estn, el inconveniente de ste se encuentra en que solo puede ser utilizado para bacterias en que el
DNA esta secuenciado y aporta poca informacin taxonmica; se calcula:

% (G + C) =
G + C x 100

G + C + A + T

La cantidad de nucletidos se determina mediante: un gradiente de CsCl, determinacin trmica,
donde a mayor temperatura de denaturacin mayor es la cantidad de guanina+citosina, o
cromatografa. En clulas procariotas el rango de porcentaje es amplio abarcando desde un 20% a un
80%. Los criterios de exclusin para este mtodo son:
x
Si dos microorganismos tienen una diferencia de porcentaje G + C:

o >3% probablemente son dos especies diferentes. Ej.: Staphylococcus aureus
54%(G+C) y Staphylococcus epidermidis 59%(G+C), la diferencia es de
5%(G+C) por lo que pertenecen a especies distintas.
o
>10% probablemente son gneros diferentes. Ej.: al comparar Neisseria que

presenta un 60%(G+C) con Escherichia coli que presenta 48%(G+C) se
obtiene una diferencia de 12% y por tanto pertenecen a gneros diferentes.
Susan Arias Donoso
42
Una tercera forma para establecer el emparentamiento de dos especies es la hibridacin DNA
DNA, que mide el grado de similitud entre secuencias de DNA de dos microorganismos, permitiendo
la diferenciacin de microbios similares en forma ms exacta que el porcentaje G + C.
x >70% misma especie.
x >25% mismo gnero.
x <25% diferente gnero.

En general se cumple que si la secuencia del rRNA 16S difiere en ms de un 3% con el resto de
secuencias conocidas, entonces el porcentaje DNA DNA es menor del 70% y por tanto son especies
diferentes.

Actualmente la clasificacin taxonmica es polifsica, es decir que se basa en un consenso que
integra caractersticas fenotpicas clsicas, numricas, el perfil de protenas y de enzimas;
caractersticas genotpicas clsicas (%G+C), moleculares (Hibridacin DNA-DNA), fingerprinting
(perfiles moleculares por restriccin o amplificacin de DNA); y caractersticas filogenticas.

Susan Arias Donoso
43
Control de Crecimiento Bacteriano

Esterilizacin y desinfeccin

El control del crecimiento microbiano en una superficie inanimada se clasifica en dos tipos
principales, esterilizacin y desinfeccin. La esterilizacin consiste en la eliminacin completa de los
microorganismos incluyendo formas vegetativas, formas de resistencia (esporas), virus sin envoltura y
hongos, mientras que la desinfeccin es el proceso de eliminacin de la mayora de stos, sin incluir
formas de resistencia.
Existen otros tipos de control de crecimiento:
- Descontaminacin: es el tratamiento que permite la manipulacin sin riesgo de un objeto o
superficie inanimada.
- Inhibicin: es la reduccin del crecimiento microbiano debido a un descenso en el nmero
de microorganismos presentes o alteracin del ambiente.
- Sanitizacin: reduccin de la poblacin de microorganismos a niveles considerados como
seguros para la salud pblica, esto es lo que se hace con el agua potable y con la
pasteurizacin pues elimina los microorganismos que son nocivos pero no a todos ellos.

Para efectuar estos procesos se pueden emplear mtodos fsicos, como temperatura, filtracin,
radiacin ultravioleta, radiacin ionizante; y qumicos, como alcoholes, fenoles (hexaclorofeno,
cresol), iones de metales pesados, algunos agentes oxidantes (cloro, yodo, perxido de hidrgeno),
agentes alquilantes (formaldehido, glutaraldehido, xido de etileno), agentes tensioactivos (derivados
de amonio cuaternario) y algunos colorantes.

Mtodos fsicos

TEMPERATURA:
o Calor seco directo: Flameado, incineracin.

o Calor seco con aire caliente: se realiza en estufas u hornos con circulacin de aire caliente.
La temperatura utilizada es de 180 C por una hora, 160 C por dos horas, o 121 C por 16
horas. Se deben usar controles que indican si la esterilizacin fue efectiva. Es utilizado para
material quirrgico, placas Petri, material de vidrio, sustancias en polvo, no acuosas, y
sustancias viscosas no voltiles. Sus ventajas radican en que no es corrosivo para los metales
y sus desventajas en que requiere un mayor tiempo de exposicin con respecto al calor
hmedo, debido a la baja penetracin del calor.

o Calor hmedo con presin: produce la desnaturalizacin y coagulacin de las protenas
dependiendo de la temperatura aplicada, la duracin del proceso, el tamao del autoclave,
donde a mayor tamao mayor es el tiempo que se demora en alcanzar la temperatura; la
densidad del producto que se requiere esterilizar y el tamao del contenido. Se deben
utilizar controles fsicos o qumicos que aseguran haber alcanzado la temperatura ptima
por el cambio de color, habiendo algunos donde el cambio es gradual y por tanto permiten
saber por cunto tiempo se mantuvo dicha temperatura; adems se deben incluir controles
Susan Arias Donoso
44
biolgicos que corresponden a un medio de cultivo que contiene un microorganismo
esporulado, si al inocular otro medio con este contenido no hay crecimiento quiere decir
que la esterilizacin ha sido exitosa.

La autoclave es un sistema hermtico que utiliza vapor de agua a alta presin, logra
aumentar la temperatura a 121 C a ms de una atmsfera. En forma inicial la autoclave se
satura con vapor de agua, para lo cual sta se calienta hasta la emisin de vapores (80 C)
que pasan al interior del sistema, una vez saturado se ingresa el material y se cierran las
vlvulas, comenzando a aumentar la presin y la temperatura hasta su estabilizacin. El
nmero de clulas disminuye en forma exponencial o logartmica, as el tiempo mnimo de
exposicin es de 7 minutos para que el proceso sea efectivo. Cuando es material limpio se
esteriliza durante 10 a 15 como mnimo, pero en caso de material contaminado se debe
aumentar el tiempo hasta media hora aproximadamente.

Las ventajas de la autoclave se encuentran en que el calentamiento es rpido, tiene buena
penetracin en los objetos y destruye bacterias y esporas en corto tiempo (15 20 min), sin
dejar residuos txicos y provocando un bajo deterioro de los objetos, adems es un mtodo
econmico, sin embargo no permite descontaminar medios con carbohidratos, pues estos
se caramelizan, con protenas, que se desnaturan, o con antibiticos, adems puede ser
corrosivo en ciertos metales.
o Calor hmedo sin presin (tindalizacin): el material se somete en reiteradas ocasiones a un
proceso de calentamiento, por ejemplo, ebullicin por 10 minutos a intervalos separados en
varias sesiones. Este proceso se puede realizar en autoclave pero sin cerrar la vlvula de
presin de modo que se mantiene la ebullicin a 100 C, tambin se puede realizar a
temperaturas ms bajas entre 56 y 80 C para evitar la descomposicin de algunas
sustancias. Este proceso no garantiza esterilizacin.

o Ebullicin: se utiliza para eliminar y descontaminar los materiales. Desprende las colonias
adheridas a los utensilios y destruye los microorganismos susceptibles a la temperatura.

o Pasteurizacin: es un proceso que disminuye la carga microbiana patgena o causante de
deterioro de un producto, es ampliamente utilizada en el mbito alimenticio.
Susan Arias Donoso
45
Flash o HTST (alta temperatura/corto tiempo): el lquido se hace pasar por un

intercambiador de calor, habitualmente placas de aluminio por su gran poder
disipador de calor, que se calienta a 72 C por 15 s y se enfra rpidamente a 10 C,
la rpida variacin de temperatura permite eliminar una gran variedad de
microorganismos, principalmente patgenos como Listeria, E. coli y Mycobacterium.
En masa, LTLT (baja temperatura/largo tiempo): el lquido se calienta entre 60 y 70
C durante 30 minutos tras lo cual se deja enfriar.
Ultra pasterizacin, UHT (Ultra high temperature): el lquido se somete a 138 C
durante 2 segundos, el shock trmico no altera las caractersticas organolpticas de
los alimentos.

FILTRACIN:
Consiste en pasar soluciones por un filtro con una membrana que retiene todos los elementos, se
utilizan filtros con diferentes tamaos de poros segn los requerimientos, los ms utilizados son
o membranas de nylon con poros de 0,22 um de dimetro, permitiendo filtrar una
gran cantidad de microorganismos, sin embargo estos no retienen virus ni Mycoplasma pues estn
en el lmite de separacin del poro. Este mtodo se utiliza para emulsiones oleosas, soluciones
termolbiles, aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, intravenosas, drogas
diagnsticas, radiofrmaco, medios de cultivos celulares, soluciones de antibiticos y vitaminas. Las
campanas de bioseguridad poseen filtros HEPA constituidos por fibras de vidrio muy finas
entrelazadas que atrapan la mayora de los microorganismos.

RADIACIN:
o Radiacin ultravioleta: Afecta las molculas de DNA de los organismos. Se ocupa
principalmente en agua, aire (aires acondicionados), emulsiones, sales, superficies y para la
esterilizacin de quirfanos, no penetra el vidrio. Para la descontaminacin de superficies se
debe irradiar por lo menos 15 minutos, considerando que a mayor mJ/cm2 ms efectiva es
la esterilizacin.

o Radiacin ionizante o radioactividad: Los compuestos emiten radiaciones ionizantes de tres
, para esterilizar se usa principalmente tiene un mayor
poder de penetracin, la radiacin o ms pero puede
atravesar una persona. stas producen iones y radicales libres que alteran las bases de los
cidos nuclicos, estructuras proteicas y lipdicas, componentes esenciales para la viabilidad
del organismo, tiene gran permeabilidad lo que permite esterilizar materiales termolbiles
como jeringas desechables y sondas. Este mtodo es muy costoso. En el mbito industrial se
utiliza en frutas para prolongar su vida til sin alterar sus propiedades organolpticas.

Mtodos qumicos

Los agentes qumicos pueden actuar de cinco formas distintas:
o Dao al DNA: se unen a las bases (agentes alquilantes)
o Desnaturalizacin de protenas: rompe estructura terciaria (alcoholes, fenoles)
o Rotura de la membrana o pared: alteracin de propiedades fsico-qumicas (alcoholes,
fenoles, detergentes, colorantes)
o Eliminacin de grupos sulfhidrilos libres: inactivan enzimas
o Antagonista qumico: interfiere el complejo enzima-sustrato (metales pesados, cloro, yodo)
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46
Fenoles: Provocan lesiones en la membrana citoplasmtica desordenando la disposicin proteica y
fosfolipdica, esto causa la filtracin de los compuestos celulares, la inactivacin de enzimas y la
consecuente lisis celular. Son muy efectivos a bajas concentraciones contra las formas vegetativas de
las bacterias pero no contra las esporas. Su grado de desinfeccin puede ser intermedio o bajo. A este
grupo pertenecen el hexaclorofeno y el cresol.
Alcoholes: Lesionan la membrana celular de los microorganismos al desnaturalizar protenas
celulares, no destruyen esporas y su accin germicida es lenta. Los alcoholes de cadena corta tienen
un efecto nocivo mayor que los de cadena larga y los ms utilizados son el etanol y el isopropanol a
una concentracin que va de 50 a 70% y algunos hasta 90%.
Agentes oxidantes: Dentro de ellos se encuentra el agua oxigenada que es un antisptico dbil con
capacidad oxidante, forma hidroxilos y radicales libres que atacan a una amplia variedad de
compuestos orgnicos, como lpidos y protenas, que son componentes de las membranas celulares
de los microorganismos, particularmente, se utiliza para microorganismos anaerobios, pues produce
oxgeno que es txico para ellos. El agua oxigenada en estado gaseoso se utiliza como desinfectante
de superficies o de gabinetes biolgicos ya que no tiene propiedades txicas ni cancergenas como el
xido de etileno y el formaldehido.
Cloro: Es el desinfectante que ms se utiliza en el laboratorio para descontaminar. Oxida los grupos
sulfhidrilo y ataca los grupos aminos, indoles y el hidroxifenol de la tirosina.
Yodo: Modifica grupos funcionales de protenas y cidos nuclicos, inactiva protenas y enzimas por
la oxidacin de los grupos sulfhidrilo y puentes de dislfuro pudiendo atacar los grupos aminos y los
ndoles entre otros.
Agentes alquilantes: Actan sobre las protenas modificando irreversiblemente las enzimas e
inhibiendo su actividad, generalmente por accin nucleoflica de los grupos amino y sulfhidrilo.
o Glutaraldehido: es el nico esterilizante efectivo en frio.
o Formaldehido: se usa como gas para descontaminar ambientes y quirfanos, es muy
irritante y tiende a perder efecto al ser refrigerado, se utiliza como desinfectante y como
esterilizante pues destruye esporas. En gas se deja actuar por 36 horas. El grado de
desinfeccin del formaldehido 3 a 8% puede ser alto o intermedio.
o Oxido de etileno: es un gas que se utiliza para esterilizar, se une a compuestos con
hidrgenos lbiles como los que tienen los grupos carboxilos, aminos, sulfhidrilos e
hidroxilo. Se utiliza en forma gaseosa para esterilizar material termosensible (material
desechable, material de plstico, equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias). Las
desventajas que tiene es que es muy peligroso siendo inflamable, explosivo y cancergeno.
Tensioactivos: Lesionan la membrana celular al desordenar la disposicin de las protenas y los
fosfolpidos liberando los metabolitos de las clulas, intervienen con el metabolismo energtico y
transporte.
o Agentes tensioactivos aninicos: como jabn y cidos grasos que tienen mayor actividad a
pH cido y son efectivos contra microorganismos Gram+.
o Agentes tensioactivos anfteros: actan como catinicos (pH cido) o aninicos (pH bsico).
o Agentes tensioactivos catinicos: comprenden las sales de amonios cuaternarias (lysol,
lisoform). Tienen mayor actividad en pH alcalino. Las bacterias Gram+ son ms susceptibles
a este tipo de compuestos.

Susan Arias Donoso
47
Colorantes: Tienen dos mecanismos de accin principales: interfieren con la sntesis de cidos
nuclicos y protenas; y actan sobre la pared.
o Acridina: Interfiere en la sntesis de cidos nuclicos, se inserta entre dos bases sucesivas de
DNA separndolas fsicamente y causando una lectura errnea y consecuente sntesis
defectuosa, produciendo la muerte la bacteria.
o Derivados de trifenilmetano (violeta de genciana, verde de malaquita, verde brillante):
bloquean la conversin del cido UDP-acetilmurmico en UDP-acetilmuramil-pptido.

Compuestos rganos mercuriales: Se combinan con los grupos sulfhidrilos de las protenas
inactivando las enzimas. Los ms utilizados son el metafem y mertiolate (metapio utilizado como
antisptico), en parsitos se ocupa el merquilate.

La eficacia de una sustancia qumica depende de la concentracin, del microorganismo, el tiempo
de exposicin, necesitan un tiempo de accin de al menos 15 o 30 minutos, dependiendo del tipo de
desinfeccin buscada y el tipo de agente utilizado, tambin depende del pH, que determina el grado
de disociacin y por tanto la efectividad del agente qumico, donde a menor disociacin mayor
permeabilidad y mayor efectividad del agente; otro factor que influye en la eficacia es la temperatura,
ya que algunos agentes tienen mayor efectividad en frio, mientras que otros se inactivan a bajas
temperatura; y adems es condicionada por la presencia de materia orgnica, ya que sta interacta
con el compuesto qumico, perdindose una parte de ste.
Los desinfectantes se pueden clasificar segn el grado de desinfeccin, el cual depende de la forma
y la concentracin:
o
o
o
Alto grado: se utilizan para objetos empleados en procedimientos invasivos que no

soportan los mtodos de esterilizacin, como las mangueras de los ventiladores
mecnicos. Se produce esterilizacin. Ejemplo: agua oxigenada 3 a 25%
Grado intermedio: para limpieza de superficies o instrumentos con baja probabilidad de
que se encuentren esporas. Ejemplo: alcohol 70 a 95%
Bajo grado: para limpieza de superficies o elementos no crticos. Ejemplo: Compuestos
de amonio cuaternario 0,4 1,6%
Antisepsia
La antisepsia se utiliza para reducir el nmero de microorganismos presentes en la superficie
cutnea y mucosa. Estos compuestos se seleccionan segn su seguridad y eficacia. Entre los
antispticos ms utilizados estn:

La clorhexidina y el triclosn se utilizan en
enjuagues bucales.

El agua oxigenada se utiliza en
procedimientos de ortodoncia ya que la
mayora de los microorganismos de la va
oral son anaerobios.
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48
Los agentes qumicos se clasifican segn el tipo de efecto que ejercen en los microorganismos en:
-
-
-
Microbicidas: mata la clula sin provocar lisis. Dentro de ellos se encuentran bactericidas,
viricidas y fungicidas.
Agentes lticos: provocan lisis.
Agentes estticos: inhiben el crecimiento de los microorganismos, se clasifican en:
bacteriosttico, viristtico o fungisttico, generalmente al retirar el agente esttico el
microorganismo vuelve a crecer. Estos agentes afectan el crecimiento de distintas formas, el
estudio de la curva de crecimiento es importante para conocer su mecanismo de accin.
En el caso de los bacteriostticos o bactericidas se observar turbidez en los medios de cultivo

lquidos ya que no hay destruccin de la clula, para verificar si el efecto fue bacteriosttico o
bactericida se realizan cultivos del contenido de medio, si hay crecimiento quiere decir que el efecto
fue bacteriosttico. En el caso de los bacteriolticos al destruir la bacteria el medio pierde turbidez.
Los desinfectantes y antispticos deben tener un alto poder germicida, ser estables, solubles, de
fcil acceso, no txicos, no irritantes y no corrosivos, adems deben tener un gran poder de
penetracin, no tener mal olor, idealmente no deben manchar y deben ser de bajo costo.
Para establecer la actividad microbiana se puede determinar la Concentracin Mnima Inhibitoria
(CIM) que es la concentracin ms pequea del agente antimicrobiano que se necesita para inhibir el
crecimiento de un organismo, para calcularla se pueden realizar diluciones seriadas con el agente a
testear, que se siembran y se incuban para posteriormente observar cual es la mnima concentracin
que inhibi el crecimiento segn la turbidez del medio. Otra forma de determinar la CIM es mediante
E-test, usando un epsilmetro que tiene una concentracin decreciente de la sustancia, generndose
un halo elptico de inhibicin, la CIM es la concentracin donde la parte ms delgada del halo
intercepta la tira.
Susan Arias Donoso
Desinfectantes y esterilizantes
antispticos
Agente
Aplicacin
Nitrato de plata

Compuestos fenlicos (triclosan,
cloroxilenol,
hexaclorofenol,
clorhexidina)
Detergentes catinicos, amonios
cuaternarios
(cloruro
de
benzalconio)
Ojos de RN, previene oftalmia y ceguera Precipita protenas

provocada por N. gonorrhoeae
Desodorantes, cosmticos jabones, Altera
(rompe)
lociones
membrana celular.
49
Modo de Accin
Jabones, lociones.

la
Interacciona con los

fosfolpidos
de
la
membrana.
Perxido de hidrgeno (solucin Piel.

al 3%)

Desnaturaliza protenas
y disuelve lpidos.
Alcohol (60-85% etanol,

isopropanol en agua)
Agente oxidante

o Piel

Compuestos yodados

Piel.

Yodo se combina con

residuos de tirosina,
agente oxidante.
Alcohol (60 85% etanol o

isopropanol en agua)
Detergentes catinicos, amonios
cuaternarios.
Desinfecta y esteriliza superficies de

laboratorio y material mdico
Desinfecta alimentos, equipos de la
industria lctea e instrumental mdico,
Disuelve lpidos y
desnaturaliza protenas
Interacciona
con
fosfolpidos
Gas cloro.

Desinfectante para la purificacin de Agente oxidante

suministros de agua.

Compuestos clorados (dixido de

cloro, cloraminas, hipoclorito
sdico)
Sulfato de cobre

Desinfectante para equipos

industrias alimenticias y lcteas.
Oxido de etileno (gas)

Formaldehido

Esteriliza materiales termosensibles.

Agente alquilante
3 8% desinfecta superficies. Formalina Agente alquilante
(37%) o vapor como esterilizante.

Glutaraldehido
Perxido de hidrgeno
Compuestos yodados

2% desinfectante de nivel alto.

Agente alquilante
Vapor como esterilizante
Agente oxidante
Desinfecta instrumental mdico y Yodo se combina con
superficies de laboratorio
los residuos de tirosina
Dicloruro de mercurio

Desinfecta superficies de laboratorio

Se combina con grupos

SH
Ozono
Desinfecta agua potable
Fuerte agente oxidante
cido peractico
Compuestos fenlicos
0,2% alto nivel de desinfeccin

Desinfecta superficies de laboratorio
Fuerte agente oxidante

Desnaturaliza protenas
de Agente oxidante

Alguicida para piscinas, desinfectante de Precipita protenas

agua.

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50
Drogas antimicrobianas

Farmacocintica y Farmacodinamia de drogas antimicrobianas

La farmacocintica corresponde a los cambios que el organismo realiza sobre las drogas, lo cual
involucra una serie de procesos que son: absorcin, distribucin, biotransformacin y excrecin, esto
es lo que condiciona la dosis administrada y la concentracin que finalmente tendr el frmaco en el
sitio de accin.

La absorcin es la velocidad con que un determinado compuesto alcanza el torrente
sanguneo, de ella depende la biodisponibilidad, que corresponde al grado con que un frmaco
llega a su sitio de accin, esta depende de la solubilidad y por tanto de la naturaleza lipoflica o
hidrosoluble del frmaco, de la disolucin, concentracin, superficie absorbente y la
vascularizacin en dicho sitio, determinado por la va de administracin.

La distribucin se representa a travs del volumen de distribucin, el cual se haya influido por
la liposolubilidad, unin a protenas, pH y flujo sanguneo. Los rganos ms irrigados reciben la
mayor parte de la droga durante los primeros minutos, mientras que en otros sitios menos
irrigados como msculo, piel y grasa puede incluso demorar horas en alcanzar el equilibrio. La
concentracin mxima y la velocidad de eliminacin dependen del equilibrio entre distribucin
y eliminacin.

El objetivo del metabolismo y biotransformacin de los frmacos es convertirlos en
compuestos ms polares y menos liposolubles, facilitando de este modo la excrecin y
disminuyendo el volumen de distribucin, favoreciendo as la eliminacin e inactivacin del
compuesto. Suele ocurrir que en la biotransformacin las drogas sean fragmentadas en
metabolitos que siguen siendo activos contra bacterias, como es el caso de las quinolonas.
Existen dos tipos de biotransformacin: microsomal y no microsomal, la primera ocurre en el
retculo endoplsmatico liso del hgado, por accin de la enzima Citocromo P450 que oxida los
compuestos; la segunda ocurre a nivel mitocondrial en el plasma y otros tejidos. Los
antibiticos sufren transformaciones de fase I, que pueden ser de oxidacin, reduccin o
hidrlisis; o bien de fase II, es decir de biosntesis o conjugacin, donde los frmacos se acoplan
a un sustrato endgeno, como glucuronato o acetato, entre otros.

La excrecin puede ser biliar, intestinal, renal, siendo esta ltima la ms importante, en ella la
tasa de filtracin glomerular depende de la unin de la droga a protenas, puede existir adems
secrecin tubular activa mediada por transportadores y reabsorcin pasiva neta, la eliminacin
es cuantificada por clearance de creatinina. Existen drogas que no son metabolizadas y por
tanto se excretan en forma activa por la orina, de aqu que sean ampliamente utilizadas para el
tratamiento de las ITU, algunas de ellas son, los aminoglicsidos, las fluoroquinolonas y algunas
de las penicilinas y cefalosporinas. La excrecin biliar incluye principalmente a drogas no
absorbidas ni metabolizadas. Puede existir adems eliminacin por medio de la leche materna
lo cual tiene impacto sobre el lactante.

La farmacodinamia es el efecto que la droga ejerce sobre el organismo, as pueden encontrarse
compuestos que poseen accin bacteriosttica (CIM) o bactericida (CMB); existen tambin drogas
Susan Arias Donoso
51
que tienen efecto post-antibitico, es decir que aun cuando la concentracin de la droga cae bajo la
CIM persiste el efecto inhibitorio sobre el crecimiento bacteriano, las drogas que presentan este
efecto son: aminoglicsidos, fluoroquinolonas, tetraciclinas, clindamicina y rifampicina. Existen
adems drogas que son sinrgicas entre s o antagonistas. De acuerdo a estos factores de establece la
dosis ptima y su intervalo de administracin.

La dosis teraputica es la cantidad de frmaco necesario para que el tratamiento clnico sea efectivo
en una infeccin determinada. Por otro lado la dosis txica es el nivel de frmaco al que el agente se
vuelve excesivamente txico para el hospedero. El ndice teraputico corresponde al cociente entre la
dosis txica y la dosis teraputica.

Antimicrobianos

Los antimicrobianos son sustancias capaces de actuar sobre los microorganismos, inhibiendo su
crecimiento o destruyndolos se pueden clasificar segn su origen, efecto antimicrobiano, espectro y
mecanismo de accin.
Segn su origen:
- Antibiticos o naturales: Sustancia producida por el metabolismo de organismos vivos,
principalmente hongos microscpicos y bacterias, que posee la propiedad de inhibir el
crecimiento o destruir microorganismos
- Quimioteraputico o sintticos: Sustancia producida de manera sinttica que posee la
propiedad de inhibir el crecimiento o destruir microorganismos.
- Semisintticos: se obtienen por modificacin qumica de los antimicrobianos naturales.

Segn su efecto:
- Bacteriostticos: la mxima concentracin que se alcanza en el suero o en los tejidos impide
el desarrollo y la multiplicacin de los microorganismos pero no los destruye. Una de sus
caractersticas es que si se deja de administrar las bacterias inhibidas comienzan a crecer
nuevamente. Tetraciclina, cloranfenicol, macrlidos.
- Bactericidas: matan a la bacteria (pierden su viabilidad) pero esta mantiene su forma.
o Bactericidas y activos en fase de crecimiento y reposo: glucopptidos (vancomicina),
polipptidos (bacitracina, colistin, polimixina B).
o Bactericidas y slo activos en fase de crecimiento: Betalactmicos, vancomicina,
fosfomicina.
- Bacterioltico: matan y lisan a la bacteria.

Segn su espectro microbiano o actividad:
- Amplio espectro: actan sobre un gran nmero de especies microbianas (Gram+ y Gram-,
incluso sobre anaerobios, protozoos y otros).
- Espectro intermedio: actan sobre un nmero limitado de microorganismos por ejemplo
sobre Gram+ pero no contra los Gram-.
- Espectro reducido: actan solamente sobre un nmero pequeo de especies microbianas.
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Segn su mecanismo de accin:

- Inhibicin de la sntesis de la pared celular: Penicilinas, cefalosporinas, monobactmicos,
carbapermicos, etc. Estas drogas son activas contra bacterias en crecimiento.
o Inhiben la polimerizacin del peptidoglicn: Penicilinas, Cefalosporinas, etc.
o Inhiben enzimas biosintticas: Fosfomicina, Cicloserina.
o Se coBacitracina.
o Se combinan con sustratos de la pared: Vancomicina.
- Alteran la permeabilidad celular: Polienos, polimixina y los imidazoles. Estos difunden a
travs de la membrana externa y la pared celular hasta la membrana citoplasmtica donde se
unen, alterndola y desestabilizndola, lo que ocasiona el derrame del citoplasma hacia el
exterior. Tienen efecto bactericida.
- Inhibicin sntesis de protenas: Tetraciclinas, aminoglicsidos, anfenicoles, lincosamidas y
macrlidos, actan sobre bacterias que se multiplican rpidamente.
- Inhibicin la sntesis de DNA y RNA: En este grupo se encuentran las quinolonas,
ansamicinas, sulfonamidas, mitomicina, diaminopirimidinas y actinomicina.

Un antimicrobiano de uso sistmico idealmente debe ser bactericida, debe mantenerse activo en el
plasma y en presencia de agentes biolgicos y debe ser efectivo contra un amplio espectro de
microorganismos o dirigido al microorganismo blanco, los organismos susceptibles a este
antimicrobiano no se deben volver resistentes; por otro lado no debe ser toxico ni debe tener efectos
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colaterales y si los tiene estos deben ser mnimos para el hospedero, la concentracin activa frente al
microorganismo debe alcanzarse lo ms rpido posible y mantenerse en el tiempo.
Los antimicrobianos interactan entre s de diversas formas:
- Indiferencia: si se administran ATB diferentes, su combinacin no es ms potente ni menos
potente que cuando estos se administran por s solos.
- Adicin: el efecto de la combinacin es equivalente a la suma de cada droga por separado.
- Sinergismo: efecto de la combinacin es mayor que la suma de la accin de cada uno de los
ATB por separado.
- Antagonismo: la accin combinada de los dos es menos efectiva que cada uno por s solo.

Normas para la asociacin:
Aquellos ATB que para ejercer su efecto teraputico necesitan que los microorganismos estn en
activa multiplicacin, como los betalactmicos, tienden a ser antagonistas con antimicrobianos que
detienen la multiplicacin.
Los ATB cuyo mecanismo de accin es inducir la produccin de protenas aberrantes en las
bacterias, como los aminoglicsidos, son sinrgicos con aquellos que inhiben la sntesis de la pared
bacteriana. Por otro lado, estos mismos frmacos no son antagnicos con las drogas bacteriostticas
como tetraciclina, cloranfenicol y sulfas.
Los antimicrobianos con igual mecanismo de accin presentan generalmente efecto de adicin,
pero hay que tener presente que hay ciertas estructuras (sitios de accin) que compiten entre s.
Para la eleccin de un antimicrobiano primero se debe conocer el diagnostico clnico, el diagnostico
bacteriolgico, la farmacocintica del antimicrobiano, la biodisponibilidad de la droga,
hipersensibilidad y los mecanismos de eliminacin y degradacin de cada paciente; se debe tener
presente adems que la concentracin del antimicrobiano debe ser 3 4 veces la CIM en la sangre.
En el caso que no haya muchas alternativas de tratamiento se debe posponer el uso de un
antimicrobiano ms txico. La eleccin de la droga se realiza en base a la anamnesis del paciente, el
resultado del estudio de susceptibilidad y su costo, debiendo escogerse siempre el ms econmico.

Betalactmicos

Los ATB betalactmicos poseen en su estructura un anillo
betalactmico, son uno de los grupos de ATB ms importantes
tanto histrica como clnicamente, porque la penicilina fue el
primero en describirse y a partir de ella se han ido modificando y
sintetizando ATB con distinta actividad. Una de sus ventajas es
que se pueden administrar en embarazadas y nios y su
desventaja es que se ven afectados por la accin de las
betalactamasas y otras enzimas que producen resistencia.
Son potentes inhibidores de la sntesis de la pared celular ya
que se unen a las transpeptidasas encargadas de unir las cadenas
transversales del peptidoglicano, as al unirse las PBP a las
Susan Arias Donoso
54
molculas de penicilina, que actan como anlogos de sustrato (competidor), no se produce el
entrecruzamiento del peptidoglicano, aun as la pared contina su sntesis pero cada vez ms
debilitada a medida que se va depositando el peptidoglicano. Adems el complejo del ATB con el PBP
estimula la liberacin de autolisina que digieren la pared celular. Por tanto el efecto ltico de los
betalactmicos se da por 2 mecanismos: se sintetiza una pared defectuosa, poco rgida que estalla
por la entrada de agua (debido a una alta presin osmtica interna), y por otro lado provocan prdida
de inhibidores de enzimas endgenas que hidrolizan la murena y participan en el recambio de la
pared.

La toxicidad selectiva de estos antibiticos se basa en que las clulas animales no poseen pared
celular, as como tampoco las enzimas de su biosntesis. Los efectos adversos ms relevantes son:
alergia, diarrea, convulsiones o disfuncin plaquetaria, las dos ltimas solo a dosis altas.

Penicilinas

Modo de accin: inhiben sntesis de la pared celular.
Efecto: bactericida.
Espectro: Gram +, Gram- y anaerobios.
Toxicidad: Alergia inmediata (IgE) o tarda, a los 7 a 10 das (IgE e IgG), extensible a otros
betalactmicos (exp. Aztreonam).
Indicaciones: Pueden usarse en embarazadas. Atraviesa barrera hematoenceflica (BHE).
Interacciones: sinrgico con aminoglicsidos, antagonista con tetraciclinas (TET),
cloranfenicol (CAF), ansamicinas y sulfamidas
Asociaciones: amoxicilina + cido clavulnico atraviesan barrera placentaria. Asociada a
procana o benzatina se enlentece la absorcin (12 horas y 15 30 das respectivamente).
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Existen distintos tipos de penicilinas:

- Penicilinas naturales: Penicilina G (bencilpenicilina) fue el primer betalactmico en
descubrirse. Activa principalmente contra Gram+. Penicilina V efecto sobre Gram+.
- Aminopenicilinas: ampicilina, amoxicilina, ciclacilina, hetacilina, epicilina, metampicilina,
pivampicilina, talmpicilina y bacampicilina. Presentan un espectro de actividad mucho
ms amplio, sobre Gram+ y algunas Gram-, son ms resistentes a pH cido, pero
sensibles a betalactamasas.
- Penicilinas isosaxlicas: resistentes a las betalactamasas, meticilina, oxacilina,
cloxacilina, nafcicilina, flucloxacilina y dicloxacilina. Tienen un efecto sobre Gram+ y
Staphylococcus aureus.
- Carboxipenicilina: carbenicilina y ticarcilina. Tienen espectro contra Gram-, algunas
enterobacterias e incluso Pseudomonas aeruginosa (resistentes a Aminopenicilinas).
- Uureidopenicilinas: apalcilina, azlocilina, furazlocilina, mezlocilina, piperacilina y
sulbenicilina, ejercen efecto contra Pseudomonas y Klebsiella.

Penicilinas G: Infecciones puerperales causadas por cocos Gram + y S. agalactiae
*Ampicilina no sufre biotransformacin.
Cefalosporinas

Las cefalosporinas son betalactmicos que poseen un anillo de dihidrotiazina de 6 miembros en
lugar de un anillo tiazlico de 5 miembros (en el caso de las penicilinas) y adems poseen el anillo
betalactmico. Se unen a las PBP y las inactivan irreversiblemente impidiendo la transpeptidacin de
los peptidoglicanos y tambin desregulan las autolisinas. Pueden tener un espectro reducido o
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amplio, de acuerdo a ello y su resistencia se pueden clasificar en: cefalosporinas de primera, segunda,
tercera y cuarta generacin.

1 generacin

Modo de accin: inhiben sntesis de pared celular.
Efecto: bactericidas.
Espectro: Gram +, inactivas frente a Enterococcus faecalis, Staphylococcus resistentes
a la meticilina, Listeria monocytogenes, Stenotrophomonas maltophilia, Legionella,
Chlamydia y Mycoplasma.
Indicaciones: pueden ser administradas en embarazadas y nios

Se emplean como tratamiento emprico de infecciones supuradas de la piel y tejidos
blandos en que se sospeche de S. aureus y S. pyogenes y en faringitis estreptoccicas.
Cefadroxilo se utiliza en infecciones urinarias, respiratorias altas, neumona bacteriana,
infeccin de huesos y articulaciones, otitis media, infeccin de la piel y tejidos blandos,
faringitis y tonsilitis. Cefazolina en profilaxis de infeccin quirrgica (S. aureus) es usada como
predictor del comportamiento de otras cefalosporinas de 1 generacin.

2 generacin

Espectro: Mejoran su actividad frente a Gram- y anaerobios, a cambio de ver reducida
su utilidad frente a Gram +

Se emplea en faringitis estreptoccicas donde el tratamiento es ms corto que con
penicilinas. Cefuroxima se utiliza en profilaxis de infeccin quirrgica (S. aureus) y neumona
intrahospitalaria, en Infecciones del tracto respiratorio superior (TRS) e inferior (TRI), en
infeccin urinaria, de la piel y tejidos blandos. La Cefoxitina es usada contra cocos y bacilos
anaerobios, Clostridium, Actinomyces y Bacteroides (80% B. fragilis).

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3 generacin

Espectro: preferentemente sobre Gram-, incluso sobre Pseudomonas y anaerobios.
Pierden accin frente a Gram +.
Asociaciones: con metronidazol actan sobre bacilos Gram- anaerobios productores
de betalactamasas.
Indicaciones: Atraviesan BHE.

Se emplea como tratamiento de neumonas comunitarias, son activas sobre K. pneumoniae,
E. coli y cocos Gram+ resistentes o no a penicilina. Tambin se usan en sepsis del adulto
causadas por patgenos respiratorios o en epiglotitis aguda causada por H. influenzae tipo B.
Se emplean como tratamiento emprico de meningitis bacteriana adquirida en la comunidad,
causada por N. meningitidis, H. influenzae, E. coli, K. pneumoniae.

Ceftriaxona se usa para el tratamiento de otitis media aguda (OMA) causada por S.
pneumoniae resistente a penicilina, en sepsis de origen abdominal producida por anaerobios
e infeccin del tracto urogenital.

Cefotaxima se usa en pacientes cirrticos ya que no es hepatotxica y para tratamiento de
Salmonelosis. Estas drogas estn dirigidas para microorganismos muy resistentes.

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4 generacin

Espectro: preferentemente sobre Gram- y Pseudomonas. Activas sobre cocos Gram+.
Especificaciones: administracin solo va parenteral.
*No son alteradas por betalactamasas cromosomales.

Se utilizan como tratamiento emprico de infecciones del TR causadas por Pseudomonas
aeruginosa y Streptococcus pneumoniae, tambin se utiliza en sepsis nosocomial (UCI)
causada por bacilos Gram- multirresistentes.

Carbapenems
Imipenem
Meropenem
Ertapenem

Modo de accin: unin covalente a las PBP esenciales, inhibiendo la sntesis de la pared
celular y activando autolisinas endgenas que actan sobre bacterias sensibles en fase de
crecimiento.
Especificaciones: No se absorben por va oral, pues son inestables frente al jugo gstrico, por
tanto administracin es solo por va parenteral, especialmente intravenosa.
Espectro: Gram+ aerobios, excepto S. aureus meticilina resistente y Enterococcus (|
cefalosporinas de 1 generacin); Gram- aerobios (| cefalosporinas de 3 generacin) y
anaerobios. Excepto Corynebacterium.
Indicaciones: atraviesan BHE

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Monobactams
Aztreonam

Modo de accin: inhiben la sntesis de la pared celular.
Efecto: bactericida.
Especificaciones: resistentes a betalactamasas.
Espectro: Gram+ aerobios, Gram- aerobios y anaerobios.
Indicaciones: atraviesan BHE

Inhibidores de la sntesis de la pared celular no betalactmicos

Glucopptidos
Vancomicina
Teicoplanina

Modo de accin: forma un complejo con los residuos de D-alanina e impide la transferencia
de los precursores del peptidoglicn desde el carrier lipdico, alterando la permeabilidad de la
membrana citoplasmtica e inhibiendo la sntesis de la pared celular.
Espectro: estrecho, activo frente a cocos y bacilos Gram+ aerobios y anaerobios, incluyendo
todas las cepas de Staphylococcus, S. pneumoniae penicilina-resistentes, Clostridium,
Corynebacterium, Listeria y algunas cepas de Enterococcus.
Indicaciones: contraindicado en pacientes con insuficiencia renal, sordera, embarazo y
lactancia.
Interacciones: Vancomicina + ceftriaxona/cefotaxima/rifampicina efecto sinrgico sobre S.
pneumoniae.

Fosfomicina

Inhibe la sntesis de la pared celular al bloquear la formacin del cido N-acetilmurmico por
inhibicin de las enzimas biosintticas.

Cicloserina

Inhibe la sntesis de la pared celular al bloquear la incorporacin de D-alanil-D-alanina al
peptidoglicano inhibicin de las enzimas biosintticas.
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Inhibicin de la sntesis de protenas

Aminoglicsidos
1 generacin: Estreptomicina, Neomicina.
2 generacin: Kanamicina, Gentamicina.
3 generacin: Amikacina, Dibekacina.

Modo de accin: Se unen a la protena s-12 de la subunidad 30s, as producen errores en la
lectura del mRNA e inhiben la formacin de cadenas peptdicas, bloquea la formacin del
complejo de iniciacin, la subunidad 30S no es reutilizable y disminuye por tanto su pool.

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Espectro: Gram- aerobios, especialmente enterobacterias, no actan sobre anaerobios,
actividad limitada sobre Gram+, actan sobre P. aeruginosa (excepto estreptomicina,
gentamicina y neomicina). Estreptomicina, actividad antituberculosa.
Especificaciones: administracin solo por va parenteral pues no se absorben por va oral (exp
estreptomicina). Neomicina y kanamicina solo uso tpico. Gentamicina, soluciones oftlmicas.
Asociaciones: amikacina con ceftazidima activas frente a P. aeruginosa.
Interacciones: sinergia con drogas que actan sobre la pared celular y rifampicina.
Antagonismo con cloranfenicol, macrlidos, clindamicina y tetraciclina.
Toxicidad: ototoxicidad (neomicina +++) y neurotoxicidad (gentamicina +++, estreptomicina
+). Esta ltima se ve favorecida por: edad avanzada, insuficiencia renal previa, hipovolemia,
disminucin de potasio y sodio en sangre, acidosis, tratamiento prolongado (>7-10 das), dosis
alta o combinacin con drogas nefrotxicas.

Son azcares complejos unidos por enlaces
glicosdicos, los grupos NH y OH interactan con
protenas del ribosoma.

Son drogas muy hidrosolubles y su actividad se
ve disminuida (aumenta CIM) en presencia de altas
concentraciones de calcio y magnesio. Son
inactivadas en medio cido, hiperosmolar y
anaerobiosis, pues se rodean de protones, por
tanto poseen mala actividad en orina, secrecin
bronquial y abscesos por pH cido, y en pus o
mucus por componentes aninicos. Son quelantes
de las endotoxinas. Presentan mala actividad sobre
MO que producen biofilms ya que la capa de
arginato se rodea de carga negativa. Los
tratamientos que emplean estas drogas requieren
la administracin de dosis 10 veces mayores que la
CIM, con el fin de evitar la seleccin de mutantes.

Tetraciclinas
Vida media
Corta
Intermedia
Larga

Tetraciclina
Demeclociclina
Doxicilina
Minociclina
6-8 horas
12-14 horas
16-18 horas
Susan Arias Donoso
62
Modo de accin: Se unen a la subunidad 30S de los ribosomas. Bloquean la insercin del
aminoacil-tRNA. La unin es transitoria, por lo que su efecto es reversible.
Efecto: Bacteriostticos, actuando como bactericidas en altas concentraciones.
Espectro: Activas frente a Brucella, Calymmatobacterium granulomatis, Vibrio cholerae
(tetraciclina). Acta sobre Staphylococcus y Streptococcus no resistentes, espiroquetas.
Resistente: Pseudomonas y enterobacterias.

La estructura bsica de este grupo es una molcula con un anillo naftazeno. Las tetraciclinas fueron
los primeros ATB llamados de amplio espectro, pues inhiben a casi todas las bacterias incluyendo a
Gram positivas y negativas. Existen tetraciclinas naturales y semisintticas y se emplean en el
tratamiento de ETS, infecciones por Mycoplasma, Ureaplasma, Brucella, actinomicosis y acn.

Anfenicoles
Cloranfenicol
Tianfenicol

Modo de accin: se unen a la protena 23s de la subunidad 50S ribosomal, inhibe la
transpeptidiltransferasa y la formacin de uniones peptdicas.
Efecto: Bacteriosttico sobre Staphylococcus aureus y enterobacterias, bactericidas sobre
patgenos menngeos como Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Neisseria
meningitidis.
Espectro: activo frente a Gram+ aerobios y anaerobios.
Interacciones: antagonismo con otros antibiticos bactericidas como betalactmicos y
aminoglicsidos.
Toxicidad: provoca anemia aplstica dependiendo de la dosis y duracin del tratamiento, ya
que afecta las clulas eritropoyticas de los mamferos.
Indicaciones: no administrar en embarazadas y nios. Atraviesan BHE

Actualmente se restringe su uso para el tratamiento de abscesos cerebrales causados por
anaerobios, en fiebre tifoidea causada por Salmonella Typhi y en salmonelosis, pero no como
tratamiento de primera eleccin. Provocan alteraciones en los resultados de laboratorio, provocando
falsos aumentos o disminuciones del BUN y falsa glucosuria, interfiriendo con la determinacin del
17-OH-esteroides urinarios y alterando el perfil bioqumico heptico.

Susan Arias Donoso
63

Macrlidos
Grupo de 14 tomos Grupo de 15 tomos
(azlidos)
Eritromicina
Azitromicina
Claritromicina
Roxitromicina
Diritromicina
Grupo de 16 tomos
Cetlidos
Espiramicina
Josamicina
Diacetil midecamicina
telitromicina

Modo de accin: actan sobre subunidad 50S de los ribosomas inhibiendo a la elongacin de
la cadena peptdica durante la sntesis proteica.
Efecto: Bacteriostticos a baja concentracin, y bactericidas a altas concentraciones.
Espectro: Gram+ (exp. Enterococcus), algunos Gram-: H influenzae, N. gonorrhoeae,
Gardnerella vaginalis, Mycoplasma pneumoniae; y espiroquetas.
Interacciones: antagonismo por competencia con lincosaminas y cloranfenicol.
Indicaciones: no atraviesan BHE

Los macrlidos son drogas lipoflicas absorbibles por fagocitos, por lo que son tiles en infecciones
intracelulares, como las causadas por Mycoplasma, Chlamydia y Legionella. Tienen grandes anillos
lactnicos que estn unidos a una parte glucosdica. Claritromicina y azitromicina son usadas en
cuadros que afectan al TRS y TRI.

Lincosaminas
Clindamicina
Lincomicina

Susan Arias Donoso
64
Modo de accin: Actan sobre subunidad 50S del ribosoma y producen una rpida
destruccin de los polirribosomas.
Efecto: bacteriostticos a baja concentracin y bactericidas a altas concentraciones.
Espectro: Eficaz sobre actinomicetos como Actinomyces israelii y Nocardia asteroides.
Interacciones: antagonismo por competencia con macrlidos y cloranfenicol. Puede haber
resistencia cruzada con bacterias que previamente fueron inducidas por macrlidos.

Se emplea para el tratamiento de enfermedades crnicas de huesos y articulaciones pues tienen
buena difusin en estos tejidos; para sepsis e infecciones plvicas e intrabdominales producidas por
anaerobios, estafilococos y estreptococos, para infecciones del TRI provocadas por bacterias
anaerobias como empiema (neumona anaerbica y abscesos pulmonares) y para neumona por
estreptococos.

Inhibicin de la sntesis de cidos nuclicos

Quinolonas
1 generacin
2 generacin
3 generacin
4 generacin
cido nalidxico, cido oxolnico, cido

pipemdico, Cinoxacino, Rosoxacino
Norfloxacino, Enoxacino, Ciprofloxacino,
Lomefloxacino, Ofloxacino, Pefloxacino,
Rufloxacino
Levofloxacino, Gemifloxacino, Esparfloxacino,
Grepafloxacino, Pasufloxacino, Temafloxacino
Moxifloxacino, Gatifloxacino, Clinafloxacino,
Trovafloxacino
Fluoroquinolonas

Modo de accin: bloquean la actividad de la subunidad A de la DNA girasa (topoisomerasa II)
y topoisomerasa IV, provocando un superenrollamiento positivo e inhibiendo la replicacin.
Efecto: bacteriosttico y bacterioltico segn concentracin.
Espectro: 1 generacin: Gram- (enterobacterias); 2 4 generacin Gram positivas y
negativas: P. aeruginosa, N. gonorrhoeae (ciprofloxacino), S. aureus, H. influenzae, M.
catarrhalis. 4 generacin: Anaerobios (Clostridium y Bacteroides).
Indicaciones: no utilizar en pacientes con cartlago en crecimiento (embarazadas y nios), ya
que la droga se acumula en esos tejidos y produce deformaciones. Fluoroquinolonas
atraviesan BHE.
Especificaciones: difunde a travs del slime que producen cierto tipo de bacterias.
Susan Arias Donoso
65
Las quinolonas y las fluoroquinolonas, como ciprofloxacino, norfloxacino y ofloxacino son

antibiticos de amplio espectro y son utilizados especialmente en infecciones urinarias y en
infecciones por Escherichia coli y Salmonella.

Ansamicinas
Rifampicina
Rifabutina

Modo de accin: Inactiva selectivamente la RNA polimerasa bloqueando la sntesis del mRNA.
(provoca cambio conformacional).
Efecto: bacteriostticos o bactericidas segn concentracin.
Espectro de accin: Gram positivos y negativos.

Es un antibitico de uso limitado, debido a la aparicin de mutantes resistentes. Es capaz de
penetrar a las clulas, por lo cual es til en el tratamiento de tuberculosis, en combinacin
con drogas antituberculosas, como Isoniazida que inhibe la sntesis de lpidos de
Mycobacterium tuberculosis, y Etambutol. Tambin se usa en combinacin con estas drogas
para el tratamiento de la Lepra.

Mitomicina y actinomicina

La mitomicina produce uniones cruzadas entre las cadenas del DNA que impiden la separacin de
las cadenas complementarias bloqueando as su sntesis. La actinomicina inhibe tanto la sntesis del
DNA como la del RNA (esta es inhibida en concentraciones menores), pues bloquea el avance de la
RNA polimerasa a lo largo del modelo del DNA. La desventaja de este ATB es que es muy txico para
el hospedero, porque tambin afecta a las protenas humanas.

Nitrofuranos
Nitrofurantona (furandantina): Infeccin genitourinaria.
Nitrofurazona (furacin).
Farazolidona: Gastroenteritis bacteriana.
Nifurtimox

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66
Modo de accin: Interfiere en procesos enzimticos de respuesta celular, metabolismo
glucdico y sntesis de la pared bacteriana.
Efecto: Bactericidas.
Espectro: amplio, Gram+ y Gram-.

Polipptidos

Bacitracina: se une al Bactoprenol, molcula lipdica de membrana que transporta las subunidades
de peptidoglicn hacia la cara externa de la membrana, as inhibe la sntesis de la
pared celular.
Capreomicina
Gramicidina
Polimixina B y E: alteran la permeabilidad de la membrana.

Nitroimidazoles
Metronidazol
Secnidazol
Tinidazol
Ornidazol

El grupo Nitro es reducido por una protena de bacterias anaerbicas, la droga reducida produce
ruptura del DNA y sustrae los electrones necesarios para el metabolismo de la bacteria. Son activas
frente a anaerobios y protozoos y se usa principalmente para el tratamiento de infecciones
producidas por bacterias anaerobias como Clostridium o Bacteroides fragilis.

Sulfamidas
Sulfas de uso sistmico
Sulfas de uso tpico
Sulfadiazina, sulfadoxima, sulfisoxazol, sulfametoxazol

Sulfacetamida, sulfadiazina argntica

Modo de accin: Inhibe por bloqueo competitivo la sntesis del cido aminoparabenzoico
(PABA) en la sntesis del acido flico, actuando como anlogos estructurales del PABA. Al ser
el acido flico un precursor de la sntesis de purinas, pirimidinas y aminocidos se bloquea la
sntesis de cidos nuclicos y de la pared celular.
Efecto: bacteriosttico.
Espectro: Gram+: S. pyogenes, S. epidermidis, S. aureus. Gram-: Neisseria spp., H. influenzae y
enterobacterias, Actinomyces, Nocardia, Chlamydia, Vibrio, Aeromonas. Resistentes: Algunas
cepas de Neisseria spp, Shigella spp y E. coli.
Interacciones: sinergia con trimetoprim.
Especificaciones: absorcin principalmente oral, importante excrecin renal.
Susan Arias Donoso
67
Indicaciones: no recomendados durante el embarazo, ni en pacientes con insuficiencia renal

o heptica.

La asociacin de las sulfas y trimetoprim tiene accin sinrgica, pues actan en 2 puntos distintos de
la sntesis del cido flico; por tanto se usan generalmente combinados.

Se emplea en el tratamiento de infecciones urinarias, bronquitis crnica, infeccin intestinal
(salmonelosis), fiebre tifoidea, infeccin de piel y tejidos blandos, infeccin por Pneumocystis carinii.
A diferencia de las quinolonas en la actualidad tienen menor actividad debido a la amplia resistencia.
Cuando hay presencia de pus la actividad puede ser inhibida por la existencia de purina y timidina en
el mismo tejido necrtico evadiendo la actividad de la droga.

El uso de dos o ms antibiticos en una terapia est indicado slo en determinadas situaciones. En
general, es mejor usar un antibitico eficaz que una combinacin de drogas, ya que aumenta la
probabilidad de efectos adversos y el costo, sin un efecto teraputico mayor. La terapia combinada
est indicada en los siguientes casos:
- Tratamiento rpido en infecciones muy graves como meningitis en nios y septicemia en
pacientes inmunodeprimidos.
- En infecciones crnicas, para retardar la aparicin de mutantes resistentes, como en
tuberculosis.
- En infecciones mixtas, como las que ocurren despus de un traumatismo masivo.
- Para obtener un efecto sinrgico, como es el caso de la asociacin de Sulfas y Trimetoprim.
Susan Arias Donoso
68
Betalactmicos, inhibicin sntesis pared celular

Penicilina G
Penicilina V
Resistentes a
Penicilasas
Aminopenicilina
Penicilinas
Benzilpenicilina
Meticilina
Oxacilina
Cloxacilina
Nafcicilina
Ampicilina
Amoxicilina
Bacampicilina
Ciclacilina
Carbenicilina
Carboxipenicilinas
Ticarcilina
Acilureidopenicilina
Piperacilina
1 generacin
Cefalosporinas
Cefalotina
Cefazolina
Cefradina
Cefadroxilo
Cefuroxima
2 generacin
3 generacin
Cefoxitina
Ceftazidima
Cefotaxima
Cefoperazona
Ceftizoxima
Ceftriaxona
4 generacin
Cefpiroma
Gram+
Gram+
y algunas
Gram-
Gram-,
enterobacterias
P. aeruginosa
Pseudomonas
y Klebsiella
Gram+
Gram+
y algunas
Gram-
Gram+
Gram-
Resistentes a
betalactamasas
Carbapenems

Monobactams

Sinrgico, compite para unirse a betalactamasas
Inhibicin Sntesis Proteica

Tetraciclinas [1]
Doxicilina
Tetraciclina
Susan Arias Donoso
Anlogos de sustrato, se
unen PBP y no se puede
producir el
entrecruzamiento del
peptidoglicn, ya que no se
realiza la transpeptidacin.
La pared igual se sigue
sintetizando pero cada vez
ms dbil.

Efecto ltico:
- Pared estalla por entrada
de agua
- Prdida de inhibidores de
enzimas endgenas que
hidrolizan la murena
Gram+
Gram-
Resistentes a
betalactamasas
Cefepime

Meropenem
Imipenem

Aztreonam
cido clavulnico
Gram+
Gram+
Gram+
Gram-
Actan sobre la subunidad

30S de los ribosomas
inhibiendo la sntesis

Aminoglicsidos [2]
Estreptomicina
Gentamicina
Kanamicina
Tobramicina
Amikacina
Neomicina

Gram-
69
proteica
[1] inhibir la unin de
molculas al aminoacil del
tRNA
[2] lectura errnea de
mRNA
Bacteriosttico
Anfenicol
Cloranfenicol
Amplio
Macrlidos
Eritromicina
Claritromicina
Azitromicina
Gram+
y algunas
Gram-
Lincosamidas
Clindamicina
Lincomicina
cido fusdico
Anaerobios
Actan sobre la subunidad

50S de ribosomas
inhibiendo la sntesis
proteica
Inhibe transpeptidil
transferasa (formacin
unin peptdica)
Gram+
Inhibicin de la sntesis de DNA y RNA
Antiguas
Nuevas
Quinolonas [1]
cido nalidxico
cido oxolnico
Cinoxacina
Ciprofloxacino
Norfloxacino
Levofloxacino
Ofloxacino
Kanamicina [2]
Rifampicina
Gram+
Gram-
anaerobias

Glucopptidos [3]
Vancomicina
Teicoplanina
[1] Inhiben la duplicacin,

transcripcin,
recombinacin y
superenrollamiento del
DNA, ya que actan sobre
la DNA girasa.
[2] inactiva RNApol
[3] inhibe permeabilidad
celular y la sntesis de RNA
Gram +
Otros mecanismos de accin

Nitrofurantona
Furazolidona
Nitrofurazona
Nifuroxima
Sulfanilamida
Sulfisoxazol
Trimetoprim
Nitrofuranos

Sulfonamidas

Gram +
Gram-
Gram+
Gram-
Interfiere en procesos
enzimticos de respuesta
celular, metabolismo
glucdico y sntesis de la
pared bacteriana.
Bloqueo secuencial en la
biosntesis del acido flico.
Sulfas + trimetoprim
accin sinrgica.
Susan Arias Donoso
70
Mecanismo de resistencia a antimicrobianos

La resistencia es la prdida del efecto inhibitorio o letal del
antimicrobiano (AM) ante una determinada bacteria, siendo
distinto el efecto para cada una de ellas con los diferentes
antimicrobianos.
- Resistencia Intrnseca: CIM > CIM de bacterias
similares.
- Resistencia Adquirida: Mutacin o adquisicin de
material gentico (plsmido, virus o DNA libre).
- Resistencia Natural: Insensibilidad de una bacteria
por ausencia de blanco. Por ejemplo, el blanco est
en la membrana externa, estructura que no
presentan las bacterias Gram-

La resistencia se genera principalmente por el uso
indiscriminado de AM lo que selecciona cepas resistentes.

Alteraciones del blanco: Modifican el sitio de accin de los AM.
o Modificaciones para hacerse insensible al inhibidor.
Modificar protenas ribosmicas. Genera resistencia a aminoglicsidos,
tetraciclinas, cloranfenicol, macrlidos y lincosamidas. Ej.: estreptomicina (M.
tuberculosis)
Alteracin de precursores de la pared: sntesis de peptidoglicn, la forma
correcta de sntesis es agregando D-ala-D-ala pero es cambiado a D-ala-D-
lactato por Enterococcus spp hacindose insensible a los ATB. Otorga
resistencia a vancomicina y teicoplanina, ambas se utilizan para clasificar los
enterococos importantes en infecciones intrahospitalarias.
Modificacin de enzimas esenciales que participan en el metabolismo. Genera
resistencia a betalactmicos, quinolonas, sulfanilamidas, trimetoprim,
Susan Arias Donoso
71
rifampicina, novobiocina. Ej.: Modificacin de DNA girasa, la bacteria se hace

insensible a la accin de quinolonas.
Mayor produccin de blanco: Aumento de la produccin de PBPs producen
resistencia a ampicilina en Enterococcus.

o
o
Reduccin en importancia fisiolgica del blanco: mutando ciertas protenas del

receptor.
Sntesis de nuevas enzimas que duplican la funcin del blanco inhibido: creando rutas
metablicas alternativas para que al inhibir una enzima otra pueda cumplir su funcin
y poder generar el producto que se necesita. Generan mutantes auxtrofos,
dependen de los sustratos que generaran por el cambio de la va metablica.
Aquellas rutas que tiene como sustrato a la timina por accin de trimetoprim se salta
esa va y se hacen dependientes de timina (la timina no se procesa).
Prevenir el acceso al blanco:

o Bombas de eflujo o expulsin. Determinante gentico: plsmido y cromosoma.
Genera resistencia a betalactmicos, tetraciclinas, quinolonas, cloranfenicol.
o
o

Modificar la droga para que no entre a la clula. Hidrlisis o inactivacin del ATB
mediante enzimas. Neutralizacin. Cambio en la conformacin del ATB.
Canales o porinas: su funcin es incorporar sustancias diferentes al AM sin embargo,
igual ocupan estos canales que generalmente son de transporte activo, para esto la
bacteria disminuye estos canales. Est relacionado con mutaciones genticas en los
cromosomas. Genera resistencia a cloranfenicol, tetraciclinas, betalactmicos.
Inactivacin del agente

o Inactivacin del agente. Ej.: betalactamasas destruyen el anillo betalactmico.
o Modificar el agente para que falle en su unin con el blanco. Algunas enzimas como
hidrolasas, fosfotransferasas, adenilacetilasas y acetilasas modifican los grupos
funcionales de los ATB y al mismo tiempo tambin pueden modificar enzimas que son
blanco de los ATB. Determinantes genticos: plsmido, cromosoma y tramposones.
Otorgan resistencia a betalactmicos, aminoglicsidos y cloranfenicol.
Susan Arias Donoso
72
Resistencia a betalactmicos
-
-
-
Inactivacin de la droga debido a betalactamasas que dividen el anillo betalactmico y

por lo tanto inactivan el ATB. Las betalactamasas son enzimas encargadas de degradar el
anillo betalactmico de algunos ATB. En Gram+ son inducibles y extracelulares
sintetizadas en grandes cantidades. En Gram generalmente son constitutivas, estn
unidas a las clulas, se encuentran en el espacio periplsmico y se sintetizan en menor
cantidad. Estn codificadas tanto en cromosomas como en plsmidos. Existen diferentes
tipos de betalactamasas: de espectro reducido como las penicilasas, de espectro
extendido (BLEE) y Carbaperemasas: MBL metalobetalactamasas
Dificultad en la captacin del ATB, por la disminucin de la permeabilidad y por bombas
de eflujo.
Alteracin del blanco, por ejemplo la variacin de D-ala-D-lactato.

Para evitar la produccin de mecanismos de resistencia a los antimicrobianos se debe:
-
Controlar, reducir o alterar los ATB usados.

Mantener la higiene en los hospitales y el personal y reducir el movimiento de pacientes
para eliminar la diseminacin de organismos resistentes en los hospitales.
Descubrir o desarrollar nuevos ATB.
Modificar qumicamente ATB existentes para disminuir los mecanismos de resistencia.
Desarrollar inhibidores de enzimas modificadoras de ATB.
Betalactamasas de espectro extendido (BLEE)

Las betalactamasas son enzimas que hidrolizan el enlace amida del anillo betalactmico de los
antibiticos betalactmicos confiriendo a las bacterias resistencia al inactivar estas drogas. En
bacterias Gram- estas enzimas permanecen en el espacio periplsmico mientras que en Gram+ se
ubican en forma extracelular.
Susan Arias Donoso
73
Las betalactamasas de espectro extendido (BLEE) son producidas por bacterias Gram-,
principalmente por enterobacterias siendo ms comn en Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae,
seguido de Proteus mirabilis y Klebsiella oxytoca, se localizan en plasmidios de modo que son
transferibles entre cepas bacterianas de especies diferentes, adems, a menudo forman parte de
tramposones o integrones lo cual determina su asociacin con otros determinantes genticos de
resistencia transferibles, como los que confieren resistencia a los aminoglicsidos o al clotrimoxazol.
Las bacterias productoras de BLEE son resistentes a todos los antibiticos betalactmicos, quinolonas,
aminoglicsidos, tetraciclina y clotrimoxazol con la excepcin de carbapenems y cefamicina. Pueden
ser inhibidas por algunas drogas como el cido clavulnico, azobactam y sulbactam, permitiendo as
que los betalactmicos ejerzan su efecto cuando son administrados en conjunto.

As las BLEEs causan serios problemas para el control de infecciones nosocomiales, por esta razn el
uso de cefalosporinas de 3 generacin contra bacterias productoras de BLEEs es restringido, al igual
que el de betalactmicos asociados con inhibidores.

Se sospecha de la produccin de BLEEs cuando el halo de inhibicin usando cefotaxima es inferior a
27 mm con una CIM mayor a 1 um/ml, su deteccin (ensayo doble disco) se basa en la capacidad del
cido clavulnico de incrementar la actividad de una cefalosporina de 3 generacin gracias al efecto
inhibitorio que ejerce sobre una BLEE.

Un aumento mayor o igual a 5mm en el
Cef/AC
Cef/AC
dimetro del halo de inhibicin de la
combinacin de cualquiera de las drogas
betalactmicas con cido clavulnico versus
el dimetro de la droga sola evidencia la
produccin de BLEEs.
Cef
Cef

Las enzimas de clase CTX-M son ms activas para hidrolizar a cefotaxima que a ceftazidima y por
tanto las cepas que la posean pueden aparecer sensibles a ceftazidima no sindolo.
Incubacin 18 24 hr

D Test

Su objetivo es detectar la resistencia de Streptococcus Staphylococcus
aureus a eritromicina y a clindamicina en Streptococcus del grupo B. Su importancia radica en que
algunos pacientes no son capaces de tolerar la penicilina, de modo que clindamicina y eritromicina
son las alternativas teraputicas. Se realiza por difusin de disco en agar Mueller Hinton Sangre
usando clindamicina de 2 um colocado a 12 mm, medido de extremo a extremo, de un disco de
eritromicina. Su sensibilidad y especificidad es muy cercana al 100%.

Determinacin de fenotipo Van A y Van B

Busca determinar la resistencia a vancomicina de Enterococcus, la deteccin requiere la incubacin
durante 24 horas utilizando el mtodo de placa, si el resultado indica resistencia intermedia, se
confirma como resistente usando dilucin. Si la CIM es mayor de 4 um/mL se clasifica como
posiblemente resistente.
Susan Arias Donoso
74
Existen siete genotipos distintos que codifican para la resistencia a vancomicina, denominados con
letras de la A a la G, siendo A y B los de mayor importancia ya que son llevadas entre especies y
generaciones diferentes. El genotipo Van A determina resistencia a vancomicina y teicoplanina,
mientras que Van B presenta resistencia a vancomicina pero sensibilidad a teicoplanina, pudiendo ser
diferenciadas de esta forma, pero requiriendo confirmacin por PCR.

Antibiticos
Mecanismo de
accin
Inhibicin de la
sntesis de la pared
celular
Blanco de
accin
Protenas
unidoras
de penicili-
nas (PBPs)
Macrlidos y
lincosinamidas
Inhibicin de la
sntesis de
protenas
Subunidad
50S del
ribosoma
Cloranfenicol
Inhibicin de la
sntesis de
protenas
Inhibicin de la
sntesis de
protenas
Subunidad
50S del
ribosoma
Subunidad
30 y 50S
del riboso-
ma
Inhibicin de la
sntesis de
protenas
Inhibicin de la sn-
tesis, transcripcin,
recombinacin, su-
perenrollamiento
del DNA
Inhibicin de la
sntesis de
protenas
Betalactmicos
Aminoglicsidos
Estreptomicina
Quinolonas
Tetraciclinas
Mecanismo de resistencia
Resistencia
debida a
Betalactamasas

PBP2 modificada
OmpF sustituida
por OmpC
Base
gentica
Plsmido y
cromosoma
Cromosoma
Cromosoma
Metilasas

Eritromicina-
esterasas
Cloranfenicolace-
tiltransferasa
(CAT)
Acetiltransferasa,
fosfatidiltransfe-
rasa, adeniltrans-
ferasa
Metilasas

LPS alterado
Plsmido y
cromosoma

Plsmido
Plsmido
Subunidad
30S del
ribosoma
DNA girasa a) Mutacin sobre DNA girasa
b) Disminucin de la
permeabilidad
c) Eflujo
Protenas S12 de
la subunidad 30S
ribosomal
DNA girasa
modificada
Mutacin NalB
NorA
Cromosoma
Subunidad
ribosomal
30S
Protenas Tel
inducibles
Psmido
a) Hidrlisis del anillo betalact-

mico del antibitico
b) alteracin del blanco
c) permeabilidad cambios en
las protenas de membrana
externa
a) metilacin del RNA riboso-
mal 23S
b) hidrlisis de la lactona de
eritromicina y olenadomicina
Modificacin del ATB evitando
su unin al ribosoma
a) Modificacin del ATB
impidiendo su transporte

b) Modificacin del RNA 16S de
la subunidad 30S del ribosoma
c) Bajo potencial de membrana
y transporte de electrones
inadecuado, cambios en el LPS
Modificacin de protenas
ribosomales
Interferencia con el transpor-te

de la droga, aumento del eflujo
Plsmido y
cromosoma

Plsmido

Cromosoma
Cromosoma
Cromosoma

Cromosoma
Bacteriocinas
Las bacteriocinas son pptidos o protenas de sntesis ribosomal producidos por bacterias que
inhiben el crecimiento o matan a otras bacterias. Su efecto bacteriosttico se puede apreciar por la
formacin de un halo oscuro, mientras que si el efecto es bacterioltico se observa un halo claro.
Producidas por Gram -
- Microcinas (Microcina 24): masa menor a 10 000Da
- Colicinas: masa mayor a 10 000 Da
Producidas por Gram +
- Lantobiticos
- Bacteriocinas no lantobiticas
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75
Pruebas de susceptibilidad in vitro a los antimicrobianos

Las pruebas de susceptibilidad son mtodos in vitro que determinan la sensibilidad de los MO a una
variedad de agentes antimicrobianos bajo condiciones de laboratorio especficas y estandarizadas por
la CLSI en la norma M2, con el objetivo de proveer al clnico de algunas recomendaciones sobre la
terapia que puede ser ms apropiada en pacientes con una infeccin especifica, junto con esto el
clnico relaciona la situacin o foco de infeccin con patologas primarias o secundarias con el fin de
evaluar si el paciente est en condiciones de recibir el AM o no. Adems permiten seguir la evolucin
de las resistencias bacterianas y monitorear medida la aparicin de agentes multirresistentes dentro
de la comunidad. Sin embargo la correlacin entre el resultado in vitro y la respuesta clnica no
siempre es exacta ya que existen condiciones especficas del frmaco y husped necesarias para una
respuesta adecuada; los factores que condicionan la respuesta clnica son:

Factores del agente AM:
- Farmacocintica
- Unin a protenas plasmticas.
- Vas de administracin.
- Accin bacteriosttica o bactericida.
- Concentracin en sitio de infeccin: depende de la carga bacteriana en la zona afectada.

Factores del husped:
- Enfermedad de base: se requiere conocer estos datos para la realizacin de una antibiograma
- Estado inmunolgico.
- Formacin de abscesos: cambios de pH.
- Presencia de un cuerpo extrao.
- Funcin renal y heptica.
- Cumplimiento del tratamiento

Factores del MO:
- Virulencia del agente.
- Alta concentracin del microorganismo.
- Infeccin mixta. Ejemplos: enterobacterias con anaerobios o coccea con anaerobio.
- Desarrollo de resistencia durante el tratamiento: los plsmidos juegan un papel importante
en este proceso.

El mtodo ms utilizado para determinar la sensibilidad in Vitro es la difusin en Agar de Kirby-
Bauer, para esto se emplea una tabla que relaciona la zona de inhibicin con el grado de resistencia
de la bacteria para determinados ATB. Para realizar el test de susceptibilidad se deben seguir los
siguientes pasos:
1. Se asla la cepa (cultivo axnico)
2. Se toma un muestra del cultivo puro y se realiza una suspensin de bacteria que puede
ser en suero fisiolgico, el que se estandariza con el nefelmetro de 0,5 Mac Farland,
esta densidad del inoculo es importante para los resultados, pues si es muy denso
puede arrojar un falso resistente.
3. Se inocula una placa con la suspensin, empleando una trula humedecida.
4. Se aplican los discos de los distintos ATB dependiendo del tipo de muestra y paciente.
5. Se incuba y se miden los halos de inhibicin, medida que se compara con tablas
previamente estandarizadas para determinar si es resistente, intermedio o susceptible.
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Existen especies que tienen susceptibilidad predecible, por ejemplo Streptococcus pyogenes que es
susceptible a penicilina, sin embargo siempre es necesario conocer una segunda alternativa de
tratamiento, debido a la existencia de reacciones alrgicas en determinados pacientes o alguna otra
condicin que invalide el tratamiento emprico, en el caso anteriormente mencionado se puede
emplear la eritromicina o ceftriaxona o ceftazidima como segunda opcin.

Una bacteria es considerada sensible a un AM si es inhibida por las concentraciones de droga
usualmente alcanzada con la dosificacin recomendada para el sitio de infeccin, de acuerdo a esto la
CLSI (2209 manual M100, versin 20) ha definido las sensibilidades de cada droga, adems esta
institucin ha definido las concentraciones requeridas en el disco, cual es la susceptibilidad en
difusin de Agar y la CIM para considerarse susceptible, intermedio y resistente; adems se especifica
cules son los valores esperados en un control de calidad de una determinada cepa tipo,
denominadas ATCC, para la difusin en Agar y CIM. Entre las cepas ATCC (American Type Culture
Collection) recomendadas estn:

Streptococcus pneumoniae ATCC 49619
Haemophilus influenzae
ATCC 49247 y 49766
Neisseria gonorrhoeae
ATCC 49226
Escherichia coli

ATCC 25922 y 35218
ATCC 25923 y 29213
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Enterococcus faecalis
ATCC 29212 (Discos de alto contenido de Aminoglicsidos)

Los puntos de corte corresponden a la concentracin de AM que separa poblaciones de MO, stos
han sido establecidos de acuerdo a estudios microbiolgicos que incluyen informacin sobre la
distribucin de los dimetros de inhibicin y a la CIM para un determinado ATB en variadas
poblaciones. Como regla general la concentracin alcanzada en el plasma es por lo menos 2 a 4 veces
superior a la CIM.

Para la realizacin de pruebas de susceptibilidad es necesario conocer a qu drogas ciertas especies
tienen resistencias y sensibilidades naturales.
- E. coli: se conoce que naturalmente es sensible a la mayora de las drogas, sin embargo han
presentado resistencia adquirida a muchas drogas.
- Klebsiella spp: se encuentra en muestras clnicas, presenta resistencia natural a ampicilina.
- Pseudomonas aeruginosa presenta una resistencia natural en un 100% a ampicilina y
ampicilina/sulbactam, adems han adquirido multirresistencia.
- Stenotrophomonas presenta alta resistencia a muchos medicamentos. SXT es uno de los
pocos medicamentos al cual posee sensibilidad natural
- Los organismos no fermentadores son lo que presentan mayor resistencia a AM, adems de
haber adquirido multirresistencia (P. aeruginosa, Acinetobacter)
- S aureus: Multirresistencia.
- S. pneumoniae: Resistencia a penicilina, y por tanto podra presentar resistencia a otros
betalactmicos.
- Streptococcus viridans: se monitorean los casos de endocarditis y septicemia. En muestras de
lquido articular se debe hacer un espectro de droga AM a este agente.
- Enterococcus: multirresistentes.
- Enterobacteriaceae: En general se estudia la susceptibilidad, principalmente para la bsqueda
de BLEE.
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H. influenzae: resistencia a penicilina y a ceftriaxona.

N. gonorrhoeae: Resistentes a penicilinas, se debe ampliar el espectro.
Moraxella catharrhallis: se monitorean los casos en que causa un cuadro pulmonar, pues
coloniza la zona farngea, han adquirido resistencia a penicilina o ampicilina.
- Streptococcus E-hemolticos: son sensibles a la penicilina, como segunda opcin se emplea
eritromicina, ceftriaxona, ceftazidima.
- Neisseria meningitidis: puede presentar resistencia.
- Listeria monocytogenes: Presenta resistencia a los betalactmicos.

La resistencia, farmacocintica y farmacodinamia en los distintos tipos de muestra se deben
considerar a la hora de hacer pruebas de susceptibilidad.

- Urocultivo: Se debe considerar el sexo y edad del paciente Las quinolonas son los
tratamientos de eleccin para infecciones urinarias, sin embargo no se administran a mujeres
embarazadas ni a nios (menores de 15 aos), para monitorear la susceptibilidad a
quinolonas se utiliza ciprofloxacino o levofloxacino.

Drogas tiles en ITU
A. pipemdico
Enoxacino
Amoxicilina/sulbactam Afuroxima
Norfloxacino
Trimetoprim
Ampicilina sulbactam
Cefixima
Ciprofloxacino
Cotrimoxazol
Cefalotina
Ceftibuteno
Ofloxacino
Nitrofurantona
Cefadroxilo
Forfomicina-
Levofloxacino
Amoxicilina
Cefaclor
trometamol
- Meningitis: se deben emplear drogas capaces de atravesar la BHE, el tratamiento de eleccin
es ceftriaxona y ceftazidima:

Drogas tiles en Meningitis

S. aureus
Ceftriaxona

Aztreonam
Rifampicina
Cloxacilina
Ceftazidima
Cloranfenicol
Meropenem
Vancomicina/rifampicina

- Uretritis no gonoccica: prioritariamente se utilizan macrlidos (Azitromicina, Doxicilina). Los
agentes causales son muy fastidiosos, por tanto el tratamiento es de tipo emprico, cuando
hay sospecha de Mycoplasma, Chlamidya o Ureoplasma.

Drogas tiles en Uretritis No Gonoccica
Azitromicina
Eritromicina base
Ofloxacino
Doxiciclina
Eritromicina etilsuccinato

- Uretritis gonoccica: involucra a N. gonorrhoeae. El tratamiento de eleccin era penicilina,
sin embargo la bacteria ha adquirido resistencia contra esta droga.
- Zonas blandas y osteomielitis: son zonas complejas de tratar pues en ella estn involucradas
distintas especies, principalmente anaerobios, los medicamento de eleccin son aquellos que
logran llegar en forma muy adecuada a los tejidos y a cavidades de difcil acceso como el
sistema articular o sistema seo, como primera alternativa se tienen a los betalactmicos, en
el caso de Staphylococcus aureus, Streptococcus E hemoltico, la alternativa de tratamiento es
vancomicina, en caso de Enterococcus, lo es imipenem. Estas drogas son capaces de llegar al
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lugar de la infeccin, especialmente los abscesos, y no sufren modificacin ni por pH ni por

barreras que puede producir el proceso infeccioso.
Infecciones intrabdominales: Generalmente son producidas por anaerobios, la alternativa al
tratamiento de eleccin es la ampicilina, en caso de existir resistencia a esta droga se emplea
amoxicilina combinada con cido clavulnico, debido a las altas concentraciones de droga que
se deben administrar puede existir un desplazamiento de la microbiota intestinal, Bacteroides
fragilis que produce colitis pseudomembranosa, genera graves problemas por la produccin
de una toxina especifica mientras est en tratamiento. Si la infeccin es producida por
Candida albicams el tratamiento se realiza con antifngicos, en general se usa anfotericina B.
Para el tratamiento de cuadros diarreicos generalmente se usan drogas que son capaces de
llegar a concentraciones adecuadas en el intestino grueso y delgado, como el SXT que es el
agente ms adecuado, muchas veces se usan fluoroquinolonas; el agente ms habitual es
Salmonella enteritidis y E. coli O157 en nios menores de 2 aos, En infecciones intestinales
se usan quinolonas como tratamiento de primera eleccin, sin embargo cuando se trata de
infantes de opta por septrim, o ceftriaxona como segunda eleccin. En cuadros diarreicos
provocados por Campylobacter jejuni, la eritromicina es el tratamiento de eleccin y algunas
fluoroquinolonas en adultos.
Para monitorear Haemophilus influenzae, generalmente se usaba ampicilina, cotrimoxazol y
cloranfenicol, mas, debido a la adquisicin de resistencias se opta por ceftriaxona y
Meropenem como alternativa de tratamiento.
Informe de susceptibilidad

Cuando la prueba de difusin es agar manifiesta susceptibilidad intermedia se debe indicar que
puede estar susceptible o resistente in vivo, debiendo el clnico decidir aumentar la dosis o descartar
la droga como alternativa de tratamiento, esta informacin es de utilidad cuando el organismo es
multirresistente y no existen otras drogas plausibles para su tratamiento.

Los resultados de sensibilidad a ampicilina predicen la actividad a amoxicilina y otros
betalactmicos. Por otro lado la mayora de los aislamientos de Haemophilus influenzae resistentes a
ampicilina o amoxicilina indican la produccin de betalactamasas de tipo TEM (prediccin por
nitrocefinasa).

Para aislamientos de LCR o sangre slo debe informarse la sensibilidad a ampicilina, cefalosporinas
de 3 generacin, cloranfenicol y meropenem. La eleccin de la cefalosporina de 3 generacin est
ligada a la disponibilidad del frmaco en el servicio clnico, y el cloranfenicol solo se considera como
una tercera alternativa.

Los resultados obtenidos con agentes administrados por va oral solo deberan informarse en
infecciones como otitis media, sinusitis e infeccin broncopulmonar.

Aquellos aislamientos resistentes a ampicilina no productores de betalactamasas son muy inusuales
y debern ser considerados resistentes a todos los otros betalactmicos principalmente a:
amoxicilina/cido clavulnico, ampicilina/sulbactam, cefaclor, cefuroxima. Para S. pneumoniae aislado
de LCR, hemocultivo o proceso pulmonar, los puntos de corte de sensibilidad son distintos para la
amoxicilina, amoxicilina/cido clavulnico; para esta bacteria el monitoreo de penicilina se realiza con
oxacilina (1um), ya que los discos de penicilina no brindan resultados reproducibles, los resultados de
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las pruebas de difusin en agar con esta droga son generalizables a todas las drogas betalactmicas, si
el tamao del halo es inferior a 20 mm necesariamente se debe realizar la determinacin de la CIM,
estandarizada por la norma M7 de la CLSI, con el objetivo de conocer si es susceptible o no,
generalmente se utiliza el E-test de penicilina (0,6 ug/mL). Finalmente para este MO se debe
informar la CMI de penicilina, cefotaxima, ceftriaxona, meropenem y vancomicina.

Cuando existe resistencia contra las siguientes drogas: azitromicina, aztreonam, cefepime,
cefotaxima, cefpodoxima, ceftazidima, ceftriaxona, ciprofloxacino, levofloxacino, imipenem y
meropenem; se debe revisar el procedimiento tcnico, la viabilidad de la droga usada, y si persiste la
resistencia se debe enviar a un laboratorio de referencia, en el caso de Chile es el ISP.

En el caso de los estreptococos E-hemolticos y del grupo Viridans, solo se considera cuando se
encuentran en zonas estriles como el lquido articular o pericrdico, cuando ocurre esto se debe
monitorear la penicilina y ampicilina a travs del mtodo de CIM y no por mtodo de difusin ya que
este no es suficiente para determinar la sensibilidad o resistencia, esta se realiza en caldo Mueller
Hinton, con una concentracin estandarizada de calcio y magnesio, con adicin de sangre de cordero
al 5%, en condiciones sin CO2 por incubacin de 20 a 24 horas.

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Control de calidad

Empleando especies que son resistentes en forma natural a una droga se puede determinar la
calidad del proceso tcnico o si la identificacin es adecuada. El proceso de control de calidad se
puede realizar utilizando cepas ATCC, permitiendo determinar la precisin y exactitud de los
procedimientos, controlar la calidad de los equipos, instrumentos y reactivos, principalmente la droga
antimicrobiana, evaluar el desempeo del personal que realiza la prueba, y as controlar los
resultados antes de emitirlos. Se deben controlar diversas variables:
- Medio de cultivo: generalmente se utiliza Agar Mueller Hinton, para su control se utiliza
principalmente E. coli ATCC 25922; en caso de agentes fastidiosos se utiliza este mismo agar
pero con adicin de sangre de cordero al 5%, en su control se usa S. pneumoniae ATCC
49619; en el caso de H. influenzae se utiliza Agar HTM, especialmente diseado para el
desarrollo de Haemophilus.
o Composicin: calcio y magnesio principalmente, estandarizados en 20 25 y 10
12,5 meq respectivamente, si estn aumentados pueden inducir un incremento en
la actividad de la colistina y tetraciclina, y disminuir la de los aminoglicsidos
cuando se prueban con P. aeruginosa, habiendo por tanto una distorsin en la
medicin del halo. Con concentraciones menores puede ocurrir el efecto contrario.
El control se realiza con P. aeruginosa ATCC 27853, enfrentndolo a gentamicina.
Timina-timidina se controla con E. faecalis ATCC 29212, la alta concentracin de
timina altera la sensibilidad a cotrimoxasol y sulfas.
o Profundidad: debe ser de 4 mm, a menor profundidad puede existir una falsa
sensibilidad y a mayor una falsa resistencia.
o pH: generalmente se controla usando E. coli ATCC 25922, que se confronta con
gentamicina y tetraciclina. El pH cido puede producir una menor actividad de los
aminoglicsidos y macrlidos, y el pH alcalino el efecto es contrario. Las drogas que
usualmente se utilizan para controlar el pH son amikacina y tetraciclina, donde a pH
alcalino tetraciclina disminuye su actividad y amikacina la aumenta. Se debe evitar
incubar en microaerofilia ya que disminuye el pH.
o Humedad
o Esterilidad
o Fecha de expiracin
- Inculo: concentracin de bacterias estandarizada a 0,5 Mc Farland, si aumenta la
concentracin puede producir una falsa resistencia, y una disminucin una falsa
sensibilidad, los patrones de control de 0,5 Mc Farland pueden ser medidos en
comparacin con otro tubo de similares caractersticas o medirlo con un instrumento a 625
nm. Una vez que se ha depositado el agente en las placas de MH u otras no deben pasar
ms de 15 min entre la aplicacin del agente y la insercin de los discos ya que esto puede
producir una falsa resistencia. Hay que considerar la atmsfera, si se requiere sembrarlo en
aerobiosis o anaerobiosis, o si requiere concentraciones de CO2 tambin debe controlarse
la temperatura.
- Antimicrobianos: no se deben colocar ms de 6 sensidiscos por placa de 100 mm para
estudio en una prueba de sensibilidad antimicrobiana, con una distancia no menor de 24
mm entre ellos. Los sensidiscos se deben almacenar entre -20 C y 8 C, betalactmicos a -
20 C, al igual que aquellos que no se usan por largo tiempo, antes de usarse deben dejarse
1 o 2 horas a temperatura ambiente. Al colocar los sensidiscos deben tenerse en cuenta los
antagonismos. La potencia de los discos se verifica utilizando cepas control como E. coli
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ATCC 25922 y S. aureus ATCC 25923 cuyos halos de inhibicin deben concordar con
aquellos establecidos por la CLSI. Para el control de sensidiscos de Betalactmicos sobre
enterobacterias usar E. coli ATCC 35218.
Incubacin: 35 2 C. 16 18 hrs. en aerobiosis, 24 hrs slo para medir la susceptibilidad a
vancomicina, debe realizarse antes de 15 minutos desde la colocacin de los sensidiscos
Lectura: debe ser entre las 16 y 18 horas, sobrepasado ese tiempo se puede obtener una
falsa resistencia, en el caso de oxacilina o vancomicina se puede leer hasta 24 horas tanto
para Staphylococcus como para Enterococcus.

El control de calidad se ejerce para todas las pruebas realizadas en el laboratorio de microbiologa
con el fin de asegurar la buena prctica del aislamiento e identificacin del MO, adems de la prueba
de susceptibilidad.

Este control exige la existencia de un manual de procedimientos, que debe existir en todos los
laboratorios; la verificacin y validacin de metodologas y equipos, adems de la educacin continua
del personal; se debe contar con elementos de bioseguridad y libros de registro e informes, que
indiquen los controles diarios de temperatura, lotes, etc., estos deben ser continuamente
supervisados; se requiere tambin la existencia de controles externos, esto asegura la confiabilidad y
reproducibilidad de los anlisis.

Los clculos de CV y DE, parte de funciones analticas, tienen poca aplicacin en el laboratorio, ya
que la mayora de los resultados son productos de interpretaciones y evaluacin de reacciones
bioqumicas de seres vivos, expuestos a variaciones inmanejables, donde el valor de la experiencia
tiene mucha importancia ya que de ella depende los resultados.

Los errores que pueden surgir se diferencian en:

Fase pre analtica
1. Peticin de examen: corroborar si el formulario corresponde a los datos de la muestra.
2. Toma de muestra: desarrollar un manual para muestras de rutina y urgencia.
3. Transporte de la muestra: embalaje y riesgos asociados.
4. Recepcin de la muestra: procedimientos con criterios de aceptacin o rechazo.

Fase analtica:
1. Anlisis de laboratorio: ejecucin y registro de resultados
2. Mantencin de equipos e instrumentos: calibraciones y mantenciones, con registros y
programacin para su buen funcionamiento.
3. Control de calidad de insumos y reactivos: programas control con sus registros, reactivos
con vida til prolongada.

Fase post analtica
1. Produccin de informes, entrega de resultados.
2. Derivacin de exmenes a otras instituciones porque no se posee la tcnica.
3. Almacenamiento de datos y produccin de estadsticas. Base de datos de las cepas ms
aisladas, infecciones intrahospitalarias, etc.
4. Preparacin de insumos para un nuevo anlisis.
5. Reciclaje de material, esterilizacin, tratamiento de desechos.

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Las estufas de cultivo son el equipo ms utilizado en el laboratorio de microbiologa, requiere un
control diario de temperatura 2 veces al da, permitindose una variacin de 1 C; se debe llevar un
registro de esto en la puerta o parte lateral del equipo. Adems de debe mantener en el interior un
termmetro de mnima y mxima, que indica cuando fue la temperatura mnima y mxima, lograda
en un periodo de tiempo, la temperatura se debe calibrar en distintos sectores dentro de la estufa y
mantener un vaso de agua destilada en el interior para mantener humedad, ya que la prdida de
humedad en las placas no puede ser mayor a 15% a las 24 horas. La placa se debe pesar antes y
despus de ser llevada a la estufa.

30g

24 hrs 36 1C

>25.5g

Se debe contar con un termmetro de referencia calibrado y certificado, comparando con l el resto
de los termmetros y registrando los factores de error para cada termmetro comparado. Se deben
usar cepas control positivo y negativo a la temperatura de trabajo. Las estufas requieren mantencin
anual de cables, conexiones, resistencia y sistemas de cierre de la estufa; y una mantencin mensual,
que incluye la desinfeccin con alcohol 70%, no se debe emplear cloro.

La autoclave debe alcanzar 121 1C dentro de los primeros 5 minutos y una vez finalizado el ciclo,
la temperatura debe bajar a 100 C en 8 minutos, no se debe sobrecargar, ya que demora ms en
alcanzar la temperatura, se debe usar termmetros de registro mnimo/mximo calibrado, con rango
de 80 C a 130 C ubicado en el centro del autoclave. Se debe llevar un registro de funcionamiento
para cada ciclo de esterilizacin, incluyendo operador, temperatura, tiempo, fecha, presin, control
biolgico, utilizando una ampolla de Bacillus thermophilus que si cambia de color indica una
deficiencia en el proceso. Se debe realizar una mantencin, con inspeccin de vlvulas de seguridad,
cerrado de tapa, deteccin de fugas, limpieza diaria y eliminacin de residuos, entre otros.

Se deben controlar los Destiladores de agua ya que se requiere agua tipo II; es decir con
conductividad no superior a 0,5 MOhm y pH entre 5,5 y 7,5, donde mientras ms cida sea el agua
ms pura es, se debe hacer un recuento de colonias del agua empleada tomando colonias del filtro y
plaquendolas en un agar. El agua no debe tener sales de Ca y Mg, pues involucra una elevacin del
pH y por ende de la conductividad.

Otros instrumentos que requieren control son: Cabina de seguridad, controlar los filtros y prefiltros;
Horno Pasteur, Refrigeradores, Microscopios y Centrfugas.

El control de medios de cultivo involucra:
1. Almacenaje: sin preparar se deben conservar en un lugar fresco, a temperatura ambiente,
protegidos de la luz y humedad. Se deben plaquear a 50 C para evitar deshidratacin. El agar
chocolate se prepara a 80 C sin embargo la sangre no se aade a altas temperaturas pues
existe coagulacin por desnaturalizacin de protenas, una vez preparados se debe almacenar
a 4 C en un lugar oscuro, en una bolsa sellada, o bien sellando cada placa para evitar la
deshidratacin. Antes de usar se deben colocar a 36 C por 2 horas para eliminar
condensacin y as lograr un buen aislamiento de colonias, pues de otro modo el shock
trmico puede estresar la bacteria e inhibir su crecimiento.
2. Preparacin:
- pesaje, masar correctamente; calibracin de balanzas (masas patrones)
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83
insumos, medios de cultivo no hidratado o endurecido; calidad del agua sin

inhibidores o minerales.
- pH, para el tipo de medio; pueden existir errores por aumento de temperatura o
mala calidad de buffer.
- material de preparacin, evitar recipientes mal lavados, contaminacin con residuos
qumicos, etc.
3. Esterilidad: se debe respetar la temperatura de esterilizacin del medio recordando que los
agares SS, XLD, TCBS y caldo selenito no se autoclavan, y que los azcares o caldos con
azcares deben autoclavarse a 115 C por 10 minutos, de lo contrario se caramelizan y
pierden la capacidad nutricional del medio. Para controlar la esterilidad se debe llevar el 5% o
el 100% de las placas a incubacin por 48 hrs a 36 C y luego dejar 48 hrs ms a temperatura
al igual que los tubos del centro.
4. Capacidad de crecimiento y reaccin de cepas control, se debe probar cada lote de los medios
con cepas ATCC u otras cuyo comportamiento es conocido en esos medios.
5. Estabilidad: los medios preparados mantienen su calidad por 14 das a 4 C o hasta dos meses
si se sellan las placas o se encuentran en bolsas selladas. Evitar congelamiento de los medios
o la sangre de cordero porque la sangre se puede hemolizar.
6. Registros de lotes de produccin. Permiten trazabilidad. Se utiliza un nmero de lote
correlativo interno de laboratorio en el envase a esterilizar. Este lote considera el lote del
producto, fecha, operador, etc. de modo que no hay que volver a escribir toda la informacin.

Se debe hacer un control semanal de los colorantes con cepas conocidas como S. aureus y E. coli
para la tincin Gram y Mycobacterium para Ziehl Neelsen, deben adems filtrarse debido a que
puede haber precipitacin o bacterias que se alimentan de ellos; si se sospecha contaminacin de
colorantes se deben sembrar en tioglicolato; se debe evitar la evaporacin cerrando bien los frascos,
deben tenerse en cuenta otros interferentes como los portaobjetos con grasa, o el
sobrecalentamiento de los portaobjetos en la fijacin quemando las bacterias.

Existen varias colecciones de cepas utilizables para el control de calidad. Algunos ejemplos son:
ATCC: American Type Culture Collection- Rockville, USA
NCIC: National Collection of Industrial Bacteria- Survey, Inglaterra
JFCC: Japanese Federation of Culture Collection of Microorganism-Japn.
CCTM: Coleccin Nacional Lille, Francia
RIA: USSR Reseach Institute for Antibiotics- Mosc, Rusia.
NCIB: Coleccin Nacional industrial Aberdeen, Escocia
DSM: Deutsche Sammlung von Mikroorganismen Gottinger, Alemania.
* As, E. coli ATCC 25922 es igual a la DSM 1103 y a la NCIB 12210.
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Microbiota

Es el conjunto de MO que habitualmente vive en un cuerpo sano, participan en los procesos de
digestin de los alimentos, en la sntesis de vitamina K y del complejo B, y en la produccin de pH
cido a nivel vaginal, evitando la colonizacin de otros MO que no toleran el pH cido, o por
antagonismo competitivo, as actan como mecanismo de defensa, ej.: Lactobacillus; inducen adems
la produccin de anticuerpos, inmunoglobulinas y de sustancias antibacterianas, bacteriocinas y
colicinas.

El cuerpo humano posee 1014 clulas
bacterianas de las cuales el 90% son
comensales, en la mayora de los casos
con una relacin mutualista. Algunos de
stos MO pueden transformarse en
patgenos oportunistas si se alteran las
condiciones fisiolgicas del individuo, se
altera la virulencia del organismo o bien si
se introducen en cavidades estriles.

En la piel puede encontrarse tanto una microbiota residente como una transitoria, especialmente
en las manos, si la residente es alterada, la de tipo transitorio puede colonizar, proliferar y finalmente
producir una enfermedad. Esta microbiota transitoria en su mayora son patgenos que se adquieren
por contacto con fmites y son fcilmente eliminados por el lavado, al contrario de los residentes que
son de baja virulencia pero ms resistentes a los desinfectantes y por tanto difciles de eliminar. La
microbiota de la piel en general es regulada por el nmero y actividad de las glndulas sebceas y
sudorparas, por la descamacin celular y el grado de sequedad de la piel.

Al momento de nacer el intestino grueso es un territorio estril que se va colonizando acorde a la
dieta, albergando ms de 500 especies diferentes, as en lactantes predominan las bacterias lcticas,
anaerobios estrictos y enterobacterias, mientras que en adultos casi el 99% de la microbiota intestinal
est conformada por bacterias anaerobias estrictas (Fusobacterium, Bacteroides, Clostridium), y
bacterias lcticas (Streptococcus, Lactobacillus), las bacterias anaerobias facultativas solo representan
el 1% (Escherichia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter).

Antes de la pubertad la vagina es alcalina y predomina la presencia de Staphylococcus,
Streptococcus y difteroides, una vez alcanzada la adultez se vuelve dbilmente cida y adquiere
cantidades significativas de glucgeno, lo que permite la presencia de Lactobacillus acidophilus,
adems de Streptococcus, Bacteroides, Candida y Clostridium, una vez alcanzada la menopausia
desaparece el glucgeno, se eleva el pH y la microbiota se parece a la que se encuentra antes de la
pubertad (cocceas Gram+). En los genitales externos masculinos existe una gran cantidad de MO
colonizando especialmente la zona del prepucio, pudindose incluso encontrar Mycobacterium.

Existen territorios estriles en condiciones normales dentro del organismo que carecen de
microbiota, algunos de ellos son: el tracto respiratorio inferior, donde los MO que lo alcanzan son
rpidamente fagocitados, el tracto genitourinario alto (desde los riones a la vejiga, y la primera
porcin de la uretra en hombres), LCR, sangre, no es completamente estril, msculos, articulaciones,
huesos, hgado, tejido conectivo y bazo.
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Regin
Grupo
Piel
Bacterias

Hongos
Conjuntiva
Bacterias
Vas
Respiratorias
Altas
Bacterias
Boca
Faringe
Intestino grueso
Vas
genitourinarias
bajas (uretra y
vagina)
Bacterias
(1010/g
sarro)
Hongos
Virus
Bacterias
Bacterias
(109/g)
Hongos
Virus
Bacterias
Hongos
Protozoos
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Componentes
Gram +: Staphylococcus, Bacillus, Enterococcus, Micrococcus,
Brevibacterium, Corynebacterium, Streptococcus, Propionibacterium,
coliformes
Gram-: Pseudomonas, enterobacterias
Candida, Pytirosporum, Malassezia
S. aureus, S. epidermidis, difteroides, Micrococcus,
Propionibacterium, Corynebacterium, estreptococos
Nariz: S. aureus, S. epidermidis, difteroides
Garganta: S. aureus, S. epidermidis, difteroides, S. pneumoniae,
Neisseria, Haemophilus
Streptococcus mutans, Neisseria, Corynebacterium, Veillonella,
Treponema, Haemophilus, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus,
Lactobacillus, difteroides. Gran cantidad de anaerobios estrictos.
Bacteroides, Fusobacterium,
Candida
Adenovirus y Herpesvirus
Streptococcus Neisseria, Staphylococcus
E. coli, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Klebsiella, Bacteroides,
Fusobacterium, Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium
Candida
Enterovirus, rotavirus, adenovirus, herpesvirus
Uretra: Staphylococcus, Micrococcus,
Enterococcus, Lactobacillus, Proteus, Bacteroides, difteroides,
Klebsiella, Pseudomonas.
Vagina: Lactobacillus, difteroides, Streptococcus, Staphylococcus,
Bacteroides, Clostridium
Vagina: Candida
Vagina: Trichomonas vaginalis
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Cocceas Gram positivas

Familia ^Gnero Staphylococcus

Dominio: Bacteria
Phylum: Firmicutes
Clase:
Orden: Bacillales
Familia: ^
Gnero: Staphylococcus, (importancia mdica)

En un comienzo este gnero era clasificado dentro de la familia Micrococcaceae pero actualmente
se ha propuesto una nueva familia para este gnero, ^ cuyo nombre deriva del
griego Staphy ia entre ambas familias se encuentra
en la susceptibilidad a bacitracina, siendo Staphylococcaceae resistente a esta droga antimicrobiana.

Tamao: 0,5 1,5 um
Agrupacin: irregular en ocasiones en forma de racimo
Importancia epidemiolgica: su presencia en agua indica contaminacin fecal reciente.

Esta familia est compuesta por 48 especies y varias subespecies donde los ms importantes para el
ser humano son S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus y S. lugdunensis, todo ellos son cocos
Gram+ anaerobios facultativos (exp. S. saccharolyticcus anaerobio estricto), catalasa positiva, oxidasa
EDK
de modo que crecen bien en medios de peptona, sin embargo son inhibidos por altas concentraciones
de sales biliares.


Hbitat: zona nasofarngea, tracto gastrointestinal (intestino grueso), perineo y ambientes
hospitalarios (fmites).
Reservorio: humano, portadores persistentes (nasofarngeo 30 50%, fecales 20%, piel 5
20%), portadores intermitentes.
Resistencia: viable por meses en ropas, paredes y medio ambiente general, resiste 60 C por
30 minutos, se ha descrito resistencia a antispticos mercuriales y amonios cuaternarios.
Importancia epidemiolgica: multirresistencia.
Transmisin: gotitas de pflgge, piel, fmites y alimentos contaminados.
Factores predisponentes: heridas abiertas, neutropenia, fibrosis qustica, enfermedad
granulomatosa crnica, diabetes, catteres, VIH y trabajadores de la Salud.

Se caracteriza por poseer la enzima coagulasa, una caracterstica que solo comparte con S.
intermedius y S. hyicus subespecie hyicus, sin embargo estos ltimos solo se encuentran en animales;
de modo tal que su presencia permite identificarlo como especie al ser aislado de una muestra clnica.
Adems es halotolerante y fermentador del manitol.
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Para su aislamiento se puede emplear Agar Nutriente, Agar Sangre, Agar Chapman (Agar nutriente
con adicin de 9% de sal, manitol e indicador rojo fenol, forma colonias amarillas), o Agar Baird
Parker (Colonias negras). Crecen bien en condiciones aerbicas o microaeroflicas a 37 C a las 24-48
hrs de incubacin, obtenindose colonias que pueden ser pigmentadas o no (Agar nutriente y
Sangre), en caso de serlo su pigmento es de color dorado y se produce mejor a 20-25 C, su tiempo
generacional es de 30 min.

Puede provocar infecciones localizadas de piel y mucosas, furnculos, ntrax, imptigo, flegmn,
abscesos, infecciones en heridas quirrgicas y quemaduras, siendo en estos el segundo agente con
ms frecuencia luego de Pseudomonas aeruginosa. Puede provocar adems infecciones invasivas
como septicemias, endocarditis, pericarditis, osteomielitis, meningitis, otitis y sinusitis. La presencia
de toxinas en las cepas puede ser responsable de intoxicaciones alimentarias, sndrome de Shock
txico, sndrome de la piel escaldada y la enterocolitis estafiloccica. Sin embargo la colonizacin
asintomtica es ms frecuente que aquella que causa enfermedad.

Factores de virulencia
Peptidoglicano: constituye la red de murena de los MO Gram+, acta como pirgeno y
quimiotctico, es responsable de abscesos como las espinillas (S. aureus y P. acnes).
cido Teicoico: se une a la fibronectina que forma parte de las superficies celulares en general.
Protena A: solo est presente en S. aureus (coagulasa positivo), en base a lo cual se han
desarrollado pruebas de aglutinacin en ltex para la identificacin de esta bacteria. Esta
protena posee actividad antifagocitaria, activa el complemento, inhibe regin Fc de IgM, induce
la liberacin de factores quimiotcticos y contiene proteinasas que degradan el tejido,
produciendo destruccin de protenas, que constituyen el pus (pH cido).
Cpsula (Slime layer): no todas las bacterias la poseen, su funcin es evitar la fagocitosis y
facilitar la adherencia a mucosas y cuerpos inanimados.
Enzimas: catalasa, coagulasa, hialuronidasa, estafiloquinasa o estreptoquinasa (fibrolisina),
lipasa, DNAsas, betalactamasas.
Adhesinas: permiten la unin a ciertos receptores celulares como: colgeno, fibronectina y
fibringeno.

Toxinas:
Citolticas o citotoxinas: son exotoxinas muy sensibles al calor que lisan los glbulos rojos y
afectan a macrfagos y leucocitos, se clasifican en alfa, beta, gamma, delta y leucocidina:
- Toxina alfa: afecta el msculo liso de los vasos sanguneos y es txica para los GR,
leucocitos, hepatocitos y plaquetas, produciendo hemlisis parcial y pancitopenia.
- Toxina beta (beta hemolisina o esfingomielinasa C). Activa el factor CAMP que exacerba la
hemlisis producida por L. monocytogenes y S. agalactiae, la que se observa como punta
de flecha en el test de CAMP. Es txica para GR, fibroblastos, leucocitos y macrfagos
produciendo hemlisis total.
- Toxina gamma: no tiene importancia mdica.
- Toxina delta: afecta la membrana del GR.
- Leucocidina: es leucotxica, menos del 5% de las cepas la producen.
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Toxinas exfoliativas (A y B): exotoxinas causantes de eritemas, genera la separacin del tejido
intraepidrmico (epidermolticas), produciendo el sndrome de la piel escaldada.
A: termoestable y codificada cromosomalmente.
B: termosensible y codificada por plasmidios. Afecta solo a nios.

Toxina-1 del sndrome del shock txico (TSST-1) o Enterotoxina F: Es una exotoxina
termoestable que afecta principalmente a mujeres durante la menstruacin, distribuyndose a
travs de la sangre a nivel orgnico, produciendo fiebre, vmito, diarrea; la lengua toma aspecto
de fresa y puede producir la muerte por una falla multiorgnica sistmica.

Enterotoxinas (A-E y G a I): adquieren Importancia en portadores de S. aureus y manipuladores
de alimento. Son exotoxinas superantgenos que estimulan la proliferacin de linfocitos T y la
liberacin de citoquinas, adems actan sobre los mastocitos aumentando el peristaltismo
intestinal y la prdida de lquidos, por medio de nauseas y vmitos. Son estables a 100 C por 30
min y resisten la hidrlisis de las enzimas gstricas y yeyuneales. Producidas por el 30 50% de
las cepas de S. aureus, requiriendo condiciones de microaerofilia para su produccin.
- A: es la ms asociada a la intoxicacin alimentaria, por huevos, atn, pollo, papas, crema,
chocolates leche y derivados. Solo se produce si hay una tensin de 30% de CO2 en el
alimento.
- B: produce enterocolitis estafiloccica.

Susceptibilidad Antimicrobiana
Las cepas hospitalarias siempre son ms resistentes que las de nivel comunitario.
En Chile el 90% de las cepas son resistentes a penicilina, Cloxacilina fue por mucho tiempo la droga de
eleccin, pues es resistente a Betalactamasas, sin embargo actualmente han adquirido resistencia, de
modo que se ha comenzado a usar Ciprofloxacino (Quinolona) como tratamiento, tenindose como
alternativas las lincosaminas, eritromicina, fosfomicina, aminoglicsidos, tetraciclinas, cefalosporinas
y sulfas, en caso de existir resistencia a eritromicina debe realizarse D-test con el fin de determinar la
resistencia inducida a clindamicina. Son muy sensibles a Vancomicina y Rifampicina.

Existen cepas resistentes a meticilina (MRSA), la cual es una droga que no se usa actualmente como
terapia, sino solo como monitorizacin ya que si una cepa es resistente a meticilina posee el gen
MecA en el cromosoma bacteriano el cual va acompaado de genes de resistencia a otras drogas
como cloxacilina y otros betalactmicos, adems de tetraciclinas, macrlidos, lincosaminas,
aminoglicsidos y quinolonas, as frente a una cepa MRSA solo se puede emplear vancomicina.

Si una cepa es sensible a penicilina tambin lo ser frente a otras penicilinas, a las combinaciones de
betalactmicos con inhibidores, a cefalosporinas y carbapenems, en el caso que sean resistentes a
penicilina pero susceptibles a oxacilina, la bacteria ser resistente a todos los frmacos que son
inactivados por betalactamasas (ampicilina, amoxicilina, azlocilina, carbenicilina, mezlocilina,
piperacilina, ticarcilina), pero sensible a aquellas que no son inactivadas (meticilina, nafcilina,
cloxacilina, dicloxacilina), a las combinaciones con inhibidores, a cefalosporinas y carbapenems. Si la
cepa es resistente tanto a penicilina como a oxacilina, esta resistencia ser extensible a todos los
betalactmicos disponibles incluyendo las combinaciones con inhibidores, cefalosporinas y
carbapenems, la mayora son resistentes tambin a otros antibiticos como aminoglicsidos,
macrlidos, clindamicina y tetraciclinas.

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El control epidemiolgico requiere corroborar la existencia de resistencia a meticilina y la realizacin
de D-test en busca de falsa susceptibilidad a Clindamicina

Staphylococcus epidermidis

Hbitat: piel y superficies mucosas
Reservorio: humano
Importancia epidemiolgica: altas tasas de resistencia a meticilina, produccin de biofilms.
Transmisin: implantes mdicos, contacto directo

Las colonias son blancas, pequeas y pueden producir hemlisis en Agar Sangre, lo cual no es
habitual. La identificacin de laboratorio solo lo diagnostica como Staphylococcus coagulasa negativo,
el diagnstico de la especie se puede realizar mediante PCR o pruebas de aglutinacin en ltex.

Su accin patgena ms importante es la contaminacin de dispositivos mdicos como catteres,
marcapasos, pudiendo producir endocarditis, es uno de los principales MO causantes de
endoftalmitis, provoca adems infeccin de heridas, cistitis, bacteriemia en pacientes
inmunodeprimidos, septicemia, otitis media. Se estima que produce el 43 80% de los cuadros por
estafilococos coagulasa negativo.

El tratamiento incluye la remocin del dispositivo mdico, y la administracin de Lincomicina,
Eritromicina, Cloxacilina o alguna Cefalosporina de 1 3 generacin, en caso de presentar
resistencia a estas drogas se puede emplear Vancomicina.

Staphylococcus saprophyticus

Hbitat: piel y superficies de animales.
Reservorio: animales (zoonosis).
Importancia epidemiolgica: produccin de ITU (2 agente causal de cistitis despus de E.
coli).

Se caracteriza por ser resistente a la novobiocina, constituyendo la prueba determinante para su
identificacin cuando es aislado de muestras clnicas; adems es coagulasa negativo, no reduce
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nitritos a nitratos y es manitol variable. Tiene la capacidad de adherirse a receptores de las clulas
uretrales, ya que posee receptores especficos para ese sitio.

Es sensible a la mayora de los antibiticos utilizados para infecciones urinarias: Nitrofurantona,
Quinolonas, Cefalosporinas, SXT.

Staphylococcus lugdunensis

Hbitat: piel y perineo.
Resistencia: no presenta.

Esta especie hace diez aos no tena rol patognico atribuible, actualmente se conoce el papel que
cumple en la produccin de endocarditis, sepsis e infecciones de tejidos blandos y piel. Su
identificacin de basa en la presencia de la enzima pyrrolidonil arilamidasa (PYRasa), adems es
Cumpling factor positivo, Coagulasa negativo y Ornitina positivo. En Agar sangre, con 18-24 horas de
incubacin, suele manifestarse como un cultivo heterogneo, con colonias de distintos tamaos y
-72 horas, las colonias tienden a
homogenizar formando colonias blanco-

Posee adhesinas que le permiten unirse a fibronectina y fibringeno; lipasa, glucoclix, algunas
cepas son capsuladas, aun no se conoce si presenta hemolisina alfa y beta.

Familia Micrococcaceae

Esta familia est compuesta por 9 gneros, de los cuales Micrococcus, Rothia, Arthobacter,
Stomatococcus y Kocuria tienen importancia en el ser humano.

Rothia mucillaginosa

Son cocceas Gram+, de 0,9 a 1,3 um de dimetro, agrupadas en racimos, anaerobias facultativas,
inmviles, catalasa positiva o dbil. Su colonia se caracteriza por ser grasosa, de modo que no se
disuelve en medio acuoso, pueden presentarse capsuladas si han crecido en medio enriquecidos. No
tienen la capacidad de crecer en medios con alto contenido de sal. Son productores de abscesos
locales produciendo endocarditis y bacteriemia.

Gnero Micrococcus

Agrupa a cocceas Gram+ de 0,5 a 2 um de dimetro, de agrupacin irregular, se diferencian de
Staphylococcus por ser aerobios estrictos y sensibles a bacitracina. La mayora de sus cepas producen
pigmento. En general no son patgenos y solo se comportan como oportunistas en pacientes
inmunosuprimidos.

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Familia Streptococcaceae, gnero Streptococcus

La familia Streptococcaceae est compuesta por dos gneros, de los cuales solo Streptococcus tiene
importancia para el ser humano, dentro de este gnero existen grupos aerobios facultativos y
anaerobios facultativos estrictos. Suelen habitar la piel y mucosas del hombre y animales.

Son cocceas Gram+ que pueden agruparse en cadenas cuando estn el caldo y dispersas en otras
muestras. La mayor parte crece mejor en microaerofilia y algunas especies no crecen si no cuentan
con un determinado porcentaje de CO2 en el medio; adems requieren la adicin de sangre o suero
para su ptimo crecimiento. Son inmviles y no esporuladas, capaces de fermentar la glucosa. Se
Streptococcaceae y Micrococcaceae por ser oxidasa y catalasa negativo.

Se pueden clasificar segn el tipo de hemlisis, clasificacin de Brown; segn su estructura
antignica, grupos de Lancefield y factores de virulencia; y segn sus propiedades fisiolgicas y
bioqumicas.

Clasificacin de Brown 1903
Grupos de Lancefield
x Alfa: produce destruccin parcial de eritrocitos,
con liberacin de metahemoglobina, se observa
un halo verde alrededor de la colonia en Agar
Sangre Cordero.
x Beta: produce destruccin total de eritrocitos y
de la hemoglobina, se observa un halo
tranparente alrededor de la colonia en Agar
Sangre Cordero.
x Gamma: no hay hemlisis, por tanto no se
observa halo.
Se basa es la presencia del carbohidrato C en la pared

celular, entre el peptidoglicn y la cpsula en la pared.
Se establecen distintos grupos de A a H y de K hasta V,
donde los serogrupos ms importantes son A, B y D,
seguidos de C, F y G.
- A: carbohidrato es N-acetil glucosamina.
- D y N: cido lipoteicoico.
- S. pneumoniae (no posee serogrupo): fosfato
de ribitol.
Se detectan con pruebas inmunolgicas de aglutinacin.
Poseen cpsula, que ayuda en la colonizacin de tejidos, los estreptococos del grupo A y C poseen
una cpsula no antignica formada por cido hialurnico, por tanto las colonias se observan mucosas,
S. pneumoniae induce la formacin de anticuerpos lo cual es til para serotipificacin.

En la pared celular existen tres antgenos de importancia:
- Protena M: es el principal factor de virulencia, se encuentra presente en las fimbrias y es
necesaria para la adherencia e internalizacin en la clula del hospedador, permite resistir
la fagocitosis y degrada la fraccin C3b del complemento, inhibindolo. Posee tres regiones:
conservada, variable e hipervariable, que diferencia entre especies, siendo la composicin
de esta ltima la que determina la clasificacin de Lancefield. Esta protena se divide en 2
clases:
o clase 1- asociada a infeccin respiratoria y fiebre reumtica.
o clase 2- asociada a infeccin cutnea y glomerulonefritis.
- Antgenos proteicos:
o Antgeno T: no est asociado a virulencia
o Protena R: no tiene importancia clnica ni diagnstica.
o Protena F: se una a fibronectina.
- cido lipoteicoico: forma las fimbrias que permiten adherencia.
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Adems secretan sustancias extracelulares como: Estreptolisina (hemolisina), estreptodornasa;
siendo estas dos tiles para la identificacin de la especie, y si cursa un cuadro en fase aguda o
crnica; DNAsa, Hialuronidasa, Estreptoquinasa y exotoxina pirognica.
- Estreptolisina: se clasifica en O y en S:
o O: es lbil al oxgeno y es inhibida por el colesterol. Presenta toxicidad para glbulos
rojos, leucocitos y plaquetas, e induce la produccin de anti-estreptolisina O
(Prueba ASO). Se encuentra en todos los grupos A y algunos B, C, F y G y se sintetiza
solo en la etapa de crecimiento de la bacteria.
o S: es estable al oxigeno, no es antignica, pero tambin es txica para glbulos

sangre.
- Estreptoquinasa o fibrinolisina: Producida por Streptococcus pyogenes y por Streptococcus
del grupo C y G. Acta hidrolizando el cogulo de fibrina, de modo que impide la formacin
de fibrina en lesiones. Induce la formacin de anticuerpos durante el curso de la
enfermedad pero no se utiliza en el diagnstico.
- Hialuronidasa: producida por Streptococcus pneumoniae, y Streptococcus del grupo A, B y C.
- Estreptodornasa (DNAsa): Causante del exudado lquido viscoso inflamatorio que ayuda en
la diseminacin de la bacteria (spreading factor). Hay 4 tipos de estroptodornasa: A, B, C y
D, siendo B la ms importante, ya que se utiliza como elemento diagnstico pues induce la
produccin de anticuerpos en las infecciones por Streptococcus pyogenes.
- Exotoxina pirgena (toxina eritrognica): Producida slo por cepas lisognicas de
Streptococcus pyogenes, estas cepas estn infectadas por un fago que normalmente codifica
alguna expresin fenotpica que la bacteria antes no tena.

Hay 4 toxinas termolbiles en S. pyogenes y en algunas cepas del grupo B y C, toxinas A, B, C y F, las
que son responsables del rash (eritema) de la escarlatina. Por otra parte estas toxinas actan como
sper antgeno interactuando con macrfagos y LT helper para liberar citoquinas que pueden causar
el Sndrome de Shock Toxico Estreptoccico.

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Diferenciacin bioqumica
-
^
o Sensibilidad a bacitracina: S. pyogenes es sensible mientras que otros Streptococcus
hemolticos no lo son.
^ hemolticos:
o Sensibilidad a optoquina: S. pneumoniae es sensible, mientras que los Streptococcus
del grupo viridans son resistentes.
Streptococcus pyogenes o Streptococcus del grupo A

Reservorio: ser humano (15-20% portadores orofarngeos asintomticos, nios y jvenes), no
forma parte de la microbiota.
Transmisin: gotitas de pflgge y secreciones mucosas.

Se caracterizan por ser sensibles a bacitracina, adems es la nica especie que produce la enzima
pirronidonil aminopeptidasa, de modo que la prueba PYR es de gran ventaja por su rapidez de
ejecucin y lectura, con un 99% de sensibilidad y 100% de especificidad. Requieren medios de cultivos
enriquecidos, con adicin de sangre para su desarrollo, en el forman colonias bastante pequeas,

La patogenicidad de S. pyogenes se desarrolla en una serie de pasos:
- Adhesin a clulas epiteliales: mediado por cido lipoteicoico, protenas ligadas a
fibronectina, protena M y cido hialurnico.
- Permanencia en husped: determinado por la capacidad antifagoctica que le es dado por la
protena M, cido hialurnico capsular, en caso de poseer cpsula; y la peptidasa C5a
(enzima que degrada el factor C5a del complemento).
- Translocacin: se internaliza desde espacio extracelular al intracelular, mediante la protena
M y F1.
- Invasin: cido hialurnico capsular y la protena M.
- Diseminacin en los tejidos: Hialuronidasa, estreptoquinasa y las DNAsa A-D.
- Toxicidad sistmica producto de la estreptolisina O, S y los sper antgenos.

Puede producir enfermedades supurativas: Infecciones respiratorias, como: faringitis aguda (la ms
frecuente), otitis media, faringoamigdalitis y sinusitis; Infecciones de piel y tejidos blandos:
escarlatina (toxina pirognica), fiebre puerperal, onfalitis, erisipela, imptigo, fascitis necrotizante,
celulitis, heridas infectadas; y Sndrome del shock toxico; y no supurativas, las que ocurren como
secuelas de las enfermedades anteriores, stas son glomerulonefritis aguda (hipertensin, hematuria,
proteinuria, edemas) o una fiebre reumtica (fiebre, artritis), donde la ms compleja es esta ltima ya
que hay compromiso cardaco de por medio. Adems puede desarrollar enfermedades de tipo
autoinmunes, por la produccin de gamma globulina que se fijan en los vasos sanguneos a lo largo
del miocardio en pacientes afectados.

La penicilina es el tratamiento de eleccin para las infecciones causadas por esta especie, sin
embargo la eritromicina o alguno de los nuevos macrlidos es la eleccin de segunda lnea y de
preferencia en pacientes con sensibilidad a penicilina.

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Localizacin
Ap. Respiratorio
Piel y tejidos
blandos
Sistmicas/
profundas
Mediados
por toxinas
No supurativas
Enfermedad
Edad tpica
1
Faringoamigdalitis
Nasofaringitis febril
Adenitis cervical
Absceso periamigdaliano
Neumona
Imptigo
Intertrigo
Erisipela 2
Celulitis perianal
Vulvovaginitis purulenta
Fascitis necrosante (gangrena
estreptoccica) 3
Artritis/osteomielitis
Septicemia (enfermedad
invasora)
Fiebre puerperal4
Escarlatina 5
Shock txico estreptoccico
Fiebre reumtica6
Glomerulonefritis7
Escolares (5-11)
< 3 aos
3-8 aos
> 10 aos
Todas las edades
< 5 aos
< 2 aos
Todas las edades
2-8 aos
< 3 aos
Todas las edades
Escolares
Todas las edades
5-11
Todas las edades
Nios
1 Tto: Cef. 1G, Penicilina G

benzatnica, amoxicilina,
amoxicilina/. clavulnico
2 Tto: penicilina
3 infeccin tejido subcutneo,
produce falla multiorgnica
4 Posterior al parto por
microlesiones que permiten
entrada a sangre
5 complicacin de la faringitis
6 faringitis previa (2-5
semanas), inflamacin de
tejidos
vasculares
y
articulaciones, prueba ASO,
WZ reumatodeo
(IgM)
7 faringitis o infeccin cutnea
previa (10 das a tres semanas),
puede ser viral, Diagn.:
deteccin de antgenos, Tto.:
penicilina,
eritromicina,
cefalosporina.
Streptococcus agalactiae o Streptococcus del grupo B

Reservorio: humano, microbiota de la rinofaringe, el tracto digestivo y urogenital femenino; y
animales (ubres de las vacas)

factor CAMP y por ser resistentes a la bacitracina. Es el menos exigente dentro de los Streptococcus
pudiendo crecer en un agar nutritivo sin sangre, para su aislamiento se puede utilizar el medio
selectivo de Todd-Hewitt, que contiene 15 um/mL de cido nalidxico y 8 um/mL de sulfato de
Gentamicina.

Esta especie es capaz de producir abortos en mujeres, siendo 15 - 30% de las mujeres gestantes
portadoras asintomticas, con colonizacin transitoria, crnica o intermitente, ellas pueden transmitir
el agente al neonato antes o durante el parto, con una tasa de 50%, y si no hay una adecuada
profilaxis el neonato puede sufrir una meningitis pudiendo causarle la muerte. Se asocia con un
mayor riesgo la prematuridad (<37 semanas), la rotura prolongada de membranas (>12 horas), la
existencia de fiebre intraparto (>38 C), haber tenido un hijo con infeccin por esta bacteria y la
presencia de bacteriuria durante el embarazo. Para prevenir la infeccin neonatal se deben identificar
a las gestantes portadoras, mediante la realizacin de un cultivo de exudado vagino-rectal durante la
semana 35-37 de gestacin y administrrseles quimioprofilaxis intraparto o todas las portadoras,
utilizando Penicilina al inicio del parto. Es la principal causa de sepsis neonatal que puede
manifestarse como sepsis, neumona o meningitis. En las mujeres gestantes puede producir
corioamnionitis, endometritis post parto, infeccin de herida quirrgica tras cesrea e ITU. Puede
comportarse como patgeno oportunista en el tracto respiratorio, mucosas, piel, etc.
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Penicilina es el tratamiento de eleccin, emplendose frecuentemente en combinacin con algn

aminoglicsido.

Streptococcus pneumoniae

Estructura antignica: polisacrido capsular que determina serotipos, base de vacunas.
Modo de transmisin: gotitas de pflgge, contacto oral directo, fmites

Son cocos lanceolados Gram+, cultivos viejos se tornan Gram-, dispuestos en pares o cadenas
cortas ^
(>15mm), adems es lisado por sales biliares, siendo por tanto insolubles en bilis. Requieren 10% de
CO2 para su crecimiento. Presentan cpsula inmunognica, de la cual existen 90 serotipos distintos, la
virulencia de la cepa se encuentra en funcin de ella, que evita o retarda la fagocitosis, ya que no
produce toxinas significativas.

Otros factores de virulencia son:
- Protena A de unin a colina (CbpA), ayuda a la bacteria a adherirse a las clulas a nivel
pulmonar.
- Neumolisina (citotoxina), activa la va clsica del complemento y suprime la actividad
oxidativa fagoctica.
- cido teicoico: Activa la va alternativa del complemento.
- Proteasa IgA secretora: Altera la eliminacin mediada para IgA secretora.
- Neumolisina - Neuraminidasa: invasin tisular.

No forma parte de la microbiota pero se encuentra en nasofaringe y se asla entre el 5-10% de los
adultos y del 20-40% de los nios. Puede provocar Otitis Media Aguda (OMA), meningitis y neumonas
en nios, no existe prevencin posible por vacunas poliosdicas antes de los dos aos. En adultos
provoca neumona y menos frecuentemente Meningitis, septicemia, artritis, peritonitis, endocarditis,
pericarditis y empiema. Los factores de riesgo son: edad avanzada, patologas crnicas,
inmunocomprometidos, VIH, hacinamiento.

El diagnstico se realiza en muestras respiratorias, lquido pleural, sangre y LCR, mediante la
determinacin de antgeno (polisacrido capsular) por aglutinacin en ltex, se puede emplear la
Reaccin de Neufeld (Quellung: hinchamiento capsular). El cultivo se realiza en agar sangre en
microaerofilia y la identificacin bioqumica se basa en la tincin de Gram, catalasa y optoquina.

Penicilina es el tratamiento de eleccin, sin embargo ha aumentado la resistencia (15%) en ese caso
se utilizan cefalosporinas de 1 generacin, amoxicilina y anfenicoles. En cepas con sensibilidad
disminuida se emplea Vancomicina, quinolonas, macrlidos. La vacuna se construye a partir de
polisacrido capsular purificados de Streptococcus pneumoniae, con 23 serotipos distintos que cubren
el 90% de los serotipos aislados; sta se aplica en una dosis cada 5 aos dependiendo de las polticas
de salud del pas, como va subcutnea o intramuscular, esta es eficaz a partir de los dos aos y
constituye un arma eficaz contra Streptococcus pneumoniae resistentes.

Existe un programa de vigilancia por parte del ministerio de salud debindose monitorear la
susceptibilidad a penicilina utilizando discos de oxacilina 1 ug. Tambin se realiza vigilancia de
agentes etiolgicos cuando S. pneumoniae produzca enfermedad invasora.
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Streptococcus grupo viridans

Es un conjunto de Streptococcus que no pueden ser considerados S. pyogenes, S. agalactiae, S.
bovis, S. disagalactiae o S. pneumoniae, de modo que son especies muy diferentes en morfologa,
reacciones hemolticas y procesos infecciosos. A l pertenecen las especies S. mitis, S. mutans, S.
oralis, S. sanguis, S. salivarius y el subgrupo anginosus compuesto por S. intermedius, S. constelatus y
S. anginosus, &
frecuente, presentan adems un caracterstico olor a caramelo. En general son resistentes a
optoquina, penicilina (exp. Anginosus) y cefalosporinas, sensibles a bacitracina.

Pueden producir endocarditis infecciosa, caries (S. mutans), abscesos cerebrales, hepticos y
pulmonares (S. constelatus y S. intermedius) y bacteriemias (S. anginosus). Forman parte de la
microbiota del tracto respiratorio, piel, tracto gastrointestinal y tracto genital femenino.

Streptococcus gallolyticus

Antiguamente era conocido como S. bovis
Lancefield, son sensibles a penicilina, hidroliza la esculina y no crecen en NaCl al 6,5%, estas dos
ltimas caractersticas lo diferencian de Enterococcus.

Se encuentra en rumiantes y causa infeccin en palomas, forma parte de la microbiota intestinal del
ser humano, encontrndose entre un 2 a 10% de humanos sanos. Produce endocarditis
(preferentemente en personas mayores de 50 aos), meningitis y sepsis neonatal.

Familia Enterococcaceae, gnero Enterococcus

Hbitat: son ubiquitarios del suelo, agua, plantas, animales. Pertenecen a la microbiota del
tracto digestivo, cavidad oral y tracto vaginal.
Resistencia: pueden sobrevivir en ambientes extremos (10-45 C o salinidad y pH). Resistencia
intrnseca a cefalosporinas, clindamicina, SXT y en alto nivel a los aminoglicsidos.
Transmisin: Persona a persona por las manos del personal.
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Antiguamente eran conocidos como estreptococos del grupo D, ya que poseen el antgeno D de
Lancefield, corresponden a cocos Gram+ anaerobios facultativos agrupados en pares o cadenas
cortas. Crecen en caldo 6,5% NaCl e hidrolizan la esculina en presencia de sales biliares al 40%, en su
mayora hidrolizan el pirrolidonil beta naftilamida. Poseen DNA peroxidasa la cual puede actuar como
falsa catalasa.

E. faecalis es el ms comn, causa el 85-90% de las infecciones enterococcicas en tanto E. faecium
causa el 5-10%. E. faecalis es el segundo agente de importancia de infecciones intrahospitalarias.

Pueden causar infeccin urinaria, intrabdominal (peritonitis, abscesos) o bacteriemias, en ocasiones
acompaadas de endocarditis. Se adhiere a las clulas mediante sustancias agregantes como
carbohidratos de superficie y fibronectinas, all produce toxinas extracelulares, como citolisinas;
bacteriocinas, gelatinasa y sustancias que modifican la reaccin inflamatoria local, como cido
lipoteicoico, superxido y feromonas.

Existen plsmidos y genes cromosomales codificantes para resistencia a aminoglicsidos,
betalactmicos, vancomicina, eritromicina, tetraciclinas, quinolonas y nitrofurantona. Se han descrito
7 genotipos de resistencia a glucopptidos denominados de VanA a VanG, de los cuales slo VanA y
VanB, tienen importancia clnica por su capacidad de transferencia entre especies y gneros
diferentes. Las cepas con genotipo VanA presentan alto nivel de resistencia a vancomicina y
teicoplanina, lo cual est codificado a nivel de un transposn (Tn1546), localizado en un plsmido o
en el cromosoma, este fenotipo es frecuente en Enterococcus faecium e inusual en Enterococcus
faecalis. Las cepas VanB presentan resistencia a vancomicina y sensibilidad a teicoplanina, los
determinantes de la resistencia se localizan en el cromosoma o en plsmidos y son transferibles por
un transposn conjugativo.

En Chile el MINSAL ha desarrollado Programas de Vigilancia para Enterococcus, que incluyen el
monitoreo de la resistencia a antimicrobianos y cepas de Enterococcus resistentes a Vancomicina
(ERV), lo cual se realiza en todos los hospitales donde haya UCI y en pacientes que estn ms de 5
das en esta unidad, por medio de hisopado rectal, el estudio se realiza en E. faecium y E. faecalis, se
utiliza el medio selectivo Agar Bilis Esculina con Vancomicina 6 ug/mL, la resistencia intermedia o de
alto nivel debe ser confirmada con tcnica por dilucin y las cepas confirmadas se deben enviar al ISP,
que realiza la identificacin de la especie, la cual puede lograrse con las pruebas de reaccin de
telurito y fermentacin de arabinosa, donde E. faecalis es arabinosa- y telurito+, mientras que E.
faecium da los resultados inversos para ambas pruebas.
Susan Arias Donoso
98
Orden Neisseriales
Familia Neisseriaceae

Est compuesta por los gneros Neisseria, Eikenella, Kingella y Chromobacterium, los que en general
son cocos aislados, de a pares o en cadenas, Gram- aunque tienden a resistir la decoloracin. Son no
esporulados y pueden presentar cpsula y salvo una excepcin son inmviles. Son organismos
aerobios aunque algunas especies crecen anaerbicamente o requieren de un 5 10% de CO2. La
temperatura ptima de desarrollo es de 32 a 37 C y sus requerimientos nutricionales pueden ser
simples o muy complejos.

Gnero Neisseria

Las especies de Neisseria patgenas primarias exclusivas del ser humano son: N. gonorrhoeae y N.
meningitidis las que a su vez son patgenos obligados. Existen muchas otras especies siendo N.
cinerea, N. lactamica, N. flavenscens, N. mucosa, N. sicca, N. subflava y N. elongata con sus
subespecies elongata, glycolytica y nitroreducens las que pueden ser aisladas desde el ser humano
como saprobias, pudiendo comportarse como patgenos oportunistas, especialmente en pacientes
inmunodeprimidos, principalmente en septicemias, cuadros seos, meningitis, etc.

Son diplococos arrionados de 0,6 1,5 um, anaerobios, inmviles y no esporulados. Las especies
patgenas son exigentes en su cultivo requiriendo de medios enriquecidos con sangre, hemina,
aminocidos y otros nutrientes. Estos los obtienen en medios como agar chocolate, agar Thayer
Martin, GC y otros similares. Adems requieren humedad y un 3 10% de CO2, y se debe considerar
que son fotolbiles y termosensibles. Existe una modificacin del agar Thayer Martin, el cual posee un
antibitico que inhibe el crecimiento de otras bacterias. Las especies saprobias, en cambio, crecen en
anaerobiosis, en medios corrientes y son menos termosensibles y menos fotolbiles. Algunas de estas
pueden producir pigmentos carotenoides (amarillo verdoso).

Neisseria meningitidis

Hbitat: membranas mucosas y nasofaringe. No es capaz de sobrevivir en el ambiente.
Reservorio: portadores nasofarngeos 10 40%
Transmisin: gotitas de pflgge.

Son diplococos Gram-, oxidasa positivo, fermentadores de glucosa y maltosa, pero no sucrosa.
Todas las cepas presentan cpsula polisacrida muy antignica que los agrupa en 13 serogrupos
relacionados con el antgeno capsular, los ms frecuentes son A, B, C (en Chile B y C) los cuales se
detectan mediante test serolgicos en LCR.

Produce meningitis meningoccica, tras un periodo de incubacin de una semana, cuadros que
aumentan en primavera e invierno. El cuadro clnico cursa con fiebre, rigidez de nuca (sntoma
caracterstico), dolor de cabeza severo, vmitos, produciendo como secuela retardo mental en casos
no tratados oportunamente. Produce un cuadro denominado Meningococeles (sepsis), el cual es
mucho ms grave que la meningitis, este va acompaado de CID que es evidenciado por la aparicin
Susan Arias Donoso
99
de petequias. Causa tambin el Sndrome de Walterhouse Friedrichsen que afecta el tejido adrenal
produciendo necrosis y hemorragias.

Es agente de meningitis cerebroespinal epidmica (MCEE) o endmica, dependiendo ello del
serotipo infectante. Ocasionalmente son agentes de rinofaringitis, bronquitis, traqueobronquitis y
sepsis meningoccica.

En la colonizacin de individuos participa el Pili y una proteasa IgA1, adems presenta cpsula y
libera una endotoxina en sangre.

El diagnstico primario se realiza en basa a la Tincin Gram de LCR, donde se informa la presencia
de diplococos Gram negativos intracelulares o extracelulares en PMN, puede aislarse tambin de
sangre, cuando de sospecha de una meningococcemia, o de lquido articular. Puede realizarse
identificacin mediante tcnicas de aglutinacin en ltex. Los hallazgos de laboratorio indican un
aumento de las protenas en LCR, una disminucin de glucosa por aumento de PMN y la presencia
bacteriana, existe adems una disminucin de mononucleares. Es menos exigente que N.
gonorrhoeae ya que no requiere glutamina ni fierro, entre las 24 48 horas de incubacin en
microaerfilia y humedad forma colonias grandes, brillantes, lisas, a veces mucoides, grisceas o de
color miel.

El tratamiento se realiza con penicilina, aunque algunas cepas poseen resistencia, el manejo del
shock es con cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima, donde lo que ms se una es ceftriaxona. Existe
una vacuna contra serotipos A, C y W135 que se aplica como profilaxis en personas que mantuvieron
contacto con algn paciente que present la enfermedad, a los cuales tambin se les realiza un
tratamiento con rifampicina, ciprofloxacino, quinolonas o ceftriaxona.

Las medidas de control involucran aislamiento respiratorio hasta por 24 horas, la activacin de
mecanismos de vigilancia, vacunacin, etc., y la realizacin de campaas educativas.


Simbiosis: patgeno exclusivo del hombre.
Resistencia: No es capaz de sobrevivir al medio ambiente.
Periodo de incubacin: 2-3 das.

Llamado tambin gonococo es un diplococo Gram- que tiene forma arrionada con sus lados
adyacentes cncavos o aplanados, inmvil, oxidasa positivo, fermentadores de glucosa y maltosa,
pero no sucrosa, ocasionalmente se agrupan en ttradas o paquetes. Por la accin de enzimas
autolticas, estimuladas por calor y pH alcalino, pueden observarse formas aberrantes, deformadas,
grandes, vacuolazas o bien como cuerpos granulares muy pequeos. Pueden presentar capsula cuya
composicin en parte es glucosdica, sin propiedades antignicas. Su desarrollo es inhibido por cidos
grasos y agentes quelantes, son sensibles a desecacin. En medios de cultivo se puede desarrollar
formando diferentes tipos de colonias, siendo algunas de 1 mm de dimetro de bordes lisos o
irregulares, color miel o blanco grisceo. Estas caractersticas coloniales se asocian con la presencia
de fimbrias. Tambin se pueden desarrollar formando colonias grandes, convexas, redondas, menos
coloreadas, lo cual se asocia con ausencia de fimbrias.

Susan Arias Donoso
100
Produce Gonorrea (ETS), cervicitis, infeccin pelviana aguda (IPA) y, en forma menos frecuente
faringitis, poctictis, artriris y oftalmia neonatal, esta ltima se desencadena cuando una madre que
padece Gonorrea en el momento del parto infecta los ojos del beb. La gonorrea es una enfermedad
de notificacin obligatoria en el sistema de salud chileno. En el hombre se produce una inflamacin
del pene con secrecin purulenta de la uretra, de esta secrecin se realiza un Gram y se buscan
diplococos Gram- intra o extracelulares como forma de diagnstico, sin embargo esta enfermedad
es ms frecuente en la mujer, donde puede cursar en forma asintomtica, la bacteria puede infectar
las trompas de Falopio provocando enfermedad inflamatoria plvica, adems puede invadir el
peritoneo y producir embarazos ectpicos. En ocasiones puede instalarse en la faringe por prcticas
sexuales orales o infecciones anales. Es ms frecuente en personas de 15 a 24 y en individuos de raza
negra. Las mujeres tienen un 50% de probabilidad de adquirir la infeccin en un nico contacto sexual
y el hombre un 20%.

Se une a las clulas epiteliales del crvix y la uretra gracias a la presencia de pilis, presenta LPS con
actividad endotxica y protena ligadora Fe, que fija el hierro para la nutricin de la bacteria, posee
proteasas IgA y betalactamasas, sus componentes antignicos son:
- Protena 1 (POR): forma poros en la membrana de la bacteria ayudando as el ingreso de
nutrientes, es til para serotipificacin.
- Protena 2 (OPA): permite adherencia intracelular e intracolonia.
- Protena 3 (RMP) relacionadas con las POR.

Esta bacteria es capaz de inhibir la fagocitosis, el PMN endocita al microorganismo pero no es capaz
de degradarlo, as se pueden observar bacterias intra y extracelulares.

La enfermedad comienza con signos y sntomas inespecficos, encontrndose en la mujer: Fiebre,
disuria, dolor plvico cuando hay invasin de las trompas de Falopio o peritoneo, en el hombre puede
haber pielonefritis o prostatitis, secrecin de zona uretral; en casos de prcticas sexuales orogenital
cursa con dolor de garganta; en personas con actividad sexual anal provoca sangrado del ano; adems
provoca vmitos, edema, picazn, secrecin de ojos.

Los signos y sntomas especficos son: Exudado uretral purulento (hombres), pene edematoso y
glande inflamado, Aumento del flujo vaginal con mal olor y sangrado, dolor en el acto sexual, artralgia
y lceras en la garganta.

Las complicaciones posteriores a la enfermedad son faringitis gonoccica, vaginitis, proctitis,
Enfermedad inflamatoria plvica, Peritonitis (asociada a sepsis), Abscesos en tubos ovricos,
Conjuntivitis gonoccica o oftalmia neonatal (en recin nacido), Vulvovaginitis (en nias que han sido
violadas principalmente), Epididimitis, Prostatitis. Estas pueden tener como secuelas como ceguera
en recin nacidos con oftalmia neonatal no tratados, Infertilidad, Embarazo ectpico, Artritis
supurativa, Perihepatitis y finalmente la Muerte.

Existen distintos niveles de prevencin, un nivel primario de educacin y un nivel secundario de
diagnstico precoz mediante citologa (tincin Gram), muestras de orina y examen plvico.

El tratamiento de eleccin es la administracin de ceftriaxona, quinolonas, cefixina, ciprofloxacino,
ofloxacino y levofloxacino, luego de la inutilizacin de penicilina por betalactamasas.

Susan Arias Donoso
101
Caractersticas de laboratorio

Caractersticas
Agar chocolate o Thayer Martin
Glucosa
Maltosa
Lactosa
N. gonorrhoae
+
+
-
-
N. meningitidis
+
+
+
-
N. lactamica
+
+
+
+
N. lactamica es parte de la microbiota habitual, puede comportarse como patgeno oportunista

con muy baja frecuencia. En Agar Thayer Martin las colonias poseen un olor muy caracterstico
Gnero Eikenella

Eikenella corrodens es la nica especie del gnero. Es un cocobacilo Gram-no esporulado, no
capsulado, no hemoltico, inmvil, oxidasa positivo y anaerobio facultativo. Es un microorganismo
exigente en su desarrollo, requiriendo hemina y peptonas enriquecidas y un 3 5% de CO2. En estos
medios presentan un deslizamiento sobre la superficie del agar y lo corroe, y adems posee un olor
caracterstico. Es un habitante de la cavidad oral, tracto respiratorio superior y de la superficie del
intestino y tejido del tracto genitourinario, sin embargo puede comportarse como un patgeno
oportunista, aislndose en endocarditis, meningitis, osteomielitis, neumona e infecciones
postquirrgicas.

Genero Kingella

El gnero Kingella tiene 3 especies: K. kingae, que coloniza el tracto superior, principalmente en
nios, K. oralis, que se encuentra en la cavidad oral y K. denitrificans cuyo hbitat es desconocido.

Corresponde a bacilos Gram- cortos de extremos rectos, carentes de flagelos, que pueden
agruparse en pares o cadenas. En ocasiones puede resistir la decoloracin de la tincin Gram,
pudiendo ser confundido con bacilos Gram+. Son microorganismos anaerobios facultativos, oxidasa
positiva, catalasa positiva, nutricionalmente fastidiosos y de lento crecimiento. Se pueden desarrollar
en agar sangre, chocolate o medios lquidos suplementados. A las 48 horas produce colonias de 1 a 2
mm de dimetro, mucosas, con una papila central que pueden presentar bordes irregulares y un
pequeo halo de beta hemlisis en ASC.

K. kingae se ha descrito como una rara causa de infeccin en humanos, sin embargo, en la ltima
dcada han aumentado los reportes, probablemente por una mejor recuperacin e identificacin,
teniendo predileccin por lactantes y nios menores en quienes produce fundamentalmente
infecciones osteoarticulares. Tambin es causa de endocarditis, septicemia, queratitis e infeccin del
SNC.

Genero Chromobacterium

Este gnero presenta solo una especie, Chromobacterium violaceum, un bacilo Gram-, anaerobio
facultativo, oxidasa y catalasa positivo, habitante comn del suelo y agua en las regiones tropicales y
Susan Arias Donoso
102
subtropicales, que se caracteriza por producir pigmento no difusible llamado violacena, que da a las
colonias un distintivo color violeta, aunque hasta un 9% de las cepas aisladas no lo producen. Esta
especie crece bien en agar nutritivo a 37C a las 24 horas.

Este microorganismo es un patgeno oportunista que rara vez produce infeccin, pero cuando la
produce es por exposicin de heridas al agua o suelos contaminados. Sin embargo tambin hay
reportes de cuados diarreicos donde la va de transmisin es la ingesta de agua contaminada. Se le
asocia a sepsis, abscesos mltiples en el hgado y dermatitis pustular difusa.
Susan Arias Donoso
103
Bacilos Gram-

Familia Pasteurellaceae

Gnero Haemophilus

Forma parte del grupo HACEK (Haemophilus aphrophilus, Haemophilus parainfluenzae,
Actinobacillus actinomycetemcomitans, Cardiobacterium hominis, Eikenella corrodens y Kingella
kingae) un conjunto de microorganismos Gram- de crecimiento lento y exigente, que requieren una
atmsfera con dixido de carbono para crecer, estas bacterias residen normalmente en la cavidad
bucal y se asocian con infecciones localizadas en la boca; tambin pueden causar infecciones
sistmicas, principalmente endocarditis.


Haemophilus parainfluenzae
Tracto respiratorio y boca
Haemophilus haemolyticus
Haemophilus parahaemolyticus
Haemophilus ducreyi
Tracto genital
Haemophilus aegypticus
Ojo
Haemophilus aphrophilus

Haemophilus paraprophilus
Placa dental
Haemophilus segues

Reservorio: no capsuladas: colonizacin asintomtica frecuente (50% de las personas), cepas
capsuladas, colonizacin rara, especialmente serotipo b (vacunacin disminuye colonizacin
farngea).
Simbiosis: parsitos obligados de mucosas.

Son bacilos o cocobacilos Gram- (pleomrficos) de 0,3 a 1,2 um, aerobios facultativos,
microaerfilos, algunas especies poseen cpsula, son inmviles y no esporulados, algunas de ellas
fermentan carbohidratos y reducen nitritos a nitratos. Se comportan como especies fastidiosas,
requiriendo medios complejos para su crecimiento, adems son sensibles a la desecacin y
temperaturas extremas; su crecimiento ptimo ocurre a 35-37 C, con atmosfera de 5-10% de CO2, y
en el caso de H. ducreyi a 33-35 C. Requieren adems factores X o V para su desarrollo. El factor X es
una hemina (protoporfirina) necesaria para la sntesis de Fe que contienen las enzimas respiratorias
citocromo oxidasa, catalasa y peroxidasa, este factor es estable al calor y es proporcionado
directamente por la hemoglobina. El factor V corresponde a NAD o NADP, coenzimas necesarias para
reacciones de oxido-reduccin, es aportado en el momento de la preparacin del medio de cultivo o
usando Staphylococcus aureus que produce NAD. H. influenzae requiere de ambos factores, mientras
que H. parainfluenzae slo requiere el factor V y H. ducreyi slo el factor X. Crece bien en agar
chocolate que les aporta e factor V y X, all se desarrolla como cepas capsuladas y las colonias tienen
un distintivo olor a cloro.

En el gnero Haemophilus se han descrito 9 especies que se asocian al ser humano, ya sea como
parte de la microbiota en el tracto respiratorio superior o como agentes de infecciones; de ellas la
ms importante desde el punto de vista de las infecciones es H.influenzae. H. parainfluenzae, H.
Susan Arias Donoso
104
parahaemolyticus, H. aphrophilus y otras especies se pueden comportar como patgenos
oportunistas produciendo endocarditis, abscesos cerebrales y dentales.


Reservorio: humano. No se ha encontrado en ningn otro animal adems del chimpanc.
Hbitat: nasofaringe de la mayora de nios saludables (75%), la portacin adulta es ms baja.
Transmisin: gotitas de pflgge y descargas del TR durante el perodo infeccioso.

Se clasifican de forma clnica segn su origen invasor (sangre, LCR, lquido articular, pericrdico,
tejidos blandos, etc.) versus no invasor (superficie de mucosas). La serotipificacin en base a
antgenos capsulares establece grupos de la A a la F, siendo el serotipo B el ms importante (causa el
95% de la enfermedad invasiva) y C y F los ms frecuentes. La biotipificacin establece grupos del I al
VIII, segn los resultados de las pruebas indol, ureasa, ornitina descarboxilasa, esto tiene inters
epidemiolgico. Algunas cepas del serotipo B producen betalactamasas.

Portadores
Patogenicidad
Serotipo b
2-4%
Infecciones sistmicas (meningitis, epiglotitis)
Otros serotipos (a, c - f)
1-2%
Rara vez
No capsuladas
50-80%
Infecciones localizadas (EPOC), vacuna contra
el serotipo b no protege de esta enfermedad

Las cepas no capsuladas producen infeccin localizada del tracto respiratorio, ms frecuente en
adultos, adems provocan sinusitis y otitis media, con ms frecuencia en nios que en adultos,
conjuntivitis y neumona bacterimica y no bacterimica. Estas cepas expresan IgA proteasa (fraccin
de IgA de las superficies mucosas) que permite la colonizacin, la diseminacin ocurre por
contigidad, pasando al torrente sanguneo; adems presentan Lpido A (LPS) que altera la funcin
ciliar y daa el epitelio respiratorio ciliado.

Las cepas capsuladas pueden provocar enfermedades sistmicas o infecciones invasivas
principalmente en nios, tales como meningitis, epiglotitis aguda (laringitis destructiva), celulitis y
artritis sptica. Estas cepas poseen una cpsula de fosfato de polirribitol, que cumple funciones
antifagocticas e inmunognicas, habiendo sido utilizada esta ltima propiedad para la produccin de
vacuna Hib; adems poseen pilis para la adhesin a superficies celulares, especialmente en la
orofaringe, produce as inflamacin local, bacteriemia y metstasis a distancia.

Cepas capsuladas
Cepas no capsuladas
Colonizacin
2%
50-80%
Adherencia
+
++
Infeccin local
+
++
Invasividad
++
-

La enfermedad invasora por H. influenzae tipo b (Hib) es una enfermedad inmunoprevenible, en
Chile se introdujo la vacuna conjugada anti-Hib en 1996 con un esquema de 3 dosis (2 - 4 - 6 meses de
edad), esto disminuy la incidencia en un 60% desde 1996 al 2006; junto con el inicio de la
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105
vacunacin se comienza un plan de vigilancia epidemiolgica de infecciones invasivas por Hib en

nios menores de 5 aos, con el fin de evaluar el impacto de las medidas de prevencin y control
realizadas. Adems se establece segn el decreto no. 158 que la enfermedad invasora por Hib es una
enfermedad de notificacin universal obligatoria e inmediata. Previo al inicio de la vacunacin, las
manifestaciones clnicas provocadas por Hib tenan la incidencia que seala la grfica:

17%
50%
15%
6%
8%
2%
Enfermedad Edad
Meningitis 3 6 aos
Clnica
Infeccin previa del TRS
2 5 aos
Odinofagia (dolor al
deglutir), fiebre, babeo
incontrolado, disnea,
curso fulminante
Epiglotitis
2%
epiglotitis
neumonia
osteomielitis
artritis
celulitis
bacteriemia
meningitis
Tratamiento
Cef de 3 generacin
y corticoides

Mortalidad
2-5%
Alta mortalidad si no se
inicia el tratamiento
rpidamente.

La realizacin del diagnstico depende del tejido afectado, pudiendo realizarse en muestras de
sangre, LCR, liquido sinovial y del TRI. Se basa en la observacin microscpica de la tincin Gram, el
cultivo en medios especiales como: Agar chocolate, HTM (Haemophilus test medium), Levinthal, o en
agar sangre con una estra de S. aureus en condiciones de microaerofilia; la identificacin de los
factores X y V y pruebas bioqumicas. Adems puede hacerse una identificacin serolgica (serotipos).
El diagnstico indirecto se basa en la deteccin de antgenos mediante tcnicas de aglutinacin en
ltex y ELISA.

El tratamiento de la enfermedad invasiva se realiza con ceftriaxona, cefotaxima o ampicilina
combinada con CAF, adems se administra Rifampicina antes que el paciente deje el hospital para
asegurar la eliminacin completa de la bacteria. En infecciones graves el tratamiento de eleccin es
con cefalosporinas de 3 generacin, mientras que en infecciones localizadas con amoxicilina/cido
clavulnico. La realizacin del antibiograma incluye: Ampicilina (10 mg) (a30% resistencia va
plasmidial), CAF (30 mg) (15 a 20% de resistencia) y SXT (2,375/1,25 mg).

Haemophilus ducreyi
Es el agente causal de chancroide o chancro blando (ETS), caracterizado por lesiones en genitales y
reas adyacentes que aparecen a los 4-7 das de incubacin, estas lesiones pequeas rojas se tornan
rpidamente en pstulas y luego en una sola lesin de aspecto erosionada y ulcerada, que puede ser
autoinoculable. Su presencia en la cavidad oral es poco frecuente, determinada al tipo de prctica
sexual de la persona. Es abundante en pases tropicales con alta temperatura. El tratamiento se
realiza con eritromicina o SXT.

Haemophilus aegypticus
Es el causante habitual de conjuntivitis purulenta y produce fiebre prpura brasilea.
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Gnero Pasteurella

En este gnero se incluyen 20 especies que corresponden a cocobacilos o bacilos Gram- cortos de
0,3 a 2 um de ancho por 1 a 2 um de largo, inmviles, aislados, o agrupados en parejas o en cortas
cadenas, que pueden presentar tincin bipolar; son anaerobios facultativos, capaces de crecer en un
rango de 22 44 C. Se desarrollan bien en agar sangre, donde forman colonias de 1 3 um de
dimetro, redondeadas y grisceas entre las 24 y 48 horas. Algunas especies pueden producir beta
hemlisis. Se caracterizan por ser catalasa y generalmente oxidasa positivo. Fermentan carbohidratos
habitualmente sin produccin de gas y reducen nitratos a nitritos. Algunas especies pueden producir
indol y ureasa. Son parsitos de la mucosa del tracto respiratorio y digestivo de mamferos y aves,
pero rara vez del hombre; estos constituyen su principal reservorio.

Pasteurella multocida
Es la especie tipo del gnero, son cocobacilos Gram- cortos de coloracin bipolar, capsulados,
oxidasa, catalasa, Indol, ornitina descarboxilasa y glucosa positiva, y urea negativa. Crece bien en agar
sangre, agar chocolate, MH, pero no en agar Mac Conkey. Tras 24 horas de incubacin en agar sangre
produce colonias lisas de 1 2 um de dimetro de color gris azulado brillante, no hemolticas y en
ocasiones mucosas. El crecimiento en agar sangre y la caracterstica tincin bipolar ayudan a
diferenciarla del gnero Haemophilus, con el que puede confundirse en la observacin microscpica
inicial. La ausencia de hemlisis en medios con sangre, la produccin de indol, la descarboxilacin de
la ornitina y una reaccin de urea negativa permiten diferenciar P. multocida de las otras especies del
gnero.

Posee la mayor importancia como causa de enfermedad humana, pudiendo ser responsable de
enfermedades localizadas de piel y tejidos blandos, como celulitis, abscesos, laringitis y adenopata
regional, de ellas pueden surgir complicaciones locales como osteomielitis y artritis producto de
mordeduras de gatos o perros. Causa adems infecciones respiratorias, con en 90% de los casos en la
forma de neumona EPOC e infecciones invasivas como bacteriemias, meningitis, infecciones
intrabdominales y endocarditis.

P. multocida incluye tres subespecies: P. multocida subesp. multocida, P. multocida subesp. sptica
y P. multocida subesp. gallicida. La identificacin de subespecies se basa en la produccin de cido a
partir de sorbitol y del dulcitol, aunque esta distincin no se considera relevante en los aislamientos
clnicos.

Familia Brucellaceae, gnero Brucella

Son patgenos intracelulares facultativos y derivan de animales produciendo enfermedades
crnicas, de modo que son consideradas zoonosis; todas las especies estn altamente relacionadas
segn su antigenicidad e hibridacin DNA-DNA, con ms de 90% de homologa; de acuerdo a esto se
ha propuesto que todas corresponden a serovares de una misma especie: B. melitensis; sin embargo
se mantiene la clasificacin tradicional por las caractersticas de patogenicidad y de preferencia de
hospedador. De acuerdo a la clasificacin clsica existen 6 especies con sus respectivos biovares, que
se diferencian basndose en el crecimiento en medios con colorantes (tionina, fucsina), CO2,
produccin de H2S y aglutinacin especfica, de ellas 4 especies pueden infectar al ser humano.

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Especie
B. mellitensis
No. serovares Reservorio animal

3
Ovinos, caprinos
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Sndromes clnicos
Enf. aguda grave con complicaciones
(frecuente)
Enf. leve con complicaciones supurativas
(frecuente)
Enf. crnica, supurativa y destructiva
B. abortus
Bovinos
B. suis
Cerdos
B. canis
No tiene
Caninos
B. ovis
No tiene
Corderos
Enf. leve con complicaciones supurativas

(rara)
Sin importancia clnica
B. neotomae
No tiene
Ratas del desierto
Sin importancia clnica

Son bacilos Gram- pequeos de 0,6 - 1,5 um de longitud y 0,5 - 0,7 um de dimetro, poseen dos
cromosomas circulares, son inmviles, acapsulados, no licuan la gelatina, son ureasa positivo,
reducen los nitratos a nitritos, no coagulan la leche y no producen cido a partir de carbohidratos; la
mayora de ellos son catalasa positiva, y las especies de importancia clnica son tambin oxidasa
positiva, se encuentran aislados o en grupos irregulares o cortas cadenas. En general son aerobios
estrictos, a excepcin de Brucella ovis y Brucella abortus que son microaerfilas; Brucella abortus y
Brucella suis son productoras de H2S cuya intensidad vara en el tiempo. El bacilo se destruye por
pasteurizacin, pero sobreviven hasta 8 semanas en queso blanco de cabra.

Requieren medios enriquecidos para su crecimiento que contengan infusin de carne o triptena,
como agar infusin de hgado, Tween 40, medio de Kuzdas y Morse, caldo agar Brucella, medio de
Castaeda, agar glucosado, agar papa o agar tripticasa con adicin de suero estril al 5% que carezca
de aglutininas para Brucella. Por lo general el crecimiento es lento, la colonias aparecen despus de 2
a 4 das de incubacin a 37 C, necesitando para su desarrollo una atmsfera de CO 2 al 10%. En
medios lquidos a las 24 horas se observa un ligero enturbiamiento, y a los 8 10 das presenta un
sedimento viscoso amarillento.

Las colonias son de 0,5 3 mm de dimetro despus de 3 das de incubacin, redondeadas, de
bordes lisos, pequeas, convexas, transparentes, hmedas, brillantes y no hemolticas, pueden
presentar una disociacin lisa o rugosa (S- R) relacionada con la prdida de patogenicidad y
antigenicidad, producto de la presencia de 2 Ag O del LPS, A y M, los que dependiendo de su cantidad
permiten distinguir entre especies.

Brucella abortus
A:M=20:1 tiene la ms alta concentracin de Ag A y causa las
infecciones ms serias.
Brucella mellitensis A:M=1:20
Brucella suis
A:M=2:1

Esta bacteria tiene tropismo por eritritol, un azcar presente en la placenta y el tejido fetal animal,
de modo que puede producir abortos en ellos.

La enfermedad que provocan en el ser humano se denomina brucelosis y se produce en personas
que estn en contacto con animales infectados o subproductos como leche y quesos no
Susan Arias Donoso
108
pasteurizados, y en personal de laboratorio que trabaja con el microorganismo, razn por la cual se
debe emplear cabinas de bioseguridad. La dosis infectiva es de 10 a 100 organismos, los que
requieren un periodo de incubacin que va de 5 das a 6 meses, por tanto cuando existe sospecha de
brucelosis el hemocultivo se debe dejar por lo menos 30 das. La enfermedad puede durar semanas o
meses con una mortalidad menor al 5% y con un 10% de probabilidad de producir complicaciones
como: artritis, a menudo sacrolitis y espondilitis, no hay transmisin persona a persona.

En la brucelosis, tambin conocida como Fiebre de Malta, Fiebre Ondulante, Fiebre Recurrente o
Bang, el microorganismo penetra a travs de la piel (incluso intacta), mucosa respiratoria, conjuntival
o digestiva. Tras la incubacin alcanza los ganglios linfticos regionales y de all pasan a la sangre,
donde es fagocitada, sin embargo sobrevive en el interior del fagocito, multiplicndose y alcanzando
otros rganos como el hgado, bazo, huesos, riones, ganglios linfticos, vlvulas cardacas, sistema
nervioso y testculos.

En humanos la brucelosis aguda se presenta con:
- Astenia 95%
- Dolor articular y lumbar 86%
- Fiebre ondulante 93%
- Cefalea 81%
- Mialgia 91%
- Anorexia 78%
- Sudoracin nocturna 87%
- Prdida de peso 65%

Puede manifestarse con lesiones cutneas, como erupciones maculopapulosas, prpura y
petequias, ulceraciones crnicas, abscesos cutneos y subcutneos mltiples.

Simbiosis: patgeno intracelular facultativo.
Resistencia: sensibles a agentes externos y pasteurizacin. Se mantienen viables en leche
refrigerada durante 10 das y en queso o mantequilla durante 2 a 4 meses.
Hbitat: distribucin mundial.
Reservorio: animal (zoonosis)
Mecanismo de transmisin: Ingestin de leche y derivados, contacto directo con materiales
infectados (abortos animales, placentas, estircol, etc.), Inhalacin de la bacteria, inoculacin
parenteral accidental (enfermedad laboral).

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El diagnstico de laboratorio directo se realiza durante la fase aguda de la enfermedad, durante la
cual se puede obtener en muestras de sangre y en ocasiones de LCR y orina, realizndose
hemocultivo o medulocultivo, tambin puede identificarse molecularmente por medio de PCR. El
diagnstico indirecto en animales se realiza por la tcnica Rosa de Bengala, y en humanos por
aglutinacin lenta en tubo de Wright (SAT) o por aglutinacin en placa, segn la Reaccin de
Huddleson (para B. abortus, B. mellitensis, B. suis) o con y sin 2-mercaptoetanol; puede realizar Test
de Coombs anti-Brucella o ELISA pesquisando IgG, IgA, IgM.

La profilaxis incluye la no ingestin de leche cruda, el control de perros y cerdos, y la vacunacin del
ganado (no existe vacuna para el ser humano), se debe considerar el riesgo de consumir queso no
pasteurizado, especialmente de cabra.

El tratamiento es difcil ya que la bacteria es intracelular y resistente a la penicilina. Se emplea
tetraciclina por 21 das, a veces combinada con estreptomicina; se puede emplear tambin un
rgimen de combinacin de 2 o 3 frmacos: Doxiciclina y estreptomicina o rifampicina; SXT +
rifampicina; durante los 21 das siguientes se establece otro tratamiento a base de Doxiciclina, SXT,
rifampicina y estreptomicina.

Familia Bifidobacteriaceae

Este gnero incluye dos gneros de importancia para el ser humano: Gardnerella y Bifidobacterium,
esta ltima un organismo anaerobio estricto.

Gnero Gardnerella, Gardnerella vaginalis

Hbitat: rganos genitales y tracto urinario del ser humano.
Reservorio: humano.
Resistencia: Sensible al polianetol sulfonato de sodio (20 ug).
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Gardnerella vaginalis es la nica especie del gnero, es un bacilo Gram variable, anaerobio
facultativo, altamente pleomrfico, inmvil, no capsulado y no esporulado. Tanto catalasa como
oxidasa son negativas, tiene la capacidad de hidrolizar el hipurato de sodio y es sensible al polianetol
sulfonato de sodio (20 ug), un compuesto que formaba parte de los hemocultivos tradicionales,
pruebas que son claves para su identificacin. Se pueden encontrar 8 biotipos distintos.

La identificacin en frotis directo se logra por la presencia de
descamativas con bacterias adheridas. Crecen en medios enriquecidos con sangre humana, donde
produce beta hemlisis circunscrita a la colonia, puede emplearse Agar CNA (agar Columbia con 5%
de sangre humana y 15 ug/ml de cido nalidxico), donde forma colonias pequeas de 1 2 nm de
dimetro tras ser incubadas en microaerofilia (5-10% CO2) durante 24 48 horas.

Posee una toxina citotxica que rompe las clulas epiteliales, adems induce la presencia de
anticuerpos IgA provocando una respuesta inflamatoria local.

Forma parte de la microbiota de la vagina (16 - 48% de las mujeres en edad frtil), actuando
sinrgicamente con bacterias anaerbicas (Mobillunes) y Mycoplasma hominis para causar una
vaginosis bacteriana caracterizada por una descarga vaginal lechosa fina con olor a pescado cuando
se agrega KOH 10%. La vaginosis bacteriana es factor de riesgo de corioamnionitis, rotura prematura
de membrana y parto prematuro, como as mismo de infecciones postquirrgicas.

El tratamiento incluye la administracin de metronidazol (antiparasitario), ampicilina o clindamicina.
Esta bacteria es resistente al cido nalidxico, ciprofloxacino, neomicina y sulfas.
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Bacilos Gram- no fermentadores

No son comensales habituales del ser humano y se consideran como patgenos oportunistas,
especialmente de infecciones nosocomiales, donde los principales factores de riesgo para el paciente
son tratamientos con antimicrobianos o ciruga, instrumentacin y permanencia del paciente en salas
UCI por periodos prolongados. Solo una especie es patgeno obligado para el ser humano:
Burkholderia pseudomallei, agente etiolgico de melioidosis.

Pseudomonas aeruginosa es la especie ms frecuentemente aislada seguida de Acinetobacter spp y
Stenotrophomonas maltophilia, estos dos ltimos se caracteriza por producir infecciones
intrahospitalarias y en su gran mayora se asocian al uso de ventiladores artificiales o al implante de
catteres; adems presentan elevada resistencia natural a los antimicrobianos y son capaces de
adquirirla con facilidad. Achromobacter es el agente que produce la patologa ms severa, Bordetella
tiene importancia tanto en la clnica como en la epidemiologa, y se encuentra relacionada con las
infecciones que se producen en el invierno. Dentro de ellos las especies aerobias facultativas son:
Oligella urealytica, Oligella urethralis, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Alcaligenes
feacalis y Alcaligenes piechaudii.

Orden Pseudomonadales

Familia Pseudomonaceae

Simbiosis: Patgenos oportunistas.
Hbitat: Crecen en suelos y agua.
Importancia epidemiolgica: Especies psicrfilas, Especies multirresistentes. Colonizacin en
pacientes tratados con ATB.

A esta familia pertenecen los gneros: Pseudomonas spp, Burkholderia spp, Stenotrophomonas spp,
Comamonas spp y Stiewanella spp.

Gnero Pseudomonas

Es el gnero ms importante de los BGNNF, se comportan como patgenos vegetales y humanos;
son oxidasa positivo y mviles, por la presencia de flagelos polares.

Pseudomonas aeruginosa

Simbiosis: patgeno oportunista.
Transmisin: persona a persona o por lquidos contaminados.

Este MO es un patgeno oportunista, mvil por flagelacin montrica, que crece en todos los
medios a 10 42 C, produciendo diferentes tipos de colonias, estas pueden ser mucoides, y
pigmentadas verde, azul, rojo o marrn, por la presencia de piocianina, un exopigmento, que
corresponde a una fenazina, no fluorescente de color azul, soluble en agua y cloroformo que inhibe la
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112
microbiota normal y es exclusivo de esta especie; piorrubina y piomelanina que enmascaran la
piocianina, presentan tambin Pioverdina que es un pigmento fluorescente que participa en la
captacin de hierro y confiere un color grisceo al medio. Poseen un caracterstico olor dulzn, como
a fruta madura, producto de una aminocetofenona.

Se caracteriza por ser un patgeno oportunista o potencial ya que en condiciones normales no
produce dao a su hospedado. Produce infecciones de tipo pigeno, aislndose de heridas
quirrgicas. Es la especie ms aislada del medio ambiente, encontrndose en fuentes inanimadas
dentro del rea hospitalaria como soluciones teraputicas, desinfectantes (amonios cuaternarios y
ciclohexidina), jabn hexaclorofeno, frceps, catteres, termmetros, incubadoras, etc. Adems
presenta resistencia natural a la mayora de las drogas antimicrobianas. Puede causar ITU,
bacteriemias, endocarditis, infecciones respiratorias (especialmente pacientes que sufren fibrosis
qustica), infecciones oculares, otitis, infecciones cutneas, infecciones osteoarticulares.

Posee Antgeno O (termoestable), Antgeno H (termolbil), Pili, que colabora en la adquisicin de
resistencia a ciertos ATB y modifica las porinas en las membranas. Tiene una cpsula polisacrida
(arginato) con funciones de adherencia - antifagoctica. Las toxinas que produce son: Bacteriocinas o
piocinas (inhibe microbiota), Exotoxina A, endotoxinas (polisacrido) y exotoxinas: proteasas,
elastasas, hemolisinas (fosfolipasa C, produce hemlisis intravascular importante).

El tratamiento se realiza con betalactmicos: ceftazidima, cefepime, piperacilina, fluoroquinolonas,
ciprofloxacino, aminoglicsidos, polimixinas, colistina. Presenta alta resistencia a los ATB, por tanto se
debe realizar un antibiograma ampliado.

La profilaxis incluye asepsia rigurosa de las unidades clnicas y una poltica adecuada en torno a los
ATB, la realizacin de un correcto lavado de manos en los clnicos. Se ha trabajado con algunas
vacunas, pero aun no tiene el efecto deseado.

Pseudomonas fluorescens y Pseudomonas putida

Se diferencian de P. aeruginosa en el nmero de flagelos, ya que stas poseen entre 1 y 6, adems
no producen piocianina y la produccin de Pioverdina es variable, tampoco crecen a 42 C. Ambas
especies se diferencian entre s en que P. fluorescens posee una mayor actividad proteoltica. Estas
especies se aslan de suelo, agua, plantas y estn asociadas al medio ambiente hospitalario. Son
recuperadas en menor frecuencia en muestras humanas, sin embargo, P. fluorescens es considerado
como tpico patgeno oportunista para el hombre, asociado a septicemias y bacteriuria. Adems
pueden formar parte de la microbiota orofarngea y la mayora de los aislamientos son de muestras
del tracto respiratorio, en especial de pacientes con fibrosis qustica.

Familia Moraxellaceae

Comprende los gneros Moraxella, Acinetobacter y Psycrobacter. Est formado por bacilos y cocos
aislados, de a pares o formando cadenas cortas, Gram- pero con tendencia a resistir la decoloracin,
son quimiorgantrofos aerobios y productores de oxidasa a excepcin de Acinetobacter,
generalmente producen catalasa. Algunas especies son parsitos de las mucosas, hombres y
animales, causando ocasionalmente infecciones. Las otras especies se encuentran asociadas a
alimentos y al medio ambiente. Psycrobacter: son cepas asacarolticas, cocobacilares; producen
cuadros clnicos muy infrecuentemente.
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Gnero Moraxella

Las especies M. lacunata, M. nonliquefaciens, M. bovis, M. atlantae, M. osloensis, M. catarrhalis y
M. lincolnii son aerobias, no exigentes en su cultivo y parsitos obligados, aislndose
fundamentalmente de la nasofaringe del hombre. Muchas de estas especies actan como patgenos
oportunistas causando enfermedades en aquellos grupos de pacientes que presentan factores
predisponentes. Las especies M. caviae, M. ovis, M. cuniculi, M. canis, M. caprae y M. equi se aslan
en animales.

Moraxella catarrhalis
Son diplococos Gram-, oxidasa + y a diferencia de Neisseria son DNAsa+, se decolora con dificultad y
a menudo se encuentra formando ttradas, las clulas ms viejas tienden a la autolisis, por lo que se
observan hinchadas y de diferentes tamaos. Son aerobios estrictos y no utilizan glucosa, maltosa,
lactosa, sacarosa ni fructosa. Aproximadamente el 90% de las cepas aisladas de muestras clnicas son
productoras de betalactamasas.

Habita normalmente en la cavidad nasal y menos comnmente en la faringe. Se ha aislado de
secrecin de los senos maxilares, odo medio y aspirados bronquiales en bronquitis y neumona, y
ocasionalmente en infecciones sistmicas. Crece en medios corrientes, con colonias grises y cremosas
menores a 2 mm de dimetro y apigmentadas, puede ser diagnosticada mediante tcnicas
serolgicas, el tratamiento emplea betalactmicos principalmente o macrlidos y quinolonas de 1
generacin como tratamiento de segunda opcin.

Moraxella lacunata
Es agente de un cuadro infeccioso conocido como blefaroconjuntivitis angular crnica. Si bien la
conjuntivitis puede ser causada por una gran variedad de microorganismos de los cuales M. lacunata
es uno de los menos aislados, es importante debido a que puede causa lceras en la crnea. Por otra
parte es la nica especie exigente en su desarrollo, ya que requiere suero de conejo que neutraliza el
efecto txico de ciertos componentes de las peptonas.

Gnero Acinetobacter

Produce infecciones en la piel, mucosas, septicemia, neumona, ITU, meningitis, heridas post-
operatorias, y se encuentran asociados a catteres.

Son cocobacilos Gram-, aerobios estrictos y por tanto no fermentan azcares, oxidasa negativos e
inmviles, se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza y se comportan como patgenos
nosocomiales oportunistas, se clasifican en sacarolticas, es decir que degradan hidratos de carbono
no degradables en el intestino, y asacarolticas.

Crece muy bien en Agar Mac Conkey y Agar Sangre. Se han descrito 16 especies, siendo las ms
relevantes para el ser humano A. calcoaceticus, A. baumannii, A. haemolyticus y A. iwoffi. A. iwoffi, A.
haemolyticus, se identifican por sus caractersticas coloniales (hemolticas), adems no reducen los
nitratos. La mayora son resistentes a los betalactmicos, por tanto se recomienda realizar un
antibiograma ampliado para dar un buen tratamiento, en general son sensibles a quinolonas y STX.

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Gnero Psychrobacter

Solo la especie P. phenylpyruvicus ha sido descrita en cuadro clnicos muy espordicos en el ser
humano, como agente de artritis sptica, absceso del pie y una posible endocarditis infecciosa. Esta
especie corresponde a un cocobacilo Gram- que crece bien en agar sangre y agar chocolate, pero que
no se desarrolla en agar Mac Conkey, es no hemoltico, oxidasa y catalasa positivo, inmvil, reductor
de nitritos a nitratos, productor de ureasa y desamina tanto fenilalanina como triptfano. En su
identificacin se debe considerar que los sistemas comerciales para BGNNF pueden identificar
Brucella melitensis errneamente como P. phenylpiruvicus, aunque la primera no desamina la
fenilalanina.
Orden Burkholderiales

Familia Burkholderiaceae

Gnero Burkholderia

Hbitat: agua y suelo
Este gnero presenta 29 especies, sin embargo, solo 3 de ellas tienen importancia mdica: B. mallei,
B. pseudomallei y B. cepacia. Son bacilos Gram- pequeos no esporulados clasificados antiguamente
como Pseudomonas, son catalasa y oxidasa positivo. Son aerobios estrictos, mviles por la presencia
de flagelos polares. Son patgenos de de infecciones intrahospitalarias o nosocomiales, y agentes de
meloidosis, sepsis fulminante, bacteriemia, ITU, artritis sptica.

Burkholderia pseudomallei
Esta especie produce colonias hmedas o rugosas, acompaadas de un olor a putrefaccin
mezclado con olor picante. Crece en anaerobiosis en medios que contienen nitrato y es variable en la
produccin de oxidasa. La confirmacin se logra por medio de reacciones serolgicas usando sueros
comerciales. Tiene distribucin ubicua y su incidencia es frecuente en regiones tropicales, tales como
el sudeste de Asia y el norte de Australia. Este bacilo ataca tanto animales como humanos,
predominando en individuos con condicin de inmunosupresin, es agente de melioidosis,
enfermedad que afecta los ganglios y es considerada una enfermedad emergente y un arma biolgica
de categora B.

Burkholderia mallei
Corresponde a bacilos Gram- bastante claros y con extremos redondeados, de 2 5 um de largo y
0,3 0,8 um de ancho y con inclusiones granulares de varios tamaos, a menudo se tien
irregularmente y no tienen cpsulas ni forman esporas. A diferencia de las dems especies del gnero
no posee flagelos y por tanto no es mvil. En los cultivos viejos existe un polimorfismo claro,
pudiendo formar filamentos ramificados en la superficie. Es aerbica, creciendo de forma ptima a 37
C, crece bien en medios de cultivo ordinarios como el agar nutritivo y se recomienda la incubacin
durante 48 horas, el enriquecimiento con glicerol es particularmente til. Esta especie es agente del
muermo en equinos y ocasionalmente se puede transmitir al hombre, ya sea por heridas o inhalacin.

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Bulkholderia cepacia
Esta especie produce variados pigmentos segn la composicin qumica del medio en que se
desarrolle, la presencia de hiero se relaciona con la produccin de pigmento amarillo, pudiendo
producir una misma cepa uno o varios pigmentos. Pierde rpidamente la viabilidad en los medios de
cultivo. Normalmente es un fitopatgeno, que se ha asilado como patgeno oportunista en pacientes
neutropnicos sometidos a ventilacin mecnica, con septicemia, meningitis, endocarditis, ITU,
neumona y portadores de fibrosis qustica.

Familia Alcaligeneceae

Gnero Alcaligenes

Hbitat: suelo, agua.
Modo de transmisin: a travs de los funcionarios hospitalarios e incorrecta manipulacin
del material mdico.
Patogenia: en pacientes inmunosuprimidos son capaces de colonizar.
Espectro de la enfermedad: sangre (bacteriemia, sepsis), muestra respiratoria (respiradores
mecnicos), orina: Oligella (mala manipulacin de sondas).

Est formado por bacilos Gram-, oxidasa y catalasa positiva, mviles por flagelacin pertrica y no
exigentes, de modo que la mayora crece en agar sangre cordero 5% y Mac Conkey.

La nica especie del gnero que tiene importancia clnica es A. faecalis subesp. faecalis. Esta
especie puede formar parte de la microbiota saprfita de la piel y el tracto gastrointestinal. La
mayora de los aislamientos clnicos provienen de hemocultivos y secreciones del tracto respiratorio
de pacientes hospitalizados, ya que estn relacionados con la contaminacin de equipos mdicos y
fluidos. Ocasionalmente se han aislado en lceras corneales, endoftalmitis, abscesos cerebrales y
otitis crnica; todas ellas en pacientes con factores de riesgo para desarrolla infecciones, como
inmunodeprimidos, diabticos, alcohlicos, o tambin como un patgeno oportunista coinfectando
junto a otros microorganismos virulentos. El tratamiento se realiza con SXT.

Gnero Achromobacter

Est formado por 7 especies, de las cuales A. xylosoxidans subesp. xylosoxidans y denitrificans son
las ms importantes para el ser humano. Corresponden a bacilos Gram- rectos, aerobios obligados,
mviles por flagelacin pertrica, oxidasa y catalasa positivos. El tratamiento se realiza con
quinolonas, ceftazidima y carbapenems.

A. xylosoxidans subesp. xylosoxidans

Esta especie crece bien en agar nutriente, formando colonias circulares no pigmentadas, blanco
grisceas, en agar BHI las colonias alcanzan un dimetro de 1 mm. La infeccin por esta especie es
rara, los casos reportados definen el perfil clnico de riesgo: pacientes de mediana edad, aosos,
neonatos, pacientes inmunocomprometidos, etc., que adquieren la infeccin (en la mayora de los
casos) durante la hospitalizacin, aunque hay casos reportados de infecciones adquiridas en la
comunidad. El reservorio permanece desconocido, sin embargo se conoce que el microorganismo
Susan Arias Donoso
116
puede sobrevivir y multiplicarse en soluciones acuosas, jabones, soluciones antispticas, respiradores,
nebulizadores, agua corriente, fluidos de dilisis y piletas de natacin. Los aislamientos clnicos han
sido cultivados de otitis, lquido pleural, peritoneal y cefalorraqudeo, osteomielitis, catteres, etc.

A. xylosoxidans subesp. denitrificans

Esta especie comparte las caractersticas de la subespecie xylosoxidans. Se le ha aislado de una gran
variedad de muestras clnicas tales como heces, orina, sangre, lquido pleural, secrecin tica
purulenta, prosttica y farngea.

Gnero Bordetella

Simbiosis: patgeno exclusivo del ser humano
Modo de transmisin: gotitas de pflgge (fase catarral)

Est compuesto por 6 especies B. pertussis, B. parapertusis, B. avium, B. bronchi, B. hinzii,
B.holmesii. Bordetella pertusis es una bacteria Gram- que causa enfermedades del tracto respiratorio,
usualmente limitada a las vas areas superiores, llamada tos ferina, tos convulsiva o coqueluche, una
enfermedad inmunoprevenible y causada ocasionalmente por B. parapertusis. B. bronchiseptica
raramente infecta a humanos sanos, aunque se han informado enfermedades en pacientes
inmunocomprometidos. Fue aislada por primera vez en 1906 por Bordet y Gengou.

Son cocobacilos pequeos de 0,2 a 0,5 micrones de dimetro y de 0,5 a 2 micrones de largo,
presentan cpsula y filamentos similares a pilis, generalmente se disponen como clulas nicas o en
pares. Son aerobias estrictas y su temperatura ptima de crecimiento es 35C, pueden presentar
tincin bipolar y ser inmviles o mviles por flagelacin pertrica. Las colonias en medio Bordet-
Gengou son lisas, convexas, perladas, brillantes o como gotitas de mercurio.

Bordetella pertussis
Esta bacteria, tambin llamada bacilo de Bordet-Gengou, es agente etiolgico de Coqueluche o tos
convulsiva que ataca preferentemente a nios, entre 6 meses a 5 aos, esta enfermedad se desarrolla
en tres periodos: catarral, espasmdico y convaleciente. Presenta distintos factores de virulencia, que
son:
- Sustancia capsular: le proporciona proteccin efectiva.
- Vellosidades o Pili: interviene en la adherencia en la zona traqueal.
- Pertactina: protena de membrana externa. Participa en la adherencia bacteriana.
- Hemaglutinina filamentosa (FHA): adherencia. Aglutina GR
- Toxina pertusis: favorece la adherencia a clulas epiteliales traqueales y la linfocitosis, tiene
actividad de ribosilacin del ADP de manera anloga a la toxina del clera.
- Citotoxina traqueal: inhibe la sntesis de DNA de las clulas ciliadas, provocando ciliostasis y
extrusin de clulas epiteliales ciliadas.
- Endotoxina: es un polisacrido.
- Otras toxinas: adenilciclasa, toxina dermonecrtica y hemolisina.
o Adenilciclasa: interfiere con la quimiotaxis y funcin bactericida de los leucocitos.
Produce edema local.
o Toxina dermonecrtica: contraccin del msculo liso vascular y necrosis sistmica.
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El diagnstico idealmente se debe realizar durante la fase catarral. Se realiza a partir de muestras
obtenidas por lavado nasal con solucin salina, hisopados nasofarngeos, o gotitas expectoradas

obtener una muestra contaminada es por aspirado traqueal, seguido por el hisopado nasofarngeo. El
cultivo se debe realizar en medios enriquecidos (Bordet Gengou) que contienen drogas
antimicrobianas para inhibir la microbiota acompaante, se puede emplear tambin el Agar Jones-
Kendrick modificado y Regan-Lowe, que es el ms recomendado en el aislamiento de Bordetella
pertussis, la cual aparece usualmente al tercer da, observndose colonias pequeas, brillantes, lisas,
de borde regular, convexas y de color perlado, semejando gotas de mercurio. La muestra se siembra
de inmediato y se incuba en atmosfera normal a 35-36C, hasta 7 das. La identificacin se realiza por
medio de coloracin inmunofluorescente o aglutinacin en portaobjeto con el antisuero especfico.

Los resultados de las pruebas bioqumicas, indican un agente Urea negativo, Catalasa positivo,
Oxidasa negativo, indol negativo y citrato negativo. El diagnstico rpido se puede realizar mediante
inmunofluorescencia directa de las muestras, sensibilidad de un 60% (hay un buen rendimiento en la
fase catarral). Las pruebas serolgicas no tienen valor diagnostico, ya que los anticuerpos aumentan
durante la tercera semana de la enfermedad. La identificacin presuntiva se basa en la morfologa de
las colonias, la tincin de Gram a partir del cultivo y el uso de pruebas bioqumicas, sin embargo el
aislamiento sigue siendo la tcnica de confirmacin diagnstica.

El tratamiento se realiza con Eritromicina a dosis de 10 mg/kg cada 6 horas (mximo 2 gramos),
como terapia alternativa se puede emplear clotrimoxazol. El tratamiento en nios dura 14 das para
evitar recidivas. En adultos dura 7 das. La administracin de oxgeno, sedacin y antitusivos ayudan
en la fase paroxstica y previenen la lesin anxica del cerebro. Si se administra el ATB durante la fase
catarral de la enfermedad se consigue alterar favorablemente el curso de la enfermedad.

B. pertussis se transmite de una persona infectada a una susceptible a travs de gotas respiratorias,
con una alta tasa de transmisibilidad, especialmente a nivel intrafamiliar. El grupo de mayor riesgo lo
constituyen los nios con inmunizacin parcial, hallndose la mayora de los casos en menores de un
ao. Han existido brotes epidmicos a pesar de la vacunacin, la vacuna empleada es elaborada con
bacterias muertas y se administra conjuntamente con el toxoide diftrico y el tetnico a los 2, 4 y 6
meses, con refuerzos a los 18 meses y 5-6 aos. Se puede realizar quimioprofilaxis con eritromicina u
otros macrlidos para evitar que se produzca el cuadro clnico.

Fisiopatogenia
El MO alcanza el tracto respiratorio y se adhiere a la superficie epitelial (cilios) de la trquea y
bronquios (unin mediada por hemaglutinina, pertactina, fimbrias y la toxina pertusis), all se
multiplica, pero no invade la sangre. Produce sustancias que irritan las clulas superficiales (toxina
dermonecrtica, citotoxina traqueal) produciendo edema, destruccin de los cilios, tos y linfocitosis
marcada. La citotoxina traqueal, provoca ciliostasis, es decir que altera la defensa mucociliar. Esto
radica la aparicin de zonas de necrosis en el epitelio, infiltracin polimorfonuclear, inflamacin
peribronquial y neumona intersticial. Los bronquios ms pequeos se obstruyen con moco y
producen atelectasia, disminuyendo la oxigenacin y provocando la aparicin de convulsiones. La
toxina pertusis y adenilato ciclasa inhiben a las clulas fagocticas.

El microorganismo requiere un periodo de incubacin 2 semanas antes de provocar la enfermedad.
Durante la fase catarral, que dura aproximadamente 10 a 14 das, el paciente presenta tos leve,
malestar general, rinorrea, fiebre, estornudos, anorexia y coriza, esta etapa es muy infecciosa, pues
Susan Arias Donoso
118
en ella se produce diseminacin del MO por las gotitas de pflgge. En la fase paroxstica, que dura de
1 a 4 semanas, comienza la afeccin de las vas respiratorias inferiores, con aparicin de accesos de
tos repetitiva con estridor, leucocitosis y vmitos. Finalmente en la fase de convalecencia prolongada
disminuyen en nmero e intensidad los ataques paroxsticos, entre los cuales el paciente se
encuentra clnicamente bien, esta fase dura desde 1 semana a meses, en ella se desarrollan las
complicaciones secundarias (neumona, convulsiones, encefalopatas).

Los accesos de tos se caracterizan por ser ms frecuentes durante la noche y puede aparecer tras
algn estmulo como el aire fro, se producen en series repetitivas durante hasta 40 das; ataques de
tos violenta, espasmdica, sin interrupcin que terminan con una inspiracin violenta y prolongada
acompaado de un silbido o estridor caracterstico; son frecuentes los vmitos poscrticos (tos
emetizante); y puede aparecer convulsiones, cianosis o apnea. En general es un cuadro mayormente
relacionado con nios, y cuenta como agravantes la presencia de enfermedades asociadas como dao
pulmonar o diabetes.

Gnero Oligella

Este gnero comprende dos especies Oligella urethralis y Oligella ureolytica, las que poseen las
mismas caractersticas que Moraxella.

Oligella urethralis
Esta especie es comensal del tracto genitourinario y la mayor parte de los aislados clnicos son de
infeccin del tracto urinario, predominantemente en hombres. Aunque las infecciones sintomticas
son raras, se han informado bacteriemias, artritis sptica que imita una artritis gonoccica, y
peritonitis.

Oligella ureolytica
Esta especie se ha encontrado primariamente como agente de infeccin del tracto urinario,
usualmente en pacientes con catter urinario de largo plazo u otros sistemas de drenaje urinario.
Estos pacientes tienen predisposicin a desarrollar clculos urinarios, posiblemente debido a que la
bacteria hidroliza urea y alcaliniza la orina, conduciendo a la precipitacin de fosfatos. Se ha
informado un caso de bacteriemia en un paciente con uropata obstructiva. El diagnstico se logra por
cultivo.

Orden Xanthomonadales, Familia Xanthomonadaceae

Gnero Stenotrophomonas

S. maltophilia es la especie ms frecuente, es un patgeno nosocomial oxidasa negativa e inmvil.
Posee colonias caractersticas en agar sangre y agar nutritivo, que permite pensar en la presencia de
esta bacteria. Pueden producir ITU (infeccin ms frecuente), bacteriemia, mastoiditis, conjuntivitis,
peritonitis, endoftalmitis, neumona (infrecuente). Son muy resistentes a ATB, evitan que la droga
ingrese al citosol, por un sistema de porinas, el tratamiento se realiza con cotrimoxazol.

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Orden Legionellales, Familia Legionellaceae

Gnero Legionella

Este gnero presenta ms de 64 serogrupos, siendo Legionella pneumophila serogrupo 1 la
responsable de ms de 90% de los casos de la enfermedad. Corresponde a un parsito intracelular de
protozoos de agua dulce que, con mecanismos parecidos, puede desarrollar su ciclo vital en clulas
de mamferos. En humanos es responsable de la legionelosis, cuyo primer brote fue detectado en
Filadelfia, donde varios excombatientes de la Guerra de Vietnam presentaron una variante de la
neumona que provoc varias muertes en sus filas, recibiendo el nombre de Legionella con motivo de
los legionarios.

La mayor fuente de contagio es el sistema de aguas de grandes edificios, hoteles y hospitales,
^W
caeras con agua tienen una capa bilfila donde viven hongos, protozoos y algas que forman un gran
tamiz que esconde microorganismos que tienen una gran importancia en el desarrollo de Legionella,
es debido a esto que la bacteria se instala en el interior de las amebas, donde resiste mucho ms las
posibilidades de agresin externa, como el aumento de temperatura y el contacto con el cloro.
Cuando el agua contaminada con la bacteria es inhalada en forma de aerosol la enfermedad se
manifiesta en personas susceptibles, causando una forma de neumona adquirida en la comunidad
(NAC) reconocida en todo el mundo. La bacteria puede llevar complicaciones pulmonares, siendo sus
sntomas fatiga, dificultad para respirar y en ocasiones diarrea o dolores musculares. En
Latinoamrica su incidencia es desconocida y en Chile hay informe de casos basados en la deteccin
de antgenos en orina.

Morfolgicamente corresponde a un bacilo Gram- que en cultivo es largo y fino de 0,3 a 0,9 um de
ancho y desde 1,5 a 15 um de largo. Se caracteriza porque puede observarse como cocobacilo en los
tejidos infectados y formas bacilares alargadas en los medios de cultivo. Es aerobio estricto, catalasa y
gelatinasa positivo, capnfilo y poco sacaroltica. Su principal fuente de energa lo constituyen los
aminocidos y se les considera fastidiosos para su aislamiento in vitro ya que requieren hierro y
cistena.

Para el diagnstico de laboratorio se cuenta con el cultivo, siendo el medio BCYE, suplementado con
polimixina B, anisomicina y cefamandol para evitar el crecimiento de microbiota, el ms
recomendado, este medio enriquecido contiene, entre otros ingredientes, extracto de levadura, L-
-cetoglutarato. Puede ser aislada desde muestras respiratorias, sin
embargo, la sensibilidad del cultivo de expectoracin es baja (50%), se obtiene mejor rendimiento de
aislamiento con las muestras de lavado broncoalveolar. La bacteria crece a partir de las 48 horas de
incubacin a 37 C en aerobiosis, las colonias son de color azulado y de textura esmerilada con
aspecto de vidrio molido. Se confirma su identificacin mediante aglutinacin con partculas de ltex.
Un informe de cultivo negativo solo se emite despus de 10 das de incubacin y revisin peridica.
Otra tcnica para el diagnstico es la IFD que puede detectar la bacteria en muestras respiratorias y
tejidos en dos a cuatro horas, sin embargo, pueden presentarse reacciones cruzadas, su sensibilidad
vara entre 25 y 66%. Otra alternativa es la deteccin de antgenos en orina, lo cual es un gran aporte
en el diagnstico de la bacteria ya que su antgeno es detectable desde el inicio de los sntomas y en
algunos casos hasta muchos meses despus, sin influir la administracin previa de antibiticos; es una
prueba rpida que utiliza inmunocromatografa de membrana para detectar antgenos en 15 minutos,
Susan Arias Donoso
120
aunque solo detecta L. pneumophila serogupo 1; la sensibilidad de esta tcnica oscila entre 60 y 90%.
El diagnstico serolgico nicamente permite realizar un diagnstico retrospectivo. Se requieren dos
muestras de suero, la primera obtenida en la fase aguda de la enfermedad y la segunda a las 6 8
semanas, dado que aproximadamente un 15% de los pacientes seroconvierten despus de las 6
semanas. La deteccin de anticuerpos se realiza con inmunofluorescencia indirecta. Un incremento
de 4 veces o ms en el ttulo se considera diagnstico. En muestra nica un ttulo de 256 en presencia
de neumona se considera diagnstico, sin embargo, dada la prevalencia de anticuerpos en personas
asintomticas, sta se debe interpretar con precaucin. Se puede realizar, tambin, diagnstico por
medio de PCR tradicional y en tiempo real a partir de muestras respiratorias, orina, suero y
leucocitos. La sensibilidad flucta entre 30 y 86%.

La eritromicina ha sido la terapia de eleccin, sin embargo, dado las fallas de tratamiento, se han
probado con xito otras dogas antimicrobianas, como azitromicina y fluoroquinolonas.

Orden Flavobacteriales, familia Flavobacteriaceae

Chryseobacterium meningosepticum Elizabethkingia meningoseptica

Esta bacteria es un bacilo mediano a largo, que no fermenta la lactosa pero si fermenta la glucosa
pero dbil y lentamente, por lo que se considera no fermentador, oxida glucosa y manitol, tiene un
pigmento amarillo (en agar sangre o agar nutritivo), es oxidasa positivo. Es un patgeno oportunista y
su hbitat es: suelos, plantas y agua. Causa infecciones nosocomiales, puede provocar bacteriemia,
neumona, meningitis y sepsis neonatal, es muy raro encontrar esta especie en infecciones en
adultos. Esta especie coloniza las vas respiratorias y, por tanto, es frecuente encontrarlo en
aislamientos de muestras clnicas humanas. Sus factores de virulencia son proteasas, gelatinasa.

Esta especie crece bien en agar sangre produciendo colonias pequeas, hmedas y amarillas. Son
resistentes a betalactmicos (incluido carbapenems), cefalosporinas y aminoglicsidos. El tratamiento
se realiza con: Clindamicina, Rifampicina (en caso de meningitis) y Vancomicina. La principal medida
de prevencin es la buena manipulacin del material mdico (especialmente los instrumentos que
produzcan injurias o seas invasivos).

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121
Familia Enterobacteriaceae

Tamao: 0,4 0,6 x 2 3 um
Hbitat: ubiquitarias (exp. Salmonella Typhi)
Importancia epidemiolgica: su presencia en agua indica contaminacin fecal reciente.

Esta familia es el grupo ms grande y heterogneo de bacilos Gram- de importancia clnica, siendo
veinte de sus especies responsables de ms del 95% de las infecciones, a ella pertenecen los gneros
Escherichia, Shigella, Salmonella, Klebsiella, Yersinia, Enterobacter, Morganella, Proteus y Serratia, los
que se clasifican de acuerdo a sus propiedades bioqumicas, estructura antignica, hibridacin y
secuenciacin de su material gentico. Todos son bacilos Gram- rectos anaerobios facultativos no
esporulados de entre 0,4 y 0,6 um de ancho por 2 o 3 um de largo, en general son mviles por la
presencia de flagelos pertricos pero los gneros Klebsiella y Shigella son inmviles, fermentan
glucosa con produccin de cido o cido y gas, son catalasa positivos, con excepcin de Shigella
dysenteriae O1; oxidasa negativos a excepcin de Plesiomonas, reducen nitratos a nitritos, Salmonella
y Shigella resisten altas concentraciones de sales biliares; no tienen cpsula verdadera a excepcin de
Klebsiella.

Estas bacterias son ubiquitarias ya que son resistentes a las condiciones del medio ambiente, con
excepcin de Salmonella Typhi; algunos de ellos son comensales del tracto gastrointestinal del
humano y de animales, pero se pueden comportar como patgenos oportunistas; otros son
patgenos per se para el ser humano como Shigella, Salmonella, Yersinia y algunos serotipos de
Escherichia coli.

Para su aislamiento se pueden utilizar medios de cultivo selectivos y diferenciales como Mac
Conkey, Agar EMB (Etilen Metilin Blue), Agar SS, Agar XLD y Cromo Agar. Para su reconocimiento se
d^/< >/ D/K h K KEW'
reduccin de H2S, Rojo Metilo y Voges Proskauer, donde las cinco primeras son ms determinantes;
se utiliza adems serotipificacin para la identificacin de Salmonella, Shigella y Escherichia coli.

Se pueden clasificar de acuerdo a su capacidad de fermentar la lactosa, segn esto se pueden
encontrar:

Fermentadores de lactosa
No fermentadores de lactosa Variable
Escherichia coli (con excepcin
Shigella
Citrobacter
de algunas cepas)
Salmonella
Pantoea
Klebsiella
Proteus

Enterobacter
Yersinia
Serratia
Providencia
Morganella

Se clasifican adems segn el cuadro clnico que producen en enteropatgenas y no
enteropatgenas, encontrando en estas ltimas aquellas que producen ITU, meningitis, neumona,
abscesos, entre otras patologas.

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Enteropatgenas
Escherichia coli
Shigella
Salmonella
Yersinia enterocolitica
Yersinia pseudotuberculosis

No enteropatgenas
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Enterobacter cloacae
Citrobacter freundii
Serratia marcencens
Morganella morganii
Providencia
Mecanismos de patogenicidad

Antgeno somtico O: es cepa especfico aunque pueden existir reacciones cruzadas (Salmonella
con Citrobacter y Escherichia con Shigella), es el principal antgeno de pared y forma parte del LPS, es
estable al calor e inhibe la fagocitosis. Se ha asociado con meningitis, gastroenteritis e ITU.

Antgeno capsular K (Vi en Salmonella): es una protena o polisacrido lbil al calor que en algunos
casos puede interferir con la determinacin del antgeno O, sin embargo se puede remover por

Enterobacteriaceae y por tanto existen reacciones cruzadas: E. coli con N. meningitidis o H. influenzae
tipo b, y K. pneumoniae con S. pneumoniae. Se asocia con aumento de la virulencia pues protegen
contra la fagocitosis mediada por anticuerpos, aunque son malos inmungenos.

Antgeno flagelar H: es una protena termolbil que puede estar ausente y se ha asociado a
enfermedades, probablemente estn involucrados en la adherencia de las bacterias a las clulas. Se
ha empleado para la clasificacin bacteriana.

Pili o fimbrias: actan como adhesinas.
- d /
hospedador.
- Antgeno factor de colonizacin (CFA) I y II: se encuentran presentes en enterobacterias
agentes de gastroenteritis.
- Fimbrias P: en bacterias uropatgenas.
- Fimbrias S: en cepas productoras de sepsis y meningitis neonatal.

Endotoxina: propiedad que reside en el lpido A del LPS y es liberada cuando muere o se lisa la
bacteria, es responsable de la fiebre, de la leucopenia seguida de leucocitosis, de la activacin del
complemento, CID, Shock y Muerte.

Exotoxina: presentes en bacterias enteropatgenas.
- Enterotoxina ST (termoestable): aumenta el GMPc responsable de la diarrea secretora.
- Enterotoxina LT (termolbil): aumenta el AMPc productor de diarrea secretora.
- Shiga: inhibe la sntesis proteica inactivando la subunidad 60S ribosomal de la clula del
hospedador.
- Verotoxina: produce enterotoxicidad similar a la del Shiga.
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123
- Hemolisina: lisa los glbulos rojos y los glbulos blancos aumentando la concentracin de
hierro extracelular.

Enterobactina y aerobactina (siderforos): capturan el hierro de los grupos hemo o de la
transferrina y la lactoferrina.

Mecanismo de produccin de diarreas

Mecanismo invasor: Invade el enterocito y pasa al torrente sanguneo, algunas solo alcanzan la
lmina propia, provocando diarrea disentrica, exudativa o mucosa, este mecanismo es realizado por:
Salmonella, Shigella, Campylobacter, ECEI, Yersinia, ECEH.

Mecanismo toxignico: En este mecanismo se ven involucradas toxinas, la bacteria toma contacto
con la clula y provoca salida de Na aumentando la presin osmtica del lumen intestinal y
provocando as la salida de agua y la consecuente diarrea secretora, este mecanismo lo desarrollan:
ECEP, ECET, ECEAg, Campylobacter, Vibrio.

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124
Escherichia coli

Es el bacilo Gram- ms aislado en muestras clnicas en su mayora son fermentadores de lactosa y
glucosa con produccin de gas, son indol positivo, citrato positivo y mviles. Es agente etiolgico de
septicemia, ITU, meningitis neonatal (serotipos K1) y gastroenteritis.

Habitan en la microbiota intestinal presente en animales homotermos, es decir que son capaces de
mantener la temperatura especialmente a 37C, all produce vitamina k y parte del complejo
vitamnico B. Se transmiten mediante agua y alimentos contaminados con heces.

Escherichia coli es el organismo que ms frecuentemente causa infecciones en el tracto urinario
(90%), debido a su capacidad de unirse al uroepitelio principalmente por la presencia de fimbria P, ya
que los receptores de manosa se encuentran en este epitelio, la mayora de las cepas uropatgenas
son de los serogrupos O2, O4, O6 y O18. Es adems un causante habitual de septicemia y meningitis
neonatal al adquirirla en el canal de parto. El 75% de estas cepas presentan el antgeno K1. Las
fimbrias S son su princ
limitado por la presencia de hierro.

Se encuentran seis serogrupos en base a los mecanismos de
patogenicidad y su estructura antignica:

Enteropatognica clsica (ECEP): se contagia por alimentos o aguas
contaminadas, esta bacteria se adhiere al epitelio del intestino y
destruye las microvellosidades, por consiguiente se produce una diarrea
acuosa (secretora), generalmente en nios menores de dos aos, que
afecta al intestino delgado. Los factores de virulencia estn codificados
^
serotipificacin.

Enterotoxignica (ECET): se contagia por alimentos o agua

contaminada, es el principal agente etiolgico de la diarrea del viajero,
pero puede incluso causar colitis hemorrgica (diarrea secretora o
toxignica), puede afectar a nios y adultos. Poseen fimbrias CFA I y II
(factor de colonizacin) codificadas por plasmidio y necesarias para la
colonizacin, estos se adhieren especficamente al epitelio del intestino
delgado. Adems presentan toxinas STI y STII, codificadas por
tramposones, y LT, con funcin homloga a la toxina del clera. STI
estimula la salida de Cl- o inhibe la absorcin de NaCl, o ambas,
provocando as diarrea acuosa. Usualmente no se identifica, en caso de
realizarse se puede emplear ELISA y sondas de DNA.

Enteroinvasora (ECEI): se contagia por alimentos contaminados la
bacteria se adhiere a la superficie de la clula epitelial y la invade
destruyndolas y causando diarreas con sangre y mucus (diarrea o
disentera exudativa), y acuosas. Poseen enterotoxinas que son
codificadas por plasmidio. Puede afectar tanto a nios como adultos en
el intestino grueso. Estas bacterias utilizan el citoesqueleto de la clula
para formar una cola de actina que le permite trasladarse a las clulas
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125
adyacentes. No fermentan la lactosa y adems son inmviles, se

detectan por pruebas de DNA.

Enterohemorrgica (ECEH): se considera zoontica, es trasmitida por
alimentos contaminados, especialmente por carne mal cocida, tienen
baja dosis infectiva, inferior a 100 bacterias, causa desde diarreas leves
hasta colitis hemorrgicas. Estas bacterias poseen toxinas VT1 (o STx1) y
VT2 (o STx2) codificadas en dos profagos, son parecidas a las toxinas de
Shigella, adems producen toxina Shiga. Puede producir SHU por dao
renal posterior a la colitis y prpura trombocitopnico, actan en el
colon ascendente y afectan a nios y adultos. El serotipo O157:H7 es el
principal causante de SHU en Chile (91%), existiendo tambin los
serogrupos O26, O55, O111 y O119. Adems es el causante principal de
diarrea con sangre en nios menores de 5 aos (38%). Para su
identificacin se utilizan muestras de deposiciones que se siembran en
agar Mac Conkey sorbitol, el cual se incuba por 24 horas, pudiendo
observarse al cabo de este tiempo colonias transparentes ya que no
fermentan el sorbitol, a 5 o 10 de estas colonias se les realiza serologa
con antisueros O157, O26 y O11, la cual se realiza en centros de
referencia. No fermentan la sacarosa.

Enteroagregativa (ECEAg): esta bacteria es poco frecuente, tienen la
capacidad de formar una biopelcula sobre las clulas epiteliales del
intestino delgado, provocando diarrea acuosa persistente en nios,
afecta el intestino delgado. Las bacterias tienden a aglutinarse en
cultivo. Se puede identificar mediante sondas de DNA y la realizacin de
Patrones de Adherencia Agregativa, esto cobra importancia en
investigacin.

Enteroadherente (ECEA)

Factores de patogenicidad especficos

- W & -manosa, estn
presentes en clulas uropatgenas y no uropatgenas.
- WW '-Galactosa (Gal-Gal) del uroepitelio
principalmente.
- Pilis de adherencia agregativa (AAF): uroepitelio o intestinal.
- Pilis CFA (factor de colonizacin): actan a nivel del epitelio intestinal.
- Pilis formadores de poros (BFD): epitelio intestinal.
- Polisacrido capsular K1 (cido silico, antifagocitario): asociado a meningitis neonatal.
- Hemolisina alfa: formadores de poros, destruyen GR y GB, para la salida de Fe.

Entre el 40 y 90% de las cepas son resistentes a ampicilina, estreptomicina, tetraciclina y sulfamidas,
mientras que entre un 15 y 30% son resistentes a las cefalosporinas de 1 generacin, a neomicina,
kanamicina, cloranfenicol, nitrofurantona y a quinolonas. Por esta razn se emplea como
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126
tratamiento la combinacin de amoxicilina con cido clavulnico, o cefalosporinas de 2 o 3
generacin; tambin se puede utilizar gentamicina, tobramicina, amikacina, colistina y polimixina B.
En caso de diarrea se emplea como tratamiento cotrimoxazol, ECET son altamente sensible, y
quinolonas (ciprofloxacino), estas ltimas se usan tambin para infeccin urinaria.

Para prevenir la presencia de esta bacteria en alimentos es necesario mantener algunas medidas de
profilaxis como hervir el agua, eliminar vectores y cocinar los alimentos, en el caso de manipuladores
de alimentos que hayan presentado Escherichia coli enteropatgena se pueden emplear medidas de
quimioprofilaxis.

Familia Salmonellaceae

Es el segundo grupo bacteriano ms importante de esta familia, es adems el grupo ms grande y
heterogneo de bacilos Gram-, cortos en caso de Salmonella, de importancia clnica. No forman parte
de la microbiota y cuando estn presente forma cuadros patolgicos.

En general son bacterias anaerobias facultativas Catalasa positivo y oxidasa negativo, a excepcin de
Plesiomonas, no son capsuladas, por lo menos no poseen una cpsula real, se tiene solo un antgeno
de superficie que es el antgeno Vi, son mviles por la presencia de flagelos pertricos, excepto
Salmonella gallinarum y Salmonella pullorum; y poseen fimbrias; fermentan la lactosa con produccin
de gas de glucosa con excepcin de Salmonella Typhi.

Gnero Salmonella

Reservorio: Animales domsticos y salvajes de sangre caliente y fra, especialmente de
planteles agrcolas y de corral (zoonosis). Salmonella Typhi y Paratyphi exclusivos del hombre.
Fuentes ambientales: ubiquitarias, agua, suelo, huevos, aceite, fecas animales, carne cruda,
alimentos marinos y superficie de plantas de proceso de alimentos e inanimadas.
Distribucin: mundial, endmico en India.
Hbitat: tracto gastrointestinal.
Husped: afecta a todas las especies conocidas
Transmisin: Salmonella Typhi y Paratyphi, alimentos contaminados y portadores sanos (ciclo
ano-mano-boca).
Factores predisponentes: edades extremas, problemas gstricos: hipoclorhidria, trnsito
rpido, tratamiento antimicrobiano prolongado, desnutricin, diabetes, neoplasias y SIDA.
Resistencia: sensibles a acidez estomacal. Resistentes a sales biliares.

Son bacterias que resisten bien las altas concentraciones de sales biliares, lo cual es la base del Agar
SS ya que este posee altas concentraciones de stas sales que inhiben el resto de los coliformes. Son
citrato positivo y urea negativo, esta ltima caracterstica es muy relevante para diferenciarlo de
Proteus. Se caracterizan por poseer crecimiento rpido a temperaturas que varan entre 5 y 46 C
(ptimo es a 35 37 C); son sensibles a pH menores de 4,5 (ptimo 6,5 7,5), de modo que la carga
infectiva es alta (106 108) pues el pH cido del estmago los destruye.

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Existe una gran cantidad de subespecies o serovariedades, siendo la subespecie enterica la nica de
importancia clnica pues rene a todas las que producen cuadros entricos en el ser humano, de ellas
las ms importantes son las que producen la fiebre tifoidea en el ser humano: Salmonella Typhi y
Salmonella Paratyphi A, B y C, los dems integrantes de esta subespecie solo producen salmonelosis.
S. Typhi y S. Paratyphi son estrictos del ser humano. Salmonella Typhi, o bacilo de Elbeth, constituye
el serovar ms virulento y su nico reservorio es el hombre, este serovar presenta algunas
caractersticas fenotpicas especiales: produce H2S en muy poca cantidad, es citrato negativo, ornitina
negativo y acidifica la glucosa sin produccin de gas.
Gnero
Salmonella
Especie
enterica
Subespecie
salamae
Serovar
Enteritidis
diarizonae
Typhi
arizonae
Typhimurium
enterica
Paratyphi
A, B, C
houtenae
Cholerasius
indica
Gallinarum

El diagnstico de las subespecies se realiza mediante la aplicacin de Test bioqumicos y Serologa.
No es posible determinar los serovares de Salmonella a travs de pruebas bioqumicas, stas solo
llegan a diagnosticar el gnero. Se puede determinar mediante pruebas de aglutinacin en ltex la
presencia del antgeno Vi, que rodea a la pared, del Antgeno flagelar H, a excepcin de Salmonella
Gallinarum; y del Antgeno somtico O, segn el esquema de Kauffman-White. Adems, Salmonella
puede inducir la produccin de anticuerpos O y H, lo cual permite un diagnstico indirecto a travs de
la Reaccin de Widal.

-
Fimbrias: se han descrito 4 tipos, la funcionalidad es de adhesin

Sistema de secrecin tipo 3: estructuras que se han especializado en la invasin de las clulas
intestinales (spi-1) y en la supervivencia dentro del macrfago (spi-2)
- Capsula no verdadera: es un antgeno de envoltura que se llama Vi y le permite evadir la
fagocitosis, dificulta el depsito del complemento y enmascara al antgeno O, se puede
remover por calor.
- Lpido A: forma parte de los lipopolisacridos, tiene una actividad endotxica, se encuentra
en la diarrea invasora.

Salmonella en un parsito intracelular facultativo, ya que escapan de la accin de lisosomas, por lo
que le permiten mantenerse viable dentro de los fagocitos, dentro de los cuales puede multiplicarse.
A diferencia de Shigella que solo invade hasta la lmina propia, Salmonella tiene la capacidad de
invadir al organismo y pasar al sistema circulatorio. En el caso de portadores la bacteria pasa por el
ganglio mesentrico y luego al hgado, para finalmente alojarse en la vescula biliar.
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Salmonella ingresa al organismo por la va oral
mediante alimentos contaminados (i), alcanza el
intestino delgado, donde se adhiere gracias a las
fimbrias, e ingresa a la clula por invaginacin (ii),
comenzando as la invasin, una vez dentro de la
clula se multiplican produciendo muerte celular con
extensin a las clulas adyacentes del tejido linfoide,
durante la segunda semana se distribuye en las
placas de Peyer. Al ser fagocitadas por los
macrfagos (iii) la bacteria se disemina por el cuerpo
en la sangre llegando a diferentes rganos, pudiendo
llegar al hgado, bazo y a la vescula biliar (iv), de esta
se puede ir eliminando pulso a pulso a travs del
coldoco de modo que las personas portadoras
eliminan cargas bacterianas a travs de las heces.
Este proceso genera diarreas de tipo mucosas, con
presencia de leucocitos fecales. La primera diarrea se
produce cuando la bacteria pasa al intestino delgado,
es durante esta diarrea cuando se puede pesquisar la
bacteria, cuando vuelve al intestino delgado se
genera la segunda diarrea, sin embargo es un cuadro
muy raro. La bacteria se puede aislar en hemocultivo
despus de la primera diarrea para saber cul es la
parte del desarrollo. Despus en la tercera semana
hasta la octava semana, existe una alta incidencia de
la bacteria en las deposiciones y en ella se puede
pesquisar la bacteria sin ningn problema.

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Los portadores tienen ttulos de anticuerpos ms altos por la constante presencia de la bacteria, as
la titulacin es un eficiente mtodo para estimar la condicin de portacin.

La gastroenteritis es la ms comn, los sntomas se presentan a las 6 o 48 horas luego de la ingesta
del alimento contaminado, o en algunos casos muy rpidamente, entre los sntomas se encuentran:
diarrea, vmito, diarrea con sangre, fiebre, calambres abdominales y musculares, debido a la prdida
de electrolitos y deshidratacin se produce el dolor de cabeza, los sntomas son persistentes por 3
das a 1 semana y son autolimitados. La mortalidad de esta enfermedad es inferior a 1%.

La fiebre entrica o fiebre tifoidea, producida Salmonella Paratyphi es ms suave que la producida
por Salmonella Typhi, los sntomas se presentan luego de 10 14 das de incubacin, generalmente
con fiebre, dolor de cabeza, dolor muscular, apetito disminuido, sntomas gastrointestinales,
hepatoesplenomegalia, y lo ms importante y repetitivo es la aparicin de Rosolas, pequeas
aureolas rojas en la piel. Entre un 1 y 5% de los pacientes son portadores al cabo de un ao. Las
complicaciones de la fiebre entrica son: hemorragias y perforaciones intestinales que pueden
producir el desangramiento del paciente. Los portadores convalecientes de Salmonella Typhi, van de
un 10 a 50% en 1 3 meses y mientras que los de otras especies van de 5 40% de 1 3 meses. La
portacin crnica de Salmonella Typhi es de un 3%. Las complicaciones cardiovasculares pueden ser
endocarditis, pericarditis, perforacin valvular, arteritis; en el SNC provocan: meningitis, ventriculitis y
abscesos; a nivel pulmonar provocan neumona; tambin causan complicaciones a nivel
osteoarticular, hepatobiliar, esplnico, urinario, genital y en partes blandas. La septicemia se presenta
ms frecuentemente en pacientes peditricos y gstricos, esto se produce por la presencia de la
bacteria en el torrente sanguneo, existe un 10% de pacientes que pueden derivar a una osteomielitis,
endocarditis y artritis como consecuencia de esta infeccin.

El diagnstico de Salmonella spp en gastritis se realiza mediante un examen microscpico de heces,
siendo de gran importancia la observacin de leucocitos fecales y coprocultivo. En el caso de Fiebre
entrica y septicemia: el diagnstico se realiza por hemocultivo, coprocultivo y deteccin de
anticuerpos. En Agar SS las colonias de Salmonella se ven con un precipitado de color negro por la
produccin de H2S, en Agar Mac Conkey se observan lactosa negativa.

El tratamiento de gastroenteritis solo incluye la rehidratacin, el tratamiento de fiebre tifoidea y
septicemia se realiza con antimicrobianos, segn el resultado del antibiograma, pero por lo general se
usa ciprofloxacino y cotrimoxasol, pudiendo utilizarse tambin cloranfenicol.

La profilaxis incluye vigilancia sanitaria, tratamiento de aguas y residuos, educacin de la poblacin,
buena disposicin de las deposiciones, vigilancia y control de los portadores, vacunacin a personas
expuestas que viajen a zonas endmicas

Gnero Shigella

Modo de transmisin: orofecal, vectores.

Mecanismo de accin: invasin de la mucosa intestinal y elaboracin de toxina secretognica
solo en el caso de S. dysenteriae.
Resistencia: resiste pH cido.
Factores de riesgo: hacinamiento
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Es un bacilo Gram-, lactosa negativo, fermentador de glucosa sin produccin de gas, inmvil y no
descarboxila la lisina. Son parecidos bioqumica y antignicamente con E. coli.

1. Toxina Shiga: es una enterotoxina, citotxica y neurotxica, solamente est en S. dysenteriae,
es termolbil y afecta al intestino y al SNC, inhibe la absorcin de azcares y aminocidos en el
ser humano, tambin puede actuar como enterotoxina responsable de diarrea (similitud con
verotoxina de E. coli).
2. Endotoxina: Causa irritacin de la pared intestinal lo que puede llevar a producir lceras por
autolisis celular, provocando fiebre.

Esta bacteria es el agente causal de gastroenteritis ms frecuente, tambin llamada Shigellosis, y de
disentera bacilar, producida por S. dysenteriae; causa diarrea exudativa, mucosa y hemorrgica
(greras). La Shigellosis es una infeccin bacteriana que afecta el intestino, comnmente en verano y
otoo (estacional), que puede ocurrir en casos aislados, la aparicin de los sntomas es muy rpido y
son mucho ms severos que los de Salmonella.

Solo afecta al ser humano, y ms comnmente a nios, la dosis infectiva es de 200
microorganismos, ya que son resistentes a la acidez estomacal. El hacinamiento es un factor de riesgo
y est asociada a vectores como moscas y cucarachas.

Invade las clulas M de las placas de Peyer del colon, por agentes de invasin codificados por
plsmidos, tienen la capacidad de ondular la actina de la clula y polimeralizarla, un mecanismo que
comparte con Listeria monocytogenes, as invaden las clulas adyacentes y luego producen apoptosis,
formando lceras y microabsesos, de modo que se pueden ver piocitos (leucocitos) en las heces, el
sndrome mesentrico se presenta con diarrea con mucus, sangre y pus.

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La diferenciacin de especies se realiza por serotipificacin basada en tcnicas de aglutinacin con

antisueros especficos, en los cuales se utiliza el serogrupo A, B, C y D, determinado por el Ag
somtico O:
Grupo A: Shigella dysenteriae
Grupo B: Shigella flexneri
Grupo C: Shigella boydii.
Grupo D: Shigella sonnei: fermentadores muy lentos de lactosa

Las especies ms frecuentes son S. flexneri y S. sonnei, y la ms virulenta es S. dysenteriae, de ella el
serotipo O1 es epidmico y produce la toxina Shiga, el serotipo O2 no es epidmico.

El diagnstico se realiza en coprocultivo, el medio de transporte para la muestra es Cary Blair que le
da soporte a la bacteria, se siembra en Agar MC, XLD, SS y caldo selenito antes de 6 horas luego de
haber tomado la muestra; tras 24 horas de incubacin se observan colonias lactosa negativo, a ellas
se le realizan las pruebas de TSI, LIA donde se debe encontrar fermentacin de glucosa sin produccin
de gas; posteriormente se siembra en agar nutritivo, pues para realizar serologa no se pueden utilizar
colonias aisladas en agar Mac Conkey o SS, la prueba se realiza con suero formolado, y por ltimo se
realiza un antibiograma. Shigella en agar SS se observa sin punto negro central.

El tratamiento se realiza con ampicilina, quinolonas y cefalosporinas de 3 generacin, hay
resistencia cotrimoxasol, no se dan antiespasmdicos ni antidiarreicos, ya que esto impide la
eliminacin del microorganismo. En genera es un cuadro autolimitado y el uso de antibiticos se
reserva para manipuladores de alimentos, nios en guarderas o individuos institutivos. La prevencin
involucra saneamiento ambiental, coccin de alimentos, control de insectos, etc.

Gnero Yersinia

Reservorio: roedores, cerdos, aves, perros, monos (zoonosis).
Mecanismo de transmisin: contacto persona-persona, persona-animal o a travs de fuentes
ambientales como alimento y agua contaminados con heces.
Periodo de incubacin: 24 48 horas.

Son bacilos o cocobacilos Gram- de tincin bipolar, Inmviles a 37 C y mviles a 22 C, se observan
como colonias pequeas lactosa negativo en agar Mac Conkey, su crecimiento es ms rpido en Agar
Sangre, siendo capaz de crecer a 4 C. Actualmente el gnero incluye 13 especies, de las cuales solo
tres son de importancia clnica: Y. pestis, Y. enterocolitica y Y. pseudotuberculosis. Y. pestis es el
agente etiolgico de peste bubnica o peste negra, enfermedad que mat a la cuarta parte de Europa
en el siglo XV; Y. pseudotuberculosis puede producir enterocolitis y mesenteritis en el hombre, sin
embargo su aislamiento es bajo; Y. enterocolitica produce enterocolitis (diarrea invasora),
especialmente en nios menores de 5 aos, es capaz, tambin de producir septicemia en pacientes
con trastornos del metabolismo del hierro y con desrdenes de base, en Chile su aislamiento es
inferior al 1%. Estas bacterias pueden causar adems linfoadenitis mesentrica, fiebre intestinal,
sndrome poliartrtico (artritis reactiva o sndrome de Reiter) e ileitis terminal. La sintomatologa
incluye gastroenteritis, dolor abdominal, diarrea, fiebre, vmito; en nios y adultos los sntomas
suelen cursar con pseudoapendicitis ya que se confunde con el dolor abdominal. El inicio de la
enfermedad ocurre dentro de 24 - 48 hrs. despus de la ingestin de la bacteria y persiste por 2 6
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132
semanas. Ocasionalmente puede ocurrir gastroenteritis por Y. enterocolitica seguida por artritis de
articulaciones perifricas.

Y. enterocolitica fermenta lentamente la lactosa, de modo que aparece como lactosa negativa o de
color muy plido en agar Mac Conkey, crece ms lentamente que el resto de las enterobacterias a 37
C, su ptimo desarrollo se produce a 25 C.

El tratamiento se realiza utilizando ampicilina, tetraciclina o cloranfenicol; ya que son resistentes a
penicilina y cefalosporinas por el desarrollo de betalactamasas.

La prevencin consiste en la buena manipulacin de alimentos especialmente de carnes, la
adecuada coccin de productos alimenticios y la refrigeracin de ellos ya que este retarda el
crecimiento.

Invaden las clulas M de las placas de Peyer, gracias a la presencia de una protena invasora en la
membrana exterior que se fija a las integrinas, debido a la invasin se observaran leucocitos fecales
en las deposiciones, es capaz de multiplicarse en los ganglios mesentricos, y formar microabscesos,
adems tiene capacidad de diseminacin sea. Alcanza la circulacin donde es captada por los
macrfagos, sobreviviendo en su interior, pues inhibe la fagocitosis y la produccin de TNF, adems
de formar poros en la membrana del macrfago, para despus ser liberada por apoptosis de este
ltimo en sitios distantes de la colonizacin inicial. Poseen Siderforos, un elemento de virulencia,
que capta el hierro del hospedador.

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133
Grupo KES (Klebsiella, Enterobacter y Serratia)

Los integrantes de este grupo usualmente estn presentes en el tracto intestinal, pero son capaces
ce producir una amplia variedad de infecciones, como neumona primaria, heridas e ITU.

Todas ellas son citrato positivo, H2S y fenilalanina deaminasa negativo, se caracterizan
principalmente por ser RM negativo y VP positivo, es decir que fermentan la glucosa a travs de la va
butanodilica y producen acetona. Algunas especies son no mviles y ureasa positiva dbil
(Klebsiella, al incubar ms de 24 hrs).

Gnero Klebsiella

-
-
-
-
-
Hbitat: tracto gastrointestinal del ser humano y animales, plantas, agua y alimentos.
Klebsiella pneumoniae y Klebsiella oxytoca: provocan infecciones urinarias, neumona, otitis y

otras enfermedades nosocomiales.
Klebsiella pneumoniae subesp. pneumoniae: Es la ms aislada, se puede encontrar en el
tracto respiratorio como agente de neumona, especialmente en alcohlicos y pacientes
hospitalizados. Tambin produce infecciones urinarias, otitis y diversos procesos infecciosos.
Klebsiella pneumoniae subesp. rhinoescleromatis: produce el rinoescleroma, un tumor que
destruye la mucosa nasal, bucal, farngea y larngea.
Klebsiella pneumoniae subesp. ozaenae: es agente etiolgico del ocena que es una atrofia
nasal.
Klebsiella granulomatis: granuloma inguinal (donovanosis), afecta genitales y rea inguinal,
provocando grandes ulceraciones en el pene. No crece en medios de cultivo tradicionales, se
asla en cultivos de monocitos, ya que es intracelular de PMN, histiocitos y clulas
plasmticas. Se tie en frotis directo con Giemsa (diagnstico directo).

Son bacilos cortos agrupados frecuentemente como diplobacilos. Poseen Ag O y Ag capsular K, la
presencia de cpsula otorga apariencia mucosa a las colonias, las cuales poseen filancia; esta cpsula
cumple funciones antifagocticas y de proteccin contra la actividad bactericida del suero. Adems
poseen Bacteriocinas (Klebcinas) y fimbrias tipo I (manosa sensible, adherencia a epitelio respiratorio,
urinario e intestinal) y tipo III (manosa resistente, facilita la adherencia a clulas endoteliales del
tracto respiratorio y urinario) donde sta ltima es la responsable de pielonefritis. Captura el hierro a
travs de siderforos, principalmente para la produccin de factores de virulencia.

Comnmente esta bacteria es citrato y urea positivo, ornitina y motilidad negativo, Klebsiella
oxytoca se caracteriza por crecer como una raz de rbol; adems descarboxila la lisina y fermenta
lactosa y glucosa con produccin de gas, en el caso de Klebsiella pneumoniae es indol negativo lo que
es muy importante para su identificacin.

Causa neumona principalmente en personas inmunocomprometidas, donde causa dao
permanente; adems es un importante agente de infecciones nosocomiales tales como septicemia y
meningitis, especialmente en servicios de neonatologa. Se asla menos frecuentemente en heridas y
constituye uno de los principales reservorios de BLEE.
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Gnero Enterobacter

Especies de importancia para el ser humano:
- Enterobacter cloacae
- Enterobacter aerogenes
- Enterobacter gergoviae
- Enterobacter sakazakii (La menos frecuente).

Hbitat: Ubicua, suelo, agua y tracto intestinal del ser humano y animales.
Resistencia: ampicilina y cefalosporinas

Son bacilos ms largos que Klebsiella, lactosa positiva tarda (post 24 horas), citrato y motilidad
positivas; son capaces de descarboxilar la ornitina y sus colonias tienen aspecto mucoide pero no
presentan cpsula, sino que la mucosidad se debe a un producto extracelular.

Es responsable de la mayor parte de las infecciones intrahospitalarias. Suele colonizar pacientes
hospitalizados, en particular a los que reciben tratamiento con antibiticos, diabticos, enfermos con
cncer, neutropnicos, cateterizados y enfermos con quemaduras o heridas, pudiendo producir
infecciones de las vas respiratorias y urinarias.

Poseen pili o fimbrias que permiten la adherencia a clulas del husped.

Gnero Serratia

Existen 7 especies, pero slo Serratia marcescens tiene importancia clnica, sta se asocia
frecuentemente a infecciones nosocomiales del tracto respiratorio o urinario y es muy resistente a
antibiticos. Son capaces de fermentar la lactosa lentamente. Producen un pigmento rosado
caracterstico, especialmente cuando los cultivos son dejados a temperatura ambiente, Serratia
rubidaea produce un pigmento rojo (prodigiosita y pirimina) a temperatura ambiente y luz, el mismo
pigmento est presente en el 10% de las cepas de Serratia marcescens. Sus factores de patogenicidad
son Elastasa, Lecitinasa y Caseinasa.

El modo de infeccin intrahospitalaria ms importante es por las manos del personal de salud, estas
infecciones usualmente ocurren en pacientes inmunocomprometidos, causando neumona en
pacientes ventilados, ITU en pacientes cateterizados; infeccin de heridas post operatorias, infeccin
del sistema circulatorio sanguneo en pacientes con dispositivos de acceso intravenoso; adems est
implicado en brotes en unidad de quemados.

Las fuentes responsables de brotes intrahospitalarios son: Leche de botellas usadas, Equipos de
ventilacin, Bombas succionadoras de leche materna, Aditivos de alimentacin enteral, Emolientes de
limpieza de piel, Jabn antisptico, Tubera de succin y Desinfectantes.

Se presenta con Bacteriemia o septicemia en pacientes con enfermedad de base; como meningitis,
neumona, ITU, Infeccin de tejidos blandos y Conjuntivitis; con una tasa de mortalidad general de
14%.
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Para evitar los contagios se recomienda no mover los equipos entre salas y desinfectarlos con
hipoclorito de sodio 500 ppm; adems se sugiere limitar el acceso a personal solamente esencial.

El tratamiento se realiza con cefalosporinas de 3 generacin, aminoglicsidos y quinolonas.

Gneros: Proteus, Morganella y Providencia

Forman parte de la microbiota intestinal, comportndose como patgenos oportunistas. Son lactosa
negativo y deaminan la fenilalanina y la lisina, esta ltima es la caracterstica ms importante para su
identificacin. La mayora es ureasa positiva y Proteus lo es fuertemente. Todos ellos son Indol+ a
excepcin de Proteus mirabilis. La Ureasa que poseen produce amonio que puede daar las clulas
epiteliales del tracto urinario.

Proteus y Morganella provocan infeccin del tracto urinario, as como tambin neumona,
septicemia e infeccin de heridas de piel y tejidos blandos.

Gnero Proteus

Hbitat: tracto intestinal de humanos y animales.

Las especies pertenecientes a este gnero son: Proteus mirabilis y Proteus vulgaris, y ambas son
patgenas, se aslan de orina, heridas, infecciones ticas y bacteriemias. Se caracterizan por producir
swarming (invasin) en medios no selectivos que contengan NaCl y es distintivo su olor a chocolate
quemado; adems producen H2S en forma muy abundante y poseen flagelacin pertrica.

Poseen como factores de patogenicidad pili o fimbrias, Ureasa, Flagelos, Protenas de membrana,
LPS con poder endotxico y hemolisina.

Afecta principalmente a diabticos, obesos, cateterizados, pacientes con sondas uretrales y
quimioterapia. El tratamiento se realiza con cefalosporinas (1 y 2), quinolonas: Ciprofloxacino y
Norfloxacino. En general tienen resistencia a aminoglicsidos.
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Gnero Moraxella

Moraxella morganii es la nica especie. Afecta principalmente a pacientes que han sido expuestos
previamente a ampicilina o betalactmicos; a pacientes de edad avanzada y que padezcan Diabetes
mellitas, que hayan sido sometidos a procedimientos quirrgicos, con exposicin perinatal y abscesos
o infecciones de tejidos blandos luego de una mordedura de serpiente.

Gnero Providencia

Este gnero se diferencia porque no es productora de H2S, existen tres especies de importancia
clnica:
- Providencia rettgeri: patgeno del tracto urinario y ha causado brotes nosocomiales.
- Providencia alcalifaciens
- Providencia stuartii: puede causar brotes en unidades de quemados y se asla de orina.

Gnero Citrobacter

Hbitat: tracto intestinal y heces del ser humano y animales.
Simbiosis: patgenos oportunistas.

A este gnero pertenecen las especies Citrobacter diversus, Citrobacter stuartii y Citrobacter
freundii, esta ltima es la ms importante y ms frecuentemente aislada. Causan infecciones del
tracto urinario y respiratorio y ocasionalmente infeccin de heridas, otitis, osteomielitis, abscesos
cerebrales, endocarditis y meningitis. Citrobacter freundii ha sido asociado con infecciones
nosocomiales: ITU, neumonas y abscesos intrabdominales. Pueden fermentar o no lactosa, son
citrato y motilidad positivo y lisina descarboxilasa negativa. Tiene similitud con Salmonella spp en
agar MC.

Gnero Pantoea

Hbitat: superficie de plantas, semillas, frutas (ejemplo: mandarinas) y heces humanas y
animales.

Pantoea agglomerans es la nica especie de importancia medica (antes denominada Enterobacter
agglomerans). Es responsable de la mayor parte de las infecciones intrahospitalarias junto con
Enterobacter spp. Se ha descrito en casos de meningitis neonatal y de artritis sptica, tambin
infecciones relacionadas con la infusin intravenosa. Puede crecer en medios ricos en glucosa.

Gnero Plesiomonas

Hbitat: Suelo y ambientes acuticos; en peces y aguas dulces y de estuarios; animales de
sangre caliente y fra son portadores.

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La nica especie de ste gnero es Plesiomonas shigelloides, que tiene relacin taxonmica con el
gnero Proteus y serolgica con Shigella sonnei.

Esta bacteria presenta flagelacin loftrica (2 5), es Oxidasa y catalasa+, cabe destacar que es la
nica enterobacteria oxidasa positiva. Crece hasta 5% de NaCl a pH que oscila entre 4 y 9, y entre 8 y
45 C (ptima 37 C), no produce hemlisis en agar sangre, en Mac Conkey produce colonias Lactosa
positivas; se diferencia de Aeromonas por la presencia de DNAsa y su sensibilidad al Vibriosttico
O129, razn por la cual tambin tiene relacin con el gnero Vibrio.

La exposicin ocupacional es la fuente de algunas infecciones (manipuladores de peces,
veterinarios), sin embargo todas las personas pueden ser susceptibles a la infeccin, los recin
nacidos, nios y enfermos crnicos son los ms propensos a experimentar una prolongada
enfermedad. Se sospecha que el microorganismo es toxico e invasor.

Es la causa primaria de gastroenteritis autolimitada que comienza 48 horas despus de la infeccin,
producto del consumo de ostras, es una enfermedad leve auto-limitante que produce fiebre,
calofros, dolor abdominal, nauseas, vmitos o diarrea acuosa no mucosa y libre de sangre. En
personas sanas la enfermedad puede durar entre 1 y 7 das. Adems puede provocar infecciones
extraintestinales en personas inmunocomprometidas despus de la exposicin animal. Es agente
causal de septicemia y meningitis.

No se realiza tratamiento ya que es una enfermedad autolimitada, pero el microorganismo es
sensible a gentamicina, CAF, cefalotina, SXT, imipenem, quinolonas y resistencia a ampicilina,
eritromicina, piperacilina.

Reacciones serolgicas en Enterobacterias

La tipificacin o identificacin serolgica se realiza mediante tcnicas de aglutinacin en lmina, si la
reaccin es negativa puede ser porque la bacteria no corresponde al gnero que uno sospecha, posee
un Ag de envoltura o bien escapa a los serogrupos cubiertos por el antisuero en uso.

- Ag O (Ohne: sin movimiento), somticos, termoestables. Determinan el serogrupo.
- Ag K, capsulares o Vi de envoltura. Enmascaran los Ag O. Pueden ser termoestables o termolbil.
- Ag H flagelar (Hauch: halo por el movimiento en un medio de cultivo), son proteicos,
termolbiles y determinan la especie de la bacteria.

Identificacin de Salmonella
Posee Ag O, Vi y H. Segn el esquema de Kauffman y Whit, Salmonella se rene en:
o Grupos serolgicos en base al Ag O designados con nmeros.
o Especies determinadas por el Ag, la aglutinacin puede presentarse en dos formas
Fase 1: especfica que determina la especie (letra minscula).
Fase 2: inespecfica o de grupo (se designa con nmero).

Interpretacin de los resultados: Los ttulos altos frente al Ag O significa que la infeccin se
encuentra en la fase aguda, mientras que los ttulos altos frente al Ag H indica fase de convalecencia.

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Nomenclatura del gnero Salmonella
Especie
Subespecie
Serotipo
Enterica
Enterica (I)
Paratyphi A
Typhimurium
Parathyphi B
Bredeney
Choleraesuis
Montevideo
Oranienburg
Paratyphi C
Newport
Typhi
Enteritidis
Gallinarum
Pullorum
Dublin
Anatum
Butantan
Give
Salamae (II)
Daressalam
Arizonae (IIIa)

Diarizonae (IIIb)

Houtenae (IV)
Houten
Indica (VI)
Ferlac
Bongori
Bongori
Bongor
Serogrupo
A
B
C1
C2
D
Identificacin de Shigella
La identificacin se realiza por serologa mediante tcnicas de aglutinacin, ya que las pruebas
bioqumicas solo establecen gnero, sta emplea antisueros que establecen establece 4 serogrupos,
que indican la especie.
- A: Shigella dysenteriae.
- B: Shigella flexneri.
- C: Shigella boydii.
- D: Shigella sonnei.

Identificacin de Escherichia coli

La identificacin por aglutinacin permite determinar ECEP, ECEI y ECEH, para ello se utilizan sueros
polivalentes que se leen luego de 1 minuto en placa de Huddlesson o portaobjeto.

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Orden Campylobacteriales

Familia Campylobacteriaceae

Esta familia est compuesta por 4 gneros, dos de los cuales, Arcobacter y Campylobacter, incluyen
especies patgenas para el ser humano. Son bacilos Gram- curvos, oxidasa+, no esporulados y
microaerfilos (5% oxgeno, 2-10% CO2). Su metabolismo es no fermentativo y no utilizan hidratos de
carbono, obteniendo su energa de los aminocidos y de intermediarios del ciclo de los cidos
tricarboxlicos que no sean carbohidratos. Ambos gneros se diferencian fundamentalmente en que
Campylobacter no puede crecer a 15 C, es mvil por flagelacin polar o anftrica y en cultivos viejos
degeneran a formas cocoides o esfricas que pierden su viabilidad, mientras que Arcobacter posee un
solo flagelo, crece bien a bajas temperaturas (17 C) pero mal a 37 C y 42 C.

Gnero Campylobacter

C. fetus sub especie fetus
C. jejuni
C. coli
C. lari
C. upsalensis
Bacteriemia en pacientes inmunosuprimidos

Enteritis y meningitis
Diarrea
Diarrea
Diarrea
Zoonosis
Termotolerantes
42 C

Distribucin: ubiquitarias.
Reservorio: principalmente animales domsticos y salvajes, se asla tambin del agua,
alimentos de origen animal, como carne y leche, medio ambiente y ser humano.
Transmisin: ingestin de alimentos o agua contaminada, por contacto con animales
(zoonosis) y portadores; se ha sugerido la transmisin persona-persona.
Grupo de riesgo: todos los grupos etarios, nios y adultos jvenes son los grupos ms
expuestos.

Actualmente se reconocen 19 especies dentro del gnero. Los patgenos ms importantes son C.
coli y C. jejuni, ya que tienen comportamiento zoontico.

C. jejuni es una bacteria zoontica de distribucin mundial, considerada como el primer agente de
diarrea en el ser humano en los pases desarrollados y el segundo o tercero en los pases en vas de
desarrollo. Esta es la especie del gnero aislada con mayor frecuencia, tanto de animales como del
propio ser humano. Comprende dos subespecies, C. jejuni subespecie jejuni y C. jejuni subespecie
doylei, las que pueden diferenciarse de acuerdo a su capacidad de reducir el nitrato, donde la
subespecie doylei no lo reduce. Ambas pueden colonizar superficies mucosas, generalmente del
tracto intestinal, en la mayora de las especies de mamferos y aves. La subespecie doylei ha sido
aislada del epitelio de la regin del antro gstrico en pacientes con lcera gstrica o gastritis crnica
activa y de nios con diarrea aguda. La subespecie jejuni se asla ms fcil y frecuentemente que la
subespecie doylei, es una bacteria zoontica de distribucin normal considerada como el primer
agente de diarrea en el ser humano en los pases desarrollados y el segundo o tercero en los pases en
vas de desarrollo.

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140
C. coli es muy semejante a C. jejuni subesp. jejuni, ambas especies se diferencian bioqumicamente
por la hidrlisis del hipurato que es positiva para esta ltima especie y negativa para C. coli. No
existen grandes diferencias entre ambas especies en relacin a su patogenicidad, composicin
antignica, bacteriologa y caractersticas epidemiolgicas relacionadas con los mecanismos de
transmisin y distribucin en animales y en el medio ambiente, salvo que C. coli reconoce como
reservorio natural al cerdo. En los pases desarrollados, C. coli es responsable de ms o menos el 3%
de los casos de diarrea producidos por las especies termotolerantes de gnero. En los pases en vas
de desarrollo esta frecuencia puede llegar hasta el 25%.

C. lari es reconocido como agente de diarrea y septicemia en el hombre. Aun cuando su frecuencia
de aislamiento es menor que la de C. coli, esta bacteria ha sido responsable de importantes brotes de
diarrea producidos por la ingestin de agua contaminada. El reservorio ms preponderante de esta
especie son las aves marinas, particularmente las gaviotas. Tambin se puede aislar de otros animales
como perros y terneros.

C. upsaliensis esta especie presenta como principales caractersticas fenotpicas su capacidad de
crecer a 37 y 42 C y una dbil o nula produccin de catalasa. Ha sido aislada de la materia fecal de
gatos. En el ser humano ha sido encontrada produciendo diarrea y bacteriemia en nios y adultos
inmunocompetentes e inmunodeprimidos.

Existen otras especies de Campylobacter que han sido aisladas desde el ser humano en cuadros
diarreicos, septicemia y otros. C. fetus subesp. fetus, C. hyointestinalis, C. concisus y C. mucosalis.

Corresponden tpicamente a bacterias Gram- con formas de S itlica o en espiral, cuyo tamao
oscila entre 0,2 0,8 um de ancho y 0,5 5 um de largo, su movimiento asemeja el de un sacacorchos
producto de su flagelacin polar o anftrica. Algunas especies, particularmente C. jejuni, C. coli, C. lari
y C. upsaliensis, son termotolerantes y crecen ptimamente a 42 C.

Requieren ser cultivadas en microaerofilia durante 42 48 horas de incubacin, considerando que
el oxgeno, a la concentracin de la atmsfera normal le es txico; es una bacteria de crecimiento
relativamente lento siendo su tiempo generacional de 1,5 horas, su aislamiento es difcil de realizar ya
que tiende a difundir en torno a la estra de inoculacin, producindose, a veces, una zona de
confluencia del cultivo; en medios deshidratados son menos invasores; las colonias son planas o
discretamente convexas, brillantes y efusas con coloracin griscea o levemente rosada y no
hemolticas. Muchas cepas presentan una franca diseminacin por la superficie del medio formando
un velo, especialmente cuando el medio de cultivo es fresco y posee bastante humedad, a medida
que esta se va perdiendo, las colonias crecen cada vez ms separadas y convexas. En cultivos de 24
horas las colonias son transparentes, semejando gotas de agua, a medida que aumenta el tiempo de
incubacin, aumenta tambin la consistencia de las colonias las cuales van adquiriendo una
coloracin parduzca.

Para el aislamiento se pueden emplear medios selectivos constituidos por una base de nutrientes y
una mezcla de antibiticos para suprimir la microbiota acompaante de deposiciones, agua o
alimentos contaminados; dentro de estos medios se encuentran: Butzler, Campy-bap (Blaser), Skirrow
y Skirrow modificado, este ltimo contiene adems metasulfito de sodio que capta el oxgeno y no lo
deja disponible para la bacteria, el piruvato de sodio se utiliza para el rescate de la bacteria, ya que
disminuye el estrs.

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MEDIO DE SKIRROW (para 1000 mL)

Agar Brucella 43 gr

MEDIO SKIRROW MODIFICADO (para 1000 mL)

Agar Brucella 43 gr
Mezcla antibitica:
Vancomicina 10 mg
Polimixina B 2500 U.I.
Trimetoprim 5 mg

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Mezcla antibitica:
Vancomicina 10 mg
Polimixina B 2500 U.I
Trimetoprim 5 mg
Cefalotina 10 mg

Suplemento FBP
Sulfato ferroso 0,5 gr
Metasulfito de Na 0,5 gr
Piruvato de Na 0,5 gr
Sangre 50 mL

MEDIO DE BUTZLER

Caldo tioglicolato 30 gr
Agar agar 12 gr

Mezcla antibitica:
Bacitracina 25000 U.I.
Novobiocina 5 mg
Cicloheximina 50 mg
Colistin 10000 U.I.
Cefazolina 15 mg
Sangre 150 mg

MEDIO CAMPY-BAP (BLASER)

Agar Brucella 43 gr

Mezcla antibitica:
Vancomicina 10 mg
Polimixina B 2500 U.I.
Anfotericina 2 mg
Trimetroprim 5 mg
Cefalotina 15 mg
Sangre 50 mL

Otra mezcla antibitica:
Vancomicina 10 mg
Cefoperazona 32 mg

El empleo de medios de enriquecimiento se recomienda cuando se sospecha que en la muestra a
ser estudiada puede haber un bajo nmero de clulas viables de Campylobacter (portadores,
pacientes tratados, muestras sometidas a desecacin, etc.)

La identificacin se basa en sus caractersticas morfolgicas y sus propiedades bioqumicas y de
crecimiento. Con esta misma finalidad se ha introducido una prueba de aglutinacin en lmina que
utiliza partculas de ltex sensibilizadas con anticuerpos contra los tipos serolgicos ms frecuentes.
La utilizacin de sondas genticas y PCR estn siendo utilizadas tambin para la identificacin.

Sus factores de virulencia son:
- LPS: actividad endotxica.
- LPS + flagelo: adhesinas que permiten unin a la clula epitelial y mucus.
- Toxina extracelular citoptica o CDT (Cytolethal Distending Toxin): responsable de la
invasin celular que provoca diarrea mucosa o exudativa.
- Enterotoxina: toxina similar a la LT de ECET, es la responsable de la diarrea acuosa por
aumento del AMPc intracelular.
- Lipooligosacrido (LOS): similar a los ganglisidos de las neuronas, mimetismo molecular,
(se producen Ac contra Ag presentes en la bacteria que se comparten con algunos Ag
presentes en estructuras del hospedador), produciendo el Sndrome de Guillian-Barr.
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-
-
Cpsula: resistencia a la actividad antibacteriana del suero y a la fagocitosis; adherencia e

invasin a las clulas epiteliales.
Transformacin natural: la bacteria puede tomar DNA de su ambiente, preferentemente
de otras cepas de C. jejuni.

Son sensibles al pH cido del estmago, de modo que la dosis infectiva es alta (10 4 organismos),
tiene la capacidad de multiplicarse en el intestino delgado, invadiendo el epitelio, produciendo
inflamacin y diarrea con sangre.

La campilobacteriosis es una enteritis causada por especies termotolerantes, su duracin es de 1
semana, cursa con diarrea, estreimiento, dolor abdominal y fiebre. C. jejuni causa bacteriemia en
una frecuencia inferior a 1%. Requiere incubacin de 2 a 5 das, y su duracin es de 7 a 10 das; las
bacterias se pueden aislar en deposiciones durante 3 semanas. A largo plazo tiene consecuencias
como: artritis reactiva, SHU y Sndrome de Guillan-Barr; puede causar la muerte con una frecuencia
de 1 por cada 1000 casos. La diarrea es autolimitada y por tanto no se requiere tratamiento con
antibiticos; en el caso del Sndrome de Guillian Barr se utilizan tetraciclinas, cloranfenicol,
eritromicina y ampicilina.

El diagnstico se realiza en una muestra de deposiciones teidas con Gram, y en base a los cultivos
en Agar Skirrow, Skirrow modificado o Butzler; la identificacin se alcanza mediante pruebas
bioqumicas, aglutinacin en ltex o PCR.

Esta infeccin se puede prevenir evitando el consumo de carnes mal cocidas, consumiendo solo
leche o productos lcteos pasteurizados, manteniendo las medidas de higiene como el correcto
lavado de manos y evitando la contaminacin cruzada en la cocina.

Gnero Arcobacter

En la actualidad este gnero est compuesto de 4 gneros: Arcobacter nitrofigilis, Arcobacter
butzleri, Arcobacter cryaerophilus y Arcobacter skirrowii, de las cuales, solo A. butzleri tiene
importancia para el ser humano.

Est formado por bacilos Gram- curvos, helicoidales o en forma de S, no eporulados, que miden de
0,2 a 0,6 um de dimetro por 1 a 3 um de longitud. Son mviles por flagelacin montrica o anftrica y
crecen entre 5 y 37 C, siendo 30 C su temperatura ptima de crecimiento. Algunas cepas pueden
crecer tambin a 42 C. El aislamiento primario de estas bacterias puede realizarse en microaerofilia
pero, en los subcultivos posteriores, puede crecer en aerobiosis.

Arcobacter butzleri
Esta especie ha sido aislada de deposiciones diarreicas de animales y del humano, tambin de
hemocultivos y en contenido peritoneal de pacientes con apendicitis aguda, adems se ha
encontrado en fetos abortados de bovinos y porcinos, de deposiciones de primates y de personas con
diarrea. Crece en aerobiosis entre 15 y 36 C, siendo la nica especie de la familia que crece en agar
Mac Conkey. La transmisin al humano es mediante alimentos y agua contaminada.
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Familia Helicobacteraceae

Esta familia posee actualmente 4 gneros, de los cuales solo Helicobacter posee importancia para el
ser humano. Este lo constituyen bacilos Gram- curvos o helicoidales de 0,3 1 um de ancho y 1,5 a 5
um de longitud. No forman esporas y en cultivos viejos pueden transformarse en cuerpos esfricos o
cocoides. Son mviles por flagelacin polar o loftrica, microaerfilos, no utilizan los hidratos de
carbono en su metabolismo y su temperatura ptima de crecimiento es 37 C, no es capaz de
soportar bajas (<25 C) ni altas temperaturas (>42 C). Inicialmente, por sus semejanzas morfolgicas
las especies del gnero fueron incluidas en el gnero Campylobacter, su diferencia con ste se
encuentra en la enzima ureasa, la cual no se encuentra en Campylobacter pero si en Helicobacter.

Helicobacter pylori

Hbitat: estmago de seres humanos.
Transmisin: fecal-oral, oral-oral, vmitos y aerosoles. Posiblemente agua y alimentos
contaminados.
Factores de riesgo: Alto grado de hacinamiento, condiciones socioeconmicas bajas,
malas condiciones higinico-sanitarias.
Reservorio: humano.

Esta especie fue inicialmente observada en pacientes con gastritis, pero desde su descubrimiento se
ha asociado, no solo a esta afeccin, sino tambin con lcera pptica, linfoma y adenocarcinomas
gstrico. En los pases en vas de desarrollo se estiman cifras de contaminacin que resultan
alarmantes. La va de contaminacin ms probable es la oral y se le atribuye un papel fundamental a
las aguas de consumo contaminadas. Solamente ha sido aislada del epitelio gastroduodenal del ser
humano. No se conocen reservorios animales o ambientales para esta bacteria.

Esta bacteria invade la superficie celular del epitelio en cierto grado, y las toxinas y LPS pueden
daar las clulas mucosas al igual que el NH3 producido por la actividad de la ureasa. Los factores de
virulencia que determinan su patogenicidad son:
- Adhesinas
- Citotoxina vacuolizante (VacA): forma poros en la clula hospedadora e induce apoptosis.
- Protena activadora de neutrfilos (NAP): activa neutrfilos y clulas cebadas que daan
localmente el tejido.
- Endotoxina.
- Ureasa: facilita la sobrevivencia en el estmago elevando el pH, ya que destruye
compuestos amoniacales dando como productos finales compuestos alcalinos.
- Flagelos: permite penetrar a travs de la mucosa gstrica.
- Colagenasa/mucinasa: exponen el epitelio gstrico al cido gstrico.
- CagA: se piensa que juega un papel en el cncer gstrico

La prevalencia de la infeccin est relacionada a nivel socioeconmico y se presenta principalmente
durante la niez, persistiendo por dcadas. En adultos la prevalencia oscila entre 20 y 100%. Puede
cursar de forma aguda, provocando nauseas, vmitos y dolor abdominal; o como gastritis si se
extiende por ms de una semana, adems puede existir colonizacin asintomtica persistente por
aos.
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144
Ulcera duodenal: Ms del 90% de las personas que la padecen son portadores. Existe
una buena respuesta a la terapia antimicrobiana.
Ulcera gstrica: 50-80% de las personas que la padecen son positivas a la bacteria.
Carcinoma gstrico: La bacteria induce gastritis que es un factor de riesgo para el
desarrollo de carcinoma.
Linfoma gstrico
Enfermedades esofgicas

Para su identificacin la tincin Gram revela los tpicos bacilos Gram negativos curvo-espiralados
con cierto grado de pleomorfismo, los que tambin pueden ser pesquisados utilizando otros
colorantes como anaranjado de acridina y bromuro de etidio, o bien, empleando colorantes
argnticas (mtodo de Wathin-Starry).

El medio de cultivo utilizado para H. pylori corresponde a un agar sangre de base nutritiva rica,
pudiendo ser adicionado de diferentes drogas antimicrobianas (colistn-cido nalidxico, vancomicina-
polimixina-trimetoprim anfotericina) para conferirle poder selectivo. Tambin pueden usarse medios
comerciales elaborados especficamente para cultivar estas bacterias. La incubacin se realiza a 37 C,
en microaerofilia estricta hasta por 7 das debido al crecimiento lento de la bacteria. Las colonias son
pequeas, no mayores de 1 mm de dimetro y pueden presentar hemlisis. Son citrocromo oxidasa,
catalasa y ureasa positivas, esta ltima puede ser positiva en los primeros 15 minutos, aumentando la
positividad hasta el 90% despus de 3 horas de incubacin, as constituye una tcnica rpida de
presuncin.

El diagnstico se realiza a partir de una muestra obtenida por endoscopia y biopsia, segn la
deteccin de ureasa, el cultivo y la realizacin de serologa en busca de IgG contra antgenos de la
bacteria en las deposiciones, sta ltima tcnica no requiere cultivo previo; se puede realizar tambin
la prueba de respiracin con C14 Urea, el cual es un mtodo caro pero no invasivo, en ste se
suministra al paciente urea marcada con C14, la bacteria al descomponer una parte de la urea
transformar un porcentaje de sta en amonio y otro ser descompuesto a bicarbonato o CO2, el que
poseer el carbono marcado que pasar a la circulacin llegando a los pulmones, de donde saldr por
espiracin detectndose utilizando un espectrmetro de masa.
Susan Arias Donoso
145

El tratamiento se realiza con amoxicilina, tetraciclina, metronidazol, claritromicina, furazolidona
(susceptible a quinolonas a diferencia de Campylobacter) o nitrozoxanida; asociado con inhibidores
de la bomba de H2, como comeprazol (iansoprazol) y anticidos clsicos.

Resumen de infecciones por Campylobacter y Helicobacter

Susan Arias Donoso
146
Familia Vibrionaceae

Gnero Vibrio

Hbitat: principalmente agua, intestino delgado.
Hospedador: humano.
Resistencia: 4 7 das en la superficie de frutas y vegetales frescos. 3 4 das en
hielo. Se multiplica en agua. Sensible a acidez estomacal.
Transmisin: Consumo de alimentos y agua contaminada. Transmisin directa de
persona a persona es rara porque la dosis infecciosa es alta. Un enfermo elimina de 1
a 1000 millones de vibrios por gramo de heces.

Es un bacilo Gram negativo curvo, anaerobio facultativo que puede crecer en ausencia o presencia
de sal, fermentadores de carbohidratos, oxidasa negativos y presentan motilidad por flagelos polares.
Miden entre 0,5 y 0,8 um de ancho por 1,4 y 2,6 um de largo. El gnero Vibrio contiene ms de 50
especies y 11 de stas son patgenas para el ser humano. Todas ellas producen la enzima citocromo C
oxidasa (excepto la especie V. metschnikovii), fermentan la glucosa y algunas producen gas. El cloruro
de sodio estimula el crecimiento y algunas especies son estrictamente halfilas. Son capaces de
producir enfermedad gastrointestinal.

Las especies de Vibrio asociadas a enfermedad humana son:

Vibrio cholerae

Es el patgeno ms reconocido del gnero, es agente etiolgico del clera, una enfermedad que de
inicio brusco que cursa con diarrea y vmitos, sin fiebre y sin dolor, el perodo de incubacin es de 2 a
3 das, a diferencia de Salmonella en que puede ser de hasta 12 das, las heces se vuelven inodoras e
. En su forma grave el clera es una de las enfermedades
ms rpidamente letal, ya que en el plazo de tres horas puede conducir a muerte de una persona
previamente sana, sin embargo lo ms comn es que la enfermedad dure de 24 horas a varios das, la
Susan Arias Donoso
147
tasa de mortalidad es alta y el perodo de transmisin en adultos usualmente es de 5 das y la

portacin a nivel biliar puede extenderse por meses.

Se caracteriza por ser capaz de fermentar la sacarosa. Posee un antgeno flagelar comn H y un
antgeno somtico O que lo clasifica en serogrupos, siendo Vibrio cholerae O1 y O139 las
responsables de producir el clera clsico (cepas toxignicas), por tanto se les denomina vibriones
colricos. Existen 3 grupos principales:

- Vibrio cholerae O1: es el responsable del clera epidmico, una enfermedad infecciosa con un
cuadro clnico caracterizado por vmitos y diarrea intensa que puede llevar a la
deshidratacin grave. Contiene 3 subgrupos o serotipos: Ogawa, Inaba e Hikojima y 2
biotipos: Clsico y El Tor.

Hemolisina
VP
Polimixina B
Clsico
-
-
S
El Tor
+
+
R

- Vibrio cholerae no O1: Es fenotpicamente similar a V. cholerae O1, pero carece de
importancia clnica ya que no tiene la capacidad de producir la toxina colergena, la
enfermedad que causa es similar al clera, y est asociada al consumo de alimentos marinos
crudos, adems puede causar infeccin extraintestinal (odos, celulitis y septicemia). Acta
como un indicador ya que si es encontrado en una muestra significa que estn todas las
condiciones dadas para que Vibrio cholerae O1 o Vibrio cholerae O139 estn presentes.
- Vibrio cholerae O139: produce toxina colrica, es similar a El Tor.

El diagnstico se establece segn la observacin microscpica de deposiciones al fresco, con el fin
de observar motilidad; y el cultivo de deposiciones en agar sangre, Mac Conkey, las colonias
producidas en estos medios son muy similares a las de la familia Enterobacteriaceae, sin embargo,
debido a que algunas especies son especialmente haloflicas es necesario agregar una concentracin
final de 1% NaCl a aquellos medios que carecen de sal. Usualmente es necesario hacer un
enriquecimiento de los diferentes tipos de muestras (heces, agua, alimentos) para aumentar la
recuperacin en los medios de aislamiento, el medio de enriquecimiento ms utilizado es el agua
peptonada alcalina (pH 8,4 -8,6) que permite la eliminacin de la microbiota acompaante, ste una
vez inoculado se incuba a 36 C por 6 12 horas en aerobiosis antes de realizar los subcultivos en
medios de aislamiento primario. El medio de aislamiento primario ms recomendado para la
recuperacin de las especies de Vibrio es el agar TCBS, las que se incuban por 48 horas antes de
descartarlas, es importante analizar cuidadosamente el color de las colonias en el medio, donde
produce color amarillo ya que fermenta la sacarosa.

Frente a un aislamiento sospechoso se debe replicar en agar no selectivo para la posterior
realizacin de pruebas bioqumicas y serologa.

La prueba rpida (SMART) identifica anticuerpos monoclonales para V. cholerae O1 y O139 en
deposiciones. El diagnstico indirecto se logra por tcnicas de inmunoensayo como ELISA o por
biologa molecular mediante PCR.

El tratamiento se realiza con Doxiciclina, SXT y furazolidona. Existe vigilancia establecida por el ISP
en Chile, que obliga a sembrar en TCBS todas las muestras de deposiciones desde diciembre a marzo,
Susan Arias Donoso
148
y desde marzo a diciembre sembrar en este agar 1 de cada 10 coprocultivos de adultos y 1 de cada 5
coprocultivos de nios.


- Factores de adherencia: colonizacin inicial del intestino.
- Neuraminidasa y mucinasa: reducen el efecto protector de la mucina intestinal.
- Exotoxina proteica (colergeno): Enterotoxina: acta en el tubo digestivo, presenta dos
subunidades A y B, por causa de ella el paciente puede perder hasta 1 litro de agua por hora.

La subunidad B se une al
receptor celular (GM1), la
toxina ingresa a la clula y
activa la adenilciclasa que
genera AMPc produciendo
la
extravasacin
de
electrolitos, de esta forma
el lumen intestinal se vuelve
hipertnico y el agua tiende
a salir para equilibrar la
presin osmtica.

Han existido 7 grandes pandemias de clera desde 1817, la ltima fue causada por Vibrio cholerae
biotipo O1 El Tor, durante 1961 en Asia, extendindose posteriormente a frica, Europa y Oceana
entre 1970 y 1980, y afectando a Per en el ao 1981, para expandirse, despus, a todos los pases de
Amrica.

Vibrio parahaemolyticus

Transmisin: consumo de pescado y mariscos crudos o inadecuadamente cocidos

Se encuentra en el agua de mar y estuarios como su hbitat natural, lo que no implica que exista
riego permanente de infeccin. Se lo ha relacionado con enfermedad debido al consumo de agua y
productos del mar, mariscos o pescados consumidos crudos. A 10 C se retira de la columna de agua
(mar), pero se mantiene en el sedimento desde donde reemerge cuando las condiciones son
favorables.

Es una bacteria anaerobia facultativa, halfila, tolerando 1 a 8% de NaCl, caracterstica que lo
diferencia de V. cholerae. Tiene la capacidad de fermentar glucosa sin formacin de gas. No fermenta
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149
sacarosa, y por tanto produce colonias de color verde en agar TCBS, lactosa ni xilosa. Habita aguas
saladas, principalmente de estuarios y costas; aumenta en estaciones clidas. La dosis infectante es
de 106 vibrios. Existen distintos serotipos donde O3:K6 se considera enteropatgeno emergente
(CDC); los serotipos O3:K6, O4:K68, O1:K25, O1:K41 derivan de un solo clon.

La enfermedad que produce, tras un periodo de incubacin de 12 a 24 horas, corresponde a una
gastroenteritis autolimitada que cursa con diarrea acuosa, en ocasiones sanguinolenta,
encontrndose leucocitos fecales en las deposiciones. Constituye una enfermedad de transmisin
alimentaria (ETA) de notificacin obligatoria. Puede producir tambin infeccin de heridas y
septicemia.

Poseen factores de adherencia que determinan la adherencia e invasividad y dos tipos de toxinas:

Toxina TDH (hemolisina termoestable directa): es causante del cuadro gastroentrico, la

enfermedad solo es producida por la bacteria viva, ya que las toxinas por si solas no pueden
producirla. Es dependiente de temperatura, encontrando su mxima produccin a 30 C, y no
producindose a temperaturas que se encuentren entre 4 y 10 C, se inactiva parcialmente al
calentar por 30 minutos a 100 C.
Toxina TRH (hemolisina relacionada a TDH): Esta asociada a la produccin de ureasa.

El diagnstico se establece por cultivo de deposiciones en agar TCBS donde la bacteria produce
colonias de color verde, se realizan tambin Pruebas fenotpicas y Pruebas serolgicas, el Test de
Kanagawa, ELISA para pesquisar TDH y TRH, o sondas de hibridacin. El tratamiento se realiza con
Tetraciclina (adultos), cloranfenicol, SXT y ciprofloxacino.

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150
Familia Aeromonadaceae, Gnero Aeromonas

Habita en medios de agua dulce y con bajo contenido en sal, y en productos frescos: carnes, leche y
helados. Existen 11 especies capaces de producir enfermedades en humanos, encontrndose
patgenos importantes como: Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae y Aeromonas veronii biovar
sobria.

Las especies A. hydrophila, A. veronii, A. caviae y A. trota pueden producir gastroenteritis por
consumo de agua o alimentos contaminados con la bacteria, que persiste por ms de dos semanas. La
cual puede cursar con:
o Diarrea acuosa, vmitos y heces con sangre.
o Diarrea disentrica con mucus y sangre.
o Diarrea crnica.
o Diarrea tipo colrica: agua de arroz.

Las especies A. hydrophila, A. veronii y A. schubertii, pueden provocar infeccin de heridas,
provocando dao traumtico, se deben al contacto con agua contaminada. Otras especies pueden ser
causantes de infecciones extraintestinales, de tipo ocular, del tracto respiratorio y urinario,
Meningitis o endocarditis, o tambin pueden provocar sepsis en pacientes con enfermedades
hepticas y desrdenes hematolgicos. Aeromonas hydrophila es la especie tipo que puede provocar
en el ser humano diarrea, endocarditis, septicemia, osteomielitis e infecciones de heridas, siendo ms
frecuentemente de pacientes con factores predisponentes. La mayor parte de las cepas presentan
una marcada beta hemlisis en agar sangre.

La diarrea aguda es un cuadro autolimitado y solo requiere tratamiento de soporte, especialmente
en nios. El tratamiento antimicrobiano es necesario en los pacientes con diarrea crnica o con
infeccin sistmica y se realiza con: Gentamicina, SXT y cloranfenicol.

Son bacilos o cocobacilos Gram- anaerobios facultativos productores de hemlisis tipo beta en agar
sangre, crecen en agar Mac Conkey generando una colonia lactosa + o - dependiendo de la especie.
Sus factores de virulencia son una enterotoxina termolbil y citotoxinas. Son oxidasa, catalasa e indol
positivo, reducen nitratos a nitritos, fermentan las D-glucosa y otros carbohidratos. Crecen entre 10 y
42 C, con pH hasta 9 y concentraciones de NaCl entre 0 y 4%. Producen una gran cantidad de
enzimas extracelulares, entre ellas DNAsa, y en general son resistentes al factor Vibriosttico O/129
(150 um). Las especies de importancia son mviles por flagelacin polar.

Crece bien en medios comunes para enterobacterias y tambin en agares selectivos (Mac Conkey).
El medio TCBS es usualmente inhibitorio para estas bacterias; agar sangre con 20 mg/mL de
ampicilina (ABA) es til para el aislamiento de todas las especies de Aeromonas excepto A. trota que
es sensible a la ampicilina. Para su identificacin es necesario diferenciarla de Vibrio y Plesiomonas,
esta ltima se diferencia fcilmente de Aeromonas por la reaccin positiva para lisina, ornitina,
arginina y la fermentacin de inositol. Vibrio es ms difcil de diferenciar, la resistencia al agente
Vibriosttico O/129 y la imposibilidad de crecer en concentraciones de sales mayores o iguales al 6%
usualmente indican el gnero Aeromonas, la excepcin es V. cholerae O139, toxignico, que no
requiere sal y es resistente al agente Vibriosttico O/129, sin embargo el patrn de lisina
descarboxilasa y ornitina positiva y arginina negativa, la ausencia de produccin de gas de glucosa y la
fermentacin de salicina separan este microorganismo de Aeromonas.
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151
Bacilos Gram+ aerobios no esporulados

Familia Listeriaceae, gnero Listeria

Dominio: Bacteria
Phylum: Firmicutes
Clase: Bacilli
Orden: Bacillales
Familia: Listeriaceae

El gnero de importancia clnica es Listeria, dentro de l se encuentran 6 especies principales:
L. monocytogenes: es potencialmente patgeno, causando listeriosis en humanos y otros
vertebrados como mamferos y aves.
L. ivanovii: se le ha descrito en humanos, pero su incidencia es escasa. Comnmente
causa abortos retenidos y septicemias en neonatos de ganado ovino y vacuno.
L. seeligeri: avirulenta. Se asla en un 99% de superficies inanimadas.
L. inoccua: avirulenta.
L. grayi: avirulenta.
L. welshimeri: avirulenta.

Caractersticas diferenciales entre las especies del gnero Listeria
Especie
Hemlisis Esculina Produccin de cido Catalasa Oxidasa Test de Camp Motilidad 20 C

con S. aureus Caldo Semislido
Ramnosa Xilosa
L.
+
+
+
-
+
-
+
T
P
monocytogenes
+
+
-
+
+
-
-
T
P
L. ivanovii
L. seeligeri
L. welshimeri
L. innocua
L. grayi
L. denitrificans
T = movimiento a tumbos en microscopio de contraste de fases con incubacin del caldo por 24 hrs.
P = turbidez en forma de paraguas.
V = resultados variables
L. monocytogenes

Simbiosis: patgeno intracelular facultativo.
Distribucin: ubiquitaria (suelo, agua, aire, vegetacin, animales), ambiente hmedo y seco,
presencia importante en ensilaje y en materia fecal animal y humana.
Transmisin: principalmente ingestin de alimentos, productos lcteos (zoonosis, provoca
mastitis en vacas) y carnes contaminadas. Transmisin vertical (madre al feto), fmites.
Reservorio: se han descrito casos de portacin humana (1 5% asintomtica gastrointestinal)
Susan Arias Donoso
152
Grupos de riesgo: neonatos, edad avanzada (>65 aos), mujeres embarazadas (3 trimestre).
Factores predisponentes: alteracin inmunidad celular, trasplantes, especialmente renal,
terapia con corticoesteroides, desrdenes autoinmunes, esplenomegalia, alcoholismo,
diabetes y cirrosis heptica.
Posibles causas de brotes: progreso mdico (frmacos inmunosupresores), cambios
demogrficos, cambio de prcticas de produccin y manipulacin de alimentos.

Son bacilos rectos cortos Gram+, no esporulados y no capsulados, mviles entre 20 y 25 C, por la
presencia de entre 1 y 6 flagelos pertricos, a 37 C solo posee un flagelo pero no se puede determinar
su movilidad. Son organismos anaerobios facultativos, con comportamiento psicotrpico, ya que
puede crecer a temperatura de refrigeracin, y sobrevive a -18 C, en general resiste temperaturas
entre 0,4 y 50 C, pudindose eliminar por calentamiento a 70 C por 10 minutos; adems resiste
concentraciones de sal de hasta un 10% y pH de entre 4,5 y 9. Es un fermentador anaerognico, es
decir que no produce gas a partir de azcar, y es productor de biofilms.

Crecen bien en medios de cultivo corrientes pero su crecimiento es lento ya que su tiempo
^d lisis,
Ramnosa+, Xilosa-, fermentacin de lactosa y glucosa, hidrlisis de esculina, esta ltima caracterstica
compartida por todos los miembros del gnero. La serotipificacin del antgeno somtico O y del
antgeno flagelar H es de importancia, al igual que la fagotipificacin y la susceptibilidad
antimicrobiana. Se puede realizar PCR en busca de genes de patogenicidad, electroforesis en gel de
campo pulsado (PFGE) y tipificacin de secuencias multiloci (MLST), esta ltima permite establecer
relacin entre las cepas. Los estudios epidemiolgicos contribuyen a la vigilancia y control de la
listeriosis humana.

Estructura antignica de las especies de listeria:

Antgenos
Antgenos somticos (O)
flagelares (H)
Serotipos
I II (III) IV (V) VI VII VIII IX X XI XII XIII XV A B C D
1/2
I II (III)

A B

1/2b
I II (III)

A B C
1/2c
I II (III)

B D
3

II (III) IV

A B

3b

II (III) IV

A B C
3c

II (III) IV

B D
4

(III) (V) VII IX

A B C
4ab

(III) (V) VI VII IX

A B C
4b

(III) (V) VI

A B C
4c

(III) (V) VII

A B C
4d

(III) (V) VI VIII

A B C
4e

(III) (V) VI VIII IX

A B C
5

(III) (V) VI VIII X

A B C
7

(III)

XII XIII A B C
6a (4f)

(III) (V) VI VII IX

XV A B C
6 (4g)

(III) (V) VI VII IX X XI

A B C
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153
Los serotipos 1/2a, 1/2b y 4b representan el 96% de las infecciones humanas. Existen 14 antgenos
somticos y 4 antgenos flagelares que determinan la existencia de 3 linajes de L. monocytogenes,
establecidos por la realizacin de un mapeo gentico por electroforesis en gel de campo pulsado y
electroforesis de enzimas multiloci.
Linaje I: 4b, 1/2b, 3b, 4d, 4e.
Linaje II: 1/2a, 1/2c, 3a, 3c.
Linaje III: 4a, 4c, 4b.

La estructura filogentica se basa en la secuencia nucleotdica de 7 genes conservados que
determinan 7 complejos clonales o clones, que comprenden el 75% de los aislados clnicos, cada clon
tiene un serotipo nico o dominante.
Serotipo
Clones
4b
1, 2, 4
1/2b
3, 5
1/2a
7
1/2c
9

- Internalinas: protena de superficie que facilita el ingreso de la bacteria a la clula epitelial.
- Listeriolisina O: hemolisina lbil al oxgeno, responsable de la hemolisis en agar sangre, es
una toxina formadora de poros que destruye el fagosoma, facilitando el escape de la
bacteria, su actividad es similar a la estreptolisina O de S. pyogenes. Es antignica de modo
que es til para el diagnstico.
- Fosfolipasa C: igual actividad que listeriolisina O.
- Lecitinasa: igual actividad que listeriolisina O.
- Act A: protena de superficie que facilita la polimerizacin de la actina en forma de propela
en un polo de la bacteria, este mecanismo le permite movilizarse a las clulas contiguas.
- Acido teicoico: causa fiebre alta en el hospedador, son antignicos
- Presenta tropismo por el SNC.
Sndrome clnico:
Puede hallarse Infeccin en el embarazo, granulomatosis infantisptica por va transplacentaria,
sepsis, meningoencefalitis, cerebritis y romboencefalitis, las tres ltimas producidas por transmisin
transplacentaria o contaminacin del feto al pasar por el canal de parto; tambin ocurren en
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154
ancianos. Existen adems infecciones locales como: listeriosis cutneas, otitis, osteomielitis,
peritonitis, endocarditis, abscesos espinal o cerebral y colecistitis.

La listeriosis invasiva requiere un periodo de incubacin de 3 a 70 das, con un promedio de 3
semanas, la dosis infecciosa mnima vara entre 10 3 y 109 dependiendo del sistema inmune del
hospedador y de la cepa. Los sntomas se desarrollan como una enfermedad tipo gripe, pudiendo
provocar meningitis, septicemia, infeccin del SNC no menngeas, aborto espontneo, aborto
retenido, septicemia peripatos e ITU ascendente.

La listeriosis no invasiva produce un cuadro gastroentrico, requiere una incubacin de 18 a 20 das,
su dosis infecciosa no se conoce pero se estima menor que la invasiva. Los sntomas son
gastroenteritis fecal, fiebre, fatiga, dolor de cabeza, nauseas, calambres, vmito, diarrea, y en
pacientes inmunodeprimidos puede causar bacteriemia y pasar a listeriosis invasiva. La transmisin es
oral y la eliminacin es fecal, puede comportarse como infeccin nosocomial.

El tratamiento de eleccin es ampicilina, penicilina, sulfametoxazol trimetoprim, vancomicina,
cloranfenicol, se estudia la asociacin con gentamicina. En infecciones leves se extiende el
tratamiento por 2 semanas, mientras que infecciones graves se recomienda de 3 a 6. La prevencin
incluye la coccin adecuada de los alimentos, y el buen lavado de ellos, adems de las manos y los
utensilios de cocina.

En Chile se han presentado casos de listeriosis en los ltimos aos, en 2008, se presentaron 165
casos (5 veces ms que aos anteriores) donde 79 cepas fueron del Clon 009, a causa de la ingestin
de quesos Brie y Camembert de la marca Chevrita contaminados, al ser estos retirados del mercado el
numero de caso disminuy luego de dos semanas. En 2009 ocurrieron 45 casos con 9 fallecidos, la
mayora adultos mayores, personas con enfermedades de base y recin nacidos; 10 de los casos
fueron del Clon 001.
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155
Familia Erysipelotrichaceae, gnero Erysipelothrix

Erisipelothrix spp es un bacilo Gram+ recto o curvo, con tendencia a formar largos filamentos,
agrupados en cadenas cortas, pares, ngulos, como letras chinas o aislados. Es no esporulado,
anaerobio facultativo, inmvil y no cido alcohol resistente, no produce catalasa, lo cual constituye la
principal diferencia con Listeria y Corynebacterium, fermenta la lactosa y es H2S positivo en TSI.
Produce colonias pequeas y translcidas. Pueden presentar alfa hemlisis en agar sangre pero solo
en anaerobiosis. Este gnero presenta dos especies: E. rhusopatiae y E. tonsillarum, donde solo la
primera tiene importancia clnica.

Erisipelothrix rhusopatiae se encuentra principalmente en los animales y en el hombre causa una
infeccin zoontica de tipo ocupacional. Su nombre viene de erisipela por el color rojo de la lesin y
thrix de pelo.

En los cerdos produce erisipela porcina o Mal Rojo. Otros animales y aves como cabras, ovejas,
conejos, pollos, pavos, peces y crustceos, son portadores del microorganismo en su aparato
digestivo. En los animales la va de infeccin son la digestiva o la cutnea a travs de abrasiones en la
piel.

El ser humano es husped accidental ya que contrae la infeccin a travs de heridas al contacto con
animales enfermos o portadores, sus productos y objetos contaminados con sus desechos. Esta se
manifiesta comnmente como una enfermedad inflamatoria cutnea localizada (erisipeloide)
generalmente en las extremidades. Los casos de infeccin sistmica con bacteriemia son infrecuentes
(menos del 1%) e incluyen endocarditis, artritis sptica y peritonitis. La endocarditis de vlvula artica
nativa es la presentacin predominante (70%).

Esta bacteria es no exigente en sus requerimientos nutritivos, fermenta la glucosa, fructosa, lactosa,
maltosa y no fermenta el manitol.
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156
Familia Corynebacteriaceae, gnero Corynebacterium

- C. diphtheriae.
- C. ulcerans: produce toxina diftrica y un cuadro diftrico benigno que cursa con faringitis
exudativa, presenta grnulos metacromticos y constituye un integrante de la microbiota de
la faringe.
- C. xerosis: forma parte de la microbiota de la faringe y piel, puede producir conjuntivitis
(xenosis) y puede desarrollar una infeccin invasiva.
- C. pseudodiphtheriticum.
- C. pseudotuberculosis.
- C. jeikeium: grupo JK, provoca infeccin intravascular nosocomial en inmunodeprimidos, es
la especie ms aislada en muestras clnicas.
- C. urealyticum: pertenece al grupo D2, provoca ITU, cistitis incrustante alcalina, produciendo
clculos renales. Posee una fuerte actividad uresica y generalmente en multirresistente.
- C. minutissium: comensal de la piel y agente etiolgico del eritrasma. Tambin se ha aislado
en casos de bacteriemias y endocarditis.
- C. hemolyticum: causa infecciones larngeas, se caracteriza por producir hemlisis en agar
sangre.

Son bacilos Gram+ variable, pues su pared no se tie correctamente ya que es rica en cidos
miclicos de cadena corta que rechazan el cristal violeta (grupo CMN); son no esporulados, agrupados
caractersticamente en empalizada o letras chinas (L, Y, V), se caracterizan adems por ser
pleomorfos, siendo rectos o curvados elipsoidales, con una forma similar a clavas. Son inmviles, no
capsulados y aerobios estrictos; poseen grnulos metacromticos de polifosfato, que actan como
reserva energtica, visibles con la Tincin Neisser o con azul de metileno alcalino, cerca de los polos
del bacilo, con entre un 75 y 80% de positividad.

Se comportan como organismos saprofitos de vida libre en agua dulce, salada, suelo, aire y
productos alimenticios. Son miembros de la microbiota de humanos y animales, a excepcin de C.
diphtheriae, a menudo se agrupan como difteroides, no suelen comportarse como patgenos
oportunistas, pero contaminan implementos mdicos.

C. diphtheriae

Simbiosis: Patgeno exclusivo del ser humano.
Hbitat: vas respiratorias superiores, piel, uretra.
Reservorio: ser humano enfermo o portador sano.
Transmisin: gotitas de pflgge, contacto cutneo, fmites, y leche cruda como
vehculo efectivo.
Poblacin susceptible: contactos cercanos sin antitoxina.
Resistencia: lbil a temperatura y desinfectantes; resistente a desecacin y luz.

Es un importante patgeno para el ser humano, es el agente causal de la difteria. Se cultiva en
medio Loeffler, suero coagulado al calor 75% y telurito de potasio, que inhibe los microbios
acompaantes. C. diphtheriae, produce colonias corredizas en la superficie, serosas, de difcil
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157
disgregacin y de color grisceo en agar telurito, se describen 4 biotipos fenotpicos de acuerdo a sus
caractersticas coloniales, los cuales pueden ser toxignicos o no:

- Belfanti
- Gravis: estriadas
- Intermedius: pequeas
- Mitis: brillantes

Posee antgenos de superficie O comunes a todas las especies y antgenos K que permiten
establecer serotipos e identificar la especie. Es capaz de producir exotoxinas, una protena termolbil
de 60 kDa, cuando se encuentra infectado con el profago B que contiene el gen Tox, esta toxina es la
responsable del cuadro clnico y su codificacin es activada frente a un descenso de hierro en el
medio. La toxina posee 4 subunidades o fragmentos:

Fragmento 2A: es el fragmento activo
se une a los ribosomas e impide la
sntesis proteica, conduciendo a la
muerte celular y tisular.

Fragmento 2B: permite la unin, se
une receptores especficos de
membrana y permite la entrada del
fragmento 2A al citoplasma de la clula
hospedadora.

La infeccin respiratoria puede ser faringoamigdalar, nasal, larngea o traqueo bronquial, requiere
un periodo de incubacin que va de 2 a 5 das, cursa con dolor de garganta, fiebre y malestar general,
la toxina usualmente produce necrosis tisular en forma local en faringe o amgdalas, all puede ser
absorbida hacia la sangre y producir efectos sistmicos, comienza con emisin de exudado que
evoluciona hacia la formacin de una pseudomembrana dura, adherente, gris o blanca que puede
causar sofocacin. La muerte puede sobrevenir por falla cardaca.

La transmisin no respiratoria puede producir infeccin sistmica y cutnea. La difteria cutnea es
prevalerte en el trpico por infeccin de heridas. Las cepas no toxignicas pueden causar faringitis y
endocarditis.

El diagnstico se basa en tinciones directas de la muestra, con un valor solamente presuntivo, las
caractersticas coloniales en agar sangre, Loeffler y telurito aportan hacia el diagnstico, en las
pruebas bioqumicas se encuentra que la cepa es nitrato+, ureasa- y no hidroliza la pirazinamida.

Las Pruebas de Toxigenicidad se realizan mediante el Test de Elek (inmunodifusin), el efecto letal
en cobayo y por PCR, que permite la deteccin molecular del gen tox. La inmunofluorescencia de
material sospechoso teido con antitoxina marcada con fluorescencia es rpidamente confirmatoria.
Se puede emplear tambin pruebas de hemaglutinacin y ELISA para deteccin de IgG especfica.

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158
Test de Elek

Antitoxina
+
-
Se realiza entre el 2 y 4 da
Positivo para C. diphtheriae y C. ulcerans

El tratamiento busca neutralizar la toxina, para ello se utiliza la antitoxina diftrica equina
administrada en forma local o por goteo venoso si la toxina es circulante, su administracin debe
realizarse lo ms pronto posible ya que a mayor tiempo es mayor el riesgo de muerte; adems esta
antitoxina no es efectiva una vez transcurrida 48 horas. El tratamiento antimicrobiano incluye
penicilina para disminuir la transmisibilidad, eritromicina en portadores, rifampicina y clindamicina.

En Chile segn norma debe efectuarse investigacin inmediata, hospitalizacin y aislamiento de
casos sospechosos por el establecimiento de salud que lo pesquise, adems de estudios de
laboratorio de acuerdo a instruccin estandarizada con notificacin inmediata al Servicio de Salud de
casos confirmados. Adems debe efectuarse investigacin de contactos segn formulario ad hoc.
Como medida profilctica se administra la vacuna DPT que contiene toxoide de Corynebacterium
diphtheriae y Clostridium tetani, junto con microorganismos muertos de Bordetella pertussis.

C. jeikeium

Aunque C. diphtheriae es la especie patgena ms importante del gnero C. jeikeium es el ms
frecuentemente aislado de muestras clnicas y es multirresistente a muchas drogas antimicrobianas.
Se asla ms frecuentemente de piel sana en varones hospitalizados. Esta especie se ha implicado en
infecciones asociadas a catteres intravenosos, enfermedades malignas e inmunodepresin, es
posible que el reservorio de esta infeccin sea la piel del paciente y, en condiciones favorables como
ciruga, sondas, catteres intravenosos, administracin prolongada de antimicrobianos, u otras, se
produzca la infeccin por el este patgeno oportunista. Provoca cuadros cutneos, meningitis,
endocarditis, osteomielitis y linfoadenopatas. Se ha aislado en pacientes con septicemia
intrahospitalaria, en infiltrados pulmonares, neumona e infecciones de tejidos blandos. Posee un
metabolismo de tipo oxidativo, no tiene actividad uresica y acidifica la glucosa.

Familia Mycobacteriaceae
Dominio: Bacteria
Phylum: Actinobacteria
Orden: Actinomicetales
Familia: Mycobacteriaceae
Gneros: Mycobacterium

Nocardia
Corynebacterium
Actinomyces
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159
Son bacilos Gram+ no esporulados, aunque no se tien bien con esta tincin debido a la estructura
de su pared que contiene alto contenido de cidos grasos.

Genero Mycobacterium
Especie
Reservorio
M. tuberculosis
Ser humano
+++
Tuberculosis
Si
M. bovis
Animal
+++
Tuberculosis
Rara
M. kansasii
Medio ambiente
M. scrofulaceum Medio ambiente
M. avium
Medio ambiente
M. intracellulare aves
M. fortuitum
Medio ambiente
M. marinum
Aguas, peces
M. ulcerans
M. leprae
Probablemente
medio ambiente
tropical
Ser humano
Virulencia en Enfermedad Transmisin

Modo de
humano
entre humanos transmisin
+
+++
Similar a
tuberculosis
Linfadenitis
Similar a
tuberculosis
Abscesos
cutneos
Granuloma
cutneo
Severa
ulceracin
cutnea
Lepra
Desgarro,
aerosoles,
fmites
Secreciones,
heces, leche,
derivados
animales
No
No

Heces, agua y
alimentos
contaminados
No
No
No
No

Si
inhalacin

Resistencia: resisten cidos, lcalis y la desinfeccin con alcohol 70%. Son sensibles al
calor, radiacin y fenoles.
Vas de transmisin:
Inhalacin: pulmonar y ganglios linfticos traqueobroquiales, a travs de
gotitas de pflgge.
Ingestin: a travs de los ganglios mesentricos. M. bovis ingestin de leche
contaminada.
Cutnea: infrecuente
Urogenital: infrecuente

Se habla de transmisin cuando la baciloscopa es positiva, entendindose como
baciloscopa la presencia de las bacterias al teir con Ziehl-Neelsen; en este caso el
paciente se denomina bacilfero, es decir que produce el bacilo y puede transmitir
fcilmente la enfermedad; lo cual ocurre en menor medida cuando la baciloscopa es
negativa y el cultivo es positivo. Cuando un paciente posee baciloscopa y cultivo
negativo se dice que es no contagioso, al igual que cuando existe tuberculosis
extrapulmonar.
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160
Esta bacteria fue descubierta por Robert Koch, sin embargo sus efectos se conocen desde hace
miles de aos, hallndose evidencias en momias que datan de 5000 a. C fallecidas por esta causa.
Provoca una enfermedad denominada tuberculosis, la cual era conocida como tisis por los griegos.

Cuando ingresa al cuerpo humano se genera una reaccin de hipersensibilidad retardada atribuible
a la alta cantidad de antgenos tuberculares, esto genera una destruccin de los tejidos de forma
microscpica que puede progresar a una lesin muy caracterstica denominada tubrculo.

Son bacilos delgados rectos o ligeramente curvos que se agrupan formando letras chinas (Y, L)
aerobios estrictos, no esporulados y no capsulados. Su multiplicacin es lenta, con un tiempo
generacional que va de 12 a 18 hrs, con algunas excepciones, de modo que solo a las 3 6 semanas
se pueden visualizar algunas colonias.
Presentan resistencia cido/lcalis, de modo que su aislamiento se puede lograr generando cambios
de pH que eliminan la microbiota acompaante. Poseen adems pigmentacin por la presencia de
escotocromgeno y fotocromgeno.
La pared celular est compuesta por una gran cantidad de lpidos (20 40% del peso seco),
principalmente cido miclico y algunos lpidos llamados complejos porque forman estructuras muy
largas con cidos micsidos y glucolpidos; el cido micsido controla la permeabilidad celular, de
modo que las bacterias resisten enzimas hidrosolubles, antibiticos y desinfectantes; mientras que los
glucolpidos generan toxicidad.

La gran presencia de lpidos les confiere gran hidrofobicidad a estas bacterias y por este motivo son
impermeables a colorantes acuosos en frio. Contiene un 60% de lpidos y un 10% de pptido-
glicsidos. Varios de estos lpidos son responsables de la reaccin celular de los tejidos frente a M.
tuberculosis, por tanto se piensa que los fosfolpidos podran estar implicados en la patogenicidad de
la bacteria. La tincin de Ziehl Neelsen se basa en estas propiedades bacterianas, ya que el cido
miclico retiene el carbol-fucsina despus de aplicar cido-alcohol para decolorar.

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161
Para su aislamiento existen distintos tipos de medios con caractersticas

especiales, dentro de ellos el ms utilizado es el Lowenstein-Jensen, que
contiene verde malaquita para eliminar la microbiota acompaante; sales,
como fosfato monopotsico, aminocidos y huevos enteros que le
proporcionan la cantidad de cidos grasos que necesita para construir su
pared, este medio se caracteriza por no poseer agar, ya que la solidez est
dada por la mezcla de glicerina y huevos; en ste las colonias se observan
con el aspecto de coliflor o migas de pan. Un segundo medio
frecuentemente utilizado es el Middlebrook, contiene: sales, vitaminas,
acido oleico, albumina, glicerol y verde malaquita. Otros medios empleados
para este fin es: Dorset, Petragnan y Coletsos. Mycobacterium leprae, por
su condicin de parasito intracelular estricto, debe cultivarse en medios
celulares.
Las pruebas bioqumicas para su identificacin, en Chile, son realizadas por el ISP o por laboratorios
especializados en Mycobacterium.
Las micobacterias son clasificadas utilizando distintos criterios segn Runyon:
-
Ritmo de crecimiento: depende de la carga bacteriana y disminuye en subcultivos.

o Rpido: menor a 7 das.
o Lento: 15 60 das.

Produccin de pigmento en presencia o en ausencia de Luz
o Escotocromgeno: pigmenta independientemente de la luz.
o Fotocromgenos: solo pigmentan cuando son expuestos a la luz

Grupos y subgrupos
Fotocromgenos de
crecimiento lento
(>5 das)
Escotocromgenos de
crecimiento lento
No cromgenos de
crecimiento lento
Fotocromgenas de
crecimiento rpido
Escotocromgenas de
crecimiento rpido
No cromgenas de
crecimiento rpido
(<5 das)
Especies
M. kansasii
M. asiaticum
M. marinum
M. scrofulaceum
M. tuberculosis
M. bovis
M. avium intracellulare
M. abscessus
Patologas
Pulmonar, Ganglionar, Menngea,
Generalizada, Osteoarticular,
Urogenital
Ganglionar, pulmonar,
osteoarticular
Pulmonar, renal, etc.
Cutnea, ganglionar, pulmonar,
osteoarticular, generalizada.
Cutnea, articular
M. vaccae
M. fortuitum
M. chelonae
Cutnea, pulmonar,
osteoarticular, ocular, menngea.
* M. tuberculosis, M. bovis, M. avium intracellulare: son las ms patgenas y por tanto

tienen la mayor importancia clnica.

Relacin parsito hospedador.
o Parsito estricto del ser humano (M. tuberculosis, M. leprae)
Intracelular estricto: M. leprae requiere cultivos celulares para su aislamiento.
Intracelular facultativo: M. tuberculosis, micobacterias atpicas.
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162
o
o
Oportunistas (Mycobacterium atpicos): M. avium, M. kansasii, M. scrofulaceum

Saprfitos de vida libre, presentes en agua, suelo, piel y tracto genitourinario (M.
smecmatis)
No generan ningn cuadro clnico (Mycobacterium smecmatis).
Algunos miembros como M. fortuitus y M. marinus si podran causar un
cuadro clnico en personas que trabajan con peces.
M. chelonae, M. fortuitum y M. abscessus habitualmente se relacionan con
patologas humanas.
En forma excepcional M. gordonae, M. terrae, M. triviale y M. flavescens.

Cuadros clnicos.
o No tuberculosas o atpicas: son aquellas micobacterias que no provocan tuberculosis
o lepra; sino que producen micobacteriosis en el ser humano o se comportan en
forma saprfita. Las especies M. intracellulare avium provocan una infeccin
pulmonar similar a TBC en pacientes con SIDA.
Fotocromgenas: M. kansasii, M. marinum, M. simiae, M. asiaciticum.
Escotocromgenas: M. scrofulaceum, M. aquae, M. gordonae.
No Fotocromgenas: M. xenopi, M. avium, M. intracellulare, M. gastri.
De Crecimiento Lento: M. fortuitum, M. chelonae, M. abscessus y M.
smecmatis.
o Complejo tuberculosis
M. tuberculosis: estricta del ser humano
M. bovis: se encuentran en las vacas y en el ser humano
M. africanum
M. microti
M. canetti: aun no se establece si forma parte de este complejo.

Mycobacterium leprae

Simbiosis: patgeno intracelular obligado.

Reservorio: hombre.
Transmisin: contacto directo, aerosoles.
Puerta de entrada: piel, va area.

Es un microorganismo no cultivable de baja infectividad cuyo nico reservorio es el hombre
enfermo, en el cual se observan como bacilos dentro de las clulas mononucleares (clulas lepra). Se
comporta como patgeno intracelular obligado que se multiplica dentro de los macrfagos, en
especial en los histiocitos y en las clulas de Schwann, tiene especial afinidad por los nervios.

Es un bacilo incurvado que se caracteriza por multiplicarse con extraordinaria lentitud, la
temperatura ptima para su crecimiento es 30 C.

La lepra es una enfermedad infecciosa, crnica, escasamente contagiosa que afecta los nervios
perifricos, piel y en ocasiones otros rganos. Requiere un contacto ntimo y prolongado para su
transmisin y suele producirse en la infancia o adolescencia. Afecta fundamentalmente a personas
con dficit de alimentacin y falta de higiene.
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163
En Europa la lepra ha ido desapareciendo y solo quedan algunos focos en Espaa y Portugal, y
contina siendo endmica en Asia, frica, y Amrica del Sur. En este ltimo continente, es ms
frecuente en Brasil, Colombia, Venezuela y Per, el nico pas exento de esta enfermedad es Chile, a
consecuencia, posiblemente, de las condiciones ambientales muy especiales que impiden que la
enfermedad se propague.

Al no poder cultivarse, el diagnstico debe ser directo mediante tincin Ziehl Neelsen buscando
bacilos cido-alcohol resistente en lesiones cutneas y en raspado de la mucosa nasal. La profilaxis
incluye la deteccin oportuna y el aislamiento del enfermo, realizndose quimioprofilaxis en sus
contactos, actualmente existe inmunizacin mediante la vacunacin con BCG.

Mycobacterium tuberculosis
Simbiosis: Parsito estricto del ser humano.
Transmisin: directo, persona a persona requiere contactos repetidos y estrechos.
Gotitas de pflgge, desgarros y fmites
Resistencia: resistente a una gran variedad de desinfectantes (fenol 5%, Lysol 3% y
cresoles). Puede sobrevivir 150 das en heces secas de bovino. Resiste hasta -20C.

Es el agente causal de la tuberculosis. Son bacilos de multiplicacin lenta, lo que condiciona su
cronicidad, y virulencia variable, incapaces de producir toxinas pero portadores de una gran variedad
de antgenos.

Cuando la micobacteria alcanza los tejidos, principalmente pulmonar, se activan los linfocitos T CD4
y los macrfagos migran inmediatamente a la zona afectada, sobreviniendo apoptosis y activacin de
los linfocitos T CD8 que inducen a los macrfagos a realizar fagocitosis, sin embargo la bacteria es
capaz de evadir los lisosomas, sobreviviendo dentro del macrfago, de modo que es transportada por
los macrfagos, quienes la diseminan en el organismo.

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164
La tuberculosis (TBC) puede presentarse de 3 formas: Pulmonar, Extrapulmonar, por diseminacin
del Mycobacterium en el torrente sanguneo; y la forma Diseminada o Miliar asociada a pacientes
inmunocomprometidos, que se produce en el parnquima pulmonar.

El Mycobacterium es adquirido a travs de la va respiratoria (inhalada) llegando a los alveolos y

bronquiolos, donde se implanta y se multiplica en forma activa durante aproximadamente 15 das
hasta alcanzar el nmero de bacterias crtico para provocar la enfermedad cavitaria, localizada ms
frecuentemente en los segmentos apicales y posteriores de los lbulos superiores, adems de los
segmentos superiores de los lbulos inferiores, en el centro de la lesin el material caseoso presenta
licuefaccin y destruye las paredes de los bronquios y de los vasos sanguneos, determinando la

consecuente hiperventilacin para ingresar oxgeno al cuerpo, adems ocurre una depresin del
sistema inmune facilitando el ingreso de agentes oportunistas, principalmente Aspergillus,
produciendo Aspergilosis pulmonar. La TBC pulmonar puede diseminarse, por va hematgena a otros
rganos como: huesos, riones, va genitourinaria, ojo, cerebro, hgado e intestino, constituyendo un
importante problema de salud pblica, por su alto grado de infeccin y el alto costo de su
tratamiento. En Chile la tuberculosis es de suma importancia por su alta frecuencia en inmigrantes
peruanos y bolivianos, pases en que la Tuberculosis es endmica.

La respuesta monocitaria alveolar se presenta a las 48 hrs luego de la infeccin, estos fagocitan los
bacilos que crecen lentamente en su interior, cada 25 a 32 horas. No hay respuesta inmediata del
husped por carecer de endotoxinas y por tanto se produce diseminacin linftica y posteriormente
sangunea a otros sitios del organismo. Los Macrfagos y Linfocitos T activados forman los
caractersticos granulomas, denominados tubrculos, que limitan la propagacin. Existe una
importante liberacin de mediadores.

La respuesta inmune celular aparece luego de 2 a 12 semanas, periodo en el cual se encuentran
granuloma necrtico con un pequeo nmero que permanece
viable, PPD detectable, existe presencia del complejo primario de Ghon (lesiones con fibrosis y
calcificacin), que puede ser inaparente.

La tuberculosis es una de las enfermedades ms mortferas del mundo, situndose como la primera
causa de muerte por enfermedades infecciosas. Actualmente existen en el mundo 30 millones de
enfermos con Tuberculosis (19 y 43% de la poblacin mundial est infectada), cada ao ocurren 8
millones de casos nuevos y 3 millones de personas mueren por esta enfermedad; el 95% de los casos
ocurren en pases en vas de desarrollo.
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165
Su capacidad de producir la enfermedad depende de la virulencia del bacilo y de su cantidad.

Adems existen factores predisponentes en el husped que favorecen el desarrollo de sta, como la
edad, sexo, predisponencia gentica, Diabetes, desnutricin, alcoholismo, infecciones (VIH),
tratamientos inmunosupresores.
Ignorado; 4%
EPOC; 1%
Enfermedades asociadas
Otras; 4%
Desnutricin;
12%
Ninguna; 49%
Diabetes; 20%
Alcoholismo;
7%
VIH/SIDA; 5%

El diagnstico se basa en la realizacin de tinciones, requiriendo 5x10 - -70%),
para poder ser observadas al frotis, su escasa sensibilidad hace necesaria la realizacin de cultivos,
que son capaces de detectar entre 10 y 100 bacterias/ml de muestra. El PCR permite detectar entre 1
y 10 bacterias/ml de la muestra. El diagnstico se puede establecer tambin por deteccin de
antgenos o componentes bacterianos, o bien de la respuesta inmune celular, detectable por la
prueba de Mantoux o prueba de la Tuberculina.

La prueba de la tuberculina corresponde a una intradermorreaccin (test cutneo), en que se aplica
un derivado proteico purificado (PPD) obtenido por cultivo del agente en caldo y purificacin por
fraccionamiento qumico, este permite conocer si el individuo ha estado o no en contacto con
Mycobacterium, la reaccin positiva se revela por la aparicin de un eritema indurado en el rea de
inoculacin, la lectura se realiza a las 72 horas y es vlida hasta 1 semana. Los inconvenientes de esta
prueba radican en que no es especfica para Mycobacterium tuberculosis, ya que otras micobacterias
no tuberculosas dan resultados positivos para esta prueba. La prueba se considera positiva si el
dimetro de la induracin es mayor de 5 mm en pacientes no vacunados; en aquellos que han sido
vacunados no se puede discernir con seguridad absoluta si la reaccin es debida a infeccin por
Mycobacterium tuberculosis o a causa de la vacuna, por tanto, en ellos se considera positiva si la
induracin es mayor a 5 mm siempre y cuando cumplan con algunas caractersticas establecidas
como poseer contactos bacilferos, radiografa de trax con imagen de TBC inactiva, estar
inmunosuprimidos o ser silictico. Un paciente vacunado con una induracin mayor de 15 mm se
considera infectado.

La profilaxis incluye la vacuna BCG (Bacilo de Calmette y Guerin), la cual contiene bacilos vivos con
virulencia atenuada obtenidos por 237 pasajes en una medio de cultivo a base de papas y bilis, le
confiere al ser humano resistencia a las cepas virulentas de bacilos tuberculosos y se aplica al recin
nacido. No obstante la vacunacin, actualmente se han elevado los casos de tuberculosis por
aumento de enfermedades inmunodeprimentes como el SIDA y Diabetes.

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166
El tratamiento de la tuberculosis se realiza con la administracin de una serie de drogas como:
Isoniacida, Rifampicina (su uso se restringe slo para el tratamiento de tuberculosis), Pirazinamida,
Etanbutol o Estreptomicina. Estas drogas tambin son empleadas para el tratamiento de otras
micobacterias. Como segunda opcin se tiene a drogas como: Capreomicina, Kanamicina, Cicloserina
y PAS.

La tuberculosis constituye una enfermedad de notificacin obligatoria.

Determinantes de patogenicidad
-
-
-
-
-
cidos miclicos, sulfolpidos, protenas de pared: actan como antgenos e interfieren en la

interaccin del fagosoma y lisosoma en el macrfago, otorgan resistencia a los mecanismos
dependiente de O2.
Lipoaribinomanano: lpido asociado a carbohidrato, interfieren en la interaccin del
fagosoma y lisosoma en el macrfago, permite la fijacin a la superficie de los macrfagos
alveolares, retarda la reaccin inmunolgica, ya que inhibe la presentacin de antgenos; y
tambin puede modular la produccin de citoquinas por los linfocitos T.
Factor cordonal (cord factor): inhibe la migracin de leucocitos y provoca granuloma crnico.
Micobactinas: son quelantes de hierro, por tanto recuperan el Fe a partir de la transferrina.
Exoquelinas: quelan y solubilizan el hierro.
Catalasa: destruye el perxido de hidrgeno de las clulas fagocitarias.

Micobacterias atpicas

Son especies de micobacterias distintas de las que producen tuberculosis o lepra, algunas de ellas
son saprfitas (M. gordonae, M. terrae) y otras tienen poder patgeno en el hombre pudiendo
producir enfermedades denominadas micobacteriosis. Las principales micobacterias atpicas
potencialmente patgenas para el hombre son: M. kansasii, M. marinum, M. scrofulaceum, M.
szulgal, M. xenopi, M. ulcerans, M. avium, M. intracellulare, M. malmoense, M. fortuitum y M.
abscessus.

No todas las micobacterias atpicas son capaces de producir enfermedad ni todas las que la
producen lo hacen con igual virulencia. Actualmente la infeccin por micobacterias atpicas ms
frecuente es la producida por micobacterias del complejo avium-intracellulare. Las infecciones por
micobacterias atpicas, tales como, M. kansasii, M. avium y M. intracellulare pueden causar
infecciones pulmonares localizadas, indistinguibles desde el punto de vista clnico de la tuberculosis, o
infecciones diseminadas a cualquier rgano o tejido. La infeccin aguda diseminada por M. avium y
M. intracellulare es particularmente comn en pacientes con SIDA durante las fases terminales de la
enfermedad. Ante el aislamiento en un producto patolgico de una micobacteria atpica se deben
aplicar los siguientes criterios para confirmar la existencia de una micobacteriosis:
- Que exista un cuadro clnico que pueda ser producido por la micobacteria aislada.
- Que no se aslen simultneamente ninguna especie del complejo M. tuberculosis.
- Que se asle la misma micobacteria en varias muestras.
- Que el nmero de colonias sea abundante para descartar una posible contaminacin.

Para el diagnstico microbiolgico se utilizan las mismas tinciones (Ziehl Neelsen) y las mismas
tcnicas y medios de cultivo que para el diagnstico de M. tuberculosis. La identificacin a veces es
compleja y se utilizan pruebas bioqumicas de biologa molecular.
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167
Familia Nocardiaceae, Gnero Nocardia

Hbitat: ambiental (tierra). Puede formar parte de la
microbiota comensal de piel y TRS.
Simbiosis: saprfitas.
Mecanismo de transmisin: inhalacin de aerosoles o
inoculacin traumtica en piel y mucosa ocular.

Las especies de importancia clnica son: Nocardia pseudobrasiliensis, Nocardia otitidiscavarium,
Nocardia brasiliensis, que infecta la piel de forma lenta o rpidamente progresiva, y Nocardia
asteroides agente productor de infecciones respiratorias y en el SNC (20%), en pacientes con VIH,
diabticos o con uso de esteroides, la infeccin respiratoria es indolente con fiebre, tos y prdida de
peso.

Son bacilos Gram positivos de morfologa filamentosa o de hebras finas generalmente ramificadas, o
formas bacilares y cocoides producto de la fragmentacin de las hifas vegetativas. Su morfologa es
similar a Actinomyces, del cual se diferencia con la tincin de Kinyoun, siendo Nocardia total o
parcialmente cido resistente. Son aerobios estrictos, inmviles, de crecimiento lento (48 a 72 horas,
puede tardar hasta 4 semanas) a 35 C en la mayora de los medios no selectivos, donde forman
colonias de aspecto variable, dependiendo del medio y tiempo de incubacin, de olor caracterstico a
tierra hmeda y pueden observarse como tiza blanca, salmn o rosa caf, a veces de aspecto
algodonoso. Estas bacterias carecen de la capacidad de formar granulomas lo cual permite
diferenciarlos de Mycobacterium.

Los medios ms usados para su aislamiento son el agar Sabouraud dextrosado, agar infusin
cerebro corazn, agar Mueller Hinton y agar Lowenstein Jensen. La identificacin presuntiva de
Nocardia se basa en las caractersticas ya mencionadas, ms catalasa positiva y tincin de Kinyoun
positivo. El complejo Nocardia asteroides, que incluye N. asteroides, N. nova y N. farcinica presenta al
menos seis patrones de susceptibilidad antimicrobiana, asociados a las diferentes especies, siendo
esta ltima altamente resistente, especialmente a cefalosporinas de amplio espectro.

La nocardiosis es reconocida como una infeccin espordica, adquirida en la comunidad, que se
comporta como oportunista, produciendo principalmente infeccin pulmonar invasora o diseminada
en husped inmunosuprimido. Nocardia asteroides es la especie que causa infeccin humana con
mayor frecuencia. Es una enfermedad de alta mortalidad (10% en general y 80% en los abscesos
cerebrales) que se puede desarrollar de tres formas, pulmonar, sistmica y cutnea, entre las formas
localizadas (86%) destaca la infeccin pulmonar (70 79%), siendo menos importantes las formas
cutneas primarias.
- Forma pulmonar: Por inhalacin de suelo o materia orgnica en pacientes con
Inmunodepresin de base (leucemia, trasplantes, VIH, EPOC, diabetes), provoca
inflamacin aguda, que progresa a la formacin de mltiples abscesos, y finalmente se
disemina al cerebro.
- Forma cutnea: Por inoculacin directa (va parenteral), formando una pstula que
progresa a la formacin de un micetoma actinomictico con fstulas, ste corresponde a
un absceso crnico que destruye los tejidos blandos y el hueso.
- Forma sistmica: suponen entre el 14 y 50% de los casos, suelen estar precedidas en un
60 a 80% por una afectacin pulmonar y puede producirse metstasis en el sistema
nervioso central (20 40%), en la piel y el tejido celular subcutneo (9%), en el rin (8%)
Susan Arias Donoso
168
y, ms raramente, en otras localizaciones como la pleura, pared torcica, hgado y ojos. La
colonizacin de las vas areas o, excepcionalmente la piel.

Se ha observado hasta un 10% de personas asintomticas.

Al ingresar al organismo el bacilo produce una neutralizacin de agentes oxidantes y previene la
fusin lisosoma - fagosoma, y la acidificacin de este ltimo. La bacteria posee cidos miclicos que
participan en la virulencia. Las lesiones cutneas por Nocardia pueden manifestarse como micetomas
actinomicticos que se observan frecuentemente en extremidades inferiores, y afecta al tejido
subcutneo, msculo y hueso.

El diagnstico se realiza en muestra de esputo o aspirado de pus, la cual contiene una cantidad
abundante de bacilos, teido con Gram o Kinyoun (Tincin de Ziehl Neelsen modificada), el cultivo se
realiza en aerobiosis durante 2 a 5 das generando colonias arrugadas y pigmentadas.

El tratamiento incluye el drenaje quirrgico de las lesiones y la administracin de antimicrobianos
(sulfamidas, Amikacina y Carbapenems o Cefalosporina de 3 generacin) durante 12 a 18 meses.

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169
Bacilos Gram+ esporulados

Los bacilos Gram+ capaces de producir esporas pertenecen a los gneros Bacillus y Clostridium, en
general son organismos saprfitos, sin embargo algunas de ellas producen patologas importantes
para el hombre como B. anthracis, agente causal del carbunco, o algunas especies de Clostridium
implicadas en enfermedades mediadas por toxinas. La esporulacin les permite sobrevivir en
ambientes inhspitos y resistir los medios de esterilizacin y desinfeccin, la endospora en
condiciones favorables puede germinar y dar lugar a la clula vegetativa.

Familia Bacillaceae, Gnero Bacillus

Son bacilos aerobios o anaerobios facultativos, quimiorgantrofos, generalmente catalasa+, de 1,2
7 um de longitud y 1 2 um de ancho, en su mayora mviles por flagelacin pertrica. La mayora de
sus especies son saprfitas del suelo, aire, agua, plantas; a excepcin de B. anthracis y B. cereus.

Bacillus anthracis:
Es agente del carbunco en animales, especialmente en el ganado herbvoro, y ocasionalmente se
transmite al ser humano, en el que tiene tres formas clnicas: cutnea, que resulta de la
introduccin de la espora a travs de la piel; por inhalacin y gastrointestinal, por ingestin.
Es un bacilo grande, aerobio estricto, inmvil, recto y de extremos cortados en ngulo recto;
cuando proviene de productos patolgicos se encuentra aislado, en parejas o en cadenas cortas,
con una cpsula que suele rodear varios elementos; en medio de cultivo desarrolla cadenas ms
largas y asemejan una caa de bamb, la cpsula solo se puede observar en medios especiales. Las
endosporas son esfricas u ovales con ubicacin central o subterminal y no deformantes, y se
observan en cultivos viejos, suelo o restos de animales infectados. Crece bien en medios comunes.

La confirmacin de laboratorio se logra por aislamiento en una muestra sangre, lesiones
superficiales o secreciones respiratorias, y observacin de cpsula mediante tincin con azul de
metileno D&, o por cultivo e inoculacin en ratones o conejos. Se puede
realizar identificacin rpida por inmunodiagnstico, ELISA y PCR. El aislamiento en agar comn a
las 24 horas permite observar colonias elevadas, amarillo grisceas, opacas, de superficie irregular,
de 2 a 4 mm de dimetro y con proyecciones en forma de rizos a su alrededor, constituidos por
largas cadenas de bacilos , en agar sangre no
producen hemlisis.

La cpsula se produce cuando B. anthracis virulento se cultiva en agar nutritivo que contenga 0,7% de
bicarbonato sdico y se incuba en presencia de CO 2 (20% ptimo), donde forma colonias mucosas. Esta cpsula
puede observarse usando azul de metileno policromtico, que contiene etanol (95%), hidrxido potsico (KOH
0,01%) y azul de metileno, y que debe exponerse al aire con agitacin ocasional durante un ao para su
maduracin y oxidacin, la adicin de K2CO3 (concentracin final 1%) acelera la maduracin del colorante.

Se observan bacilos grandes capsulados de extremos cuadrados, en cadenas de uno o varios bacilos

Susan Arias Donoso
170
Bacillus cereus:
Acta como saprfito y se encuentra ampliamente distribuido en el medio ambiente, puede
estar presente en alimentos secos en forma de espora, la cual germina en presencia de humedad y
pH de baja acidez. Existe portacin humana de 14% como colonizacin transitoria gastrointestinal
por tanto el aislamiento a partir del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar
el agente etiolgico.
Se describe como causante de dos tipos de enfermedades transmitidas por los alimentos. La
intoxicacin alimentaria emtica (vmitos) es causada por ingestin de la toxina (cereulida)
preformada en el alimento (periodo de incubacin corto) y una infeccin diarreica causada por la
ingestin de esporas o clulas bacterianas que producen enterotoxinas en el intestino delgado
(incubacin larga); en general estos cuadros son autolimitados. Ha sido implicado en casos de
sepsis, endocarditis, infecciones respiratorias y del SNC. Produce una betalactamasa de espectro
ampliado que la hace multirresistente.
Es un bacilo Gram+ en cultivos jvenes y a medida que envejece puede verse como Gram
variable o Gram-. Tiene una morfologa similar a B. anthracis, pero a diferencia de ste en general
es mvil, no es susceptible a penicilina y sus colonias son hemolticas en agar sangre. Las esporas
son observables con tincin Gram y se ubican dentro de la pared bacteriana deformndola. La
temperatura de crecimiento vara entre 15 y 45 C, con un ptimo de 37 C.
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171
Espiroquetas y Leptospira

Las bacterias que pertenecen a las familias Spirochaetaceae
y Lesptospiraceae se caracterizan por ser bacterias finas
Gram- de forma espiralada y bordes redondeados, que son
mviles gracias a la presencia de filamentos axiales. En
general poseen mala afinidad por las anilinas de modo que
slo se pueden ver en preparaciones al fresco, en microscopia
de campo oscuro o contraste de fase.

Son bacterias de lento crecimiento y exigentes
nutricionalmente, por lo que son difciles de cultivar,
debiendo emplearse cultivos especiales para su aislamiento.

Familia Spirochaetaceae

Orden: Spirochaetales
Familia: Spirochaetaceaes
Gnero: Treponema, Borrelia

Familia Spirochaetaceae Enfermedad humana
Fiebre recurrente epidmica.
Gnero Borrelia
Borreliosis de Lyme.
Fiebre recurrente endmica.
Sfilis venrea (Amrica)
Bejel (zona clida)
Gnero Treponema
Frambesia (zona clida)
Pinta
Agente biolgico
Borrelia recurrentis
Borrelia burgdoferi (garrapata)
Muchas especies
T. pallidum sub. pallidum
T. pallidum sub. endemium
T. pallidum sub. pertenue
T. pallidum sub. carateum

Son organismos aerobios facultativos y emplean aminocidos y carbohidratos como fuente de
carbono.

Gnero
Filamentos axiales Discos de insercin

Treponema
6 10
1

Borrelia
30 40
2

Treponema pallidum subespecie pallidum

Agente etiolgico: sfilis.

Tamao: 6 12 x 20 um.
Simbiosis: patgeno humano estricto.
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172
Distribucin: universal.
Trasmisin: contacto sexual directo (anal, oral o genital). Congnita.
Hospedero: humano.
Factores de riesgo: prostitucin, promiscuidad, hacinamiento.
Grupos de riesgo: adolescentes promiscuos o adultos sexualmente activos, ms
frecuente entre 20 y 39 aos.
Periodo de incubacin: 3 90 das.
Incidencia: No tiene incidencia estacional aunque aumenta levemente en verano.

El Treponema pallidum, agente etiolgico de la sfilis, fue descubierto en 1905, comenzando a
describirse en el ao 1906, recin en 1909 se estudi el primer posible tratamiento y en 1946 se
instaura la penicilina como primera instancia de terapia antimicrobiana. Su origen se encuentra en
Amrica, desde donde se disemin a Europa.

Se desarrolla en dos fases, divididas por un horizonte clnico, una de ellas, el periodo prepatognico,
est asociada a una infeccin donde no hay manifestacin clnica, en ella existe un equilibrio entre el
agente y el husped; la segunda, el periodo patognico, presenta signos y sntomas, cuyas secuelas
pueden producir la muerte, se produce por un desequilibrio entre el agente y el husped.

La sfilis se clasifica en:
a) Sfilis precoz:
- Primaria: (0 8 semanas) generalmente produce un cuadro clnico de chancro duro
(ulceracin localizada en el tejido) indoloro y supurativo, altamente contagioso, que
puede pasar desapercibido, especialmente en mujeres. Existe infiltracin linfocitaria
CD4 - CD8, aumento de clulas plasmticas, histiocitos y proliferacin endotelial
provocando obstruccin de vasos sanguneos. Sobrevienen signos y sntomas
inespecficos pseudogripales, con dolor de garganta, cefalea, fiebre, mialgia, anorexia,
cansancio y prdida de peso repentina.
- Secundaria: cursa con linfoadenopatas, se desarrolla un exantema mucocutneo
generalizado (macular, papular y pustular), manchas de tipo roscea (etapa roscea)
principalmente en las zonas palmares. Es una etapa infectiva ya que las lesiones se
pueden infectar por otras bacterias. Puede durar entre 18 a 26 semanas, tras lo cual
nuevamente desaparecen las lesiones, 15% contina con el chancro.
- Latente precoz

b) Sfilis tarda, complicaciones:

- Latente tarda
- Sfilis terciaria: existe una destruccin progresiva, crnica e irreversible de los tejidos,

en hueso, piel y otros tejidos. Hay destruccin de rganos, pudiendo afectar el cerebro
(neurosfilis), corazn (sfilis cardiovascular) e hgado. La arteritis se produce porque el
microorganismo tiene alta afinidad por los vasos sanguneos. En inmunodeprimidos se
alcanza antes de 15 aos.

c) Riesgos:
- Neurosfilis: es un dao irreversible que provoca demencia.
- Sfilis congnita:
i. Precoz.
ii. Latente.
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173
iii. Tarda: cursa con malformaciones seas.

- Problemas circulatorios, ceguera, parlisis por dao tisular, sordera, insuficiencia
cardaca, malformaciones multiorgnicas, aborto espontneo o nacido muerto, muerte.

El tiempo de aparicin de la enfermedad depende del nmero de treponemas, requiere entre 500 y
1000 organismos, con una acumulacin de 7 a 10 microorganismos por gramo de tejido; dando origen
a una lesin clnica, por una rpida penetracin en mucosa sana o lesiones. Los extremos aguzados de
la bacteria le permiten penetrar tejidos blandos, dependiendo de la flexibilidad de estos; hasta
alcanzar las arteriolas generando un mecanismo de obstruccin y daando los tejidos de forma
prolongada y crnica, con la formacin de un chancro. Tras este cuadro primario existe una etapa de
latencia sin manifestacin clnica donde desaparece el chancro, la que puede durar pocas semanas.
Este es seguido por la etapa secundaria de la sfilis y una siguiente fase de latencia. Ambas etapas
pueden ser revertidas con un tratamiento adecuado.

La sfilis es afectada por lo general en el secundarismo lutico, que implica la produccin de
hepatitis difusa inespecfica, con aumento de la relacin AST/ALT y de la fosfatasa alcalina.

En forma menos frecuente puede provocar infeccin intrauterina durante cualquier etapa del
embarazo, producto del contacto de las membranas mucosas con lesiones. La trasmisin sangunea
es poco frecuente, pero su presencia en sangre es controlada en donaciones, mediante la tcnica
VDRL, pesquisando anticuerpos contra Treponema pallidum.

El tratamiento de eleccin es Penicilina G benzatnica sin embargo su efectividad depende de la fase
en que se encuentra el cuadro clnico. Para sfilis latente se emplea penicilina benzatnica. En caso de
sfilis congnita tarda y neurosfilis se emplea penicilina G. Como segunda opcin se puede emplear
tetraciclina o doxicilina. El tercer nivel de tratamiento depende de las secuelas, terapias psicolgicas
en caso de demencia, aparatos auditivos en sordera y reintegracin de la persona a la sociedad.

La tincin puede realizarse con Giemsa y mtodos de impregnacin argntica. El diagnstico se
puede establecer por observacin al fresco en microscopa de campo oscuro y contraste de fase; con
marcaje de fluorescencia (isotiocianato). Los exmenes treponmicos se realizan mediante FTA-ABS
(anticuerpos de absorcin), MHA-TP (microhemaglutinacin), HATTS (hemaglutinacin), tienen
calidad de confirmatorios. El examen hematolgico revela aumento de VHS, recuento leucocitario:
3000 26 000 y trombocitopenia leve, existe tambin alteracin del sedimento urinario. El
diagnstico puede establecerse tambin por pruebas no treponmicas como VDRL (se basa en la
creacin artificial de la Cardiolipina), RPR (prueba de la reagina plasmtica rpida).

La prevencin primaria involucra educacin sexual, uso de preservativos, abstinencia sexual,
monogamia mutua; la de segundo nivel se logra mediante diagnstico precoz. En Chile existe
monitoreo obligatorio de esta enfermedad, principalmente en embarazadas.

-
-
Hialuronidasa: permite atravesar las distintas fracciones de los tejidos, la patogenicidad

depende de esta enzima.
Protenas de membrana (P1, P2 y P3): factor de adherencia a membranas celulares,
principalmente de arteriolas y arterias donde produce mayor dao; determina la
infecciosidad de la cepa
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174
-
-
-
Fibronectina.
Mucopolisacridos
Cardiolipina: Estructura de esterol con formacin de colesterol, tiene propiedades
antignicas, permitiendo hacer una diferenciacin entre cepas patgenas y no patgenas.
Gnero Borrelia

Infeccin
Vector
Reservorio
Geografa
Especie
Fiebre
recurrente
epidmica
Fiebre
recurrente
endmica
Enfermedad de
Lyne
Piojo
Humano
Africa,
sudamrica
B. recurrentis
Garrapata cuerpo Garrapata, roedores Todo el mundo

blando
(Ornithodorus)
Garrapata de
Garrapata, roedores, Todo el mundo
cuerpo duro
animales de compaa
(Ixodes damnini)
Muchas especies
B. burgdoferi

Borrelia burgdoferi provoca de forma ms habitualmente enfermedad de Lyme, la cual est
asociada a vectores, garrapata de cuerpo duro Ixodes damnini, provocando un eritema migratorio, al
menos una manifestacin tarda puede aparecer varios das despus del ataque de la garrapata.
Puede provocar hiperplasia linfartica, invasin sistmica y compromiso cardiaco, muscular y seo.

En general Borrelia puede evadir la respuesta inmunitaria, los sntomas pueden aparecer varios das
despus de la infeccin o no aparecer, con duracin de das a semanas. Cursa con urticaria, eczema,
asociado a quemadura de sol o picadura de pulga, dolor de cabeza, rigidez de nuca, mialgia, artralgia,
fiebre, escalofros, fatiga, anorexia, dolor de garganta y glndulas inflamadas.

El diagnstico se logra por aislamiento de la especie, o por aumento del ttulo de IgG e IgM frente a
la espiroqueta, lo que es identificado por tcnica de ELISA. Si hay un aumento significativo en ste
entre una primera y una segunda muestra, se determina la infeccin por Borrelia.

El tratamiento se realiza con amoxicilina, tetraciclina y cefalosporinas, tenindose penicilina y
ceftriaxona como primera opcin. En estos casos no es necesaria la realizacin de estudios de
susceptibilidad. Para Borrelia recurrentis se emplean tetraciclinas y macrlidos.

La quimioprofilaxis frente a sospecha se realiza con doxicilina o amoxicilina. Se requiere extraer la
garrapata dentro de las primeras 72 horas cuidadosamente sin dejar el aparato bucal que es donde se
encuentra la bacteria.
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175
Familia: Leptospiraceae, Gnero: Leptospira

Reservorio: L. icterohaemorrhagiae: roedores y caninos.
L. pomona: cerdo y bovino.
L. hordjo: bovino.
L. conicola: perro.
Distribucin: cosmopolita.
Transmisin: contacto con animales, especialmente orina,
y suelo contaminado.

Gnero
Filamentos axiales Discos de insercin

Leptospira
2
3 5

Son organismos aerobios cuya fuente de carbono son cidos grasos de cadena larga y alcoholes, de
los cuales actualmente se conocen ms de 250 serovares y 218 serotipos.

Provoca:
- Enfermedad de Weil.
- Ictericia Espiroquetsica.
- Espiroquetosis Icterohemorrgica.
- Ictericia Infecciosa.
- Ictericia Catarral Epidmica.
- Fiebre de los Pantanos.
- Fiebre de otoo en Japn.
- Gripe de Asto.
- Fiebre de las Aguas.
- Fiebre Amarilla Mediterrnea.

Especialmente la especie Leptospira interrogans provoca leptospirosis, un cuadro agudo
caracterizado por la produccin de hemorragias y vasculitis generalizada, a diferencia de Treponema
que solo tiene afinidad por las arteriolas, asociado a cuadro febril, mialgia, cefalea, inyeccin en
conjuntivas, exantema, insuficiencia renal, y, en menor frecuencia, meningitis; acompaada de
ictericia preheptica en un tercio de los pacientes, quienes presentan valores de Bilirrubina superior a
40mg/dL, las enzimas FA, AST y ALT apenas se elevan. Los sntomas pueden ser bifsicos.

Al ingresar al organismo la bacteria produce lesin tisular, seguida de bacteriemia inicial y
produccin de anticuerpos, provocando opsonizacin y avance en el tejido, excretando sustancias
lticas y endotoxinas que determinan una reaccin inflamatoria con exantemas y hemorragias. Hay
colonizacin de la mucosa nasofarngea e invasin y supervivencia en el espacio intravascular,
pudiendo traspasar la Barrera hematoenceflica, provocando meningitis. Hay adems activacin de la
respuesta inmune inflamatoria y lesin neural secundaria, que puede desencadenar infarto cerebral,
hemorragia cerebral occipital, hidrocefalia, hipertensin y edema.

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176
La forma benigna cursa con fiebre, mialgia y artralgias, cefaleas, dolor retro ocular, disfagia, tos,
vmitos y en la cuarta parte de los casos, exantema, durante esta etapa la bacteria hace ingreso al
sistema circulatorio.

La forma grave se desarrolla con los mismos signos y sntomas de la fase benigna, adems de signos
vasculares como congestin nasal, gingival y conjuntival con epistaxis, gingivorragias y conjuntivitis;
hepatomegalia y esplenomegalia, ictericia preheptica; estos sntomas constituyen la enfermedad de
Weil. En orina se encuentran cilindros y proteinuria. En el hemograma los leucocitos estn
aumentados hasta 26.000 y el 50% de los pacientes presentan trombocitopenia anmica causante de
las hemorragias. Existe aumento de bilirrubina, FA y las transaminasas. En radiografas puede haber
Leptospirosis pulmonar, con hemorragia alveolar, y en zonas perifricas.

El diagnstico se logra a travs de deteccin de anticuerpos, el aislamiento de la bacteria en
muestra de biopsia heptica, renal o pulmonar; orina o LCR; habiendo descartado otras causas.

Criterios diagnsticos
Mtodo

Muestra
Bsqueda de Leptospira en
Primeros 8 das
Sangre: +++
campo oscuro
LCR: ++
Orina +
Biopsia-
Cultivo directo de muestras Despus de 8 das
Sangre ++
LCR: ++
Orina: +
Biopsia: +
Titulacin de Anticuerpos
De 8 a 15 das despus
Sangre +++
ELISA (IgM)
LCR:+
Orina:
Biopsia:

El tratamiento se realiza con penicilina y doxicilina.

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177
Bacterias anaerobias de importancia mdica

Bacilos

Gram +

Actinomyces

Eubacterium

Lactobacillus

Bifidobacterium

Mobiluncus

Propionibacterium

Gneros anaerobios
Esporulados
No Esporulados
Cocos
Gram -
Gram +
Bacteroides
Peptococcus
Prevotella
Peptoestreptococcus
Porphyromonas
Anaerococcus
Fusobacterium
Bilophila
Gram -
Clostridium
Veillonella
Finegoldia
Micromonas
Peptoniphilus
Streptococcus
El oxgeno y sus derivados (H2O2, OH-) son compuestos altamente txicos para los organismos ya
que oxida enzimas, protenas, cidos nuclicos, vitaminas y lpidos vitales para la reproduccin
celular. Las bacterias anaerobias al carecer de enzimas como: catalasa, superxido dismutasa y
peroxidasa no son capaces de soportar la presencia de oxgeno y por tanto requieren ambientes con
bajo potencial de xido-reduccin como la piel, mucosas o heridas. Se clasifican en:
- Anaerobios estrictos: no crecen a niveles de O2 mayores a 0,5%.
- Anaerobios moderados: toleran entre 2 a 8% de oxgeno gracias a la presencia de la enzima
superxido dismutasa. Corresponden a la mayor parte de los anaerobios de importancia
mdica. Son capaces de resistir durante 60 a 90 min la exposicin al oxgeno.

Normalmente el ambiente posee una concentracin de oxgeno cercana al 21% y una concentracin
de CO2 de 0,03%, la microaerofilia obtenida mediante una jarra con vela solo reduce la concentracin
de oxgeno a 17% y aumenta a 5% la de CO2, lo cual es insuficiente para el cultivo de estos
microorganismos, por tanto existen sistemas de anaerobiosis que proporcionan un ambiente
absolutamente carente de oxgeno, gracias a la adicin de productos qumicos que lo convierten en
otro compuesto reducido.

El diagnstico de este tipo de bacterias se logra por examen microscpico de muestras teidas con
Gram, sumado a caractersticas macroscpicas diferenciales como la liberacin de compuestos
malolientes, color oscuro, fluorescencia o presencia de grnulos (Actinomyces). Para su aislamiento se
incuban durante 10 das en medios de cultivo especiales como:

-
-
-
-
-
Agar Brucella + vit. k (10 ug/mL) + hemina (5ug/mL) + sangre 5%.

Agar Bacteroides Bilis-esculina (BBE)
Agar sangre Kanamicina + Vancomicina
Fenil etil agar+ vit. k + hemina + sangre 5%.
Caldo tioglicolato, Incubacin: hasta 10 das (a lo menos 48 hrs.)
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178
Actualmente se emplean nuevos mtodos de diagnostico como la tcnica de ELISA buscando las
toxinas de estas bacterias.

Estas bacterias cumplen roles beneficiosos ya que proporcionan resistencia a la colonizacin de
bacterias patgenas, al depletar el oxgeno y los nutrientes, a la vez que producen enzimas, toxinas y
vitamina K. Normalmente se pueden encontrar en pliegues y heridas de la piel, en la mucosa de la
cavidad oral constituyendo el 90% del total de las bacterias de la boca, en la mucosa del tracto
genitourinario, especialmente en la uretra anterior y a nivel vaginal; y en la mucosa del tracto
gastrointestinal, conformando aproximadamente 2/3 de las bacterias presentes en las deposiciones.

Piel: Peptostreptococcus, Propionibacterium.
Cavidad oral y TRS: Prevotella, Porphyromonas, Bacteroides,
Fusobacterium, Peptostreptococcus, Veillonella, Actinomyces.
Estmago: Lactobacillus.
Intestino grueso: Bacteroides fragilis, Porphyromonas,
Fusobacterium,
Clostridium,
Bifidobacterium,
Propionibacterium.
Intestino delgado: Streptococcus, Lactobacillus.
Vagina
y
Crvix:
Prevotella,
Porphyromonas,
Peptostreptococcus, Bacteroides, Veillonella, Lactobacillus,
Eubacterium, Propionibacterium.
Uretra: Prevotella,
Propionibacterium.
Peptostreptococcus,
Fusobacterium,

Se pueden encontrar tambin en pantanos, suelos, lagos, sedimentos de ros y ocanos, aguas
negras, alimentos y animales.

Existen factores que permiten que estas bacterias se comporten como patgenos provocando
infecciones, estos factores son:
- Inmunosupresin (SIDA).
- Trasplantes.
- Diabetes.
- Hospitalizacin prolongada.
- Edades extremas.
- Trauma o ciruga.
- Presencia de cuerpo extrao.
- Destruccin, hipoxia o anoxia tisular.
- Mordeduras o quemaduras.
- Insuficiencia vascular.

Una infeccin provocada por un anaerobio se caracteriza por la produccin de pus ftido, la
formacin de abscesos, debido a su alta actividad proteoltica, provocando gran destruccin de
tejidos; ya la produccin de gas (crpita) en los tejidos y necrosis. La mayora de estas infecciones son
polimicrobianas y prximas a la superficie mucosa. Dentro de los cuadros clnicos se encuentran:
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179
Infecciones intrabdominales, del aparato genital femenino, de la cavidad oral, del TRS, del SNC,
pleuropulmonares, de piel y tejidos blandos; adems de bacteriemias y endocarditis; la mayora de las
cuales provienen de fuentes endgenas (microbiota).

Los gneros que ms frecuentemente causan infecciones en el ser humano son: Grupo Bacteroides
(B. fragilis, Prevotella, Porphyromonas); Peptostreptococcus, Clostridium (C. tetani, C. perfringens, C.
difficile, C. botulinum), Fusobacterium y Actinomyces, con una frecuencia del 70%.

Adherencia a las mucosas:
Colonizacin o infeccin
Invasin:
Produccin de Enzimas
Sobrevivencia a la exposicin de O2
Produccin de toxinas
Sinergismo con otras bacterias
Constituyentes de superficie:
Inducen formacin de abscesos
Inhiben quimiotaxis de PMN
Antifagoctica
Fimbrias (Porphyromonas gingivalis)

Cpsula (Bacteroides fragilis, Porphyromonas
Prevotella y Fusobacterium)
Fosfolipasa A
Neuraminidasa
Colagenasa
DNAsa, RNAsa
Hialuronidasa
Fosfatasa
Elastasa
Heparinasa
Fibrinolisina
Superxido dismutasa (algunas cepas de Clostridium
perfringens)
Hemolisinas (C. perfringens)
Proteinasas (C. perfringens)
Enterotoxinas (C. perfringens A y C; C. difficile)
Con bacterias facultativas y aerobias que consumen
el oxgeno proporcionndoles a los anaerobios
sustancias necesarias para su metabolismo.
Cpsula (Bacteroides fragilis, Porphyromonas,
Prevotella y Fusobacterium)
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180
Bacilos Gram positivos anaerobios estrictos esporulados

Familia Clostridiaceae, gnero Clostridium

Hbitat: Ubicuos (suelo, aguas residuales y parte de la microbiota del TGI de animales
y del ser humano).
Simbiosis: Saprofitos.

Este gnero comprende todos los bacilos Gram+ esporulados de importancia mdica, estos son
pleomrficos y relativamente grandes y gruesos, la mayora mviles que se agrupan solos o en
pequeas cadenas, algunas especies se decoloran fcilmente por lo que se observan Gram-. Son
capaces de formar endosporas ovales o esfricas que generalmente deforman el cuerpo bacteriano y
son resistentes al calor y a los desinfectantes. Pueden ser sacarolticos o proteolticos o ambos, y son
generalmente catalasa negativos. Son anaerobios estrictos aunque se describen especies
aerotolerantes (0,5 8% O2), adems son no exigentes nutricionalmente por lo que crecen en los
medios habituales para bacterias anaerobias. Sus rangos de temperatura oscilan entre 15 y 69 C.

Se han descrito 182 especies, estando 14 asociadas regularmente con enfermedad humana, siendo
Clostridium perfringens la especie ms frecuente. Producen cuadros graves cuyo diagnstico es
fundamentalmente clnico. Se pueden clasificar en:
- Especies citotxicas, causan una variedad de infecciones tisulares, en general luego de
heridas abiertas y otras lesiones traumticas: C. perfringens, C. septicum y C. novyi.
- Especies neurotxicas, por elaboracin de toxina: C. botulinum y C. tetani.
- Especies enterotxicas, producen intoxicacin alimentaria y formas ms severas de
enfermedad gastrointestinal: C. perfringens (tipos A y C) y C difficile.
- Especies productoras de infecciones inespecficas purulentas: C. perfringens y C. ramosum.

Clostridium perfringens

Transmisin: va endgena (microbiota invade tejidos) o exgena (ingestin de
alimentos o agua contaminados con esporas).

Morfolgicamente es un bacilo Gram+, corto y grueso, de bordes redondeados, con formas hasta
cocoides. En los frotis directos de las muestras clnicas no se observan endosporas, pueden
observarse cpsulas. Es anaerobio aerotolerante ya que algunas cepas producen la enzima
superxido dismutasa. Se desarrolla a un pH variable (5,5 8) y en un rango de temperatura que va
de 20 a 50 C. Es la nica especie inmvil del gnero.

Existen cinco tipos diferentes de C. perfringens A, B, C, D y E, que se diferencian por la produccin
de cuatro toxinas letales principales: alfa, beta, psilon y theta, que determinan el cuadro clnico:

- Toxina alfa: es una lecitinasa (fosfolipasa C) que lisa las membranas celulares de los glbulos
rojos, leucocitos, plaquetas y clulas endoteliales. Es responsable de la hemlisis
intravascular. Por si sola produce mionecrosis o gangrena gaseosa.
- Toxina beta: aumenta la permeabilidad vascular y causa lesiones necrticas. Produce los
sntomas en la enteritis necrotizante (C. perfringens tipo C). Puede ser letal.
Susan Arias Donoso
-
-
181
Toxina psilon: aumenta la permeabilidad vascular de la pared gastrointestinal. Se elabora

como protoxina no txica que se transforma en una potente toxina termolbil por accin de
tripsina. Es responsable de la enterotoxemia.
Toxina iota: tiene actividad necrtica y aumenta la permeabilidad vascular provocando
extravasacin de plasma hacia los tejidos.
Enterotoxina: protena termolbil producida en el colon y liberada durante la formacin de la
espora (C. perfringens tipo A). Es causante de intoxicacin alimentaria tras la ingestin de un
nmero elevado de bacilos (dosis infectante 10 8 a 109 MO) e incubacin de 8 a 24 hrs,
provocando dolor abdominal, diarrea acuosa sin fiebre y sin vomito. C. perfringens tipo A se
ha especializado en producir mionecrosis e intoxicacin alimentaria, mientras que las dems
especies, al poseer menor cantidad de toxina alfa no producen estos cuadros.

Toxina
Tipo
Accin en el ser humano
Alfa Beta psilon Theta
A
+
-
-
-
Mionecrosis e intoxicacin alimentaria
B
+
+
+
-
No
C
+
+
-
-
Enteritis necrotizante
D
+
-
+
-
Enterotoxemia
Actividad necrotizante y aumento de la
E
+
-
-
+
permeabilidad vascular

C. perfringens tipo A es el principal responsable de enfermedad humana (intoxicacin alimentaria);
produce alfa toxina y otras de menor poder (omega, kappa, micrn) habita suelos e integra la
microbiota normal de hombre y animales, esta bacteria es la tercera causa de toxiinfeccin
alimentaria bacteriana despus de Salmonella spp y S. aureus. Los tipos B, C, D y E existen en el tracto
gastrointestinal de animales y solo ocasionalmente en el ser humano, producen una variedad de
enfermedades en animales domsticos y no habitan de forma permanente los suelos.

C. perfringens tipo C provoca enteritis necrotizante a causa de la toxina beta, una enfermedad ms
severa que la causada por el tipo A. tiene un periodo de incubacin menor a 24 horas luego del cual
aparecen dolor abdominal intenso y diarrea, en algunos pacientes ocurre prdida de la mucosa
intestinal con enterorragia. Puede ser letal con shock u oclusin intestinal y peritonitis. La
administracin de la antitoxina reduce la mortalidad.

La gangrena gaseosa es la enfermedad ms caracterstica de esta especie, la que puede ser de
origen externo o endgeno. En ella participan adems de C. perfringens otra especies acompaantes:
C. novyi, C. septicum, C. bifermentans, C. sordelii, C. sporogenes y otras bacterias anaerobias
facultativas.

Al cultivo en agar sangre incubado en anaerobiosis a 37 C durante 24 -48 horas, se observan
colonias planas extendidas de 2 a 4 mm de dimetro. En este medio presenta hemlisis doble,
compuesta por una estrecha zona de hemlisis completa producida por la toxina alfa y una zona ms
amplia de hemlisis incompleta producida por la toxina theta. Produce fermentacin tormentosa de
la leche, la fermentacin de la lactosa produce gran cantidad de cido, lo que provoca la coagulacin
de las protenas (casena), luego el cogulo es alterado y roto por el gran volumen de gas formado a
partir de la fermentacin de la lactosa (esta reaccin tambin es producida por C. septicum y otras
especies). Tambin produce gas a partir de glucosa, no produce indol, hidroliza la gelatina y es
altamente sacaroltico y proteoltico.
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182
El tratamiento se realiza empleando fuertes dosis de penicilina y antisueros contra la toxina alfa,
requiere adems el uso de cmara de oxgeno hiperbrica, con el fin de evitar que la bacteria pase de
la forma esporulada a la forma vegetativa). El cuadro clnico tiene una mortalidad entre 40% y casi el
100%. La mayora de las infecciones se previenen mediante un cuidado correcto de las heridas y el
uso adecuado de ATB profilcticos.

Clostridium tetani

Agente etiolgico: ttano.
Hbitat: presente en el suelo y heces de animales.
Transmisin: contacto de heridas con esporas.

Es un bacilo largo y delgado en comparacin con las otras especies del gnero, mvil por la
presencia de flagelos pertricos, poseedor de una espora terminal que deforma el cuerpo bacteriano
si la bacteria se encuentra en cultivo, ya que durante el proceso infeccioso no hay presencia de
esporas. Es aerobio estricto y muy difcil de cultivar por su alta sensibilidad al oxgeno y sus complejos
requerimiento nutricionales, entre ellos ciertos aminocidos y vitaminas, es capaz de crecer en agar
sangre, donde produce una beta hemlisis circunscrita, y en caldo con carne cocida. No fermenta
ningn hidrato de carbono y tienen escasa actividad metablica. Es una especie asacaroltica y
proteoltica. Es capaz de producir H2S, no produce lecitinasa ni lipasa e hidrolizan la gelatina.

Las esporas de C. tetani son capaces de persistir en el medio ambiente durante meses o aos. Para
su aislamiento debe sembrarse de inmediato en medios slidos prerreducidos y medios de cultivo
lquidos para anaerobios. Las colonias son translcidas con borde que avanza filamentoso y delicado.
La prueba final para la identificacin es la demostracin de la produccin de la toxina tetnica in vivo
cuando se inyecta en ratones, y la neutralizacin de su toxicidad en ratones previamente inoculados
con la antitoxina.

Produce un trastorno neurolgico, llamado ttano, que cursa con espasmos y aumento del tono
muscular estriado, causado por la tetanospasmina, una toxina proteica plasmidial producida por la
clula vegetativa en fase estacionaria y liberada por lisis bacteriana. La germinacin y produccin de
la toxina ocurre en tejidos desvitalizados tras un periodo de incubacin de 4 a 5 das.

La enfermedad se puede manifestar de dos maneras, un ttanos generalizado, en el cual se afectan
los maseteros, dando lugar al trismo, la risa sardnica, salivacin, sudoracin, irritabilidad y espasmos
persistentes de los msculos de la espalda (opisttonos), adems puede afectarse el sistema nervioso
autnomo dando lugar a arritmias cardacas, fluctuaciones de la presin arterial, sudoracin intensa y
deshidratacin. La muerte se produce porque afecta la respiracin. Durante este proceso el paciente
se encuentra totalmente consciente y presenta fuertes dolores. El ttanos localizado afecta la
musculatura solo de la zona de infeccin primaria.

El ttano se debe a la produccin de dos toxinas: la tetanospasmina y tetanolisina, esta ltima es
una hemolisina que tiene accin hemoltica y necrtica local. La tetanospasmina es una toxina de tipo
A-B, la unidad B se une al receptor y mientras que la A tiene efecto txico, al penetrar al SNC se fija a
la sinapsis nerviosa unindose de forma especfica a un lpido glanglisido evitando la liberacin de
glicina, impidiendo la relajacin muscular.

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183

El tratamiento incluye la administracin de antitoxina que neutraliza la toxina circulante y la an no
fijada en la herida, se emplean adems relajantes musculares y sedantes. La terapia antimicrobiana
incluye la utilizacin de penicilina, con el fin de evitar la multiplicacin de la bacteria y detener la
produccin de la toxina. De manera preventiva se administra una vacuna, basada en el toxoide
tetnico, a los 2, 4, 6, 18 meses y a los 4 aos.

Clostridium botulinum

Agente etiolgico: botulismo

Resistencia: espora resiste hasta 100 C por 20 minutos.
Transmisin: consumo de alimentos contaminados con la toxina preformada o
contaminacin de heridas con esporas.

Es un bacilo largo, mvil por flagelacin pertrica, no capsulado, recto o levemente curvo, con
extremos redondeados, poseedor de una espora oval y subterminal que deforma al soma bacteriano,
son anaerobios estrictos con requerimientos nutricionales complejos. La resistencia al calor de la
espora es mayor que la de cualquier otro microorganismo anaerobio, sobreviven varias horas a 100 C
y hasta 10 minutos a 110 C, las esporas tambin son resistentes a radiaciones y pueden sobrevivir a -
190 C, sin embargo la coccin de rutina de los alimentos enlatados limita la frecuencia de este tipo
de intoxicacin. Las esporas se encuentran distribuidas en suelos, vegetales y agua de todo el mundo,
y en escasa cantidad en el contenido intestinal de mamferos, pjaros y peces.

Esta especie produce la exotoxina ms potente que se conoce, corresponde a una neurotoxina
producida durante el desarrollo de la bacteria y liberada por autolisis, causante del botulismo, una
enfermedad neuroparaltica caracterizada por el comienzo sbito y evolucin rpida que culmina en
una parlisis marcada y un paro respiratorio. La enfermedad es rara en el ser humano y es muy
comn en animales.

Se han descrito 8 tipos serolgicamente distintos de la exotoxina: A, B, C1, C2, D, E, F y G, segn
ellas y su actividad proteoltica es posible dividir a los microorganismos en cuatro tipos (I a IV). La
enfermedad humana est vinculada a los tipos I y II y a la toxina A principalmente. Todas las toxinas
son del tipo A-B, donde es la unidad B quien se une al receptor y la A quien posee el efecto txico. Se
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184
fija a la membrana presinptica en la unin neuromuscular bloqueando la liberacin de acetilcolina,
inhibiendo as la contraccin muscular, por tanto provoca una parlisis flcida que comienza con la
participacin de los nervios craneales y se extiende hacia las extremidades. Los sntomas aparecen 18
24 hrs despus de ingerir alimentos contaminados, con trastornos visuales, incapacidad para
deglutir y hablar, la muerte ocurre por paro respiratorio o cardiaco.

El diagnstico se logra con aislamiento y realizacin de pruebas bioqumicas. La enfermedad se
confirma por la presencia de la toxina en suero, heces o contenido gstrico del paciente, adems se
realiza deteccin de la toxina en los alimentos como medida profilctica. El tratamiento incluye la
administracin de antitoxina trivalente (A, B, E) y ventilacin mecnica si es necesario.

Clostridium difficile

Reservorio: humano, portacin 1 3% adultos sanos, 50% nios, 10 33% adultos

hospitalizados.
Importancia epidemiolgica: infecciones nosocomiales.

Son bacilos Gram+ largos, mviles, poseedores de una espora oval terminal o subterminal no
deformante, que se agrupan en pequeas cantidades. Son anaerobios obligados, sacarolticos y
dbilmente proteolticos, no producen lipasa ni lecitinasa, fermenta glucosa pero no maltosa, lactosa
ni sacarosa, no producen indol, H2S ni reduce los nitratos a nitritos. En medio slido producen
colonias de 2 a 3 mm de dimetro, de bordes irregulares, planas y grisceas. En agar sangre no
producen hemlisis.

Produce 2 toxinas proteicas antignicamente diferentes durante la fase de crecimiento activo:
enterotoxina (toxina A) y citotoxina (toxina B), ambas producen una gastroenteritis asociada con el
uso prolongado de ATB, que cursa de forma leve autolimitada o como Colitis Pseudomembranosa
grave, potencialmente mortal. La toxina A produce infiltracin de PMN en el leon, y liberacin de
citoquinas, produciendo una hipersecrecin de lquidos que progresa a una necrosis hemorrgica. La
toxina B causa despolimerizacin de la actina con destruccin del citoesqueleto celular.
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185
Esta especie forma parte de la microbiota del intestino del ser humano y los animales. Bajo
condiciones normales se encuentra en el intestino del 10% de la poblacin adulta. La transmisin
nosocomial a travs del contacto directo paciente-paciente es frecuente y de difcil control,
contribuyendo a un significativo aumento de la morbilidad y de los das de hospitalizacin.

El diagnstico se realiza por la tcnica de ELISA, en bsqueda de las toxinas A y/o B o de Ag en
deposiciones, o por deteccin de antgenos por aglutinacin en ltex. El tratamiento de los casos
leves se realiza interrumpiendo la administracin del ATB implicado, en los casos graves se realiza
terapia con metronidazol o vancomicina.

Bacilos Gram positivos anaerobios estrictos no esporulados

Familia Eubacteriaceae, gnero Eubacterium

Esta familia est compuesta por 6 gneros, de los cuales solo tiene importancia para el ser humano
Eubacterium, un gnero compuesto por bacilos Gram+ agrupados en cadenas cortas, similares a
Corynebacterium, inmviles o mviles, que producen mucho H2 y lo liberan al exterior dando lugar a
una atmsfera reducida que favorece el crecimiento de anaerobios, solo algunas de ellas son
sacarolticas.

Habitan en el intestino de humanos y animales, en heces tambin en piel y vas respiratorias altas,
pudiendo comportarse como patgenos oportunistas provocando infecciones respiratorias y
vaginales. E. nodatum se ha asociado a infecciones por dispositivos intrauterinos, la especie ms
aislada desde cuadros clnicos del ser humano es E. limosum.

A pesar que algunas especies de este gnero se pueden aislar en muestras clnicas tienen un
potencial de virulencia muy bajo y generalmente se aslan como contaminantes sin significacin
clnica. La confirmacin de su papel etiolgico en una infeccin requiere el aislamiento repetido del
microorganismo a partir de mltiples muestras y la ausencia de otros microorganismos patgenos.

Familia Lactobacillaceae, gnero Lactobacillus

Esta familia est compuesta por 3 gneros se los cuales solo tienen importancia para el ser humano
Lactobacillus. Son bacilos Gram+ largos, delgados e inmviles, de bordes paralelos y extremos
rectangulares que se agrupan formando cadenas. Pueden ser anaerobios facultativos, microaerfilos
o anaerobios estrictos. Son catalasa positiva y producen cido lctico como principal derivado de la
fermentacin, sus requerimientos nutricionales son complejos y su crecimiento ptimo ocurre en
condiciones cidas (pH 4,5 6,4).

Se encuentran en la superficie de las plantas y en la carne, agua, frutas y otros productos
alimenticios. Son indispensables para la industria del alimento donde se utilizan para la fermentacin
de alimentos y bebidas. En el ser humano se encuentran formando parte de la microbiota de la boca,
estmago, intestino y tracto gnito urinario, constituyen la microbiota vaginal predominante en
mujeres en edad frtil, donde ejercen efectos beneficiosos al cubrir receptores celulares, evitando la
colonizacin de patgenos; adems generan pH cido en la vagina lo que impide el crecimiento de
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186
otras bacterias patgenas u hongos como Candida albicams. Son los organismos ms frecuentes en la
uretra, por tanto su recuperacin en los urocultivos procede invariablemente de la contaminacin de
la muestra. La razn por la cual los lactobacilos rara vez producen infecciones del tracto urinario es su
incapacidad para crecer en orina.

Generalmente no son patgenos, por el contrario, su efecto beneficioso ha sido demostrado y se
administran como probiticos, un suplemento alimentario que mejora el balance microbiano
intestinal, en la prevencin y tratamiento de algunas enfermedades como la diarrea asociada a
antibiticos, diarrea aguda infantil, diarrea del viajero, colitis alrgica, entre otras patologas. Sin
embargo bajo determinadas circunstancias pueden invadir el torrente sanguneo ocasionando
bacteriemias transitorias de origen genitourinario, endocarditis y sepsis en pacientes
inmunodeprimidos. L. catenaformis se ha descrito en infecciones pulmonares.

Familia Bifidobacteriaceae, gnero Bifidobacterium

Esta familia incluye dos gneros de importancia para el ser humano Gardnerella y Bifidobacterium,
el primero de ellos es aerobio estricto mientras que el segundo es anaerobio estricto, sin embargo su
sensibilidad al oxgeno vara entre cepas y especies. Los miembros del gnero Bifidobacterium son
bacilos Gram+ gruesos de extremos bifurcados que se pueden presentar solos o en cadenas de
muchos elementos, en agregados formando una estrella o en forma de V, los que no forman esporas
y no son mviles. Son catalasa e indol negativos, hidrolizan la esculina, y su temperatura ptima de
crecimiento oscila entre 37 y 41C.

Se han descrito 32 especies de las cuales 8 se encuentran en el ser humano, ellas forman parte de la
microbiota del tracto intestinal de mamferos, su presencia en las distintas especies animales vara
segn la especie, el individuo, la edad y la alimentacin, se encuentran en altas concentraciones en
las heces de nios recin nacidos y disminuyen con la edad, all tienen un importante papel en la
resistencia a infecciones de tipo gastrointestinal. Se les encuentra tambin en la vagina y en la
cavidad oral, en este ltimo hbitat la especie B. dentium a veces se asla en placa dental en caries y
en abscesos odontognicos. Tambin se han asociado a infecciones oportunistas.

Familia Propionibacteriaceae, gnero Propionibacterium

Esta familia posee 6 gneros, siendo solo Propionibacterium el nico de importancia para el ser
humano, son bacilos Gram+ pleomrficos, pudiendo observarse formas cocoideas, tipo difteroidal
(morfolgicamente similares a Actinomyces) que se pueden agrupar en pequeas cadenas y que
pueden ser tanto inmviles como mviles. Son anaerobios aerotolerantes, fermentan la glucosa
dando lugar a cido propinico y cido actico en grandes cantidades.

Este gnero presenta 11 especies, de ellas P. acns, P. avidum y P. popionicum tienen inters en
odontologa ya que causan infecciones endodnticas como pulpitis y radiculitis.

P. acnes es encontrado por poco tiempo en la piel de neonatos, pero la verdadera colonizacin
comienza durante el primer a tercer ao previo al inicio de la madurez sexual cuando el nmero se
eleva desde 10/cm2 a 106/cm2, especialmente en la cara y en la porcin superior del trax, donde es
agente de acn y ocasionalmente puede producir endocarditis; puede ser aislado tambin del tracto
Susan Arias Donoso
187
gastrointestinal, como forma parte de la microbiota de la piel es un problema constante en la toma

de muestra de sangre y puncin lumbar, constituyendo contaminantes habituales de muestras
sanguneas y de LCR.

P. granulosum se ubica en los mismos sitios anatmicos que P. acns pero en menor proporcin que
esta ltima especie (1 en 100). P. avidum es encontrado en la axila ms que en zona expuestas y
aumenta su nmero en la pubertad. P. propionicum ha sido implicado como agente causal menos
comn de una enfermedad similar a la actinomicosis.

Familia Actinomycetaceae

Esta familia posee 4 gneros, siendo Actinomyces y Mobiluncus los de importancia para el ser
humano.

Gnero Actinomyces
Este gnero posee 31 especies, son bacilos Gram+ ramificados, anaerobios estrictos o facultativos,
algunos de ellos microaerfilos, inmviles, no cido-alcohol resistentes y no capsulados que forman
colonias pequeas y filamentosas tras 7 a 14 das, con aspecto rugoso o aracnoideo.

Son agentes de la enfermedad endgena conocida como micetoma actinomictico (actinomicosis
cervicofacial), la cual sigue a un traumatismo local en un lugar donde normalmente habita esta
bacteria, para producir invasin en los tejidos ms profundos, especialmente en cara y cuello,
produciendo abscesos y fstulas en cuyas descargas purulentas es posible observar a simple vista
grnulos , compuestos por
filamento de la bacteria ms fosfato de calcio. Se les ha asociado tambin a bacteriemias, empiemas y
abscesos ovricos.

Son considerados primariamente patgenos oportunistas, pueden formar parte de la microbiota de
la boca, aparato genital femenino y aparto gastrointestinal de los adultos. Las especies ms
importantes que se han aislado en el hombre son: A. israelii, A. naeslundii, A. viscosus, A.
odontolyticus y A. bovis.

A. israelii es el agente etiolgico ms frecuente de las actinomicosis, otras especies como A.
naeslundii, A. viscosus, A. odontolyticus, A. meyeri y A. gereneseriae, as como un organismo
relacionado con este gnero, P. propionicum, pueden originar cuadros compatibles con una
actinomicosis clsica. Se ha estimado que del 1,6 a 11,6% de las mujeres portadoras de dispositivo
intrauterino sufren una infeccin por A. israelii.

A. israelii y A. bovis producen infecciones a nivel ocular, conjuntivitis, queratitis; e intraocular; la
cual puede diseminarse a huesos, SNC, hgado, bazo, riones, extremidades, pelvis (cervicitis,
endometritis).

Gnero Mobiluncus
Es un bacilo Gram+ que se decolora con mucha facilidad pareciendo ser Gram-, es anaerobio, curvo
y mvil por mltiples flagelos subsolares, no produce catalasa y es resistente a colistin y cido
nalidxico. El gnero comprende dos especies bien definidas y morfolgicamente diferentes: M.
mulleris y M. curtisii, este ltimo incluye dos subespecies: subesp. curtisii y subesp. holmesii. M.
Susan Arias Donoso
188
mulleris mide de 1,9 a 6 um de largo, aparece curvada en media luna e incluso forma semicrculos,
invariablemente se tie como Gram- y tiene de 1 a 8 flagelos con origen mltiple. M. curtisii mide de
0,8 a 3 um de largo, puede teirse como Gram+ o Gram-, tiene de 1 a 6 flagelos que salen de una
insercin comn.

La bacteria se diagnostica en el exudado vaginal y endocervical mediante 2 mtodos: frotis para la
coloracin Gram y cultivo, el cual es lento y fastidioso.

Su hbitat es el tracto genital femenino, donde por desequilibrio de la microbiota puede causar
vaginosis bacteriana. Adems este gnero est relacionado con otras patologas como coriomnionitis,
nacimientos a pretrmino, enfermedad inflamatoria plvica post aborto y endometritis post cesrea.

Cocos Gram positivos anaerobios estrictos

Familia Peptococcaceae

Esta familia est compuesta de 10 gneros, de los cuales solo tienen importancia para el ser humano
el gnero Peptococcus, el cual presenta solo una especie Peptococcus niger, corresponde a cocceas
Gram+, agrupados solos o de a pares, en ttradas o masas irregulares. Las colonias en agar sangre son
no hemolticas con pigmento negro. Su aislamiento es de baja frecuencia.

Familia Peptostreptococcaceae

Esta familia est compuesta por 12 gneros de los cuales solo tienen importancia para el ser
humano los gneros: Peptostreptococcus, Anaerococcus, Micromonas, Peptoniphilus y Finegoldia.
Estos gneros son cocos de tamao irregular y decoloracin parcial, se agrupan en pares, ttradas,
racimos. Formar parte de la microbiota de la boca, intestino y genitales. Se encuentran involucrados
en infecciones pleuropulmonares, endocarditis, abscesos, infecciones ginecolgicas y sinusitis.

Peptostreptococcus anaerobius
Es la nica especie del gnero, las otras especies actualmente forman parte de otros gneros.

Finegoldia magna
Anteriormente esta especie se denominaba Peptostreptococcus magnus, es la nica especie del
gnero Finegoldia y est constituida por cocos Gram+ anaerobios estrictos, no esporulados e
inmviles, cuyas clulas poseen un dimetro mayor a 0,6 um y se disponen en pares, ttrada y
acmulos. Forma parte de la microbiota residente de la piel, tractos gastrointestinal y genitourinario
femeninos, y en menor grado, de la cavidad oral. La especie se caracteriza por ser asacaroltica,
aunque algunas cepas pueden fermentar dbil y lentamente la glucosa. Su principal fuente de energa
la constituyen aminocidos y peptonas.

Los cocos Gram+ anaerobios representan del 25 al 30% de todos los aislamientos de bacterias
anaerobias, y F. magna es una de las especies que se cultiva con mayor frecuencia de muestras
clnicas, como abscesos y otras infecciones de piel y partes blandas, huesos y articulaciones, en
general en cultivos polimicrobianos, excepcionalmente en cultivo puro.
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Micromonas micros
Anteriormente esta especie se denominaba Peptostreptococcus micros corresponde a cocos Gram+
anaerobios aerotolerantes, directamente asociados con periodontitis. Esta bacteria es un indicador
temprano de gingivitis inflamatoria.

Familia Streptococcaceae

A esta familia pertenece el gnero Streptococcus, el cual solo posee tres especies anaerobias: S.
anginosus, S. constellatus y S. intermedius, actualmente se conocen como Streptococcus grupo
anginosus (ex milleri). De acuerdo a la clasificacin de Lancefield, poseen antgenos del grupo F y G
principalmente, pero tambin pueden presentar los antgenos A y C. Dado que la clasificacin en base
a la aglutinacin del carbohidrato C puede ser errnea, la identificacin de estas especies es compleja
y requiere de numerosas pruebas bioqumicas y fisiolgicas, muchas veces no disponibles en un
laboratorio clnico, llegando solo al diagnstico microbiolgico de grupo anginosus.

Aunque son comensales habituales de la cavidad oral, orofaringe, tracto gastrointestinal y genital,
pueden ocasionar infecciones patgenas e invasivas, con tendencia a la formacin de abscesos,
bacteriemia, endocarditis y ocasionalmente septicemia y shock sptico. S. constellatus es un
comensal habitual de la boca, garganta, tracto gastrointestinal y vagina. Como comensal orofarngeo
no suele provocar infecciones, pero como consecuencia de infecciones agudas de otro foco, cirugas o
manipulaciones de la va digestiva como gastroscopa o de la va respiratoria como broncoscopa
pueden ser causa de abscesos dentales, del sistema nervioso central, cavidad abdominal,
endocarditis, empiema pleural y absceso pulmonar. El compromiso pulmonar y pleural constituye
menos de 25% del total de infecciones causadas por este microorganismo.

Cocos Gram negativos anaerobios estrictos

Familia Veillonellaceae

Esta familia est compuesta por 26 gneros de los cuales solo tienen importancia para el ser
humano el gnero Veillonella y en menor importancia Selenomonas y Megasphaera.

Gnero Veillonella
Son diplococos Gram- que constituyen una fraccin muy importante de la poblacin bacteriana total
de las superficies epiteliales de la cavidad oral del ser humano y son los anaerobios ms numerosos
en saliva. Tambin son parte de la microbiota del colon y la vagina. Entre las especies aisladas en
cavidad bucal se encuentran: V. dispar, V. prvula y V. atypica. Pueden comportarse como patgenos
oportunistas provocando infecciones periodontales y de tejidos blandos de la boca, en heridas por
mordeduras, e infecciones en cabeza, cuello y pulmones.

Para su aislamiento se han propuesto diferentes medios de cultivo. Las colonias de Veillonella spp
producen fluorescencia roja visible sobre el agar BHI cuando son expuestas a la luz UV de onda larga
(366 nm), que desaparece en contacto con el oxgeno, sta es una importante diferencia con
Prevotella y Porphyromonas pigmentadas que solo fluorescen en medios con sangre. Esta propiedad
sera til para su identificacin presuntiva rpida.
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La colonizacin oral con Veillonella spp es considerada un indicador de salud oral, por su habilidad
para neutralizar la acidez local en la placa dental. Estos microorganismos raramente causan
infecciones locales o diseminadas, pero bajo algunas circunstancias se comportan como patgenos
oportunistas que pueden producir abscesos en senos, amgdalas, cerebro e infecciones mixtas
causadas por anaerobios.

Bacilos Gram negativos anaerobios estrictos

Gnero Bacteroides

Hbitat: intestino, heces contienen alrededor de 108 a 1011 bacteroides/g de materia fecal.

Es el nico gnero de importancia clnica dentro de la familia Bacteroidaceae. Son bacilos Gram-
anaerobios obligados, pleomrficos, mviles o inmviles. Estn presentes en gran cantidad en el
intestino grueso del ser humano y otros vertebrados, alcanzando 1011 o ms por gramo de materia
fecal y son los ms predominantes, junto con los estreptococos anaerobios, son sacarolticos,
hidrolizan la esculina y no reducen nitratos a nitritos. Constituyen el 90% de los aislamientos de
anaerobios en muestras clnicas, donde se diagnostica utilizando Cromatografa Liquida Gaseosa.

El gnero incluye muchas especies de las cuales B. fragilis y B. thetalotamicron son los patgenos
ms prominentes. Otras especies descritas son B. vulgatus, B. ovatus, B. distasonis y B. ureolyticus.
Las especies de este gnero se asocian a infecciones anaerobias subdiafragmticas y genitales, por su
vecindad con la porcin final del aparato digestivo y regin perineal, y sepsis a punto de partida de
estas infecciones.

Bacteroides fragilis

Resistencia: penicilina y 20% bilis.

Presenta tincin bipolar al Gram, produce catalasa y es frecuentemente no hemoltica en agar
sangre, sus colonias miden 1 a 3 mm de dimetro, son circulares, convexas, blanco grisceas,
brillantes y su superficie se observa granulosa.

Forma parte de la microbiota en diversas cavidades del cuerpo humano y es el anaerobio ms
importante desde el punto de vista clnico, por la presencia de factores de virulencia adicionales, no
solo por su alta frecuencia sino tambin por la resistencia a los agentes antimicrobianos usados
tradicionalmente para combatirlo. En el colon representa el 0,5% de la microbiota mientras que en el
tracto genital femenino se encuentra en una frecuencia relativamente baja. Forma parte del complejo
etiolgico asociado a la vaginosis bacteriana. Es agente productor de abscesos intrabdominal,
retroperitoneales, enfermedad inflamatoria plvica y de la peritonitis que se presenta despus de una
lesin en la mucosa intestinal, ya sea por ciruga, un apndice roto o un cncer perforante de coln.
La artritis sptica causada por esta especie es una entidad rara que ocurre principalmente en
pacientes inmunodeficientes. Adems son causantes de infecciones pleuropulmonares y genitales de
origen endgeno, aparecen como infecciones mixtas con tendencia a la formacin de abscesos.
El grupo fragilis est compuesto por:
Susan Arias Donoso

-
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-
-
-
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B. fragilis
B. distasonis
B. thetaiotaomicron (segundo en frecuencia)
B. vulgatus
B. ovatus
Factores de virulencia:
- Cpsula: en productos patolgicos es de polisacrido altamente antignico y gran virulencia.
Es responsable de la adherencia, formacin de abscesos y protege a la bacteria contra la
fagocitosis.
- Enzimas: colagenasa, fosfatasa, heparinasa, proteinasa, betalactamasas, hialuronidasa.
- LPS

Familia Prevotellaceae, gnero Prevotella

Esta familia est compuesta de 2 gneros, de los cuales solo tiene importancia para el ser humano el
gnero Prevotella. La mayor parte de sus especies correspondan anteriormente al gnero
Bacteroides.

Son bacilos Gram- anaerobios estrictos, inmviles. Sus colonias en medios con sangre miden hasta 2
mm de dimetro, son circulares, convexas, brillantes, lisas y pueden presentar un pigmento gris, caf
o negro. En relacin con esta capacidad se distinguen las siguientes especies de mayor inters del
gnero Prevotella:
- Pigmentadas: P. melaninogenica, P. intermedia, P. corporis, P. loescheii y P. nigrescens.
- No Pigmentadas: P. bivia, P. oralis, P. ruminicola, P. buccalis y P. buccae
- Pigmento variable: P. denticola.

P. melaninogenica es el bacilo Gram- anaerobio ms aislado despus de B. fragilis. Es un bacilo muy
corto, de extremos redondeados, pleomorfo que presenta vacuolas, sobre todo en medios lquidos,
puede agruparse en cadenas cortas. Requiere Vitamina K y Hemina para su crecimiento, el cual es
muy lento, alcanzando hasta 3 semanas. Es sensible a bilis (20%) lo cual permite diferenciarla de B.
fagilis; en agar sangre produce un pigmento negro derivado de la hemina, las colonias jvenes emiten
fluorescencia bajo luz UV, para luego aparecer la pigmentacin negra caracterstica. Se le asla
principalmente en cuadros infecciosos del tracto respiratorio superior y genital. P. oralis es un bacilo
Gram- anaerobio implicado en periodontitis. Adems es un posible causante de infecciones
ginecolgicas, osteomielitis, infecciones de tejidos blandos e incluso de endocarditis. P. ruminicola es
un bacilo Gram- anaerobio relacionado con infecciones periodontales aunque tambin hay algunos
casos descritos de infecciones y abscesos pulmonares.

Forma parte de la microbiota de la Orofaringe, TRS, tracto intestinal y genital femenino; pueden
provocar infecciones en la boca como periodontitis, gingivitis abscesos periodontales y periapicales, la
gingivitis se da principalmente en embarazadas pues estas bacterias degradan hormonas que se
sintetizan durante la gestacin. Adems provocan infecciones en cabeza, cuello e infecciones
pleuropulmonares. P. melaninogenica, P. intermedia, P. corporis, P. denticola y P. loescheii son
miembros de la microbiota de la boca, vas respiratorias superiores y partes blandas subyacentes. P.
bivia prevalece en la microbiota vaginal y produce vaginosis e infecciones de origen obsttrico.
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Dentro de sus Factores de Virulencia se encuentran proteasa que inducen supuracin en los tejidos.
Produce Infecciones del TRS y patologas del Tracto genital femenino como: Infeccin Pelviana Aguda
y Endometritis.

Familia Porphyromonadaceae, gnero Porphyromonas

Esta familia est compuesta de 8 gneros, de los cuales solo tiene importancia para el ser humano
el gnero Porphyromonas. Son bacilos o cocobacilos Gram- anaerobios estrictos inmviles que no
hidrolizan la esculina. Para su metabolismo utilizan principalmente aminocidos y no fermentan
hidratos de carbono. En el cultivo en agar sangre, con vitamina K y hemina, las colonias crecen muy
lentamente (7 15 das), alcanzando un dimetro de 1 a 3 mm. Las colonias pigmentadas van
tomando una coloracin marrn y finalmente negra brillante desde el borde hacia el centro.

P. gingivalis es una especie asociada a las periodontitis crnicas y abscesos periapicales, su hbitat
es el suco gingival, formando parte de la placa subgingival. En asociacin con Fusobacterium
nucleatum provoca gingivitis y periodontitis. P. endodontalis es menos patgena por poseer menos
factores de virulencia, forma parte de la microbiota de la boca y encas. P. asaccharolytica se asla en
heces y est en un bajo nmero en la cavidad oral.

- Fimbria tipo II: se unen a la fibronectina e integrina, permitiendo as la adherencia e invasin
de clulas epiteliales.
- Adhesinas/hemaglutininas: se unen a eritrocitos, endotelio vascular, fibronectina y
fibringeno.
- LPS: endotoxina.

Familia Fusobacteriaceae, gnero Fusobacterium

Es el nico gnero de esta familia, compuesta por cuatro gneros, con importancia para el ser
humano. Son bacilos Gram- anaerobios estrictos muy pleomorfos de tamao irregular, pueden ser
desde cocobacilos a filamentos largos agrupados solos o de a pares, con forma de huso con extremos
puntiagudos, inmviles, no fermentativos, catalasa negativos, no reducen nitratos a nitritos, son
resistentes a discos de 5 um de vancomicina y sensibles frente a 10 um de colistin y 1000 ug de
kanamicina. Forman parte de la boca, TRS, TGI y Tracto genital, y tienen la capacidad de formar
biofilms sobre los dientes.

El gnero presenta 13 especies de las cuales 6 especies son causantes de infecciones en el ser
humano, la principal especie es Fusobacterium nucleatum.

Fusobacterium nucleatum
Esta especie posee 5 subespecies F. nucleatum subesp. nucleatum, subesp. polymorphum, subesp.
vincentii, subesp. fusiforme y subesp. animalis. Tpicamente son bacilos largos con extremos en punta
o filamentos delgados. Producen alfa y beta hemlisis en los cultivos en agar sangre y las colonias son
translcidas, de formas varias y a veces irregulares. Es indol positivo, esculina negativo, lipasa y H 2S
negativo. Esta especie es la ms frecuentemente aislada dentro del gnero y forma parte de la
Susan Arias Donoso
193
microbiota de la boca, tracto respiratorio superior, tracto genital y gastrointestinal. En agente causal
de infecciones orales, abscesos de pulmn, otras infecciones pleuropulmonares e infecciones del
lquido amnitico. Es el agente etiolgico principal de la Angina de Vincent en asociacin con Borrelia
vincentii, la cual es una infeccin necrtica de amgdalas y faringe, que presenta un exudado
purulento membranoso, acompaada de mal olor. Adems se halla en una variedad de infecciones
subdiafragmticas.

Fusobacterium necrophorum
Este especie posee 2 subespecies F. necrophorum subesp. necrophorum y subesp. funduliforme. Es
un anaerobio muy virulento que puede causar infeccin ampliamente diseminada, sin embargo su
frecuencia de aislamiento es baja, pertenece a la microbiota de la cavidad oral y otras mucosas y est
asociado a infecciones orofarngeas que dan origen a una infeccin sistmica, como la llamada
necrobacilosis, septicemia postanginosa o sndrome de Lemierre, caracterizado por la tromboflebitis
sptica de la vena yugular con abscesos metastsicos y una mortalidad de un 4 a 12%, de stos la
afectacin pulmonar es la ms frecuente con la formacin de abscesos pulmonares y empiema, el
derrame pleural ocurre en un 43% pudiendo preceder a los infiltrados pulmonares, asimismo la
insuficiencia respiratoria se da en un 15% requiriendo frecuentemente soporte ventilatorio.

Corresponden a cocobacilos o filamentos largos Gram- con extremos redondeados, siendo ms
abultados en el sector medio. En cultivo slido produce colonias mamelonadas. Produce lipasa, H 2S e
indol.

Familia Leptotrichiaceae, gnero Leptotrichia

Esta familia est compuesta por 4 gneros de los cuales solo tiene importancia para el ser humano
Leptotrichia, los que son bacilos anaerobios inmviles Gram- rectos o ligeramente curvados, de 5 a 15
um de longitud, con uno o ambos extremos redondeados, a menudo aguzados. Se puede observar
grnulos Gram+ distribuidos a lo largo del eje, y uno o ms grnulos pueden localizarse cerca del
extremo de la clula. Dos o ms clulas se pueden juntar y formar filamentos septados de longitud
variable. En cultivos viejos se pueden formar filamentos de hasta 200 um de longitud los cuales
pueden girar alrededor de otros, se pueden encontrar cuerpos cocoides grandes dentro de un
filamento como producto de lisis celular. Es esencial el CO2 para su crecimiento ptimo, es capaz de
producir acido lctico a partir de glucosa.

La especie tipo es Leptotrichia buccalis que forma parte de la microbiota de la cavidad oral en el ser
humano y ocasionalmente se le encuentra en intestino y vagina. Se le ha asociado a endocarditis
infecciosa en pacientes inmunocomprometidos y se ha aislado en hemocultivos de pacientes con
lesiones en la mucosa oral y neutropenia. Es considerado patgeno emergente.

Familia Desulfovibrionaceae, gnero Bilophila

Esta familia est compuesta por 3 gneros, de los cuales solo tiene importancia para el ser humano
Bilophila, el cual presenta solo una especie B. wadsworthia. Corresponden a bacilos Gram-
anaerobios, asacarolticos, resistentes a la bilis, catalasa positivos y usualmente ureasa positivos. Fue
originalmente reconocido en muestras de fluido peritoneal y tejidos de pacientes con apendicitis y
Susan Arias Donoso
194
gangrena, otros aislamientos han sido realizados en absceso escrotal, osteomielitis mandibular,
hidradinitis supurativa axilar, fluido pleural, lquido sinovial y sangre. Su hbitat lo constituye el tracto
gastrointestinal.

El tratamiento de infecciones anaerobias se realiza con drenaje quirrgico y terapia antimicrobiana
utilizando clindamicina, metronidazol, cefoxitina, mezlocilina, piperacilina o penicilina G, esta ltima
no se emplea en Bacteroides ni Prevotella.

Susan Arias Donoso
195
Bacterias atpicas

Crecimiento extracelular
Sntesis de Protenas
Generacin de energa
Pared celular
Susceptibilidad a
antimicrobianos
Reproduccin
cidos Nuclicos
Mycoplasma
Chlamydia
Rickettsia
+
+
+
-
-
+
-
+
-
+
+
+
Fisin
DNA y RNA
Fisin
DNA y RNA
Fisin
DNA y RNA
Familia Mycoplasmataceae

Simbiosis: patgeno estricto intracelular del tracto respiratorio humano.
Tamao: 0,3 0,8 um.
Distribucin: mundial.
Incidencia: estacional.
Grupo de riesgo: nios de 5 a 15 aos.
Transmisin: gotitas de Pflgge.
Reservorio: hombre enfermo.
Profilaxis: aislamiento del paciente.

La familia Mycoplasmataceae est compuesta por los gneros Mycoplasma y Ureaplasma, los que
son unas de las bacterias ms pequeas y se caracterizan por carecer de pared celular, lo que les
confiere un aspecto pleomrfico; su membrana est compuesta por esteroles de la clula hospedera,
cidos grasos y fosfolpidos.

Son bacterias aerobias estrictas con crecimiento lento que en general se desarrollan en el interior
celular, sin embargo pueden hacerlo fuera de la clula con mucha dificultad, ya que tienen altos
requerimientos nutricionales como el colesterol.

Su cultivo se realiza en medios especiales llamados PPLO donde producen una colonia muy
caracterstica que asemeja un huevo frito invertido. El tratamiento se realiza principalmente con
macrlidos de forma emprica.

Actualmente se conocen 150 especies del gnero Mycoplasma, de ellos M. pneumoniae, M. hominis
y M. genitalum son las especies de importancia clnica ms frecuentes. Por otro lado algunas de las
especies pertenecen a la microbiota de la orofaringe:
- M. orales
- M. salivarum
- M. buccale
- M. facium
- M. lipophilum
Susan Arias Donoso
196
Se han realizado aislamientos de M. primatum, M. spermathophitum en el aparato genital, sin
embargo no se han implicado al desarrollo de procesos infecciosos. Las especies M. pirum, M.
penetrans y M. fermentans se han establecido como posibles patgenos humanos. Mientras que las
especies M. agalactiae, M. putrefaciens y M. capricolum solo se han asociado a la produccin de
enfermedades en animales.

Microorganismo Localizacin
Enfermedad
M. pneumoniae
Aparato respiratorio
Enfermedad del TRS, neumona atpica,
traqueobronquitis. Rara vez
manifestaciones extrapulmonares.
M. hominis
Aparato genitourinario
Piolenifritis, Enfermedad inflamatoria
plvica, Fiebre postparto.
M. genitalium
Uretritis
M. fermentans
Aparato respiratorio
Enfermedad pseudogripal, neumona.

Existen 6 especies pertenecientes al gnero Ureoplasma, donde U. urealyticum es la especie de
importancia clnica ms frecuente, provocando infecciones en el tracto respiratorio y genitourinario,
principalmente uretritis.

Mycoplasma pneumoniae

Se asocia a problemas pulmonares como faringitis, bronconeumona y neumona atpica,
produciendo un cuadro claro y definido, usualmente existe infeccin superior asintomtica, en
pacientes peditricos se desarrolla con secrecin nasal acuosa, coriza, tos seca y persistente, en
ausencia de fiebre, sntomas que por lo general son autolimitados. En infecciones del TRI produce tos
no productiva, fiebre, malestar, mialgia y faringitis no purulenta; es agente causal del 3-13% de las
neumonas; estos cuadros clnicos conllevan ciertas complicaciones como artritis, encefalitis,
miocarditis, pericarditis y anemia hemoltica. En general no suelen diseminarse por va hematgena ni
colonizar otros tejidos. En recin nacidos puede provocar: meningitis, abscesos y neumona, siendo
este ltimo el ms caracterstico. La meningitis tiende a confundirse con una de tipo viral debido a la
dificultad diagnstica de este agente. En pacientes inmunosuprimidos puede ocasionar
principalmente bacteriemias, y tambin artritis, abscesos, neumona y peritonitis.

En casos de neumona es necesario realizar un diagnstico diferencial respecto a infecciones
causadas por virus respiratorios, Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae b en nios.

-
Protena P1 y P2: adhesinas fras, P1 cumple funciones de adherencia y P2 detiene el

movimiento de los cilios (ciliostasis) provocando lisis de la clula hospedera.
- Perxido de hidrgeno: produce la detencin del movimiento ciliar.
- Glucolpidos: superantgenos.

La patogenia de la enfermedad implica tres fases distintas: adhesin, ciliostasis y destruccin de
cilios y clulas, esto ltimo predispone a la aparicin de enfermedades ms severas.
Susan Arias Donoso
197
El diagnstico directo a partir de muestras respiratorias se realiza por cultivo en medios especiales
(PPLO), entre la segunda y sptima semana se la enfermedad, ya que entre ellas es ms probable
identificar al microorganismo, considerando que los sntomas respiratorios se presentan entre la
tercera y sexta semana; tambin se puede realizar de manera ms exacta por rt-PCR. El diagnstico
indirecto se obtiene por fijacin del complemento e inmunoanlisis (ELISA) como diagnstico precoz
por deteccin de aglutininas fras de tipo IgM.

Mycoplasma hominis y Ureaplasma urealyticum

Ambos generan una infeccin del tracto genitourinario, principalmente prostatitis en el hombre y
enfermedad plvica inflamatoria en mujeres (mortal); adems puede provocar vaginosis bacteriana,
amnionitis en embarazadas, cervicitis, endometritis y uretritis no gonoccica en hombres (ETS). Se ha
determinado que M. hominis produce entre el 15 y 20% de las uretritis no gonoccicas.

Dependiendo de la actividad sexual existe probabilidad de padecer infecciones por Mycoplasma
hominis y Ureoplasma urealyticum, cuya frecuencia depende del comportamiento sexual:
- Vida sexual con una pareja

15 40%
- Vida sexual con mas parejas
75%
- Hombre

80%

La infeccin por M. hominis y U. urealyticus puede provocar bartholinitis, una infeccin de la
glndula de Bartholino, con formacin de quistes. Su presencia en tero o Trompas de Falopio se
asocia a esterilidad. Adems es causante de abortos, parto prematuro, RN de bajo peso, Sndrome de
Dificultad Respiratoria y neumona.

El tratamiento se realiza con Eritromicina, Azitromicina y Tetraciclina, considerando que esta ltima
se inactiva fcilmente con la protena de la leche. El tratamiento suele ser muy largo y existe la
probabilidad de producir gastritis. En nios de 3 meses a 5 aos se utiliza ampicilina (EV), quinolonas
y macrlidos (VO). En mayores de 5 aos se realiza empleando ampicilina (EV) y macrlidos (VO). Las
cefalosporinas de 3 generacin se usan en nios con compromiso del estado general.

Familia Chlamydiaceae

La familia Chlamydiaceae est conformada por los gneros Chlamydia y Chlamydophila. Son
organismos que se consideran intermedios entre virus y bacterias, actan como parsitos
intracelulares obligados del hombre y animales, ya que carecen de mecanismos de produccin de
energa, de modo que requieren de la maquinaria metablica del husped para poder vivir.

Gnero Chlamydia
Gnero Chlamydophila
C. trachomatis
C. pneumoniae
C. muridarum
C. psitacci
C. suis
C. pecorum
C. abortus
C. caviae
C. felis
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198
Agente
Reservorio
Transmisin Lugar de infeccin
Profilaxis
C. psittaci
C. pneumoniae
C. trachomatis
Aves (zoonosis)
Humano
Humano
Respiratoria
Respiratoria
ETS
Control de aves
Aislamiento
----
Mltiples puntos
Mucosa respiratoria
Membrana mucosa

Producen infecciones crnicas y persistentes, las principales especies patgenas son Chlamydia
trachomatis, que provoca una enfermedad plvica grave y tracoma ocular, Chlamydophila psittaci y
Chlamydophila pneumoniae.

Comparte caractersticas con:
- Rickettsia
- Orienta
- Anaplasma
- Ehrlichia
- Calymomatobacterium granulomatis
- Coxiella
- Tropheryma whippleii

Son bacterias Gram- sin peptidoglicn, que debido a su caracterstica de ser metablicamente
deficientes poseen un ciclo de multiplicacin especial, formando cuerpos elementales (CE) y cuerpos
reticulados (CR). Los Cuerpos elementales (CE) son la forma infectante, extracelular, mientras que los
Cuerpos reticulares (CR) poseen metabolismo activo, son mayores en tamao, lbiles, no infecciosos
e intracelulares.

Los Cuerpos elementales interactan con la clula blanco formando una vacuola en su interior,
dentro de la clula ocupan la maquinaria metablica de la clula para transformarse en cuerpos
reticulares, estos ltimos maduran y producen cuerpos elementales que se liberan e infectan a otras
clulas. Los cuerpos reticulares son observables mediante tincin Gram y Giemsa en el epitelio
pulmonar o genital.

Susan Arias Donoso
199
No crecen en medios artificiales y poseen un antgeno termolbil asociado a LPS, este superantgeno
es especfico y permite diferenciar entre las distintas especies. Presenta adems protenas de
membrana externa:
- Principal (MOPM): especifica de especie, protenas de membrana
- Otras protenas: especficas de serotipos

Todas las infecciones por Chlamydias son latentes y persistentes si no se tratan de forma adecuada
y muchas veces pueden cursar de forma inaparente.

El diagnstico de la infeccin respiratoria se realiza por inmunofluorescencia en busca de
anticuerpos monoclonales de los cuerpos reticulares. En las infecciones genitales se realiza
diagnostico directo mediante cultivo en lneas celulares y, deteccin y descripcin de antgenos.

El tratamiento emplea azitromicina, tetraciclina, doxicilina u oxitromicina.

C. psittaci puede provocar infeccin altamente mortal por inhalacin de excretas de aves, el
microorganismo es fagocitado por los macrfagos y transportado al pulmn, donde provoca invasin.
Provoca una infeccin grave en embarazadas, inmunosuprimidos y ancianos. Esta especie es ms
destructiva respecto al resto de los integrantes de la familia, sin embargo a diferencia de los virus no
produce lisis celular.

C. pneumoniae (TWAR) est asociado a procesos de: bronquitis, neumona, sinusitis y faringitis. C.
psittaci, posee muchas estructuras antignicas y produce una infeccin respiratoria de tipo
neumnica atpica denominada psitacosis, es capaz de producir otros cuadros respiratorios como
salpingitis, bronquitis, y tambin uretritis.

C. trachomatis es inmvil y presenta distintos biotipos, implicados en distintos cuadros,
fundamentalmente de tipo respiratorio, ocular o enfermedad de transmisin sexual (10%):
- L1, L2, L2a, L3: son los ms frecuente e importante es causante de Linfogranuloma
venreo (LGN) y enfermedad plvica infecciosa (EPI) asociado a enfermedad sexual.
Provoca Tracoma, una enfermedad ocular que puede provocar ceguera y que puede
ser transmitida de la madre al lactante, y en algunos casos se asocia a enfermedades
genitales y neumona del lactante. Asociados a ganglios linfticos inguinales.
- A, B, Ba y la C: asociados a tracoma ocular (conjuntiva).
- D y K: asociados fundamentalmente al aparato genital.
- A, D y Ba: asociados a neumona del lactante.

Simbiosis: patgeno intracelular obligado
Reservorio: mujeres infectadas asintomticas (80%).

En el hombre desarrolla uretritis o Sndrome de Reiter los que suelen ser asintomticos
(25%). La endocervicitis cursa con leucorrea mucopurulenta, leucorrea persistente muy
fluida. En el caso de ser aguda, se produce disuria, en urocultivo se encuentra orina estril o
con muy pocas bateras (<105 colonias/mL). El Sndrome uretral agudo se presenta con:
disuria, polaquinuria, piuria u orina estril (<10 5 colonias/ml). La Salpingitis aguda muestra
un 20 40% de PIPAg y puede provocar embarazo ectpico e infertilidad. La peritonitis
desarrolla el Sndrome de Fritz-High-Curtis.
Susan Arias Donoso
200

Patogenia de C. trachomatis en la mujer

adhesin al epitelio
Chlamydia trachomatis es agente causal del
tubrico

linfogranuloma
venreo; infeccin que Invade el epitelio

columnado del endocrvix provocando inflamacin, el
cual

puede extenderse a las trompas de Falopio, provocando
endocitosis

una alteracin del estado general, cervicitis erosiva
replicacin intracelular

sangrante y adenopata inguinal mltiple; adems puede
liberacin del organismo en el

ser trasmitida al recin nacido por el canal de parto,
lmen tubrico

provocndole a este ltimo neumona y gastroenteritis. La

diseminacin por va hematgena y linftica puede
expresin de

provocar enfermedad plvica inflamatoria, llegando a
expresin de protena
citoquinas
producir un dao persistente que cursa con inflamacin
57 kd
TNF, IL1 y 6, !FN
crnica y destruccin de la zona cervical con exudado

purulento, la infeccin tambin puede afectar al peritoneo.

reaccin de
La fase tarda se alcanza con el bloqueo de los tubos
hipersensibilidad
Inflamacin
ovricos, lo cual es altamente grave. Finalmente se genera
respuesta inmune
una fibrosis en la zona ocasionando la Enfermedad Plvica
celular (PMN)
Infecciosa. Este efecto se puede revertir en parte mediante

un diagnstico y tratamiento oportuno. La trasmisin al

hombre ocurre de forma genital, anal y oral por contacto
vasodilatacin, edema,
dao tisular

con abrasiones. Cabe destacar que en muchas mujeres la
infiltrado inflamatorio

infeccin cursa de forma asintomtica.

destruccin
exudado purulento
endosalpinx

fase temprana
fase tarda

Bloqueo tubrico
peritonitis pelvica
piosalpinx

extension a anexos

(perihepatitis)

evolucin

resolucin
organizacin

fibrosis

secuelas: EPI

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Hongos
201

Hongos

Los hongos, o tambin llamados fungi (Lat. Fungus) o micota (Gr. Mykes), son organismos
eucariontes no fotosintetizadores, donde la mayora es pluricelular aunque existen algunos de tipo
unicelular; la mayor parte de los hongos son filamentosos o levaduras microscpicas. Al ser
descubiertos se les asignaron propiedades alimenticias ya que son ricos en protenas y vitaminas, y
adems poseen una escaza cantidad de carbohidratos y lpidos, por otra parte tienen una gran
cantidad de fibra, como la celulosa y la acridina, las cuales mejoran el trnsito intestinal, adems
existen levaduras que por fermentacin permiten la produccin de pan y alcohol como
Saccharomyces cereviciae, dentro de los hongos que son comestibles se encuentran:

Cyttaria, piatra o diguee
Boletus edulis
Amanita cesarea
Trufas

Agaricus bisporus, champin campestre

Lactarius deliccius

Russula brevipes
Susan Arias Donoso
202
As como existen hongos que son beneficiosos desde el punto de vista alimenticio, existen tambin
aquellos que son altamente txicos, algunos de ellos son:

Amanita phalloides: es la variedad que ms
frecuentemente causa intoxicacin (90%), produce
hepatotoxicidad y falla heptica fulminante al ser
consumido.
Amanita verna
Amanita gemmata
Amanita virosa
Amanita brunnenscens
Amanita muscaria: dependiendo de la cantidad
ingerida puede ser mortal o solo alucingeno.
Claviceps purpurea (ergot) parasita el centeno y el
trigo, contiene un alcaloide potente de poder
semejante al LSD.
Aspergillus flavus: es un hongo microscpico que
produce aflatoxinas hapolotxicas de importancia en
la industria alimentaria.
Fusarium roseum y Fusarium tricinctum: producen
toxinas necrosantes para la piel.
Penicillium islandreum
Penicillium viridicatum

En 1928 Fleming descubri los efectos de la penicilina en un cultivo de Streptococcus aureus, a partir
de ese momento se han utilizado una gran cantidad de hongos para la produccin de antibiticos,
algunos de estos son:

Penicillium griseofulvum: griseofulvina

Aspergillus niger: fumiglina
Slavadulae: anfotericina B

Cephalosporium spp: cefalosporinas

Los hongos adems se utilizan para la produccin de cido ctrico (Aspergillus niger), la produccin
de vitamina B2 (Ashbya gossypii), de esteroides (Mucor y Rhizopus), condimentos y enzimas para
quitar manchas.
Susan Arias Donoso
203
Hbitat y Rol Ecolgico

Los hongos son organismos cosmopolitas, pudiendo encontrarse en aguas, suelos, animales,
vegetales, etc., dependiendo de la cantidad de materia orgnica disponible y de la humedad, que
debe ser mnimo un 5%; asimismo requieren una temperatura adecuada para su crecimiento,
hallndose organismos psicrfilos, mesfilos y termfilos; y un pH adecuado de preferencia cido.
Se pueden comportar como saprfitos degradando materia orgnica muerta vegetal y animal
presente en suelos, aguas, mucosas de animales. Como parsitos causan dao a animales, plantas y
otras formas de vida. Tambin pueden tener una relacin mutualista o simbionte, obteniendo mutuo
beneficio con el organismo hospedero, como es el caso de los hongos que se unen a las algas, dando
origen al liquen, o que se unen a las races de vegetales (micorrizas).

Morfologa
El talo es el cuerpo vegetativo del hongo, est constituido por clulas eucariticas con uno o ms
ncleos, siendo haploide o diploide, ste cumple funciones vegetativas y reproductivas, as se pueden
encontrar hongos eucrpicos en que solo parte del talo asume funciones reproductivas y el resto
funciones vegetativas; y hongos angiocrpicos donde todo el talo posee funciones reproductivas, el
talo puede ser de cuatro tipos diferentes:
Unicelular:
Levaduras, tienen importancia clnica.

Micelial:
Hifas septadas o tabicadas y no septadas o cenocticas, tienen importancia
clnica.
Plasmodial: rboles.
Pseudoplasmodial: filamentosas.

Las hifas son tubos de longitud variable, crecimiento apica
por los cuales fluye el protoplasma y los organelos, estn formados por una pared celular rgida cuyo
principal constituyente es la quitina o algunos de sus derivados, dentro de estos la manana y los
proteoglicanos son estimuladores del sistema inmune, cada grupo de hongos posee distinta
composicin de carbohidratos en su pared, pudindose encontrar:
Grupo de hongos
Carbohidratos
Zygomycota
Ascomycota
Deuteromycota
Basidiomycota
Ascomycota (Levadura)
Basidiomycota (Levadura)
Oomycetes
Quitosana + Quitina
Quitina + Glucano
Quitina + Glucano
Quitina + Glucano
Manana + Quitina
Manana + Quitina
Celulosa + Glucano
Susan Arias Donoso
204
Las paredes fngicas estn formadas por 4 regiones:

1. Capa ms externa: glucanos amorfos.

2. Red de glicoprotenas embebidas en protenas.

3. Capa discontinua de protenas.

4. Capa ms interna: microfibrillas de quitina o celulosa

embebidas en protenas.
5. Membrana plasmtica

La agrupacin de hifas se denomina micelio, estas hifas pueden ser:
x
x
Tabicadas o septadas: los septos son estructuras porosas, cuya funcin es constituir un
sostn para la hifa, de modo que una hifa de este tipo resiste mayormente la desecacin.
Cenocticas o no septadas: no poseen compartimentos.
Esquema de una hifa (seccin apical): D, dictiosoma; ER, retculo endoplasmtico; L, cuerpo lipdico; M,
mitocondria; MI, microcuerpos; N, ncleos; R, ribosomas; V, vescula citoplasmtica; VA, vacuola; W, pared celular.

Las hifas tienen funciones vegetativas, relacionadas con la nutricin, esta funcin est dada por
estolones o serpas, que corren a hifas de crecimiento perpendicular respecto a las estructuras de
reproduccin. Los rizoides de los saprfitos (Mucor y Rizophus) y haustorios de los parsitos permiten
al hongo penetrar y absorber en las clulas del hospedero. Los apresorios permiten la fijacin en el
sustrato u hospedero, siendo su estructura similar a la del rizoide. Las hifas adems tienen funciones
de reproduccin, crecimiento y diseminacin, y adems forman elementos vegetativos de resistencia,
esclerocios y clamidosporas.
Susan Arias Donoso
205
Ciclo de vida y sexualidad

El ciclo de vida puede ser simple o complejo, realizarse en uno o varios hospederos o sustratos,
puede implicar procesos de reproduccin asexual, o sexual o ambos, denominndose anamorfos,
teleomorfos y holomorfos respectivamente; o desarrollar uno ms tipos de esporas.
Las esporas son las unidades reproductivas del hongo, estn constituidas por una o ms clulas,
pueden ser de origen sexual o asexual, se pueden formar y madurar dentro de estructuras
esporgenas hasta su diseminacin, o bien pueden formarse dentro de stas pero permanecer en
forma externa.
La reproduccin asexual no proporciona variabilidad gentica, pero su ventaja es ser ms rpida,
puede ser realizada mediante esporas endgenas, o endosporas, inmviles, llamadas
esporangiosporas y formadas dentro de un esporangio; o bien por esporas endgenas mviles,
llamadas zoosporas y formadas dentro de un zoosporangio o asco; otros hongos utilizan para su
reproduccin esporas exgenas, denominadas mitosporas, denominndose hongos mitospricos a los
que poseen este tipo de reproduccin; estas esporas se pueden formar por fragmentacin o
desarticulacin de las hifas, originando taloconidias, o a partir de estructuras semejantes a ellas,
denominadas filides, lo que da origen a conidias, estas esporas son producidas en hifas
especializadas denominadas conidiforos. Por otra parte los hongos levaduriformes se pueden formar
adems por gemacin y biparticin.
Susan Arias Donoso
206
Zoospora

La reproduccin sexual involucra estructuras reproductivas femeninas y masculinas que se
denominan gametangios que originan gametos haploides mviles o inmviles y que pueden ser
formados por el mismo talo, es decir que se auto fecunda, homotlicos, o en talos distintos de la
misma especie, que por tanto involucra a dos individuos, heterotlicos. El proceso de reproduccin
sexual se denomina gametangiogamia e involucra diferentes etapas que son:
1. Fusin de citoplasmas: el gameto masculino y femenino se fusionan en el proceso
denominado Plasmogamia.
2. Fusin de ncleos: Cariogamia.
3. Formacin del Zigoto: monocaritico (1 ncleo) y diploide.
4. Intercambio de material gentico: ocurre meiosis. Se restablece la condicin haploide de
los cromosomas.
5. Cada juego de haploide de cromosomas pasa a constituir una clula con pared celular.
6. Se forma la espora de origen sexual.
Susan Arias Donoso

Reproduccin asexual
Esporas asexuales en esporangio
Conidias en conidiforos
Gemacin en levaduras
Fragmentacin
Ejemplos: Clamidosporas
Artrosporas
Blastospora
207
Reproduccin sexual
Dos hifas de distintos individuos se unen

Esporas sexuales
Ejemplos: Oosporas
Zigosporas
Ascosporas
Basidiosporas

Metabolismo
El metabolismo de los hongos es de tipo oxidativo e involucra la excrecin de exoenzimas que
degradan la materia orgnica compleja a unidades bsicas que son absorbidas por el hongo y
transformadas, por respiracin aerobia, a CO2, H2O, energa en forma de ATP y nuevas clulas del
talo. Las levaduras adems realizan fermentacin en condiciones anaerobias produciendo CO2,
alcohol y dos molculas de ATP por molcula de glucosa.

Nutricin

La nutricin de los hongos es quimiohetertrofa, es decir que utiliza nutrientes orgnicos como
fuente de carbono y de energa; la obtencin de estos nutrientes la realiza por absorcin, cuando la
relacin es de tipo saprfita la obtencin de nutrientes es a partir de materia orgnica no viviente,
mientras que cuando son parsitos o simbiontes los obtienen desde tejidos vivos de animales o
plantas.
Susan Arias Donoso
208
De acuerdo a su fuente nutricional los hongos se clasifican como:

Queratinoflicos: utilizan la queratina como principal fuente de nitrgeno, de modo que daan la
piel, el cabello y las uas, teniendo as una gran importancia clnica, dentro de esta clasificacin
se halan las gneros: Trichophyton y Microsporum.
Lipoflicos: utilizan lpidos como fuente de nutrientes, pueden ser encontrados en regiones
seborreicas del cuerpo, como los del gnero Malassezia, el cual es una levadura; o forman
colonias compactas en el pelo como ocurre con Piedraia y Trichosporon.
Osmoflicos: habitan ambientes con bajo contenido de agua, como es el caso de Aspergillus que
infecta el conducto auditivo externo.
Endgenos simbiontes: los hongos de la especie Candida albicams coloniza el tracto digestivo de
mamferos, faringe y vagina, ste es un hongo dismrfico, mostrando un estado de levadura, fase
saproftica, y un estado pseudomicelial, fase patognica.
Uroflicos y coproflicos: utilizan cido rico y creatina como algunas especies de Trichosporon,
que colonizan los vellos pbicos.
Para el cultivo de los hongos se deben aportar una serie de nutrientes, donde la materia
nitrogenada es aportada por la peptona, adems se debe aportar glucosa, las cantidades elevadas de
azcar inhiben el crecimiento bacteriano pero favorecen el crecimiento de hongos. Por otro lado se
debe aportar un soporte slido y un pH entre 5 y 6.

Clasificacin

Los hongos escapan de la taxonoma tradicional, existiendo distintas clasificaciones propuestas, una
egn la cual, y en base a estudios
moleculares de los constituyentes de la pared celular, del tipo de talo, nutricin, reproduccin y tipo
de esporas, los hongos se clasifican en tres reinos: Protozoa, Fungi y Chromista. A su vez estos reinos
se han dividido en Phylum o divisiones de acuerdo al tipo de talo, la constitucin de la pared celular y
nutricin, estos Phylum se han reagrupado en Clases, rdenes, Familias, Gneros y Especies.

Los organismos presentes al reino Protozoa en algunos estadios de su ciclo de vida se nutren
mediante fagocitosis mientras que los de los otros dos reinos solo lo hacen mediante absorcin. Por
otra parte los del reino Chromista frecuentemente poseen una pared compuesta por celulosa y
glucano.

Dentro del reino Protozoa se encuentran las siguientes divisiones:
x Acrasiomycota:

pseudoplasmodiales
x Myxomycota:

plasmodiales
o Clase:
Myxomycete

x Plasmodiophoromycota:
plasmodiales intracelulares

El reino Chromista se divide en:
x Labyrinthulomycota:
mucosos reticulados
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x Hyphochytriomycota:
x Oomycota:

209
micelio cenoctico o unicelulares

micelio cenoctico

Los hongos que revisten importancia desde el punto de vista clnico pertenecen al reino Fungi, el
que se compone por las divisiones:

x Ascomycota:

micelio tabicado o unicelular, meiosis en ascos, conidias.
x Basidiomycota:

micelio tabicado o unicelular, meiosis en basidios.
o Clase:
Basidiomycete
o Clase:
Teliomycetes
o Clase:
Ustomycetes

x Chytridiomycota:

micelio cenoctico.
x Zygomycota:

micelio cenoctico, meiosis en zigospora, esporangiosporas.
o Clase:
Trichomycetes
o Clase:
Zygomycetes

x Deuteromycota:

micelio tabicado o unicelular (reproduccin asexual).
Los hongos de la divisin Chytridiomycota son los
hongos ms simples y pequeos, stos son los ancestros
de todos los hongos, viven en ambientes acuticos y son
conocidos como moho del agua, careciendo de
importancia mdica. Tienen reproduccin sexual y
asexual.

Los hongos que pertenecen a la divisin Zygomycota se
caracterizan por presentar talo micelial cenoctico bien
desarrollado o con una septacin regular. Se reproducen
asexualmente por endosporas no flageladas llamadas
esporangiosporas. La reproduccin sexual a partir de la
fusin de dos gametangios, por un mecanismo llamado
copulacin gametangial da origen a una espora llamada
zigospora o zigoto; sta puede ser homotlica o
heterotlica.

Los zigomycetes son hongos mayoritariamente
terrestres que crecen en suelos ricos en materia orgnica,
algunos de ellos son parsitos facultativos de vegetales y
animales, incluyendo al hombre; otros son simbiontes
obligados de vegetales y artrpodos y otros forman
micorrizas con los vegetales.

A ste pertenecen los hongos pertenecientes al orden
de los mucorales, que contiene la familia mucoroceae,
que agrupa a los hongos de importancia clnica Absidia,
Mucor y Rhizopus.
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210
Los hongos de la divisin Ascomycota se caracterizan por producir endosporas de origen sexual
denominadas ascosporas, que se forman dentro de una estructura denominada asco. Poseen estadios
sexuales asexual y sexual, pudiendo ser, por tanto, anamorfos, teleomorfos u holomorfos. Estos
poseen un talo unicelular en el caso de los hongos levaduriformes o micelial tabicado, este ltimo
puede formar cuerpos fructferos denominados ascocarpos, en cuyo interior se encuentran
dispuestos los ascos con las ascosporas en su interior, se distinguen tres tipos de ascocarpos:
cleistotecios, con forma esfrica o de baln, peritecios, con forma de pera, y apotecios con forma de
plato. Los hongos de esta divisin pueden ser homo o heterotlico y adems son cosmopolitas,
comportndose como saprfitos, parsitos o micorrizgenos.
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211
A esta divisin pertenecen los hongos de las clases Hemiascomycetes o Saccharomycetes y

Loculoascomycetes o Dothidiomycetes, clase a la cual pertenece el agente causal de piedra negra,
Piedraia hortae.

Los hongos que pertenecen a la divisin Basidiomycota se caracterizan por poseer un talo micelial
tabicado dicaritico con la presencia de fbulas o hebillas; o bien un talo unicelular en el caso de
algunos hongos levaduriformes. Poseen reproduccin sexual dando origen a esporas exgenas
denominadas basidiosporas producidas en una estructura llamada basidio. La mayora de estos
hongos produce cuerpos fructferos llamados basidiocarpos (setas o callampas) de forma y
consistencia variada. Pueden ser homo o heterotlicos, pueden encontrarse en cuerpos de agua,
suelos y vegetales, comportndose como saprfitos, parsitos y micorrizantes. En algunas especies se
conoce reproduccin asexual, pero en ese caso pertenecen a la subdivisin Deuteromycotina y no a la
Basidiomycotina. A esta pertenecen los hongos de la clase Holobasidiomycetes o Hymenomycetes,
que contiene la clase Agaricales, a la cual pertenecen los hongos de la familia Amanitaceae y
Agaricaceae, como Amanita y Lepiota respectivamente.

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212

Los hongos pertenecientes a la divisin Deuteromycota son hongos mitospricos con micelio
tabicado y hongos unicelulares o levaduriformes a los cuales solo se les conoce reproduccin asexual.
Esta divisin incluye tambin los estadios asexuales de los hongos de las divisiones Ascomycota y
Basidiomycota. Se encuentran presentes en suelos, lodo, vegetales vivos y restos de materia orgnica,
en cuerpos de agua y en animales, comportndose como saprfitos, parsitos y simbiontes. Se
reproducen asexualmente por mediante conidias o taloconidias, pudiendo hallarse macroconidias o
microconidias, por separado o en el mismo micelio, lo cual no significa que una microconidia pueda
llegar a ser una macroconidia; los hongos de talo unicelular se reproducen por gemacin, balisporas o
pseudomicelios. A esta divisin pertenecen los hongos de importancia clnica como cndida de la
clase Blastomycetes y Aspergillus de la clase Hyphomycetes.

Macroconidios en

salchicha

La identificacin de los hongos se realiza en base a los rasgos estructurales y morfolgicos de las
hifas, la presencia de septos, de ramificaciones, la formacin de esporas y las conidias.

Hay que considerar que algunos hongos, como los productores de micosis superficial o sistmica,
tienen un comportamiento dismrfico, que depende de la temperatura en que se encuentren, as
existe una fase anamrfica o imperfecta cuando se encuentran en el hospedero, mientras que
estando en el exterior poseen un estado teleomrfico; en ambos estados el hongo posee distinta
morfologa, por lo general levaduriforme en su estado anamorfo y filamentoso en su forma
saproftica. Pueden tener distinto nombre como es el caso de la especie Trichophyton
Susan Arias Donoso
213
mentagrophytes, el cual se denomina Arthroderma benhamiae en su estado anamrfico. Otras

especies, como las responsables de micosis oportunistas son monomrficas y, por tanto, tienen la
misma estructura tanto en el medio ambiente como en la lesin.

Divisin o
Phylum
Zigomicota
Esporas
asexuales
Endgenas
(en sacos)
Esporas
sexuales
Oosporas
Zigosporas
Micelio
Cenoctico
Exgenas
Ascomycota
En las puntas o
lados de las hifas
Basidiomycota
En las puntas o
lados de las hifas
SEPTADO
Basidiosporas
SEPTADO
Setas
Amanita muscaria
------------
SEPTADO
La mayora de los
patgenos de
humanos y animales
Exgenas
En las puntas o
lados de las hifas
Rhizopus
Mucor
Penicillium
Aspergillus
Levaduras
Ascosporas
Exgenas
Deuteromycota
Hongos
imperfectos
Ejemplo
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214
Hongos de Importancia Clnica

Para su aislamiento se han desarrollado distintos agares con caractersticas especiales:
- Agar sabouraud: es un medio slido, simple y selectivo, contiene peptonas y glucosa que le
otorga una alta tonicidad inhibiendo la mayora de las bacterias. Es el medio ms utilizado
para el aislamiento de hongos levaduriformes y filamentosos.
- Agar lactrimel: contiene lactosa que estimula esporulacin, almidn de trigo que estimula la
produccin de pseudohifas, y miel.
- Agar DTM (dermatophytes test medium): posee
antibiticos, ms frecuentemente cloranfenicol,
gentamicina y cicloheximida, que inhiben hongos
saprobios y bacterias, y el indicador de pH rojo fenol, los
dermatofitos al utilizar protenas alcalinizan el medio
viran su color a rojo, otros hongos utilizan la glucosa y el
medio permanece amarillo.

Los medios se pueden clasificar segn el contenido de nutrientes:

Clasificacin Agar
Tipo de muestras
Primario
Selectivos
Todas excepto Malassezia furfur

Muestras polimicrobianas
Sabouraud-glucosa
Sabouraud-glucosa + ATB
Sabouraud-glucosa + ATB+
Cicloheximida
Enriquecidos Bilis de buey (Dixon modificado)
Leeming & Notman
Indicadores Nigerr o Guizotia
Cromognicos
Para Malassezia spp

Cryptococcus
Candida
Drogas antifngicas

-
Griseofulvina: es el tratamiento de eleccin para micosis superficial y cutnea,

bloquea la tubulina, interfiriendo la accin de los microtbulos polimerizados e
inhibiendo por tanto la multiplicacin del hongo.
Ketoconazol, Itraconazol, Fluconazol: actan en la membrana de los hongos

alterando el metabolismo de esteroles. La mayora son de uso tpico.
Terbinafina: interfiere en la sntesis del ergoesterol, componente fundamental de la

membrana del hongo, provocando la muerte celular.
Compuestos yodados
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215
Hongos productores de micosis superficiales

Los hongos productores de este tipo de infecciones son capaces de invadir solo hasta el estrato
crneo de la piel, que es la estructura ms externa de la epidermis y est en contacto con el
ambiente, en l se sita la mayor parte de la microbiota de la piel, es capaz de invadir tambin las
fneras (pelos y uas) y mucosas. Por ser solo superficiales no producen sensibilizacin en el
individuo y no provocan reacciones alrgicas.

Malassezia furfur

Agente etiolgico: Pitiriasis versicolor.

Es una levadura lipoflica agente de pitiriasis versicolor en humanos y animales, una micosis crnica
no irritativa que afecta el estrato corneo de la piel, su forma imperfecta (asexual) se encuentra en la
divisin Deuteromycota, en la familia Cryptococcoceae. No forma micelios ni pseudomicelios. Adems
puede producir dermatitis seborreica, foliculitis, pustulosis neonatal, blefaritis, fungemia y sepsis
asociada a cateterizacin en pacientes con alimentacin parenteral con o sin lpidos. Puede formar
parte de la microbiota de la piel.

La pitiriasis versicolor es una micosis que se produce mayormente en zonas tropicales, por las altas
temperaturas y humedad, afecta principalmente a personas entre 20 y 40 aos de edad, que por sus
actividades generen gran humedad corporal. Cursa con la presencia de placas despigmentadas
indoloras no pruriginosas en la piel a nivel de espalda, cuello, zona axilar y trax, pudiendo
confundirse con tumores malignos de la piel, sin embargo constituyen un problema esttico ms que
patolgico. Puede ser causada tambin por Malassezia globosa y Malassezia simpochan.

El diagnostico se establece por examen microscpico de raspado de piel teido con KOH, tinta
Parker 51 azul permanente, tinta Shoefer 22 o azul de metileno al 1%, previa fijacin de la muestra
con plasma, suero coagulado o barniz de ua, lo cual permite observar levaduras ovales con yemas
germinantes y filamentos cortos. Tras 10 das de cultivo a 37 C en agar Sabouraud enriquecido con
aceite de oliva produce colonias pequeas de color amarillo crema que asemejan gotitas. El
tratamiento se realiza con ketoconazol e itraconazol.

Trichosporon spp

Agente etiolgico: Piedra Blanca.


Es causante de piedra blanca, una micosis benigna, superficial, asintomtica y poco frecuente que se
caracteriza por concreciones fngicas blanquecinas de aspecto nodular adheridas a pelos axilares,
cabello, barba, cejas, pestaas y vello pubiano. La especie ms frecuente es Trichosporon beigelii, una
levadura que genera filamentos con produccin de artroconidias que afectan las clulas de la cutcula
del pelo, pero no lo penetra
pilosa, de color marrn, blanco amarillenta o caf rojizo, que miden en promedio 1,5 mm de
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216
dimetro, produciendo debilidad de la misma y posterior rotura de sta. Puede colonizar el tracto
respiratorio, urinario, gastrointestinal e incluso producir sepsis. La afeccin cutnea en pacientes VIH
positivos se ha encontrado desde un 10,5% hasta un 55% en forma de ppulas, ndulos purpricos y
necrticos en tronco y extremidades.

Se asla en humanos, aves, animales, agua y suelo, adems pueden ser parte de la microbiota de la
piel, uas y boca, con capacidad de comportarse como patgenos oportunistas en pacientes
inmunosuprimidos, provocando enfermedades sistmicas afectando pulmones, riones y bazo, puede
invadir el sistema nervioso y peritoneo, especialmente en pacientes con dilisis. El modo de infeccin
es desconocido y se ha sugerido predisposicin individual, los factores predisponentes son el uso de
utensilios de peinado, la falta de higiene, la humedad excesiva y el contacto sexual.

El diagnstico se realiza por examen microscpico de pelos con KOH 20% o lactofenol, que permite
observar los ndulos, por lo general intrapilosos y con crecimiento externo, el hongo se observa en la
forma de filamentos de 2 a 4 um de dimetro, tabicados, con artroconidios rectangulares, ovoides o
redondeados que al agruparse adoptan formas polidricas, que se tien rpidamente con tinta Parker
azul. El cultivo se realiza a 25 28 C por 10 das en agar dextrosa de Sabouraud sin cicloheximida, ya
que sta inhibe su crecimiento, tras 10 o 12 das de incubacin se observan colonias de 1 cm de
dimetro, lisas, blancas y brillantes, que despus se tornan rugosas y cerebriformes. A las pruebas de
laboratorio se caracteriza por no producir tbulo germinativo, por hidrolizar la urea y no fermentar la
glucosa, galactosa, maltosa, sacarosa, trealosa, aunque si las asimila, adems no asimila nitrato. El
tratamiento consiste en rasurar la zona afectada y se pueden emplear soluciones yodadas con cido
silico al 50% o cualquier derivado imidazlico.

Piedraia hortae

Agente etiolgico: Piedra Negra

Es un hongo dematiceo (productor de pigmento) queratinoflico causante de Piedra Negra, una
micosis benigna ms frecuente en reas tropicales, donde se encuentra en el suelo, caracterizada por
la formacin de concreciones oscuras de aspecto nodular adheridos a la porcin extrafolicular de
pelos axilares, cabello, barba, cejas, pestaas y vello pubiano, su colonizacin se ve favorecida por la
utilizacin de sustancias oleosas. Este ndulo corresponde a una estructura de reproduccin
asexuada (ascocarpo) de tipo ascoestroma. La enfermedad es ms frecuente en regiones tropicales y
afecta por igual a ambos sexos y en todas las edades. No se conocen factores predisponentes aunque
se cree que la humedad o el contacto con material vegetal puedan actuar como factores
desencadenantes.

Este hongo perteneciente a la divisin Ascomycota posee hifas segmentadas y clamidoconidias de
color caf oscuro, en el frotis se observan los ascoestromas con 8 ascoesporas en su interior, forma
hifas de tipo septadas con clamidoconidias.

El diagnstico se realiza con examen microscpico de pelos con KOH 20% calentando suavemente
para favorecer la penetracin del color, as se observan las concreciones oscuras formadas por un
ascoestroma polidrico, al presionar la preparacin se rompen los ndulos y liberan las ascas que
contienen de 2 a 8 ascosporas ms claras, de aspecto fusiforme, curvas, unicelulares, provistas de un
filamento de 10 um de largo en cada extremo.
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217
El cultivo se realiza en agar Sabouraud por 10 a 15 das entre 25 y 28 C, en l produce un pigmento

difusible y no forma ascosporas.

El tratamiento incluye el rasurado e higiene adecuada, pueden emplearse soluciones yodadas con
cido silico al 50% o cualquier derivado imidazlico.

Hortaea werneckii (Ex Exophiala wernekii)

Agente etiolgico: tia negra.
Hbitat: suelo de reas tropicales y subtropicales.

Es una levadura altamente pleomrfica, que forma micelios septados, con ramificaciones y
clamidoconidias, produce la enfermedad conocida como Tia Negra, una micosis poco frecuente
caracterizada por la formacin de hiperqueratosis que forma lesiones oscuras a nivel palmar, plantar,
de los espacios interdigitales, brazos, piernas, tronco y cuello. La micosis es generalmente unilateral,
no muestra preferencia por ninguna edad, sexo o raza, aunque se ha reportado mayor frecuencia en
mujeres jvenes por debajo de los 20 aos de edad.

Estos hongos se desarrollan con mayor facilidad en reas clidas cercanas al mar, zonas tropicales y
subtropicales, su mayor prevalencia se encuentra en Amrica Central y del Sur, con mayor frecuencia
en Brasil. La va de entrada es inoculacin traumtica y se ha relacionado con el contacto de plantas,
aunque no se ha logrado establece su hbitat. Tiene la capacidad de soportar hasta un 15% de NaCl.

El diagnstico se realiza mediante examen microscpico de raspado de piel teido con KOH 20%, es
un hongo demiaticeo de modo que las hifas tabicadas con ramificaciones libres de color pardo a
olivceo, tambin se pueden observar clamidoconidias, clulas hinchadas, clulas levaduriformes e
hifas fragmentadas glucosado. El cultivo se efecta en Agar Sabouraud a 25 28 C por 10 15 das,
las colonias se ven inicialmente levaduriformes transformndose en micelial con el transcurso del
tiempo. El tratamiento emplea Itraconazol y Anfotericina B.

Pseudomicosis

Es necesario realizar diagnstico diferencial con bacterias productoras de pseudomicosis.

Corynebacterium tenuis: es el agente causal de Tricomicosis axilar, la cual es una enfermedad
que afecta pelos axilares y pbicos, es similar a Piedra Blanca pero ms pequea, aparecen
manchas en la ropa de color amarillo por los productos celulares que genera la bacteria.

Corynebacterium minutissimum: agente causal de Eritrasma, que cursa con lesin superficial
de la piel y la capa crnea, provoca grandes manchas eritematosas a nivel axilar e inguinal,
especialmente en donde hay pliegues y humedad.
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218
Hongos productores de micosis cutnea, Dermatofitos (Microsporum,

Trichophyton y Epidermophyton)

Los dermatofitos son hongos filamentosos que no invaden el tejido vivo a excepcin del
queratinizado, lo que provoca una reaccin alrgica e inflamatoria, los principales gneros son
Microsporum, Trichophyton y Epidermophyton, afectan la epidermis, el estrato crneo y las capas ms
profundas de la piel, produciendo en algunos casos granulomas e hipersensibilidad.

Agente etiolgico: dermatomicosis.

Reservorio: suelo, animales (zoonosis) y ser humano.
Resistencia: sensibles a desinfectantes corrientes (yodo, cloro, cresol), pueden
sobrevivir en superficies inanimadas aunque depende de humedad.
Transmisin: contacto directo persona-persona y persona-animal, contacto indirecto
(fmites relacionados con animales).
Factores predisponentes: edad, hacinamiento, alta humedad, desnutricin, diabetes,
traumatismos de cuello y hombros por collares, uso de antiinflamatorios, uso de
calzado y ropa ajustada, exposicin a piscinas, baos pblicos y gimnasios.

Los dermatofitos tienen la capacidad de digerir la queratina de la piel y nutrirse de ella, as, la
dermatofitosis es una micosis cutnea que afecta el estrato crneo de la piel, pelo, uas como
onicomicosis y tia, que se clasifican de acuerdo al sitio anatmico que afectan. Un mismo
dermatofito puede causar varios cuadros clnicos, a la vez que un mismo cuadro puede ser causado
por varios agentes.
capitis
unguium
barbae
tipos
de tias
pedis
cruris
corporis
imbricata
manuum
Tipo de reproduccin
Gnero
Trichophyton
Microsporum
Epidermophyton
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Macroconidias
Pocas
Abundantes
Abundantes
Microconidias
Abundantes
Pocas
No tiene
219
Estos hongos se clasifican tambin en funcin de su hbitat en: antropoflicos, zooflicos y geoflicos.
Los hongos antropoflicos solo pueden vivir en el hombre (piel y fanreas), su transmisin es
exclusivamente interhumana y raramente infecta a otros animales. Los dermatofitos zooflicos viven
en la piel, pelos y plumas de diversos animales y pjaros, y ocasionalmente pueden afectar al hombre,
los animales actan como portadores asintomticos. Los hongos geoflicos estn primariamente
asociados con material queratinoso presente en el suelo como plumas, pelos, cuernos, pezuas, etc.,
y ocasionalmente infectan al hombre y animales.

gneros
especies
sub-especie
T. tonsurans
antropoflico
T. rubrum
interdigitale
Trichophyton
Epidermophyton
antropoflico
antropoflico
T. mentagophytes
mentagrophytes
Microsporum
n
e
r
o
s
zooflico
T. schoenleinii
antropofilico
T. verrucosum
zoofilico
M. canis
zooflico
M. qudovinii
antropofilico
M. gypseum
geofilico
E. floccossum
antropoflico

La tia se disemina en forma centrfuga partiendo del punto de invasin inicial, provocando una
lesin en anillo. La reaccin inflamatoria delimita la lesin. La muestra debe tomarse de los bordes,
en las tias de tipo capiti deben tomarse cabellos quebradizos, en las de tipo corporis debe tomarse
de escamas de la piel recogidas con bistur, y en aquellas de tipo ungueal la muestra corresponde a
material depositado entre el lecho y lmina de la ua adems de fragmentos de esta ltima. Estos
hongos son dismrficos y en el laboratorio se puede cultivar solo la fase saproftica, en las muestras
clnicas no se observan sus estructuras de fructificacin.

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220
Aquellos hongos que colonizan pelos pueden hacerlo en distintas formas:

- Endothrix: las hifas y conidias se localizan dentro del pelo. Esta
distribucin se encuentra principalmente en el gnero Trichophyton.
- Ectothrix: la conidia se localiza fuera del pelo, formando grandes
racimos. Es caracterstico del gnero Microsporum.
- Ectoendothrix: las conidias estn tanto dentro como fuera del pelo.
- Pelo microsprico: presenta hifas longitudinales y exteriormente
grupos de esporos formando un mosaico.
- Pelo microide: los esporos externos se encuentran formando
cadenas.
- Pelo megaesporado: presenta una vaina perifrica constituida por
grandes esporos

Gnero Epidermophyton, Epidermophyton floccosum

Agente etiolgico: Tia crural.

La nica especie de este gnero conocida como patgena es E. floccosum, el cual es el agente causal
del exantema marginado de hebra o tia crural, afectando preferentemente la piel de la cara interna
de los muslos y raramente uas, produce pie de atleta, al igual que Trichophyton, y onicomicosis.

El diagnostico se establece por examen microscpico de frotis teido con KOH 20%, tinta Parker,
DMSO o calcoflor. El cultivo se realiza en agar Sabouraud a 25 C por 10 a 15 das, donde tiene
crecimiento radial con pigmento verde limn, las macroconidias nacen de una misma hifa y se ven
globosas como raquetas de tenis, con tres a cinco clulas de pared lisa y fina, a menudo se agrupan
en tres a cuatro elementos, las clamidoconidias estn presentes en particular en elementos ms
viejos.

Gnero Microsporum

Dentro de este gnero existen tres especies de importancia mdica:
- M. canis: agente de piel lampia afecta a menores de 12 aos, su fase teleomorfa se denomina
Arthroderma olae. Puede ser transmitida por perros y gatos, considerndose zooflica.
- M. audouini: produce tia capitis, es antropoflica y puede causar epidemias en nios.
- M. gypseum: produce un pigmento rojo en cultivo. Es un dermatofito de los animales, pero
tambin se ha encontrado en la tierra y puede ser transmitido por el hombre.

La caracterstica microscpica principal distintiva del gnero es la
presencia de macroconidias multicelulares de paredes gruesas y
rugosas en cultivo. Habitualmente las macroconidias estn presentes
en pequea cantidad, dispersas en forma irregular, en general de
forma elptica u oval (fusiforme), presentan adems muy pocas
microconidias, en su forma sexual producen cleistotecios que se
observan en muestra directa.
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221
Microsporum canis: produce una enfermedad llamada tia microsporita, que cursa con
infeccin del pelo de forma ectothrix o endothrix, los cuales tienden a cortarse sin producir
dolor, formando placas grandes y circulares. En la piel lampia causan
Se encuentra frecuentemente en perros y gatos los cuales constituyen la principal
fuente de infeccin. Produce colonias de crecimiento rpido (7 a 15 das) en agar Sabouraud,
agar Lactrimel u otro, de superficie plana y abundantes hifas areas que dan un aspecto velloso
a la superficie con pigmento amarillo que difunde al medio. Produce macroconidias fusiformes
con extremos afilados y paredes gruesas. Presentan de uno a quince septos con formas de
barril, inclinadas y algo dobladas hacia un lado en la punta.

Microsporum gypseum: produce colonias de crecimiento rpido de color canela o gamuza y
textura pulverulenta con bordes irregulares; hay microconidios y las macroconidias son
fusiformes con puntas romas, paredes gruesas y posee menos de 6 septos. Las macroconidias
tienen menos forma de barril que M. canis y tienen extremos redondeados.

Microsporum audouini: produce colonias planas de color blanco, textura sedosa y su reverso es
de color rosado. Puede haber microconidios, tienen un aspecto distorsionado y son parecidas a
las de M. canis. Este hongo es parsito estricto del ser humano.

El diagnstico se realiza con frotis directo teido con KOH 20% o tinta Parker donde se observan
macroconidias puntudas o filosas con 6 a 8 septos y extremo aguzado. En cultivo en agar Sabouraud,
Lactrimel o DTM la colonia se ve algodonosa y produciendo pigmento amarillento alrededor de la
colonia, tras 10 a 15 das de incubacin a 25 C.

Gnero Trichophyton

Dentro de este gnero son cinco las especies de mayor importancia mdica: T. mentagrophytes, T.
shoenleinii, T. tonsurans, T. verrucosum y T. rubrum. Son los hongos ms queratinoflicos y por tanto
afectan piel, pelos y uas, producen Onixis tricoftica, una infeccin del borde libre de la ua que
afecta ms las mano que los pies, su diferencia con Candida spp es que esta ltima produce onixis
periungueal sin engrosamiento.

Trichophyton mentagrophytes: productor de tia interdigital, tia plantae y onicomicosis, en
cultivo produce colonias vellosas o algodonosas de color blanco cremoso y pulverulentas en el
centro con mrgenes radiados, en el reverso hay un color rojo o caf. Posee dos variedades:
T. mentagrophytes var mentagrophytes: produce macroconidias cilndrico fusiforme
y microconidias esfricas, con hifas espiraladas, afectan los pelos de forma ectothrix.

T. mentagrophytes var interdigitale: carece de macroconidias e hifas espiraladas,
presenta microconidias piriformes alternadas en la hifa. El diagnstico diferencial con
Susan Arias Donoso
222
T. rubrum se establece en base a la Prueba del rgano Perforador, que se realiza

colocando un pelo infectado con el hongo en agar con extracto de levadura, lo cual
se incuba durante 10 das, observndose perforaciones en el pelo si corresponde a la
variante interdigitale. Tambin puede realizarse segn la presencia de la enzima
ureasa la cual se encuentra presente en T. mentagrophytes var interdigitale pero no
en Trichophyton rubrum; o segn la pigmentacin en agar Lactrimel, donde T. rubrum
da un color rojo vinoso, en tanto que T. mentagrophytes var interdigitale da un color
amarillo-caf.
Trichophyton rubrum: es el ms comn de los dermatofitos causantes de micosis en el ser

humano, produce tia del cuerpo o tia de piel lampia, tia de la mano, uas, pies, barba,
ingle y del cuero cabelludo en mayores de 14 aos. Es frecuente en pacientes que desarrollan,
por su actividad, una mayor humedad y calor. Tiene una morfologa macroscpica variable,
con ms frecuencia da colonias blancas, algodonosas con un pigmento rojizo oscuro en el
reverso, algunas cepas producen un pigmento rojizo melanoide que difunde en el medio.
Tambin hay cepas granulosas o plegadas. Las microconidias tienden a la forma de lgrima,
regulares en tamao y suelen distribuirse a cada lado de las hifas, lo que produce un aspecto
pjaros >
tienen forma de lpices con paredes lisas y delgadas. Esta especie se asla solo en el ser
humano.

Trichophyton shoenleinii: es un dermatofito antropomrfico que causa tia fvica, la cual se

caracteriza por desarrollar lesiones costrosas de color oro y placas alopcicas por pedida del
cabello, el cual no vuelve a crecer por cicatrizacin de la herida, est relacionada con extrema
pobreza y se transmite por contacto entre los seres humanos. Es de crecimiento lento
produciendo una colonia lampia cerebriforme, sin micelio areo. Microscpicamente se
observan los caractersticos candeleros fvicos o hifas en forma de astas de ciervo y
abundantes clamidoconidios. No forma microconidias.
Susan Arias Donoso
223
Trichophyton tonsurans: es agente causal de tia tricoflica, en ella se observan placas

pequeas pseudoalopcicas por infeccin de tipo endothrix, afecta piel, uas y cuero
cabelludo, formando cadenas de artroconidias dentro del pelo.

Trichophyton verrucosum: agente de la tia del ganado se traspasa del ganado al hombre,
produce cadenas de clamidoconidias grandes y laxas dentro de los pelos, en una invasin de
tipo ectoendothrix, produciendo pelos megaesporados, en el ser humano causa una severa
infeccin en el cuero cabelludo.
Querion de Celso

Es una tia inflamatoria que puede afectar toda la cabeza, es producida por M. canis en 80%, y
T. tonsurans en un 15%. Se producen placas pseudoalopcicas con eritema, inflamacin pustular
y exudado purulento.

Para evitar el contagio de hongos productores de micosis cutnea debe evitarse el uso de ropa
sinttica, el calzado cerrado, adems de realizar un secado cuidadoso y mantener adecuadas
condiciones de higiene, como el corte constate y frecuente de uas.

Susan Arias Donoso
224
Hongos productores de micosis sub-cutneas

Son producidas por hongos que tienen un poder patgeno reducido y que normalmente se
adquieren por traumatismos, especialmente en pies y manos, ya que el hbitat es el suelo y
vegetales.

Sporothrix schenckii

Agente etiolgico: esporotricosis mucocutnea.
Hbitat: plantas secas y tierra.
Trasmisin: a travs de la piel por traumatismos o
mordeduras de animales (roedores).
Factores de riesgo: trabajo directo con tierra.

Es un hongo dismrfico que crece de forma filamentosa a temperaturas inferiores a 37 C en agar
Sabouraud, y en forma de levadura a 37 C en medios enriquecidos como agar infusin cerebro
corazn o agar sangre, y en los tejidos parasitados. La forma filamentosa a 24 C presenta colonias de
crecimiento lento (3 a 5 das) inicialmente claras, hmedas o levaduriformes, que posteriormente se
convierten en colonias duras y cerebroidales de color marrn o negro en su totalidad o por zonas,
debido a la produccin de conidias pigmentadas. En el examen microscpico se observan hifas
delgadas, con conidiforos perpendiculares, de la que nacen conidias hialinas que se agrupan en
forma de margarita. A medida que el cultivo envejece, la conidiacin aumenta y aparecen conidias
ssiles a lo largo de los conidiforos. En la forma levaduriforme se observan levaduras ovales o en
forma de cigarro habano.
Susan Arias Donoso
225
La esporotricosis es una micosis subcutnea de evolucin subaguda o crnica que generalmente se

adquiere por inoculacin traumtica con el hongo, pero ocasionalmente puede ser adquirida por
inhalacin, razn por la cual podra desarrollarse a nivel pulmonar, la localizacin ms comn en
adultos son las extremidades inferiores y en nios es ms frecuente en la cara. Esta micosis est
relacionada con la ocupacin de las personas, presentndose principalmente en campesinos, amas de
casa, horticultores, jardineros, vendedores de flores y laboratoristas. La enfermedad se manifiesta
con una protuberancia pequea, rojiza e indolora en el sitio de inoculacin (hasta 3 meses despus de
la lesin) que se convierte finalmente en una lcera, normalmente produce lesiones nodulares y
ulcerosas en los ganglios linfticos, es decir, causa adenopatas regionales segn el punto de
localizacin. La esporotricosis diseminada se desarrolla en personas inmunocomprometidas cuando
inhalan polvo cargado de esporas.

Esta micosis presenta amplia distribucin mundial (excepcionalmente en Europa), es as como en
Amrica los pases con mayor endemicidad son El Salvador, Uruguay, Colombia, Venezuela, Mxico,
Brasil, Bolivia y Per, adems presenta lata frecuencia en Japn y Sudfrica.

Para el diagnstico se utiliza el cultivo y adems existe prueba cutnea de la esporotriquina. Dentro
de las tcnicas serolgicas para deteccin de anticuerpos, las ms sensibles y especficas son las de
aglutinacin y las de inmunodifusin. Adems puede emplearse tcnicas de sensibilizacin con
aplicacin intradrmica de 0,5 mL de esporotricina metablica observando la zona de induracin que
indica si ha habido o no contacto con el agente. Tambin se desarrolla un diagnstico histopatolgico.

Para el tratamiento se utiliza yoduro de potasio, anfotericina B, 5 fluorcitosina e imidazoles.

Micetomas

Distribucin: mundial, ms frecuente en zonas tropicales y subtropicales. Ms

prevalente en Amrica central y Sudamrica.
Agentes etiolgicos:
Micetomas actinomicticos: Nocardia, Actinomyces, Actinomadura y
Streptomyces
Micetomas eumicticos: La ms importante es Madurella, en menor
importancia: Acremonium, Pseudallescheria, Exophiala, Leptosphaeria,
Curvularia, Fusarium, Aspergillus, etc.
Trasmisin: inoculacin traumtica a travs de piel, especialmente en pies, manos,

rodillas, piernas, brazos, cabeza y cuello.
Grupo de riesgo: personas que realizan labores de tipo agrcola; en edad productiva
(20 50 aos).

D. Son infecciones fngicas crnicas
de la piel y tejidos submucosos con tendencia a afectar los huesos, en humanos y animales, causados
tanto por hongos como por bacterias actinomicetales como Nocardia.

en una regin de la India del mismo nombre, se presenta como un aumento de volumen crnico,
progresivo y localizado con abscesos y granulomas. El aumento del volumen es relativamente
Susan Arias Donoso
226
indoloro y se caracteriza por la formacin de micetomas que producen una fistulizacin a nivel
cutneo y subcutneo que comienza a florecer, con la consiguiente eliminacin de pus y
microcolonias de distinto color, dependiendo del agente etiolgico, que se observan como grnulos.
Involucra al tejido cutneo, subcutneo, fascias y huesos de pies y manos, con mayor incidencia en las
extremidades inferiores.

Actinomicetomas:

Phylum: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Subclase: Actinobacteridae
Orden: Actinomycetales

Los actinomicetomas producen el 60% de todos los micetomas del mundo y dentro de estos
se encuentran las bacterias anaerbicas endgenas como Actinomyces israelii y Actinomyces
boris, as como bacterias aerbicas exgenas como Actinomadura spp, Nocardia brasiliensis y
Streptomyces spp. Estos microorganismos crecen en forma de filamentos y se ramifican con
fragmentacin o esporulacin. Son bacterias bacilares o cocoides que cuando infectan tejidos
pueden estar aisladas o en cadenas. Existe un gran nmero de especies agentes de
actinomicetomas dentro del orden, siendo las ms frecuentes:
- Nocardia brasiliensis
- Actinomadura pelletieri
- Actinomadura madurae
- Nocardia otitidiscavarium
- Streptomyces somaliensis
- Actinomyces israelii
- Nocardia asteroides
- Actinomyces boris

El actinomicetoma endgeno presenta tres formas clnicas: crvico-facial, torcica y
abdominal. En la primera el germen se encuentra en la mucosa oral y luego de extraccin
dental o de amgdalas, fractura de mandbula u otros traumas penetra a planos ms
profundos iniciando el proceso infeccioso. En la forma torcica, la aspiracin o umbilicacin
de bacterias del foco cervical puede llevar a compromiso pulmonar. El compromiso
abdominal (leo, colon, hgado, ovarios, trompas de Falopio, tracto urinario) resulta de la
ingestin del agente causal, por diseminacin hematgena o por contigidad desde el foco
torcico.

El actinomicetoma exgeno se caracteriza por la aparicin de lesiones ppulonodulares con
drenaje en los sitios de inoculacin. Se producen masas tumorales, supurativas e
inflamatorias que deforman el rea afectada y se eliminan grnulos rojos, amarillos o blancos.
Las extremidades inferiores son sitios frecuentes de Nocardia spp; sin embargo esta infeccin
se encuentra rara vez en extremidades superiores, trax o abdomen.

Eumicetomas

Los hongos agentes de micetomas son muy numerosos. A nivel mundial, Madurella
mycetomatis y M. grisea (hongos dematiceos) son los agentes ms frecuentes, pero otras
especies como Scedosporium apiospermum, Aspergillus spp o Fusarium spp (hongos de
filamento hialino) son reportados con cierta frecuencia por diversos autores. Desde un punto
Susan Arias Donoso
227
de vista taxonmico los agentes de eumicetoma se ubican en la divisin Ascomycota y

Deuteromycota. Entre los ms frecuentes estn:

Hongos hialinos
Hongos dematiceos
Acremonium spp
Curvularia spp
Aspergillus flavus
Exophiala jeanselmei
Fusarium spp
Leptosphaeria spp
Scedosporium apiospermum Madurella mycetomatis
Scopulariopsis brumptii
Madurella grisea
Phialophora verrucosa
Pyrenochaeta romeroi

Los hongos dematiceos forman granos negros visibles en forma macroscpica, mientras
que los hongos hialinos forman granos blancos o blanco-amarillentos.

Para el diagnstico de laboratorio se realiza examen directo, por observacin del material purulento
que drena a travs de las fstulas, con identificacin de los granos macroscpicos, y examen
microscpico. Las caractersticas morfolgicas de los granos, entre las que se encuentran el tamao,
forma, dimetro de los filamentos o pseudofilamentos que los forman, color, presencia de clavas o
flecos, son auxiliares muy tiles para establecer la etiologa. Los grnulos deben ser examinados a
travs de preparaciones al fresco con KOH y tincin Gram; los de origen eumicticos presentan hifas
septadas, que no toman el Gram, y filamentos mayores de 1 um, los actinomicticos, en cambio, son
Gram- en el centro pero con mrgenes radiados Gram+ de 1 um de dimetro.

Madurella micetomatis: presencia de filides.

Para realizar el cultivo los granos se mezclan y se lavan con solucin salina isotnica, se centrifugan
a 3000 rpm y posteriormente el sedimento se siembra en agar Sabouraud glucosado con y sin adicin
de antibiticos; el desarrollo de la mayora de los agentes se presenta despus de 2 a 3 semanas de
incubacin a 25 C. Otro medio adecuado para su desarrollo es el de Lowenstein Jensen que se incuba
en las mismas condiciones. Las colonias tienen bordes bien definidos e irregulares, aspecto creo o
membranoso, generalmente de superficie plegada, aunque las de Nocardia otitidiscavarium tienden a
ser pulverulentas. La identificacin precisa de los agentes se realiza por medio de pruebas
bioqumicas.

La velocidad de crecimiento de los Eumicetomas es variable y depende de cada agente. As,
Fusarium spp, Aspergillus spp o Scedosporium apiosporium se desarrollan en menos de ocho das;
mientras que Madurella spp, Lepstosphaeria spp y Pyrenochaeta romeroi son de crecimiento lento,
demorando ms de tres semanas. Madurella mycetomatis crece mejor a 37 C que a 30 C a la inversa
Susan Arias Donoso
228
de M. grisea, y produce grnulos caf oscuro grandes, en tanto que M. grisea produce grnulos
negros. La identificacin se realiza en base a sus caractersticas morfolgicas macroscpicas y
microscpicas.

Caractersticas morfolgicas de grnulos asociados con microorganismos

causantes de micetomas en humanos
Agente
Actinomadura madurae
Actinomadura pelletieri
Nocardia brasiliensis
Nocardia asteroides
Streptomyces somaliensis
Madurella mycetomatis
Nocardiopsis dassonvillei
Color
Blanco
Rojo
Blanco o naranja
Blanco
Amarillo
Negro
Blanco o amarillo
Dimetro (mm)
1,5 2
0,2 0,5
< 0,5
< 0,5
0,5 2
1 2
< 0,5
Consistencia
Blanda
Dura
Blanda
Blanda
Dura
Dura
Blanda

Para el tratamiento de actinomicetomas con diagnstico conocido se utiliza generalmente
sulfametoxazol trimetoprim solo o combinado con amikacina, para tratamientos empricos se utilizan
la tetraciclina, amoxicilina y estreptomicina. En el caso de los Eumicetomas no existen drogas
especficas, se emplean antimicticos como ketoconazol, Itraconazol, griseofulvina, miconazol y
anfotericina B; tratamiento que es largo y no siempre da buenos resultados; por tanto se acompaa
de ciruga con extirpacin completa del proceso.

Faeohifomicosis

Faeohifomicosis es un trmino utilizado para describir infecciones causadas por hongos que
contienen melanina en su pared celular, los que causan infeccin grave en pacientes
inmunosuprimidos y tienen predileccin por el sistema nervioso.

Bajo esta definicin se incluye una gran variedad de hongos y de cuadros clnicos. La mayora de los
pacientes presentan abscesos cerebrales, subcutneos o sinusitis alrgica. La mayor parte de los
abscesos cerebrales se deben a Cladophialophora bantiana, Ochroconis gallopavum, Exophiala
dermatitidis, especies de Bipolaris y Ramichloridium mackernziei, y aparecen en personas
previamente sanas. Los abscesos subcutneos suelen ser nicos, se forman en lugares que han
sufrido traumatismos mnimos y afectan a personas tanto inmunodeprimidas como
inmunocompetentes. Otras especies implicadas son:
- Alternara spp
- Exophiala jeanselmei
- Aureobasidium pullulans
- Exophiala spinifera
- Curvularia spp
- Exserohilum spp
- Drechsiera spp
- Phialophora verrucosa

El diagnstico de la enfermedad requiere una alta sospecha clnica. En la mayora de los casos, se
realiza mediante estudio histopatolgico y demostracin del hongo en cultivo. Los hongos son
pigmentados de color parduzco, pero se pueden observar algunas hifas hialinas al utilizar KOH 10%.
Las muestras clnicas de aspirados o biopsias (previa homogenizacin) se pueden cultivar
directamente en agar Sabouraud glucosado con o sin cicloheximida, incubando durante 4 a 6
Susan Arias Donoso
229
semanas a 25 30 C. La mayora de los agentes crecen muy lentamente pero son visibles en la
primera semana, creciendo inicialmente como levaduras negras y luego como colonias miceliales. La
identificacin definitiva del hongo se realiza mediante examen microscpico.

En general se considera que la faeohiformicosis es una enfermedad rara, por lo que no existen
estudios controlados que demuestren la efectividad de ningn tratamiento. La mayor parte de los
casos reportados de infeccin qustica o subcutnea localizada han respondido adecuadamente a la
escisin quirrgica. El itraconazol ha sido el medicamento ms efectivo para el tratamiento de la
enfermedad, tambin se han reportado casos con adecuada respuesta a anfotericina B, ketoconazol,
fluconazol y 5-fluorocitosina.

Cromoblastomicosis

Distribucin: mundial, ms frecuente en Amrica y regiones de clima tropical y

subtropical.
Reservorio: suelo y materia vegetal.
Hospedadores: mamferos
Transmisin: inoculacin traumtica. No hay transmisin persona-persona.

Esta micosis es conocida tambin como Cromomicosis o Dermatitis Verrugosa, es una enfermedad
que afecta a la piel y el tejido subcutneo, causada por diversos hongos de pared pigmentada
conocidos como hongos dematiceos. La va de entrada de estos hongos es por la piel que ha sufrido
una herida traumtica. La infeccin produce varios tipos de lesiones, que van desde placas
eritematosas y descamativas, similar a una dermatitis, hasta la formacin de cuerpos vegetativos
verrugosos que afectan fundamentalmente la extremidades del cuerpo.

Son producidas por una gran variedad de hongos, destacando por su frecuencia los gneros:
Phialophora, Cladophialophora y Fonsecaea.

El diagnstico se realiza a partir de muestra obtenida por raspado o biopsia de las lesiones, que se
observan con KOH al 10 20% en busca de clulas esfricas oscuras, llamadas cuerpos esclerticos,
tpicos de este cuadro; con septos en distintos planos y que son producidos solamente en la fase
parasitaria. El cultivo se realiza en agar Sabouraud simple o con antibiticos (cloranfenicol, actinoide),
pero fructifican mejor en agar harina de maz, pudiendo desarrollarse a temperatura ambiente o a 37
C a los 7 a 12 das. Se observan colonias vellosas, algodonosas, de color negro o ligeramente gris
verdoso, verde oscuro o caf. Se diferencian por el tipo de fructificacin que muestran en cultivo.

- Phialophora: presenta filides en forma de florero o botella, son ssiles, de banda ancha y
cuello estrecho, con collarete terminal en el cual se encuentran las fialosporas, que son
ovaladas, hialinas y de pared delgada. Las fialosporas se unen por un material adhesivo y se
aglutinan en forma de ramillete.
- Cladophialophora: presenta conidiforos cortos y pigmentados, con formacin terminal de
conidios, cada uno de los cuales produce al subsecuente por gemacin, de manera que
forman cadenas, que pueden ser cortas, de 3 a 4 esporas, muy ramificadas y con conidios
elpticos de tamao constante.
- Fonsecaea: es una combinacin de los 3 tipos de fructificacin anteriores.
Susan Arias Donoso
230
Izquierda: Fructificacin tipo Phialophora (Phialophora verrucosa); Centro Izquierda: Fructificacin tipo
Cladophialophora, (Cladophialophora bantiana); Centro Derecha: Fructificacin tipo Fonsecaea: (Fonsecae
pedrosoi); Derecha: cuerpos esclerticos.

El tratamiento es quirrgico y busca retirar la lesin cutnea, tambin se puede aplicar nitrgeno
lquido, los antimicticos como itraconazol no tienen buena difusin.
Susan Arias Donoso
231
Micosis sistmicas o profundas

Se producen a nivel de todos los rganos por hongos dismrficos como:

-
-
-
-
Histoplasma capsulatum: Histoplasmosis.

Coccidioides immitis: Coccidioidomicosis.
Blastomyces dermatitidis: Blastomicosis.
Paracoccidioides brasiliensis: Paracoccidioidomicosis.

Normalmente se encuentran habitando el suelo o el ambiente en general, algunos animales pueden
actuar como reservorios donde la transmisin es habitualmente por inhalacin, traumatismos bucales
o lesiones de la piel. A estos hongos se les llama propios de las Amricas, pues se dan ms
frecuentemente en Amrica del Norte, Centro y especialmente en Amrica del Sur, preferentemente
en Brasil y toda la zona caribea donde son endmicas.

Histoplasma capsulatum

Distribucin: endmica en Buenos Aires.
Hbitat: lugares con alta humedad, temperatura estable y constante como cuevas o
minas.
Transmisin: inhalacin de fragmentos miceliales desde material orgnico con alto
contenido de nitrgeno asociado a excremento de murcilagos. No existe transmisin
persona-persona.
Reservorio: murcilagos, pjaros, perros, gatos, ratas, zorrillos, zarigeyas, zorros y
otros animales.
Forma infectante: macroconidia tuberculada.

Agente productor de Histoplasmosis, en su fase parasitaria se encuentran formas levaduriformes
capsuladas, mientras que en la fase saproftica se encuentra formando parte del suelo como hifas con
pequeas microconidias y macroconidias tuberculadas, las que son grandes y ovaladas, formando
tubrculos con forma similar a una rueda de timn, sta constituye la forma infectante.

Arriba y centro: macroconidias tuberculadas; Abajo: forma parastica.
Susan Arias Donoso
232
Es cultivable en agar sabouraud, agar papa y agar con extracto de levadura a partir de muestras de
tejido o exudado, donde forma colonias miceliales, lisas, blanquecinas o de color rosado al comienzo,
despus son vellosas y de color blanco o caf parduzco. Las hifas son largas, ramificadas y septadas, a
cuyos lados hay microconidias esfricas. Las macroconidias son equinuladas o tuberculadas,
redondeadas o pirifomes y nacen en conidiforos tubulares. La conversin a la fase de levadura se
logra al sembrar agar sangre adicionado con cistena, a pH 7,4 o en medio Kurung, se colocan a 37 C
y se tapan los tubos para aumentar la tensin de CO2, la colonia es lisa y se encuentran levaduras al
microscopio con blastosporas de cuellos estrecho y un solo ncleo. Tambin se puede utilizar agar
infusin cerebro corazn a 37 C donde las colonias toman aspecto cerebroidal.

En forma caracterstica se observan clulas fagocticas con la levadura en su interior en muestras de
aspirado de mdula sea, el examen directo se realiza con una tincin de Giemsa a partir de una
muestra sangunea con el objetivo de observar los fagocitos con levaduras intracelulares. Se puede
realizar un anlisis serolgico para el diagnostico y pruebas cutneas, como las histoplasminas, una
prueba de sensibilizacin en que se aplica el antgeno, provocando la formacin de una induracin
cuyo tamao indica si est o no presente el hongo de acuerdo a ciertos parmetros establecidos ante
la sospecha clnica. La demostracin de infeccin no implica necesariamente la presencia de
enfermedad, por lo cual la nica forma de efectuar un diagnstico de certeza es demostrando el
hongo en tejidos o en secreciones no contaminadas.

El 95% de los casos son inaparentes, subclnicos o benignos y solamente un 5% se manifiestan
clnicamente como una enfermedad pulmonar progresiva, adems puede manifestarse de forma
sistmica invadiendo varios tejidos, provocando enfermedad cutnea crnica o sistmica fatal
fulminante. Todos los estadios de la enfermedad simulan una tuberculosis donde el diagnostico
diferencial es bastante sencillo y se basa en comprobar la existencia de bacilos cido alcohol
resistentes.

Paracoccidiodes brasiliensis

Es el nico agente etiolgico de la Paracoccidioidomicosis que resulta de la inhalacin de esporas
del hongo con la formacin de lesiones granulomatosas dondequiera que se establezca. Esta es la
micosis ms prevalente en Amrica del Sur, solamente en regiones subtropicales, donde existen
cultivos de caf, banana, algodn y yerba mate (Brasil, Venezuela, Colombia, Ecuador, Uruguay y
Argentina). La enfermedad tiene una variada presentacin y principalmente expresa dos formas
clnicas: la forma aguda, con compromiso del sistema fagoctico mononuclear, y la forma crnica de
evolucin insidiosa y compromiso usualmente pulmonar. La forma aguda es prevalente entre los
nios y personas inmunocomprometidas. El periodo de incubacin de la enfermedad vara entre
semanas hasta 60 aos. Existe frecuente compromiso del sistema gastrointestinal en alrededor del
30% de los casos, en donde causa lesiones ulcerativas granulomatosas con formacin de abscesos y
Susan Arias Donoso
233
diseminacin linftica regional, as como compromiso hepatoesplnico. Ms frecuentemente se

afecta el rea ileocecal, apndice y regin anorrectal. El cuadro clnico se caracteriza por dolor
abdominal, distensin y la presencia de masa, usualmente en el rea ileocecal, pudiendo
acompaarse de diarrea y/o fiebre. Entre los factores predisponentes se encuentran el tabaquismo,
alcoholismo, diabetes y desnutricin.

Para el diagnstico se puede realizar examen directo con KOH o lugol en desgarro, exudado o
triturado de la biopsia. Se obsevan levaduras esfricas u ovales de doble pared y con gemacin
mltiple. Las blastosporas a veces forman cadenas de 4 a 12 esporas, adoptando una disposicin en
D D
Giemsa o Wright.

La colonia micelial (a 28 C y 3 semanas de incubacin) muestra filamentos septados y ramificados,
hifas en espiral, clamidosporas y microconidias no caractersticas. En la fase de levadura (a 37 C) se
observan clulas multigemantes, como rueda de timn.

Coccidioides immitis

Distribucin: reas calurosas
Transmisin: inhalacin de polvo con
artroconidias, las infecciones cutneas
son raras y se da ms en hombres que en
mujeres en una proporcin 90:1 a 40:1.

Este hongo es agente productor de
Coccidioidomicosis, tambin conocida como
fiebre del valle de San Joaqun, enfermedad
de California y enfermedad de Posadas y
Wernicke. En la mayora de los casos el
hongo penetra por la va respiratoria, a
partir del foco pulmonar primario y
dependiendo del estado inmunolgico del
paciente, se puede diseminar a otros
rganos (sistema nervioso central, rin,
huesos, piel, etc.), en algunos pacientes
desarrolla una enfermedad crnica e incluso
causa la muerte. El periodo de incubacin de
la enfermedad vara entre 1 y 4 semanas.

La Coccidioidomicosis se puede presentar de dos maneras: una enfermedad primaria que se da
solamente en los pulmones y una enfermedad diseminada la cual se desarrolla posterior a la
localizacin en el pulmn, produciendo fungemia e infectando otros tejidos como huesos largos,
tejidos cutneos o subcutneos y las articulaciones, incluso a nivel menngeo. Esta infeccin simula
una tuberculosis, y muchas veces es confundida con ella, ocasionando cuadros de muy larga duracin
por la administracin de tratamientos inadecuados. Puede provocar la muerte por meningitis.

El tratamiento de esta patologa se realiza con itraconazol y fluconazol.
Susan Arias Donoso
234
La primera descripcin de esta micosis en el mundo fue realizada en Argentina y de acuerdo a las
reas endmicas y mapas epidemiolgicos, la frecuencia de esta infeccin es elevada en Estados
Unidos y el norte de la Repblica Mexicana, estas reas presentan clima semidesrtico con tolvaneras
frecuentes y suelos con elevadas concentraciones de sales de boro y sulfato de calcio, propicios para
el desarrollo de C. immitis.

A partir de 2002 segn estudios de tipificacin molecular y descripcin fenotpica, se demostr la
existencia de dos especies causantes de esta enfermedad, una de ellas, C. immitis, se distribuye
principalmente en el valle de California en Estados Unidos, mientras que en el resto de ese pas,
Mxico, Centro y Sudamrica existe otra especie denominada actualmente C. posadasii.

La poblacin susceptible a esta micosis corresponde a agricultores, excavadores, antroplogos,
laboratoristas que manipulan este hongo, mujeres embarazadas e individuos de raza negra. Entre los
factores predisponentes estn el tabaquismo, alcoholismo, diabetes, desnutricin, trasplantes, SIDA,
drogadiccin e insuficiencia renal.

El diagnstico se establece por cultivo y examen directo, de una muestra obtenida por biopsia de
tejido, con observacin de esporangios qusticos o esfrulas, tambin se puede realizar serologa a
travs de ELISA; o prueba cutnea de la coccidiodina que establece si el paciente ha estado o no en
contacto con el patgeno, sta se considera positiva si el tamao de la induracin e superior a 5mm a
las 24 - 72 horas posterior a la aplicacin. La inmunidad natural de los humanos frente a este hongo
es muy elevada puesto que el 60% de los individuos permanecen asintomticos y solo 39% tienen
lesiones localizadas.

En los tejidos y bajo condiciones especiales de cultivo (medios lquidos a 40 C) da lugar a
estructuras llamadas esfrulas. El moho crece con rapidez (3 a 5 das) y produce colonias
algodonosas, las que desarrollan elementos tubulares, o hifas, provistas de septos que limitan y dan
lugar a estructuras cilndricas pequeas (como barriles) denominadas artroconidias, que son livianas
y altamente infecciosas.

En los cultivos especiales a 40 C, el moho empieza a desarrollar su ciclo parasitario cuando las
artroconidias adoptan una forma redondeada, aumentan de tamao y su pared celular se hace ms
gruesa. La esfrula al romperse, durante la fase parasitaria, libera el contenido al ambiente, al quedar
libres las endosporas conservan el potencial para convertirse en una nueva esfrula, stas estructuras
de fructificacin se desarrollan dentro del ser humano y en el medio germinan formando los micelios
que nuevamente originan las estructuras infectantes llamadas esporas que por inhalacin se
trasmiten a otro hospedero, en el cual pueden diseminarse hacia otros rganos.
Susan Arias Donoso
235
Blastomyces dermatitidis
La blastomicosis, tambin denominada enfermedad de Glichrist o enfermedad de Chicago, es una
infeccin fngica poco frecuente, pero importante, presente principalmente en Amrica del Norte,
frica y la India. La neumona es la manifestacin ms comn de la blastomicosis, y los pulmones son
casi siempre la puerta de entrada de la primo infeccin. La piel, los huesos, la prstata y el sistema
nervioso central son tambin atacados, en ese orden descendente de frecuencia. El periodo de
incubacin de la enfermedad vara entre 3 semanas a 3 meses, con promedio de 45 das.
Para el examen directo se obtiene desgarro, lavado bronquial o pus, y se monta una preparacin
con solucin salina o KOH. Se observa una levadura con brote germinativo de base muy ancha, la
Blastospora generalmente crece sin separarse de la clula madre y se presentan en pares.
Al principio del cultivo llevado a cabo a 25 C (10 a 15 das), el micelio se encuentra fragmentado,
despus aparecen conidios ovoides o piriformes, laterales o terminales >
colonia en agar sangre o agar infusin cerebro corazn incubada a 37 C es cremosa y plegada,
observndose microscpicamente clulas levaduriformes de 8 a 15 um con blastosporas de base
ancha. Para el cultivo se puede emplear tambin agar Sabouraud glucosado. Actualmente para su
diagnstico existen kits de ELISA con sensibilidad de 100% y especificidad de 85,6%. No existen
pruebas cutneas estandarizadas ya que generalmente tienen reaccin cruzada con histoplasmosis.

Susan Arias Donoso
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Hongos productores de micosis oportunistas

Los hongos oportunistas son organismos monomrficos que, no siendo patgenos en condiciones
habituales, producen cuadros clnicos en el ser humano en determinadas circunstancias, en general
son monomrficos, se comportan como saprofitos y se alimentan de materia orgnica en
descomposicin, pueden formar parte de la microbiota del ser humano y pueden tener una relacin
parasitaria en pacientes que tienen algn compromiso en su estado inmunitario.

La capacidad de producir patologas depende de:

Factores del hospedador
- Compromiso del estado inmunitario por presencia de enfermedades de base como: SIDA,
leucemia, diabetes, neoplasias, tuberculosis, etc.
- Raza, ciertos grupos tnicos estn ms propensos a ciertas infecciones micticas que
otros.
- Edades extremas.
- Utilizacin de detergentes o productos desengrasantes que barren con la grasitud
produciendo laceraciones que actan como puerta de entrada para ciertos hongos.
- Tratamiento prolongado con antibiticos o corticoides
- Grandes procesos quirrgicos como trasplantes.

Factores del patgeno
- Capacidad de adherirse al estrato corneo o mucosas, penetrar los tejidos y multiplicarse
in vivo.
-
y poder superar los mecanismos de defensa natural.
- Capacidad de daar el tejido del hospedador mediante enzimas y toxinas.

La presencia de un hongo en una muestra no determina que ste sea causante de una enfermedad
determinada, por tanto su diagnstico requiere observar el mismo hongo en el examen microscpico
de muestras seriadas en forma reiterada. Adems requiere aislar el mismo hongo en cultivo seriado y
en la serie de tubos, la existencia de reacciones serolgicas positivas, detectando la presencia de un
antgeno especfico derivado del metabolismo del hongo; la observacin del hongo en el estudio
histopatolgico, y la existencia de causas predisponentes.

Los representantes ms importantes son: Candida, Aspergillus, Rhizopus, Mucor y Cryptococcus.

Candida albicams

Factores predisponentes: tratamiento antimicrobiano prolongado, especialmente a
nivel intestinal o vaginal que desplazan lacto bacilos. Diabetes, neoplasias,
administracin de corticoides, prtesis dentales, irritaciones crnicas de la mucosa
oral, mala higiene oral y tabaquismo.

Es el hongo ms aislado de muestras clnicas, Candida albicams forma parte de la microbiota
normal, colonizando la cavidad oral en un 25%, pudiendo llegar hasta un 50% en pacientes con
Susan Arias Donoso
237
prtesis dental, tambin se encuentra en el tracto gastrointestinal (25-50%) y en el tracto vaginal (25-
50%).

La formacin de hifas le confiere la capacidad de adherirse a las clulas del hospedador y nutrirse de
l, a la vez que le ayudan a evitar la fagocitosis, por evasin de los mecanismos especficos de
defensa. En el caso de Candida albicams estas hifas deben ser consideradas como pseudohifas ya que
es una levadura que no genera micelios. Poseen adems una proteinasa cida que favorece la
invasin.

Candidiasis mucocutnea
Cavidad oral
Genitales
Queilitis
Glocitis
Muget*
Tonsilitis
Vulvovaginitis
Pseudo-
membrana
Balanopostitis
Piel y Uas
Intertrigo
Crural
(Inguinal)
Submammero
tercer espacio
interdigital de
la mano en
mujeres
Dermatitis
de Paal
Paales mal
lavados
Onicomicosis
Onixis
pertungueal
(Surcos de
Beau)
Onicolisis
*Muget: placas blancas en lengua o paladar, puede acompaarse por una pseudomembrana en la cavidad
oral, tratamiento con azul de metileno o violeta de genciana.

La candidiasis sistmica involucra la produccin de sepsis, candidiasis ocular, renal, esofgica y
pulmonar, se produce principalmente en pacientes inmunocomprometidos o con enfermedad de
base importante.

El diagnstico se realiza en el raspado de las lesiones que se observan al microscopio, teidas con
Gram, al fresco con KOH o azul de lactofenol, este ltimo puede destruir la levadura en ciertas
circunstancias. Puede realizarse tambin por estudio histopatolgico y cultivo en agar sabouraud o
agar sangre. Se requiere diagnstico diferencial con infecciones producidas por dermatofitos,
psoriasis, eritrasma por Corynebacterium (pseudomicosis) y dermatitis seborreica.

La identificacin de Cndida albicams se logra mediante la Prueba de Reynolds Braude o Prueba del
d '
minutos a 2 horas con el fin de observar la formacin de tbulos muy caractersticos. Tambin se
pueden utilizar algunos medios especiales como el cromoagar, donde las levaduras producen una
coloracin especifica; o mediante sistemas API donde se realizan pruebas de fermentacin de
azcares.
Susan Arias Donoso
238
Izquierda: pseudohifas caractersticas, Centro: hifas con clamidoconidios, Derecha: tbulos germinativos.

El tratamiento se realiza con Imidazol y, especialmente, fluconazol o itraconazol, nistatina y

clotrimoxazol en forma tpica.

Cryptococcus neoformans

Distribucin: cosmopolita.
Trasmisin: inhalacin, invasin directa de la piel, por laceraciones o por disrupcin
de tejido. No hay transmisin persona-persona.
Hbitat: heces de palomas.

Existen tres variedades de este hongo:
- Cryptococcus neoformans var neoformans: es el ms importante, de l existen 5
serotipos: A, B, C, D y AD.
- Cryptococcus neoformans var gatti
- Cryptococcus neoformans var grubii

Es una levadura que se caracteriza y diferencia del resto por su capacidad de producir cpsula, que
le confiere la capacidad de evadir el sistema inmune por ser antifagocitaria. Es un hongo de
crecimiento lento y extracelular, incapaz de producir pseudohifas, puede crecer a 37 C aunque
, ellas lo eliminan por
medio de las deposiciones alcalinas, en las cuales se alimentan de la creatinina, all pierden la cpsula
y disminuyen su tamao, de modo que aumenta la posibilidad de transmisin por inhalacin.

La criptococosis corresponde a la infeccin producida por Cryptococcus neoformans, la cual se
puede dar en forma crnica o subaguda, donde los tejidos ms afectados son el SNC con la
produccin de meningitis, pulmones, piel y glndulas linfticas. La mayora de las infecciones son
subclnicas y normalmente se da en pacientes con algn estado de inmuno compromiso. La
criptococosis se clasifica en:
- Criptococosis pulmonar.
- Criptococosis del Sistema Nervioso Central: por invasin de tejidos va hematgena,
puede producir meningitis, meningoencefalitis o algunas lesiones focales con cefalea.
- Criptococosis cutnea.
- Criptococosis sea (10%)
- Criptococosis visceral: ms frecuente en pacientes con trasplante renal por tratamiento
con corticoides que deprimen el sistema inmune y en pacientes con SIDA.

La presencia de cpsula permite hacer un diagnstico de laboratorio rpido y certero, en LCR,
lavado traqueo bronquial y exudado, mediante tincin con tinta China, donde la cpsula se observa
Susan Arias Donoso
239
como un halo blanco alrededor de la levadura. El cultivo se realiza en agar sabouraud sin
cicloheximida, que inhibe el crecimiento de este agente. El diagnostico inmunolgico se basa en la
deteccin del polisacrido capsular demostrable en LCR, suero y orina durante fases activas de la
micosis. Por otro lado este hongo es produce la enzima ureasa, que inactiva el complemento, y
fermenta carbohidratos.

El tratamiento se realiza con anfotericina B, en desuso por su toxicidad, flucitosina y ketoconazol.

Aspergillus spp

Hbitat: ambiental.

Transmisin: inhalacin de conidiosporas.

Factores de riesgo: inmunosupresin.

Es un hongo tabicado con hifas ramificadas, gran cantidad de conidiosporas y conidiforo, se
encuentran distintas especies de importancia clnica:
- Aspergillus fumigatus (80%)
- Aspergillus flavus
- Aspergillus niger
- Aspergillus nidulans
- Aspergillus terreus

Dentro de las manifestaciones clnicas se encuentran:
- Aspergilosis bronco pulmonar alrgica: producida preferentemente en pacientes con
asma o fibrosis qustica.
- Aspergilosis pulmonar saproftica endobronquial: existe tos crnica productiva en
pacientes con enfermedades de base como tuberculosis, en ellos normalmente se
observan aspergilomas, llamadas bolas, que son tumores de hongo a nivel de la base
del pulmn observables en radiografas.
- Aspergilosis invasora en pacientes inmuno comprometidos: Se puede generar en
sectores de trasplantes o en pacientes con enfermedad de base como tuberculosis, en
que el pulmn queda muy afectado favoreciendo el desarrollo del hongo.
- Sinusitis aspergilosa.
- Otomicosis aspergilar.
- Aspergilosis en pacientes con VIH: afecta preferentemente pulmn y trquea.
- Cuadros menngeos, a nivel del miocardio, en piel y en huesos.

El diagnstico se logra por aislamiento del hongo en muestras de desgarro, biopsia o de la secrecin
correspondiente; o radiografas pulmonares para observar aspergilomas, la tomografa axial
computarizada permite observar la invasin, se puede determinar tambin la presencia de
inmunoglobulinas como IgG e IgE.
Susan Arias Donoso
240
El tratamiento incluye ciruga y la administracin de antimicticos como anfotericina B, itraconazol

o imidazol, sin embargo la administracin de antifngicos no es efectiva cuando ya se ha producido la
bola aspergilar.

Aspergillus fumigatus: esta especie le sigue en importancia mdica a Candida.
Corresponde a un hongo filamentoso con conidiforos cortos y flexuoso, de pared lisa,
incoloros o ligeramente verdosos, tabicado y con ramificaciones. Nacen de una clula base
del micelio, ensanchando al final en una vescula amplia, coronada de esterigmas. Los
esterigmas nacen de la zona media de la vescula conidial y cubren parcialmente la
superficie de sta (1/3 o 2/3 de la superficie). Los conidios son vedes oscuros, unicelulares,
redondos o pseudoestricos formando cadenas largas que no se ramifican y permanecen
unidos formando columnas. Las colonias son de crecimiento rpido, planas, vellosas,
compactas, blancas al comienzo toman rpidamente un color vede grisceo, de aspecto
aterciopelado y consistente. La superficie muestra algunos pliegues y mechones vellosos
blancos, el dorso es incoloro, pero al envejecer toma tintes amarillos o pardos.

Aspergillus niger: esta especie presenta conidiforos con pared lisa, hialina o pigmentada.
La vescula conidial es globosa y produce esterigmas alrededor de toda ella. Los esterigmas
son biseriados, las ramas primarias miden 30 um de largo y pueden estar tabicadas,
mientras que las secundarias son cortas y miden 8 um de longitud, a partir de la cuales
brotan los conidios de color castao, marrn o negro. Las colonias son de crecimiento
rpido en agar Sabouraud a 25 y 37 C. El color de las colonias al principio es blanco a
amarillo y luego negro, su textura es granula y el reveso es incoloro o crema.
Mucormicosis o Zigomicosis

Es una infeccin general aguda, de rpida evolucin, fulminante, que afecta preferentemente a los
vasos sanguneos; causada por los gneros Mucor, Rhizopus y Absidia, los que pertenecen a la divisin
Zygomycota.

Normalmente se localiza a nivel maxilofacial y craneal, donde la ms frecuente es la forma
rinocerebral que afecta a la cavidad bucal, nariz y senos paranasales. Se adquiere por invasin desde
la sangre alcanzando los tejidos. Afecta principalmente a pacientes inmunocomprometidos o con
alguna enfermedad de base debilitante, especialmente diabticos con cetoacidosis importante, los
cuales son, segn la casustica de esta enfermedad, los pacientes que ms padecen mucormicosis,
puede encontrarse tambin en pacientes con leucemia, linfomas, eliminacin importante de
Susan Arias Donoso
241
nitrgeno ureico o tratamiento con corticoides, tambin se da en grandes quemados, pacientes

desnutridos y prematuros.

Dentro de los agentes que producen esta enfermedad el ms importante es Rhizopus arrhizus que
normalmente se presenta en pacientes diabticos con cetoacidosis, aunque se ha encontrado
tambin en pacientes oncohematolgicos, especialmente leucmicos y pacientes con linfoma que
tienen neutropenia prolongada o trasplante de mdula sea. Este hongo alcanza el 90% de las
zigomicosis rinocerebrales asociadas a cetoacidosis diabticas.

Rhizopus arrhizus: Sus colonias se desarrollan a 25 y 37 C, pero no a 45 C, a los cuatro
das llegan a ocupar totalmente la placa Petri, inicialmente son blancas pero luego cambia
a gris parduscas. El micelio carece de septos, presentan estolones y rizoides, los
esporangioforos no son ramificados, tienen una longitud de 2 mm, generalmente estn en
grupos, formando verticilios en cuya base se sitan los rizoides, presenta esporangios
esfricos, los cuales son de color gis parduzco a negro. La columela es subesfrica
abarcando ene 50 a 70% del esporangio. Las esporangiosporas son angulares y con estras
longitudinales, grisceas, subesfricas o elipsoidales.

Clasificacin de las mucormicosis

Forma clnica
Rinocerebral (90%)
Pulmonar
Gastrointestinal
Mucocutnea
Agente causal
R. arrhizus
A. corymbifera
A. corymbifera
R. rhizopodoformis
R. pasillus
Factores predisponentes
Diabetes + acidosis
Hemopatas
Kwashiorkor
Quemaduras
Inmunodepresin
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
243

Virus

Los virus han desde hace muchos aos ligados a la salud humana en todas las clases sociales y en
todas las edades, existen informes detallados en el ao 1400 a. C que expresan que en la tumba de un
faran existan evidencias objetivas de que ste haba sido afectado por una enfermedad viral.

La virologa es la rama dentro de la microbiologa que se dedica al estudio de los virus y las
enfermedades que estos causan. Se inicio con el descubrimiento de Dimitro Iwanowski en 1892 del
virus del mosaico del tabaco, enfermedad que afecta a la planta del tabaco, donde se producen
manchas amarillas; l dedujo que haba una partcula mucho ms pequea que una bacteria capaz de
causar esa patologa, pues el agente no era retenido en el filtro de porcelana.

Ms tarde en 1898 Martinus Beijerinck acu el trmino de virus para referirse a esta partcula que
produca enfermedades; y Friederich Loefler y Paul Frosch llegaron a la misma conclusin que
Iwanowski respecto a la difteria.

En 1917 Flix d' Herelle impuso el trmino bacterifago, correspondiente a un virus especializado
que infecta a bacterias a travs de placas de lisis en las placas Petri, descubrimiento realizado en
siembras de bacterias en que aparecan crculos transparentes, deduciendo que existan virus que
digeran a las bacterias destruyndolas.

Son parsitos intracelulares obligados de pequeo tamao (20 a 250 nm) metablicamente inertes,
asociados a una clula viable; son partculas infecciosas que obtienen un beneficio del hospedador sin
aportar nada y que se replican a s mismos en el interior de las clulas. No son seres vivos porque por
si mismo solo "nacen y mueren" y no tienen metabolismo propio, sin embargo tampoco pueden ser
llamados muertos ya que contienen material gentico para poder multiplicarse, de modo que estn
en el lmite de lo vivo y lo muerto.

La replicacin, en general, es independiente del genoma del hospedador, hospedador que
usualmente es especfico. El material gentico pueden ser DNA o RNA pero nunca ambos, la
organizacin de este puede ser:
- Hilada
- Estar en duplicados
- Cadena doble o simple
- Lineal o circular

En ocasiones estn rodeados por una
membrana, que se denomina envoltura,
compuesta por restos de membrana
plasmtica de la clula hospedadora y que
por tanto posee protenas y glicoprotenas
tiles para el diagnstico de laboratorio,
sta le confiere ciertas caractersticas de
resistencia frente al sistema inmune,
Susan Arias Donoso
244
Microbiologa: Virus
protegindolo de la accin de nucleasas bacterianas o tisulares, otorga adems afinidad por

receptores celulares, determinando el tropismo por tejidos particulares. Los virus que carecen de esta
envoltura se llaman s , estos ltimos son
los ms patgenos, pero tambin los ms susceptibles a la accin de agentes fsicos como radiacin e
iodforos. Poseen adems un nucleocpside de cido nuclico, una cpside o cubierta proteica y en
algunos casos enzimas (transcriptasas, integrasas y enzimas lticas), como en VIH.

Normalmente el virus que no est dentro de la clula se llama virin, o nucleocpside o partcula
vrica.

La cpside es la estructura ms importante del virus, ya que contiene el acido nuclico, est
formada por una nica protena que se repite muchas veces, siendo montona y cada una de las estas
unidades que forma parte de la cpside se denomina capsmero, y ocupa entre un 50 a 90% de la
partcula viral sus funciones son: la proteccin del cido nuclico, la unin del virus a receptores de
membrana de la clula que infectan (virus desconocidos), esta caracterstica es vlida para los virus
desnudos, actan como complejo antignico, estimulando la respuesta inmune del hospedador.
Puede ser icosadrica o polidricos, formados por capsmeros triangulares; o helicoidal, formada por
cpsides alargadas donde los capsmeros se disponen en forma helicoidal en torno al acido nuclico,
infectan clulas vegetales. Cuando ambas se juntan forman las estructuras complejas y simtricas,
siendo tpico de los bacterifagos o fagos, los oxomixovirus son amorfos, globosos y helicoidales.

Virus con envoltura
Virus complejo
Virus helicoidal
Virus icosadricos

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
245
Los fagos son virus mixtos o complejos cuya cpside est formada por una porcin icosadrica
seguida de otra zona helicoidal. Estos virus infectan bacterias.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
Cabeza o Cpside
Collar.
Cola o lamina
Fibra o espinas
Placa basal
DNA
Taxonoma

Se basa en la morfologa (simetra helicoidal o icosadrica, compleja), la composicin qumica (cido
nuclico, presencia de enzimas), el modo de replicacin y el lugar de ensamblado de la Cpside o
envoltura, (en el citoplasma, en el ncleo), encontrndose: orden, familia, subfamilia, gnero y
especie, con una nomenclatura determinada:

- Orden viral: agrupacin de virus que comparten caractersticas comunes sufijo virales
- Familia y subfamilia: agrupacin de gneros virales que comparte caractersticas comunes
o distintas de otros miembros de otra familia. Para familias es el sufijo viridae y para
subfamilia el sufijo virinae
- Gnero: agrupacin de especie como parte de las bacteria, se agrega del sufijo virus
- Especie viral: constituida de una forma de replicacin con un nicho ecolgico particular. El
ms importante de la clasificacin jerrquica. El nombre va acompaado por la palabra
virus.
o Familia: herpesviridae
o Subfamilia: alfaherpesvirinae
o Gnero: simplexvirus
o Especie: Herpes virus

Los virus se pueden clasificar segn varios criterios:
- Clula que parasitan o infectan:
Virus animales, vegetales o bacterifagos.
- Forma:

Helicoidales, polidrico o complejos.
- Por tener o no envoltura:

Virus envueltos o desnudos.
- Por su cidos nuclicos:

DNAmc, DNAbc, RNAmc, RNAbc.
- Por el tipo del tejido que infectan:
La distribucin de los receptores en las clulas o tejidos
determina la especificidad de los virus.
Neurotropos:
clulas tejido nervioso
Dermotropos:
clulas de la piel
Exantemticos
Entricos:
virus de diarrea
Hepticos:
hepatitis
Respiratorios.

Los virus tienen mucha importancia en la vida del ser humano por razones econmicas y militares,
existen 21 familias que afectan al ser humano.
Susan Arias Donoso
246
Microbiologa: Virus
VIRUS DNA
Familia
Gnero
Herpesviridae

Alphaherpesvirinae
Gammaherpesvirinae
Betaherpesvirinae

Especie
Enfermedad
Herpes simplex
virus type 1 (aka HHV-1)
Herpes simplex
virus tipo 2 (aka HHV-2)
Varicella zoster virus
(aka HHV-3)
Epstein Barr virus
(aka HHV-4)
Sarcoma de Kaposi (KSHV),
asociado al herpesvirus,
(aka Human herpesvirus 8)
Citomegalovirus Humano (aka
HHV-5)
Encefalitis, estomatitis aguda,

llaga labial.
Human herpesvirus 6
Human herpesvirus 7
Herpes genital, encefalitis

Varicela, Herpes Zster
Mononucleosis, hepatitis,
tumores (BL, NPC)
Tumores, Sarcoma de Kaposi
(KS) y algunos linfomas de
clulas B
Mononucleosis, hepatitis,
pneumonitis, congnitas
Rosola (aka E. subitum),
pneumonitis
Algunos casos de rosola
Adenoviridae
Mastadenovirus
Adenovirus Humano
49 serotipos (especies);
infecciones respiratorias.
Papillomavirus
Papilloma virus Humano
70 especies; verrugas y
tumores
Polyomavirus
JC, BK viruses
usualmente poco graves; JC

causa PML en SIDA
Hepadnavirus
Virus de la Hepatitis B
Hepatitis crnica, cirrosis,

tumores hepticos.
Papovaviridae

Hepadnaviridae

Poxviridae
Vaccinia virus
Orthopoxvirus
Monkeypox virus

Parvoviridae
Parapoxvirus
Orf virus
Virus de la vacuna de la
viruela
Enfermedad similar a la
viruela, zoonosis muy rara (un
brote reciente en el Congo; 92
cases desde 2/96 - 2/97)
Lesiones drmicas "pocks"
Exantema infeccioso. (5
enfermedad), crisis aplstica,
prdida fetal.
Parvovirus
B19 parvovirus
Dependovirus
Virus Adeno-asociado
til para terapia gnica; se

integra en el cromosoma
Circovirus
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
VIRUS RNA
Familia
Picornaviridae
Gnero
Especie
Enterovirus
Polioviruses

Caliciviridae
Enfermedad
Hepatovirus
Rhinovirus
Calicivirus
Virus de la Hepatitis A
Human rhinoviruses
Norwalk virus
3 tipos; meningitis asptica, poliomielitis

paraltica
32 tipos; Aseptic meningitis, rashes
29 tipos; meningitis asptica,
miopericarditis
Hepatitis aguda (propagacin fecal-oral)
115 tipos; Resfriado comn
Enfermedad gastrointestinal.
Hepevirus
Virus de la Hepatitis E
Hepatitis aguda (propagacin fecal-oral)
Paramyxovirus
Parainfluenza viruses
Rubulavirus
Virus de las Paperas
Morbillivirus
Virus del sarampin
Pneumovirus
Virus Sincitial
respiratorio
Bornavirus
Borna disease virus
Echoviruses
Coxsachieviruses
247

Paramyxoviridae
Bornaviridae
4 tipos; Resfriado comn, bronquitis,

neumona
Paperas, parotitis, meningitis asptica
(raro: orquitis, encefalitis)
Sarampin: fiebre, exantema (raro:
encefalitis, SSPE)
Resfriado comn(adultos), bronquiolitis,
neumona (nios)
Relacionado con enfermedades tipo:
esquizofrenia en algunos animales.
Flu: fiebre, mialgias, malestar general, tos,
neumona
Orthomyxoviridae Influenzavirus
A
Influenza virus A
Influenzavirus
B
Influenza virus B
Flu: fiebre, mialgias, malestar general, tos,

neumona
Lyssavirus
Virus de la Rabia
Rabia: incubacin larga y despus

enfermedad del SNC y muerte.
Filovirus
Virus de bola y Marburg Fiebre hemorrgica, muerte

Rhabdoviridae

Filoviridae

Retroviridae
Oncovirinae
Spumavirinae
Lentivirinae
Human T-lymphotropic
virus type-1
Human foamy viruses
Virus tipo 1 y 2 de la
inmunodeficiencia
humana
Leucemia de clulas T del adulto. (ATL),

paraparesia espstica tropical (TSP)
No se conoce patologa
SIDA, enfermedad del SNC
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248
Microbiologa: Virus
Togaviridae
Rubivirus
Virus de la Rubeola
Exantema; malformaciones congnitas
Alphavirus
Virus de la Encefalitis
equina (WEE, EEE, VEE)
encefalitis

Flaviviridae
Virus de la Fiebre
Amarilla
Virus del Dengue
Virus de la Encefalitis de
San Luis
Hepacivirus
Virus de la Hepatitis C
Rotavirus
Rotaviruses Humano
Virus de la Fiebre de
Garrapatas de Colorado
6 tipos; Diarrea
Orthoreovirus
Reoviruses Humanos
Enfermedad leve
Hantavirus
Sndrome Pulmonar por

Hantavirus
Hanta virus
Propagado por roedores; enfermedad

pulmonar letal
Propagado por roedores; fiebre
hemorrgica con sndrome renal.
Phlebovirus
Arenavirus
Virus de Lassa
Coronavirus
Flavivirus

Reoviridae
Coltivirus
Bunyaviridae
fiebre, hepatitis
Fiebre hemorrgica
encefalitis
Hepatitis (con frecuencia: crnica), cncer
heptico
Transmitido por garrapatas; fiebre
Arenaviridae

Astrovirus

Coronaviridae
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Microbiologa: Virus
249
Replicacin viral

Los virus se multiplican solo en clulas vivas, es necesaria la sntesis de protenas virales usando la
maquinaria de sntesis proteica de la clula hospedadora, siendo capaz de producir un mRNA. La
replicacin puede producirse en el ncleo o en el citoplasma de la clula, dependiendo del acido
nuclico que posean:
o Los virus RNA se replican en el citoplasma.
o Los virus DNA se replican en el ncleo.

Las etapas de la replicacin viral son:
1. Adsorcin: evento por el cual el virus toma contacto con la clula.
2. Penetracin: el virus ingresa mecnicamente la informacin gentica que contiene o bien
es integrado a la clula por el mecanismo de endocitosis.
3. Denudacin: desnudamiento
4. Eclipse: transcripcin, traduccin y duplicacin del genoma vrico.
5. Peplicacin: aumenta el nmero de individuo
6. Maduracin o ensamblaje
7. Liberacin: puede ocurrir lisis celular o exocitosis.

La curva de crecimiento viral presenta tres etapas distintas:
- Fase de eclipse o de latencia: no hay aumento en el nmero solo ocurre transcripcin o
traduccin, se tiene la mnima expresin de partculas virales
- Fase de maduracin y liberacin: hay crecimiento exponencial del nmero de partculas
virales.

Susan Arias Donoso
250
Microbiologa: Virus
Fase de decaimiento de la progenie viral: el virus no se multiplica y baja la cantidad de

progenie, que se van perdiendo en el tiempo
Patogenia de la infeccin vrica

La patogenia de la infeccin vrica incluye 6 etapas distintas:
1. Entrada en la clula hospedadora: los virus penetran a las clulas animales por medio de
tres mecanismos
a. Fusin de la envoltura vrica con la membrana celular: se produce el desnudamiento
del virus, el acido nuclico penetra dentro de la clula, fusionndose la membrana del
virus con la de la clula.
b. Endocitosis de un virus envuelto: tras la endocitosis el virus ingresa competo a la
clula y se desnuda en su interior.
c. Adsorcin de virus desnudos a la superficie celular: se produce una fusin entre la
cpside y la membrana; tras lo cual el cido nuclico ingresa a la clula.

2. Replicacin primaria.
3. Diseminacin o viremia (1/2)
4. Dao clula en rganos target:
- Efectos directos: provoca gasto de energa de la clula, interrupcin de la sntesis de
macromolculas de la clula, competencia por los ribosomas para fabricar sus propias
protenas.
- Efectos indirectos: integracin del genoma viral, induccin de mutaciones,
inflamacin y respuesta inmune.

5. Respuesta inmune.
6. Evolucin de la enfermedad.

La virulencia depende de la cantidad de viriones presentes en el inoculo, de la va de penetracin
(piel, respiratorio, digestivo, genital) de la velocidad de replicacin, un virus que se replique ms
rpido tiene ms posibilidad de producir ms dao, ya que el sistema inmune no alcanza a producir
respuesta. Adems depende del estado de inmunidad del hospedador, la respuesta inmune, edades
extremas, estado nutricional, raza, medio ambiente (temperatura y humedad).

Modelo de infeccin
- Infeccin ltica: el virus ingresa su material gentico, se multiplica dentro y destruye la clula.
- Infeccin persistente: crnicas productivas y latentes.
- Infeccin transformante: Se produce la integracin de la totalidad o parte del genoma viral al
genoma celular. La clula transformada adquiere caractersticas morfolgicas y biolgicas
nuevas, aumenta la velocidad de crecimiento, pierde la inhibicin por contacto y produce
inmortalizacin, lo cual se encuentra implicado en los procesos de cncer.

Tipos de infecciones virales

- Infeccin aguda: enfermedades que se manifiestan abruptamente.
- Infeccin persistente: crnicas productivas y latentes con o sin reactivacin.
- Infecciones localizadas: papilomatosis, herpes zoster, rinitis.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
251
- Infecciones generalizadas: sida, sarampin, mononucleosis.

- Primoinfecciones: virus varicela zoster, 1 infeccin varicela, pero cuando el virus vuelve a
manifestarse no lo hace en forma de varicela sino que lo hace como herpes zoster.
- Reinfecciones: gripe.
- Reactivaciones: VVZ virus varicela zoster

Cintica de antgenos y anticuerpos en una infeccin viral

Lo primero que ocurre es una elevacin de IgM importante y despus ante la reinfeccin aparece un
elevado titulo de IgG.

Infeccin por Bacterifagos

1. Adsorcin
2. Unin irreversible
3. Contraccin del collar o cola
4. Inyeccin del ADN

Diagnstico viral

Se basa en la deteccin de la:
a) Presencia de virus: aislamiento viral, tomando la muestra inoculndola en cultivos celulares.
Protenas (Ag virales): inmunofluorescencia, ELISA, PCR, RT-PCR que permiten la observacin
directa de partculas virales; tambin se observan partculas virales por microcopia
electrnica.
b) Respuesta inmune del hospedador: inmunoglobulinas (IgM, IgG, a veces IgA secretora).
Efecto citoptico en lneas celulares (CPE), todas las clulas se destruyen y cada virus usa un
efecto citoptico especifico, algunos que producen sincicio, lisis celular, entre otros.

Susan Arias Donoso
252
Microbiologa: Virus
Virus respiratorios

Producen cuadros clnicos en vas respiratorias altas afectando preferentemente a nios de 1 a 3
aos, incluso hasta 5 aos. Las reinfecciones son frecuentes (3 4 episodios al ao) ya que en su
mayora estos virus no generan inmunidad. Los virus respiratorios ms importantes son:
Orthomyxovirus, Paramixovirus, Adenovirus, Rinovirus y Coronavirus.

- Virus influenza A, B y C.
- Virus parainfluenza 1, 2 y 3.
- Virus respiratorio sincitial.
- Adenovirus
- Coronavirus (SARS)
- Metapneumovirus.

Familia/ subfamilia Gnero
Especie
Serotipos Enfermedad
Orthomyxoviridae
Influenza A, B, C
Muchos
1, 2, 3, 4A
y 4B
Influenza
Parainfluenza
Pneumovirus
Virus respiratorio
sincitial (VRS)
A y B
Metapneumovirus
Metapneumovirus
humano (hMPV)
Rubulavirus
Morbilivirus
Mastadenovirus
Rubivirus
Parotiditis
Sarampin
Adenovirus (A F)
Rubeola

1
51
1
Picornaviridae
Rinovirus
Enterovirus
Rinovirus humano
Echo
Coxsacckie
>130
Varios
varios
Coronaviridae
Coronavirus
Varios
Herpesviridae
Herpesvirus
SARS
Herpes simplex
Varicela zoster
Citomegalovirus
Paramyxoviridae
Adenoviridae
Togavirus
Gripe
IRA alta, baja,
neumona, Croup
IRA alta, baja,
neumona
IRA alta, baja,
bronquiolitis y
neumona.
Paperas
Sarampin
IRA alta y baja
Rubeola
IRA alta
IRA baja
Encefalitis
Miocarditis
IRA alta
Neumonitis en
inmunosuprimidos
Familia Orthomyxoviridae

Son virus pleomrficos con envoltura causantes de una enfermedad respiratoria aguda que cursa
con fiebre y algunos sntomas sistmicos como: dolor de cabeza, mialgia, tos, rinitis y sntomas
oculares, normalmente se genera congestin alta por aumento de secreciones a nivel nasal y
conjuntival, la tos sobreviene como respuesta para eliminar las partculas virales presentes en la
trquea. A esta familia pertenece el virus Influenza tipo A, B y C responsable de la gripe.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
253
Virus influenza

Distribucin: mundial
Reservorio: Tipo A: hombre y animales. Tipo B: hombre.
Transmisin: secreciones respiratorias.
Eliminacin: secreciones respiratorias.
Resistencia: sensibles a luz UV y cloro.

Su estructura se compone de:
Nucleocpside: Formada por protenas presentes en el
core del virus.
- RNA monocatenario
- Nucleoprotena (NP)

Envoltura: bicapa lipdica que obtiene a partir de su
hospedador cuando ha salido de la clula que ha
infectado previamente.
P
P
M
Prrroootte
teen
nnaaaM
M
Espculas: glicoprotenas de superficie que determinan
serotipos.
- Neuraminidasa (N o NA): permite la liberacin del virus. Se conocen 9 tipos de
neuraminidasas, de las cuales solo 2 afectan al ser humano. N: 1 y 2
- Hemaglutinina (H o HA): toma contacto con receptores celulares del hospedador y se
adhiere a ellos. Actualmente de conocen 15 hemaglutininas, de ellas solo 3 afectan al
ser humano. H: 1, 2, 3, 5 y 9

Protena de matriz (M): forma parte de la matriz del virus influenza tipo A; se sita en la parte
ms interna de la membrana lipdica

Se clasifican en distintos tipos de acuerdo a su composicin, basndose en la presencia de protenas
de la matriz (M) y de la nucleocpside (NP).
- Tipo A: Es el tipo ms importante por ser causante de pandemias. Es capaz de infectar de
forma natural a numerosas especies animales y al ser humano, encontrndose en aves
migratorias y de corral, cerdos, caballos, focas y humanos.
- Tipo B: Solamente afecta al ser humano y no es responsable de pandemias.
- Tipo C: Produce cuadros leves bastante espordicos.

Comnmente existen cambios antignicos en el virus influenza, los que se pueden clasificar en:
- DRIFT: Cambios pequeos en la informacin gentica (mutaciones) que no producen cambios
en la cepa y clnicamente se expresa como brotes anuales.
- SHIFT: Cambios mayores en la informacin gentica por recombinacin entre dos genes de
hemaglutinina o neuraminidasa, de modo que se genera una partcula viral con mayor
letalidad que puede desencadenar pandemias o epidemias en mayor grado.

El virus infecta al hospedador principalmente por va area alcanzando los pulmones donde, tras
una incubacin de 1 a 2 das, la hemaglutinina se une a los receptores celulares permitiendo el
ingreso del virus a la clula y la liberacin del cido nuclico, el cual, utilizando la maquinaria celular,
Susan Arias Donoso
254
Microbiologa: Virus
sintetiza todas sus protenas y vuelve a ensamblar el virus que sale de la clula gracias a la accin de
las neuraminidasas, arrastrando consigo parte de la bicapa lipdica y provocando destruccin del
epitelio respiratorio por lisis celular. Esto genera cuadros respiratorios intensos que normalmente
pueden ser de tipo generalizado. La excrecin del virus se produce desde el 1 al 4 da.

1. Adsorcin:
unin de las HA

La respuesta de tipo celular esta mediada por Linfocitos T citotxicos. La respuesta de tipo humoral
se produce como mximo hacia la segunda semana con produccin de anticuerpos contra HA y NA de
tipos IgM e IgA; los de tipo IgG se producen hacia la tercera semana como mximo. En procesos de
reinfeccin se producen solo anticuerpos IgG e IgA.

La influenza puede tener complicaciones como: Neumona, Sinusitis, Otitis media aguda (nios) o
Miocarditis.

El diagnstico se logra utilizando cultivos celulares, PCR en tiempo real o Inmunofluorescencia.

Como forma preventiva debe realizarse educacin sanitaria a las personas indicndoles que debe
cubrirse la boca al toser o estornudar, idealmente con pauelos desechables o usando el ngulo del
codo; y realizar un correcto lavado de manos. Adems existen vacunas recombinantes contra los
distintos serotipos del virus basadas en los anticuerpos frente a de las hemaglutininas y
neuraminidasas. Se realiza anualmente una vigilancia epidemiolgica, con el fin de identificar cules
son los virus que mayormente se presentan en una poca del ao determinada.

Dentro de las alternativas teraputicas est el Oseltamivir, un inhibidor de la neuraminidasa que,
por tanto, impide la diseminacin del virus, a la vez que disminuye los malestares derivados de la
influenza como la sinusitis y la otitis.

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
255
Familia Paramyxoviridae:

Resistencia: sensibles a luz UV y cloro.

Son virus RNA envueltos, de clase helicoidal esfricos,
pleomrficos y poco tpicos. La nucleocpside contiene
RNA y nucleoprotenas, posee adems un complejo
polimerasa que transforma el RNA en DNA, la protena M
se sita en la parte ms interna de la membrana lipdica.

Existen muchos grupos de glicoprotenas segn la configuracin del virus, HN y F en el caso de los
Paramyxovirus; y, G y F en el caso de los Pneumovirus. La protena F permite la exclusin y participa
en la penetracin viral, mientras que la lipoprotena G facilita la adhesin.

Glicoprotenas de superficie de la familia Paramyxoviridae

Gnero
Glicoprotenas Miembros tpicos
Subfamilia Paramyxovirus
Paramyxovirus
HN, F
HPIV1, HPIV3
Rubulavirus
HN, F
HPIV2, HPVI4, virus parotiditis
Morbilivirus
H, F
Virus Sarampin
Subfamilia Pneumovirus
Pneumovirus
G, F
Virus Respiratorio Sincitial
Metapneumovirus
G, F
Metaneumovirus Humano
*HPIV: Virus Parainfluenza Humano
Virus parainfluenza

Transmisin: Aerosoles y secreciones.

Es un virus respiratorio muy habitual que produce resfriado comn, bronquiolitis (inflamacin de la
pared bronquial), Croup (laringotraqueobronquitis obstructiva) y neumona. Se clasifica en distintos
serotipos:
- Tipo I y II: Es epidmico y el ms importante, afecta a de 6 meses a 5 aos, el Croup es el
cuadro clnico ms habitual, una enfermedad que se presenta principalmente en otoo,
pueden causar tambin bronquiolitis y neumona.
- Tipo III: Es endmico y afecta a nios menores de 6 meses, produciendo bronquiolitis y
neumona. Afecta durante todo el ao.
- Tipo IV: Es endmico y en general afecta a nios de hasta 5 aos, llegando a producir cuadros
clnicos incluso en adultos, se manifiesta como un resfriado comn y es bastante infrecuente.

Cuando el virus ingresa al ser humano y alcanza los bronquiolos produce inflamacin de los tejidos y
consecuentes lesiones, que determinan la aparicin de bronquiolitis tpicas de los virus Parainfluenza,
el cuadro clnico se caracteriza por comenzar en el tracto respiratorio alto y derivar posteriormente al
tracto respiratorio bajo, desde donde se extiende la bronquiolitis. El virus Parainfluenza tipo II y III
provoca el 40% de las infecciones respiratorias diagnosticadas en un periodo estacional y genera
aproximadamente un 20% de hospitalizacin.
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256
Microbiologa: Virus
Virus Sincitial Respiratorio (VSR)

Grupo de riesgo: menores de 2 aos.


Se encuentran dos tipos de Virus Sincitial Respiratorio, A y B, clasificados segn la configuracin de
la glicoprotena G. Son menos mutgenos que los Ortomyxovirus, de modo que no existe mucha
variabilidad gentica. Poseen RNA de cadena simple, no segmentada.

Tras un periodo de incubacin de 3 a 5 das infectan el tejido a nivel nasofarngeo, donde se
multiplican. Una vez que se ha liberado el virus, comienza la colonizacin del tracto respiratorio bajo
a travs del ataque clula a clula o mediante macrfagos, formando sincisios celulares, que
corresponden a fusiones de muchas clulas que confluyen en muchos ncleos causando
disfuncionalidad del tejido y destruccin del epitelio mucociliado cilndrico bronquiolar que progresa
a necrosis celular; existe adems infiltracin mononuclear que genera edema y broncorrea hasta la
obstruccin bronquial. Provoca bronquiolitis en un 75%. El cuadro clnico se asemeja al causado por el
virus influenza y adenovirus, normalmente se produce en nios menores de 2 aos, y especialmente
entre los 2 y 6 meses de edad, agudizado en nios prematuros, ya que durante esta etapa las IgG
maternas no protegen del todo frente a estos agentes virales. Este virus es responsable de la mayor
parte de las hospitalizaciones de nios menores a 2 aos y puede afectar a pacientes de edad
avanzada, con enfermedad de base o inmunosupresin, en los cuales genera neumona y sndrome de
distrs respiratorio (SRD). La enfermedad cursa con rinorrea, tos, faringitis, fiebre moderada,
sibilancia, taquipnea, otitis media, hipoxia, disnea y cianosis. Se comporta como agente productor de
infecciones nosocomiales. Las reinfecciones son posibles pero menos severas por una respuesta
inmune incompleta, que genera memoria inmunolgica. Hay repuesta T dependiente por la
proliferacin de linfocitos T CD4 y CD8, con liberacin de citoquinas y leucotrienos responsables de la
inflamacin.

El diagnstico de laboratorio se realiza por inmunofluorescencia, ya que el cultivo solo se emplea en
procesos de investigacin.

Diferenciacin de los sntomas

Bronquiolitis o neumona
Bronquitis
Infeccin de las vas altas
Croup
VRS
+++
++
++
+

Metapneumovirus humano (hMPV)

Susan Arias Donoso
Grupo de riesgo: nios menores de 5 aos.

Reservorio: humano.
Recurrencia: estacional.
Parainfluenza
+
+
+++
++++
Influenza
+
+
++++
+
Microbiologa: Virus
257
Este virus se aisl por primera vez en Holanda en el ao 2001, ya en el ao 2005 comenzaron a
haber reportes de la presencia de este virus en cuadros respiratorios, se cree que su incidencia
estacional (invierno y primavera) es de 15% en nios menores de 5 aos, aunque puede afectar
tambin a adultos y ancianos, y provocar infecciones nosocomiales. Existen 2 serogrupos (A y B), cada
uno con 2 sub grupos basados en el genotipo. Puede haber concomitancia de distintos virus
respiratorios, es decir que se encuentre infectando junto con otros virus. El periodo de incubacin va
de pocos das a semanas. Se ha descrito la existencia de reinfecciones, de manera que no hay una
inmunidad total. Afecta el tracto respiratorio bajo (IRAB) como un resfro comn o Croup, el que a
menudo se complica con otitis media. Se caracteriza por producir bronquiolitis (10 15%) y
neumona.

Aun no se ha desarrollado un tratamiento especfico contra este virus y solo se emplea
oxigenoterapia e hidratacin.

El diagnstico a travs de cultivo es complejo, por su lento crecimiento y efecto celular atpico, por
tanto se realiza mediante la deteccin de antgenos por Inmunofluorescencia directa o PCR.

Familia Adenoviridae

Distribucin: mundial, ubicuos.

Recurrencia: no estacional.
Reservorio: humano.
Eliminacin: secreciones respiratorias y heces.
Transmisin: persona/persona mediante secreciones respiratorias y oculares, fecal
oral mediante manos, fmites, por contaminacin de agua o alimentos.

El gnero Mastadenovirus se ha asociado a faringitis y amigdalitis. Son virus DNA desnudos de 75
nm de dimetro con simetra icosadrica. Existen 6 grupos (A F), dentro de ellos los adenovirus 3 y 7
(subgrupo B) y adenovirus 1, 2, 5 y 6 (subgrupo C) son los que estn ms asociados a las infecciones
respiratorias agudas, adems se ha determinado que los adenovirus 3 y 7 estn mucho ms asociados
a neumona en nios con un alto nivel de mortalidad. Actualmente se conocen alrededor de 115
serotipos y cada uno de ellos produce un cuadro clnico distinto asociado a enfermedad respiratoria,
conjuntivitis y diarrea. Los Adenovirus 1 7 provocan Faringitis febril, afectando principalmente a
preescolares, la que puede tener como complicacin otitis media. Los Adenovirus 4 y 7 provocan
resfriado comn en adultos, el que se agudiza bajo condiciones de hacinamiento.

Subgrupo Serotipo Sndromes clnicos
A
31
Gastroenteritis infantil (asociacin discutida)
Enfermedad respiratoria alta, neumona, fiebre faringoconjuntival
B
3, 7, 21
(verano, piscinas)
C
1, 2, 5
Cistitis hemorrgica, nefritis intersticial
D
8, 19, 37 Queratoconjuntivitis epidmica
E
4
Enfermedad respiratoria alta, neumona
F
40, 41
Gastroenteritis infantil
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258
Microbiologa: Virus
El periodo de incubacin oscila de entre 4 a 14 das, infectan ms a nios que a nias, causando
aproximadamente el 5% de las IRA, y el 10% de las neumonas en nios menores de 5 aos.

El diagnstico directo se establece segn la valoracin del aislamiento, secrecin prolongada e
infeccin asintomtica, el cultivo es de utilidad en los cuadros entricos, aunque el subgrupo F no es
cultivable, se puede realizar serotipificacin, inmunofluorescencia, PCR o sondas.

Familia Picornaviridae

Transmisin: fmites, aerosoles, manos contaminadas.

Son virus RNA productores de infeccin respiratoria alta que cursa con cuadros clnicos similares al
resfriado comn, siendo su causa ms frecuente. No hay mtodos diagnsticos ni tratamiento
especifico, su identificacin se basa en la sintomatologa y signologa de la enfermedad. Actualmente
se conocen ms de 150 serotipos que no poseen antgeno comn.

Rinovirus


Es responsable de la bronquitis crnica en fumadores y es capaz de afectar a individuos de todas las
edades. Su incidencia aumenta en meses fros, ya que las bajas temperaturas detienen el movimiento
ciliar de la mucosa nasal y nasofarngea. El diagnstico se realiza mediante cultivos de exudado
farngeo o aspirado nasal solo con fines de investigacin.

Familia Coronaviridae

Resistencia: resiste 3 horas en aire seco. Se
inactiva por accin de luz UV, metafluoxecina y
cloro.
Recurrencia: estacional (invierno y primavera)
Periodo de incubacin: 2 4 das. SARS 2 11
das.
Eliminacin: secreciones respiratorias, no en
heces.
Transmisin: contacto directo y cercano,
aerosoles.

Es un virus RNA pleomrfico envuelto, con simetra helicoidal y proyecciones perifricas. Posee
solamente 2 serotipos y produce infeccin del tracto respiratorio en nios y lactantes, similar a la
causada por Rinovirus; ocasionalmente causa neumona y cuadros gastroentricos.
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Microbiologa: Virus
259
El Coronavirus es el miembro ms importante de esta familia, es capaz de mutar originando una

nueva forma de infeccin respiratoria y se caracterizan porque poseen una capa de protenas que les
hace parecer una corona y su baja infectividad, necesitando grandes dosis para desencadenar una
enfermedad, su periodo de incubacin es de 2 a 4 das, tras lo cual produce resfriado comn. Este
virus se aisl por primera vez en el ao 2002 en China, donde produjo ms de 400 muertes a causa
del TAC o Sndrome Respiratorio Agudo Severo (SARS), que es producido por una nueva mutacin de
Coronavirus, originada presuntamente en Guangdong, China, y que es altamente mortal, inicialmente
cursa con fiebre, escalofros, cefalea, astenia y mialgia, con ausencia de sntomas respiratorios, su
caracterstica ms importante es la produccin de neumona atpica. El 10% de estos virus produce
sndrome respiratorio y el 5% muerte, generalmente en pacientes con patologas de base. Afecta a
todos los grupos etarios.

El virus ingresa al organismo a travs de las mucosas oral, nasal, ocular y conjuntival.

Aun no se ha establecido un tratamiento especfico para este virus, de modo que es altamente
importante el control de su diseminacin, debiendo aislarse a los pacientes infectados. El diagnstico
se realiza mediante tcnicas de ELISA, inmunofluorescencia indirecta y PCR a partir de exudado
nasofarngeo, lavado bronquio alveolar, lquido pleural, orina, suero o tejidos.

Susan Arias Donoso
260
Microbiologa: Virus
Herpes Virus

Resistencia: Sensibles a desecacin y pH cido, se inactivan con solventes lipdicos y
detergentes.

Los herpes virus forman un grupo muy numeroso de virus que afectan a animales y humanos
produciendo infecciones latentes y de carcter recurrente que aparecen cada cierto tiempo
dependiendo de las condiciones inmunolgicas y ambientales que favorezcan su desarrollo.

Son virus de gran tamao (100 nm de dimetro) envueltos en una
bicapa lipdica. Poseen una cpside icosadrica compuesta de 162
capsmeros, el genoma est unido a la parte interna de la cpside y
se compone de DNA bicatenario lineal, cuyos genes codifican ms
de 10 glicoprotenas distintas que cumplen diferentes funciones,
especficamente absorcin y penetracin a la clula husped, que
proporciona la maquinaria metablica para la replicacin viral.
Todas las protenas vricas dan lugar a la aparicin de cuerpos de
inclusin intranucleares microscpicos en la clula husped.

Actualmente se conocen ms de 80 serotipos de la familia Herpesviridae, de los cuales 8 producen
enfermedades en humanos y se denominan Virus Herpes Humano (VHH) seguido de un nmero
arbigo.
- VHH1

Virus Herpes Simplex tipo I
Infeccin bucal
- VHH2

Virus Herpes Simplex tipo II Infeccin genital
- VHH3

Virus Varicella Zoster
Neurtrofo
- VHH4

Virus Epstein Barr
Linftrofo
- VHH5

Citomegalovirus

Linftrofo
- VHH 6, 7 y 8

Cada uno de ellos produce un cuadro caracterstico desde el punto de vista clnico, de modo que
muchas veces no se recurre a un diagnostico de laboratorio para su diferenciacin.

Ciclo de multiplicacin
1. Adsorcin.
2. Penetracin.
3. Liberacin del DNA viral y migracin hacia el ncleo.
4. Sntesis del DNA vrico y transcripcin del mRNA en el ncleo.
5. El mRNA migra al citoplasma, transduccin de protenas que migran al ncleo.
6. Formacin de la nucleocpside, que sale arrastrando parte de la membrana nuclear.
7. Liberacin.

Virus Herpes Simplex

Reservorio: Hombre.
Transmisin: contacto directo con secreciones infectadas.
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Microbiologa: Virus
261
Ingresan a travs de la piel y mucosas por contacto directo con un individuo infectado, provocando
una respuesta local. El VHS tipo 1 generalmente ataca los pares craneales y cervicales superiores,
mientras que el VHS tipo 2 puede atacar la regin sacra (zona de la cintura), de modo que se relaciona
con infecciones genitales; sin embargo se pueden expandir a otras zonas cuando las condiciones
inmunolgicas del individuo lo permitan. La reactivacin puede ser una expresin de tipo
asintomtica o manifestar una clnica con destruccin de tejido localizado y bien delimitado, en
ocasiones las lesiones herpticas se pueden asociar a infecciones por Staphylococcus aureus,
especialmente en nios. En recin nacidos y pacientes inmunodeprimidos puede provocar: Herpes
neonatal e Infecciones viscerales de pulmn, hgado y esfago.

El diagnstico se logra en forma directa a travs del anlisis de secreciones de las lesiones
infectadas en busca de antgenos por inmunofluorescencia directa; en proceso de investigacin se
realiza cultivo de lneas celulares con identificacin de anticuerpos monoclonales, el PCR se realiza en
LCR para los casos de encefalitis herpticas.

La profilaxis incluye el empleo de mtodos de barrera como guantes y preservativos, y la realizacin
de cesrea cuando se sospecha infeccin por VHS-2. No existen vacunas para prevenir la infeccin.

Virus Varicella Zoster (VHH 3)

Reservorio: hombre.
Transmisin: respiratoria.
Susan Arias Donoso
262
Microbiologa: Virus
En un virus muy similar al VHS tipo 1 y agente causal de:

- Varicela: se desarrolla formando mculas, que progresan a ppulas, se transforman en
vesculas y finalmente en una costra.
- Herpes Zoster: se asocia a los terminales nerviosos de la zona de la cintura formando
manchas rojas y provocando dao leve.

La infeccin es frecuente antes de la madurez afectando principalmente a hombres menores de 25

aos en quienes puede provocar esterilidad. Actualmente ha sido erradicada gracias a la vacunacin e
inmunizacin pasiva en inmunodeprimidos principalmente para evitar la aparicin de Herpes Zoster.

El diagnstico se establece por el caracterstico cuadro clnico que produce.

Citomegalovirus (VHH 4)

Transmisin: sangre, tejidos (trasplantes) o secreciones corporales infectadas (leche
materna, saliva, lgrimas, orina, semen). Persona-persona. En RN por va
transplacentaria, infeccin intrauterina o secreciones cervicales.

Normalmente causa infecciones asintomticas, pero en pacientes inmunodeprimidos y recin
nacidos puede producir cuadros graves. Se adquiere a travs de la sangre, tejidos o secreciones
corporales infectadas, provocando una infeccin productiva de clulas epiteliales. Este virus establece
latencia en linfocitos T, macrfagos y otras clulas.

El diagnstico se realiza mediante cultivo y PCR o IFI para deteccin de anticuerpos IgM. El 80% de la
poblacin tiene anticuerpos contra este virus.

La prevencin se realiza utilizando mtodos de barrera, y un control exhaustivo de donantes de
sangre y rganos. El control de la transmisin vertical es ms dificultoso.
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Microbiologa: Virus
263
Virus Epstein Barr (VHH 5)

Distribucin: mundial (90% de la poblacin posee anticuerpos).

Transmisin: respiratoria.
La infeccin suele ser asintomtica y se adquiere en la infancia, produce un cuadro muy

caracterstico llamado mononucleosis, el cual est asociado a neoplasias.

El diagnostico se realiza por tcnicas de serologa en bsqueda de anticuerpos IgM principalmente,
e IgG; por medio de inmunofluorescencia o ELISA. Al frotis se observan linfocitos atpicos
hiperbasfilos y aumentados en tamao con una deformacin en la membrana, los cuales se
denominan clulas de Downey. El suero presenta anticuerpos fros que reaccionan con los eritrocitos
de cordero.

Virus Herpes Humanos 6, 7 y 8

VHH6: es el agente productor del exantema sbito o rosola que en ocasiones se confunde con
sfilis secundaria, adems puede producir Sndrome Mononuclesico, que se puede confundir
con Epstein Barr. Se transmite a travs de la saliva.

VHH7: es un virus denominado

VHH8: se ha asociado al Sarcoma de Kaposi, que se produce en pacientes con SIDA.

Susan Arias Donoso
264
Microbiologa: Virus
Retrovirus

Los Retrovirus son virus envueltos que contienen RNA monocatenario de polaridad positiva, el cual
codifica la enzima transcriptasa inversa, que convierte el genoma del virus en DNA bicatenario que se
integra en el de la clula infectada.

Se distinguen 3 familias: Oncovirinae, Lentivirinae y Espumavirinae.

Lentivirinae

A esta familia pertenecen los virus VIH 1 y 2 responsables del Sndrome de Inmunodeficiencia
Adquirida (SIDA).

Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)

El VIH posee una envoltura membranosa derivada del husped, en la cual presenta 2 glicoprotenas
Gp160: Gp120 y Gp41, la primera con funciones de adhesin y la segunda de invasividad, pues
permite la fusin con la clula husped (linfocito T killer) y el ingreso del virus a ella. Adems presenta
antgenos grupo-especficos codificadas por el gen Gag, muchas de estas protenas son usadas para
estudios inmunobiolgicos mediante tcnicas de ELISA pesquisando anticuerpos especficos contra
ellas.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus

-
-
-
265
P17: protena de la matriz

P24: protena de la cpside
P7: protena de la nucleocpside (asociada al RNA)

Dentro de las enzimas que codifica el genoma viral (gen Pol) se encuentra la transcriptasa inversa,
Integrasa, que se une a diferentes estructuras, y Proteasa, que corta poliprotenas.

El genoma del VIH posee 9749 nucletidos contenidos en 3 genes estructurales:

El VIH ingresa al husped donde es transportado por los macrfagos, posteriormente el virus se une
a los linfocitos T CD4 produciendo una alteracin en la regulacin de ellos, lo que conlleva a la
inmunodeficiencia. En el interior de la clula el genoma viral codifica para la enzima transcriptasa
inversa que convierte el RNA en DNA bicatenario, el cual se incorpora en el genoma de la clula
husped para la generacin de nuevos virus, un proceso que ocurre lentamente, de manera que un
paciente se puede demorar aos en desarrollar la enfermedad, dependiendo de su estado
inmunolgico.
Susan Arias Donoso
266
Microbiologa: Virus

Se ha demostrado que el VIH penetra en distintas clulas del husped:
- Linfocitos T4 (killer) y T8.
- Linfocitos B.
- Monocitos.
- Macrfagos.
- Clulas microgla.
- Clulas de Langerhans.
- Fibroblastos.
- Clulas glioma.
- Clulas de carcinoma de colon.
- Clulas sistmicas.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
267
El cuadro celular e inmunolgico se desarrolla de la siguiente manera:

Anti H
HIV a
antibody ( (gp120

La carga viral determina la patognesis, latencia viral, transmisin y progresin; a la vez que permite
el control de la eficacia del tratamiento y la evaluacin de nuevas terapias y vacunas. La
concentracin del virus en plasma y semen es inversamente proporcional al nmero de CD4, de modo
que a menor cantidad de CD4 aumenta la carga viral.

Transmisin: Sangre (Transfusiones, Hemoderivados, inoculacin de drogas, puncin
accidental), Semen y Secreciones vaginales. Vertical (materno-fetal).

Existe riesgo profesional de infeccin:
- Tras pinchazo accidental: 0,3%
- Tras contaminacin de mucosas: 0,09%
- Transmisin del personal sanitario a los pacientes: excepcional.

La probabilidad de transmisin depende de la dosis viral, va de transmisin,
contaminacin de mucosas y de las caractersticas del husped. Toda persona infectada
puede transmitir la infeccin independientemente de su estadio evolutivo, sin embargo
la posibilidad de transmisin aumenta en estadios avanzados de la infeccin. El
tratamiento antirretroviral reduce el riesgo de transmisin.

El diagnstico microbiolgico directo de la infeccin VIH se basa en la deteccin de antgenos (Ag
p24) y cidos nuclicos por PCR; adems de la realizacin de cultivos celulares. El diagnstico
indirecto se logra por cribado mediante tcnicas de enzimoinmunoanlisis (ELISA, ELFA). Finalmente
la confirmacin se establece por Western Blot (Wb) e Inmuno Blot con antgenos recombinantes
(LIA).

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268
Microbiologa: Virus
Algoritmo diagnstico infeccin por VIH

1 suero
ELFA o ELISA
3/4 generacin
positivo
>3 cut off
positivo
<3 cut off
informe previo y peticin de

nuevo suero si precisan
confirmacin diagnstica
repetir anlisis
con mismo
suero
negativo
2 suero
negativo
repetir o hacer otras

pruebas (p24, WB) si
existe informacin
clnica relevante
ELFA o ELISA 3/4

generacin
postivo
negativo
confirmacin con WB
(preferible con pptido
gp36 de VIH-2)
positivo
informar
positivo
pedir nuevo suero y

repetir analisis con
suero anterior
negativo
indeterminado
usar glicoprotena 160, 120,

41 con o sin bandas core
bandas core p17, 31, 24,

55 u otras aisladas
informar negativo y
recomendar nuevo anlisis si
persiste indicacin clnica
informar indeterminado y solicitar

urgente nuevo suero para descartar
seroconversin (exp. < 8 meses).
valorar pruebas complementarias
(p24, PCR)
informar indeterminado; informe final para Ac frente a

VIH negativo y recomendacin de seguimiento entre 0,5-
1 y 3 meses. si hay reactividad de gp 36 de VIH-2
descartar infeccin mediante pruebas de pptidos
sintticos para VIH-1 y VIH-2

La prevencin de la transmisin de este virus se logra mediante prcticas de sexo seguro, la
abstinencia sexual, el uso de preservativos.

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
269
Oncovirinae

Los Oncovirus se encuentran relacionados con procesos oncolgicos, dentro de ellos se encuentran:
- HTVL-1 (Virus Linfotrpico Humano tipo 1): provoca leucemia de clulas T en adultos,
adenopata y enfermedades neurolgicas crnicas.
- HTVL-2 y HTVL-5: asociados a trastornos malignos de las clulas T. HTVL-2 produce

Virus Linfotrpico Humano tipo 1 (HTLV-1)

Agente etiolgico: Leucemia/Linfoma de Clulas T del Adulto (LLTA). Mielopata/
Paraparesia Espstica Tropical (M/PPET)
Distribucin: mundial, principalmente reas tropicales adyacentes a zonas costeras.
Transmisin: sangre (transfusiones), secreciones seminales y vaginales (ETS), saliva y
calostro.
Factores de riesgo: Chancro sifiltico, Herpes tipo 2 ulcerativo, Gonorrea, lesiones por
Chlamydia trachomatis, etc.

Este virus perteneciente a la familia Retroviridae fue descubierto en 1980. Es un virus linfotrpico
que compromete principalmente linfocitos CD4, provocando leucemia/linfoma de clulas T del adulto
(LLTA) y mielopata/paraparesia espstica tropical (M/PPET).

El HTLV-1 afecta a ms de 25 millones de personas en todo el mundo, con una incidencia estimada
de 0,025% en Estados Unidos, entre 3 y 6% en Trinidad y Tobago, Jamaica y otras islas caribeas y
30% en Miyazaki, al sur de Japn. En Sudamrica, la prevalencia vara entre 2 y 5% en la poblacin
general (Colombia, Brasil y Per). La coinfeccin con VIH es frecuente.

La deteccin de genes del HTLV-1 en mdula espinal, cerebro, astrocitos y linfocitos de la mdula
espinal han demostrado que el virus es causante de una neuropatologa de la mdula espinal con
atrofia de las columnas dorsales y laterales, degeneracin axonal y desmielinizacin; donde existe
inflamacin leptomenngea e infiltracin perivascular de Linfocitos T, CD4+ y CD8+. El dficit motor en
miembros superiores est presente en el 25% de los pacientes, la espasticidad predomina en
miembros inferiores desde su inicio (70%), en estadios

El diagnstico es realizado a travs del Test de ELISA, con confirmacin por Western blot en suero y
lquido cefalorraqudeo.
Susan Arias Donoso
270
Microbiologa: Virus
Hepatitis viral aguda

Es una infeccin generalizada que afecta sobre todo al hgado y que puede ser causada por distintos
tipos de virus:
- Virus A.
- Virus B: conformado por Ag HBs (cubierta externa), Ag HBc (nucleocpside central) y Ag Hbe
(marcador de replicacin e infectividad).
- Virus C.
- Virus D: Virus RNA defectuoso que requiere la presencia del Ag HBs para su replicacin.
- Virus E.

Hepatitis
A
B
C
D
E
Agente
Picornavirus Hepadnavirus
Flavivirus
Virus delta
Calicivirus
Tipo de Material
RNA
DNA
RNA
RNA
RNA
Gentico
Tamao
27 nm
42 nm
50 nm
--
27 34 nm
HBsAg
HBsAg
Antgeno
HAV
HBcAg
HCV
Ag HEV
Ag HDV
HBeAg
Anti-HBs
Anti-HBs
Anticuerpo
anti-HAV
Anti-HBc
Anti-HCV
Anti-HEV
Anti-HDV
Anti- HBe
Parenteral
Parenteral
Transmisin
Fecal-oral
Sexual
Parenteral
Sexual
Fecal-oral
Perinatal
Perinatal
Incubacin (das)
15 45
30 180
15 160
30 180
14 60
Adultos
Cualquier
Cualquier
Adultos
Grupo de riesgo
Nios
Jvenes
edad
edad
Jvenes
Crnica:
Crnica:
Crnica:
1-10%
50-70%
frecuente
Otros
Crnica: NO
Portador:
Portador:
Portador:
Crnica: NO

1-30%
0,5-3,2%
variable
Ca: >neonatal Ca: +
Ca:

La enfermedad se desarrolla en tres fases: en el inicio, 1 2 semanas antes de la ictericia, se
desarrolla la fase prodrmica, que cursa con anorexia, astenia, nauseas, vmitos, artralgias, mialgias,
cefalea, tos, fiebre, trastorno del gusto, coluria e hipocolia. En la fase ictrica existe una disminucin
del peso corporal, hepatomegalia dolorosa, esplenomegalia y adenopatas cervicales. Finalmente en
la fase de recuperacin puede mantenerse la hepatomegalia.

Durante la enfermedad se observa un infiltrado inflamatorio mononuclear panlobulillar, necrosis
heptica, hiperplasia de clulas de Kpffer, grados variables de colestasis y Cuerpos de Counsilman
(degeneracin acidfila de los hepatocitos). Durante la fase de recuperacin se observan clulas
multinucleadas. Se puede observar tambin necrosis masiva lo cual tiene mal pronstico.

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
271
La alteracin de los resultados de laboratorio se mantiene durante 1 a 2 meses en las Hepatitis A y

E; y durante 3 a 4 meses en Hepatitis tipo B y C; observndose:

AST y ALT:
Bilirrubina:
APP:

Glucemia:

FAL:

Gammaglobulina:

Neutrfilos y linfocitos:
Serologa:

4000 uL, su aumento comienza en fase prodrmica, y

alcanza su mximo en la fase ictrica. En hepatitis tipo C el
aumento es intermitente.
5-20 mg/dL (mixto), si se mantiene en forma prolongada
>20 mg/dL prolongado es indicador de mal pronstico; si es
>30 mg/dL se debe descartar hemlisis.
Prolongado
Baja
Normal o Elevada
Aumentada, Ac + (FR, ANA, etc.)
Descenso transitorio, posterior mente aumentan.
Presencia de antgenos y anticuerpos.
Diagnstico Serolgico
HBsAg IgM Anti- VHA IgM Anti-HBc Anti- VHC Diagnstico
+
-
+
-
Hepatitis Aguda B
+
-
-
-
Hepatitis Crnica B
-
-
+
-
Hepatitis Aguda B
-
+
-
-
Hepatitis Aguda A
+
+
-
-
Hepatitis Aguda A y Crnica B
+
+
+
-
Hepatitis Aguda A y B
-
+
+
-
Hepatitis Aguda A y B
-
-
-
+
Hepatitis Aguda C
En hepatitis crnica la presencia de HBsAg, HBeAg y Anti-Hbe determinan el grado de infecciosidad.

En el caso que existan anticuerpos Anti-VHC debe realizarse la determinacin de RNA VHC para
confirmar. La presencia de anticuerpos Anti-VHD indican la presencia de hepatitis fulminante, cuadros
crnicos graves o exacerbacin aguda en los pacientes con hepatitis crnica.

Evolucin serolgica tpica en infeccin por virus de Hepatitis B con recuperacin.

Sntomas

Anti - HBe
Anti- HBc total
Ttulo
HBeA
g
HBsAg

0 4
IgM anti-HBc
Anti-HBs

// //
8 12 16 20 24 28 32 36 52 100
Semanas post exposicin
Susan Arias Donoso
272
Microbiologa: Virus
Debe realizarse diagnstico diferencial con distintos tipos de enfermedades que provocan cuadros
similares:
- Infecciosas: Epstein-Barr, Citomegalovirus, Herpes Simplex, Virus Cocksakie, leptospiras,
Candida, micobacterias, pneumocistis, estas ltimas 4 son infrecuentes.
- Txicos: medicamentos, alcohol.
- Otros: colecistitis aguda, Sndrome de Budd-Chiari, hgado graso del embarazo, sndrome
de Wilson.

El tratamiento depende de la carga viral.

Se requieren medidas profilcticas especficas para cada tipo de Hepatitis:
- Hepatitis A: Inmunizacin pasiva (IgG) indicada en pos-exposicin de contactos ntimos
antes de las 2 semanas. Inmunizacin activa mediante vacuna construida a base de virus
muerto, aplicada como nica dosis a los 2 aos de edad y en grupos de riesgo, la
proteccin de esta vacuna es efectiva tras 4 semanas.
- Hepatitis B: inmunizacin con vacuna recombinante construida con HBsAg, administrada
en 3 dosis intramusculares cada 6 meses, en pacientes con pre-exposicin, RN y grupos de
riesgo; o bien en pacientes con pos-exposicin asociado a Ig en personas no vacunadas: RN
de madres con HBsAg +, accidentes laborales (antes de una semana), contacto sexual
(antes de 14 das).
- Hepatitis C: profilaxis del contagio con control de hemoderivados.
- Hepatitis E: vacuna en fase de estudio.

Susan Arias Donoso
Microbiologa: Virus
273
Virus del Papiloma Humano (PVH)

Transmisin: contacto directo (fmites, superficies contaminadas), contacto sexual,
canal de parto.
Incidencia: estacional.
Es en virin con cpside icosadrica perteneciente a la familia Papoviridae, que por tanto presenta
DNA circular bicatenario. Actualmente se han identificado 70 serotipos clasificados en 16 grupos, de
estos el PVH-16 y 18 producen papilomas cervicales y displasias.

En general los papilomavirus provocan un crecimiento benigno de las clulas, lo que da lugar a
verrugas en distintos sitios anatmicos, que corresponden a hiperplasias de clulas espinosas e
hiperqueratosis; existe tambin vacuolizacin citoplasmtica perinuclear y agrandamiento nuclear lo
que origina clulas coilocticas. Algunos serotipos se han asociado al cncer humano. Se encuentran
implicados en los siguientes sndromes clnicos:
- Verrugas en manos y pies (PVH 1-4).
- Papiloma larngeo (pedunculado).
- Papiloma oral.
- Papiloma conjuntival.
- Condilomas acuminados/verrugas anogenitales.
- Neoplasia intraepitelial cervical.
- Cncer genital, larngeo, peneal, vulvar, rectal y cervicouterino.

Se han clasificado en PVH cutneos o PVH mucosos, segn su capacidad de infectar las clulas
epiteliales de la piel o de las membranas mucosas respectivamente. La replicacin viral depende de la
fase de diferenciacin de la clula, es persistente en la capa basal y activa en los queratinocitos
diferenciados.

El virus es resistente a la inactivacin y persiste en el hospedero.

El diagnstico se establece mediante tcnicas de Inmunofluorescencia y ELISA. El tratamiento se
realiza en base a crioterapia y lser.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Ecologa de los microorganismos
275

Ecologa de los Microorganismos

La microbiologa del ambiente o ecologa microbiana habla de las interrelaciones que se generan
entre los MO dependiendo de su ambiente. Las caractersticas de los ecosistemas microbianos son:
- Capacidad de los MO para transformar el ambiente: transforman los sustratos
reincorporndolos a sus ciclos, deben tener una gran superficie, pues esto facilita la accin
enzimtica.
- Adaptacin y mutacin de los MO a condiciones ambientales cambiantes. Existe adaptacin
fisiolgica fenotpica limitada por el genotipo, que permite la adaptacin a cambios
temporales como trmino del alimento o cambios de temperatura y pH. La informacin
gentica que sustenta la adaptacin es hereditaria, lo cual no implica que la siguiente
generacin exprese ese fenotipo, en este caso al restituirse la condicin inicial la bacteria
recupera su forma original. La adaptacin es evolutiva cuando incluye cambios en el
genotipo que se pueden producir por mutacin espontnea o intercambio gentico
bacteriano.
Tamao del hbitat: pueden ser de distintos tamaos desde grandes a pequeos.
Suministro de alimento: los cambios en la naturaleza qumica y en la composicin de los
elementos nutritivos tienen influencia selectiva en la microbiota.
Diversidad de especies microbianas: son ubiquitarios, se sospecha que existen ms de un
milln de especies, de las cuales solo se conocen cerca de 4200.
Dinmica de poblaciones: los MO desarrollan descendencia cuando las condiciones le son
favorables, si no es as buscan un nuevo entorno.
Asociacin microbiana del ecosistema: las asociaciones pueden establecerse entre los
microorganismos, o entre ellos y organismos superiores; encontrndose diversas formas de
simbiosis.
Susan Arias Donoso
276
Comensalismo Mutualismo
Parasitismo
Antagonismo Neutralismo
Un organismo se Ambos organismos Un

organismo
beneficia y el otro se benefician
obtiene beneficios
no se perjudica.
de otro que se ve
perjudicado.
Dos organismos
habitan juntos sin
producirse
ni
dao ni beneficio
Microbiota que vive

a expensas de
secreciones en ojos,
odos y genitales
externos.
E. coli sintetiza vit.

K en el intestino,
as el organismo
obtiene nutrientes
S. cromoris y S.
lacris creciendo
juntas producen
mayor cantidad de
acido lctico que
separadas.
Dos seres de
diferentes especies
se relacionan y solo
uno de ellos se
perjudica
Giardia lamblia se Los pigmentos de P.
adhiere a las pare- aeruginosa inhiben
des del intestino y la germinacin de
dificulta la absor- A. terreus.
cin de nutrientes
Las sustancias anti-

fngicas producidas
por S. aureus cau-
san
alteraciones
morfolgicas en A.
terreus.

Los microorganismos en el suelo contribuyen a la transformacin de materia orgnica
convirtindola en cidos orgnicos controlando la disponibilidad de muchos nutrientes importantes
para las plantas y otorgndole fertilidad, siendo la base de los ciclos de reciclaje de nutrientes y
elementos qumicos del ecosistema. Los MO pueden existir varios cientos de metros por debajo de la
superficie de la tierra, debido a la existencia de flujos de aguas muy profundas que van trasladando
los MO de un lugar a otro mantenindolos viables, especialmente si son anaerobios facultativos o
anaerobios. As la materia orgnica presente en el suelo tiene su origen en bacterias, hongos, algas,
lquenes, musgos y plantas que crecen sobre o entre los minerales y las rocas erosionadas, y adems
de plantas y animales muertos.

Ciclos Biogeoqumicos

La energa solar es la gran fuente de energa que participa en el ciclo del agua, oxigeno, nitrgeno,
fsforo, carbono, etc. Los organismos constituyen la estructura bitica de un ecosistema y se
clasifican en: productores, que generan su propio alimento (plantas), consumidores, que se alimentan
de productores y de otros consumidores (animales), saprofitos y descomponedores de materia
muerta (MO). Adems son necesarios una serie de factores abiticos, fsicos y qumicos, donde los
principales son: las lluvias, pH, temperatura, luz, viento, nutrientes qumicos, salinidad e incendios.

Ciclo de la materia

Susan Arias Donoso
277
Ciclo del nitrgeno

Las actividades biolgicas fundamentales en el ciclo del nitrgeno comprenden la fijacin de
nitrgeno, la amonificacin, nitrificacin y desnitrificacin y la asimilacin.

Los reservorios de nitrgeno se hallan principalmente en la atmosfera (78% N2 g), en el humus y en
las rocas sedimentarias; las reservas ms activas de este elementos son los compuestos inorgnicos
como amonio, nitritos y nitratos solubles en agua, que es el nitrgeno fcilmente utilizable.

Rhizobium
Azotobacter
Hongos

Cianobacterias

Bacillus
Pseudomonas

Clostridium
Acetobacter

Nitrobacter

Nitrosomonas

Cuando animales y plantas
comienzan
a
descomponerse
sobreviene el proceso de la
amonificacin, con el objetivo de
llevar compuestos nitrogenados
desde protenas hacia amonio, hay
bacterias que son claves en este
proceso como lo es Clostridium y
Acetobacter, luego ese amoniaco es
llevado a nitritos por Nitrosomona,
los que son llevados a nitratos por el
proceso
llamado
nitrificacin
bacteriana realizado por Nitrobacter,
finalmente el nitrato pasa nitrgeno
gaseoso, el cual corresponde a la
desnitrificacin bacteriana.
Susan Arias Donoso
278
Ciclo del carbono

El carbono est almacenado en el aire, en el agua y en el suelo en forma de gas llamado dixido de
carbono. El ciclo involucra tres procesos importantes: el primero de ellos es la absorcin de CO2 por
parte de las plantas fotosintticas que lo transforman carbohidratos por accin lumnica; luego los
animales se alimentan transformando las azcares en dixido de carbono y las bacterias se encargan
de descomponer para poder restituir el carbono al ciclo.

Ciclo del oxigeno

El oxigeno est disponible en la atmsfera y es utilizado a travs de procesos de respiracin por
organismos vivientes.
Susan Arias Donoso
279
Ciclo del azufre

Dentro de este ciclo hay una
pequea parte donde las bacterias,
especialmente
del
tipo
desnitrificantes y bacterias de
azufre (Desulfovibrio), llevan
elementos como el hidrgeno
sulfurado a sulfato, restituyndose
el azufre a este ciclo.

Hay que considerar que el azufre
junto con el nitrato producen la
lluvia cida, donde el sulfato al
combinarse forma el acido sulfrico
y el nitrato forma el acido ntrico.

Ciclo del fsforo

El fsforo es un compuesto completamente sedimentario, hallndose sus reservorios en rocas,
suelo y agua en forma de fosfato, en el ciclo de este elemento los MO participan transfiriendo formas
inorgnicas a orgnicas o bien solubilizando el fosfato insoluble.
Susan Arias Donoso
280
Relacin entre parasito y hospedador

Se conoce como patogenicidad la capacidad de producir dao que tiene un organismo, mientras que
la virulencia corresponde al grado de patogenicidad que presenta, por otro lado la infectividad es la
capacidad de entrar, sobrevivir y multiplicarse en un hospedador causndole dao o no, y la
infestacin es cuando no ocurre penetracin. La toxigenicidad es la capacidad de producir exotoxinas.

Patgeno oportunista: aquel MO que mientras estn las condiciones dadas podr producir
dao, normalmente se expresa cuando hay un deterioro de la defensas del hospedador,
muestra efectos distintos en el mismo hospedador.

Patgenos emergentes: aquellos que tradicionalmente han estado presentes en el ambiente
sin producir ninguna enfermedad, pero que de un momento a otro comienzan a aumentar los
casos de personas enfermas por tal microorganismo. Ej.: Listeria.
Patgeno obligado: su sola presencia genera una patologa en el organismo, Salmonella Typhi,
Yersinia pestis (peste bubnica), Neisseria gonorrhoeae, etc.

La probabilidad de que la infeccin por un patgeno de origen a una enfermedad depende de la
virulencia del parasito en una relacin directamente proporcional, del nmero de grmenes y de la
resistencia del hospedador.

Las etapas de la enfermedad infecciosa son:
1. Periodo de incubacin: tiempo que transcurre entre la infeccin inicial y la aparicin de
cualquier signo o sntoma.

ENFERMEDAD
TIEMPO DE INCUBACIN

Clera
1-3 das

Neumona neumoccica
Variable

Tos ferina
12- 20 das

2. Periodo prodrmico: es un tiempo relativamente corto que sigue al periodo de incubacin
en algunas enfermedades, aparecen los sntomas iniciales, como malestar general.
3. Periodo de estado o clnica, o tambin llamado periodo de enfermedad: aparecen los
sntomas evidentes como alteraciones hematolgicas, fiebre, faringitis. En ella ocurre la
activacin de la respuesta inmune humoral o celular. Las personas en este periodo
constituyen reservorio de la enfermedad.
4. Periodo de declinacin, puede durar desde menos de 24 horas hasta varios das, en ella
signos y sntomas cesan. En este periodo el paciente es vulnerable a infeccin secundaria.
5. Periodo de convalecencia
6. Periodo de latencia

Una enfermedad trasmisible es causada por un agente especfico o por sus productos txicos,
donde el reservorio trasmite la enfermedad a un hospedero susceptible. Por otro lado las
enfermedades infecciosas son un conjunto de manifestaciones clnicas producidas por una infeccin,
y la enfermedad infectocontagiosa es aquella infeccin que se transmite por contacto directo de
persona a persona. La colonizacin es la presencia de un agente en una superficie del hospedador
pero que no produce respuesta tisular o inmunitaria
Susan Arias Donoso
281
La relacin del agente con la clula hospedera puede ser:

- Intracelular facultativos: pueden indistintamente infectar una clula y reproducirse dentro o
fuera de ella.
BACTERIA
HONGO
Mycobacterium
Histoplasma
Brucella
Blastomyces
Salmonella
Coccidioides
Listeria
Cryptococcus
Streptobacillus
Candida
Nocardia

- Intracelulares obligados: Necesitan de una clula hospedador apara poder multiplicarse, los
virus y rickettsias se comportan de esta manera
-
Extracelular: Se multiplican fuera de la clula.

BACTERIA GRAM +
Streptococcus
Staphylococcus
Clostridium
C. diphtheriae
B. anthracis
BACTERIA GRAM -
Neisseria meningitidis*
Neisseria gonorrhoeae*
Haemophilus
Enterobacterias
Bordetella
Pasteurella
Bacteroides
Vibrio cholerae
* Tambin pueden ser parsitos intracelulares facultativos
Triada ecolgica

Relacin que se produce entre el patgeno, hospedador y
ambiente.

El agente es cualquier MO capaz de producir una
enfermedad infecciosa desde el punto de vista microbiolgico.
Sus caractersticas intrnsecas son el tamao, forma,
composicin qumica, etc. El comportamiento en el hospedador involucra el grado de contagiosidad,
patogenicidad, virulencia, poder de invasin, antigenicidad, por otro lado el comportamiento frente al
medio implica resistencia y la aptitud que presenta para su vehiculizacin.

La fuente de infeccin es cualquier persona, animal, objeto o sustancia donde se halle el agente y
desde donde pueda potencialmente pasar al hospedador, pudiendo ser un reservorio donde el
agente vive, se reproduce y del cual depende su supervivencia, o el ambiente. Un reservorio humano
se puede clasificar en: enfermo con sntomas de la enfermedad y en portador infectado sin
manifestacin clnica.

La puerta de salida es el camino que toma el agente para salir de la fuente, puede ser el aparato
respiratorio (estornudo), aparato digestivo (defecacin), placenta, piel, tracto gnito-urinario (orina).

Susan Arias Donoso
282
El mecanismo de trasmisin es aquel por el cual el agente se transmite desde la puerta de salida del
reservorio o fuente, a la puerta de entrada del hospedador. Los principales mecanismos de
transmisin son:
- Transmisin directa: hospedador toma contacto con la fuente y se infecta
- Transmisin indirecta: requiere un eslabn intermediario, como vectores y fmites.

La puerta de entrada es como el agente accede al hospedador, puede ser: conjuntiva, aparato
respiratorio, aparato digestivo, tracto gnito-urinario, heridas, mordeduras, etc.

El hospedador es el individuo blanco del agente y en el cual se desarrolla la enfermedad
transmisible, este presenta caractersticas determinadas, que lo hacen susceptible.

1. Agente
- Edad.
causal
- Mal estado nutricional.
especfico
- Estrs
- Resistencia
6.
- Inmunidad
2. Reservorio
Susceptibilidad
del Huesped

5. Puerta de
entrada del

Huesped

Mecanismos de patogenicidad y resistencia
3. Puerta de
salida del
Agente
4. Modo de
Transmisin
del Agente
Todo microorganismo debe ingresar a un hospedero susceptible y expresar su patogenicidad a

travs de adherencia y multiplicacin, tomando contacto con las clulas del hospedador, resistiendo
la eliminacin (sistema inmune) y desplazando las bacterias que normalmente colonizan los tejidos, a
la vez que compiten por nutrientes y hierro; mediante la produccin de ciertos factores de virulencia
(enzimas, toxinas o invasinas), hecho esto la bacteria producir una infeccin traducindose en un
cuadro invasivo o no, a lo cual sobreviene la enfermedad.

La virulencia bacteriana es un proceso multifactorial, que requiere
Penetracin del patgeno
etapas de infeccin bacteriana eficaz, cuyos mecanismos se
encienden o se apagan segn estn dadas las condiciones. Los
Adherencia y multiplicacin
factores de virulencia pueden estar codificados por:
- Plsmidos: informacin transmitida de un organismo a otro.
- Transposones: codifican cierto tipo de informacin gentica
especialmente de resistencia bacteriana.
Enzimas Toxinas Invasinas
- Islas de patogenicidad: conjunto de genes que en forma
armnica codifican cierto tipo de elemento de patogenicidad
Enfermedad
Susan Arias Donoso
283
La adhesina es una protena de la pared celular que se fija a molculas receptoras especficas sobre
la clula hospedadora (D-manosa, cido silico) y capacitan a la bacteria para adherirse ntimamente
a esa clula, colonizar y resistir la eliminacin, estos receptores pueden estar recubiertos por
microbiota evitando que otros microorganismos tomen contacto con las clulas, pueden ser protenas
fijadoras de fibronectina, filamentos de hemaglutinina, pilina, cpsula y slime layer, los
lipopolisacridos de las bacterias Gram- y el cido teicoico y lipoteicoico de las bacterias Gram+.
El flagelo acta como factor de virulencia solo en Campylobacter. Existen bacterias que requieren la
presencia de un fago en su citoplasma para producir toxinas, como es el caso de Corynebacterium
diphtheriae. Las bacterias toman contacto con las clulas epiteliales del hospedador a travs de las
fimbrias. Hay cierto tipo de toxinas como las enterotoxinas y verotoxinas que pasan a la clula del
hospedador.

Exotoxinas

Los mecanismos de invasin se deben a la presencia de protenas extracelulares como: Invasinas:
formadoras de poros entre la bacteria y la membrana del hospedador, presentes en Shigella,
Salmonella, Yersinia y Listeria; hialuronidasa, colagenasa, neuraminidasas, estreptoquinasa y
estafiloquinasa, fosfolipasas, lecitinas, hemolisinas, coagulasa estafiloccica, proteasas, lipasas,
glucohidrolasas y nucleasas, protenas superficiales ligadoras de colina (Streptococcus), protena I
(Neisseria) y una combinacin de invasinas y motilidad (Borrelia, Treponema).

FACTOR
FUENTE
Cpsula



Bacillus anthracis

Yersinia pestis
Protena M
Streptococcus Grupo A
Enzimas extracelulares
Hialuronidasas
Streptococcus Grupo A
Coagulasas
Cinasas
Staphylococcus, Streptococcus
Colagenasas
Clostridium perfringens
ACTIVIDAD
Antifagoctica

Antifagoctica
Lisis del tejido
Coagula fibrina
Lisis de fibrina
Lisis del colgeno
Susan Arias Donoso
284
Toxinas

Clasificacin de las toxinas segn:

Lugar de accin
Enterotoxina
(entrico)
Neurotoxina
(SN)
Leucotoxina
(leucocitos)
Hemolisinas
(eritrocitos)

Mecanismo de accin
Efectos biolgicos
Toxinas que daan la Productores de edema
membrana (citolisinas).
Hemolticas
Toxinas moduladoras de Productoras de diarrea
receptor.

Toxinas internalizadas
enzimticamente
Toxinas ADP-ribosilantes.
Toxinas adenilato ciclasa.
Localizacin del blanco

Endotoxina
Exotoxina

Las citolisinas producen poros de distinto tamao de la membrana de clula blanco, segn lo cual se
clasifican en:
- Productoras de grandes poros: Gram+, ligan selectivamente el colesterol sobre la membrana
celular eucaritica, como S. pyogenes, S. pneumoniae, Bacillus, Clostridium tetani, Clostridium
perfringens y Listeria
- Productoras de pequeos poros:
o Toxina D de S. aureus (citotoxina): Acta sobre eritrocitos, leucocitos, plaquetas
(pancitopenia), hepatocitos y msculo liso de vasos sanguneos.
o Leucotoxinas, J hemolisina, y la E toxina de Clostridium perfringens (produce gangrena
gaseosa).
- Otras formadoras de poros: Ag protector de Bacillus anthracis (carbunco)

Susan Arias Donoso
Exotoxinas
Endotoxinas
Producidas en citoplasma y
excretadas
Gram+ y Gram-
Protenas
Inestables
Alta
Alta
Alta
Tienen
Termolbil
Especfico de cada toxina
Sensibles (toxoides)
Parte de la pared celular

Estabilidad
Capacidad antignica
Toxicidad
Especificidad
Actividad enzimtica
Estabilidad al calor
Mecanismo de accin
Reaccin al formol

285
Gram-
LPS
Estables
Baja
Moderada
Alta
No tienen
Termoestable
Semejante en todas
Resistentes (no forma toxoide)
Existen toxinas tipo A/B que presentan dos dominios: A, con actividad enzimtica y txica, y B que
liga receptor especfico. A este tipo pertenecen:
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Toxina diftrica de Corynebacterium diphtheriae

Toxina del carbunco de Bacillus anthracis
Toxina de Clostridium botulinum
Toxina de Clostridium tetani
Exotoxina A de Pseudomonas aeruginosa
Enterotoxinas de Escherichia coli (ST y LT)
Exotoxina del Vibrio cholerae
Toxina Shiga like (E. coli O157:H7)
Enterotoxina C. perfringens, Bacillus cereus
Coagulasa
Toxina Helicobacter pylori
El componente A y B puede ser fagocitado completamente por la clula hospedadora, liberando el

componente A en el citoplasma.

Susan Arias Donoso
286
Cuadro infeccioso
1.
Reservorio o fuente
9.
2.
replicacin
ruta
Fase extra humana

8.
3.
liberacin de
unidades infeciosas
ruptura de la
primera lnea de
defensa y entrada
Fase humana
7.
4.
resultado (enfermedad
aguda, recuperaci,
enfermedad crnica,
muerte)
Diseminacin en el cuerpo
resistida por la segunda linea
de defensa, complemento y
fagocitosis
6.
Respuesta del sistema
inmune y respuesta general.
posible dao de los tejidos
5.
replicacin de organismos
invasores resistida por la
segunda lnea de defensa
Mecanismos de supervivencia

Susan Arias Donoso
287
Organismos
invasores
Mecanismos de defensa
Existen defensas constitutivas que proporcionan proteccin contra la
invasin, colonizacin e infeccin, se denominan naturales, innatas o
inespecficas. Asimismo existen defensas inducibles producidas por
exposicin a un patgeno, involucra la respuesta inmune y son especficas
(adaptativas). En las defensas constitutivas debe considerarse la
resistencia de las especies, la edad, sexo, estrs, malnutricin,
enfermedad intercurrente y el estado inmunitario.
Barreras
fsicas
Piel, microbiota
Respuestas
dirigidas
Inflamacin
Produccin de
Los mecanismos locales de defensa incluyen las barreras anatmicas
Inmunidad
Ac
especifica
como piel, mucosas, tracto respiratorio, boca, estmago, intestino, tracto
urogenital, ojos. La piel protege gracias a la descamacin, la desecacin, la
Inmunidad
acidez y las secreciones como el cido oleico. El mecanismo de defensa de la conjuntiva puede celular
ser
mecnico gracias a la secrecin lacrimal, o biolgico por la lisozima presente en ella. En el aparato
respiratorio la inmunidad est dada por las vibrisas, cornetes, secrecin mucosa, movimiento ciliar,
lisozima, acidez, tos, fagocitosis. En el aparato digestivo los responsables de la inmunidad son, el
epitelio escamoso de la boca, la secrecin salival, pH gstrico, flora intestinal (Lactobacillus bifidus),
secrecin de moco, lisozima, irritabilidad. En el sistema gnito-urinario la inmunidad se debe al pH de
las secreciones, la descamacin celular, el revestimiento epitelial, acidez de la orina, mecnica de la
miccin, estrgenos y Lactobacillus acidophilus. Las barreras celulares estn compuestas por los
neutrfilos, eosinfilos, macrfagos, NK y clulas asesinas activadas por linfocinas (LAK).

Sistema/rgano
Piel
Tracto
genitourinario
Pulmn
Nasofaringe y ojos
Circulacin,
rganos linfoides
Suero
Barreras fisicoqumicas a la infeccin

Componente activo
Mecanismo efector
Clulas escamosas
Clulas columnares
Cilios traqueales
Moco, saliva y lgrimas
Fagocitos
Clulas NK y K
Clulas LAK
Lactoferrina y transferrina
Interferones
TNF-alpha
Lisozima
Fibronectina
Complemento
Descamacin, escurrimiento, cidos

orgnicos
Peristalsis, pH bajo, cidos biliares,
escurrimiento, tiocianato
Expulsin mucociliar, surfactantes
Escurrimiento, lisozima
Fagocitosis y muerte intracelular
Citolisis directa y Ab-dependiente
Citolisis I2-activada
Unin de hierro
Protenas antivirales
Antiviral, activacin de fagocitos
Hidrlisis de peptidoglicn
Opsonizacin y fagocitosis
Opsonizacin, mayor fagocitosis, inflamacin
La inmunidad innata se compone de pptidos antimicrobianos, de fagocitos (macrfagos, PMN,

monocitos), linfocitos NK, sistema de complemento. Mientras que el sistema inmune adaptativo se
compone de linfocitos B, de inmunidad humoral, y linfocitos T de inmunidad celular que expresa
citotoxicidad, secrecin de citoquinas y activacin de clulas B. La inmunidad es modificada por
desnutricin, fatiga, temperatura, radiacin, drogas: alcohol, depresores de la medula sea,
infecciones intercurrentes y enfermedades metablicas, como la diabetes.
Susan Arias Donoso
288
Inmunidad activa
Inmunidad pasiva
Natural
Artificial
Natural (6 meses de vida)
Artificial
Post-infecciosa
Vacunas
Calostro
Sueros hiperinmunes

Existen sustancias antibacterianas como la lisozima, protenas bsicas, sales biliares, sistema del
complemento y mecanismos de defensa de tejidos y sangre, como lactoferrina, transferrina,
fagocitos, complemento.
Las infecciones y su severidad son influenciadas por exposicin: manejo, alimentacin, raza, gnero,
edad, infecciones coexistentes, constitucin gentica, estado inmune, stress, infecciones crnicas y
temperaturas extremas.

Si una endotoxina presente en los LPS (Gram-), en el lpido A, toma contacto con los macrfagos se
producen una serie de eventos que incluyen la produccin de lpidos, radicales (agentes
detoxificantes), protenas, interleuquinas, interferones y TNFJ; mecanismos que se regulan mediante
feed-back positivo o negativo. La produccin de estos elementos determina la respuesta del
hospedador frente al microorganismo, la cual puede llegar a ser riesgosa en caso que los mediadores
sean sobreproducidos, que incluyen, fiebre alta, CID, hipotensin y shock.
Susan Arias Donoso
289

En bacterias Gram+ solo existe peptidoglicn expuesto hacia el exterior, de modo que al producirse
la lisis de la bacteria se produce un contacto con el macrfago generando una serie cambios qumicos
dentro de l que producir la sntesis de cierto tipo de molculas como citoquinas, IL, TNF y PAF
activando as la coagulacin e inflamacin.

Postulados de Koch
La utilidad es estos postulados es que renen las caractersticas necesarias para considerar a un
microbio particular como la causa de una enfermedad particular, estos son:
1. El microbio debe estar presente en cada caso de la enfermedad, aunque existen algunas
bacterias que colonizan sin causar enfermedad sintomtica.
2. Los microbios deben crecer en un cultivo puro fuera del organismo enfermo.
3. La misma enfermedad debe producirse inoculando el microbio en un organismo sano,
actualmente ocurre que existen enfermedades muy graves para reproducirlas en
organismos humanos o no existen modelos animales.
4. Los microbios deben ser reaislados de organismos intencionalmente infectados.

Vacunas
Son utilizadas para la prevencin de enfermedades infecciosas, como profilaxis especfica o
inmunizacin activa. Las vacunas son una suspensin de microorganismos vivos, atenuados o
muertos, o fracciones de aquellos que se administran para inducir inmunidad y de esa forma prevenir
enfermedades infecciosas tanto en seres humanos como en animales. La atenuacin se logra por
mltiples pasajes en el tiempo en medios de cultivos, dejando de expresar ciertos factores de
virulencia. Cuando el microorganismo esta muerto pero totalmente intacto la vacuna se denomina
vacterina.
Susan Arias Donoso
290
Las vacunas pueden ser de distintos tipos:

-
-
-
-
-
Vacunas de microorganismos viables atenuados (virulencia atenuada): Los MO se

multiplican en el hospedador, simulando las etapas tempranas de la infeccin natural.
Requieren menos dosis, pero la efectividad depende del estado de salud. Adems puede
ocurrir diseminacin del MO en otros individuos y existen riesgos de reversin a cepa
virulenta bajo ciertas circunstancias. Producen respuesta humoral y celular.
Vacunas de MO muertos o inactivados: son suspensiones concentradas pobres en
antgenos, requiriendo varias dosis y el uso de adyuvantes como hidrxido de aluminio,
poseen una baja especificidad inicial, y poseen reacciones adversas. La inactivacin se
puede efectuar con calor, formaldehido, fenol, beta propionilactona o timerosal. Solo
producen respuesta humoral.
Vacunas de toxoides: Exotoxinas bacterianas modificadas (difteria, ttanos). Inactivacin
con calor y formaldehido.
Vacunas de componentes celulares bacterianos: Fracciones antignicas purificadas:
Extractos capsulares Streptococcus pneumoniae, H. influenzae B y Neisseria meningitidis.
Vacunas de subunidades virales: Influenza, Hepatitis B.
Vacunas de antgeno recombinante: Hepatitis B: produccin en Saccharomyces cereviseae
modificado.

Vacuna
Tipo de antgeno
Via de administracin
BCG (tuberculosis)
Bacteria viva y atenuada
ID
DPT
Toxoide y bacteria inactivada
IM
DPT (pertusis acelular)
Toxoide y productos bacterianos IM
Haemophilus influenzae b
Polisacrido conjugado
IM
Hepatitis A
Virus inactivado
IM
Hepatitis B
vacuna recombinante
IM
Influenza
Virus inactivado
IM
Polisacrido
IM
Sarampin, paperas, rubeola Virus vivos atenuados
SC
Polisacrido
IM o SC
Sabin (polio)
Virus vivo atenuado
oral
Salk (polio)
Virus inactivado
IM
Rabia
Virus inactivado
IM
Ttanos
Toxoide
IM
Varicela
Virus vivo atenuado
SC
*DPT = Difteria, Pertusis (tos convulsiva), Ttanos; BCG = Bacilo de Calmette y Gurin (Mycobacterium bovis)
Infecciones intrahospitalarias (IIH)

Las infecciones intrahospitalarias son aquellas infecciones que no estaban presentes al momento
del ingreso del paciente, ni siquiera en perodo de incubacin, y que se manifiestan durante la
hospitalizacin o tras el egreso del paciente, dentro de las 48 horas posteriores al alta mdica.
Dependiendo del tipo de procedimiento realizado se consideran IHO (infecciones de heridas
operatorias) hasta 30 das despus de la intervencin; en el caso de ciruga inscicional profunda,
implante, prtesis valvulares, injertos vasculares y prtesis, generalmente se considera un perodo de
Susan Arias Donoso
291
un ao, mientras que en los catteres urinarios permanentes se consideran hasta 7 das despus de
su retiro. Sin embargo no todas las infecciones presentadas bajo estas condiciones son consideradas
IIH, stas no contemplan:
- Infecciones asociadas a complicaciones.
- Infecciones del recin nacido (asociadas a la madre).
- Infecciones de colonizaciones.
- Inflamaciones.

La colonizacin por agentes patgenos est condicionada por la naturaleza de la exposicin:
venoclisis (colocacin de una va para administrar alimentos o ATB), sondas, punciones, alimentacin
parenteral, transfusiones, heridas quirrgicas, estancia hospitalaria; segn lo cual los principales
cuadros son: infeccin del tracto urinario (40%, sondas), Infeccin del Sitio Quirrgico (ISQ, 21%), de
las vas respiratorias (16%, ventilacin mecnica), cutneas (6%), septicemia (4%). Depende adems
de factores del husped asociados a la edad, sexo, naturaleza de patologa, riesgo quirrgico,
diabetes, estado nutricional, inmunosupresin e infecciones agregadas; y del acto quirrgico,
considerndose si es de urgencia o electivo, el servicio hospitalario, sitio de la ciruga, procedimiento
quirrgico, equipo mdico, tiempo quirrgico, material extrao y el tipo de cierre de la herida. En
general se manifiestan con flebitis, conjuntivitis (RN), abscesos, gangrena y septicemia.

Los principales microorganismos productores de IIH son:
Microorganismo Reservorio ambiental Reservorio humano

S. aureus
No
Manos, nariz
S. epidermidis
Enterococcus
Catter vasculares
Muebles clnicos
Klebsiella
Equipamiento terapia
ventilatoria
Manos, nariz
Manos
Orina, secrecin
bronquial, faringe,
deposiciones
Manos, deposiciones
Enterobacter
Pseudomonas
Acinetobacter
Candida
(principalmente
C. albicams)
Serratia
Citrobacter
Agua, soluciones EV
Equipamiento terapia
ventilatoria
Agua, equipos
desinfectantes
Manos
Manos, faringe,
deposiciones
Sitio de infeccin
Herida operatoria,
sangre, pulmn
Sangre, ventriculitis
Sangre
Tracto urinario,
pulmn, sangre
Sangre, tracto urinario
Tracto urinario,
pulmn, sangre
Tracto urinario,
pulmn, sangre
No
Deposiciones, tracto
genital femenino
Tracto urinario, sangre

Las IIH constituyen un problema de salud pblica por la morbi-mortalidad y el gran impacto
econmico que conllevan, ya que a causa de ellas la hospitalizacin se prolonga en alrededor de 5
10 das y el gasto extraordinario puede triplicar o cuadruplicar el costo de hospitalizacin, por
requerir aislamiento, reintervenciones quirrgicas, mayor uso de das cama en UTI y el empleo de
antimicrobianos de alto costo, debido a que la mayora de estas infecciones es causada por
organismos multirresistentes. Adems generan un impacto social por el aumento de ausentismo
Susan Arias Donoso
292
laboral y escolar, y la prdida temporal o definitiva de la productividad, sumado a los gastos que
involucra el otorgamiento de subsidios.

Su incidencia en los egresos hospitalarios es de 5 10%, encontrndose 45 000 casos notificados al
ao, con una subnotificacin de 50%, estimndose, por tanto, 100 000 casos anuales, de stas, el 77%
se producen en hospitales de tipo I y II. En Chile alrededor del 60% de las notificaciones tienen
respaldo microbiolgico, dependiendo de su localizacin, siendo las bacteriemias e infecciones
urinarias aquellas en que ms se conoce su etiologa (80%).

Estas infecciones constituyen un indicador de calidad del establecimiento, una meta sanitaria y un
compromiso de gestin.

Pueden ser prevenidas con medidas simples y que no implican un gran costo, como interrumpir el
mecanismo o la cadena de transmisin de las infecciones, y el lavado de manos que es lo ms
efectivo. Sin embargo estas medidas no son aplicables a todas las IIH ya que solo un bajo porcentaje
de ellas es considerado evitable, de acuerdo a esto se han clasificado en:
- IIH evitables (30%): son de carcter exgeno ya que son provocadas por MO externos, donde
2/3 son provocadas por bacterias y 1/3 por virus, hongos y protozoos.
- IIH inevitables (70%): son de carcter endgeno ya que son provocadas por los MO propios
del paciente.

Los programas de prevencin a nivel local estn indicados en el Servicio de Salud respectivo, y la
vigilancia se realiza a travs del Departamento de Programas de las Personas; segn los cuales se
requiere notificacin del consolidado trimestral de la vigilancia epidemiolgica de las IIH (expresadas
en indicadores y sus tasas) a la direccin del servicio cada 3 meses, la que es remitida al MINSAL en
forma posterior.

Indicadores
Serie ITU: vigilancia de ITU.
ITU. 1 (a) Medicina
ITU. 2 (a) Ciruga CUP/DAS CUP
ITU. 3 (a) UCI
Serie EP: vigilancia de endometritis puerperal
EP. 1 (a) EP/ No. MPV
EP. 2 (a) EP/ No. MPC
EP. 3 (a) EP/ No. MPC S/TP
Serie IInt: vigilancia de infecciones intestinales
IINT. Lactantes
IINT. Neonatologa IINT/Das hosp
IINT. Adultos
Serie ITU: vigilancia de ITU

ITU. 1

ITU. 2 ITU/das catter

ITU. 3

Susan Arias Donoso
Serie IRB: vigilancia de ITRB

IRB. 3 (a) NVM/DAS VM

Serie ITS: vigilancia de infecciones del torrente
sanguneo
ITS. 1 (a)
ITS. 2 (a) ITS CV / DIAS CV
ITS. 3 (a)
Serie IHQ: vigilancia de IHQ
Colecistectoma, laparoscopia
Colecistectoma laparotoma
Hernia inguinal IHO/No. Interv
Cesreas
Serie IRB: vigilancia de ITRB no asociado a
procedimientos invasivos

IRB. 3 (b)

Neumonas
293
La vigilancia que se realiza en pacientes hospitalizados involucra:

o ITU (Medicina y ciruga).
o ITRB.
o Infeccin del torrente sanguneo.
o Infecciones intestinales (nios).
o Infecciones de heridas operatorias.
o Endometritis puerperal.

En funcionarios se vigila:
o Nmero de accidentes corto-punzantes.
o Nmero de funcionarios con tuberculosis.

Los objetivos del programa de vigilancia de las IIH son:
- Disminuir la incidencia de IIH asociadas a procedimientos invasivos.
- Disminuir o evitar los brotes epidmicos (nmero de brotes y nmero de casos por brote).
- Disminuir exposiciones laborales y las infecciones asociadas en el equipo de salud
(tuberculosis y SIDA).
- Aumentar la eficiencia del sistema de vigilancia (seala estado de calidad).
- Aumentar la eficiencia y eficacia de las intervenciones.
- Disminuir los costos asociados a las IIH.

Dentro de las responsabilidades del programa se encuentran la vigilancia epidemiolgica y
diagnstico nacional, estipulacin de normativa nacional, acreditacin del programa de IIH, apoyo a
otros programas y la investigacin operacional. Los elementos bsicos del programa son:
- Comit de IIH.
- Sistema de vigilancia.
- Control de esterilizacin.
- Control de antispticos y desinfectantes.
- Apoyo del laboratorio de microbiologa.
- Aislamientos.
- Control en el uso de antimicrobianos.
- Saneamiento ambiental bsico.
- Programa de educacin continua.
- Programa de salud del empleado.
- Comunicacin con otros centros de salud de la comunidad.

Enfermedades de notificacin obligatoria

Actualmente existen 47 enfermedades que deben ser notificadas de forma obligatoria, adems de
los brotes de enfermedades infecciosas y los fallecimientos de causa no explicada donde se sospeche
una causa infecciosa en personas previamente sanas. Estas enfermedades tienen distinta forma y
periodicidad de notificacin, distinguindose las de notificacin inmediata, diaria y por centinelas, lo
cual se encuentra regulado por los decretos supremos 158 y 147. El Decreto Supremo 158, en su
artculo 6 establece que el responsable de la notificacin es el mdico cirujano que atiende enfermos
en establecimientos asistenciales, sean pblicos o privados. Si el mdico es parte de la dotacin de
algn establecimiento asistencial pblico o privado de atencin abierta o cerrada, la notificacin ser
responsabilidad del Director del mismo y se realizar por la persona a quien ste haya designado para
Susan Arias Donoso
294
ello. El mdico o establecimiento debe notificar a la Autoridad Sanitaria Regional (Secretara Regional
Ministerial de Salud), y ste a su vez al Ministerio de Salud.

Enfermedades de notificacin inmediata

La sospecha de casos de Botulismo, Brucelosis, Carbunco, Clera, Dengue, Difteria, Enfermedad
Invasora por Haemophilus influenzae, Enfermedad Meningoccica, Fiebre Amarilla, Fiebre del Nilo
Occidental, Leptospirosis, Malaria, Peste, Poliomielitis, Rabia Humana, Sarampin, SARS, Sndrome
Pulmonar por Hantavirus, Triquinosis, la ocurrencia de toda agrupacin de casos relacionados en el
tiempo y en el espacio, donde se sospeche una causa infecciosa transmisible, incluidos brotes de
enfermedades transmitidas por alimentos. La ocurrencia de fallecimientos de causa no explicada, en
personas previamente sanas, cuando se sospeche la presencia de un agente infeccioso transmisible.

Frente a la sospecha de alguna de las enfermedades antes mencionadas se deber comunicar en
forma inmediata, por cualquier medio a la autoridad sanitaria correspondiente (Seremi de Salud),
desde el lugar en que fue diagnosticada. Posteriormente, dentro del plazo de 24 horas se proceder a
llenar el formulario respectivo. La autoridad sanitaria deber, a su vez comunicarlo al Ministerio de
Salud, por la va ms expedita.

Todas las enfermedades de declaracin obligatoria debern notificarse en el formulario ENO
(enfermedad de notificacin obligatoria). Adems para las enfermedades de notificacin inmediata
existen formularios ad hoc, los que se pueden solicitar a la autoridad sanitaria correspondiente.

Enfermedades de notificacin diaria

Coqueluche, Enfermedad de Chagas (Tripanosomiasis Americana), Fiebre Tifoidea y Paratifoidea,
Gonorrea, Hepatitis viral A, B, C y E, Hidatidosis, Lepra, Parotiditis, Psitacosis, Rubola, Rubola
congnita, Sfilis en todas sus formas y localizaciones, VIH/SIDA, Ttanos, Ttanos neonatal,
Tuberculosis en todas sus formas y localizaciones y Tifus Exantemtico Epidmico.

Las enfermedades de declaracin diaria debern ser notificadas, una vez confirmado el diagnstico,
por el respectivo establecimiento asistencial, envindose el formulario correspondiente, el mismo da
de la confirmacin a la autoridad competente, desde donde se remitir al Ministerio de Salud una vez
por Semana. Una vez confirmado el diagnstico se deber llenar el formulario ENO.

Enfermedades de notificacin exclusiva a travs de establecimientos centinelas

Las siguientes enfermedades corresponden a las que debern ser notificadas obligatoriamente solo
por los centros y establecimientos definidos como centinelas por la autoridad sanitaria: Influenza,
Infecciones Respiratorias Agudas, Diarreas, Enfermedades de Transmisin Sexual (excepto Gonorrea,
Sfilis y VIH/SIDA) y Varicela.

Estas enfermedades debern ser notificadas en cuanto a nmero de casos semanales, segn sexo y
grupos de edad, una vez confirmado el diagnstico en el respectivo establecimiento centinela,
envindose el o los formularios correspondientes semanalmente, incluyendo los datos de laboratorio,
a la autoridad sanitaria competente, desde donde se remitirn al Ministerio de Salud con igual
periodicidad.
Susan Arias Donoso
Microbiologa: Diagnstico microbiolgico
295

Diagnstico microbiolgico

El diagnstico microbiolgico est orientado a proporcionar informacin necesaria, oportuna y
trascendente para conocer la etiologa de una enfermedad y establecer un tratamiento adecuado.
Generalmente el diagnstico se establece por medio de dos elementos bsicos:
- Identificacin del microorganismo.
o Tinciones.
o Medios de cultivo.
o Pruebas bioqumicas.
- Evaluacin de la susceptibilidad a los antimicrobianos.
o Pruebas de difusin en placa.
o Pruebas de microdilucin en placa.
o Pruebas de dilucin en tubo.

Para facilitar y dirigir el diagnstico de laboratorio es indispensable que el mdico cumpla con lo
siguiente:
- Aportar con la informacin clnica indispensable.
- Tener conocimientos bsicos de microbiologa clnica.
- Conocer las limitaciones e indicaciones de las pruebas.
- Solicitar el estudio de forma precisa.
- Comunicarse constantemente con el laboratorio.
- Alertar al laboratorio sobre patgenos raros.
- Tomar las muestras correctamente.

Antes de tomar la muestra es importante saber qu es lo que se est buscando especficamente y
conocer como se toma la muestra ideal.

Etapas del diagnstico microbiolgico
Etapa
Procedimiento
Muestra
Muestra correcta y bien tomada, bien rotulada con un apropiado transporte

y almacenamiento
Tinciones de la muestra y del cultivo
Sembrar en placas, tubos con el medio apropiado
Traspasar a medios diferenciales y selectivos, serologa, test de DNA
Antibiograma por difusin o CIM, utilizando antimicrobiano apropiados para
el sitio de la infeccin y la bacteria aislada
Microscopa
Cultivo
Aislar/identificar
Sensibilidad

Una etapa y bsica en el estudio de las caractersticas morfolgicas de una bacteria, es la
observacin directa de su morfologa macroscpica y microscpica, observacin que abarca la
deteccin de hemlisis en torno a las colonias, sta corresponde a la capacidad que tienen algunas
bacterias de lisar los glbulos rojos presentes en las placas de agar sangre, de acuerdo a lo cual las
colonias se pueden clasificar en: gamma hemolticas (sin hemlisis), alfa hemolticas (destruccin
parcial de los glbulos rojos, se aprecia un halo verdoso por precipitacin de la metahemoglobina) y
Susan Arias Donoso
296
beta hemolticas (destruccin total de los eritrocitos). Otra caracterstica importante es la morfologa
colonial y su caracterstica de ser superficial o invasiva.

Forma
Borde
Puntiforme
Circular
Elevacin
Entero
Ondulado
Superficie
Plana
Lisa o rugosa
Elevada
Mate o brillante
Rizoide
Lobulado
Convexa

Irregular
Seca o cremosa

Filamentoso
filamentosa

Crateriforme
(umbilicada)
Acuminada
(mamelonada)
Invasiva o superficial

La observacin microscpica permite conocer algunas caractersticas de las bacterias, como su
forma, disposicin y agrupacin, presencia o ausencia de cpsula, esporas, flagelos, movilidad, etc.
Esta observacin se puede realizar al fresco, mediante microscopa o tinciones simples, diferenciales
o especiales.

Pruebas bioqumicas y medios de cultivo:

Utilidad
Indicador pH/
Interpretacin
reactivo/medio
Positivo
Citocromo oxidasa en presencia de
Kovacs oxidasa
Fundamento
Presencia de
oxgeno, Citocromo C y Reactivo de
enzima Citocromo
oxidasa produce compuesto prpura
C oxidasa
INDOFENOL

El triptofano es oxidado por la tripto-
fanasa formando indol, escatol y ci-
Detecta la enzima
do indol actico, el aldehdo del
Indol
triptofanasa
reactivo se combina con el indol
dando color rojo intenso
Pluripeptona aporta nutrientes, glu-
Detecta
cosa es el CHO fermentable pudien-
fermentacin
Rojo-Metilo
do formarse productos cidos evi-
cido mixta en
denciables con el indicador rojo de
enterobacterias
metilo
La acetona, en medio alcalino y

presencia de oxgeno y alfa naftol, se
Detecta
Voges-
oxida a DIACETILO, que reacciona
fermentacin
con creatina dando color rojo fucsia,
Proskauer
butanodilica
evidenciando la presencia de

productos neutros
Lmina: el clumping factor o endo-
coagulasa unida a la pared celular ac-
Identificacin de S.
ta sobre el fibringeno.
Coagulasa
aureus
Tubo: la exocoagulasa libre activa el
CRF que reacciona con fibrongeno.
Oxidasa
Susan Arias Donoso
Prpura
(tetrametil-p-
Negativo
fenil diamina 1%)
incoloro
Kovacs Indol
Positivo
Rojo intenso
(Alcohol amilico
HCl p-metilamino Negativo:
benzaldehdo)
Amarillo
Positivo
Rojo Metilo
(5gotas)
pH 4,4
Negativo
pH 6,0
naranjo

Positivo
alfa naftol y KOH
Rojo Fucsia
(1ml cada uno)
Negativo

Amarillo
Positivo
Plasma
citratado

cogulo total o
parcial
Negativo
no hay cogulo
Catalasa
Presencia de
enzima catalasa
La catalasa descompone el perxido

Positivo
de hidrgeno en agua y O2, con des- Agua oxigenada
burbujeo
prendimiento de gas evidente
Citrato

Capacidad de usar
citrato como nica
fuente de carbono
y compuestos
amoniacales como
fuente de
nitrgeno
Mg: cofactor
Sales de fosfato forman buffer
Azul de
Citrato aporta C (Cit permeasa)
Bromotimol
Fosfato monoamnico fuente de ni-
trgeno (alcaliniza)
El nitrato es reducido a nitrito o gas

reduccin de
nitrgeno (N2) por accin de la nitra-
Nitrato
nitratos a nitritos y
acido sulfalinico
to reductasa en un proceso anaero-
a gas nitrgeno
(1:1)
bio
Triptena y glucosa aportan nutrien-
Detecta la
Hidrlisis de
tes. La urea al ser hidrolizada por la
presencia de la
rojo de fenol
enzima ureasa libera carbonato am-
la urea
enzima ureasa
nico y CO2 alcalinizando el medio.
La triptena es fuente de N.
DNAsa hidroliza el DNA altamente *Azul de
Diferencia Neisseria
polimerizado, rompe enlaces fosfo- toluidina o
de Moraxella y
DNAsa
diester internos. Al adicionar HCl el Verde de Metilo
especies de Serratia
DNA no hidrolizado precipita, o bien
y Staphylococcus
los indicadores se unen al DNA no HCL 1N
hidrolizado.
Diferenciacin y
Hidrlisis de manitol acidifica el me-
dio, altamente selectivo por su alta rojo fenol
Manitol Sal aislamiento de
Staphylococcus
concentracin de sal (7,5%).
Identifica la
PYRasa hidroliza el sustrato pirridonil
presencia de la
beta naftilamida liberando beta naf-
N-dimetil amino
PYR
enzima 1-
tilamida que reacciona con el reac-
cinnamaldehdo
pirroglutamil
tivo formando un compuesto de co-
aminopeptidasa
lor prpura.
Detecta la
40% de bilis aporta selectividad
degradacin de
La hidrlisis de esculetina produce
Bilis
esculetina en
glucosa y esculina, esta ltima se
esculina
presencia de sales combina con citrato ferroso dando
biliares
un color negro.
Glucosa, Ramnosa, Arabinosa o Xilo-
sa pueden ser CHO fermentables, su
Diferencia
fermentacin acidifica el medio.
Azul de
metabolismo
Cubierta con vaselina proporciona un
O/F
oxidativo y
Bromotimol
ambiente anaerobio indicando capa-
fermentativo
cidad fermentativa. Sin vaselina per-
mite oxidacin.
Factor monofosfato de adenina ccli-
ca (factor CAMP) de S. agalactiae in-
Diferenciacin de S. aureus ASC 5%
Test de Camp S. agalactiae y S. apareciendo una zona de hemlisis Cepa de S.
aureus
mayor, en forma de punta de flecha aureus
en el punto de contacto de ambas
bacterias
297
Positivo
alcalino
Negativo
cido

Positivo

Negativo
incoloro
Positivo
alcalino
Negativo
cido
Positivo
Transparencia
Decoloracin
Negativo
Opalescencia
Color
Positivo
Negativo
positivo

negativo
Positivo
> 50%
Negativo
< 50%
Positivo
Amarillo
Negativo
Verde
Azul
Positivo:
Punta de flecha
Susan Arias Donoso
298
Identifica la
capacidad de
desarrollarse en
NaCl 6,5%
Prueba de
Diferenciar los
fermentacin gnero
de la glucosa Microccocus y
Staphylococcus
anaerobia
Prueba de
tolerancia a
la sal
Kligler
TSI
LIA
MIO

Agar Mac
Conkey
Susan Arias Donoso
Positivo
Caldo nutritivo cerebro corazn ms
NaCl 6,5%

Turbidez
Negativo
Transparencia
Triptosa (1%) y extracto de levadura

Prpura de
(0,1%) aportan nutrientes. Glucosa
bromocresol
(1%) es el CHO fermentable
Peptona y tripteina aportan nutrien-

Capacidad de
tes. Lactosa (tendido) y glucosa (ba-
fermentar CHO
se) son los CHO fermentables. Tiosul-
especfico,
fato de sodio proporciona S para la
producir cido
produccin de H2S que reacciona con
sulfhdrico (H2S) y citrato frrico formando SULFURO
gas a partir de
DE HIERRO (precipitado negro). La
glucosa.
presencia de cavidades indica pro-
duccin de gas.
Extracto de carne y pluripeptona
Capacidad de
aportan nutrientes. Sacarosa, lactosa
fermentar CHO
(tendido) y glucosa (base) son los
especfico,
CHO fermentables. Tiosulfato de so-
producir cido
dio proporciona S para producir H2S
sulfhdrico (H2S) y que reacciona con citrato frrico for-
gas a partir de
mando SULFURO DE HIERRO (preci-
glucosa.
pitado negro). La presencia de cavi-
dades indica produccin de gas.
Peptona y extracto de levadura apor-
tan nutrientes. Glucosa es el CHO
fermentable.
Deteccin de:
LDC en medio cido produce PU-
lisina
TRESCINA que alcaliniza el medio.
descarboxilasa
LDA en presencia de oxigeno y sales
(LDC)
de hierro forma /K dKZ-
Lisina deaminasa
BNICO.
(LDA)
Tiosulfato de sodio proporciona S pa-
H2S
ra la produccin de H2S que reaccio-

na con citrato frrico formando SUL-
FURO DE HIERRO, un precipitado de
color negro.
Peptona y triptena aporta nutrientes
Deteccin de:
Semisolidez permite la distribucin
Motilidad
de bacterias mviles.
Ornitina
ODC en medio cido descarboxila or-
descarboxilasa
nitina produciendo CADAVERINA que
(ODC)
alcaliniza el medio.
Indol
Indol: triptofanasa lo produce a par-

tir de triptfano.
Discrimina
Peptonas aportan nutrientes, lactosa
bacterias con
es el CHO fermentable, sales biliares
capacidad de
y cristal violeta inhiben el crecimien-
fermentar lactosa to de Gram+
Positivo
Staphylococcus
Negativo
Micrococcus
Positivo
cido
Negativo

Rojo de fenol
Alcalino
H2S
Precipitado
Gas
Cavernas
Positivo
cido
Negativo
Rojo de fenol
Alcalino
H2S
Precipitado
Gas
Cavernas

Positivo
Negativo
Positivo: tendido
Negativo

Precipitado
Prpura de
bromocresol

Positivo turbidez

Prpura de
bromocresol
Positivo
Negativo

Positivo indol
Negativo

rojo neutro

Positivo
pH cido
Negativo
incoloro
Agar XLD
Agar SS
Agar TCBS
Caldo
tioglicolato
Caldo
selenito
Tincin de
Kinyoun
Tincin de
Loeffler
Desoxicolato de sodio inhibe colifor-

mes, xilosa es el CHO fermentable.
LDC en medio cido descarboxila la
aislamiento y
lisina alcalinizando el medio. Fer-

diferenciacin de mentacin de Sacarosa y lactosa in-
rojo neutro
bacterias
hibe coliformes y contrarresta alcali-

enteropatgenas nizacin del medio. Tiosulfato de so-
dio proporciona S para la produccin
de H2S que reacciona con citrato f-
rrico formando SULFURO DE HIERRO.
Sales biliares y verde brillante inhi-
ben Gram+, coliformes y Proteus.
Aislamiento de
Lactosa es el CHO fermentable, tio-
Salmonella y
sulfato de sodio proporciona S para rojo neutro
Shigella
la produccin de H2S que reacciona

con citrato frrico formando SULFU-
RO DE HIERRO (precipitado negro)
Estracto de levadura, peptona y trip-
teina aportan nutrientes. Tiosulfato,
citrato y sales biliares inhiben la mi-
crobiota acompaante, sacarosa es Azul de timol
Aislamiento de
el CHO fermentable.
Azul de
Vibrio
Tiosulfato de sodio proporciona S pa- Bromotimol
ra la produccin de H2S que reaccio-
na con citrato frrico formando SUL-
FURO DE HIERRO (precipitado negro)
La baja cantidad de agar retarda la
dispersin de CO2 y O2. Las sustancias
Ensayos de control
reductoras como tioglicolato de sodio
de esterilidad.
y cistena proporcionan una anaero-
Favorece el
biosis suficiente y los grupos -SH- de
desarrollo de MO

estos compuestos neutralizan los e-
aerobios y
fectos bacteriostticos de los deriva-
anaerobios.
dos mercuriales, arsenicales y de o-
tros metales pesados.
Peptona aporta los nutrientes, la lac-
Medio de
tosa es el CHO fermentable, el sele-
enriquecimiento
nito de sodio inhibe la flora Gram po-
para aislamiento sitiva y la mayora de la flora entrica
de Salmonella spp. excepto Salmonella spp durante las
primeras 8-12 horas de incubacin.
diferenciacin de
Nocardia resiste decoloracin pues Fucsina fenicada
Actinomyces y
es cido resistente
Azul de metileno
Nocardia
presencia de
grnulos
metacromticos
el azul de metileno alcalino se une a Azul de

los grnulos con alto contenido de metileno
fosfato
alcalino
299
Salmonella,
Shigella, Yersinia,
Pseudomonas
Salmonella Typhi
Microbiota
intestinal
Positivo
pH cido
Negativo
Incoloro
H2S
Precipitado
Positivo
pH cido
Negativo
pH bsico
H2S
Precipitado
Aerobios:
Parte superior

Anaerobios
estrictos y
facultativos:
Profundidades
Nocardia
Otros MO
Grnulos
Fondo
Susan Arias Donoso
300
Prueba
Susceptibilidad a
novobiocina
Susceptibilidad a
bacitracina
Susceptibilidad a SXT
Susceptibilidad a
optoquina

Susan Arias Donoso
Concentracin

Sensible

Resistente
< 16 mm
0,04 U

< 10 mm
1,25 ug/23,75 ug
5 ug/mL
Cualquier halo Sin halo

< 14 mm
301
Diagnstico microbiolgico de infecciones urinarias

Una infeccin urinaria se desarrolla siguiendo una secuencia en que el agente bacteriano, que tiene
la capacidad de adherirse a las clulas uretrales o vesicales, inicia la colonizacin, a lo cual sobreviene
la invasin, que es la reproduccin del agente en la zona urinaria baja, desde donde puede alcanzar la
zona alta, o viceversa, cuando la infeccin urinaria se presenta a causa de una bacteriemia. La
sintomatologa incluye la inflamacin de la zona vesical que implica una respuesta del uroepitelio por
invasin bacteriana de amplio espectro.

La primera infeccin (recidiva 25%) es fcil de tratar pues est asociada a un agente especfico y se
ha producido por un desorden fisiolgico. Cuando existe una bacteriuria no resuelta puede generar
dao permanente o no, como pielonefritis, en que se ve afectado el rin. La persistencia bacteriana
se comporta como factor predisponerte, pues ese mismo microorganismo se asocia a una segunda
infeccin y a un problema estructural anatmico.

La bacteriuria se refiere a la presencia de bacterias en orina, y la piuria indica la existencia de
leucocitos en sta, principalmente neutrfilos, activados o no, dependiendo del grado de dao
producido.

Se define como IVU simple a la infeccin de vas urinarias sanas, sta ocurre principalmente en
mujeres por la simple accin de retener la orina. La IVU complicada corresponde a la infeccin
asociada a trastornos estructurales o fisiolgicos y a pacientes inmunodeprimidos o con terapia
antimicrobiana que desplaza la microbiota normal.

La infeccin del tracto urinario se clasifica en:
- Infeccin urinaria parenquimatosa: afecta la vejiga, rin, prstata, epiddimo y testculo. La
pielonefritis aguda debe tener un tratamiento rpido, pues causa dao irreversible a los
nefrones. Cursa con cistitis aguda, epididimitis aguda y prostatitis.
- Infeccin urinaria de vas: en general son infecciones simples que afectan la vejiga y uretra.
- Infeccin urinaria no complicada: bacteriuria sin sintomatologa, de modo que son pesquisadas
en controles. Ocurre ms frecuentemente en embarazadas, por compresin de la vejiga, y en
nios.
- Infeccin urinaria de repeticin.

Va
Bacterias
Husped
Causas
urinaria
asociadas
Normal
Sano
Mujer joven con VSA E. coli (90%)

No
(adolescencia) adquirida K. pneumoniae
complicada
en la comunidad.
Complicada Trastorno
Complicado Ancianos, cualquier sexo,

funcional o Compromiso 33% de las infecciones
estructural del sistema nosocomiales, principal
inmune.
causa de bacteriemias
nosocomiales.
S.saprophyticus
otros Gram-
E. coli (80%)
K. pneumoniae
P. mirabilis
P. aeruginosa
E. cloacae
E. faecalis.
Embarazo, vejiga
neurognica,
diabetes, clculos,
inmunosupresin,
anormalidades
anatmicas.
Susan Arias Donoso
302
E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis estn asociados a BLEE y a infecciones nosocomiales, E. faecalis

puede adquirir resistencia a vancomicina; ambas situaciones hacen ms complejo el tratamiento de
los pacientes. A nivel nosocomial los agentes ms frecuentes son P. aeruginosa y Acinetobacter.

La deteccin del agente causal se realiza a partir de una muestra de orina que es obtenida por
miccin de segundo chorro, idealmente la primera miccin de la maana. En pacientes peditricos la
muestra puede obtenerse por medio de una bolsa adhesiva, sin embargo existe riesgo de
contaminacin de la zona anal o del aparato genital. Cuando no es posible obtener la muestra de esta
manera, se realiza por sondaje vesical o puncin suprapbica, esta ltima se efecta cuando existe
una mala formacin anatmica que impide la miccin o el sondaje, o cuando hay sospecha de
infeccin por anaerobios. Esta muestra debe ser transportada en forma inmediata, de no ser posible,
debe conservarse a 2 8 C, para evitar la amplificacin de las bacterias en la muestra, pues el
diagnstico se basa en el recuento de UFC/mL.

La muestra debe ir acompaada de los datos del paciente, se requiere conocer si se trata de una
infeccin urinaria alta o baja, y la existencia de sospecha de tuberculosis renal, adems de si se trata
de un paciente nosocomial, ambulatorio o con patologas anexas que orienten el estudio de aquellas
bacterias con una concentracin menor a 100 000 UFC/mL o procedentes de cultivos polimicrobianos,
considerando que en embarazadas la muestra generalmente est contaminada. Debe realizarse
tambin examen del sedimento urinario, para determinar la existencia de leucocitos, piocitos (placas
de leucocitos), cilindros leucocitarios o hemticos, y su cantidad; que puede indicar la existencia de
pielonefritis.

La identificacin se alcanza solo a travs de un estudio microbiolgico certero, relacionando los
resultados con los antecedentes del sedimento urinario y del paciente. El urocultivo se considera
positivo si el recuento de colonias es:
- 102 UFC/mL en caso de cistitis simple o recurrente.
- 103 UFC/mL en caso de clnica de pielonefritis.
- 105 UFC/mL para las bacteriurias asintomticas.

La etiologa de la infeccin urinaria puede ser de origen bacteriana, mictica, viral o parasitaria, lo
cual determina el grado de infeccin. La piuria estril o asptica, es causada principalmente por
Chlamydia, Ureaplasma y Mycobacterium, los que requieren condiciones especiales para su
desarrollo.

Las pruebas de sensibilidad no deben incluir antibiticos con ineficacia probada ni con eliminacin
renal bioactiva inferior a 10%; en las ITU de tipo no complicado el tratamiento se realiza
principalmente con ciprofloxacino. En general el tratamiento de eleccin para las infecciones
urinarias son las quinolonas, primordialmente norfloxacino junto a cido pipemdico, sin embargo su
uso est prohibido en embarazadas, de modo que se emplea ampicilina, sulfas o cefalosporinas. Si
existe sospecha de P. aeruginosa y Acinetobacter el antibiograma debe ser ampliado de forma
inmediata, si la patologa es causada por Gram+ no se recomienda usar macrlidos y lincosaminas.

Existen mtodos rpidos para la deteccin de bacterias, que emplean mtodos qumicos como la
reduccin de nitratos para la deteccin de E. coli, K. pneumoniae y P. mirabilis; la produccin de
catalasa para la identificacin de Enterobacterias o S. saprophyticus; la reduccin del tetrazolim para
Enterobacterias; o bien la deteccin de otros elementos como glucosa en pacientes diabticos,
esterasa leucocitaria, que evidencia piuria; o bioluminiscencia. Otros mtodos son de tipo fsico como
Susan Arias Donoso
303
el conteo de partculas, fotometra (turbidimetra a 720nm), bioimpedometra (medicin de cargas

reductoras), microcalorimetra (medicin de la temperatura urinaria en un momento determinado
producto del metabolismo de las bacterias) y radiometra (utilizacin de marcadores). Existen
tambin mtodos microbiolgicos de tipo inmunolgico.

Pielonefritis aguda
Se encuentra asociada principalmente a E. coli, se presenta con calofros, fiebre, lumbalgia,
polaquiuria (aumento del nmero de micciones), nicturia, urgencia miccional, disuria y Giordano
positivo. La manifestacin simple se presenta en pacientes ambulatorios, mientras que las
complicadas ocurren en hospitalizados, post-operados y en pacientes con enfermedades de la va
urinaria. El tratamiento es bajo hospitalizacin y supervisin clnica, consiste en la administracin de
fluoroquinolonas (norfloxacino) por va parenteral u oral, con una duracin de 7 das en casos no
complicados y 21 das en complicados, si la infeccin es provocada por Chlamydia el tratamiento se
realiza con tetraciclinas por 21 das. Los urocultivos deben repetirse 5 7 das despus de iniciar el
tratamiento, para verificar si el resultado in vitro es el mismo in vivo, y 4 6 das despus de terminar
el tratamiento en pacientes con probabilidad de reinfeccin asociada a un proceso fisiolgico o
anatmico.

Absceso perinefrtico
Es producido por diseminacin hematgena de coliformes y Pseudomonas, se presenta con fiebre,
dolor y masa costovertebral, adems de sintomatologa renal, el TAC manifiesta contorno renal
deformado, hidronefrosis y una masa importante. El tratamiento est enfocado en drenar el absceso,
se aplica un triple esquema antibitico y se realiza un control metablico, principalmente mediante la
medicin de urea y creatinina, con el fin de conocer la condicin del rin posterior al absceso.

Pielonefritis enfisematosa
Existe necrosis del parnquima renal e infeccin perirrenal debida a bacterias formadoras de gas,
principalmente enterobacterias. Est asociada con clculos, que producen obstruccin de las vas,
diabetes, necrosis papilar e insuficiencia renal. La mortalidad de este tipo de cuadros es de 43%.

Pielonefritis crnica
Es una enfermedad que no se manifiesta claramente, est asociada a clculos y a infecciones de las
vas urinarias bajas que posteriormente han provocado pielonefritis.

Cistitis
Ocurre con mayor frecuencia en mujeres, su diagnstico se establece en base a la clnica del
paciente que presenta una continua necesidad de orinar, lo cual es realizado con intenso dolor, en
algunos casos cursa con fiebre. Las complicaciones asociadas son cistitis crnica y dolor importante
en la zona vesical. El tratamiento se realiza con fluoroquinolonas, como norfloxacino o ciprofloxacino.
Se han clasificado en:
- Aislada o simple: conocida tambin como cistitis de la luna de miel. Es la forma ms comn,
siendo ms frecuente en mujeres y requiriendo atencin primaria. Se manifiesta como un
sndrome urinario bajo, incluyendo pujo, tenesmo, polaquiuria, urgencia miccional y goteo
terminal asociado a hematuria. En el tratamiento se utiliza Trimetoprim/Sulfa o Trimetoprim
por 3 das; existe una resistencia menor al 10 20%, en estos casos se administran
quinolonas por 3 das o nitrofurantona por 7 das, adems se debe evitar la
sobrehidratacin, ya que provoca expansin de la vejiga y aumento del dolor.
Susan Arias Donoso
304
-
-
Rebelde (no resuelta): Se debe buscar la causa ms que desarrollar un tratamiento.

Recidivante (reinfeccin o persistencia bacteriana): Algunos factores de riesgo son coito,
antimicrobianos, espermaticidas, antimicticos o postmenopausia, las pacientes obesas
tienen una alta probabilidad de padecerla, ya que poseen ms pliegues o zonas hmedas, al
igual que los pacientes con clculos renales. En algunas ocasiones est asociada a levaduras,
especialmente a Candida albicams. El tratamiento quimioprofilctico incluye la
administracin de nitrofurantona 50 mg, trimetoprim/sulfa, cefalexina 250 mg y
fluoroquinolonas 200 250 mg, el tratamiento nocturno se realiza con nitrofurantona,
trimetoprim/sulfa.
Prostatitis aguda
Es una infeccin prosttica producida a raz de una infeccin urinaria, generalmente se presenta con
dolor e inflamacin en la zona, puede generar problemas de miccin y otras complicaciones como
abscesos prostticos y prostatitis crnica. El tratamiento se realiza con quinolonas y cido pipemdico.
Se clasifican en:
- Categora I: prostatitis aguda bacteriana, se manifiestan con mayor claridad, cursan con
bastante irritacin y dolor en la zona.
- Categora II: prostatitis bacteriana crnica.
- Categora III: sndrome de dolor crnico plvico.
- Categora IV: prostatitis inflamatoria asintomtica.

Absceso prosttico
Se manifiesta con bastante dolor. El tratamiento incluye drenaje del material purulento y
administracin de sulfas y quinolonas dependiendo del grado de infeccin presente.

Orquitis
Puede ser de origen infeccioso o traumtico, causada por diseminacin hematgena, produciendo
septicemia en las de tipo grave, generalmente se manifiesta con fiebre, dolor y aumento del volumen
testicular sin sntomas urinarios; suele secundar las paperas tras 3 a 4 das de esta enfermedad. Se
recomienda reposo en cama, elevacin, hielo y suspensorio, para su tratamiento se deben
administrar antimicrobianos, principalmente quinolonas, y analgsicos para reducir el edema. Existe
riesgo de esterilidad de 30% en el lado afectado, por tanto el tratamiento debe ser oportuno.

Susan Arias Donoso
305
Diagnstico de Enfermedades de Transmisin Sexual (ETS)

El estudio de las ETS se realiza generalmente desde una clasificacin sindrmica que permita al
laboratorio utilizar los medios y recursos ms apropiados para el diagnstico de los patgenos
implicados. Segn estos criterios se clasifican en:

Ulceras genitales
No siempre son de origen infeccioso, pueden estar asociadas a algn dao en el tejido, como
destruccin inmunolgica o proliferacin celular. Aquellas de tipo infeccioso se deben diferenciar
entre ulceras dolorosas y no dolorosas, son causadas por:
- Dolorosas:
o Virus Herpes Simplex, principalmente tipo 2.
o Haemophilus ducreyi (chancroide).
o Chlamydia trachomatis serovar. L1, L2, L3 (linfogranuloma venreo, en mujeres EPA).
o Klebsiella granulomatis (donovanosis o granuloma inguinal).
- No dolorosas:
o Treponema pallidum (sfilis, generacin de chancro duro).

Uretritis y cervicitis
La uretriris gonoccica est producida por Neisseria gonorrhoeae. La uretritis no gonoccica puede
estar causada por diferentes agentes como:
- Chlamydia trachomatis.
- Mycoplasma genitalium.
- Trichomonas vaginalis.
- Virus del papiloma humano, slo algunas variedades producen el cncer cervicouterino.
- Ureaplasma urealyticum.
- Treponema pallidum (pesquisa por tcnicas no treponmicas).
- Enterobacterias: E. coli, Proteus spp.
- H. ducreyi
- N. meningitidis
- Clostridium difficile y otras bacterias anaerobias, asociadas a prcticas anales.
- S. agalactiae y otros Streptococcus del grupo B, pueden provocar meningitis en el neonato.
- Especies de Candida

Vulvovaginitis
Esta infeccin puede estar acompaada por uretritis y cervicitis, frecuentemente es causada por:
- Candida spp.
- Trichomonas vaginalis.
- VHS 2 y CMV.
- Neisseria gonorrhoeae
- Chlamydia trachomatis.
- Vaginosis bacteriana: Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum,
Mobiluncus spp, Bacteroides.
- Agentes menos frecuentes como: Capnocytophaga spp, Pasteurella bettyae, Mycobacterium
tuberculosis, Streptococcus agalactiae, S. pyogenes, S. aureus (toxinas causan cuadro severo a
nivel sistmico), H. influenzae.
- Salmonella, Shigella principalmente en nias prepuberales, asociados a contaminacin rectal.
Susan Arias Donoso
306
Cuadro clnico y microorganismos implicados en las ETS

Impresin clnica
Amnionitis
(lquido amnitico)

Agentes etiolgicos habituales
Otros microorganismos implicados
C. trachomatis,
N. gonorrhoeae,
U. urealyticum

Bacteroides spp, G. vaginalis (tambin en

asintomticas), Capnocytophaga spp, E. coli, H.
influenzae, H. parainfluenzae, Pasteurella
bettyae, L. monocytogenes, M. hominis, S.
agalactiae, S. pyogenes
Anaerobios, E. coli, estreptococos, P. mirabilis, P.
bettyae, H. influenzae, S. aureus, U. urealyticum
Capnocytophaga spp, P. bettyae, S. agalactiae,
M. tuberculosis
Actinomyces spp, Bacteroides spp, P. bettyae,
Enterococcus spp, enterobacterias, Prevotella
bivia, H. influenzae, Peptostreptococcus spp,
Mycoplasma hominis, S. aureus, S. epidermidis,
S. agalactiae
Actinomicetos, Bacteroides spp, P. bivia,
enterobacterias, Enterococcus spp, G. vaginalis,
H. influenzae, S. agalactiae, S. pyogenes, L.
monocytogenes, M. hominis (en crvix)
B. fragilis, B. bivius, B. disiens, enterobacterias,
cocos anaerobios, Enterococcus spp, S.
agalactiae
Enterobacterias, M. tuberculosis, Pseudomonas
spp.

Bartolinitis (glndulas C. trachomatis,

N. gonorrhoeae
de Bartholino)
C. trachomatis, N. gonorrhoeae,
Cervicitis
Enfermedad
plvica inflamatoria
(EPI) (salpingitis)

VHS, M. genitalium
N. gonorrhoeae,
C. trachomatis
M. genitalium

Endometritis

C. trachomatis, N. gonorrhoeae, M.
genitalium

Endometritis
postparto
Epididimitis

Esquenitis
(glndula de Skene)
Orquitis

Prostatitis

C. trachomatis, N. gonorrhoeae, U.
urealyticum
N. gonorrhoeae
Ulceras genitales
con linfoadenopata
T. pallidum, C. trachomatis (LGV),

H. ducreyi, Klebsiella granulomatis,
VHS, VPH
N. gonorrhoeae, C. trachomatis, U.
urealyticum, M. genitalium, T.
vaginalis, VHS
C. trachomatis, N. gonorrhoeae, U.
urealyticum

Uretritis masculina

Uretritis femenina
(y sndrome uretral)
Vaginosis
bacteriana

Vulvovaginitis

Susan Arias Donoso

T. vaginalis
Trichomonas vaginalis

Enterobacterias, estafilococos, estreptococos, P.

aeruginosa, virus de las paperas
E. coli, otras enterobacterias, Enterococcus spp,
Pseudomonas spp, S. aureus (tambin
productor de abscesos prostticos)

E. coli, S. agalactiae, P. bettyae, H. influenzae, H.

parainfluenzae, raro: N. meningitidis, Candida
spp, Adenovirus
E. coli, S. saprophyticus

G. vaginalis, M. hominis, Mobiluncus spp, Cocos
anaerobios, Prevotella spp, Atopium vaginae y
otros
Actinomyces spp, Capnocytophaga spp, Candida
spp, Bacteroides spp, Eubacterium nodatum,
Enterobacterias, M. tuberculosis, N. meningitidis,
P. bettyae, P. bivia, P. disiens, Prevotella spp, S.
pyogenes, S. aureus, Peptostreptococcus spp,
VHS, C. diphtheriae (raro)
307
Para la identificacin de los organismos causantes de infeccin se debe emplear una muestra cuya
procedencia depender del sitio afectado:
- Exudado anal: Para el diagnstico de la gonococia rectal, se obtiene a travs de torulado de las
criptas rectales, evitando el contacto con materia fecal, transportado en medio Stuart.
- Exudado balano-prepucial: Fundamentalmente para el aislamiento de Candida spp, y de
bacterias anaerobias y aerobias (principalmente S. agalactiae). Se obtiene por torulado con
medio Amies del surco balano prepucial.
- Exudado de la glndula de Bartholino: en los estadios iniciales de la infeccin se obtiene por
torulado de la glndula de Bartholino, empleando tres trulas, de las cuales una es empleada
para cultivo de N. gonorrhoeae, otra para C. trachomatis; y la tercera para el resto de los
patgenos. Se debe realizar muestreo adicional para tricomonas y micoplasmas. Para estadios
tardos de la infeccin es preferible la aspiracin con jeringa.
- Exudado endocervical: se obtiene por torulado de la zona, previa remocin del moco cervical,
una de las trulas se emplear para el cultivo del gonococo y otras bacterias aerobias y
anaerobias y la otra para la deteccin de C. trachomatis.
- Exudado farngeo: Se obtiene por torulado de las zonas tonsilares, faringe posterior y zonas
ulceradas, inflamadas o con exudados purulentos. Para investigar la presencia del gonococo y
clamidia.
- Exudado parauretral: se obtiene por torulado de las paredes de la uretra.
- Exudado de lceras: la muestra depender de los microorganismos que se pretendan detectar:
o Para cultivo de virus, se emplearn medios de transporte especficos usando una solucin
tamponada con rojo fenol, antibiticos y una fuente proteica, como la albmina. La
muestra se obtiene por torulado de la base de la lesin. Para ulceraciones con sospecha de
infeccin por VHS se debe romper la vescula y recoger el lquido con una trula estril o
bien por aspiracin, despus se procede a raspar la base de la vescula con un bistur y
recoger la secrecin con una trula frotando vigorosamente la base de la vescula. Si la
lesin es costrosa se debe retirar la costra con la punta de un escalpelo o aguja estril,
evitando el sangrado. Se debe realizar una extensin en un portaobjetos para tincin por
inmunofluorescencia directa (IFD).
o Para cultivo de H. ducreyi, se puede usar indistintamente un escalpelo o aguja para aspirar
el lquido de la lcera evitando el sangrado, el que se introduce en un medio de transporte
a base de hemina y tioglicolato con L-glutamina, fraccin V de albmina bovina y
vancomicina (3 mg/L), medio en que la supervivencia oscila entre 24 horas y 7 das a 4 C.
Alternativamente se puede usar un medio de transporte (tipo Stuart-Amies) que confiere
una supervivencia entre 2 y 4 horas, extendido a 24 horas si se refrigera a 4 C.
o Para diagnstico de sfilis, la muestra se obtiene apretando suavemente la base de la
lesin hasta la obtencin de un lquido claro, el cual es tocado con un portaobjetos, que
tras ser cubierto se observa en microscopa de campo oscuro. En caso de no obtener
lquido, se debe aadir una gota de solucin salina a la lesin o aspirar el material de la
base de sta, el que se mezcla con solucin salina. Para la realizacin de IFD, se realizarn
improntas de la base de la lcera en un portaobjetos, que sern enviadas al laboratorio
para su tincin y examen.
o En sospecha de donovanosis, las muestras tomadas por debajo de la superficie de la lcera
tienen mejor rendimiento que las muestras superficiales, sta puede ser obtenida por
biopsia o raspado del borde activo de la lesin, evitando el sangrado.
o En sospecha de linfogranuloma venreo (LGV) se obtiene lquido por aspirado de la lcera,
el cual se extiende en un portaobjeto para tincin de IFD o deteccin de cidos nuclicos.

Susan Arias Donoso
308
- Exudado uretral: se obtiene por torulado de la uretra idealmente utilizando varias trulas de
forma consecutiva, procurando que cada vez penetren ms en la uretra.
- Exudados vaginales: Para diagnstico de vaginosis, Candida spp o T. vaginalis se obtiene por
torulado de la zona en que el exudado es ms abundante o del fondo de saco vaginal posterior.
Frente a sospecha de infeccin por N. gonorrhoeae o C. trachomatis, se debe realizar la toma
de exudado endocervical (excepto en mujeres histerectomizadas en las que se realiza la toma
en el frnix posterior). En nias est indicado el cultivo de Haemophilus spp y estreptococos
beta hemolticos. En el caso de S. agalactiae se debe considerar la existencia de un alto
porcentaje de portacin en casos de prostitucin y la presencia de Haemophilus spp puede
indicar relaciones sexuales orales.
- Secrecin prosttica. Corresponde a una muestra de orina despus de efectuar un masaje
prosttico por va rectal, la cual se recoge en un contenedor limpio, estril, de boca ancha y con
tapa rosca. Para el diagnstico general de prostatitis se recomienda incluir muestras de orina
inicial, premasaje.
- Semen: Este tipo de muestra se obtiene mediante estimulacin local, recogida en un
contenedor limpio, estril, de boca ancha y con tapa rosca. El valor de esta muestra es escaso
para el diagnstico de prostatitis.

De especial importancia es el envo inmediato de las muestras al laboratorio en su medio de
transporte correspondiente ante la sospecha de infeccin por N. gonorrhoeae. Idealmente la muestra
debe procesarse antes de 3 horas desde su recogida, y como mximo antes de 6 12 horas. La
temperatura de transporte y almacenamiento debe ser de 35 37 C o en su defecto a temperatura
ambiente, aunque estudios recientes han demostrado que el gonococo puede resistir la temperatura
de refrigeracin.

Los medios se deben inocular comenzando por el medio ms general hasta el ms selectivo
(primero agar chocolate y posteriormente agar Thayer-Martin, agar Levine, agar CNA, agar
Sabouraud). El cultivo en agar chocolate debe hacerse junto con el medio Thayer-Martin o similar
debido a que algunos gonococos pueden inhibirse por la vancomicina que contiene el medio. La
utilizacin de otros medios como agar Levine y agar CNA es opcional para otros microorganismos
menos frecuentes en este tipo de muestras como Pasteurella bettyae. En el caso de muestras de
exudados vaginales y uretrales se requieren dos trulas por muestra para una mejor recuperacin de
los microorganismos buscados; las muestras se deben incubar hasta 72 horas antes de descartarlas
como negativas. Para el estudio de virus se deben seguir las normas generales de inoculacin y
procesamiento para el aislamiento de los mismos.

La tincin Gram es una tcnica rpida y tan sensible como el cultivo en la uretritis sintomtica en
hombres, pero es poco sensible en otras localizaciones. Se debe buscar la presencia de leucocitos
polimorfonucleares (PMNs), que se observan con el ncleo rosa y citoplasma sin color, usualmente se
encuentran ms de 4-5 leucocitos PMNs por campo de inmersin, en las muestras de orina la
observacin de PMNs se observa en el sedimento, all normalmente se encuentran ms de 10 PMN. El
gonococo aparece como cocos Gram- ovales, arrionados agrupados en parejas intra y extracelulares.

La identificacin presuntiva del gonococo a partir de muestras genitales se realiza mediante cultivo
tanto en medios no selectivos, como el agar chocolate, como en medios selectivos: agar Thayer-
Martin, Martn-Lewis o medio New York city. El cultivo es la tcnica de referencia por su sensibilidad y
especificidad, a la vez que permite obtener microorganismos viables para investigaciones
epidemiolgicas y sensibilidad a antibiticos. Los medios se deben incubar en ambiente hmedo y
Susan Arias Donoso
309
con 5% de CO2 a 37 C. La morfologa caracterstica en la tincin Gram, pruebas de oxidasa positiva, el

patrn de utilizacin de carbohidratos y las caractersticas inmunolgicas o perfiles enzimticos,
hacen posible la identificacin. Las pruebas de deteccin de cidos nuclicos mediante hibridacin
con sondas y de amplificacin de cidos nuclicos poseen una elevada sensibilidad y especificidad. La
calidad de la muestra no es un factor crtico en la sensibilidad de deteccin de N. gonorrhoeae, a
diferencia de C. trachomatis en que la calidad de la muestra, sobre todo de las endocervicales, puede
hacer disminuir la sensibilidad hasta el 10%. En los casos infrecuentes de infeccin diseminada se
deben realizar hemocultivos con subcultivo en agar chocolate.

Los micoplasmas pierden viabilidad especialmente si las muestras se resecan o se someten a calor,
siendo por tanto necesario su procesamiento inmediato, si esto no es posible se debe congelar la
muestra a -70 C. Las pruebas de sensibilidad de micoplasmas a los antibiticos tienen verdadera
utilidad en infecciones sistmicas y en pacientes inmunodeprimidos pero no existe ningn mtodo
estandarizado por el CLSI para su determinacin, el mtodo ms usado es la microdilucin en caldo.

Para el diagnstico de sfilis se realiza microscopa de campo oscuro del material obtenido del
chancro en la que se observan espiroquetas mviles, este procedimiento es slo vlido para lesiones
genitales, ya que no diferencia treponemas patgenos de saprfitos en muestras de boca y ano.
Tambin puede emplearse la tcnica de inmunofluorescencia directa en extensiones secas, lo que
permite la observacin en un tiempo posterior a la recogida de la muestra. Estas dos tcnicas son
muy tiles en periodos muy precoces antes de la aparicin de los anticuerpos, sin embargo sus
resultados se pueden afectar por las condiciones de la recogida de la muestra y del estadio de la
enfermedad, por lo que un resultado negativo no excluye sfilis.

La donovanosis es una ETS que se ha vinculado tambin a traumatismos en los genitales,
contaminacin fecal o auto inoculacin. El diagnstico se realiza mediante el examen microscpico
que es el mtodo de eleccin, las extensiones de tejido se tien mediante coloracin de Giemsa o
Wright. La confirmacin del diagnstico clnico se establece tras la observacin de los tpicos cuerpos
de Donovan, que son inclusiones de localizacin intracitoplasmtica en las grandes clulas
mononucleares e histiocitos, que pueden o no estar capsulados. El cultivo de K. granulomatis es difcil
y laborioso por lo que no se realiza de forma rutinaria, puede realizarse en sistemas de co-cultivo con
monocitos y ms fcilmente usando un medio de cultivo para Chlamydia modificado, pero su
rendimiento no es adecuado. La prueba de inmunofluorescencia indirecta da buenos resultados
cuando la lesin est establecida, pero tiene poca sensibilidad con lesiones tempranas, por lo que se
emplea ms para estudios epidemiolgicos que como prueba confirmatoria.

El herpes genital es causado por el virus herpes simplex tipo 1 (VHS-1) o herpes simplex tipo 2 (VHS-
2). Los sntomas y signos clnicos de la infeccin inicial o recurrente varan dependiendo del tipo de
VHS, del sexo del paciente y de la exposicin previa al VHS. Tras la adquisicin del VHS (infeccin
primaria), el genoma vrico reside en estado latente en los cuerpos neuronales (principalmente sacro-
ileales) de manera indefinida. El primer episodio de herpes genital, puede deberse a una
primoinfeccin (ausencia de anticuerpos frente a VHS) o a una infeccin inicial no primaria (presencia
de anticuerpos frente a cualquier tipo de VHS). La infeccin recurrente por VHS-2 puede ser
sintomtica o, ms comnmente, asintomtica. Las infecciones genitales por VHS-1 recidivan menos
frecuentemente que las infecciones por VHS-2, de modo que la mayora de los casos de infeccin por
VHS-1 sintomticos son infecciones primarias. La excrecin vrica en los periodos asintomticos es la
principal fuente de transmisin de la enfermedad. El DNA del VHS puede detectarse por mtodos
moleculares en muestras genitales de mujeres infectadas por el VHS-2. Las complicaciones de la
Susan Arias Donoso
310
infeccin genital por el VHS generalmente afectan al sistema nervioso central e incluyen meningitis
asptica (la ms frecuente), radiculopata sacral y mielitis transversa. Aproximadamente un tercio de
las mujeres y 10% de los hombres con infeccin primaria pueden presentar signos menngeos. El
estado de las lesiones y la cantidad de muestra recogida afecta significativamente los mtodos de
diagnstico, cuya sensibilidad disminuye con la edad de la lesin. En general, los mejores resultados
se obtienen a partir de lesiones vesiculares, y las lesiones primarias arrojan mejores resultados que
las recurrentes. En ausencia de lesiones externas, en varones se deben recoger muestras uretrales y
en mujeres tomas cervicales. Tambin debe considerarse la extraccin de sangre para estudios
serolgicos. El diagnstico de la infeccin por VHS se puede realizar mediante:
- Microscopa ptica: no es una tcnica adecuada. El examen directo mediante la tincin de
Tzanck o de Papanicolaou es poco sensible e inespecfico. No diferencia entre VHS-1 y 2, y
las inclusiones intranucleares tipo Cowdry A no son exclusivas del VHS. Adems un resultado
negativo no descarta la posibilidad de herpes genital.
- Microscopa electrnica: Est en desuso ya que requiere concentraciones superiores a 108
viriones/mL. Proporciona resultados rpidos, pero es poco sensible y requiere un equipo no
disponible generalmente en laboratorios clnicos.
- Inmunofluorescencia directa: La deteccin de antgenos del VHS se puede realizar mediante
inmunofluorescencia o por tcnicas inmunoenzimticas. Son tcnicas rpidas con una
sensibilidad y especificidad en pacientes sintomticos que oscilan entre 70 y 90%. Sobre
muestra directa la sensibilidad disminuye a medida que evoluciona la lesin en el tiempo. El
empleo de anticuerpos monoclonales aporta una buena especificidad y permite diferenciar
VSH-1 y 2.
- Cultivo celular: Su especificidad es virtualmente del 100%, pero los niveles de excrecin de
virus, la calidad de la muestra y las condiciones de transporte influyen en su sensibilidad. La
identificacin del virus se realiza generalmente por inmunofluorescencia directa con
anticuerpos monoclonales frente al VHS-1 y 2.
- Tcnicas moleculares: La rt-PCR totalmente automatizada permite la deteccin del VHS en
un sistema cerrado con bajos tiempos de respuesta y bajo riesgo de contaminacin.
- Serologa: est basada en el empleo de enzimoensayos que emplean como antgenos una
glicoprotena de superficie del VHS y detectan una respuesta tipoespecfica de anticuerpos.
Las glicoprotenas de envoltura del VHS-1 (gG1, con 150 aminocidos) y del VHS-2 (gG2, con
600 aminocidos) son lo suficientemente diferentes como para utilizarlas como antgeno
tipoespecfico. Tambin se puede utilizar Western blot e inmunoblot que detectan
anticuerpos frente a mltiples protenas individuales del VHS, incluyendo las glicoprotenas
gG1 y gG2; estos generalmente se emplean como confirmatorios de los resultados positivos
de IgG.

La vaginosis bacteriana constituye una alteracin masiva (disbacteriosis) de la microbiota vaginal,
donde el gnero dominante, Lactobacillus, es reemplazado en gran proporcin por G. vaginalis y
bacterias anaerobias como Bacteroides spp, Prevotella spp, Peptostreptococcus spp y Mobiluncus spp,
as como por micoplasmas genitales. La cantidad de estos microorganismos se incrementa entre 100 y
1000 veces en mujeres con vaginosis en comparacin con mujeres sanas. Adems, la vaginosis
bacteriana se caracteriza por poseer grandes concentraciones de enzimas bacterianas, incluyendo
fosfolipasa A2, mucinasas y neuraminidasas, as como endotoxinas e interleukina-1. El 50% de las
mujeres con vaginosis bacteriana son asintomticas; cuando existe expresin clnica, el sntoma ms
comn es el mal olor de la secrecin vaginal (olor a pescado), causado por la volatilizacin de aminas
alcalinas producidas por el metabolismo de las bacterias anaerobias. La exacerbacin del olor ocurre
despus de las relaciones sexuales y durante la menstruacin, como resultado de un incremento del
Susan Arias Donoso
311
pH. El aumento y cambio en el flujo vaginal es otra manifestacin frecuente, ste generalmente es de
poca densidad, color grisceo, homogneo y tiende a adherirse a la pared vaginal. El diagnstico de la
vaginosis bacteriana se establece fundamentalmente por los signos clnicos y las caractersticas del
flujo vaginal, y puede confirmarse por criterios objetivos microscpicos (Nugent) en la tincin Gram
del exudado vaginal. Los criterios clnicos de Amsel estn basados en la presencia de tres de los
siguientes sntomas o signos:
- flujo vaginal fino, homogneo, blanco, adherido a las paredes vaginales y uniforme.
- pH vaginal > 4,5.
- olor a pescado tras aadir a la muestra KOH al 10%.
- ms de un 20% de clulas clave en preparaciones en fresco (microscopio x40).

El diagnstico microbiolgico de la vaginosis bacteriana se realiza mediante tincin Gram del
exudado vaginal, determinando la cantidad relativa de los morfotipos caractersticos de la microbiota
vaginal alterada (bacilos Gram+, Gram- y bacterias curvas) y la presencia de clulas clave (clulas
epiteliales tapizadas de morfotipos Gram+ y Gram- que pierden los contornos), la citologa cervical
teida por el mtodo de Papanicolaou no es adecuada por su baja sensibilidad. El cultivo de G.
vaginalis tampoco es una herramienta diagnstica adecuada por su baja especificidad. Otros mtodos
diagnsticos, como el cultivo de muestras en anaerobiosis y el empleo de mtodos moleculares (16S
rRNA) no tienen aplicacin en la prctica diaria y se emplean con fines de investigacin.

La vulvovaginitis candidisica supone aproximadamente un tercio de todas las vaginitis en mujeres
en edad frtil, aunque tambin puede aparecer en nias y mujeres postmenopusicas. No suele tener
la consideracin de ETS pero se ha demostrado que la mxima frecuencia en los episodios ocurre
cuando las mujeres tienen actividad sexual. No se ha establecido relacin epidemiolgica con el
nmero de parejas sexuales, ni con la frecuencia de las relaciones, pero s parece existir alguna
relacin con el sexo orogenital. En la etiologa participan levaduras del gnero Candida, aunque
tambin se incluyen vulvovaginitis producidas por Saccharomyces cerevisiae, que representan
aproximadamente un 1% de los casos. C. albicams es la causa de un 80 90% de los casos, seguida de
C. glabrata, C. parapsilosis y C. krusei. Para el diagnstico se realiza la observacin microscpica de
levaduras en el exudado vaginal mediante visualizacin en fresco o tras tincin Gram, esta tcnica es
rpida pero de baja sensibilidad (50%). La confirmacin diagnstica se obtiene mediante cultivo en
agar Sabouraud o agares cromognicos y posterior identificacin con prueba de filamentacin o por
mtodos comerciales.

El diagnstico de tricomoniasis se realiza fundamentalmente mediante examen en fresco, cultivo, y
ms recientemente, por mtodos de amplificacin de cidos nuclicos. El examen en fresco es de fcil
realizacin, rapidez y bajo costo, pero presenta una escasa sensibilidad, entre el 62 y 92%
dependiendo del observador, aunque tiene una especificidad del 98%. Para su realizacin se mezcla
en un portaobjetos una gota de secrecin uretral o vaginal con una gota de suero fisiolgico o salino
al 0,5% temperado a 37 C, sobre el cual se pone un cubreobjetos y se observa al microscopio para
observar la movilidad caracterstica de las tricomonas. El cultivo del parsito requiere numerosos
nutrientes en el medio como carbohidratos, aminocidos, purinas, pirimidinas, cidos grasos, hierro y
vitaminas, su sensibilidad se considera que es del 98% y su especificidad del 100%.

Los Virus Papiloma Humano adquiridos sexualmente pueden producir varios tipos de lesiones
dependiendo del tipo de VPH involucrado:
- Infecciones latentes, sin expresin clnica permaneciendo la piel afectada citolgicamente
normal. Generalmente afectan al epitelio cervical.
Susan Arias Donoso
312
Infecciones subclnicas, la piel afectada no presenta lesiones a simple vista pero tras la
aplicacin de cido actico al 3-5% aparece una zona blanquecina en la zona afectada.
- Infecciones clnicas, las verrugas anogenitales que aparecen en hombres y mujeres estn
asociadas a los tipos 6 y 11 y no evolucionan a neoplasias.
- Infecciones activas de larga evolucin, asociadas con VPH de alto riesgo (principalmente los
tipos 16 y 18) que producen cambios en las clulas infectadas conduciendo a neoplasias
genitales.

Existen cuatro tipos de verrugas genitales: condiloma acuminado (lesiones blandas papilomatosas
con su caracterstica morfologa en "coliflor"), verrugas papulares (en forma de cpula, del mismo
color de la piel), verrugas queratcicas (engrosadas y con una capa crnea que le da una consistencia
dura) y verrugas maculares (ppulas con una corona plana que las asemeja a mculas). El diagnstico
de las verrugas genitales en el paciente inmunocompetente, en la mayora de los casos, es slo clnico
ya que las lesiones son suficientemente caractersticas y se basa en el examen visual minucioso del
rea genital (puede ser una enfermedad multifocal y multicntrica), que puede favorecerse con el
empleo de luz incidente y lente de aumento. El uso de colposcopio, uretocospio o anoscopio puede
ser til en algunas situaciones, pero no es necesario en la prctica clnica rutinaria. La pincelacin con
cido actico al 3 5% (las lesiones adquieren una coloracin blanquecina superficial) tampoco se
recomienda rutinariamente ya que tiene un bajo valor predictivo positivo, aunque puede ser til en la
piel parcialmente queratinizada. No se recomienda la biopsia de las verrugas genitales para el estudio
histopatolgico pues no aporta valor aadido a su diagnstico de rutina. El diagnstico microbiolgico
de las infecciones por VPH se realiza mediante tcnicas de biologa molecular ya que son virus no
cultivables y la deteccin de anticuerpos por tcnicas serolgicas no aporta ninguna informacin
sobre el genotipo infectante pues utiliza un antgeno comn. No obstante, el uso de tcnicas de
biologa molecular para la deteccin y tipado de los VPH no ha demostrado beneficio para el
diagnstico y manejo de las verrugas genitales y no se recomienda su uso rutinario. Cuando se utilizan
los mtodos moleculares sobre biopsias, la tcnica recomendada es PCR con cebadores de consenso y
posterior genotipado mediante secuenciacin, RFLP (restriction fragment length polymorphisms) o
hibridacin con sondas especficas usando formatos dot-blot o microtiter. La realizacin de una
biopsia simple (con estudio histopatolgico y molecular) puede ser necesaria como apoyo diagnstico
y debe considerarse en los siguientes supuestos: existen lesiones atpicas, el diagnstico es dudoso,
hay progresin durante el tratamiento, las recurrencias son frecuentes, las verrugas son pigmentadas,
induradas, ulceradas, o mayores de 1 cm, y en pacientes inmunodeprimidos. Todas las mujeres con
verrugas genitales han de ser exploradas para descartar la presencia de lesiones a nivel del crvix
mediante citologa, tcnicas moleculares y colposcopia, en las pacientes con verrugas genitales y
cervicales o con pareja infectada es necesaria la realizacin de revisiones peridicas que incluyan
colposcopia y citologa cervical debido al riesgo de desarrollo de neoplasia cervical.

Diagnstico microbiolgico del prurito en la piel de la regin genital

prurito en la piel de la regin genital
en zona del vello
piel de regin genital y otras localizaciones
pediculosis pubis
escabiosis

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313
Diagnstico microbiolgico de vulvovaginitis y vaginosis en nias

vulvovaginitis en nias
sin sangrado
con sangrado
Condiloma
Cuerpo extrao
Hemangioma
Lquen escleroso
Pubertad precoz
Trauma (incluye
abuso sexual)
Ttumor
Prolapso uretral
Enf. cutnea vulvar
Shigella
S. pyogenes
Examen en fesco - cultivo
patgeno especfico
respiratorio
S. pyogenes
S. pneumoniae
N. meningitidis
S. aureus
M. catarrhalis
H. influenzae
otros
entrico
microbiota normal
ITS (abuso sexual)
N. gonorrhoeae
C. trachomatis
T. vaginalis
G. vaginalis
M. genitalis
VHS
Papilomavirus
Shigella
Yersinia
Alteracin anatmica
(doble vagina con fstula,
ureter ectpico)
Cuerpo extrao (toallitas
de papel)
Vulvovaginitis inespecfica
(mala higiene)
Quejas vaginales
psicosomticas
Enf. sistmica (escarlatina,
enf. Crohn, enf. Kawasaki)
Enf. cutnea vulvar
(psoriasis, seborrea, lquen
escleroso)
Oxiuros
Diagnstico microbiolgico de uretritis y cervicitis

uretritis y cervivitis
causas no
infecciosas
Irritantes qumicos
(espermicidas,
productos de bao)
Cuerpos extraos
Neoplasia
endouretral
S. Stevens Johnson
Granulomatosis de
Wegener
causas
infecciosas
Gonoccica
No gonoccica
frecuente
No gonoccica
poco frecuente
N.
gonorrhoeae
C. trachomatis
U. urealyticum
M. genitalium
VHS 1 y 2
T. vaginalis
Candida spp
No gonoccica rara
Enterobacterias
T. pallidum
Condiloma acuminata
Adenovirus
Haemophilus spp
N. meningitidis
C. difficile
Se debe realizar tincin de Gram y cultivo de Neisseria gonorrhoeae; deteccin de C. trachomatis

mediante amplificacin de cidos nuclicos y cultivo de U. Urealyticum.

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314
Diagnstico microbiolgico de lceras genitales

lcera genital
causas no
infecciosas
Trauma
Por frmacos
(tetraciclinas)
S. Benchet
Psoriais
Derpmatitis
por contacto
Cancer (clulas
escamosas)
Vasculitis
causas infecciosas
ulceras
dolorosas
lceras no
dolorosas
Chancroide
Granuloma
inguinal
Herpes
simplex
Linfogranuloma
venreo
Les o sfilis
(chancro
duro)
H. ducreyi
C.
granulomatis
VHS 1 y 2
C. trachomatis
(L1, L2, L3)
T. pallidum
Se debe hacer un diagnstico de los virus del herpes simplex (VHS) mediante inmunofluorescencia
directa (IFD) y cultivo (que se realizar en un laboratorio de referencia si no se dispone de l) y
Treponema pallidum mediante tcnicas serolgicas (EIA, pruebas no treponmicas y treponmicas).

Diagnstico microbiolgico de vulvovaginitis y vaginosis en mujeres adultas

vulvovaginitis y
vaginosis en mujeres
causas no
infecciosas
Irritacin qumica por

baos de burbujas,
perfumes y detergentes.
Exudado fisiolgico por
cambios hormonales.
Vaginitis atrfica.
Cuerpo extrao.
Trauma.
causas
infecciosas
Candidisica
Tricominisica
(ITS)
Candida spp
T. vaginalis
Vaginosis
bacteriana
Otras
vulvovaginitis
G. vaginalis
M. hominis
U. urealyticum
Mobiluncus spp
B. bivius
B. disiens
S. pyogenes
S. agalactiae
S. aureus
Haemophilus spp
Salmonella-
Shigella
VHS
CMV
Se realizar examen en fresco, cultivo de levaduras, cultivo de tricomonas y se evaluar en la

consulta segn los criterios de diagnstico de vaginosis bacteriana (exudado, pH, olor a pescado,
clulas clave) o segn los criterios de Nugent.
Susan Arias Donoso
315
Diagnstico microbiolgico de enfermedades entricas

Las enfermedades entricas cursan con diarrea, la que se ha definido como un aumento del
nmero, volumen o fluidez de las deposiciones de un individuo en relacin con su hbito intestinal
normal; segn la OMS se considera diarrea cuando existen 3 o ms deposiciones de consistencia
disminuida en 24 horas, con periodo de 4 horas, habiendo al menos una con elementos anormales,
como pus, sangre o mucus. Segn su duracin se clasifican en:
- Diarrea aguda: tiene una duracin menor a 2 semanas, su aparicin es abrupta
dependiendo del alimento consumido y del agente involucrado.
- Diarrea persistente: su duracin oscila entre 2 y 4 semanas.
- Diarrea crnica: se extiende por ms de 4 semanas.

Segn su severidad se han clasificado en:
- Leve: existen 3 o menos deposiciones al da con sintomatologa mnima.
- Moderada: el nmero de deposiciones va de 4 a 5 al da y se encuentra sintomatologa
sistmica, como calambres, fiebre y deshidratacin.
- Severa: cursa con ms de 6 deposiciones al da acompaadas de fiebre alta, sangre y
leucocitos fecales.

Se clasifican tambin de acuerdo a su carcter de exudativa o secretora:
- Diarrea Exudativa: se presenta con sangre y leucocitos en las heces, es causada por
bacterias que tienen un mecanismo invasor, el cual puede ser intraepitelial o transepitelial,
encontrndose:
Intraepitelial: Shigella, ECEI, Aeromonas hydrophila y Plesiomonas shigelloides.
Transepitelial: Salmonella spp, Yersinia enterocolitica, Campylobacter spp.

- Diarrea secretora: las toxinas ocasionan la estimulacin de la enzima adenilciclasa
aumentando la produccin de AMPc intracelular, bloqueando la absorcin electro neutral
de Na y Cl, adems aumenta la secrecin de Cl y por consiguiente existe un mayor flujo de
agua al intestino, con una importante prdida de electrolitos. Entre las bacterias
productoras de enterotoxinas responsables de este cuadro se encuentran:
V. cholerae produce LT
ECET
produce LT y ST
C. difficile produce enterotoxina A y citotoxina B
S. aureus produce citotoxina y enterotoxina

La diarrea es un cuadro multicausal donde el 90% es de tipo infecciosa y el 10% restante tiene su
origen en la administracin de medicamentos, sustancias txicas, isquemia u otras; su aparicin es
favorecida por distintos factores epidemiolgicos y del hospedador, como la edad, condicin de vida,
hbitos, higiene, conocimiento del hospedador y mecanismos de defensa.

La microbiota intestinal normal cumple un importante papel defensivo en el hospedador al cubrir
los receptores celulares, as si disminuye la microbiota la resistencia a infecciones gastrointestinales
se reduce significativamente, lo cual puede suceder a causa de un tratamiento antimicrobiano
prolongado, como es el caso de la colitis pseudomembranosa provocada por Clostridium difficile, del
cual se han descrito casos de portacin humana. En el estmago, duodeno y yeyuno se encuentra
escasa microbiota, y esta se compone principalmente por estreptococos, lactobacilos aerobios,
Susan Arias Donoso
316
difteroides y levaduras, con una concentracin de 104 MO/mL de secrecin. Por el contrario en el
intestino grueso existe abundante microbiota, compuesta principalmente por bacteroides, cocceas
Gram+, lactobacilos y Clostridium en una relacin de aerobias/anaerobias equivalente a 1000
10000:1. As en las deposiciones se encuentran cerca de 10 12 bacterias/g, donde el 90% son
anaerobios.

Otros mecanismos de defensa inespecficos estn dados por la acidez del estmago, que condiciona
la dosis requerida del microorganismo para provocar la enfermedad; la peristalsis, que evita la
adherencia a la mucosa intestinal; el mucus, que reviste el epitelio y atrapa los microbios; la IgA
secretora presente en las glndulas submucosas del intestino que impide la adsorcin de las bacterias
a los enterocitos y que junto con los eosinfilos participa en la destruccin de los agentes patgenos.

Existen factores del microorganismo que tambin favorecen la aparicin de diarrea, relacionados
con sus mecanismos de patogenicidad, dentro de estos se encuentran: la capacidad de adherencia e
invasividad; la produccin de toxinas y citotoxinas que alteran la funcin secretora, absorcin y
funcin celular; la capacidad de generar destruccin del epitelio o interferir con los mecanismos de
secrecin y absorcin.

Susan Arias Donoso
Principales E. coli productores de diarrea

Principal factor de virulencia
Tipo
Mecanismo
Activacin de la adenilato
guanilatocidasa
Inhibicin de la sntesis
proteica
Invasin celular
317
Clnica
Diarrea acuosa
Enterotoxignica
Enterotoxinas termolbiles y
(ECET)
termoestables
Enterohemorrgica Toxinas similares a Shiga I y II
Diarrea
(ECEH)
sanguinolenta
Enteroinvasiva
Enterotoxina enteroinvasora
Disentera aguda
(ECEI)
Enteropatognica Pili
Adherencia localizada
Diarrea aguda y
(ECEP)
persistente
Enteroagregativa
Fimbrias y enterotoxinas
Adherencia agregativa
Diarrea
(ECAg)
persistente

En general la diarrea es un cuadro autolimitado, con una alta morbilidad, convirtindose en la 2
causa de ausentismo laboral y escolar, y por tanto con un impacto socioeconmico elevado; al estar
asociada a condiciones higinico-sanitarias deficiente adquiere un carcter endmico en pases poco
desarrollados como India y el continente africano, cobrando entre 5 y 8 millones de vidas al ao.

Dentro de los agentes que ms frecuentemente causan diarrea aguda infantil estn:
- Rotavirus.
- Escherichia coli enteropatgena (ECEP).
- Campylobacter jejuni.
- Shigella spp.
- Salmonella spp.
- Cryptosporidium spp.
- Escherichia coli enterotoxignica (ECET).

Menos frecuentemente se han aislado:
- Escherichia coli enteroinvasora (ECEI)
- Giardia lamblia
- Entamoeba histolytica
- Yersinia enterocolitica
- Adenovirus entricos
- Virus Norwalk

Causas de diarrea aguda
Vrica
Parasitaria
Bacteriana
No infecciosa
Virus Norwalk Entamoeba histolytica
Staphylococcus aureus Hongos
Rotavirus
Guardia lamblia
Clostridium spp
Toxinas
Adenovirus
Strongyloides stercolaris Escherichia coli
Metales pesados
Herpes
Cryptosporidium
Vibrio cholerae
Glutamato monosdico
Epstein-barr
Isospora belli
Salmonella spp
Laxantes
VIH
Blastocystis hominis
Shigella spp
Antibiticos
Astrovirus
Campylobacter spp
Hepatitis vrica
Yersinia spp

Susan Arias Donoso
318
Estos microorganismos pueden localizarse tanto en el intestino delgado como en el intestino

grueso:
- Intestino delgado:

ECEP, ECET, V. parahaemolyticus, rotavirus.
- Intestino delgado e intestino grueso:
Salmonella, Yersinia.
- Intestino grueso:

Campylobacter, Shigella, ECEI, C. difficile.

Dentro de las infecciones intestinales no inflamatorias se encuentran:
- Diarrea epidmica del neonato, causada por ECEP, Salmonella, Shigella, rotavirus y
adenovirus entre otros.
- Diarrea del nio pequeo, causada por rotavirus, ECET y enterobacterias.
- Diarrea no inflamatoria del adulto, causada por rotavirus y virus Norwalk, mediada por
toxiinfeccin alimentaria.
- Diarrea del viajero, ECET, Salmonella, Yersinia, C. jejuni, Shigella, Vibrio spp, otros virus o
parsitos.
- Diarrea nosocomial, causada por C. difficile, Salmonella spp y Cryptosporidium.

En pacientes inmunodeprimidos:
- Paciente infectado con VIH: la incidencia de la diarrea es de 30-90%, con presentacin
crnica, superior a 1 mes. Es provocada por:
o Parsitos: Cryptosporidium spp, Microsporidium spp, Isospora belli, Entamoeba spp,
Giardia spp.
o Bacterias (15-25%): Salmonella spp, Campylobacter spp, Helicobacter, Arcobacter,
Aeromonas spp, Shigella spp, C. difficile, Mycobacterium avium (5-23%).
- Paciente con neoplasias o trasplantados: Adems de los enteropatgenos clsicos se puede
encontrar el CMV (colitis) y algunos hongos como Candida spp. Se deben considerar adems
los patgenos asociados al consumo de antibiticos como C. difficile y citostticos como C.
perfringens, adems de oportunistas como Pseudomonas spp.

El diagnstico de infeccin gastrointestinal se basa en la existencia de antecedentes
epidemiolgicos como viajes recientes, brotes espordicos, alimentos sospechosos; el periodo de
incubacin y la presencia de factores predisponentes; adems del tipo de diarrea que cursa y la
sintomatologa que la acompaa, seguido de la realizacin de estudios microbiolgicos; para lo cual
se emplea una muestra de deposicin recin emitida, que requiere ser tomada al inicio de la infeccin
y previo al comienzo de la realizacin de alguna terapia antimicrobiana; el transporte de dicha
muestra se realiza en medio Cary-Blair en refrigeracin, no debiendo transcurrir ms de dos horas
desde la toma de muestra hasta su procesamiento, considerando que la refrigeracin prolongada
puede afectar la viabilidad de Shigella. En caso de anlisis viral la muestra debe ser congelada a -20
C, la recoleccin debe hacerse en forma estril, seleccionando 1 a 2 g de las zonas con mucus o pus
en caso de existir por cada 10 mL de medio de transporte. Para diagnstico de bacterias invasoras
idealmente se obtiene por torulado rectal.

La presencia de leucocitos fecales se aprecia mediante tincin con azul de metileno, lo que define si
la diarrea es de tipo secretora o exudativa. Una infeccin causada por Shigella presenta un recuento
de leucocitos >50 c/campo 40x, mientras que una causada por Salmonella o ECEI es de
aproximadamente 20 c/campo 40x.

La siembra debe ser inmediata en agar Mac Conkey y XLD o SS, con incubacin a 36 C por 24 horas,
y en el caso de Yersinia por 48 horas. Se realiza, adems, siembra en medios de enriquecimiento,
Susan Arias Donoso
319
como caldo tetrationato y caldo selenito que elevan el nmero de Salmonella, estos se incuban a 36
C durante 12 a 16 horas con posterior resiembra en agar SS o XLD, debe tenerse en consideracin
que la sobre incubacin del caldo Selenito tiene efectos inhibitorios sobre el desarrollo de Salmonella.
La siembra puede hacerse directamente con la trula o mediante suspensin de la materia fecal en
solucin salina.

La identificacin bioqumica se obtiene con la utilizacin de las pruebas TSI/Kligler, LIA, MIO, urea y
citrato. La serologa realizada para Salmonella, ECEP, ECEI, ECEH y Shigella posee gran importancia
clnica y epidemiolgica, ya que permite una identificacin confiable e inmediata y el establecimiento
de la prevalencia de un agente etiolgico en un determinado lugar y tiempo; sta es realizada cuando
las pruebas bioqumicas sugieren un patgeno en sospecha a partir de un cultivo puro en agar
nutritivo sin inhibidores, siendo necesario conocer todos los serogrupos o serotipos que cubre el
suero inmune en uso.

El esquema antignico de Salmonella se ha dividido en 60 grupos que agrupa ms de 1800
serovares, de los cuales el 90% de las infecciones humanas son producidas por los grupos A E,
siendo el B el ms frecuente. Para su identificacin se utiliza el esquema de Kauffmann y White, que
emplea en primera instancia un suero polivalente seguido del antgeno somtico O y posteriormente
el antgeno flagelar.

Antgeno H
Serovar
Antgeno O
Fase 1
Fase 2

Grupo A

Salmonella Paratyphi A
1, 2, 12
a
-

Grupo B

Salmonella Paratyphi B
1, 4, 5, 12
b
1, 2
Salmonella Typhimurium 1, 4, 5, 12
i
1, 2

Grupo C1

Salmonella Paratyphi C
6, 7, Vi
c
1, 5
Salmonella Cholerae-suis 6, 7
c
1, 5

Grupo D

Salmonella Typhi
9, 12, Vi
d
-
Salmonella Enteritidis
1, 9, 12
g, m
-

La serotipificacin de Shigella busca establecer la especie, para lo cual existen 4 serogrupos A, B, C y
D:
A. Shigella dysenteriae comprende 12 serotipos distintos (1 12)
B. Shigella flexneri
comprende 6 serotipos (1 6, y variante x o y )
C. Shigella boydii
comprende 18 serotipos (1 18)
D. Shigella sonnei
2 formas I (lisa, virulenta) y II (rugosa, avirulenta).

ECEP: es el principal causante de diarreas en nios menores de 2 aos, la identificacin bioqumica
se realiza a 5 colonias empleando sueros O:K polivalentes. El diagnstico confirmatorio se logra
utilizando antisueros O:K monovalente.

Susan Arias Donoso
320
ECEI: la mayora son inmviles y lisina descarboxilasa-, encontrndose algunas cepas lactosa - y
anaerognicas, la identificacin bioqumica se realiza en 5 colonias; acompaada de serologa por
aglutinacin en lmina y test de invasin en cultivo celular (hep-2 o hela).

ECEH: ha sido involucrada en cuadros de SHU, para su identificacin se siembra la muestra en agar
Mac Conkey sorbitol 1% en el cual aparecen colonias amarillas (sorbitol -), se realiza serologa con
antisuero O:157 y se confirma la aglutinacin con el antisuero H flagelar correspondiente. Se puede
realizar identificacin a travs de sus toxinas, VT1 (SLT1 o STx1) o VT2 (SLT2 o STx2), que se pueden
confirmar en cultivos celulares o mediante bsqueda de genes codificantes de ellas a travs de PCR.
Otras tcnicas son las Pruebas genticas con hibridacin de colonias y DNA para poner de manifiesto
los genes SX.

ECET: la identificacin se basa en la deteccin de las toxinas ST y LT, sin embargo ha sido restringida
a laboratorios de investigacin. La toxina ST se detecta en ratn lactante por ELISA, Hibridacin de
colonias o PCR.

Plesiomonas shigelloides: presenta una alta frecuencia en alimentos marinos, implicndose en su
contagio el consumo de pescados crudos y bivalvos. Para su identificacin se realiza aislamiento en
agar Mac Conkey durante 24 horas de incubacin a 36 C, considerando que es la nica
enterobacteria Oxidasa +.

Yersinia enterocolitica: su aislamiento se realiza en agar Mac
Conkey, SS, produciendo colonias pequeas lactosa-, rojas en agar
y> /E -
ingason-novobiocina), requieren incubacin a 25 30 C por 24 hrs,
con posterior incubacin a temperatura ambiente por 24 horas.

Susan Arias Donoso
321
Clostridium difficile: se ha asociado a diarreas iatrognicas por el uso prolongado de antibiticos,

colitis ulcerosa y megacolon txico. Tiene una mayor frecuencia en pacientes hospitalizados de edad
avanzada o inmunocomprometidos que han recibido terapia ATB. Es el principal responsable de colitis
pseudomembranosa. El aislamiento se realiza a partir de deposiciones en agar CCFA (cicloserina-
cefoxitina-fructosa-yema de huevo) y demostracin de la capacidad de produccin de enterotoxina
(citotoxina A) y citotoxina (toxina B) mediante aglutinacin con partculas de ltex sensibilizadas con
anticuerpos frente a la toxina A o B, o ELISA con anticuerpos frente a estas toxinas.

Vibrio: V. cholerae serogrupo O1 y O139 son
toxignicos y V. parahaemolyticus provoca diarrea
acuosa muy abundante. La identificacin requiere
aislamiento en agar TCBS donde V. cholerae forma una
colonia amarilla (sacarosa+) y V. parahaemolyticus una
colonia verde (sacarosa-), el aislamiento de V. cholerae
necesita preenrequicimiento en agua peptonada
alcalina (pH 8,5) con 3% sal o TCBS 3% sal, durante 6 a
8 horas a 37C.

Campylobacter jejuni y Campylobacter coli: el aislamiento

se logra en medio Skirrow, con incubacin a 42 C para
aumentar selectividad, y en medio de microaerofilia por 48
horas. La tincin Gram muestra bacilos Gram- con forma S
itlica del bacilo, esta tincin es modificada empleando
fucsina fenicada en vez de safranina para mejorar la
observacin de los delgados bacilos.

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322

Aeromonas: el aislamiento se realiza en agar Mac
Conkey, ASA (sangre + ampicilina 10ug/mL) y agar CIN,
incubados a 36 C por 24 horas.

Rotavirus (Reoviridae): es un virus RNA con genoma fragmentado descubierto en 1973 y
reconocido como el principal agente causal de gastroenteritis severa en nios. Prcticamente todos
los nios presentan al menos una infeccin por rotavirus antes de cumplir los 5 aos, y sobre 90%
antes de los 3 aos, independientemente del nivel socioeconmico, causando 440 000 muertes en
nios menores de 5 aos en el mundo, donde el 82% ocurre en frica y Asia.

Su perodo de incubacin es de aproximadamente 2 das, luego de los cuales provoca vmitos y
diarrea acuosa por 3 a 8 das, muchas veces con fiebre y dolor abdominal. Su transmisin es fecal-
oral.

Actualmente se conocen diversos serotipos, predominando el serotipo G1 en la mayora de las
regiones del mundo.

Este virus se replica en la mucosa del intestino delgado proximal, donde produce una rpida
destruccin de las vellosidades, que reducen la capacidad de absorcin, provocando una alteracin
en el transporte de iones, aumento de los hidratos de carbono intraluminales y salida osmtica de
agua y electrolitos hacia la luz intestinal. Por su accin se pierden las disacaridasas del borde en
cepillo, en que la lactasa es la primera en desaparecer y la ltima que se recupera.
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323
Las complicaciones extraintestinales comprenden convulsiones, encefalitis, encefalopata y

meningitis.

En Chile este virus produce 53 000 consultas mdicas de urgencia y 8 000 hospitalizaciones en nios
menores de 3 aos, siendo una enfermedad que requiere vigilancia centinela desde 2002, en nios
Z
de Notificacin de Enfermedades Transmisibles de Declaracin Obligatoria (DS No. 158). La
administracin de vacuna oral atenuada supera el 85% de eficacia contra las formas ms severas de
infeccin y contra gastroenteritis de cualquier gravedad es de hasta 70%, sin embargo el Ministerio
de Salud no la ha incluido en el calendario nacional de inmunizaciones.

Su deteccin se realiza en muestras de deposiciones almacenadas entre 2 y 8 C, por un mximo de
3 das o congeladas a -20 C. La identificacin es mediante ELISA, utilizando anticuerpos contra la
protena VP6 del rotavirus. La serotipificacin (G1 G9) se hace mediante ELISA, PCR o aglutinacin
directa de partculas de ltex recubiertas con anticuerpos policlonales especficos para Rotavirus.

Norovirus (Norwalk): es un virus RNA causante de gastroenteritis benigna altamente contagiosa en
individuos de todas las edades, cuya transmisin es fecal-oral. Provoca cuadros caractersticos de
diarrea y vmitos y en casos ms severos se presenta con fiebre. Se asocia al consumo de agua y
alimentos contaminados, en instituciones como residencias de ancianos, colegios, hospitales, hoteles,
etc. Se encuentra presente en los cultivos de ostras en Chile y afecta a todos los moluscos bivalvos
(mitlidos); adems el ser humano puede ser portador del virus a nivel intestinal.

Su periodo de incubacin es de 24 a 48 horas y la duracin de los sntomas oscila entre 12 y 60
horas, encontrndose vmitos en ms del 50% de los casos, y coprocultivos negativos. El diagnstico
se realiza en muestras de deposiciones o alimentos mediante rt-PCR o Enzimoinmunoanlisis (EIA),
aunque esta ltima tiene bajo rendimiento, de aproximadamente 50%.

Adenovirus: es un virus DNA dividido en 6 gneros designados y clasificados de la A a la F, basados
en su habilidad para la aglutinacin. Los adenovirus entricos pertenecen al subgrupo F, serotipos 40
y 41; estos se han asociado con casos de diarrea en nios, generalmente menores de 3 aos,
pacientes inmunocomprometidos y trasplantados de mdula sea. La diarrea y los vmitos son los
sntomas predominantes con una duracin promedio de 9 a 12 das. La diarrea persistente se puede
encontrar en el 33% de los nios infectados por el serotipo 40.

El diagnstico de Laboratorio se logra por deteccin del antgeno de adenovirus (gnero/adenovirus
40 y 41) por inmunocromatografa, aglutinacin de partculas de ltex y EIA. O bien mediante PCR,
anlisis de polimorfismo de fragmentos de restriccin (RFLPs), hibridacin en dot-blot y secuenciacin
de los productos amplificados.

Astrovirus: es un virus RNA reportado como causante del 2 al 8% de las diarreas de etiologa viral en
el mundo, afectando preferentemente a nios menores de 5 aos, aunque se han reportado casos en
ancianos e inmunodeprimidos. Los Astrovirus humanos (HAstV) han sido clasificados en 8 tipos
antignicos denominados HAstV 1 a HAstV 8 de los cuales el tipo predominante es el HAstV 1. Los
tipos ms habituales en Chile son el 1, 2, 4 y 3, en orden de frecuencia.
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324
El diagnstico de laboratorio se logra mediante EIA comercial basado en anticuerpos monoclonales

y policlonales frente a antgenos conservados de la cpside vrica, con una sensibilidad de 91% y
especificidad de 98%, similares a las de la inmunomicroscopa electrnica. Se puede realizar tambin
rt-PCR y rt-PCR + cultivo celular.

En general no se realiza tratamiento de estas enfermedades, ya que son cuadros autolimitados, y
por tanto la terapia es bsicamente de soporte, no se recomienda usar antiespasmdicos,
antisecretores, adsorbentes ni otros antidiarreicos para evitar portacin. Las drogas antimicrobianas
se usan en caso de disentera, especialmente por Shigella, en cuadros de curso severo por ciertas
cepas de ECEP, se emplea:
- Salmonella
quinolonas
- Shigella

cefalosporina 3 generacin, cloranfenicol, cotrimoxazol.
- V. cholerae
tetraciclina
- Campylobacter
eritromicina, metronidazol (no modifican el curso clnico)
- ECET

furazolidona, sulfato de colistn (gentamicina)
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325
Diagnstico microbiolgico de enfermedades de las vas respiratorias

La forma aguda de la infeccin respiratoria agrupa aquellas enfermedades que afectan al aparato
respiratorio con evolucin menor a 15 das y con la presencia de 1 o ms sntomas o signos clnicos,
los que pueden ser: tos, rinorrea, obstruccin nasal, odinofagia, otalgia, disfona, respiracin ruidosa,
dificultad respiratoria, presencia o ausencia de fiebre.

Para el diagnstico de estas infecciones se deben cuantificar los patgenos en algunos sitios
anatmicos y reconocer la microbiota de la orofaringe, nariz, y de las zonas retrofarngea y
amigdaliana, poniendo especial consideracin en la existencia de portadores a nivel de la orofaringe:
o S. aureus, S. pneumoniae
25%.
o H. influenzae, N. meningitidis 20%.
o S. pyogenes

5-10%.

Adems se debe tener en cuenta la existencia de zonas estriles como la laringe, trquea,
bronquios, bronquolos, alvolos pulmonares, senos nasales y odo medio.

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326
Infecciones de las vas respiratorias altas

Las infecciones respiratorias de las vas altas son causadas en un 90% por agentes virales, las cuales
son secundadas por infecciones bacterianas.

Faringitis (amigdalofaringitis purulenta)

Corresponde a la inflamacin de la faringe y del tejido linfoide subyacente (amgdalas palatinas y
ganglios linfticos), es causada ms frecuentemente por virus (65 80%), habitualmente: Rinovirus,
Coronavirus, Adenovirus, Enterovirus, HSV, CMV, EBV, Virus Influenza, Virus Parainfluenza. Los
agentes bacterianos son menos usuales (15 20%), estos pueden ser: S. pyogenes, Mycoplasma
pneumoniae, H. influenzae, S. pneumoniae, S. aureus, N. meningitidis y Arcanobacterium
haemolyticum. En nios menores a 3 aos el principal agente es S. pyogenes, mientras que en nios
de entre 3 y 6 aos son S. pyogenes y Streptococcus beta hemolticos (grupos B, C, F y G).

El diagnstico se realiza a partir de exudados farngeos o amigdalianos obtenidos por torulado de la
zona cuidando no tocar la lengua, paladar o labios. La tincin Gram revela los morfotipos involucrados
y el cultivo se realiza en ASC 5%, con incisin en agar para favorecer la observacin de hemlisis
profunda, ste es incubado 24 horas a 36 1 C en aerobiosis, es necesario incorporar una estra de S.
aureus para permitir el crecimiento de Haemophilus y observar el satelitismo. Se debe realizar
monitoreo de susceptibilidad a penicilina en cocceas Gram+ beta hemolticas usando un disco de
oxacilina, y a cefotaxima, ceftriaxona y meropenem, si esto indica resistencia o susceptibilidad
intermedia se requiere medir la CIM usando E-test.

El informe final debe incluir los microorganismos patgenos indicando la abundancia de su
desarrollo, usando los trminos: abundante, regular, escaso.

Corynebacterium diphtheriae
Su diagnstico es de urgencia clnica y epidemiolgica, requiriendo notificacin obligatoria. El
diagnstico presuntivo se establece de acuerdo a lo observado en la tincin Gram, Neisser o azul de
metileno directo, el diagnstico definitivo se logra mediante IF o bsqueda del gen tox por PCR. Se
requiere hacer diagnstico diferencial con tincin Gram para Candida y asociacin fusoespiroquetal
(Angina de Vincent) ya que tambin producen pseudomembrana, aunque de distintas caractersticas.
La siembra se realiza en AS y AS + telurito, los que se incuban por 24 horas a 36 1 C en aerobiosis.

Su presencia es ocasional en pacientes que tienen contacto sexual orogenital, a pesar de su baja
incidencia, debe incluirse en el diagnostico diferencial de faringitis en adultos sexualmente activos
pertenecientes a grupos de alto riesgo y en pacientes con gonorrea urogenital. La sospecha se basa
en la observacin de diplococos Gram-, los que se deben sembrar en agar chocolate e incubar en
microaerofilia estricta.

Treponema pallidum
Se adquiere tras relaciones sexuales orogenitales, desencadenando la aparicin de un chancro
farngeo asociado a linfoadenopatas. Ante la sospecha de sfilis se deben realizar las pruebas
serolgicas correspondientes.
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327
Angina de Vincent
Se desarrolla con exudado membranoso, aliento ftido y ulceras orales. Es una enfermedad causada
por Borrelia spp y Fusobacterium spp, infrecuente en nios, pero que s se presenta en adultos con
mala higiene bucal, estrs o enfermedad sistmica grave.

Candida spp
La infeccin por especies de Candida se observa especialmente en pacientes portadores de prtesis
o con inmunodeficiencia, es frecuente en lactantes, ancianos y personas con factores predisponentes.
El diagnostico microbiolgico se logra mediante tincin Gram y cultivo en agar Sabouraud a 25 C por
48 72 horas.

Rinofaringitis aguda

Su etiologa es principalmente viral, pero se han descrito tambin Mycoplasma pneumoniae y
Chlamydia pneumoniae causando esta enfermedad. Los virus ms frecuentes son: influenza, VRS,
ADV, Parainfluenza y en menor proporcin Rinovirus, Coronavirus, CMV, EBV, Echo y HSV.

El diagnstico se logra por IFI en una muestra de secrecin nasofarngea.

Sinusitis

Corresponde a la infeccin de los senos paranasales por comunicacin con la zona nasal, su etiologa
de mayor frecuencia es S. pneumoniae, H. influenzae no capsulado, S. aureus y Moraxella catarrhalis.
En menor frecuencia puede ser producida anaerobios (Peptostreptococcus spp, Bacteroides spp),
Pseudomonas spp o Rhizopus arrhizus (zigomicosis).

Para su diagnstico la muestra ideal se obtiene por puncin asptica del seno nasal, ya que la
secrecin nasal puede arrojar contaminacin. La realizacin de tincin Gram permite la observacin
de los morfotipos implicados, que suelen ser monomicrobianos. El cultivo se realiza en ASC y agar
chocolate incubado a 36 1 C por 24 horas en microaerofilia para favorecer el desarrollo de S.
pneumoniae y H. influenzae.

El tratamiento de primera eleccin se realiza con amoxicilina, sin embargo este frmaco no tiene
muy buena difusin sea, se emplea tambin amoxicilina asociada a cido clavulnico, cefalosporinas
de 2 y 3 generacin y quinolonas; con una duracin de 10 14 das.

Resfro comn o influenza

Su etiologa es principalmente viral, frecuentemente causada por Rinovirus, Adenovirus, Virus
Respiratorio Sincitial, Influenza, Parainfluenza y Coronavirus; otros virus asociados son: Virus
Coxsackie, Echovirus, VHS, EBV, CMV, Virus de la rubola, Virus del sarampin y VIH.

El diagnstico se logra utilizando IFD con anticuerpos monoclonales dirigidos contra los virus
influenza A y B, adenovirus, VRS, virus parainfluenza 1, 2 y 3, tras amplificacin en cultivo celular; el
Susan Arias Donoso
328
kit comercial para su deteccin se denomina SimulFluror Respiratory Screen. La muestra se obtiene
por aspirado de secrecin respiratoria o torulado nasofarngeo o de la garganta; los lavados nasales,
aspirados nasofarngeos o traqueales son ideales para el examen directo de la muestra ya que
proporcionan abundantes clulas epiteliales.

Epiglotitis

Su agente etiolgico principal es H. influenzae tipo b (cepas capsuladas) en nios de 2 a 6 aos.

Laringitis

Su etiologa es principalmente viral en nios menores a 5 aos, H. influenzae es el ms importante
dentro de las causas bacterianas.

Otitis

La otitis constituye el 80% de las consultas peditricas, corresponde a la inflamacin del conducto
auditivo externo (CAE) causando dolor y prurito. Pseudomonas aeruginosa es el agente etiolgico ms
frecuente y produce adems destruccin de tejido, se encuentra asociada a personas asiduas a
piscinas y con malformaciones del odo. En menor frecuencia es causada por S. aureus y M. morganii;
o bien por Aspergillus, lo que es conocido como otitis fngica.

Otitis media:
Es la inflamacin de la caja timpnica, de las cavidades anexas y de la trompa de Eustaquio,
causando otalgia y otorrea como signos y sntomas tpicos. Se presenta ms frecuentemente en nios
menores de 3 aos. Es causada por S. pneumoniae (40 45%), H. influenzae (25%), M. catarrhalis
(10%), S. pyogenes (5%), S. aureus (2%), Adenovirus, VRS y enterovirus; ocasionalmente la provocan
las especies C. trachomatis, Chlamydophila y Mycoplasma pneumoniae en nios menores de 6 meses
de edad.

Para su diagnstico se obtiene una muestra por timpanocentesis o torulado, en caso que exista
drenaje de secrecin, a la cual siempre se le realiza tincin Gram previa a la siembra en ASC con estra
de S. aureus o agar chocolate, si existe sospecha de H. influenzae, Agar Mac Conkey, para diagnstico
de enterobacterias, especialmente en la formas crnicas; caldo tioglicolato y Agar Sabouraud, si se
sospecha de otitis fngica. El informe debe incluir todos los organismos identificados si la muestra fue
tomada por timpanocentesis. Si fue obtenida por torulado y hay desarrollo de microbiota mixta se
debe indicar. El tratamiento de primera eleccin es amoxicilina, amoxicilina / cido clavulnico o
cefalosporina de 2 y 3 generacin, tambin son tiles las quinolonas.

Infecciones de las vas respiratorias bajas (IRAB)

Las infecciones de las vas respiratorias se caracterizan por desarrollarse causando fiebre, tos
productiva o secreciones alteradas y dolor pulmonar asociado con la respiracin, provocando
Susan Arias Donoso
329
compromiso de los alveolos terminales en los cursos severos. Su presentacin puede ser aguda o
crnica y su etiologa ms frecuente es bacteriana (50%) y viral (50%). Las IRAB graves se desarrollan
ms frecuentemente en nios menores de 3 meses, con nacimiento prematuro, desnutricin,
enfermedad pulmonar crnica, cardiopata congnita o inmunodeficiencia; sta es causada
principalmente por S. pneumoniae (90%), pero puede ser causada tambin por, K. pneumoniae (5%),
H. influenzae (1%), S. aureus y en menor frecuencia por Mycoplasma pneumoniae, Legionella
pneumophila, Mycobacterium tuberculosis y Aspergillus spp. Los agentes virales implicados son: Virus
Influenza, Virus Parainfluenza, VRS (lactantes y nios), Adenovirus y Hanta Virus.

Existen factores que pueden predisponer a estas enfermedades, los que dependen del hospedador
y del medio; los primeros corresponden a la prematurez, bajo peso al nacer, desnutricin, falta de
lactancia materna y vacunacin incompleta; mientras que los asociados al ambiente son la
contaminacin ambiental, hacinamiento, poca invernal, madre adolescente y la pertenencia a un
nivel socioeconmico bajo.

Los organismos que ingresan al pulmn lo hacen principalmente por inhalacin de aire contaminado
con la microbiota de la orofaringe y senos paranasales, aerosoles de la tos o secreciones de otras
personas, o bien polvo con MO; y en forma menos frecuente por va hematgena. Estos organismos
deben poseer un tamao menor a 6 micrones para alcanzar el alveolo terminal, pero aquellas con
tamao inferior a 2 micrones constituyen mayor riesgo ya que quedan suspendidas en el aire
inhalado, las partculas con tamao mayor a 6 micrones quedan atrapadas en el TRS. La micosis
pulmonar es causada por hongos dismrficos que en su forma levaduriforme miden entre 3 y 4
micrones.

El diagnstico se realiza a partir de muestras de desgarro, siempre y cuando el paciente sea capaz
de expulsarlo, en caso contrario, en pacientes de edades extremas, con patologas crnicas,
inmunocomprometidos o en estado de inconsciencia, se puede obtener por hisopado larngeo, lavado
bronquial o broncoalveolar (LBA), escobillado bronquial, aspirado bronquial o puncin transtraqueal;
estos ltimos mtodos son complejos, caros y no se encuentran exentos de contaminacin por
microbiota oral; en casos excepcionales se puede hacer la determinacin en contenido gstrico, pero
su rendimiento es muy bajo.

El desgarro corresponde a un producto exudativo especfico del TR inflamado poco lquido con
mucopus, microorganismos, PMN y a veces sangre, su acumulacin afecta la accin ciliar
desencadenando el reflejo de la tos y la eliminacin de la secrecin a la orofaringe, esta muestra debe
eliminarse sin saliva, para evitar contaminacin con la microbiota bucal, por tanto debe obtenerse a
partir de tos profunda (desgarro traqueobronquial). La calidad de las muestras de desgarro se evala
de acuerdo a la presencia de clulas epiteliales y leucocitos en la observacin de la tincin Gram,
segn la graduacin de Murray y Washington establecida en 1975.

Grupo
No. leucocitos
No. clulas epiteliales escamosas
1
< 10
>25
2
10 25
>25
3
>25
>25
4
>25
10 25
5
>25
<10
6
<25
<25
Se valoran como aceptables las muestras correspondientes a los grupos 4, 5 y 6
Susan Arias Donoso
330
Otra forma de valoracin de la calidad de la muestra de desgarro es el ndice de Bartlett, el que se

obtiene mediante el conteo del nmero de leucocitos y clulas epiteliales escamosas en no menos de
10 campos del microscopio a 100X y la posterior suma algebraica del total de leucocitos versus las
clulas epiteliales presentes, donde cualquier valor positivo es vlido para aceptar la muestra como
apropiada para el cultivo. Esta valoracin establece:

Leucocitos:

10 a 25 leucocitos:

>25 leucocitos:

Clulas epiteliales escamosas:

10 a 24 clulas epiteliales

>25 clulas epiteliales
1+
2+
-1
-2

La muestra de desgarro se observa al fresco para determinar la presencia de elementos de hongos,
especialmente en pacientes inmunodeprimidos, adems se realiza observacin de extendidos fijados
y teidos con Gram, Ziehl Neelsen, Giemsa y sustancias fluorescentes como naranja de acridina.

Las muestras de LBA para estudios microbiolgicos son consideradas en dos categoras:
- Categora no. 1: Incluye estudios para detectar MO sin problemas de interpretacin a pesar
de tener contaminacin con microbiota del TRS, esto incluye hongos oportunistas, parsitos,
Legionella spp y micobacterias. El recuento de bacterias 104 es considerado significativo.
- Categora N 2: incluye el estudio de MO que pueden ser parte de la microbiota oral. Los
cultivos de rutina se le pueden realizar de manera similar al desgarro, y estos tambin
tienen el problema de contaminacin con microbiota bucal. No se realiza estudio para
anaerobios. El recuento de bacterias 103 es considerado significativo, dado que estos
representan alrededor de 106 MO/mL de la solucin original.

Ambas se mezclan con vrtex y se siembran en agar sangre, chocolate, Mac Conkey y caldo
tioglicolato usando un asa calibrada de 0,01 mL, los medios se deben incubar a 36 1 C en
microaerofilia por 48 horas; el caldo tioglicolato se debe incubar hasta 5 das.

Informe semicuantitativo:
- Si no hay crecimiento:

no hubo desarrollo microbiano.
- Si hay crecimiento de 1 a 2 colonias:

muy escaso desarrollo microbiano.
- Si hay crecimiento de 3 a 10 colonias:

escaso desarrollo microbiano.
- Si hay crecimiento mayor a 10 colonias:

moderado desarrollo microbiano.
- Si hay colonias presentes en un rea 1 y 2 de inoculacin: abundante desarrollo microbiano.

Informe cuantitativo:
- No. de colonias: < 10
< 103
- No. de colonias: 10 100
103 104
- No. de colonias: 100 1000 104 105
- No. de colonias: >1000
> 105

Susan Arias Donoso
331
Bronquiolitis

Es una inflamacin difusa y aguda de las vas areas inferiores, de naturaleza infecciosa, expresada
clnicamente por la obstruccin de la va area pequea (bronquiolos). Los factores de riesgo
asociados a esta enfermedad son: ser de sexo masculino, tener entre 2 y 6 meses de edad, no haber
recibido alimentacin con leche materna, madre fumadora, hacinamiento y asistencia a guarderas.
En forma ms frecuente es causada por Virus Sincitial Respiratorio (70%), Virus Influenza, Virus
Parainfluenza, Adenovirus y Rinovirus.

Neumona

Es la inflamacin de los bronquios o alvolos que da como resultado una radiografa de densidad
anormal, afecta a los espacios alveolares, va area central (bronquiolos terminales y respiratorios) y
el intersticio circundante. La etiologa de la enfermedad est condicionada por la edad del paciente:

-
-
-
-
RN menor de 1 mes: Streptococcus beta hemolticos, enterobacterias, S. aureus.

3 semanas a 4 meses: C. trachomatis, VSR, virus parainfluenza, U. urealyticum.
4 meses a 5 aos: VSR, Virus Parainfluenza 1 y 3, Adenovirus, Virus influenza, S.
pneumoniae, H. influenzae tipo b, S. aureus (menos frecuente).
5 15 aos: S. pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae y S. aureus.

El VSR es la causa ms comn de neumona en lactantes compartiendo la edad de mayor incidencia
y el peak estacional con la bronquiolitis. Por otro lado las neumonas bacterianas son mucho menos
frecuentes y ocurren durante todo el ao, pero con mayor incidencia durante el invierno, en general
los aislamientos bacterianos ms frecuentes son S. pneumoniae y H. influenzae tipo b, quienes son
responsables de la neumona severa en nios de pases en vas de desarrollo.

La neumona neonatal tiene distintas vas de adquisicin:
- Congnita: CMV, herpes, rubola, Toxoplasma gondii, enterobacterias.
- Intrauterina y canal de parto: enterobacterias, S. agalactiae, L. monocytogenes.
- Posnatal comunitaria: VSR, Virus Influenza A, Virus Parainfluenza.
- Nosocomial: enterobacterias, P. aeruginosa, S. aureus.

S. pneumoniae pertenece a la microbiota de TRS en el 5 70% de la poblacin, portacin que
disminuye con la edad. Causa infecciones de carcter estacional, ms frecuentes en invierno y
principios de primavera, la neumona por esta especie es de 3 4 veces mayor en el hombre que en la
mujer, y se presenta especialmente en pacientes sobre 40 aos; constituye la complicacin ms
frecuente de la influenza y el sarampin.

Provoca infecciones con incidencia estacional en nios de entre 4 meses y 4 aos de edad; stas
involucran la pleura y pueden complicarse con pericarditis (43%).

Las infecciones por este agente son frecuentes en pacientes con enfermedad debilitante, mala
nutricin y alcoholismo.
Susan Arias Donoso
332
Tos Convulsiva

Existe incidencia de esta enfermedad a pesar de la inmunizacin masiva en Chile, la que afecta
principalmente a nios menores de 1 ao de edad. El diagnstico se confirma en muestra
nasofarngea o farngea por aislamiento de Bordetella pertussis en las secreciones de las vas
respiratorias, para lo cual se usa el medio de Bordet Gengou, ya que es un microorganismo exigente y
lbil, no creciendo en medios con peptonas, la incubacin se realiza a 35 C por 48 horas
observndose colonias que asemejan gotas de mercurio. El mayor rendimiento del aislamiento se
obtiene en la primera semana de la enfermedad (fase catarral). La identificacin se logra por IFI y
PCR.

Susan Arias Donoso
333
Diagnstico microbiolgico de meningitis

La meningitis corresponde a la inflamacin de las meninges, las cuales son las membranas que
cubren la mdula espinal y el cerebro, esta inflamacin puede ser debida a la presencia de un agente
bacteriano, viral o mictico, produciendo dao en su estructura. Este cuadro se puede clasificar en
purulenta o asptica, de lo cual depende el tratamiento o procedimiento clnico a emplear:
- Meningitis purulenta: hay participacin de elementos celulares (linfocitos y neutrfilos), es
causada por hongos, parsitos o bacterias. Se pueden presentar de forma aguda o crnica,
siendo la primera ms grave, en las de tipo agudo los agentes ms frecuentes son:
o S. pneumoniae
o S. agalactiae (RN)
o H. influenzae tipo B
o N. meningitidis
o L. monocytogenes
o S. aureus
o Bacilos Gram- (requiere septicemia previa) principalmente E. coli y Fusobacterium
meningoseptico, seguido de K. pneumoniae, P. aeruginosa y Acinetobacter

- Meningitis asptica: es de carcter viral, en general son autolimitadas, dependiendo de la
migracin de leucocitos al foco de infeccin. Es causada por Virus Herpes Simplex 1 y 2, Virus
Varicela Zoster, Citomegalovirus y el Virus Epstein Barr, de ellos los ms frecuentes son HSV 1 y
2, pues estn asociados a la depresin del sistema inmune.

La pesquisa del agente se realiza a partir de una muestra de lquido cfalorraqudeo (LCR), donde se
encuentra alteracin fsico, qumica y hematolgica, que se interpreta como sigue:

Cuadro clnico
Leucocitos
Tipo celular
Protenas mg/dL
Glucosa mg/dL
3
/mm
predominante
(LCR/suero=0,6)
Normal
0-5
Ninguno
15-50
54-100
Infeccin viral
2-2000
Mononuclear
Ligeramente elevada
Normal
(: 80)
(50-100)
Infeccin
5-20000
PMN
Elevada (>100)
Baja (<45)
purulenta
(: 80)
Tuberculosis y
5-2000
Mononuclear
Elevada (>50)
Normal o baja
hongos
(: 100)
(<45)

Si la muestra se presenta turbia existen al menos 108 elementos que pueden ser leucocitos, GR o
bacterias, la observacin morfolgica revela la presencia de leucocitos, PMN o linfocitos dependiendo
del cuadro clnico, el examen qumico revela niveles de albmina aumentados y glucosa disminudos,
esto ltimo en caso de infecciones purulentas, valores que pueden encontrarse normales al inicio de
la enfermedad. La glucorraquia es la principal caracterstica que permite diferenciar entre meningitis
asptica y purulenta, sumado a los niveles de protena C reactiva que aumentan en infecciones
bacterianas, mientras que se mantienen cercanos al valor normal en infecciones virales.

El riesgo de padecer meningitis est asociado a la edad del paciente ya que condiciona el
microorganismo que causara la infeccn, como es el caso de la listeriosis en adultos o la presencia de
S. agalactiae en menores de 1 mes.
Susan Arias Donoso
334
La aproximacin diagnstica en meningitis bacteriana se basa en la presencia de rash petequial, que

se asocia a septicemia (meningococcemia), la existencia patolgica previa en la zona orofarngea, la
realizacin de cirugia neurolgica o la presentacin de trauma a este nivel, el dficit focal (ataxia) que
provoca daos del sistema inmunolgico, y la alteracin del estado mental que disminuye la
absorcin de alimentos escenciales y deprime el sistema inmune.

La tincin Gram permite una rpida visualizacin de las bacterias que causan meningitis en 60 a 90%
de los pacientes, con una especificidad mayor a 90%. La probabilidad de observar bacterias en LCR
teido con Gram se correlaciona con la concentracin de estas en LCR, as si existen menos de 10 3
UFC/mL el rendimiento de la tincin Gram es equivalente a 25%, si la concentracin se encuentra
entre 103 y 105 UFC/mL ser de 60%, mientras que si la concentracin sobrepasa las 10 6 UFC/mL el
rendimiento se acerca a 97%. El rendimiento de la tincin Gram puede ser menor a 20% en pacientes
que han recibido terapia antimicrobiana previa. Esta tincin se transforma en una tcnica de urgencia
frente a un cuadro menngeo y se hace inmediatamente tras la llegada de la muestra al laboratorio.

La muestra se centrifuga a 1000 G por 10 minutos y el pellet generalmente se siembra en agar
sangre de cordero 5% para desarrollo de Streptococcus, Mac Conkey para la deteccin de
enterobacterias o bacilos no fermentadores, y agar chocolate para pesquisa de Haemophilus
influenzae; adems de emplearse para la realizacin de la tincin Gram. Los cultivos se incuban a 36
C en microaerofilia. La presencia de PMN y linfocitos en el Gram debe ser informada ya que sealan
la probabilidad de meningitis purulenta.

En meningitis crnica se observa pleocitosis linfocitica predominante, definida como sntomas ms
pleocitosis en LCR durante 4 semanas, puede ser causada por: M. tuberculosis, Actinomyces o
Brucella, y es diagnosticada mediente tincin Ziehl Neelsen, cultivo y PCR. La pleocitosis linfoctica
predominante es causada tambin por:
- Nocardia asteroides complex, especialmente en pacientes inmunocomprometidos. Se utiliza
como prueba diagnstica Ziehl Neelsen modificado y cultivo.
- Hongos: el ms frecuente es Cryptococcus neoformans, pudiendo encontrarse tambin
Coccidiosis immitis, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitis, especies de Candida. La
prueba diagnstica usada es la Tinta China y el Test de antgenos para Cryptococcus spp.
- Treponema pallidum, principalmente en nios. Para su diagnostico se utilizan pruebas no
treponmicas (VDRL, URS, RPR), para la pesquisa de anticuerpos, relacionados con una
reaccin inmune primaria, en suero y LCR, como el rendimiento de LCR es bajo se debe
confrontar con suero. Se pueden realizar tcnicas treponmicas para la confirmacin de
neurosifilis, sta se realiza cuando la reaccin no treponmica es positiva.
- La deteccin de Brucella requiere un mayor tiempo de incubacin en medios de cultivos
especiales que aumentan su capacidad de desarrollo.
- Parsitos: Toxoplasma gondii, Cisticercos, Trichinella spiralis. Como mtodo diagnstico se
observan taquizoitos en extendido (LCR), PCR (LCR), test serolgicos.

La meningitis viral (asptica) cursa con encefalitis viral, en estos casos existe pleocitosis linfocitica y
niveles normales de glucosa, de manera caracterstica, el diagnstico se establece por deteccin de
anticuerpos contra estos agentes, mediante PCR o rt-PCR, esta ltima posee una mayor precisin y
prontitud diagnstica. Los cultivos celulares han sido desplazados por las tcnicas moleculares, ya sea
inmunoblot o westernblot, debido a que los primeros son muy tediosos y muchas veces no tienen
buen rendimiento.

Susan Arias Donoso
335
Procesamiento del Lquido Cefalorraqudeo
Mtodos de deteccin de MO que causan infecciones del SNC

Metodo
Tincion Gram/
otras tinciones
Espectrofotometra de
masa
Cromatografa gas-lquido
Deteccin de Ag
AC fluorescentes
Aglutinacin en ltex
Cultivo
ASC 5%
Agar Mac Conkey
Agar Chocolate
PCR
Ventaja
Rpido, en algunos casos diagnstico
Desventaja
Tiempo
Menos sensible
Subjetivo
Rpido
Usado como tamizaje/
recuento de leucocitos
Rpido
Poco usado
Rpido
Sobreusado
Bajas concentraciones
de bacteria la invalidan
Tradicional gold estandar
Lento
til para test de resistencia e investigacin Algunos patgenos no
epidemiolgica
crecen facilmente in
Disponible para la mayora de patgenos
vitro
Sensible
Puede detectar cidos
Relativamente rpido
nucleicos en organismos
Puede detectar patogenos que no crecen
no viables o latentes
en cultivo
No disponible
ampliamente
Minutos-
horas
Horas
Horas
Horas
Das -
semanas
Horas -
dias
Susan Arias Donoso
336
Para el tratamiento se emplea una antibioterapia emprica empleando drogas con buena
penetracin en el SNC a dosis elevadas, como cefalosporinas de tercera generacin (cefotaxima,
ceftriaxona), ampicilina o vancomicina (atraviesa la barrera hematoenceflica solo si est inflamada),
mantenidas mientras no se conozca el agente; estas drogas deben tener actividad frente a los
patogenos ms frecuentes (Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Haemophilus
influenzae y Neisseria meningitidis), pudiendo usarse combinaciones de antibioticos; la duracin
adecuada se establece tras los resultados de la tincin Gram o del cultivo, luego de 3 das. Como
tratamiento coadyuvante se utiliza dexametasona (antiinflamatorio).

Generalmente cuando hay sospecha de Streptococcus agalactiae la penicilina G o ampicilina son el
tratamiento de primera eleccin, combinados con un aminoglicsido o una cefalosporina de tercera
generacin, en caso de presentar resistencia se emplea vancomicina. En el caso de Staphylococcus
aureus el tratamiento de eleccin es, principalmente, cioxalina, vancomicina y rifampicina, sin
embargo la frecuencia de este agente es baja. En meningitis causada por enterobacterias
generalmente se emplean cefalosporinas de tercera generacin y en ltimo caso meropenem o
aztreonam. En caso de Pseudomonas aeruginosa se utiliza como primera opcin ceftazidima
combinada con algn aminoglicsido, en ltima instancia se usa el meropenem, el aztreonam junto
con tobramicina o ciprofloxacino u ofloxacino intravenoso. La infeccin por Acinetobacter baumannii
puede ser confundida con la causada por Neisseria meningitidis, para la primera se emplea como
tratamiento meropenem o colimicina, para la segunda se emplea ampicilina o ceftriaxona, no
existiendo otras alternativas teraputicas.

La quimioprofilaxis incluye la administracin de Rifampicina para evitar el contagio de N.
meningitidis y H. influenzae. La Inmunoprofilaxis implica la vacunacin contra N. meningitidis, H.
influenzae y S. pneumoniae.

Susan Arias Donoso
337
Diagnstico microbiolgico de infecciones del torrente sanguneo

La infeccin se define como un proceso inflamatorio que se desarrolla ante la presencia o invasin
de microorganismos en los tejidos normalmente estriles del hospedador.
La bacteriemia corresponde a la presencia de bacterias viables en la sangre, que se puede confirmar
por hemocultivo, sta puede ser transitoria, cuando hay pasaje a la sangre de ciertas bacterias en
forma espontanea pero sin que se produzca ningn cuadro clnico, ya que son retiradas por el sistema
fagoctico mononuclear dentro de la primera media hora; o bien puede ser continua, provocando
infeccin intravascular. Existen casos de bacteriemia intermitente donde se liberan cada cierto
tiempo bacterias a la sangre.
El sndrome de respuesta inflamatoria sistmica (SRIS) se define como la respuesta del organismo
frente a distintas agresiones clnicas graves como infecciones, pancreatitis, shock hemorrgico,
politraumatismo y otras enfermedades; cursa con dos o ms de los siguientes sntomas: fiebre (>38
C), hipotermia (<36 C), taquicardia mayor a 90 lat/min, taquipnea menor a 20/min, PaCO 2 < 32
mmHg, leucocitosis (> 12 000 cel/mm3) o leucopenia (< 4 000 cel/mm3), con un 10% de baciliformes.
La sepsis se refiere a la respuesta inflamatoria sistmica a una infeccin demostrada con
hemocultivo positivo. Esta respuesta posee distintos niveles:
- No complicada: es la ms habitual cuando hay infecciones virales, cuadros gastroentricos o
absceso dental, no se manifiestan muchos sntomas y puede ser autolimitada.
- Grave o severa: ocurre dao en la funcionalidad de ciertos rganos, puede haber hipotensin
e hipoperfusin (alteracin del suministro de sangre a algunos rganos) lo que provoca
acidosis lctica, falla renal y a veces alteracin del nivel de conciencia. La mortalidad en estos
casos puede llegar alrededor del 30 35%.

Los signos y sntomas generales de la sepsis son:

Susan Arias Donoso
338
El Shock sptico se define como sepsis grave en donde todas las alteraciones se mantienen y
generan falla multiorgnica. Su tratamiento incluye antibiticos y vasodepresores, la mortalidad
alcanza el 50%. El rash, prpura, es una signologa caracterstica de algunos tipos de sepsis, como la
meningoccica.
Tras la sepsis, si sta no es controlada, puede sobrevenir el Sndrome de falla multiorgnica, en que
los sistemas comienzan a fallar en forma de cascada, en general este sndrome no tiene retorno, pues
es muy difcil de compensar, normalmente ocurre entre la segunda y tercera semana una vez que se
ha iniciado el proceso de la enfermedad, en ella el tratamiento se enfoca solo en mantener la
homeostasis.

En el momento en que se inserta un catter a una persona es posible que se arrastren
microorganismos que habitan en la piel, los que se adhieren al catter, colonizndolo y formando
slime layer, desde all las bacterias pueden ingresar a la sangre donde eventualmente causan
bacteriemia, que podra progresar a septicemia, conllevando a la prdida de la homeostasis por
activacin de la inflamacin, coagulacin y fibrinlisis. La inflamacin provoca lesin endotelial
sistmica que tiene como consecuencia vasodilatacin y fuga capilar, provocando shock y muerte, la
vasodilatacin se desarrolla por el aumento de la produccin de xido ntrico, un potente
vasodilatador, por los linfocitos que han tenido contacto con las bacterias, esto provoca una
alteracin de los lpidos de membrana, con vasodilatacin y dao del epitelio. El cuadro sptico
intravascular provoca la activacin en cascada de los factores tisulares de la coagulacin, que sumada
a la falta de fibrinlisis puede provocar CID generando microtrombos, lo que aumenta el consumo de
factores y plaquetas, pudiendo generarse hemorragias.

inflamacin
activada
sepsis
prdida de la
homeostasis
coagulacin
activada
Fibrinlisis
suprimida
lesin
endotelial
sistmica
CID, micro-
trombosis
en rganos
permanencia
de Trombos -
isquemia
Vasodilatacin
y Fuga Capilar
Shock
MODS
FOM
Muerte

Todas las sepsis tienen un foco inicial que no siempre se conoce, aunque en su mayora provienen
del aparato genitourinario, las que generan alrededor del 25% de las sepsis en el cuerpo humano.

Susan Arias Donoso
339

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Tracto genitourinario: 25%

Tracto respiratorio: 20%
Abscesos: 10%
Heridas quirrgicas: 5%
Tracto biliar 5%
Otros sitios anatmicos: 10%
De origen desconocido: 25%

Segn esto y la procedencia, la septicemia se clasifica en:
- Septicemia primaria: el microorganismo es aislado en sangre pero no se relaciona a un foco
determinado.
- Septicemia secundaria: el microorganismo es aislado en sangre y se conoce el foco primario
de la infeccin, de manera que es ms fcil de combatir. Dentro de este tipo se encuentra la
pielonefritis, la fiebre tifoidea y todos los cuadros que lleguen a la sangre por un foco clnico
distinguible.
- Septicemia extrahospitalaria: corresponden a las infecciones contradas en la comunidad, 48
horas antes de la hospitalizacin, pueden ser causadas por: S. pneumoniae, N. meningitidis, H.
influenzae.
- Septicemia intrahospitalaria: se ha definido como aquella que se produce tras 48 horas de
internacin, es producida por Pantoea agglomerans, Stenotrophomonas maltophilia.

En trminos generales se define que cualquier microorganismo podra producir un cuadro sptico,
de ellos los ms importantes son:
-
-
-
-
-
Staphylococcus coagulasa negativo (S. epidermidis y S. haemolyticus): tienen una elevada

tasa de multirresistencia a meticilina (80%), aminoglicsidos, macrlidos y lincosaminas.
Staphylococcus aureus: en general se adquiere desde un foco local extravascular provocando
celulitis, infeccin de herida, osteomielitis, neumona; sin embrago puede obtenerse desde el
intravascular por medio de catter intravenoso, uso de drogas IV, entre otros.
Escherichia coli: el foco primario corresponde a cuadros diarreicos e infecciones urinarias.
Enterococcus spp: se presenta ms frecuentemente es pacientes inmunocomprometidos,
trasplantados, nefrpatas o con infeccin IIH. Pueden poseer multirresistencia.
Streptococcus pneumoniae: septicemia extrahospitalaria causada como consecuencia de
enfermedades del tracto respiratorio bajo. Se presenta ms comnmente en pacientes
mayores de 60 aos, con infecciones previas del TRB y uso betalactmicos.
Susan Arias Donoso
340
-
-
-
-
-
-
-
Klebsiella spp: puede producir cuadros clnicos en distintos niveles, renal, infeccin urinaria y
es uno de los agentes ms importantes de neumona.
Streptococcus orales: provoca endocarditis infecciosa (30 40%), su importancia ha decado
por la posibilidad de remover los focos de infeccin mediante el cambio de vlvulas cardacas.
Corynebacterium jeikium: provoca septicemia intrahospitalaria, endocarditis, meningitis,
osteomielitis, etc.
Enterobacter cloacae: es la especie ms importante dentro del gnero.
Proteus
Pseudomonas: a pesar de ser un microorganismo multirresistente no tiene mayor frecuencia
al poseer menor cantidad de factores de virulencia.
Acinetobacter

Septicemias, Etiologa por origen

Bacteria
Pulmonar Digestivo Urinario Catter
E. coli
P. aeruginosa
S. aureus
E.C.N.
S. pneumoniae
14%
5,9%
22%
3%
27%
30%
5%
6%
<0,1%
1%
52%
4%
10%
2%
<0,1%
4%
1%
46%
14%
<0,1%
Etiologa segn las edades

Edad
< 1 mes
1 3 meses
3 meses 5 aos
> 5 aos
Etiologa
Enterobacterias1
Staphylococcus aureus2
Streptococcus agalactiae
Streptococcus pyogenes2
Anaerobios
Enterobacterias
Enterococcus spp
Streptococcus agalactiae
Streptococcus pyogenes2
Haemophilus influenzae tipo b
Anaerobios2
Streptococcus pneumoniae4
Enterobacterias1,3,6
Anaerobios3
Haemophilus influenzae tipo b5 Staphylococcus aureus2
Streptococcus pneumoniae4
Anaerobios3
Enterobacterias1,3,6
1. Incluye Escherichia coli, Klebsiella spp., Proteus spp., Enterobacter spp., entre otras.
2. En caso de infeccin de piel, partes blandas y osteoarticular.
3. En caso de infeccin intraabdominal.
4. Independientemente de poseer esquema de inmunizacin completo para S. pneumoniae.
5. En caso de antecedente de esquema de inmunizacin para Haemophilus influenzae tipo b
incompleto o inadecuado para la edad.
6. En caso de infeccin urinaria.
Susan Arias Donoso
341
Factores predisponentes a procesos spticos

Condicin
Sonda urinaria
Catter intravenoso
Mecanismos
Organismos
Colonizacin microbiana del tracto

urinario
Acceso directo de la microbiota de la
piel al sistema circulatorio
Enterobacterias, P. aeruginosa,
Enterococos
S. aureus, S. epidermidis,
enterobacterias, Candida spp
S. aureus, Enterobacterias, P.
aeruginosa
Estreptococos gpo. A, P. aeruginosa,
Enterobacterias, Candida spp
P. aeruginosa, Klebsiella spp,
Candida spp, S. aureus
Neumococos, Haemophilus spp,
meningococos
Neumococos, Haemophilus spp,
meningococos
Estreptococos gpo. B, E. coli, otras
enterobacterias, S. aureus, L.
monocytogenes
Mycobacterium spp
Klebsiella spp, Enterobacter spp,
Candida spp
Intubacin endotraqueal o
Colonizacin microbiana del TRI
traqueotoma
Quemaduras graves
Granulocitopenia
Hipogammaglobulinemia
Esplenectoma
Recin Nacidos
SIDA
Prdida de la funcin de la barrera (piel)

con infeccin de herida
Prdida de la funcin fagoctica de los
PMN
Prdida opsonizacin
Prdida de macrfagos fijos y
produccin de Ac por los linfocitos
Mecanismos defensivos inmaduros,
colonizacin de organismos de la madre
y del hospital
Desajuste de la funcin del Inf TH
Infusiones IV contaminada Invasin directa por MO

Vlvula cardaca anormal
Prtesis valvular
(<2 meses)
Prtesis valvular
(>2 meses)
Aumento de las probabilidades de

infeccin por MO de bacteriemias
transitorias
S. viridans, Enterococos, S. aureus,

Haemophilus spp
S. aureus, S. epidermidis,
Cuerpo extrao favorece colonizacin en
enterobacterias, Candida spp,
otras cirugas
Enterococos
Foco de colonizacin por bacteriemias
Estreptococos, enterococos,
transitorias
Haemophilus spp
Susan Arias Donoso
342
Otros factores predisponentes son: la administracin de drogas inmunosupresoras, las edades

extremas y algunos factores genticos.
Se habla de sepsis asociada a catteres cuando el nmero de microorganismos aislados a partir de
una muestra tomada por catter es mayor en 15 UFC respecto a los obtenidos en muestras
perifricas, considerando la sintomatologa presente.

Hemocultivo
El diagnstico de las septicemias se realiza a partir de una muestra de sangre que debe ser tomada
bajo determinadas condiciones para evitar la contaminacin de la muestra y, por consiguiente falsos
positivos. Se debe siempre utilizar desinfectantes sobre la zona a puncionar, para evitar el arrastre de
microorganismos de la piel a la sangre, y nunca extraerla desde un catter intravenoso, ya que
pueden existir microorganismos colonizando su superficie, especialmente si se ha instalado hace ms
de 48 horas; adems cada extraccin debe hacerse de zonas anatmicas distintas y antes de iniciar
cualquier terapia antimicrobiana. El tiempo ptimo para la toma de nuestra es 30 minutos antes del
pick febril, pues la fiebre intensa disminuye la presencia bacteriana.
Si el hemocultivo ser realizado en equipos automatizados se requieren solo dos muestras, pero si
la tcnica se realiza en forma manual se requieren 3 muestras; esto debido a que mientras mayor es
la cantidad de muestras mayor es tambin la probabilidad de aislar la bacteria, as, en una sola
muestra la probabilidad es de 80%, en dos muestras es de 89% y en 3 muestras es de 99%. Estas
muestras deben ser almacenadas a temperatura ambiente y nunca en refrigeracin ya que las bajas
temperaturas podran afectar la viabilidad de microorganismos lbiles como Neisseria meningitidis.
El volumen de sangre necesario para la realizacin del anlisis depende de la edad del paciente:
Edad
Neonatos a 1 ao
Volumen
0,5 a 1,5 mL
1 mes a 2 aos
2 a 3 mL
>2 aos
3 a 5 mL
Adolescente
10 mL
Adulto
10 mL

La dilucin de la muestra puede ser de 1/5 a 1/10, dilucin que se obtiene al adicionar la muestra al
caldo de cultivo, sta es necesaria para quitar ciertas propiedades o componentes a la sangre que
podran afectar en el diagnstico, como la presencia de antibiticos, las lisozimas, el complemento,
entre otros.
La incubacin se realiza a 35 C durante no ms de 7 das, con revisin diaria en las tcnicas
manuales, identificando la presencia de hemlisis (Streptococcus, Staphylococcus o Listeria), turbidez
(bacilos Gram- aerobios), formacin de gas (bacilos Gram- aerobios y anaerobios), formacin de velo
(aerobios estrictos) o cogulos.
Susan Arias Donoso
343
clasificacin de los
hemocultivos
segn tipo de
paciente
segn toma de
muestra
segn el tipo de
microorganismo
segn la
metodologa
peditrico
centrales
bacterias aerobias
manuales
adulto
perifricos
bacterias anaerobias
semiautomatizados
inmunocompetente
bacterias fastidiosas
automatizados
inmunosuprimido
micobacterias
hongos

Sistema Manual
Se utiliza un medio lquido que puede tener como base caldo nutriente, TSB, BHI, Caldo Brucella,
Caldo Columbia, etc.; el cual debe estar en cantidad suficiente para establecer una dilucin 1/10,
adems debe contener anticoagulante, donde el ms usado es polianetol sulfonato de sodio (SPS)
0,025%, el que adems inhibe la fagocitosis, el complemento y las lisozimas, sin embargo implica un
riesgo frente a especies de Neisseria, Moraxella, Gardnerella, cuyo desarrollo es inhibido. Puede
contener adems glucosa, sacarosa o inhibidores de betalactamasas dependiendo de la sospecha
clnica.
sistemas manuales
inoculacin de la muestra (10 mL)
botella con medio de cultivo
(aerobio-anaerobio)
deteccin visual del desarrollo microbiano

(1vez al da: turbidez, hemlisis, gas, velo)
tincin Gram
(resiembra)
resiembra ciega a las

24 hrs y 7 dias
Susan Arias Donoso
344
Sistema semiautomatizado
Emplea un tubo de lisis con SPS, saponina, que destruye los glbulos rojos, leucocitos y macrfagos,
y un fluoroqumico, que, mediante un cambio de color a causa del metabolismo de la bacteria, indica
la positividad del hemocultivo; este tubo se centrifuga a alta velocidad y el sedimento se siembra en
el medio de cultivo correspondiente. Este mtodo permite rescatar patgenos intracelulares como
Mycobacterium e Histoplasma capsulatum.

Sistema automatizado
Se dispone de distintos frascos dirigidos para la deteccin de cada tipo de microorganismo en
particular, estos sistemas se basan en la deteccin del CO2 que produce una bacteria, ya que esto
hace reaccionar un fluorocromo presente en el medio que es detectado por mecanismos
radiomtricos, fluorimtricos, colorimtricos o espectrofotomtricos, permitiendo conocer la
positividad de la muestra para su posterior resiembra. Los medios pueden contener resina que lisa los
leucocitos, neutralizan los antibiticos y aumentan la superficie de crecimiento.

sistemas automatizados
inoculacin de la muestra (10 mL)

botella con medio de cultivo
(aerobio-anaerobio-micobacterias-resinas)
deteccin del desarrollo microbiano (CO2) contnuo
(radiomtrico- espectrofotomtrico-colorimtrico-fluorimtrico)
computador: indice de crecimiento
grfico de crecimiento
descarga de botellas
tincin Gram (resiembra)
eliminacin de botellas
(sin subcultivo)
Las ventajas del sistema automatizado radican en la realizacin de un monitoreo no invasor

continuo, que acorta el tiempo de trabajo de 7 a 5 das y disminuye la manipulacin de los frascos; a
la vez que aumenta el rendimiento del hemocultivo en pacientes con terapia antimicrobiana.
Previa a la inoculacin de las muestras se debe realizar tincin Gram directa de ellas, cuyo frotis se
seca en estufa a 36 C; si las muestras son positivas se debe sembrar en Agar Sangre, Agar Mac
Conkey u otro, segn lo indicado por la tincin Gram; estas placas se incuban por 24 horas a 36 C, y a
las colonias desarrolladas se les realiza identificacin y antibiograma.

Situaciones especiales

-
En endocarditis infecciosa el diagnstico microbiolgico a travs del hemocultivo no siempre

da resultados positivos, por tanto se recomienda usar sistema automatizado para elevar la
sensibilidad y medios con piridoxal (Vitamina B6) que favorecen el desarrollo de
Streptococcus spp, pues los estreptococos del grupo viridans son los agentes ms frecuentes
Susan Arias Donoso
-
-
-
-
-
345
en estas infecciones, seguidos de S. aureus, Enterococcus spp, Streptococcus del grupo D,

Staphylococcus coagulasa negativo, bacilos Gram-, anaerobios y hongos. Es recomendable
tambin la realizacin de 3 hemocultivos dentro de 24 hrs, ya que la bacteriemia es continua.
Frente a sospecha de brucelosis se recomienda prolongar el cultivo por 30 das y realizarlo por
mtodo de lisis por centrifugacin.
En caso de infeccin por leptospiras se requiere la utilizacin de un medio especial e
incubacin en oscuridad por 6 semanas a 30 C, la observacin microscpica debe realizarse
en campo oscuro.
En infeccin por los miembros del grupo HACEK la incubacin se prolonga hasta 21 das por
mtodo convencional.
Frente a infecciones por hongos y Mycobacterium spp se recomienda lisis por centrifugacin.
Para la deteccin de sepsis por catter, se corta una punta de 3 cm de ste y se hace rodar 3
veces sobre agar sangre con una pinza estril, simultneamente se toman muestras
perifricas para establecer la comparacin. La incubacin se realiza por 18 24 horas a 36 C,
tras lo cual se realiza el conteo de las colonias desarrolladas si la diferencia entre la muestra
del catter y la muestra perifrica es mayor a 15 UFC se diagnostica la infeccin.
Susan Arias Donoso
346
Diagnostico microbiolgico de procesos supurados de piel y tejidos

blandos

Las infecciones de piel y tejidos blandos incluyen a todas las que afectan la piel y anexos cutneos,
tejido celular subcutneo, fascias y msculo estriado, y son, junto con las de las vas respiratorias, las
infecciones ms frecuentes en clnica humana. Estas infecciones pueden ser producidas por una
amplia variedad de microorganismos que forman parte de la microbiota de la piel y mucosas
(especialmente oral, gastrointestinal y genitourinaria), o proceden del medio ambiente; los que
penetran en el organismo secundariamente a la produccin de una herida traumtica, de una
quemadura o de una mordedura (origen exgeno), como complicacin de la ciruga (origen
endgeno) o desde un foco de infeccin distante a travs de la sangre (diseminacin hematgena).
Podra incluirse un cuarto mecanismo, indirecto, por toxinas o reacciones inmunolgicas.

El espectro de este tipo de infecciones abarca desde procesos leves hasta cuadros graves con gran
afectacin sistmica que precisan de una intervencin inmediata.

En funcin del momento de aparicin y de su evolucin, estas infecciones pueden ser agudas o
crnicas. Las infecciones agudas se producen por un dao externo sobre la piel intacta, como en
heridas quirrgicas, heridas traumticas, quemaduras o mordeduras. Las infecciones crnicas estn
favorecidas por determinados factores del husped, como el dficit de perfusin, la presin
mantenida de la piel sobre prominencias seas, o enfermedades metablicas como la diabetes; es el
caso de las lceras vasculares, de las lceras por presin o de la infeccin del pie diabtico
respectivamente, estas infecciones suelen ser polimicrobianas, con participacin de bacterias
aerobias y anaerobias.

Se consideran potencialmente patgenos a los estreptococos beta hemolticos, S. aureus,
Enterococcus spp, B. anthracis, P. aeruginosa y otros bacilos Gram- como las enterobacterias, tanto
en heridas agudas como crnicas; no es despreciable la presencia de microorganismos anaerobios
como Bacteroides spp, Prevotella spp, Porphyromonas spp y Peptostreptococcus spp, ya estn
implicados en un 38 48% de los procesos.

El tejido subcutneo expuesto es un excelente medio de cultivo para la colonizacin y proliferacin
de los microorganismos, que dependen de las caractersticas de la lesin (tipo de herida, profundidad,
localizacin, grado de perfusin sangunea, presencia de material extrao o tejido necrtico) y de
factores propiamente microbianos, como la carga bacteriana y los factores de virulencia. Son factores
predisponentes para la infeccin: edad, obesidad, malnutricin, diabetes (hiperglicemia inhibe
macrfagos), inmunosupresin y alteraciones circulatorias. Una escasa perfusin sangunea produce
una situacin de hipoxia tisular que afecta directamente la capacidad antimicrobiana de los
leucocitos, por ello las heridas en reas anatmicas bien perfundidas se infectan menos. Adems
estas infecciones dependen del entorno ambiental y la microbiota presente en el rea afectada.

El diagnstico en general es clnico y no microbiolgico, este ltimo se reserva para los casos en los
que se precisa conocer la etiologa de la infeccin, bien porque sean de particular gravedad o se
sospeche la presencia de microorganismos menos frecuentes, o bien haya habido mala respuesta a
tratamientos antimicrobianos previos, o porque son heridas de larga evolucin que no cicatrizan
dentro de un periodo de tiempo razonable. El diagnstico microbiolgico se realiza a partir de
muestras obtenidas desde una zona representativa de la infeccin, en cantidad adecuada y evitando,
Susan Arias Donoso
347
en lo posible, la contaminacin con la microbiota normal. sta debe ser tomada antes de iniciar un
tratamiento antibitico emprico y nicamente de aquellas lesiones que presenten signos clnicos de
infeccin, que se estn deteriorando o que no cicatricen despus de un periodo de tiempo largo, tras
correcta limpieza y desinfeccin de la zona. En heridas abiertas, se recomienda eliminar el material
necrtico y los tejidos desvitalizados, ya que la muestra debe tomarse de tejido viable infectado y no
de restos superficiales.

La muestra de tejido o la obtenida por aspiracin son las mejores desde el punto de vista
microbiolgico, ya que permiten realizar estudios cuantitativos, que establecen el momento ptimo
para realizar un injerto cutneo o suturar una herida abierta.

Las muestras superficiales pueden no reflejar exactamente lo que ocurre en profundidad, y en ella
pueden aislarse microorganismos de la microbiota comensal del individuo e incluso patgenos que no
participan en la infeccin; sin embargo la mayora de las veces las bacterias presentes en profundidad
son las mismas que se manifiestan en la superficie. Si la muestra es tomada con trulas deben
emplearse dos de ellas, una de las cuales se emplear para inocular los medios de cultivo y la otra
para realizar la extensin para tincin Gram; en caso de utilizar una sola trula se inocularn primero
los medios de cultivo y en ltimo lugar se realizar la extensin para la tincin.

Las muestras de trayectos fistulosos no representan la verdadera etiologa en casos de osteomielitis
subyacente y no se recomienda tomarlas.

En enfermos con infeccin grave o repercusin sistmica se recomienda adems extraer
hemocultivos.

- Abscesos cerrados: se recomienda aspirar el pus con jeringa, preferentemente a travs de una
zona de piel sana. Si as no se obtuviera una muestra, se puede inyectar suero salino estril
subcutneo y volver a aspirar.
- Heridas abiertas: con una trula se debe muestrear un rea de aproximadamente 1 cm2 del
tejido celular subcutneo de los bordes de la herida o de la base de la lesin, evitando el
sangrado. En el caso de heridas muy secas, se recomienda impregnar la trula con suero salino
estril antes de realizar la toma.
- Pus: se recomienda aspirar el pus de la zona ms profunda de la herida con jeringa.
- Tejidos obtenidos mediante curetaje y biopsias: se recomienda obtener suficiente muestra,
evitando las zonas necrticas. En determinadas heridas (como las quemaduras o las heridas
crnicas) se recomienda recoger ms de una muestra, de diferentes zonas de la herida, porque
una nica muestra puede no reflejar todos los microorganismos productores de la infeccin.

Se requiere conocer la informacin demogrfica del enfermo incorporando:
- Tratamiento antimicrobiano previo y con qu frmacos.
- Enfermedad de base (diabetes mellitus, insuficiencia vascular perifrica, etc.)
- Tipo de muestra (tejido profundo, muestra superficial, herida quirrgica, mordedura, lcera
por presin, lcera vascular, herida crnica, quemadura, etc.)
- Localizacin anatmica.

Las muestras de gran tamao se deben fraccionar con un bistur y realizar una impronta con el
borde de la muestra recin cortado en los medios y posteriormente la extensin. Siempre que la
muestra lo permita se procede a la homogenizacin.
Susan Arias Donoso
348
La tincin Gram se utiliza como un mtodo para evaluar la calidad de las muestras clnicas, de
acuerdo a la presencia de polimorfonucleares, que indica la existencia de inflamacin o infeccin, y de
clulas epiteliales que indica contaminacin superficial de la muestra. La observacin de esta tincin
permite decidir cuntos microorganismos se van a valorar en muestras con cultivos polimicrobianos, y
puede indicar la realizacin de procedimientos especiales de trabajo.

Con el objetivo de desarrollar un mtodo estandarizado y racional para la evaluacin de este tipo
de cultivos, se han aplicado la valoracin del ndice Q, para lo cual se determina el nmero de clulas
epiteliales (puntan negativamente) y de polimorfonucleares (puntan positivamente) por campo de
bajo aumento ("cba"; 10x).
Nmero de clulas epiteliales/cba
Nmero de PMN/cba
0
-1
-2
-3
0
3
0
0
0
+1
3
0
0
0
+2
3
1
0
0
+3
3
2
1
0

El ndice Q indica el nmero de patgenos que se deben evaluar (identificacin y antibiograma).
Cuando la muestra es de buena calidad (Q3), se identifica y se realiza antibiograma de hasta 3
microorganismos que se consideren patgenos potenciales. Si el ndice es Q1 o Q2, se identifican y se
hace antibiograma a 1 o 2 patgenos potenciales respectivamente. Si se aslan ms patgenos en el
cultivo que el ndice Q de la tincin Gram, prevalece el resultado de sta ltima.

Para el aislamiento se emplean ASC, Chocolate, Mac Conkey y en forma optativa agar Sabouraud,
agar Brucella / agar kanamicina-vancomicina / agar BBE. Se pueden emplear tambin caldos de
enriquecimiento: caldo BHI, caldo TSB o caldo tioglicolato. Este ltimo es el ms indicado para el
aislamiento de anaerobios. El empleo de caldo de enriquecimiento slo est indicado en las muestras
invasivas, en que la carga bacteriana puede ser baja y las caractersticas de obtencin de la muestra
obligan a apurar al mximo las posibilidades diagnsticas.

De los organismos desarrollados en los medios de cultivo se consideran patgenos: S. aureus,
estreptococos beta hemolticos, Enterococcus spp, bacilos Gram- y Bacillus anthracis, mientras que se
consideran contaminantes: difteroides, estafilococos coagulasa negativos, Neisseria spp no patgenas
y estreptococos alfa y no hemolticos.

Cuando se observe turbidez en el caldo, debe subcultivarse a medios slidos, en las siguientes
situaciones:
a) Si en las placas se aslan menos morfotipos bacterianos diferentes de los observados en la
tincin Gram.
b) Si en las placas originales no se observa crecimiento.
c) Siempre que slo se haya inoculado caldo de enriquecimiento, como en el caso de
fragmentos seos.

Susan Arias Donoso

Medios de cultivo
Aerobios
Muestras no invasivas
Muestras invasivas
Anaerobios
Caldo de enriquecimiento
Situaciones especiales
Mordeduras
Actinomicosis
Primera lectura

24 horas
24 horas
48 horas
24 horas

24 horas
48 horas
Recuento

48 horas
48 horas
48 horas

48 horas
349
Tiempo de incubacin

48 horas
4 das
5 7 das
4 das

7 10 das
2 4 semanas

Tipos de procesamiento recomendado:
Infeccin
Tipo de muestra
Herida quirrgica
Superficial
Invasiva
Superficial
Invasiva
Superficial
Invasiva
Superficial
Invasiva
Superficial
Invasiva
Heridas agudas
Heridas crnicas, UPP,
lceras vesiculares
Quemaduras
Pie diabtico
Cultivo
cualitativo

X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

X
X
X
X
Cultivo
semicuantitativo
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

Cultivo
cuantitativo

X
X

X
X

X
X

Infeccin de la herida quirrgica (IHQ)

Se define como la infeccin que se produce en la herida de una incisin quirrgica por
contaminacin de sta durante el acto quirrgico o en el postoperatorio inmediato, la determinacin
de una infeccin de este tipo es compleja y consta de diferentes requisitos:
- Tipo de procedimiento quirrgico.
- Referencia temporal.
- Referencia anatmica: en funcin de la profundidad de la afeccin se diferencian tres tipos:
superficial, profunda y de rgano o espacio.
- Criterios diagnsticos: pueden ser de tipo clnico o microbiolgico.

Constituye la segunda causa de infeccin nosocomial y la desarrollan entre el 2 20% de los
enfermos operados segn el tipo de ciruga. Existen caractersticas o factores de riesgo, tanto del
enfermo como del tipo de procedimiento quirrgico, que pueden influir en el desarrollo de la IHQ,
cuyo conocimiento permite la planificacin de medidas preventivas dirigidas.

El grado de contaminacin bacteriana de los mrgenes de la herida condiciona el riesgo de sufrir
una IHQ. En base a ello, la ciruga se clasifica en cuatro tipos:
- Limpia: intervenciones en las que la incisin atraviesa piel sana y no afecta a las mucosas ni a
la cavidad orofarngea; la tcnica quirrgica se realiza en condiciones de esterilidad, y se
cierra la herida en primera intencin. Riesgo de infeccin bajo (1-5%).
Susan Arias Donoso
350
Limpia-contaminada: intervenciones en las que hay apertura del tracto respiratorio,

gastrointestinal o genitourinario, sin contaminacin excesiva de la herida quirrgica, y
siempre de manera controlada (tcnica quirrgica con violacin menor de la esterilidad).
Reparacin de ciruga limpia en los primeros 7 das. Riesgo de infeccin medio (3-11%).
Contaminada: intervencin sobre una herida traumtica reciente, con tiempo de evolucin
menor a cuatro horas, tejido inflamado no infectado o con inflamacin aguda no purulenta,
existencia de derramamiento importante del contenido del tracto gastrointestinal en el
campo operatorio, o tcnica quirrgica con violacin de la esterilidad. Riesgo de infeccin
medio (10-27%).
Sucia: herida que acompaa a una infeccin clnica (pus), vscera perforada, o herida
traumtica de ms de cuatro horas de evolucin. Riesgo de infeccin alto (hasta 40%).

Los principales agentes implicados en infecciones de la herida quirrgica son:
- Enterobacterias: E. coli y Enterobacter pueden indicar contaminacin fecal de las heridas.
- Staphylococcus aureus.
- Enterococcus spp.
- BGN no fermentadores.
- Staphylococcus epidermidis.
- Anaerobios.
- Levaduras

Infecciones agudas de tejidos blandos

Bajo el trmino "infecciones de piel y partes blandas" se engloban todas las infecciones que afectan
a la piel, anexos cutneos, tejido celular subcutneo, fascias y msculo estriado. Dentro de este grupo
se incluyen los abscesos cutneos, las heridas traumticas y las infecciones necrotizantes, estas
ltimas se clasifican segn:

- Los microorganismos causales.

Monomicrobiana
S. aureus 25 30% de los abscesos cutneos
43 48% de las infecciones de piel o
tejidos blandos
Resistencia: Meticilina: 24 29,5%
Ciprofloxacino: 20,4 26,5%
Clindamicina: 16,5 20,9%
Polimicrobianas
Abscesos cutneos: 30 50%
Heridas traumatolgicas: 50%
Heridas necrotizantes: 47%
La resistencia de los microorganismos Gram+ a los antibiticos est aumentando, por lo

que se considera que las infecciones por S. aureus resistente a la meticilina (SARM) sern
cada vez ms frecuentes.

-
-
-
-
La forma de presentacin clnica.

El tipo de tejido afectado y la profundidad de la afeccin:
o Piel: celulitis aerbica y celulitis anaerbica o clostridiana.
o Espacio entre el tejido celular subcutneo y la fascia: fascitis necrotizante.
o Msculo: miositis estreptoccica y mionecrosis por Clostridium spp.
La velocidad de progresin.
El tipo de tratamiento que precisa.

Susan Arias Donoso
351
Esta clasificacin tiene poca utilidad desde el punto de vista clnico, ya que el pronstico y
tratamiento de las distintas entidades suele ser similar. Se requiere diferenciar entre la mionecrosis
por Clostridium y otras infecciones que no afectan al msculo, ya que posee alta mortalidad.

En muchas de estas infecciones se ha observado sinergia entre aerobios y anaerobios, lo que
potencia la aparicin de infeccin. Los aerobios consumen oxgeno y disminuyen el potencial de
xido-reduccin, favoreciendo la proliferacin de microorganismos anaerobios. Algunos aerobios
(como S. aureus) producen metabolitos (vitamina K) que potencian el crecimiento de determinados
anaerobios (Prevotella melaninogenica). Por ltimo, determinados microorganismos (Escherichia coli,
Klebsiella pneumoniae, Bacteroides spp) producen succinato, que se acumula en los tejidos e inhibe la
fagocitosis de S. aureus y E. coli.

Infecciones por mordeduras

Una mordedura es una herida producida por los dientes de un animal o de otra persona, que
laceran, perforan o aplastan los tejidos del paciente. Puede afectar la piel, nervios, vasos sanguneos,
tendones, msculos, articulaciones e incluso el hueso (causando osteomielitis); y causar infecciones a
distancia, o lesionar determinadas estructuras como el globo ocular. El 90% de las mordeduras son de
perros y gatos, y la mayora de las de perros afectan a nios, quienes son mordidos en la cara o en el
cuero cabelludo, mientras que los adultos son mordidos en brazos o piernas.

Las mandbulas de un perro producen una herida traumtica con laceracin, arrancamiento y
perforacin de los tejidos, las que se infectan entre un 3 y 20%. Las mordeduras de gatos se infectan
ms (30 80%) porque sus incisivos son afilados y estrechos y perforan en profundidad, causando
osteomielitis con ms frecuencia que las de perro. Sin embargo, las mordeduras que originan las
infecciones ms graves son humanas (10 50%), dada la gran cantidad y diversidad de microbiota
oral que hay en la boca del hombre, estas mordeduras se clasifican en lesiones oclusivas o por
puetazo. Las lesiones oclusivas se producen accidentalmente o de forma intencionada. Al dar un
puetazo a otra persona, el puo choca contra sus dientes, que llegan hasta la articulacin
metacarpo-falngica, cuando el puo se extiende, los tendones se retraen y la infeccin penetra por
debajo de la superficie de la piel, la herida suele ser pequea y se pasa por alto hasta que aparecen el
dolor y la infeccin.

Los microorganismos que se aslan en estas infecciones son los de la microbiota comensal de la boca
del agresor, de modo que suelen ser polimicrobianas en el 74% de los casos, con predominio de S.
aureus no meticilina resistente, Peptostreptococcus spp y Bacteroides spp. No obstante, tambin
pueden aislarse otros microorganismos menos frecuentes como Pasteurella multocida,
Capnocytophaga canimorsus, Bartonella henselae y Eikenella corrodens.

Infecciones de quemaduras
La infeccin de una quemadura se produce por la prdida de la primera barrera de proteccin, de
modo que el organismo queda expuesto a la colonizacin por microorganismos, se diagnostica con
algunos los siguientes criterios:
- Cambios en la apariencia de la quemadura, como separacin rpida de la escara, reas de
decoloracin local (parduzca, negra, violcea) o edema en el margen de la herida
- Al menos dos de los siguientes signos o sntomas sin otra causa conocida:
Susan Arias Donoso
352
a) Fiebre >38 C o hipotermia <36 C, hipotensin, oliguria <20 cm3/hrs, hiperglucemia,

confusin mental.
b) Examen histolgico de una biopsia cutnea donde se observe invasin de
microorganismos en el tejido viable adyacente.
Al menos uno de los siguientes hallazgos:
a) Hemocultivo positivo en ausencia de otro foco de infeccin
b) Aislamiento de virus herpes simplex, identificacin histolgica de inclusiones por
microscopa ptica o electrnica, o visualizacin de partculas vricas por
microscopa electrnica en biopsias o raspado de la lesin.

La lesin por quemadura rompe la homeostasis del organismo ms que ningn otro tipo de
traumatismo, ocasionando importantes alteraciones hemodinmicas, metablicas, respiratorias,
renales e inmunolgicas. La extensin y profundidad de la quemadura, la edad del enfermo, la
etiologa de la quemadura y las lesiones asociadas constituyen los principales factores que
determinan su gravedad. Las complicaciones infecciosas constituyen una de las causas ms
importantes de morbi-mortalidad en los grandes quemados (>50%). Entre los factores que favorecen
la infeccin de la quemadura se incluyen:
- Destruccin de las barreras mecnicas (piel y mucosas).
- Prdida de protenas por alteracin de la barrera endotelial o dficit de sntesis (malnutricin).
- Inmunosupresin local y sistmica.
- Trastornos de perfusin local.
- Procedimientos invasivos (catteres, respirador, sonda vesical, etc.).
- El detritus tisular que forma la quemadura, junto al exudado producido por la misma (rico en
protenas), favorece el crecimiento de microorganismos.

La superficie de la quemadura es estril inmediatamente despus de la agresin trmica, pero en las
primeras 48 horas hay una rpida colonizacin por microorganismos Gram+, como estafilococos, que
resistieron la accin trmica en zonas profundas (glndulas sudorparas o folculos pilosos). Cinco a
siete das despus la quemadura se coloniza por otros Gram+, Gram- y levaduras de los tractos
gastrointestinal y respiratorio y por bacterias del ambiente hospitalario, a travs de fmites o del
personal sanitario. La mayora de estas infecciones son bacterianas y monomicrobianas. Los Gram+
muestran escasa tendencia invasiva local y no suelen llegar a la fascia, por el contrario, los Gram-
invaden con mayor facilidad los tejidos sanos subyacentes, y producen con frecuencia bacteriemia e
infecciones a distancia.

Microorganismos que causan infeccin invasiva en quemaduras:
Categora

Microorganismo
Gram+
GramHongos
Virus
Susan Arias Donoso
Enterococcus spp.
Staphylococcus coagulasa negativos
P. aeruginosa
S. marcescens
Escherichia coli
Enterobacter spp
K. pneumoniae
Proteus spp
Candida spp
Fusarium spp
Aspergillus spp
Alternaria spp
Herpes simplex
Citomegalovirus
Varicella-zoster
Acinetobacter spp
Bacteroides spp
Rhizopus spp
Mucor spp
353
P. aeruginosa y S. aureus son la principal causa de infeccin. Las infecciones vricas, en especial por
herpesvirus (herpes simplex, varicella-zoster y citomegalovirus) suelen ser autolimitadas y aparecen
entre la segunda y la sexta semana tras la lesin trmica.

Infecciones de lceras por presin y de otras heridas crnicas (lceras vasculares venosas)
Una lcera por presin (UPP) es toda lesin de la piel originada por una presin mantenida sobre un
plano (silln, cama, etc.) o prominencia sea, o por friccin, cizallamiento o combinacin de las
mismas, causando isquemia que provoca degeneracin de la dermis, epidermis, tejido subcutneo, e
incluso del msculo y hueso, originando la muerte celular y necrosis. En su desarrollo es ms
importante la continuidad en la presin que su intensidad.

Las UPP son una complicacin habitual en los enfermos hospitalizados y suelen presentarse en
enfermos graves y con estancias largas. Conllevan dolor, infeccin y aumento de la estancia y del
coste hospitalario. La infeccin es rara en las UPP de estadios I o II (superficiales), pero mucho ms
frecuente en los estadios III o IV (profundas). Debe considerarse que una UPP est infectada siempre
que no se cure a pesar de haber eliminado la presin constante.

Los factores predisponentes a padecer estas lceras son: edad, incontinencia urinaria o fecal,
disminucin de la sensibilidad, actividad o movilidad; presin arterial baja, dficit nutricional y niveles
de hemoglobina baja.

Las lceras vasculares venosas se asientan sobre una piel daada por una dermatitis secundaria a
una hipertensin venosa, la cual constituye la complicacin principal de la insuficiencia venosa
crnica. Las lceras vasculares venosas representan entre el 80 90% del total de las lceras
vasculares.

La hipertensin venosa mantenida produce la apertura de los shunts arteriovenosos, con
incremento de la permeabilidad vascular, y consecuente extravasacin de protenas de alto peso
molecular que actan como una barrera que disminuye la oxigenacin; provoca adems el acmulo
de leucocitos con fenmenos de trombosis local de las vnulas. Alrededor de los vasos aparece una
zona de hipoxia con un bajo contenido en nutrientes y factores de crecimiento, que provoca la falta
de regeneracin de los tejidos una vez que se pierde la capacidad protectora de la epidermis.

La infeccin de ambos tipos de heridas se produce tras la prdida de la integridad de la piel, por
mnima que sea, por las modificaciones inducidas por la hipoxia tisular y la contaminacin desde
reas contiguas altamente colonizadas.

La etiologa de las infecciones de estos dos tipos de heridas es polimicrobiana, donde S. aureus es el
principal patgeno. No obstante, los anaerobios juegan un papel importante, representando el 30%
de todos los microorganismos que colonizan estas heridas y, cuando hay sntomas, se aslan en el 41
49% de los casos.

El diagnstico de infeccin de una UPP o de una lcera vascular venosa se basa nicamente en los
signos clsicos (eritema, edema, aumento de la temperatura y dolor). Sin embargo, estos signos
suelen existir en ausencia de infeccin, ya que son lesiones en un estado de inflamacin crnica, por
tanto es ms importante determinar si hay cualquier cambio, por muy sutil que sea, que indique
infeccin.
Susan Arias Donoso
354
Infeccin del pie diabtico

Segn la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) se define como "la existencia de ulceracin,
infeccin y/o destruccin de tejidos profundos asociada a alteraciones neurolgicas y a enfermedad
vascular perifrica en los miembros inferiores, que se presenta en enfermos con diabetes mellitus".
Para determinar su gravedad existen varias clasificaciones aunque ninguna se ha aceptado de forma
universal. Segn la clasificacin de Karchmer-Gibbson (1994) se distinguen:
- Infecciones leves: celulitis de menos de 2 cm de extensin y lceras superficiales (dermis y
epidermis) que no representan un riesgo para la extremidad. Hay buena perfusin arterial,
pocos signos inflamatorios y no hay complicaciones locales, se tratan en rgimen
ambulatorio.
- Infecciones moderadas: celulitis ms extensa y lcera profunda, que pueden llegar a causar
osteomielitis. Representan una amenaza para la extremidad y requieren ingreso
hospitalario.
- Infecciones graves: celulitis masiva, abscesos profundos y fascitis necrosantes, que
amenazan la vida del enfermo; suelen asociarse a toxicidad sistmica (fiebre y/o
leucocitosis) e inestabilidad metablica (hiperglucemia, acidosis, azoemia). Requieren
tratamiento rpido por va intravenosa e ingreso hospitalario.

Suele ser una infeccin por contigidad. Aparece en el 10 20% de los enfermos con infecciones
leves o moderadas y en el 50 60% de los enfermos con infecciones graves. El diagnstico es difcil,
ya que se producen muchos cambios seos destructivos durante la neuroartropata diabtica. La
exteriorizacin sea en la base de una ulceracin tiene un valor predictivo positivo del 90% para el
diagnstico de osteomielitis. El diagnstico etiolgico requiere la identificacin del microorganismo
causal mediante la obtencin de muestras seas para estudios microbiolgicos e histolgicos.

La OMS estima la prevalencia mundial de la diabetes mellitus ligeramente por encima del 2%, donde
la mayora de los casos son diabetes mellitus tipo II y hasta un 5% de estos pacientes tienen
problemas relacionados con el pie. La incidencia de ulceraciones es del 6 16,5%, de las que un 15%
requiere amputacin. Las ulceraciones son ms frecuentes en enfermos con un mal control de su
enfermedad, deformidades en el pie, ausencia de pulso pedio o insensibilidad.

Los principales factores de riesgo para las ulceraciones y la infeccin son: la neuropata perifrica,
motora, sensorial y de fibras autonmicas, que favorece la aparicin de pequeas heridas y la
invasin de microorganismos de la piel en el tejido subcutneo; la insuficiencia arterial, que provoca
isquemia tisular e impide la adecuada cicatrizacin de las heridas, y la hiperglucemia u otras
alteraciones metablicas, que producen disfunciones inmunolgicas.

Las infecciones agudas en enfermos sin tratamiento antibitico previo suelen ser monomicrobianas
y estn causadas por cocos Gram+ aerobios en un 80 90%, principalmente por S. aureus y
Streptococcus beta hemolticos; mientras que las infecciones crnicas o de heridas profundas suelen
ser polimicrobianas (90%), aadindose Gram- y anaerobios, en stas es frecuente aislar entre 3 y 5
microorganismos diferentes en la misma muestra, donde la patogenicidad de cada uno de ellos es
difcil de determinar. Entre los bacilos Gram- predominan las enterobacterias, especialmente Proteus
spp y Escherichia coli, y P. aeruginosa, la que en algunos casos es considerada como un posible
contaminante. Los microorganismos anaerobios se aslan hasta en el 95% de las heridas del pie, sobre
todo Peptostreptococcus spp, Bacteroides spp y Prevotella spp. Las alteraciones en la inmunidad local
que existen en los tejidos isqumicos hacen que microorganismos de baja virulencia, como los
estafilococos coagulasa negativos y los difteroides, puedan comportarse como patgenos. En
Susan Arias Donoso
355
enfermos con tratamiento antibitico reciente, hospitalizacin previa o que residen en unidades de
cuidados crnicos, se aslan con ms frecuencia microorganismos multirresistentes. La presencia de
hongos en las lceras del pie diabtico puede tener significado clnico cuando no se obtiene mejora
con un tratamiento antibitico prolongado, Candida spp y Aspergillus spp representan el 4% del total
de microorganismos aislados.

Tipo de infeccin
Etiologa
Infeccin leve (no complicada)

(celulitis, paroniquia, abscesos superficiales,
lceras crnicas con infeccin aguda)
Infecciones moderadas/graves (complicadas)
(celulitis severa, fascitis necrosante, abscesos
profundos y afeccin osteoarticular)
Cocos Gram+ aerobios

Bacilos Gram- aerobios
Anaerobios
Polimicrobianas
Bacterias Gram+ (2/3)
Bacterias Gram- (1/3)
Anaerobios
Frecuencia
80-90%
10-20%
<1%

99%
66%
33%
Susan Arias Donoso
356
Diagnstico de infecciones de la cavidad oral

La boca es un ecosistema complejo que establece una relacin del organismo con el ambiente y
proporciona numerosos hbitats para los microorganismos. Est formada por tejidos, rganos y
clulas de secreciones, con funciones relacionadas con el sistema endocrino, secretor, inmune y del
sistema nervioso. Contiene epitelios de distintas caractersticas, el de la lengua y de las paredes de la
boca, posee adems glndulas salivales, rganos sensoriales (papilas gustativas) y rganos de
estructura calcificada que sobresalen al exterior, denominados dientes, estos ltimos son exclusivos
de la cavidad oral.

En los dientes habita un gran nmero de especies microbianas que conforman la microbiota oral, la
que bajo ciertas condiciones puede producir enfermedades. Las funciones de dicha microbiota es
impedir la colonizacin de la boca por parte de patgenos extraos, adems de destruir y metabolizar
los residuos orgnicos de la alimentacin, constituyen una fuente de vitaminas y aminocidos al ser
ingeridas por el reflejo de la deglucin. Esta se clasifica en:
- Microbiota autctona: corresponde a las bacterias establecidas en la cavidad oral que
interactan con la boca, se considera como la microbiota residente normal.
- Microbiota alctona: son los microorganismos externos que alcanzan la cavidad oral a travs
del agua, de los alimentos o fmites; se denomina microbiota transente.

Antes del nacimiento la cavidad oral es estril pero comienza a colonizarse con bacterias en el canal
de parto, por manipulacin del personal mdico y durante la lactancia alcanzando alrededor de 20 a
25 especies, principalmente bacterias aerobias facultativas y fermentadores de lactosa, como
Lactobacillus y Streptococcus, esta constituye la microbiota de predenticin. Posteriormente la
microbiota se diversifica constituyendo la microbiota de denticin, donde se encuentran bacterias
anaerobias y anaerobias facultativas como Veillonella, Fusobacterium y espiroquetas. Finalmente se
pueden encontrar ms de 500 tipos de bacterias constituyentes de la microbiota oral, como
Lactobacillus spp, Corynebacterium spp, Fusobacterium spp, Actinomyces spp, Vibrio spp, Candida
albicams, espiroquetas, Porphyromonas spp, Prevotella spp, Streptococcus spp, Neisseria spp,
Veillonella spp y Entamoeba gingivalis, dependiendo de la alimentacin; una dieta rica en azcares
refinados constituye una dieta cariognica, pues favorece la presencia de bacterias fermentativas, en
el caso de una dieta rica en protenas predomina la microbiota proteoltica.

La temperatura bucal vara entre 35 y 36 C lo cual es propicio para el desarrollo de bacterias
mesfilas, el pH de esta cavidad es neutro pero disminuye por la fermentacin de los carbohidratos
de la dieta lo cual favorece el desarrollo bacteriano; la secrecin salival aporta la humedad
indispensable para este crecimiento, otros factores que favorecen la colonizacin son la oscuridad, el
alto potencial redox y la presencia de residuos alimenticios (nutrientes exgenos) y nutrientes
endgenos, como el exudado gingival (similar al plasma) y la saliva, compuesta por lisozima,
inmunoglobulinas, lactoferrina, peroxidasa, IgA y electrolitos. Los mecanismos retentivos son muy
importantes para el establecimiento de la microbiota, ya que las bacterias que no se adhieren a las
piezas dentarias son deglutidas y llevadas al estmago donde son destruidas. Estos mecanismos se
clasifican en adhesivos y no adhesivos, dentro de los primeros se encuentran los polmeros
extracelulares, las glicoprotenas de la saliva y la cubierta superficial de las bacterias; mientras que los
no adhesivos corresponden a la retencin mecnica en las anfractuosidades de las piezas dentarias
que retienen alimentos y bacterias.

Susan Arias Donoso
357
La existencia de sitios con diferentes caractersticas en la cavidad oral, diversifica la microbiota que
la coloniza, las bacterias que requieren de una muy baja tensin de oxgeno se van a alojar en las
profundidades de los tejidos y en surcos, como el surco gingivodentario.

Por otro lado el desarrollo bacteriano es limitado por la remocin de los nutrientes, la presencia de
factores antibacterianos, como inmunoglobulinas, proteasas y lisozimas; el aumento del pH, el reflejo
de la deglucin y la descamacin constante del epitelio.

El desarrollo inicial de enfermedades de la cavidad oral, caries y periodontitis principalmente, est
asociado a S. mutans y S. sobrinus que provocan una lesin primaria que es colonizada de manera
secundaria por otros microorganismos como Lactobacillus y Actinomyces, estos son importantes para
la adherencia de las bacterias, en estas infecciones se puede encontrar tambin Candida albicams, S.
mitis, S. anginosus, S. salivarus y S. sanguis asociados a un cuadro secundario, ya que producen una
menor cantidad de cido.

El metabolismo de los carbohidratos, en especial de la sacarosa, produce cido y sntesis de
polisacridos extracelulares por parte de las bacterias, las que pueden producir glucanos solubles
como dextranos, y glucanos insolubles como mutanos, ambos son polisacridos que intervienen en la
adhesin y el almacenamiento de energa, adems existe sntesis de polisacridos intracelulares cuya
principal funcin es almacenar energa. La acidez producida provoca la desmineralizacin del esmalte,
lo que conlleva la formacin de caries. La presencia prolongada de los alimentos en la boca prolonga
la desmineralizacin y retarda la remineralizacin del esmalte, pues el pH alcanza valores muy cidos
(4,5 a los 20 min), considerando que la desmineralizacin comienza cuando el pH es 5,5 y si la
exposicin es prolongada se degrada la dentina, el tiempo es un factor clave en la produccin de
caries.

La formacin de caries depende de la capacidad bacteriana de generar biofilms que constituyen la
placa bacteriana que cubre la superficie dental, esta se ha definido como una entidad organizada,
proliferante, enzimticamente activa, adherida a la superficie dentaria e incolora, estas caractersticas
le permite daar los tejidos periodontales como las encas, ligamentos y huesos alveolares, por esta
razn ha sido propuesto como el principal agente etiolgico de las enfermedades periodontales. Un
biofilm es una comunidad bacteriana, inmersa en un medio lquido, que les permite unirse entre s o a
un sustrato, ste se encuentra embebido en una matriz extracelular producida por las mismas
bacterias que muestran un fenotipo alterado en cuanto al grado de expresin gentica. Su ventaja
principal es proporcionar proteccin a las especies colonizadoras de agresiones externas, como
antimicrobianos (disminuye concentracin efectiva), mecanismos de defensa del hospedero,
sustancias potencialmente txicas u otros microorganismos competitivos; a la vez que proporcionan
un ambiente fsico qumico adecuado para el desarrollo de las bacterias, pues otorgan un potencial de
xido reduccin ptimo, capacidad de comunicacin (qurum sensing, transformacin y conjugacin,
por plasmidios y transposones), y ventajas nutricionales, ya que facilitan el procesamiento y
absorcin de nutrientes y la eliminacin de desechos, al permitir la alimentacin cruzada (una especie
provee alimentos para otra) y la remocin de productos metablicos potencialmente dainos, que a
menudo son usados por otras bacterias. Su formacin involucra 3 etapas:
- Fase 1: formacin de biofilms en el diente carente de bacterias, se forma por la adherencia de
glicoprotenas que se encuentran en la saliva.
- Fase 2: comienza la adhesin de algunos tipos de bacterias
- Fase 3: multiplicacin de las bacterias adheridas en la fase 2, se produce un cambio local de
las condiciones del medio y se adhieren nuevas bacterias, como anaerobios.
Susan Arias Donoso
358
Los biofilms se pueden desarrollar a travs de una clula planctnica, es decir bacterias que se
adosan al esmalte dentario como Actinomyces naeslundii, S. mitis, P. aeruginosa, P. fluorescens y E.
coli, todas ellas, bacterias que producen expresin de adhesinas; o bien a partir de otro biofilm ya
formado, por desprendimiento de este y su posterior instalacin en otro sitio, manteniendo las
propiedades del biofilm precursor.
Las biopelculas formadas adquieren forma de setas o torres separadas entre s por microcanales,
con una distancia de al menos de 10 um, que permiten la circulacin de lquidos y nutrientes, estos
microcanales poseen surfactantes que evitan su obstruccin por bacterias; en general los biofilms
estn compuestos en un 15 a 20% por bacterias, mientras que el 80 a 85% restante lo constituye el
glucoclix, que a su vez contiene sales minerales, exopolisacrido, protenas y material celular; esta
composicin vara con el tiempo y la maduracin de la pieza que coloniza; en general se presentan
dos matrices: una cubierta salival o cutcula adquirida carente de bacterias; y una matriz secundaria o
pelcula tarda formada por bacterias y polmeros celulares. La cutcula adquirida es una biopelcula
amorfa, electrodensa e inmediatamente adyacente al esmalte del diente, cuyo grosor vara de
acuerdo al sitio, pero se estima entre 1 y 2 um, se forma sobre el esmalte limpio en menos de 2 horas,
por lo cual se denomina cutcula temprana; contiene protenas y glicoprotenas con alto contenido de
treonina, serina y alanina, lo que indica la existencia de adsorcin selectiva en la superficie del
esmalte; en su formacin intervienen interacciones fsico inicas, fuerzas de Wallis e interacciones
hidrfobas, que permiten la fijacin de los componentes con carga positiva de la saliva, orgnicos e
inorgnicos, a los grupos fosfatos de la superficie del esmalte. Posteriormente la pelcula temprana
sufre modificaciones transformndose en la pelcula tarda en la que se asocian componentes de la
saliva, productos bacterianos y exudado gingival desde la enca, el tiempo posibilita el desarrollo de
modificaciones en los ecosistemas instaurados. Algunas especies como S. mitis y Actinomyces viscosus
producen una neuroaminidasa que separa los residuos del cido sillico terminal en la cutcula
temprana y la saliva para exponer productos que actan como receptores para la adhesin de
protenas fijadoras, como la glucosiltransferasa, contribuyendo a la adhesin de algunos MO a la
pelcula dental y por consiguiente a la formacin de la pelcula tarda.

Los biofilms son formados principalmente por cocos Gram+, Haemophilus parainfluenzae,
Fusobacterium y Treponema. Se clasifican segn:
Localizacin:
- Supragingival
- Subgingival
Propiedades
- Adherente
- No adherente
Susan Arias Donoso
359
Potencial patognico:
- Cariognicos
- Periodonto patognico.

Existen distintos mecanismos para regular la formacin de biofilms uno de ellos es eliminar las
pelculas ya formadas, otro es evitar la adherencia de las bacterias a los biofilms ya formados o la
proliferacin de las ya instaladas, una tercera tcnica es alterar la patogenicidad del biofilms, al
cambiar las condiciones internas.

El desarrollo de infecciones periodontales depende de factores relacionados con el nivel
socioeconmico, la higiene oral, la atencin odontolgica, la dieta y la cantidad y calidad de la saliva
(capacidad tamponante, secrecin de inmunoglobulinas y lisozimas).

Por otro lado los factores que favorecen la formacin de caries son: la predisposicin gentica, la
edad (asociada a cambios hormonales), la dieta, la mezcla racial, el dficit de fsforo, calcio y flor, el
sexo femenino, la pregnancia, el padecimiento de enfermedades endocrinas, hemticas y
metablicas, la alteracin morfolgica y la mala disposicin dentaria, la mala higiene oral, la
masticacin unilateral y la existencia de prtesis que retienen los restos de comida. La presencia de
flor en la ruta de la fermentacin inhibe a la enzima enolasa lo que disminuye el riesgo cariognico,
sin embargo un exceso de este compuesto produce una enfermedad llamada fluorosis, que significa
la produccin de debilidad y oscurecimiento de las piezas dentales.

Existen distintos tipos de caries segn el lugar en que se produzcan:
- Caries del esmalte, producidas en fosas y fisuras.
- Caries de las superficies proximales.
- Caries de la raz.
- Caries de la dentina.

El nico agente que es comn a todas las caries es S. mutans, el cual puede estar presente en mayor
o menor grado segn su capacidad de adherencia, los agentes que le siguen en importancia son
Lactobacillus caseii y Actinomyces viscosus, de acuerdo a lo establecido en 1970 por Loesche.

El examen microbiolgico en odontologa tiene como objetivo prevenir, diagnosticar, predecir,
tratar y controlar las enfermedades microbianas. Debido a que la Microbiologa Bucal es una
disciplina relativamente nueva, el diagnstico microbiolgico de las infecciones de la cavidad bucal,
no se realiza con la frecuencia que debera hacerse, no obstante, este tipo de anlisis es una
herramienta importante para el Odontlogo, ya que permite conocer la etiologa microbiana de un
proceso patolgico infeccioso, seleccionar el antimicrobiano adecuado y tambin determinar la
eficacia del tratamiento realizado.

El diagnstico microbiolgico es de tipo presuntivo diferencial sobre la base del cuadro clnico y
radiogrfico. La muestra clnica empleada para tales efectos debe ser tomada a partir del rea
afectada en una cantidad adecuada para realizar las diferentes pruebas diagnsticas, previo a la
administracin de antimicrobianos; evitando arrastrar la microbiota de la piel y mucosas, para esto se
debe secar el campo operatorio con el fin de evitar la contaminacin por saliva; esta muestra debe
ser rotulada con el nombre del paciente, fecha, y origen de la misma, y enviada de forma inmediata al
Susan Arias Donoso
360
laboratorio, pues existen factores que pueden modificar la composicin inicial, como la temperatura,
humedad y algunas sustancias que producen los microorganismos que pueden inhibir el crecimiento
de otros. Cabe destacar que la mayor parte de los microorganismos asociados a las enfermedades de
la cavidad oral son anaerobios facultativos o anaerobios estrictos, por tanto se deben emplear medios
de transporte especiales que permitan la viabilidad de los microorganismos hasta ser sembrados en
los medios de cultivo selectivos. Las muestras a emplear son:
- Muestra de mucosa oral: es tomada por torulado de la superficie de la lesin evitando el
contacto con mucosa sana. La trula se transporta en medio Stuart.
- Muestra de abscesos dentales: la muestra es tomada tras aseo de la cavidad bucal
mediante el uso de enjuague bucal, la extraccin se realiza con jeringa.

Una vez llegada la muestra al laboratorio, se procede a realizar el examen microscpico directo,
aunque su valor es limitado, la siembra en medios de cultivos apropiados, y la identificacin de los
microorganismos en estudio, ya sean de tipo bacteriano, protozoario o mictico, mediante pruebas
bioqumicas convencionales, pruebas rpidas, que incluyen sistemas microbioqumicos y enzimticos
manuales o automatizados; o bien por pruebas de cromatografa gas-lquido, sondas de DNA, IFD y
ELISA. Estas pruebas han sido utilizadas para detectar especies de Porphyromonas, Prevotella,
Streptococcus, Fusobacterium, Candida, entre otros microorganismos.

El conocimiento de la ecologa oral permite confeccionar estrategias de control y prevencin,
delimitar la presencia, estabilidad, sucesin y transmisin de microorganismos, y desarrollar e
implementar sistemas de deteccin de microorganismos ms afines con la realidad.

La determinacin del riesgo cariognico implica la determinacin de la produccin de saliva y sus
propiedades, y de la microbiota cariognica, para lo cual existen varios test disponibles, dentro de
ellos estn:

1. Test de Snyder: Es usado para la determinacin de la susceptibilidad a caries dentales,
midiendo la capacidad de producir cidos por parte de la microbiota oral, principalmente
por el gnero Lactobacillus. Para la realizacin del test se siembra una muestra de saliva
estimulada o activa en un medio slido con azcares fermentables, en agar profundo, con
indicador de pH verde de bromocresol a pH 4,8; cuyo cambio de verde a amarillo y
posteriormente a blanco, es proporcional a la produccin de cido, mientras ms rpido sea
este viraje la microbiota es ms acidognica y por tanto el riesgo cariognico es mayor.
- Si el viraje se presenta a las 24 horas el poder acidognico es alto y se indica: +++.
- Si el viraje se presenta a las 48 horas el poder acidognico es mediano y se indica: ++.
- Si el viraje se presenta a las 72 horas el poder acidognico es bajo y se indica: +.

2. Test de Bahn: indica el poder acidognico de la microbiota y su ubicacin. Para su
realizacin se toma una impresin de las arcadas dentarias, con aliginato, tras lo cual se
hace un vaciado con medio Snyder, el que se saca y se coloca en una placa que se incuba en
estufa a 36 C. Las colonias acidognicas virarn el indicador de pH en los lugares en que se
encuentran.

3. Recuento de S. mutans: para la realizacin de este test se toma una muestra de saliva
estimulada y se realizan diluciones seriadas que se siembran en medios selectivos como
Agar mitis salivarius bacitracina o agar TYCSB. El recuento indica el riesgo cariognico:

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Pronstico
Clase 0 = bajo riesgo de caries

Clase 1= riesgo bajo a moderado;

Clase 2= riesgo moderado a alto de caries
Clase 3= alto riesgo de caries

361
4 UFC/mL de saliva
104 105 UFC/mL de saliva
105 106 UFC/mL de saliva
>106 UFC/mL de saliva

4. Recuento de Lactobacillus: Los lactobacilos son un indicador de que la dieta del paciente
tiene una gran cantidad de carbohidratos, si al realizar el recuento la cantidad es demasiado
elevada se deben tomar ciertas medidas como el cambio de dieta y la disminucin del
consumo de azcares refinados. Para este test se utiliza una muestra de saliva estimulada,
que se diluye en forma seriada hasta 103, sta se siembra en agar tomate, agar LBS o agar
rogosa. El recuento se realiza tras 24 48 horas de incubacin.

Recuento de colonias Expectativa clnica
0
Inmune a caries
1 1 000
Ataque de caries negativa a ligera
1 000 5 000
Ataque de caries ligera
5 000 10 000
Ataque de caries ligero a moderado
10 000 50 000
Ataque de caries moderado a acentuado
50 000 o ms
Ataque de caries acentuado

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362
Diagnstico de anaerobios estrictos.

El hbitat de las bacterias anaerobias est limitado a zonas corporales del hombre y de los animales
donde la tensin de oxgeno es baja; stas forman parte de la microbiota normal de la boca, intestino,
vagina y vas respiratorias altas, en relacin comensal y mutualista, jugando un importante papel en la
resistencia inespecfica infecciones. Sin embargo pueden contaminar de forma pasajera la piel, sobre
todo la del perin produciendo infecciones, ya que la piel es pobre en anaerobios permanentes, a
excepcin de Propionibacterium acnes que vive en las glndulas sebceas. En general estas bacterias
al ser eliminadas al ambiente mueren, a excepcin de los clostridios, que sobreviven gracias a la
formacin de esporas.

Las especies de bacilos Gram- que poseen importancia clnica son:
- Bacteroides, especies sacarolticas resistentes a bilis incluidas en el grupo de Bacteroides
fragilis, poseen alta virulencia y resistencia a antibiticos.
- Porphyromonas, producen colonias pigmentadas de color negro tras varios das de incubacin,
son asacarolticos y no resistentes a bilis.
- Prevotella, especies pigmentadas o no pigmentadas, sacarolticas y no tolerantes a la bilis.
- Fusobacterium, producen cido butrico en forma caracterstica, sin cido isobutrico e
isovalrico.
- Bilophila.
- Otros gneros microaerfilos que necesitan para su crecimiento formato y fumarato.

Entre los cocos Gram- destaca Veillonella y entre los Gram+ poseen especial importancia los gneros
Peptostreptococcus, Anaerococcus, Finegoldia, Micromonas, Peptoniphilus, Schleiferella. Los bacilos
Gram+ no esporulados ms significativos clnicamente son Actinomyces, Propionibacterium,
Eggertella y Eubacterium, y el bacilo Gram+ no esporulado ms relevante es Clostridium. Dentro de
las espiroquetas su mximo representante es Treponemas orales.

Las bacterias anaerobias producen infecciones con al menos dos patrones en cuanto a su
fisiopatologa o patogenia. El primero es el de los cuadros ocasionados por la accin de diferentes
toxinas producidas por diversas especies del gnero Clostridium; estas son infecciones especficas, de
origen habitualmente exgeno, con frecuencia a partir de esporas, y en ocasiones oportunistas.
Incluyen el ttanos, botulismo, gangrena gaseosa, celulitis anaerobia, enteritis necrotizante (C.
perfringens tipo C) en pacientes con dietas hipoproteicas que condicionan un dficit de tripsina de
forma que no se destruye la toxina beta; intoxicacin alimentaria, intoxicacin por colonizacin
intestinal a consecuencia de alteraciones digestivas producidas por ciruga gastrointestinal o por el
consumo de antimicrobianos; inhalatorias, por accidentes de laboratorio o posible bioterrorismo; y
las relacionadas con C. septicum que suelen aparecer en pacientes con cncer colorrectal, leucemias,
linfomas y otras inmunodeficiencias. El segundo patrn es el resultado de la actuacin de
mecanismos patognicos no exotxicos, diferentes segn las bacterias implicadas y a menudo an no
caracterizados, esto significa la aparicin de diferentes infecciones inespecficas, en las que los
sntomas y signos no permiten identificar el agente etiolgico involucrado; su origen es endgeno a
partir de componentes de la propia microbiota, a excepcin de las derivadas de mordeduras, por
tanto requieren circunstancias favorecedoras por parte del hospedador, como roturas traumticas de
las barreras cutneomucosas de las localizaciones que las albergan, llegada a zonas lejanas de sus
hbitats o la diminucin del potencial de xido-reduccin. Es habitual que sean de etiologa
polimicrobiana y mixta.
Susan Arias Donoso
363
Muchas de estas infecciones son piognicas y la presencia de abscesos es caracterstica, se

encuentran: abscesos cerebrales, empiemas subdurales, abscesos epidurales, endoftalmitis, sinusitis
y otitis crnicas, abscesos periamigdalares, caries dentales, periodontitis del adulto, neumonas por
aspiracin, abscesos de pulmn, bronquiectasias, empiemas pleurales, peritonitis secundarias,
abscesos intraabdominales, infecciones de la pared abdominal e intraabdominales, de vas biliares y
abscesos hepticos, procesos infecciosos obstetro-ginecolgicos, artritis y osteomielitis, infecciones
de piel y tejidos blandos como el acn, celulitis, infecciones tras mordeduras, pie diabtico, gangrena,
lceras por presin, etc.

Existe un tercer patrn, que se puede definir como de desequilibrio o sobrecrecimiento de bacterias
anaerobias cuyo mejor exponente es la vaginosis bacteriana, que es un cuadro caracterizado por un
aumento de flujo vaginal, de pH ms elevado (pH >4,5) y con aminas voltiles pero sin leucocitos
polimorfonucleares. Por microscopa es caracterstica la presencia de clulas de descamacin en las
que hay adheridas bacterias con morfotipos de Gardnerella vaginalis y de otras especies ("clue cells").
Algunos de estos MO, como C. difficile, son eminentemente nosocomiales y emergentes.

Dentro de los organismos anaerobios los ms comunes son: C. perfringens, C. tetanis, C. botulinum,
C, difficile, Bacteroides fragilis, Prevotella y Veillonella; sin embargo su bsqueda slo se debe hacer
cuando se pueda discernir su papel y tenga inters etiolgico y teraputico; pues el trabajo de
laboratorio ofrece una gran dificultad, ya que requieren un ambiente totalmente libre de oxgeno
para su aislamiento y el empleo de tcnicas que permitan diferenciarlos de agentes facultativos. Para
proporcionar este ambiente, existen diferentes modelos de cmaras para anaerobios, en las que se
consigue una atmsfera anaerobia mediante una mezcla de gases que contiene 5% de H2, 5 10% de
CO2 y 85 90% de N2. La necesidad de anaerobiosis se debe a la carencia de la enzima superxido
dismutasa, que los hace ser lbiles al oxgeno; sin embargo pueden poseer las enzimas: oxidasa y
pseudocatalasa, que son empleadas para la diferenciacin de gneros o especies. Otra caracterstica
que dificulta el diagnstico es el bajo ritmo de crecimiento de estas bacterias, probablemente debido
a la menor cantidad de energa que aporta la respiracin anaerobia, por tanto muchas veces la
observacin de colonias se logra solo tras 5 10 das de incubacin.

El grupo de anaerobios tiene una importante actividad degradativa de numerosos compuestos
orgnicos pues contienen una amplia variedad de exoenzimas que actan sobre diversos sustratos;
mediante fermentacin producen cidos grasos de cadena corta que permiten cierto grado de
identificacin; estos cidos adems de ser txicos suelen ser malolientes. A travs de la
descarboxilacin de aminocidos se originan carbolitos que algunas veces son inodoros.

La muestra empleada para la deteccin de organismos anaerobios depender del lugar en que se
localice la infeccin, todas ellas deben ponerse en un medio libre de oxgeno y ser remitidas al
laboratorio en forma inmediata, pues la exposicin este compuesto por ms de 30 minutos afecta
considerablemente la viabilidad bacteriana; la refrigeracin de estas muestras no es posible y no
deben transcurrir ms de 15 minutos entre su recepcin y procesamiento. Como habitualmente las
especies encontradas en las diferentes infecciones son las mismas que se hallan en la microbiota
normal, es necesario que las muestras sean tomadas de forma que sta no las contamine, por ello no
se deben estudiar muestras nasales, orales, de vas respiratorias bajas o digestivas, salvo en procesos
muy concretos, como botulismo, diarrea asociada a antimicrobianos y toxiinfeccin por C.
perfringens. En abscesos cerrados, empiemas, infecciones de cavidades cerradas y lquidos estriles
las muestras se deben tomar, por puncin percutnea o aspiracin, empleando medidas de
desinfeccin y evitando el uso de trulas. En las infecciones abiertas es necesario recurrir a muestras
Susan Arias Donoso
364
representativas, que deben ser de la parte profunda, tomadas quirrgicamente por aspiracin
percutnea o, tras la eliminacin de los tejidos necrticos superficiales, por raspado o por aspiracin;
en su defecto, se puede tomar la muestra por hisopado de la base de la lesin. El uso del
broncofibroscopio ha mejorado la toma de muestras en neumonas, otras muestras respiratorias
vlidas son la puncin pulmonar directa y la toracocentesis. En las intoxicaciones por C. perfringens y
C. botulinum se estudian muestras de los alimentos o elementos involucrados.

Infecciones
Muestras
SNAC (abscesos y empiemas)

Cabeza y cuello
Oculares
Endoftalmitis
ORL
- Sinusitis

- Otitis Media Crnica
TRI
- Neumonas

- Empiema pleural
Aparato circulatorio
- Bacteriemia
- Endocarditis
- Pericarditis
Intraabdominales
- Peritonitis y abscesos
- Colecistitis
- Heridas laparotmicas
Tubo digestivo
- Diarrea asociada a antimicrobianos
- Intoxicacin por C. perfringens
Genitales femeninos
Aspiracin y biopsias
Aspirados y biopsias

Aspiracin intraocular

Aspiracin percutnea o por rinoscopia y material
quirrgico de los senos.
Torulado.

Catter telescopado protegido, Lavado broncoalveolar y
Puncin pulmonar percutnea
Toracocentesis

Hemocultivo
Vlvula, verruga
Lquido pericrdico

Aspiracin y ciruga
Bilis tomada quirrgicamente
Tomas en profundidad

Heces
Heces para toxina y recuento
Ciruga, culdocentesis, aspiracin (absceso Bartholino),
aspiracin endometrial protegida, DIUS (actinomicosis)
Puncin suprapbica

Aspiracin
Aspiracin, ciruga y biopsia
Aspiracin percutnea, ciruga y tomas en profundidad.

Alimento sospechoso (recuento)
Alimento sospechoso (toxina, cultivo)
Suero (deteccin de las toxinas, no suele ser positiva en
el lactante)
Contenido gstrico y vmitos (toxinas)
Heces (toxinas y cultivo)
Material de heridas (cultivo)
Muestras ambientales (bioterrorismo)
Torulado nasal (bioterrorismo)
Urinarias
Osteoarticulares
- Artritis
- Osteomielitis
Tejidos blandos
Relacionados con alimentos
- Intoxicacin por C. perfringens
- Botulismo
Ttanos
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Material de la presunta puerta de entrada
365
Las muestras son transportadas segn indica la siguiente tabla:

Muestra
Sistema de transporte
Tiempo ptimo de transporte
Material obtenido por biopsia Viales con atmsfera anaerobia
2 3 horas
Tejido o biopsia
Contenedores estriles
30 minutos
Frascos con atmosfera anaerobia
2 3 horas
Contenedores en bolsas de anaerobiosis
2 3 horas
Trulas
Tubos con atmsfera anaerobia
2 3 horas

El procesamiento inicial de las muestras incluye su homogenizacin, examen directo, tincin Gram e
inoculacin en los medios de cultivo apropiados; lo cual, idealmente, debe realizarse en cmara de
anaerobiosis para minimizar su oxigenacin. Un ambiente anaerobio se logra tambin por medio de
jarras y bolsas de anaerobiosis. Con independencia del sistema utilizado es importante monitorizar el
ambiente anaerobio con una tira indicadora de azul de metileno o de resarzurina (rosado) que en
anaerobiosis se vuelven incoloros.

Esquema del procesamiento
inicial de la muestra
Examen
directo
Medio
lquido
Medio slido
Caldo
tioglicolato
Tincin Gram
Microscpico
Incubacin en
anaerobiosis
Agar Brucella,
SNV, BBE, PEA,
AYE+
Incubacin
al 10% CO2
(Medio reductor,
permite desarrollo
de anaerobios
estrictos y
facultativos)
Agar chocolate,
agar sangre

El examen directo proporciona de forma inmediata informacin semicuantitativa acerca de los

microorganismos presentes y un diagnstico presuntivo de la existencia de bacterias anaerobias, lo
cual es importante para establecer una terapia inicial, ya que el proceso de aislamiento e
identificacin puede demorarse varios das. As, el examen macroscpico de las muestras, olor,
fluorescencia roja con luz UV (Prevotella, Porphyromonas, produccin de protoporfirinas), pigmento,
presencia de necrosis, gas o grnulos de azufre en los tejidos, exudados sanguinolentos o negruzcos
(Actinomyces spp, Propionibacterium, C. perfringens), es suficiente para establecer la sospecha de
infeccin por anaerobios. Por otro lado el examen microscpico por medio de la Tincin Gram es de
gran utilidad en el diagnstico microbiolgico presuntivo, ya que proporciona informacin acerca de
los tipos de bacterias existentes y la cantidad relativa de las mismas. La morfologa y afinidad tintorial
de los bacilos anaerobios Gram- vara segn las diferentes especies, las de Bacteroides, por lo general,
aparecen como bacilos pleomrficos que se tien dbilmente; las formas cocobacilares son sugestivas
de especies pigmentadas de Prevotella o Porphyromonas, Fusobacterium nucleatum suele
presentarse como un bacilo fino y fusiforme, a menudo dispuesto en parejas, al igual que
Susan Arias Donoso
366
Fusobacterium periodonticum, y las especies microaerfilas de Capnocytophaga. Fusobacterium

mortiferum se presenta como un bacilo muy pleomrfico, con filamentos que contienen zonas
hinchadas, o formas redondas y de tincin irregular, morfologa que tambin se puede observar en
Fusobacterium ulcerans y, ocasionalmente, en Fusobacterium necrophorum. La presencia de
pequeos cocos Gram- son indicativos de Veillonella. Los bacilos Gram+ anaerobios adoptan mltiples
formas y pueden aparecer teidos en forma variable, en ellos es necesario buscar esporas para hacer
la diferenciacin entre Clostridium y otras especies, un bacilo Gram+ grueso, de forma rectangular y
sin esporas es sugestivo de C. perfringens, mientras que un bacilo ramificado lo es de Actinomyces o
Propionibacterium.

La mayora de estas bacterias requieren para su crecimiento vitamina K1 y hemina, para su
aislamiento e identificacin presuntiva se recomienda emplear una combinacin de medios
enriquecidos no selectivos, selectivos y diferenciales.
- Agar Brucella o Agar Schoedler: contiene un 5% de sangre de cordero, vitamina K1 (1 ug/mL)
y hemina (5 ug/ml); es el medio ms utilizado, pese a que permite el desarrollo de bacilos
anaerobios facultativos y obligados, las colonias de estos ltimos son pequeas, menores a 1
mm.
- Agar Bacteroides bilis esculina con amikacina (BBE): es un medio selectivo para Bacteroides
del grupo fragilis y Bilophila spp. Contiene amikacina (100 ug/mL) que inhibe la mayora de los
facultativos, 20% de bilis que, casi con exclusividad, permite el crecimiento de las especies
citadas, y esculina que al ser hidrolizada en presencia de un indicador (citrato frrico) vira el
medio a color negro, las especies de grupo fragilis son esculina positivas. Este medio permite
tambin el crecimiento de otras especies, como Fusobacterium mortiferum, Fusobacterium
varium, algunas enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa, enterococos y levaduras, las que
se distinguen el tamao de sus colonias, que suele ser mayor.
- Agar alcohol fenil-etlico (PEA): posee alcohol feniletlico y 5% de sangre de cordero. El
alcohol inhibe el crecimiento de bacilos Gram- y el crecimiento en velo de las especies de
Proteus y de algunas especies de clostridios como C. septicum, facilitando el aislamiento. Se
emplea principalmente para sembrar muestras purulentas o provenientes de una infeccin
mixta.
- Agar yema de huevo (AYE): permite la deteccin de clostridios por la produccin de lipasa o
lecitinasa, se emplea en muestras de tejidos con sospecha de gangrena gaseosa.
- Agar fructosa-cicloserina cefoxitina (CCFA) o Agar yema de huevo cicloserina-cefoxitina
(CCEY): son medios selectivos que permiten el desarrollo de Clostridium difficile.
- Caldo tioglicolato: se emplea como medio lquido de enriquecimiento o mantenimiento para
recuperar bacterias anaerobias en caso de que falle el aislamiento en los cultivos primarios.
Este medio carece de indicador y es suplementado con vitamina K1 (200 uL) y hemina (20 uL).

Inmediatamente despus de la siembra, las placas de cultivo se incuban a 35 37 C en el sistema
de anaerobiosis disponible, si se utiliza cmara de anaerobiosis se puede observar desarrollo a las 24
horas, mientras que en jarras o bolsas de anaerobiosis el desarrollo se presenta a las 48 horas. Si en
las placas no se observa ningn crecimiento se deben reincubar hasta completar 7 das, ya que
algunos anaerobios requieren este tiempo para formar colonias visibles, como Actinomyces,
Porphyromonas, Propionibacterium, Bilophila, etc.).

La identificacin preliminar de la especie se logra de acuerdo a las caractersticas morfolgicas
coloniales y a la observacin microscpica, la capacidad de crecer en 20% de bilis, la susceptibilidad o
resistencia a vancomicina (5 um), kanamicina (1000 um) y colistina (10 um), la interpretacin es:
Susan Arias Donoso

Crecimiento
en bilis
+
+
-
V
367
Susceptibilidad
Interpretacin
Vancomicina Kanamicina Colistina
R
R
R
Grupo Bacteroides fragilis
R
S
S
Grupo Bilophila/Sutterella
V
R
V
Grupo Prevotella/Porphyromonas
R
S
S
Fusobacterium spp.
Grupo Bacteroides urealyticus/
R
S
S
Campylobacter o el gnero Leptotrichia
La identificacin final se establece segn las pruebas indol y catalasa, la capacidad sacaroltica o
proteoltica, estudios de la dotacin enzimtica para lo cual se pueden utilizar sistemas API y
mediante la deteccin de los productos finales de su metabolismo por medio de cromatografa gas-
lquido. Adems puede detectarse la produccin de la toxina A o enterotoxina C mediante EIA.

Cocos Gram+ anaerobios

Producto del metabolismo
cido actico
Prueba de indol

Acido butrico
Negativa
cido butrico
Positiva
cido isocaproico y otros cidos orgnicos

cido caproico y otros cidos orgnicos
Especies
Finegoldia magna
Micromonas micros
Anaerococcus prevotii
Anaerococcus tetradius
Anaerococcus lactolyticus
Anaerococcus vaginalis
Peptoniphilus lacrimalis
Peptoniphilus ivorii
Peptoniphilus indolicus
Peptoniphilus asaccharolyticus
Peptoniphilus harei
Anaerococcus vaginalis
Anaerococcus hydrogenalis
Peptostreptococcus anaerobius
Anaerococcus octavius
Bacilos Gram positivos

Lecitinasa Lipasa Indol Ureasa
+
+
-

+
-
-

+

+
-
+

+
+
Productos metablicos

cido actico
cido butrico
cido isocaproico
Especies
C. novyi A
C. perfringens
C. bifermentans
C. sordellii
C. botulinum
C. sporogenes
C. ramosum
C. clostridioforme
C. tetani
C. septicum
C. butyricum
C. difficile
Propionibacterium spp: confirmacin mediante la deteccin de cido propinico como producto final del
metabolismo. P. acnes: catalasa (+), indol (+) y nitratos (+)
Susan Arias Donoso
368
No se recomienda realizar, de una forma rutinaria, ensayos de sensibilidad a todos los aislamientos
de bacterias anaerobias, estas se realizan en las siguientes situaciones, mediante E-test:
- Estudios peridicos de vigilancia y seguimiento para conocer los patrones locales de
resistencia que permitan seleccionar la terapia antimicrobiana emprica ms adecuada y
detectar la aparicin de resistencias.
- Casos individuales de pacientes que no responden a la terapia emprica, o que presentan
infecciones graves o que requieran terapia prolongada (absceso cerebral, endocarditis,
osteomielitis, infeccin articular, de prtesis, de injertos vasculares, y bacteriemias
recurrentes).
- Estudios de la actividad in vitro de nuevos antimicrobianos frente a bacterias anaerobias.
- Infecciones producidas por especies ms virulentas, como Bacteroides, Prevotella, Bilophila,
Clostridium, Fusobacterium y Sutterella, o con sensibilidad poco predictible.

Botulismo
Es una enfermedad cada vez menos frecuente en pases desarrollados por la implantacin de
medidas preventivas en la elaboracin y conservacin de los alimentos envasados. Es provocada por
las neurotoxinas de C. botulinum, C. butyricum y C. baratii. Se reconocen cinco tipos de
presentaciones clnicas: intoxicacin alimentaria, botulismo de las heridas, botulismo del lactante,
botulismo por colonizacin intestinal y botulismo inhalatorio. Su diagnstico se logra por deteccin
de las neurotoxinas y del agente etiolgico. En la intoxicacin alimentaria deben obtenerse muestras
de suero, heces y del alimento sospechoso. En el botulismo de las heridas debe obtenerse suero,
heces y material tisular o exudativo de la herida infectada. En el del lactante y en el producido por
colonizacin intestinal se recomienda obtener suero, heces y contenido gstrico del paciente, y en el
botulismo inhalatorio, suero, contenido gstrico, heces, torundas nasales y el material sospechoso.

Diarrea y colitis por Clostridium difficile asociadas al uso de antibiticos

Clostridium difficile es la causa ms frecuente de diarrea y colitis asociada al uso previo de
antibiticos en el ambiente hospitalario, con una incidencia de 10 casos por cada 1 000 ingresos. Las
toxinas implicadas son la A o enterotoxina y la B o citotoxina. El diagnstico se basa esencialmente en
la deteccin de stas a partir de heces diarreicas frescas por ensayos de citotoxicidad. El ensayo de
citotoxicidad se basa en la deteccin del efecto citoptico especfico de la citotoxina de C. difficile en
ciertas lneas celulares de mamferos como: fibroblastos humanos, clulas MRC-5 o clulas K-1 de
ovario de hmster chino, para lo cual la bacteria en estudio se cultiva en un caldo de enriquecimiento,
que se filtra, diluye y aade a un cultivo celular, el cual se incuba a 37 C por 48 horas; en paralelo con
un cultivo celular que contiene la antitoxina B. Las muestras de heces para esta deteccin requieren
un pretratamiento con alcohol absoluto durante 30 60 minutos o mediante choque trmico a 80 C
por 10 minutos. Las colonias producidas por C. difficile, tras 24 48 horas de incubacin en
anaerobiosis, son no hemolticas, mates, planas, grandes e irregulares, de color amarillento a grisceo
con olor a cuadra debido a la produccin de p-cresol.

Toxiinfeccin por Clostridium perfringens.

Esta toxiinfeccin se produce por la enterotoxina tipo A de C. perfringens y suele aparecer en forma
de brotes, ms frecuentemente en restaurantes y colegios, debido a cocciones inadecuadas de
productos crnicos y, a veces, vegetales, que contienen esporas de C. perfringens, y a un ulterior
enfriamiento lento. Las esporas sobrevivientes del cocinado germinan dando lugar a las formas
vegetativas que se multiplican activamente por el enfriamiento lento, tras la ingestin, las formas
vegetativas producen endosporas debido al ambiente alcalino del intestino delgado, este proceso de
esporulacin da lugar a la elaboracin y liberacin de la enterotoxina responsable del cuadro que se
Susan Arias Donoso
369
presenta con diarrea acuosa (90%), calambres abdominales (80%), nuseas (25%), fiebre (24%) y
vmitos (9%), sntomas que suelen remitir espontneamente en pocas horas. El diagnstico se realiza
a partir de muestras de heces y del alimento sospechoso en medios especficos para clostridios
sumado a la deteccin de la enterotoxina en heces mediante tcnicas de aglutinacin en ltex, EIA o
ensayos especficos de citotoxicidad en cultivos celulares de clulas Vero. La deteccin parcial o total
del gen de la enterotoxina mediante tcnicas de PCR o sondas marcadas con digoxigenina no implica
que las cepas tengan la capacidad de producirla durante la esporulacin.

Angina de Vincent
Es una infeccin de la cavidad oral caracterizada por faringitis, presencia de exudado membranoso,
aliento ftido y lceras orales. Es causada por ciertas especies aerobias como Borrelia spp o
anaerobias como Fusobacterium spp. El diagnstico se realiza segn los hallazgos clnicos y la tincin
Gram de las lceras bucales en que se observaran espiroquetas, bacilos fusiformes y leucocitos
polimorfonucleares. El cultivo no es til para el diagnstico de esta enfermedad.

Actinomicosis
La actinomicosis es una enfermedad granulomatosa crnica caracterizada por la presencia de
lesiones supurativas que pueden evolucionar a abscesos y fstulas. En ocasiones, se produce una
supuracin purulenta con grnulos macroscpicos de azufre de color blanquecino, amarillento o
marrn. Su principal agente etiolgico es Actinomyces israelii aunque otras especies como A.
naeslundii, A. meyeri, A. odontolyticus, A. gerencseriae o A. viscosus tambin pueden estar implicadas.
Esta infeccin suele ser polimicrobiana y los microorganismos ms frecuentemente encontrados
junto al gnero Actinomyces son Propionibacterium propionicum, Fusobacterium spp, Eikenella
corrodens, Capnocytophaga spp, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella spp,
Porphyromonas spp y algunos estreptococos. El diagnstico se basa en la observacin microscpica
de los grnulos de azufre obtenidos de muestras de tejidos, lavados bronquiales, lquidos corporales,
dispositivos intrauterinos o exudados purulentos, donde se observan bacilos Gram+ en forma de
garrote, normalmente ramificados y que se deben diferenciar de otros microorganismos
morfolgicamente similares como Nocardia spp o Streptomyces spp. El cultivo de estas bacterias
requiere una incubacin mnima de 7 das a 35 37 C en agar sangre para anaerobios, pudiendo
extenderse hasta 2 4 semanas. Frente a muestras con alto riesgo de contaminacin es
recomendable realizar diluciones entre 1/10 y 1/10 000, para posterior siembra en agar Columbia con
y sin metronidazol a una concentracin de 2,5 ug/mL. La morfologa de las colonias de Actinomyces
spp vara de un aspecto liso a una apariencia molar dependiendo del tipo de medio, las condiciones
de cultivo y la edad de las colonias. La diferenciacin de las especies de Actinomyces es difcil.

Infecciones Endometriales
Son infecciones generalmente polimicrobianas con predominio de agentes anaerobios. La muestra
ideal para cultivo es tejido endometrial ya que los agentes causales suelen encontrarse incluidos en el
tejido, sta se siembra en los medios habituales para el cultivo de anaerobios, adems de otros
especficos para bacterias aerobias productoras de infecciones endometriales como agar Thayer-
Martin, agar Shepard Al y agar para micobacterias.

Enterocolitis del paciente con neutropenia

Es una infeccin necrtica del ciego y otras zonas del intestino producida generalmente por C
septicum y, en menor medida, por otros clostridios como C. tertium, C. perfringens, C. sporogenes y C.
sordelli; que se manifiesta con fiebre, dolor abdominal, que aumenta cuando se palpa el cuadrante
inferior derecho del abdomen, y diarrea acuosa ocasionalmente sanguinolenta; los tejidos afectados
Susan Arias Donoso
370
se encuentran edematosos, hemorrgicos, necrticos y contienen numerosos clostridios. Esta

infeccin afecta a pacientes neutropnicos o con procesos oncolgicos gastrointestinales. El
diagnstico microbiolgico se realiza a partir de muestras de sangre, heces y tejido del rea ileocecal
afectada. Tanto C. septicum como el resto de los clostridios implicados crecen muy bien y
rpidamente en los medios de cultivo habituales para anaerobios, donde a las 48 horas de incubacin
producen colonias grandes e irregulares. Las colonias de C. septicum son muy caractersticas ya que
crecen en velo por toda la superficie del medio de cultivo y no crecen en agar con alcohol feniletlico.

Susan Arias Donoso
371
Diagnostico microbiolgico de tuberculosis

La tuberculosis no siempre se encuentra asociada a enfermedades pulmonares, sino que tambin
afecta a otras zonas como el rin, zona gstrica o cerebral en el caso de meningitis por tuberculosis,
circunstancias en que se dificulta el diagnstico de laboratorio. Habitualmente es producida por
Mycobacterium tuberculosis, el cual se caracteriza y diferencia por su pared celular con alto contenido
de cido murmico que le confiere resistencia a ciertos compuestos orgnicos, como solventes , y al
alcohol como desinfectante y decolorante; generalmente se relaciona con otros agentes, como
Nocardia, Rhodococcus y Corynebacterium.

Dentro del gnero Mycobacterium existen 71 especies pero solo algunas de ellas poseen
importancia clnica, morfolgicamente son bacilos o cocobacilos curvados, no esporulados, no
capsulados e inmviles, que se observan con tincin de Ziehl Neelsen, caractersticas que son
relevantes para la pesquisa del agente, aunque no permiten establecer un diagnstico definitivo.
Mycobacterium tuberculosis es una bacteria de crecimiento lento, de modo que la determinacin de
su presencia en muestras clnicas demora alrededor de 90 das, existen otras micobacterias que
tienen la capacidad de desarrollarse con mayor rapidez y que generalmente proliferan bien a
temperatura ambiente, producen pigmentos y son menos cido-alcohol resistentes que las otras
formas patgenas.

El complejo tuberculosis involucra varias especies que son capaces de producir tuberculosis en el ser
humano, estas son:
- Mycobacterium tuberculosis
- Mycobacterium bovis (includas cepas BCG)
- Mycobacterium africanum
- Mycobacterium microti
- Mycobacterium canetti

La presencia de micobacterias en muestras clnicas no siempre significa el desarrollo de un cuadro
tuberculoso ya que existen especies saprfitas que habitualmente pueden aparecer en el laboratorio,
o bien algunos patgenos oportunistas que producen cuadros distintos de la tuberculosis en
pacientes inmunosuprimidos, estas son:
Saprofitos
Patgenos oportunistas
- Mycobacterium gordonae
- Mycobacterium avium
- Mycobacterium terrea
- Mycobacterium intracelulare
- Mycobacterium triviale
- Mycobacterium kansasii

- Mycobacterium scrofulaceum

Algunas de estas especies, como Mycobacterium avium, crecen muy bien en agar sangre de cordero
al 5% y poseen un tiempo generacional ms corto que aquellas que pertenecen al complejo
tuberculosis, este ltimo, a diferencia de los anteriores, requiere medios especiales para su
desarrollo.

Existe otro complejo que produce un cuadro distinto a tuberculosis denominado Complejo Leprae,
al que pertenecen las especies: Mycobacterium leprae-murinum y Mycobacterium leprae, la
enfermedad que producen, lepra, no es frecuente en Chile.

Susan Arias Donoso
372
El diagnstico de tuberculosis se realiza a partir de muestras provenientes del sitio de la lesin

producida por el agente, las que se deben trabajar bajo condiciones de bioseguridad nivel 3, por tanto
se recomienda que las muestras sean enviadas al laboratorio dentro de una bolsa plstica sellada
para disminuir el riego de contagio del personal; aunque el rechazo de muestras no es habitual se
consideran como criterios de exclusin:
- Muestras en envase sin rotular.
- Muestras derramadas (por contaminacin del material).
- Muestras con evidencia de descomposicin.

Dentro de los tipos de muestra para la deteccin de tuberculosis pulmonar, la expectoracin es la
ms comn, sta, idealmente, no debe encontrarse contaminada con saliva, aunque si la presentan
en baja cantidad la muestra no es rechazada; para el diagnstico se requieren dos muestras, una de
las cuales debe tomarse en el momento de la consulta y la otra al da siguiente a primera hora de la
maana, con volumen mnimo de 2 mL, de acuerdo a las recomendaciones del ISP. La toma de
muestra se debe realizar en lugares ventilados y en forma individual, con el fin de evitar la
contaminacin por aerosoles. En pacientes con incapacidad de toser o en nios se emplean tcnicas
quinsicas para inducir la expectoracin y conseguir de este modo una muestra adecuada para el
estudio.

La muestra puede obtenerse tambin por lavado o aspiracin broncoalveolar para lo cual se utiliza
una tcnica llamada fibrobroncoscopa en la cual se ingresa suero fisiolgico con el fin de extraer todo
el material desde lo ms profundo del pulmn; el inconveniente de esta tcnica radica en la
necesidad de administrar anestsicos que disminuyen la viabilidad del patgeno, pudiendo
encontrarse retardos o falsos negativos

En condiciones excepcionales puede realizarse la determinacin a partir de contenido gstrico,
preferentemente para la investigacin de tuberculosis pulmonar en nios con sintomatologa y
antecedentes de familiares con tuberculosis, en esta muestra se buscan bacilos que han sido
deglutidos de manera involuntaria, considerando que son agentes que resisten la acidez estomacal.
Este mtodo no es recomendado en pacientes bajo tratamiento administrado por va oral ya que el
rendimiento de la pesquisa se reduce.

Cuando no se ha encontrado el agente a travs de muestras de expectoracin se puede utilizar
lquido pleural para la deteccin, la muestra es obtenida por pleurocentesis en un tubo con EDTA,
requiriendo al menos 20 mL del material, esta muestra se debe concentrar por centrifugacin, en este
caso no se emplea la tcnica de Petroff ya que es un lquido estril. La biopsia pleural no es muy
habitual, pero s es una muestra adecuada cuando se tiene sospecha, sta debe ser procesada
rpidamente antes de 12 horas, en caso que esto no sea posibl
en suero fisiolgico y no en formalina para evitar el dao al agente.

La presencia de piuria asptica en el sedimento urinario permite sospechar la existencia de
tuberculosis renal o infeccin por anaerobios, el tratamiento de la muestra es complejo debido a la
presencia de componentes con accin de tamponante, principalmente fosfatos, que dificultan la
titulacin. Para el diagnstico de tuberculosis renal se requiere tomar 6 muestras matinales de orina
de primera miccin y segundo chorro (50 mL), recolectada en das sucesivos, tras aseo genital prolijo.
Posteriormente se realiza una concentracin del material, mediante centrifugacin de la muestra,
para la realizacin de baciloscopa en busca de bacilos cido alcohol resistente. La muestra puede ser
obtenida tambin mediante cateterismo o tras masaje prosttico.
Susan Arias Donoso
373
Para la deteccin de micobacterias con localizacin genital se emplean muestras obtenidas por
biopsias del endometrio, trompas, epiddimo u otro tejido, las que son mantenidas en solucin salina,
y nunca en formalina. El procesamiento se debe realizar en un tiempo prudente para evitar la prdida
de la muestra. La deteccin se puede realizar tambin en sangre menstrual, sin embargo es compleja
por la abundante cantidad de eritrocitos que dificultan la titulacin por la tcnica de Petroff.

Para la deteccin de tuberculosis menngea se emplea una muestra de LCR que se debe concentrar
y procesar de manera inmediata por su escaso contenido bacilar, en este caso no se puede exigir una
cantidad determinada de muestra, lo que limita la observacin de BAAR, ya que normalmente no se
toman ms de 5 mL; esta muestra no necesita tratamiento pues normalmente es un lquido estril.

Para la deteccin de micobacterias de localizacin ganglionar se obtiene una muestra por medio de
biopsia de los ganglios o del lquido ganglionar, en estos casos se recomienda la utilizacin de suero
fisiolgico para mantener la hidratacin, no debiendo utilizar formalina para este efecto. El contenido
ganglionar requiere procesamiento inmediato por su bajo contenido bacilar.

En casos de localizacin osteoarticular se toman muestras de tejido medular que deben ser incluidas
en suero fisiolgico estril para mantener la hidratacin hasta su procesamiento; las muestras de
lquido articular deben obtenerse como mnimo en un volumen de 2 mL, el cual debe ser procesado
antes de 12 horas por su escaso contenido bacilar.

La localizacin intestinal es difcil de determina ya que la baciloscopa a partir de muestras de
deposiciones no es confiable, pues la presencia de BAAR puede deberse a M. tuberculosis de
procedencia pulmonar que han sido deglutidos de manera involuntaria o bien por la presencia de
micobacterias no tuberculosas en los alimentos.

Todo tipo de muestra se debe transportar en recipientes con cierre hermtico, idealmente de tapa
rosca, protegidos de la luz y del calor excesivo, teniendo especial precaucin para evitar el derrame
durante su transporte, el cual se debe hacer en cajas selladas con cinta adhesiva y en bolsas
individuales. Los formularios de peticiones se deben encontrar alejados del material, stos son
formularios establecidos por ley, en el cual se incorporan los antecedentes demogrficos del
paciente, y se seala si corresponde a la primera o segunda pesquisa, si se encuentra en tratamiento
o est en control, esto para todas las personas que presenten un problema pulmonar con sospecha
de tuberculosis, a las cuales se les toman muestras en forma aleatoria, esto permite llevar un control
del tratamiento al poder comparar la cantidad de micobacterias existentes antes de iniciar el
tratamiento y luego de haberlo iniciado.

El frotis para la baciloscopa debe ocupar 2/3 del portaobjeto, el cual debe ser identificado
previamente para evitar la contaminacin; para realizar la extensin de muestras mucosas se coloca
una porcin de la muestra entre dos portaobjetos, los que se mueven en direcciones distintas para
disgregar la muestra y dejar una lmina fina, alternadamente se calienta suavemente en el mechero;
las muestras liquidas se deben centrifugar cuando se dispone de un volumen superior a 2 mL, en el
caso de muestras de orina se recomienda centrifugar un volumen mnimo de 50 mL a 3 000 rpm por
30 minutos, del pellet obtenido se coloca 1 o 2 gota sobre un portaobjetos previamente delimitado.
Las muestras slidas, generalmente proveniente de biopsias, se deben macerar con un mortero
estril, y, si es necesario, ayudndose con un poco de arena fina estril, posteriormente se agrega una
pequea cantidad de agua estril o suero fisiolgico sobre el macerado, de la cual se toman 1 o 2
gotas libres de arena que se disponen sobre un portaobjeto delimitado previamente. Las muestras
Susan Arias Donoso
374
mucosas de expectoracin se fijan al calor suave del mechero, mientras que para las muestras

a temperatura ambiente hasta el da siguiente para su tincin. Debido a la gran cantidad de aerosoles
producidos este procedimiento debe realizarse bajo condiciones de bioseguridad nivel 3, en un cuarto
totalmente delimitado y restringido.

La tincin de Ziehl Neelsen es una tcnica que se desarrolla en tres fases, una de coloracin
especifica, en que se emplea el colorante primario que se introduce en la estructura bacteriana
mediante la aplicacin de calor, a esto le sigue un proceso de decoloracin que utiliza alcohol cido;
finalmente se emplea una coloracin de contraste. Esta tincin permite la observacin de bacilos que
se tien de manera muy irregular, muchas veces estos se encuentran agrupados lo que justifica la
necesidad de disgregar la muestra en el portaobjetos con el fin de aislarlos y poder observar su
morfologa.

La observacin microscpica se hace con lente de inmersin y ocular con aumento 8 a 10X, en el
caso de las muestras de orina se debe leer un mnimo de 5 zonas representativas del extendido,
mientras que en las de expectoracin se debe leer un mnimo de 100 campos tiles si la cantidad de
BAAR es menor a 1 por campo; si esta cantidad vara entre 1 y 10 BAAR por campo se debe leer un
mnimo de 50 campos, mientras que si dicha cantidad supera los 10 BAAR por campo se deben leer
20 campos.

& Z Z
ZZ
Z
supera los 10 BAZZ^Z
menor a 10 se debe dejar registro interno de dicho nmero. En caso que la observacin con fucsina
presente muy baja cantidad de BAAR se recomienda emplear la tincin con fluorocromos.

El mtodo ms utilizado para descontaminar las muestras clnicas es el de Petroff. El NaOH y el
H2S04 a las concentraciones empleadas, son mucho menos txicas para las micobacterias que para las
bacterias asociadas. En una primera etapa, el NaOH lica el mucus que rodea las bacterias. En una
segunda etapa, estas ltimas, ms sensibles a la accin de la soda, son progresivamente destruidas,
mientras que las micobacterias preservan su vitalidad. Estos dos tiempos que se efectan
simultneamente, representan el tratamiento de la muestra, llamado comnmente homogenizacin.
Las micobacterias resisten la accin del NaOH por ms o menos 5 horas, y la del H 2S04 por ms o
menos 30 minutos. Sin embargo, a estos lmites la viabilidad es muy escasa.

La tcnica consiste en colocar en tubos de fondo cnico, en partes iguales, la muestra y NaOH al 2%,
lo cual se agita en cmara a 37 C por 20 minutos, o 30 minutos si el agitador se encuentra a
temperatura ambiente, si no se dispone de agitador se debe agitar manualmente por 5 minutos de
forma vigorosa, tras lo cual se incuba en estufa de cultivo a 37 C por 20 minutos, posteriormente se
vuelve a agitar por 5 minutos. En una segunda etapa se neutraliza el medio mediante la adicin de
H2S04 al 4%, tras haber adicionando un indicador de pH, el cido se agrega gota a gota agitando el
tubo hasta observar el viraje del indicador.

El fosfato trisdico, el cloruro de benzalconio y acetil cistena son algunos de los agentes
liqueficantes del mucus, utilizados en otros procedimientos descontaminantes.
Susan Arias Donoso
375
Para la siembra se emplean entre 0,3 y 0,5 ml de la muestra descontaminada en 3 medios de

Lowenstein Jensen, a los cuales se les quema el algodn y se hunden sin tocar el medio, tras lo cual se
disponen en una caja de fondo inclinado por 24 48 horas a 37 C, una vez transcurrido este tiempo
los tubos se taponan con tapn de caucho, parafina, nylon o parafilm. En caso de muestras de orina y
otros lquidos se recomienda sembrar 6 tubos.

Los medios que se emplean para el cultivo son:
Slidos
En base de agar
- Middlebrook 7h10, Middlebrook 7h10 selectivo
- Middlebrook 7h11, Middlebrook 7h11 selectivo
- Middlebrook biplaza (agar 7h10/7h11)

Sobre base de huevo
- Lowenstein Jensen
- Lowenstein Jensen gruft: adicin de cido nalidxico y penicilina.
- Lowenstein Jensen con cido pirvico
- Lowenstein Jensen con huevo

Lquidos
- Medio BACTEC 12B: asociado a tcnicas automatizadas
- Caldo Middlebrook 7h9
- Septi-check BAAR

El ms utilizado es el medio de Lowenstein Jensen, fabricado a base de huevo, de tipo selectivo por
la presencia de verde malaquita y asparragina.

La primera observacin de los tubos se hace a las 48 72 horas con el fin de detectar contaminacin
por microbiota asociada, si esta alteracin se presenta en todos los tubos sembrados se solicita nueva
muestra. La segunda revisin se hace a los 30 das, fecha en que se informara todo lo positivo y la
contaminacin tarda, incluyendo colonias de Nocardia. La ltima revisin se realiza a los 60 das con
emisin del informe definitivo ya sea negativo o positivo especificando los das. El informe se realiza
en base a la suma de los recuentos de las colonias desarrolladas en todos los tubos sembrados, las
colonias tpicas de Mycobacterium tuberculosis son secas, rugosas y con una leve coloracin marfil. Si
se desarrollan entre 1 y 50 colonias se informa el nmero exacto de colonias desarrolladas, en el caso
que las colonias sean no confluentes (que coincide en el mismo punto que otro) se informa: ms de
50 colonias, si las colonias son confluentes se informa: incontables colonias.

Actualmente se emplean otros mtodos para detectar la presencia de Mycobacterium tuberculosis,
como tcnicas de hibridacin o PCR, que poseen una mayor sensibilidad, especificidad y rapidez.

El estudio de susceptibilidad incluye: rifampicina e isoniazida, con el fin de monitorear resistencia
adquirida a estas drogas que han adquirido estas especies.

Susan Arias Donoso
376
Microbiologa: Anexos
Diagnstico microbiolgico de micosis.

El diagnstico de las micosis se realiza a travs de una correcta recoleccin de la muestra clnica y su
posterior examen microscpico, adems de la realizacin de cultivo e identificacin segn sus
caractersticas morfolgicas, bioqumicas y serolgicas, estudio inmunolgico en el enfermo y estudio
histopatolgico; sumado a los antecedentes que acompaan al material clnico, tanto personales
como clnicos y geogrficos, considerando la edad, sexo, procedencia, viajes, ocupacin, las
caractersticas de la lesin y su evolucin, teniendo en cuenta si las lesiones slo afectan a la piel
lampia o comprometen pelos, si existe invasin de las uas y su tamao.

La muestra debe obtenerse en cantidades suficientes desde un lugar representativo de la lesin y
del borde activo, desde una zona libre de ungentos y cremas, colectada y transportada en
condiciones estriles. Si el paciente est en tratamiento, ste debe ser suspendido por 10 a 15 das, y
hasta un mes, segn el antimictico empleado, sin embargo se puede intentar el diagnstico an con
tratamiento. El tipo de muestra depender del tejido afectado:

- Pelos: son extirpados con pinzas desde el borde de las lesiones, a fin de examinar el bulbo
piloso y conocer el grado de invasin del hongo, en un nmero que oscila entre 5 y 7 pelos. Se
recomienda raspar con las placas de alopecia para su siembra posterior.
- Uas: se obtienen fragmentos o raspado de las uas, de su parte superior o inferior segn la
zona de infeccin, en el caso de perionixis se puede obtener pus por torulado de la lesin.
- Lesiones de mucosa: torulado de las superficies comprometidas.
- Desgarro: tomadas en la maana tras aseo prolijo de boca y dientes, la cual se obtiene en
forma estril y no debe contener saliva.
- Biopsia: se mantiene en solucin salina 0,9% hasta su anlisis, es til para el diagnstico de
rinosporidosis, cromoblastomicosis, por observacin de cuerpos esclerticos; actinomicosis y
micosis oportunistas.
- Pus: para diagnstico de actinomicosis, nocardiosis o micetomas, ste se obtiene de procesos
supurados, previa desinfeccin con lugol, mediante jeringa.
- Mdula sea y sangre: para medulocultivo y hemocultivo.
- Lquido cefalorraqudeo: para identificacin de C. neoformans mediante tincin con tinta
china.
- Secrecin vaginal y uretral: se busca Candida y excepcionalmente Actinomyces.
- Escamas de piel: La extraccin se hace por raspado enrgico de las escamas perifricas de la
lesin usando un bistur estril.

El transporte de muestras secas se puede realizar en bolsa plstica limpia o papel, en el caso de
hisopos se requiere el uso de medios de transporte como caldo nutritivo o solucin salina, los tejidos
se transportan en frasco de vidrio o plstico.

La observacin directa de la muestra se realiza principalmente en montajes con KOH 20% ya que
tiene un mayor rendimiento; con ste las hifas se ven refringentes. Para la observacin con KOH se
adicionan dos gotas de ste y se calienta suavemente, cuidando que el reactivo no hierva, esto facilita
la penetracin del KOH en el hongo, se debe ejercer una leve presin en el cubreobjeto para liberar
las hifas y eliminar los artefactos de tcnica que podran dar falsos positivos; la adicin tinta Parker 51
azul o tinta Schaefer 22, permite una mejor visualizacin y contraste de los hongos en especial en los
casos de pitiriasis versicolor, causada por M. furfur, que se colorea intensamente de azul a diferencia
Susan Arias Donoso
377
de otras levaduras. Se debe observar al menos 2 o 3 lminas por muestra con aumento 10x o 40x. La
tincin con clorolactofenol es til para la observacin de pelos y la determinacin del tipo de
parasitismo piloso, que orienta el diagnstico, adems permite mantener la preparacin
indefinidamente. La tincin con azul de lactofenol es til para la observacin de secreciones; y la
tincin Gram para la observacin de levaduras, y diferenciacin con Actinomyces y Nocardia. Se
puede emplear tambin tinta china para la observacin de cpsula y el diagnstico de C. neoformans,
u otras tinciones histopatolgicas. La tincin con Giemsa se emplea para H. capsulatum y
Paracoccidioides. La tincin de Ziehl Neelsen descarta un cuadro similar a micosis causada por M.
tuberculosis y Nocardia spp.

El cultivo se realiza en agar Sabouraud glucosado con o sin la adicin de antibiticos, Lactrimel, DMT
para estudio macroscpico de las colonias, debiendo sembrar 3 tubos para aumentar el rendimiento.
Tambin se puede realizar microcultivo que consiste en el depsito de un trozo de agar Sabouraud en
un portaobjeto que se siembra por sus 4 costados y se tapa con un cubreobjeto estril, incubado en
cmara hmeda, el crecimiento del hongo fija el cubreobjeto; en l se observan las caractersticas
microscpicas claramente y sin alteracin por el raspado. El dismorfismo se identifica por cultivo
paralelo a 25 C en agar Sabouraud y a 37 C en agar BHI. Los hongos permanecen vivos en pelos y
escamas de piel y uas durante das o semanas, pero es preferible sembrar de inmediato y en tubos
para disminuir la probabilidad de contaminacin; la siembra de muestra de piel o uas se realiza con
asa en filamento con su extremo distal doblado en ngulo recto, con la cual se pica el agar
manteniendo distancia de 1,5 cm entre cada picadura. La incubacin se extiende por 2 a 3 semanas
en levaduras y hasta por un mes para hongos dermatofitos, se debe considerar que los hongos
contaminantes crecen por lo general durante la primera semana. Los hongos presentan una gran
variedad de colonias que van desde similares a las bacterianas hasta colonias muy algodonosas que
pueden cubrir toda la superficie de cultivo, las caractersticas de las colonias fngicas son en muchos
casos particulares a determinados hongos, as la correcta interpretacin del anlisis de la colonia es
un paso importante en el proceso de identificacin. Sin embargo la colonia de muchos hongos
filamentosos puede variar considerablemente entre un medio y otro. Conocer las colonias de hongos
patgenos es importante para identificarlos en cultivos polimicrobianos, obtenidos frecuentemente
en micosis superficiales y cutneas.

Caractersticas macroscpicas de colonias fngicas:
- Textura: determinada por la longitud del micelio areo y el nmero de conidios presentes:
glabra, pulverulenta, granular, aterciopelada, vellosa, algodonosa, mucosa, cremosa, crea y
membranosa.
- Aspecto: brillante u opaca, hmeda o seca.
- Topografa o superficie: lisa, rugosa, plana, convexa, umbilicada, plegada, cerebriforme y
verrucosa.
- Color: blanco, crema, verde, salmn, negro, etc.
- Pigmento: presente o ausente. Si est presente, definir el color y si difunde en el medio o
est restringido a la colonia.
- Borde: regulares, irregulares y radiado.

Las clulas fngicas presentan morfologa variable, inclusive dentro de los organismos de una misma
especie y cepa, mostrando gran diversidad en las estructuras de propagacin, dispersin y
fructificacin, tanto en su forma como en su tamao. Las caractersticas microscpicas incluyen:
- Blastoconidio: organismo unicelular, globoso a elipsoide que se origina por gemacin a
partir de una clula madre.
Susan Arias Donoso
378
Pseudohifa: cadena de clulas, formada por levaduras yemantes que semejan una hifa,
pero que presentan constricciones a nivel del septo y que en el sitio de ramificacin parten
con un tabique. Nunca llegan separase de la levadura de origen.
- Hifa cenoctica: hifas sin septos o tabiques.
- Artroconidio: clulas rectangulares de paredes gruesas formadas por fragmentacin de
estructuras tubulares de los hongos.
- Clamidoconidios: estructura de resistencia, producida como respuesta a las condiciones
adversas del medio. Son clulas globosas u ovoides, de pared doble y gruesa, localizndose
a nivel terminal, proximal e intercalar.
- Cpsula: estructura de mucopolisacridos localizada externamente al blastoconidio.

La identificacin se logra, en hongos filamentosos, de acuerdo a sus caractersticas macroscpicas y
microscpicas, en el caso de hongos levaduriformes se realizan pruebas bioqumicas y test de
filamentacin; adems se puede realizar deteccin de antgenos capsulares para la identificacin de
C. neoformans. Tambin se pueden emplear sondas de cidos nuclicos para investigacin.

La deteccin de IgG tiene valor diagnstico y sirve para el monitoreo de la infeccin, se detecta por
fijacin del complemento, inmunodifusin, inmunoelectroforesis, inmunofluorescencia, ELISA y PCR.
La IgM se expresa en la etapa aguda de la enfermedad y a veces da reacciones no especficas que
luego se negativizan, al desaparecer la IgM aumenta la IgG. La especificidad depende del tipo de
prueba y de la IgG.

El informe se realiza tras examen microscpico directo y es entregado de inmediato al mdico, debe
decir:
- En
- En Candida

- En histoplasmosis, cromoblastomicosis, coccidiomicosis y criptococosis se informa, por
Paracoccidioides brasiliensis o bien se observan
clulas levaduriformes de pared gruesa con gemaciones en rueda de timn de barco:
Paracoccidioides brasiliensis
- En ^Piedraia hortae
- En aspergilosis informar: observa micelio tabicado, dismrfico, en ngulo de 45:
Aspergillus
- troconidios caractersticos de Trichosporon
Susan Arias Donoso

Hongo
Dermatofitos
Medio de cultivo
Agar Sabouraud
C. albicams
Incubacin
24 28 C
Agar Sabouraud
Lactrimel
Otras levaduras Agar Sabouraud
Lactrimel
P. hortae
Agar Sabouraud
C. neoformans Agar Sabouraud sin
actidiona
Lactrimel
24 28 C
37 C
24 28 C
H. capsulatum
Tubos de:
Agar Sabouraud-CAF
Agar glucosado (2)
Agar sangre-CAF (2)
Tubos de:
Agar Sabouraud-CAF (2)
Agar glucosado (2)
Agar sangre-CAF (2)
Tubos de:
Agar Sabouraud-CAF (2)
Agar glucosado (2)
Agar sangre-CAF (2)
Agar Sabouraud
Lactrimel
28 37 C
Agar Sabouraud
Lactrimel
Agar Sabouraud
Lactrimel
Agar Sabouraud
Lactrimel
24 28 C
P. brasiliensis
C. immitis
Aspergillus
Geotrichum
Torulopsis
S. schenkii
24 28 C
24 28 C
28 37 C
28 37 C
28 37 C
28 37 C
24 37 C
379
Observacin
Macroconidias y microconidias. rgano perforador.
Ureasa. Pruebas de requerimientos nutricionales en
algunas especies.
Tbulo germinativo. Pseudomicelio y clamidosporas.
Asimilaciones y fermentaciones.
Pseudomicelio, morfologa. Asimilaciones y
fermentaciones.
Ascos tpicos con 8 ascosporas.
Colonia mucosa, cpsula. Urea. Asimilaciones y
fermentaciones para establecer especies. Discos de
cido cafeico o extracto de semilla de Guizotia
absyssinica.
28 C: macroconidias tuberculadas.
37 C: colonia levaduriforme con clulas ovaladas
28 C: colonia poco vellosa. Sin estructuras

diferenciales.
37 C: colonia levaduriforme con clulas yemantes en
rueda de timn de barco.
28 C: colonia blanco algodonosa sin fructificacin y
con las caractersticas clamidoartrosporas.
37 C: desconocida. Tejidos: esporangios.
Observar color de la colonia. Esporforo (recto o
flexuoso). Vescula. Forma del esterigma y localizacin
de conidias.
La tpica fragmentacin del micelio en artroporas.
Ausencia de pseudomicelio y cpsula. Asimilaciones y
fermentaciones.
24 C: colonia blanca micelial con microconidias en
margarita.
37 C: colonia levaduriforme con las tpicas clulas
alargadas como cigarrillos puros o navetas.
Susan Arias Donoso
381

Anexos

Esquemas de trabajo de muestras clnicas

Lquido cefalorraqudeo
Transportar en frasco estril y procesar en el acto, de no ser posible incubar a 35 o 36 C, nunca
refrigerar pues N. meningitidis y H. influenzae pierden su viabilidad. Si se sospecha de meningitis
viral se debe congelar una parte de la muestra.
Centrifugar el LCR en tubo estril: 2 500 3 000 rpm por 10 a 30 minutos, guardando una parte para
examen citolgico, despus de centrifugar hacer Gram directo del sedimento y realizar dos o ms
extendidos par tincin de Ziehl Neelsen u otro. Si hay sospecha de meningitis criptocccica se debe
realizar preparacin al fresco del sedimento con tinta china para ver cpsula, teniendo cuidado de
no confundir C. neoformans con polimorfonucleares, su resultado debe ser informado de inmediato.
Siembra: Agar sangre con estra de S aureus o agar chocolate incubado en microaerofilia a 35 36
C hasta 72 horas. Agar Mac Conkey en nios menores de 30 das para pesquisa de E. coli incubado a
35 37 C en aerobiosis. Caldo Tryptosa ms tres gotas de sangre, incubado en microaerofilia hasta
72 horas a 35 37 C, ste se debe informar a las 24 y 72 horas cuando este positiva. Si hay
sospecha de meningitis tuberculosa sembrar en 2 a 3 tubos de Lowenstein Jensen. Frente a
sospecha de hongos, sembrar en agar Sabouraud sin cicloheximida.
Agentes ms frecuentes:
- Meningitis del recin nacido (1 30 das): son causadas fundamentalmente por enterobacterias,
siendo E. coli el responsable del 80 90% de los casos, se aslan adems K. pneumoniae,
Enterobacter, Proteus y Salmonella, entre otras. Otro agente importante es S. agalactiae (grupo
B). S. pneumoniae, Enterococcus, N. meningitidis, H. influenzae y Staphylococcus son aislados con
menor frecuencia en este grupo etario. Cuando se asla P. aeruginosa, B. cepacia,
Flavobacterium, Acinetobacter debe sospecharse de una infeccin nosocomial.
- Meningitis del lactante (1 mes a 18 aos): es producida fundamentalmente por N. meningitidis,
H. influenzae y S. pneumoniae.
- Meningitis del preescolar (2 6 aos): es producida en orden de frecuencia por H. influenzae, S.
pneumoniae y S. aureus, aun cuando ocasionalmente se observan otros agentes. Esto cambia en
un brote epidmico donde predomina N. meningitidis.
- Meningitis del adulto: los tres principales agentes son: S. pneumoniae, N. meningitidis y las
enterobacterias. H. influenzae se encuentra en menor porcentaje.

Se debe tener consideracin con L. monocytogenes pues produce meningitis en neonatos, mujeres
embarazadas, ancianos e inmunodeprimidos, con una frecuencia baja pero de alta importancia.

Informe: microorganismo patgeno y su antibiograma. La tincin Gram debe informarse de
inmediato una vez recibida la muestra.
Susan Arias Donoso
382
Orina por miccin sonda o cateterismo

Siembra: Agar Sangre y Mac Conkey, incubacin aerobia por 24 horas a 37C.
Recuento: asa calibrada (1 um). Cada colonia debe multiplicarse por 1000 para obtener recuento
final. Si el asa es de 10 um, se debe multiplicar por 100, este ltimo tipo de asa se recomienda
cuando la orina es tomada por puncin suprapbica.
Agentes frecuentes: en general las ITU no complicadas de poblacin ambulatoria que no han sido
sometidos a instrumentacin y tratamiento antimicrobiano, son monomicrobianas causadas en ms
del 90% por enterobacterias, de ellas el 80% se debe a E. coli y el resto a Klebsiella y P. mirabilis. Un
10 a 15% tienen como agente a S. saprophyticus.
En pacientes hospitalizados E. coli sigue siendo el ms aislado, pero en un porcentaje menor (40
50%). El resto est representado por Klebsiella, Proteus, Enterobacter y Pseudomonas. Tambin se
asla Providencia, Serratia, Morganella y Acinetobacter. Entre los Gram+ destacan Enterococcus y S.
aureus. En estos pacientes son ms frecuentes las infecciones mixtas. Los microorganismos
anaerobios rara vez producen ITU, las candidiurias son raras, observndose en especial C. albicams
en pacientes con catter vesical que han recibido antimicrobianos.
Otros microorganismos que pueden causar ITU son G. vaginalis, S. agalactiae y U. urealyticum
especialmente en mujeres embarazadas. Corynebacterium urealyticum es un patgeno reconocido
del tracto urinario debido a su intensa actividad uresica, capaz de alcalinizar rpidamente la orina
produciendo precipitacin de cristales de fosfato amnico magnsico, con posterior formacin de
clculos.
Consideraciones especiales en el antibiograma: en embarazadas y nios no deberan utilizarse
sensidiscos de aminoglicsidos, quinolonas ni nitrofurantona, sin embargo queda a criterio mdico
su utilizacin.
Informe:
Z>

Deposiciones para coprocultivo

Si la trula no viene en sistema de transporte (Cary Blair) y viene seca, no trabajar, informndose

Muestra proveniente de lactantes o RN (menores de 2 aos):

Agentes: Salmonella, Shigella, ECEP, ECEI, Y. enterocolitica y Campylobacter termotolerantes. Puede
considerarse la bsqueda de Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus.
Siembra: Agar SS o XLD y Mac Conkey incubar 24 horas a 37 C. Caldo Selenito, incubar 16 a 18
horas a 37 C, resembra en agar SS o XLD. Agar Skirrow modificado, incubar en microaerofilia por 48
horas a 42 C. Agar TCBS, incubar a 37 C por 24 horas, se debe sembrar uno de cada 5
coprocultivos.
Informe: Salmonella, Shigella, Y. enterocolitica,
ECEP, ECEI ni Campylobacter
Susan Arias Donoso
383
Muestras provenientes de Adultos y Peditricos mayores de 2 aos.

Agentes: Salmonella, Shigella, ECEI, Y. enterocolitica y Campylobacter termotolerantes. Puede
considerarse la bsqueda de Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus.
Siembra: Agar SS o XLD y Mac Conkey incubar 24 horas a 37 C. Caldo Selenito, incubar 16 a 18
horas a 37 C, resembra en agar SS o XLD. Agar Skirrow modificado, incubar en microaerofilia por 48
horas a 42 C. Agar TCBS, incubar a 37 C por 24 horas, se debe sembrar uno de cada 10
coprocultivos.
Informe: Salmonella, Shigella, Y. enterocolitica, ECEI
ni Campylobacter

Pus y secreciones de heridas

Microorganismos ms frecuentes:
- Heridas traumticas: S. aureus, S. pyogenes, E. faecalis, Pseudomonas, E. coli, Proteus,
Flavobacterium, Acinetobacter y Stenotrophomonas. Anaerobios: C. perfringens y C. tetani.
- Infeccin de heridas post-quirrgicas: S. aureus, Proteus, E. coli, Pseudomonas,
Stenotrophomonas, Klebsiella, Enterobacter, Flavobacterium, Acinetobacter, Clostridium y
Bacteroides.
- Infecciones post-aborto sptico: Clostridium.
- Endometritis post-aborto: Bacteroides fragilis, S. aureus, P. aeruginosa, S. pyogenes, S.
agalactiae, E. faecalis, E. coli, G. vaginalis, C. trachomatis y Mycoplasma.
- Quemaduras: P. aeruginosa y S. aureus.
- Abscesos pulmonares (empiema pleural): S. aureus, Klebsiella, S. pyogenes, S. pneumoniae y
otras enterobacterias. Anaerobios F. nucleatum, P. melaninogenica, cocos Gram+ y Actinomyces.

Gram directo.

Siembra: Agar Sangre y Mac Conkey, incubar por 24 horas a 37 C en aerobiosis, o Agar Sangre
Hemina-Vitamina K si se hace cultivo anaerobio. Caldo tioglicolato, incubar 24 horas a 37 C en
aerobiosis, si la Gram se observan las mismas morfologas que en Agar Sangre y Mac Conkey,
descartar, si no resembrar en otros medios. La siembra en medios especiales se realiza frente a un
diagnstico especfico o en base a lo observado en el Gram directo.

Informe: del o los microorganismos patgenos y su antibiograma. El Gram directo se informa solo
cuando se solicita o frente a hallazgo importante.

Secrecin ocular
Microorganismos ms frecuentes: S. aureus, Haemophilus spp, S. pneumoniae, Moraxella lacunata,
Pseudomonas spp, enterobacterias, ocasionalmente Corynebacterium xerosis, Mycobacterium,
Nocardia, Fusarium y Actinomyces. Anaerobios: Propionobacterium, Peptostreptococcus y
Peptococcus. Oftalmia neonatorum: N. gonorrhoeae. Conjuntivitis de inclusin: C. trachomatis.
Gram directo.
Susan Arias Donoso
384
Hemina-Vitamina K si se hace cultivo anaerobio. Agar Chocolate incubado en microaerofilia a 35
36 C cuando al Gram se observan morfologas sugerentes de N. gonorrhoeae. Caldo tioglicolato
incubado 24 horas a 37 C en aerobiosis, si la Gram se observan las mismas morfologas que en Agar
Sangre y Mac Conkey, descartar, si no resembrar en otros medios. La siembra en medios especiales
se realiza frente a un diagnstico especfico o en base a lo observado en el Gram directo.


Secrecin tica

Microorganismos ms frecuentes: conducto auditivo externo: P. aeruginosa, S. aureus, M. morganii
y Proteus. Conducto auditivo medio: S. pneumoniae, H. influenzae y M. catarrhalis.

Gram directo.

Hemina-Vitamina K si se hace cultivo anaerobio. Agar Chocolate incubado en microaerofilia a 35
36 C. Caldo tioglicolato incubado 24 horas a 37 C en aerobiosis, si la Gram se observan las mismas
morfologas que en Agar Sangre y Mac Conkey, descartar, si no resembrar en otros medios. La
siembra en medios especiales se realiza frente a un diagnstico especfico o en base a lo observado
en el Gram directo.


Secrecin farngea

Microorganismos ms frecuentes: S. aureus, S. pneumoniae, S. pyogenes, Haemophilus y bacilos
Gram negativos.

Gram directo: para establecer el estado de la microbiota o para observar morfotipos de
importancia. Si la muestra correspondiera a Pseudomembrana farngea y esta tincin revelara la
presencia de abundantes levaduras y pseudohifas, sembrar en agar Sabouraud e incubar a 25 26
C por 48 72 horas. Un a pseudomembrana farngea puede tratarse de una amigdalofaringitis por
asociacin fusoespiroquetal (Angina de Vincent), en este caso, hacer Gram directo prolongando la
coloracin con safranina, para mejor observacin de Borrelia y Fusobacterium spp. Si la
pseudomembrana correspondiera a Difteria realizar tincin de Loeffler o Neisser, o Azul de Metileno
para observacin de grnulos metacromticos.

Siembra: agar sangre con estra de S. aureus o agar chocolate incubado a 37 C en microaerofilia por
24 horas. Agar Mac Conkey si al Gram se observan bacilo Gram- en predominio.

Informe: el o los microorganismos patgenos aislados, con su antibiograma si corresponde.
Susan Arias Donoso
385
Secrecin nasal

Agentes ms frecuentes de sinusitis: S. pneumoniae, H. influenzae no capsulados, S. aureus. Con
menor frecuencia anaerobios (Peptostreptococcus, Bacteroides), M. catarrhalis, Pseudomonas spp.

Gram directo: para escoger medio de cultivo.

Siembra: Agar Sangre con estra de S. aureus o Agar Chocolate, incubado a 37 C en microaerofilia
por 24 horas.

Informe: el o los patgenos aislados ms su antibiograma.

Desgarro (expectoracin)

Agentes bacterianos ms frecuentes de infecciones del tracto respiratorio bajo (50%): S.
pneumoniae (90%), se debe considerar que existe entre un 5 y 70% de portacin asintomtica, K.
pneumoniae (5%), en enfermos debilitados principalmente, H. influenzae (1%), en nios de 4 meses
a 4 aos principalmente, y S. aureus. En menor frecuencia se encuentran: Mycoplasma pneumoniae,
Legionella pneumophila, M. tuberculosis, Aspergillus spp.

Gram directo: realiza para evaluar calidad de la muestra y observar morfotipos de importancia que
puedan orientar los medios de cultivo a utilizar. En general solo se informa cuando el mdico lo
solicita o cuando hay un hallazgo de importancia como suele ser la observacin de levaduras o hifas.

La decisin de trabajar o no una muestra de desgarro se realiza en base a la presencia de clulas
descamativas a la tincin Gram observada a 100x. En trminos generales se valoran como
aceptables las muestras con menos de 25 clulas descamativas y ms de 25 PMN por campo, o
aquellos que corresponden a los grupos 4, 5 y 6 segn el esquema de graduacin de Murray y
Washington.

Baciloscopa: solo si es solicitada, realizar tincin de Ziehl Neelsen de 3 lminas para un ptimo
resultado.

Siembra: Agar Sangre con estra de S. aureus incubado a 37 C en microaerofilia, y agar Mac Conkey
si se observan bacilos Gram- al Gram.

Informe: el o los patgenos aislados con su antibiograma respectivo. Si se solicit baciloscopa
informar adems la observacin, basado en lo establecido para Chile:

(+)
menos de un BAAR por campo, en 100 campos observados.

(++) 1 10 BAAR por campo en un mnimo de 50 campos observados.

(+++) ms de 10 BAAR por campo en un mnimo de 20 campos observados.

Si la lectura es negativa inforresistentes Z

encontradas.

Susan Arias Donoso
386
Microorganismos de importancia industrial

La microbiologa industrial es un campo dedicado a la utilizacin comercial de microorganismos para
la generacin de elementos de inters industrial, en procesos en que los microorganismos
intervienen de alguna manera a una materia prima para generar un producto que puede ser usado
por el hombre.

Mucho tiempo antes que se descubrieran los microbios, estos ya eran utilizados por las antiguas
civilizaciones para la elaboracin de bebidas alcohlicas y de pan, sin conocer el fundamento de la
fermentacin. La presencia de levaduras en dicho proceso fue observada por primera vez por
Leeuwenhoek y su papel en l fue descrito por Pasteur casi doscientos aos despus, quien describi
los fundamentos de este proceso.

La fermentacin es un proceso de obtencin de energa en condiciones anaerobias con productos
finales diversos, dependiendo del tipo de fermentacin. En el contexto industrial la fermentacin se
refiere a un proceso microbiano a gran escala independientemente de si ste se realiza en
condiciones aerobias o anaerobias. Actualmente la industria alimentaria usa la fermentacin para la
obtencin de distintos productos, donde se encuentran los quesos, el yogurt, vinagres, el vino y otras
bebidas alcohlicas. Otras industrias emplean los microorganismos para la formacin de productos
qumicos, como el metano, la obtencin de enzimas, tambin son usados para el control de plagas
mediante microbios patgenos, para la descontaminacin de mareas negra, depuracin de aguas
residuales y para obtencin de toxinas utilizadas en la fabricacin de armas biolgicas.

Los microorganismos de utilidad en la industria son aquellos capaces de elaborar alguna sustancia
que no se puede obtener de manera fcil o barata por otros mtodos, estos son las levaduras, hongos
filamentosos y las bacterias, que deben cumplir una serie de requisitos:

- Producir la sustancia de inters en un corto periodo de tiempo.
- Estar disponible en cultivo puro.
- Ser genticamente estable.
- Crecer rpidamente en cultivos a gran escala, en un medio de cultivo de bajo costo y
disponible en grandes cantidades.
- No ser patgeno para el hombre, animales o plantas.
- Fcil de separar del medio de cultivo (la centrifugacin es dificultosa o cara a gran escala),
quienes cumplen este requisito son los microorganismos de mayor tamao celular (hongos
filamentosos, levaduras y bacterias filamentosas) pues sedimentan ms fcilmente y son ms
fciles de filtrar.
Las levaduras han sido uno de los primeros microorganismos utilizados y actualmente son los ms
explotados, dentro de estas se encuentran:

- Saccharomyces cerevisiae es el principal gnero responsable de la fermentacin, se emplean
diferentes cepas para la fabricacin de cerveza, vino, sake, pan y alcoholes industriales. La
concentracin que alcanza el alcohol es de 14%, ya que a esta concentracin tanto la
fermentacin como el crecimiento de la levadura se detiene. El sabor y aroma se deben
principalmente al contenido de cido actico, cido lctico y acetato etlico, sustancias que
definen la calidad del producto.
Susan Arias Donoso

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Kluyveromyces fragilis es una especie fermentadora de lactosa que se explota en pequea

escala para la produccin de alcohol a partir de suero de leche.
Yarrowia lipolytica es una fuente industrial de cido ctrico.
Trichosporum cutaneum posee una gran capacidad de oxidacin de compuestos orgnicos,
incluyendo algunos que son txicos para otras levaduras u hongos, como los derivados
fenlicos, esa capacidad les confiere un importante papel en los sistemas de digestin
aerbica de aguas residuales.
Phaffia rhodozyma produce un pigmento especial llamado astaxantina, que se emplea como
complemento al alimento de truchas y salmones de criadero, con el objetivo de rescatar el
color rosado de su carne.

Comnmente en la fermentacin se utilizan azcares que contienen 6 tomos de carbono, como
glucosa y fructosa, sin embargo, existen algunas bacterias capaces de utilizar azcares pentosas como
Candida utilis, que se emplea en la industria alimentaria; por otro lado Saccharomycopsis lipolytica
metaboliza cadenas lineales de hidrocarburos de 10 a 16 tomos de carbono, produciendo cido
ctrico como producto de desecho. Existen tambin levaduras que pueden crecer en presencia de
metanol, economizando su cultivo, por lo cual se utilizan para la alimentacin de animales.

Los hongos filamentosos permiten el reciclaje de la materia viva, pues degradan la mayor parte de la
materia orgnica, esto mismo provoca una gran cantidad de enfermedades en plantas y animales
destruyendo alimentos y materiales necesarios para el hombre. A nivel industrial los hongos son la
base de muchas fermentaciones como la combinacin de soja, habichuelas, arroz y cebada utilizado
para producir alimentos orientales como el miso, shoyu y tempeh. Son tambin la fuente de muchas
enzimas comerciales (amilasas, proteasas, pectinasas), cidos orgnicos (ctrico, lctico), antibiticos
(penicilina), quesos especiales (Camembert, Roquefort) y, evidentemente, de las setas.

Entre las especies bacterianas de inters industrial estn:
- Gluconobacter y Acetobacter: convierten el etanol en cido actico, principal componente del
vinagre.
- Streptococcus y Lactobacillus: producen acido lctico y son utilizadas para elaborar el yogurt.
- Clostidium acetobutylicum: empleado en la industria qumica para obtener acetona y butanol.
- Streptomyces: tiene su principal importancia en la produccin de antibiticos como
anfotericina B, kanamicina, neomicina, estreptomicina, tetraciclina, etc.
- Bacillus spp: es productor de antibiticos (gramicidina, bacitracina, polimixina), proteasas e
insecticidas biolgicos, estos ltimos son producidos por las especies B. thuringiensis y B.
popilliae y se caracterizan por tener menor cantidad de efectos nocivos que los sintticos.
- Pseudomonas putida: degrada productos txicos para el hombre como el fenol, toluol y otras
composiciones de hidrocarburos, produciendo en este proceso un biopolmero (PHA) que se
utiliza como materia prima para fabricar distintos productos, como colas para pegar y vlvulas
cardacas. Aproximadamente un 60% de los productos de qumica fina podran producirse con
ayuda de estos microorganismos.

Muchos de los microorganismos utilizados en industria han sido manipulados genticamente para
optimizar su uso al lograr levaduras de pan que hacen que la masa leve ms rpido, o bien al
aumentar el espectro de azcares empleados por ellas y tambin reduciendo los niveles de desechos
contaminantes en los efluentes de las industrias. Estas manipulaciones tambin se han orientado a la
realizacin cultivos mejorados que protejan a los alimentos de la accin de otras bacterias que
podran provocar el envenenamiento de los alimentos.
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Manual de Bergey

Es un manual con mltiples ediciones que clasifica los microorganismos, de manera determinativa
hasta el 4 volumen (1984-1989) en donde se habla de una bacteriologa sistemtica que va de la
mano con el desarrollo de la biologa molecular, adems presenta tablas comparativas y descriptivas
de los MO. La edicin ms actual, correspondiente a la 2 edicin del ao 2001 y titulado Bergeys
manual of Systematic Bacteriology, presenta una clasificacin fundamentalmente filogentica e
incluye 5 volmenes:
-
-
Volumen 1: Archaea, Cianobacterias, Prottrofos verdes y gneros muy ramificados.

Volumen 2: Proteobacterias clasificadas segn caractersticas filogenticas basados en la
secuencia del rRNA.
o Alfa Proteobacteria:
Rickettsia, Ehrlichia, Brucella.
o Beta Proteobacteria: Bordetella, Burkholderia, Neisseria.
o Gama Proteobacteria: incluye los rdenes Enterobacteriales, Pseudomonadales,
Legionellales, Vibrionales, Pasteurellales, Francisella.
o Delta Proteobacteria: gneros sin importancia clnica.
o psilon Proteobacteria: Campylobacter y Helycobacter.

-
-
-
Volumen 3: Firmicutes. Bacterias Gram+ con bajo contenido G+C.

Volumen 4: Chlamydiae, Spirochetes, Bacteroidetes, Fusobacteria.
Volumen 5: Actinobacteria. Bacterias Gram+ con alto contenido G+C.

El manual incluye una simbologa particular para referirse a si un microorganismo posee o no una
caracterstica, estos smbolos son:

+:
90% o ms de las cepas son positivas para una caracterstica determinada.

-:
10% o menos de las cepas son negativas.

d:
entre 11 99% de las cepas son positivas.

D:
hay diferentes reacciones en las diferentes taxas (especies de un gnero o un gnero
de una familia).

v:
.

Por otro lado el manual orienta la identificacin de los microorganismos en el labotatorio, para lo
cual sugiere la realizacin de:

1. Tinciones: Gram, Ziehl Neelsen, tinta china, esporas, Neisser.

- Tincin Gram: determinar forma, agrupacin y morfologa.

2. Cultivos: en medios de cultivo apropiados se pueden observar caractersticas coloniales,

hemlisis, pigmentos, etc.
3. Pruebas bioqumicas:
- Pruebas de familia: Catalasa y oxidasa
- Pruebas para cocos Gram+:
Enterococcus: bilis esculina (+)
Staphylococcus: coagulasa, manitol, glucosa aerobia y anaerobia.
Streptococcus: tolerancia a la sal, hipurato, sensibilidad a la bacitracina.
- Pruebas para Gram -: IMVIC, urea, nitrato, citrato, TSI, etc.

4. Serologa: Se utiliza con el fin de determinar especies.

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Microbiologa: Bacterias

Sin membrana, con un cromosoma

Con membrana y varios cromosomas

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Formas y agrupaciones bacterianas

Cocos o cocceas: se clasifican en cuatro grupos dependiendo de su agrupacin, su tamao

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Quimitrofos: usan compuestos qumicos.

Fottrofos: usan la energa luminosa (fotosntesis).

Auttrofos: usan el compuesto directamente desde el ambiente, los nutrientes son

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La glucosa que pasa a piruvato e ingresa al ciclo de Krebs, sigue la ruta y el

Respiracin aerobia, el aceptor final de electrones es el oxigeno,

Es un catabolismo parcial, donde el aceptor final de electrones es una molcula orgnica y

Susan Arias Donoso

Existen distintos tipos de fermentacin segn su producto final: homolctica (cido

Susan Arias Donoso

Todas las bacterias utilizan otros hidratos de carbono adems de

Susan Arias Donoso

De acuerdo a la diversidad metablica de las bacterias se pueden realizar distintas pruebas

Determinacin del metabolismo fermentativo

Una colonia bacteriana se embebe en el filtro

Tubos con indicador de pH y con un indicador

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Pared celular y glucoclix

CHO, Protenas, lpidos y

Composicin qumica en base al peso seco

Susan Arias Donoso

Proporcin peso seco

En muchos compuestos orgnicos e inorgnicos.

Susan Arias Donoso

Factores que influencian el crecimiento bacteriano

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x ptima: permite la tasa ms rpida de crecimiento y metabolismo de un

Halfilo: microorganismos que tienen la capacidad de crecer en condiciones de

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Halotolerantes: son capaces de soportar alguna reduccin de la AW del medio, pero

Aerobios: utilizan el oxgeno y pueden detoxificarlo, dentro de estos se encuentran:

Test para determinar el requerimiento de oxgeno

Anaerobios: no utilizan el oxgeno, dentro de estos se encuentran:

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Susan Arias Donoso

La morfologa de las colonias obtenidas permite identificar el

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Ciclo lisognico o Transduccin Especializada o Restringida, el

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Opern triptfano: el triptfano es la molcula correpresora, por tanto al estar

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POR CORRIMIENTO DE MARCO DE LECTURA: numerosos codones equivocados se

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