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REACCIONES

HOMOGENEAS

GENERALIDADES

LA MAYORIA DE LAS
TRANSFORMACIONES

QUIMICAS Y
BIOLOGICAS SE
REALIZAN EN UN
BIOREACTOR.
QUE ES EL
CORAZON DEL
BIOPROCESO

REACCIONES CATALITICAS
Un catalizador es una sustancia que
afecta a la velocidad de reaccin sin
alterar el equilibrio y sin experimentar
ella misma cambio alguno.
Enzimas, complejos de enzimas,
rganos de clulas y clulas enteras
(viables
con
crecimiento
o
sin
crecimiento) actan como catalizadores.
El crecimiento celular es una reaccin
auto cataltica, es decir el catalizador es
un producto de la reaccin.

GENERALIDADES

LA MAYORIA DE LAS

REACCIONES CATALITICAS
El rendimiento de las reacciones catalticas
se caracteriza por variables como la velocidad
de reaccin y el rendimiento del producto a
partir de un sustrato.

TRANSFORMACIONES

QUIMICAS Y
BIOLOGICAS SE
REALIZAN EN UN
BIOREACTOR.
QUE ES EL
CORAZON DEL
BIOPROCESO

Las reacciones catalticas se diferencian en


reacciones homogneas y heterogneas.
Una reaccin es homognea cuando la
temperatura y las concentraciones del
sistema son uniformes: fermentaciones y
reacciones enzimticas.
Una reaccin es heterognea cuando hay
gradientes
de
concentracin
o
de
temperatura.

TEORIAS

TEORIA DE LAS REACCIONES

TERMODINAMICA DE LA
REACCION.
CINETICA DE LA
REACCION

TEORIAS

TERMODINAMICA DE LAS
REACCIONES

A+bByY+zZ
Si se introducen los componentes en un
sistema cerrado durante un periodo
infinito de tiempo la reaccion procede, la
reaccion procede hasta alcanzar el
equilibrio termodinmico.

TEORIAS

TERMODINAMICA DE LAS
REACCIONES
Las condiciones de equilibrio estn
relacionadas mediante la constante de
equilibrio K.

Y
Ye

Z
Ze

C C
K=
C AeC Be
CAe CzeCYe,Cze

Concentraciones de equilibrio de
A,Y,B,Z

TERMODINAMICA DE LAS
REACCIONES
El valor K depende de la temperatura de
la siguiente manera :

G
ln K =
RT

rxn

TERMODINAMICA DE LAS
REACCIONES
Para reacciones bioqumicas que se
producen en disolucin deben utilizarse
otras condiciones estndar

G rxn = yG y0 + zGz0 G A0 bGB0


La energa libre G esta relacionada con la
entalpia H, la entropa S y la temperatura
absoluta T de la siguiente manera :

G = H T S

H
ln K =
RT

rxn

S rxn
+
R

RENDIMIENTO DE LA REACCION

Rendimiento terico = moles totales de producto formado


moles de reactante utilizado para
formar ese producto.
Rendimiento aparente = masa moles de producto presente
masa moles totales de reactante
consumido

VELOCIDAD DE REACCION

A+bByY+zZ

VELOCIDAD DE REACCION
En un volumen cerrado donde el volumen
de la mezcla de reaccin permanece
constante , la velocidad especifica se
expresa como :

1 1 dC
rA = o
x e dt

x = concentracin de clulas
e = concentracin de enzimas
Sirve para comparar las velocidades
especificas de las clulas o enzimas

VELOCIDAD DE REACCION

La velocidad especifica es la velocidad


alcanzada por unidad de catalizador.
Una productividad total elevada
podra alcanzarse con un catalizador
de actividad baja.

CINETICA DE LA REACCIN
La velocidad de reaccion depende de la
concentracin del reactante.
La velocidad de reaccion tambin varia con
la temperatura de manera que la mayora
de las reacciones aumentan su velocidad
conforme aumenta la temperatura.
La cintica de la reaccin se refiere a la
resistencia existente entre la velocidad de
reaccion y las condiciones que afectan
dicha velocidad, como concentracin de
reactantes y temperatura

CINETICA DE LA REACCIN
La Velocidad volumtrica de reaccion se
puede expresar en funcin de las
concentraciones :
Orden para A

r A = kC

a
A

b
B

k= constante de velocidad o coeficiente de


velocidad de reaccin.
Orden Global de reaccin = a+b

La cintica de la reaccin expresa la relacin existente


entre la velocidad de reaccin y las condiciones que
afectan dicha velocidad como conc. de reactantes y
temperatura.

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE


LA VELOCIDAD DE REACCION
La variacin de la constante de velocidad
de reaccion k con la temperatura se
describe mediante la ecuacin de
Arrhenius:

E/RT

k =Ae

A= Constante de Arrhenius, factor de


frecuencia o factor pre exponencial.
E = Energa de Activacin.

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE


LA VELOCIDAD DE REACCION
Aplicando logaritmos Neperianos :

E
ln k = ln A
RT

METODO DEL AREA EQUIVALENTE A


LA VELOCIDAD MEDIA
Se basa en la construccin del rea
equivalente a la velocidad media y su
utilizacin mostrando datos de consumo
de oxigeno por clulas inmovilizadas.

METODO DEL AREA EQUIVALENTE A


LA VELOCIDAD MEDIA
La velocidad volumtrica de reaccin (dCA/dt) en un
sistema cerrado puedo de terminarse midiendo la
velocidad de cambio de masa del reactante.
Para determinarla se realiza lo siguiente :
Tabular los valores de CA y t para cada intervalo de
tiempo como lo muestra la tabla anterior. Los valores de
CA son negativos porque disminuye en cada intervalo.
Calcular las velocidades medias de consumo de oxgeno,
CA /t para cada intervalo de tiempo.
En cada intervalo de tiempo trazar una lnea horizontal
para representar CA /t.

METODO DEL AREA EQUIVALENTE A


LA VELOCIDAD MEDIA
Dibujar una curva suavizada que corte a la lnea
horizontal de tal manera que las reas sombreadas por
encima y por debajo de la curva sean iguales en cada
intervalo de tiempo.
La curva obtenida proporciona valores de dCA/dt para
todos los puntos de tiempo los cuales tambin se han
tabulado en la tabla anterior.
Dentro de los inconvenientes del mtodo es la dificultad
cuando se tienen datos que presentan dispersin.

METODO DEL AREA EQUIVALENTE A


LA VELOCIDAD MEDIA

dCa/dt=0.59

METODO DE LA PENDIENTE DEL


PUNTO MEDIO
En este mtodo los datos originales se suavizan
tabulan a intervalos.

y se

Representar los datos originales y trazar la curva.


Dividir la curva suavizada a intervalos de tiempo , de
manera que el nmero de intervalos sea menor que el
numero de datos medidos.
En este mtodo las velocidades se calculan en el punto
medio entre dos intervalos consecutivos de tamao .
t- = 3 CA = 6.96
t+ =5 CA = 6.61
CA(t+ ) CA(t- )=6.61-6.96= -0.35 que corresponde a la
concentracin a un tiempo de 4 min.

METODO DE LA PENDIENTE DEL


PUNTO MEDIO
La pendiente o velocidad se calcula utilizando la
siguiente formula :

dC A [(C A ) t + (C A ) t ]
=
dt
2
Las velocidades calculadas mediante los dos mtodos son
casi similares. Esta comparacin permite comprobar si los
resultados son obtenidos son correctos.

METODO DE LA PENDIENTE DEL


PUNTO MEDIO

METODO DE LA PENDIENTE DEL


PUNTO MEDIO

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE ORDEN CERO


Si una reaccion obedece a una cintica de
orden cero, la velocidad de reaccion es
independiente de la concentracin de
reactante :

rA = k 0
rA = velocidad volumtrica de la reaccion
con respecto a A.
ko = Constante de velocidad de orden cero.
Kmol/m3.s

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE ORDEN CERO


Velocidad
de una reaccion celular o
enzimtica, el valor de ko incluye el efecto
de la concentracin de catalizador :

k0 = k e
'
0

k0 = k x
''
0

k0=constante de velocidad especifica de


orden cero para la reaccion enzimtica
e = concentracin de la enzima
k0=constante de velocidad especifica de
orden cero para las clulas.
x= concentracin de clulas.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE ORDEN CERO


Si la reaccin se desarrolla en un sistema
cerrado de volumen constante, la
velocidad de reaccin puede calcularse
directamente como la velocidad de
cambio de la concentracin de reactante
utilizando los mtodos grficos.
Si la reaccin es de orden cero la
velocidad ser constante e igual a k0
durante toda la reaccin.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE ORDEN CERO


Para obtener una ecuacin que exprese el
valor de CA en funcin del tiempo :

C A = rA dt = C A0 k0t

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE PRIMER ORDEN


Si una reaccion obedece a una cintica de
primer orden, la relacin entre la velocidad
de reaccion y la concentracin de reactante
es :

rA = k1C A
rA= Velocidad volumtrica de reaccin.
K1 = constante de velocidad de primer
orden, este valor depende de la
concentracin del catalizador.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE PRIMER ORDEN


Bajo estas condiciones (sistema cerrado de
volumen constante) calcular si la reaccion
sigue una cintica deprimer orden se
integrar:

rA = k1C A

Con rA=-Dca/dt
entonces se comprobar los datos de
concentracion frente a la ecuacin
obtenida.

C A = C A0 e

k1t

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
La cintica de la mayora de reacciones
enzimticas se representa razonablemente
bien mediante esta ecuacin :

rA

v
=
K

max
m

C
+ C

A
A

rA= Velocidad volumtrica de reaccin


CA=Concentracin del reactante
Vmax= Velocidad mxima de reaccin a
concentracin infinita de reactante.
mol/m3.s.
Km= Constante
Michaelis para el
reactante A. mol/m3

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN

La Constante de Michaelis Km es igual a


la concentracin del reactante a la que
rA=Vmax/2

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
Si se adoptan los simbolos convencionales
para las reacciones biolgicas y se
denomina reactante A al sustrato :

rA

v
=
K

max
m

s
+ s

rA= Velocidad volumtrica de reaccin


s = Concentracin del sustrato
Vmax= Velocidad mxima de reaccin a
concentracin infinita de reactante.
Km= Constante
Michaelis para el
reactante A.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
La secuencia de reaccin mas simple que
justifica las propiedades cinticas de
muchas enzimas :
k1

k2

E + S ES E + P
k 1

E =Enzima
S = Sustrato
P = Producto
ES = Complejo enzima sustrato
La unin de la enzima al sustrato se
considera reversible y la descomposicin
del complejo enzima sustrato para dar
el producto es irreversible.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
En la ecuacin k2 es conocida como
numero de transacciones
k1

k2

E + S ES E + P
k 1

El anlisis de los rendimientos de esta


secuencia de reacciones permite obtener la
siguiente relacin :

vmax = k 2 ea

ea = concentracin de enzima activa.


Como es de esperar en las reacciones
catalticas , la enzima se recupera al final de
la reaccin.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
Una caracterstica de la ecuacin MichaelisMenten es que el catalizador llega a
saturarse a elevadas concentraciones de
sustrato.

rA =

v
K

max
m

s
+ s

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
Si Km es despreciable si se compara con s,
tenemos los siguiente :

vmax s
v=
s

v = vmax

Por lo tanto, a concentraciones elevadas de


sustrato, la velocidad de reaccin se
aproxima a un valor constante e
independiente de la concentracin de
sustrato. En este intervalo la reaccin es de
orden es cero con relacin al sustrato.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN
Por otro lado, a concentraciones pequeas
de sustrato s<<Km y el valor de s en el
denominador puede despreciarse si se
compara con el valor de Km y quedara as:

vmax
v=
s
Km
Vmax/Km es un coeficiente de velocidad de
primer orden para la reaccin.
Entonces a concentraciones bajas de sustrato existe una
dependencia aproximadamente lineal de la velocidad de
reaccin respecto a s.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

EFECTO DE LAS CONDICIONES DE


OPERACIN SOBRE LA VELOCIDAD
DE REACCIN DE LA ENZIMA.
La velocidad de reaccin se ve afectada adems de la
concentracin del sustrato, tambin de algunas
condiciones como la temperatura y pH.
Para las enzimas el efecto de la temperatura se puede
explicar con la ecuacin de Arrhenius.

La energa de activacin
para las actividades
enzimticas son del orden 40-80 KJ/mol, un aumento
de 10 grados de temperatura entre 20 y 30C producir
un aumento de 2-3 veces la velocidad de reaccin.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

EFECTO DE LAS CONDICIONES DE


OPERACIN SOBRE LA VELOCIDAD
DE REACCIN DE LA ENZIMA.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

EFECTO DE LAS CONDICIONES DE


OPERACIN SOBRE LA VELOCIDAD
DE REACCIN DE LA ENZIMA.

Relacin
de
Arrhenius deja
de cumplirse a
elevadas
temperaturas.

CINETICA GENERAL DE
REACCION PARA
SISTEMAS
BIOLOGICOS

EFECTO DE LAS CONDICIONES DE


OPERACIN SOBRE LA VELOCIDAD
DE REACCIN DE LA ENZIMA.

La velocidad de reaccin es mxima


en un
determinado pH y disminuye drsticamente si se
desplaza el pH a cualquier lado del pH ptimo

DETERMINACIN DE LAS CONSTANTES


CINETICAS ENZIMATICAS A PARTIR DE DATOS
OBTENIDOS EN UN REACTOR DISCONTINUO

Para especificar las cinticas de las


reacciones de Michaelis - Menten es
necesario calcular dos constantes de
velocidad Vmax y Km . La de terminacin de
los parmetros cinticos de las reacciones
de Michaelis-Menten no es tan sencillo,
para ello existen varios mtodos grficos :
Representacin de Michaelis Menten
Representacin de Lineweaver-Burk
Representacin Eadie-Hofstee
Representacin de Langmuir
Representacin lineal directa

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACIN DE
MICHAELIS - MENTEN
Representacin de Michaelis - Menten

Los valores Vm y Km se pueden


calcular.
Vmax es la velocidad si s

y Km es el valor de s cuando
V=Vmax/2.

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACIN DE
LINEWEAVER-BURK
Representacin de Lineweaver-Burk
Para esta representacin es necesario
utilizar un mtodo de linealizacin con el
fin de obtener una lnea recta a partir de la
cual pueda calcularse vmax y Km . Invirtiendo
la ecuacin se obtiene :

Km
1
1
=
+
v vmax s vmax
Mtodo de precisin limitada

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACIN DE
EADIE - HOFSTEE
Representacin de Eadie - Hofstee
Otra ecuacin linearizada de MichaelisMenten.

v vmax
v
=

s Km Km
Al representar v/s frente a v se obtiene
una lnea recta de pendiente -1/Km y
ordenada en el origen vmax/Km que se
denomina representacin Eadie-Hosftee
Mtodo de precisin limitada.

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACIN DE LANGMUIR
Representacin de Langmuir
Multiplicando la ecuacin de LineweaverBurk por s se produce la formacin
linearizada de la ecuacin de MichaelisMenten de acuerdo a Langmuir.

s Km
s
=
+
v vmax vmax
Al representar s/v frente a s se obtiene una lnea recta de
pendiente 1/vmax y ordenada en el origen Km /vmax.
Esta representacin minimiza la distorsin de los errores
experimentales por lo que se recomienda su utilizacin.

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACION
LINEAL DIRECTA
Representacin Lineal Directa
Eisenthal y Cornish-Bowden han propuesto
un mtodo diferente de representar los
datos cinticos. En dicho mtodo se
representa la velocidad de reaccion v en el
eje vertical frente a s en el eje horizontal
negativo para cada observacin
de
acuerdo a la grafica siguiente :

DETERMINACIN DE LAS
CONSTANTES CINETICAS
ENZIMATICAS A PARTIR DE
DATOS OTENIDOS EN UN
REACTOR DISCONTINUO

REPRESENTACION
LINEAL DIRECTA
Representacin Lineal Directa
Para cuatro parejas de datos
(v,s). Se traza una lnea recta
para
unir
los
correspondientes puntos (s,v). En ausencia de errores
exp. la lnea de cada par (-s,v)
interceptan en su nico
punto (Km , Vmax), si en los
datos existen errores exp. Se
toman los valores medios de
Km y Vs.
Se recomienda para aquellas
enzimas que obedecen a la
cintica de Michelis
Menten.

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
Las enzimas son molculas protenicas de
configuracin compleja que pueden ser
desestabilizadas por fuerzas relativamente
dbiles.
En las reacciones catalizadas por enzimas,
la desactivacin de la enzima se produce a
una velocidad que depende
de su
estructura y de las condiciones de reaccin.
Entre los factores medioambientales que
afectan a la estabilidad enzimtica : pH,
temperatura, fuerza inica, fuerzas
mecnicas y presencia de sustancia
extraas como disolventes, detergentes y
metales pesados.

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
En el modelo mas simple de desactivacin
enzimtica, la enzima activa Ea sufre una
transformacin irreversible hacia una
forma inactiva Ei :

La velocidad de desactivacin se considera


generalmente de primer orden respecto de
la concentracin de enzima activa :

rd = kdea
rd= velocidad volumtrica de desactivacin.
ea= concentracin de enzima activa
Kd= constante de la velocidad de desactivacin.

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
En un sistema cerrado donde la
desactivacin de la enzima es el nico
proceso que afecta a la concentracin de
enzima activa :

dea
= rd = k d ea
dt

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
La integracin de la ecuacin produce una
expresin para la concentracin de enzima
activa en funcin del tiempo :
kdt
a
a0

e =e e

ea0 = concentracin de enzima activa a


tiempo cero.

vmax = k 2 ea 0 e

kd t

= vmax 0 e

kd t

Vmax0 es valor inicial de vmax. antes de que


se produzca la desactivacin.

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
La estabilidad de las enzimas se expresa
generalmente en trminos de la vida
media o periodo de semidesactivacin.
L a vida media es el tiempo necesario para
que se pierda la mitad de la actividad
enzimtica como resultado de la
desactivacin.
Tomando logaritmos neperianos y
reordenando los rendimientos se obtiene
la siguiente expresin :

ln 2
th =
kd

Th= vida media de la enzima

CINETICA DE
DESACTIVACION ENZIMATICA
La velocidad de desactivacin enzimtica
depende fuertemente de la temperatura.
Esto se describe mediante la ecuacin de
Arrenhius :
E d / RT

k d = Ae

A = constante de Arrenhius o factor de


frecuencia.
Ed = Energa de Activacin
para la
desactivacin enzimtica.
Los valores de Ed son altos , generalmente del orden de los 170
400 kJ/mol.
Para muchas enzimas un aumento de temperatura de 10C
entre 30 y 40C, producir un aumento entre 10 y 150 veces en
la velocidad de desactivacin enzimtica.

RENDIMIENTO EN
CULTIVOS CELULARES
Cuando se consideran procesos como el
crecimiento celular se estn agrupando
muchos efectos individuales
de
conversiones qumicas y enzimticas.
Los rendimientos
que se muestran
generalmente
y aquellos de especial
importancia se expresan mediante
coeficientes de rendimiento o factores de
rendimiento.
Formula general de los coeficientes de
rendimiento :
F

YFG =

YFG = Factor de rendimiento.


F = masa o moles de F producidos.
F = masa o moles de G consumidos.

RENDIMIENTO EN
CULTIVOS CELULARES

RENDIMIENTOS GLOBALES
INSTANTANEOS
El rendimiento instantneo puede
calcularse de la manera siguiente :

Y FG

F
dF
dF / dt
rF
= lim
=
=
=
AG 0 G
dG
dG / dt
rG
Donde Yxs en un determinado instante
se define como :

rx
velocidad .de .crecimient o
Y xs = =
rs velocidad .de .consumo .de .sustrato

RENDIMIENTO TEORICO
OBSERVADO
El rendimiento de biomasa observado
basado en el consumo total de
sustrato es :

X
X
Y ' xs =
=
ST
SG + S R
X = Cantidad de biomasa producida
Yx/s = Rendimiento de biomasa observado
a partir de sustrato.

RENDIMIENTO TEORICO
OBSERVADO
A efecto comparativo, el rendimiento
de biomasa terico o verdadero a
partir de sustrato es :

YXS

X
=
SG

X = Cantidad de biomasa producida


Yx/s = Rendimiento de biomasa observado
a partir de sustrato.
SG = Masa de sustrato realmente utilizada
en la produccin de biomasa.

RENDIMIENTO TEORICO
OBSERVADO

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EN UN CULTIVO
DISCONTINUO

Durante las fases de crecimiento y


desaceleracin, la velocidad de
crecimiento celular se describe :
rx=x

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EN UN CULTIVO
DISCONTINUO
Durante las fases de crecimiento y
desaceleracin, la velocidad de crecimiento
celular se describe :
rx=x
rx= velocidad volumtrica de produccin de
biomasa.
kg/m3.s.
X = Concentracin de clulas viables. Kg/m3.
= velocidad especfica de crecimiento.

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EN UN CULTIVO
DISCONTINUO
En un sistema cerrado donde el crecimiento
es el nico proceso que afecta a la
concentracin celular :
.t

x = x0 e

Ecuacin de crecimiento exponencial.


X0 =Concentracin de clulas viables a
tiempo cero.

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EN UN CULTIVO
DISCONTINUO
Las velocidades de crecimiento celular se
expresan generalmente en tiempo de
duplicacin td.

2 x = x0 e

.t d

Cancelando X0 se obtiene :

2=e

.t d

Aplicando logaritmos neperianos en ambos


lados :

ln 2 = .t d

td =

ln 2

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EN UN CULTIVO
DISCONTINUO

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

CRECIMIENTO EQUILIBRADO
En un ambiente favorable para el crecimiento, las
clulas regulan su metabolismo y ajustan las
velocidades de varias reacciones internas para que
se produzcan un crecimiento equilibrado.
Para que la composicin de la biomasa permanezca
constante durante el crecimiento la velocidad
especifica de produccin de cada componente del
cultivo debe ser igual a la velocidad especifica de
crecimiento celular :

rZ = .z
Z = Constituyente celular. (protenas, ARN, polisacridos,
etc.
rz = Velocidad volumtrica de produccin de z.

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

EFECTO DE LA CONCENTRACION
DEL SUSTRATO
La velocidad especfica de crecimiento de las
clulas durante las fases de crecimiento y
deceleracin de un cultivo discontinuo depende de
la concentracin de nutrientes existentes en el
medio .
A menudo un nico sustrato ejerce un efecto
dominante : sustrato limitante del crecimiento.
El sustrato limitante de crecimiento es a menudo la
fuente de carbono o de nitrgeno aunque en
algunos casos puede ser el oxigeno o los nitratos.

max s

Ks + s

ECUACION DE MONOD
s = concentracin de sustrato limitante
de crecimiento.
max = velocidad especfica max
crecimiento.
Ks= Constante del sustrato.

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

EFECTO DE LA CONCENTRACION
DEL SUSTRATO

max s

Ks + s

CINETICA DE
CRECIMIENTO
CELULAR

EFECTO DE LA CONCENTRACION
DEL SUSTRATO

CINETICA DE
PRODUCCION
CULTIVO CELUAR

CINETICA DE PRODUCCION
DE UN CULTIVO CELULAR
Se tendr en cuenta la cintica de produccin de
compuestos de bajo peso molecular como el etanol,
aminocidos, antibiticos y vitaminas que son expulsados
como desechos de las clulas en cultivo.
La velocidad de produccin del mismo en un cultivo celular
puede expresarse en funcin de la concentracin de
biomasa :

rp = q p x

rp= Velocidad volumtrica de formacin de producto kg/m 3.s.


X = concentracin de biomasa.
qp= Velocidad especfica de formacin de producto. 1/T

CINETICA DE
PRODUCCION
CULTIVO CELUAR

FORMACION DE PRODUCTO ASOCIADO


AL METABOLISMO ENERGETICO
Las expresiones cinticas de formacin de productos deben
considerar la produccin asociadas al crecimiento y la
asociada a las funciones de mantenimiento :

= Y

px

rx + rx + m

rx= Velocidad volumtrica de formacin de biomasa.


Yps = Rendimiento terico o verdadero de producto a
partir de biomasa.
mp= velocidad especifica de formacin de producto debida
al mantenimiento. 1/T, 1/ kg biomasa.s
X = concentracin de biomasa.
Esta ecuacin establece que la velocidad de formacin de
producto depende no solo de la velocidad de crecimiento
sino tambin de la concentracin de clulas.

r p = ( Y px + m p ) x

CINETICA DE
PRODUCCION
CULTIVO CELUAR

FORMACION DE PRODUCTO ASOCIADO


AL METABOLISMO ENERGETICO
Para productos asociados al metabolismo energtico :

= Y

px

+ m

CINETICA DE
CONSUMO DE
SUSTRATO EN
CULTIVO CELULAR

CONSUMO DE SUSTRATO CON


FORMACION DE PRODUCTO
Produccin asociada
de forma directa al
metabolismo
energtico.

Produccin no
asociada de forma
directa al
metabolismo
energtico.

CINETICA DE
CONSUMO DE
SUSTRATO EN
CULTIVO CELULAR

CONSUMO DE SUSTRATO CON


FORMACION DE PRODUCTO
En cultivos donde la sntesis del producto esta asociado
solo de forma indirecta al metabolismo energtico, la
velocidad de consumo de sustrato es funcin de tres
factores :
Velocidad de crecimiento.
Velocidad de formacin de producto.
Velocidad de consumo de sustrato para el mantenimiento.

rp
rx
rs =
+
+ ms x
Yx / s Y ps
rs= velocidad volumtrica de consumo de sustrato.
rx=velocidad volumtrica de produccin de biomasa.
rp=velocidad volumtrica de formacin de producto.
Yx/s= rendimiento verdadero de biomasa a partir de sustrato.
Yp/s = rendimiento verdadero de producto a partir de sustrato.
Ms=coeficiente de mantenimiento.
X=concentracin de biomasa.

CINETICA DE
CONSUMO DE
SUSTRATO EN
CULTIVO CELULAR

CONSUMO DE SUSTRATO CON


FORMACION DE PRODUCTO
Si se expresa rx y rp :

qp
rs =
+
+ ms x
Yx / s Y ps

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

RENDIMIENTO DE BIOMASA
A PARTIR DE SUSTRATO
Las ecuaciones de rendimiento verdadero de biomasa
pueden calcularse para sistemas sin formacin de producto
extracelular o cuando la sntesis de producto esta
directamente asociado al metabolismo energtico.

Y 'X / S =

+ ms
YX / S

Invirtiendo la ecuacin se obtiene :

m
1
1
=
+ s
Y ' x / s Yx / s

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

RENDIMIENTO DE PRODUCTO
A PARTIR DE BIOMASA

Y ' X / S = Yp / x +

mp

Invirtiendo la ecuacin se obtiene :

m
1
1
=
+ s
Y ' x / s Yx / s

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

RENDIMIENTO DE PRODUCTO
A PARTIR DE SUSTRATO

Y 'p/S =

YP / s + m p

+ ms
Yx / s

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

CINETICA DE MUERTE CELULAR

Es un factor que debe tenerse en cuenta a la hora de


disear procesos de esterilizacin as como en el anlisis
de aquellas fermentaciones donde se espera que exista
una perdida sustancial de viabilidad celular.
En un medioambiente letal, las clulas de una poblacin
no mueren todas a la vez sino que la desactivacin del
cultivo se produce durante un periodo finito de tiempo
que depende del numero inicial de clulas viables y de la
severidad de las condiciones impuestas.
Suponiendo que la muerte celular es un proceso de
primer orden :

rd = k d N

rd = velocidad de muerte celular


Kd=constante de muerte especifica.
N=numero de clulas Viables

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

CINETICA DE MUERTE CELULAR

La velocidad de muerte celular se puede expresar


mediante la concentracin de clulas en vez del numero
de clulas.

rd = k d x
rd = velocidad de muerte celular
Kd=constante de muerte especifica basada en la
concentracin celular.
x=concentracin de clulas viables.

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

CINETICA DE MUERTE CELULAR

En un sistema cerrado en el que la muerte celular es el


nico proceso que afecta a la concentracin de clulas
viables, la velocidad de muerte celular es igual a la
velocidad de disminucin del numero de clulas

dN
rd =
= kd N
dt

N = N 0e

kd t

No= numero de clulas viables a tiempo cero.


Los valores tipos de Ed para la destruccin trmica de
microorganismos es alta, 250 290 kJ/mol

EFECTO DE LAS
CONDICIONES DE
CULTIVO EN LA
CINETICA CELULAR

CINETICA DE MUERTE CELULAR

RELACION ENTRE TEMPERATURA Y VELOCIDAD DE


MUERTE TERMICA PARA CELULAS ESCHERICHIA COLI