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Gua para el uso de sedimentos en la reconstruccin histrica


de la contaminacin en zonas costeras
Editores

A.C. Ruiz-Fernndez y J.A. Sanchez-Cabeza

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Prefacio
En el ao 2007, la OIEA inici un proyecto sobre la Aplicacin de tcnicas nucleares
en la solucin de problemas especficos del manejo integrado de las zonas costeras en el
Caribe, RLA/7/012. El objetivo del proyecto es desarrollar y mejorar las capacidades para
reducir la degradacin, por causas antrpicas y humanas, de los ecosistemas costeros de la
regin del Gran Caribe utilizando tcnicas nucleares en apoyo de la gestin integrada de la
zona costera. Este proyecto est alineado con los objetivos del OIEA en medio ambiente, en
particular facilitando el uso sostenible de los recursos naturales donde los istopos pueden
mejorar el conocimiento de sistemas naturales o no que permita, por ejemplo, la prediccin de
tendencias futuras globales a partir del pasado y la evaluacin global de recursos. En el
proyecto participan Cuba, Costa Rica, Colombia, Repblica Dominicana, Guatemala, Hait,
Honduras, Jamaica, Mxico, Nicaragua, Panam y Venezuela, con el apoyo de Espaa y
Francia, y en colaboracin con UNEP.
Una de las metodologas principales de este proyecto es la utilizacin de sedimentos
costeros fechados con 210Pb como registros de cambios ambientales, incluyendo la
contaminacin. Como parte de la estrategia del proyecto, se decidi que una de las primeras
actividades a realizar fuera la elaboracin de una gua prctica para el muestreo preparacin
de ncleos sedimentarios para la reconstruccin histrica de la contaminacin en zonas
costeras.

Esta gua ha sido elaborada por y para cientficos en la regin, con el objetivo de
introducir las tcnicas fundamentales, homogeneizar las actividades llevadas a cabo en cada
pas y planificar el trabajo a realizar en los diferentes laboratorios. Para ello, el OIEA
organiz en primer lugar un Taller en Cuman, Venezuela, con la colaboracin del Instituto
de Oceanografa y la Universidad de Oriente, del 14 al 18 de Mayo de 2007, donde 13
expertos regionales discutieron las estrategias mejor adaptadas a la realidad regin y
elaboraron una primera versin del manual. ste fue discutido y mejorado durante un Curso
Regional desarrollado en el Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos, Cuba, entre el 10
y el 21 de Septiembre de 2007, donde participaron un total de 18 estudiantes
latinoamericanos.

Desde el primer momento, esta gua fue diseada como un documento vivo, que se
adapta a las realidades del proyecto y a las dificultades encontradas. An en el momento de
cerrar esta edicin se han introducido nuevas modificaciones. Si bien algunos aspectos
concretos de la gua no son aplicables directamente a otras regiones, s que lo puede ser su
estructura y filosofa. No debera ser difcil adaptarla a las necesidades de otros proyectos
nacionales o regionales.

El OIEA est muy agradecido a los expertos que han contribuido a la elaboracin de la
Gua. Los editores de este libro son Ana Carolina Ruiz-Fernndez (Mxico) y Joan-Albert
Sanchez-Cabeza (OIEA). La lista de autores que han contribuido a su redaccin se encuentra
al final de este documento. Deseamos agradecer al Instituo de Oceanografa (Universidad de
Oriente, Venezuela) y al Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (Cuba) por la
organizacin de los eventos que han permitido disear y desarrollar esta gua.

Esta gua fue producida a travs del proyecto de cooperacin tcnica del OIEA
Aplicacin de tcnicas nucleares en la solucin de problemas especficos del manejo
integrado de las zonas costeras en el Caribe RLA/7/012, con la Sra. Jane Gerardo Abaya, del
Departamento de Cooperacin Tcnica, como Oficial de Gestin del Programa y el Sr. JoanAlbert Sanchez-Cabeza del Departamento de Ciencias y Aplicaciones Nucleares,
Laboratorios del Medio Marino, como Oficial Tcnico.
3

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NDICE

Pgina

Introduccin.......9
1. Objetivo general.........10
2. Diseo del muestreo...........................................................................................................10
2.1. Metas
2.2. Seleccin de los sitios de muestreo
2.2.1. Informacin bsica para el muestreo
2.2.2. Caractersticas del sitio de muestreo
2.3. Recomendaciones generales durante el muestreo
3. Sedimentos superficiales........12
3.1. Muestreo
3.2. Anlisis de humedad y prdidas por ignicin
3.3. Preparacin de muestras para anlisis subsecuentes

4. Cores sedimentarios....15
4.1. Estrategia de muestreo de cores
4.2. Limpieza de material para el muestreo de cores
4.2.1. Equipo de muestreo
4.2.2. Material para metales pesados
4.2.3. Material para contaminantes orgnicos
4.3. Parmetros in situ
4.4. Manejo de cores en el campo
4.4.1. Inspeccin del core
4.4.2. Cuidados durante el muestreo
4.5. Manejo de cores en el laboratorio
4.5.1. Corte del core
4.6. Procesamiento por tipo de core
4.6.1. Core I: radionclidos, metales y parmetros geoqumicos
4.6.2. Core II: contaminantes orgnicos
4.6.3. Core III: testigo
4.7. Conservacin de las muestras
5. Registros de muestreo.........21
5.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales
5.2. Planilla de recoleccin de cores sedimentarios
5.3. Planilla de caracterizacin de cores sedimentarios
6. Codificacin de muestras........22
6.1. Sedimentos superficiales
6.2. Cdigos para cores sedimentarios en el campo
6.3. Cdigos del intervalo del core sedimentario
6.4. Cdigos de las alcuotas de sedimento para anlisis
7. Geocronologa con 210Pb.....24
7.1. Criterio de evaluacin de cores para fechado con 210Pb
7.2. Seleccin del core para anlisis de 210Pb
7.3. Estrategia de anlisis con 210Pb
7.4. Cores alterados

8. Ensayos a desarrollar en el proyecto......26


8.1. Anlisis recomendados
8.1.1. Contenido de humedad
8.1.2. Prdidas por ignicin (PPI)
8.1.3. Distribucin de tamao de grano
8.1.4. Composicin elemental
8.1.5. C, N, TIC, TOC:
8.1.6. Pb-210 (Po-210).
8.1.7. Pb-210, Ra-226 y Cs-137 por espectrometra gama
8.1.8. Mercurio total
8.1.9. Hidrocarburos Aromticos Policclicos (HAPs)
8.1.10. Plaguicidas (hidrocarburos organoclorados)
8.2. Anlisis opcionales
8.2.1 Temperatura y salinidad: sonda multiparamtrica.
8.2.2 Oxgeno disuelto: sonda multiparamtrica.
8.2.3. Composicin mineralgica
8.3. Control de calidad analtico
9. Referencias.........................30
Anexos
Anexo 1. Planillas de recoleccin de muestras de sedimento superficial y de cores
sedimentarios.......31
1.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales
1.2. Planilla de recoleccin de cores de sedimentos
1.3. Planilla de caracterizacin de los cores
Anexo 2: Informes analticos......... ..35
2.1. Instrucciones para la preparacin de los informes de resultados analticos
2.2. Ejemplo de informe analitico
Anexo 3. Mtodos de anlisis a utilizar en el proyecto RLA/7/012.........41
3.1. Contenido de humedad en el sedimento.
3.2. Determinacin de las prdidas por ignicin (PPI).
3.3. Determinacin de 210Pb en sedimentos.
3.4. Determinacin de radionclidos por espectrometra gama
3.5. Preparacin de muestras para anlisis de tamao de grano.
3.6. Composicin elemental por fluorescencia de rayos X (FRX).
3.7. Determinacin de C, N, TIC y TOC.
3.8. Procedimiento operativo normalizado para la determinacin de mercurio
total por el Analizador Directo de Mercurio DMA-80
3.9. Anlisis de contaminantes orgnicos en muestras de sedimentos.
3.9.1. Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por
cromatografa de gases con detector de captura electrnica.
3.9.2. Determinacin cuantitativa de hidrocarburos alifticos y totales
por cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama.
3.9.3. Determinacin de hidrocarburos policclicos aromticos por
cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas.
3.9.4. Preparacin de las disoluciones de siembra (estndares de
recuperacin, internos y enriquecimiento).
3.9.5. Ejemplos de curva de calibracin y calculos.
3.10. Factores de normalizacin para las concentraciones de metales en sedimento.

Participantes en la elaboracin del manual.........136


Comit Cientfico Asesor........136
Participantes en el proyecto RLA/7/012.....137
Tablas
Tabla 1: Cdigos numricos para los cores..........15
Tabla 2. Cdigos, alcuotas y pas responsable de los anlisis.....19
Figuras
Fig. 1. Secuencia de trabajo para el estudio de sedimentos superficiales............12
Fig. 2. Diagrama de flujo del mecanismo del procesamiento de muestras..........25

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INTRODUCCIN
Los sedimentos son el resultado de la acumulacin de diversos tipos de constituyentes, tanto
derivados del transporte continental como de origen biognico generados in situ. Debido a su
contenido de materia orgnica y de material arcilloso, pueden ser excelentes acarreadores y
acumuladores de elementos tanto naturales como de origen antropognico, tales como los
metales pesados o compuestos orgnicos persistentes (por ejemplo, hidrocarburos
poliaromticos y plaguicidas).

En reas en las que los sedimentos acumulados no han sufrido bioperturbacin, mezclado
fsico o episodios de erosin, la columna sedimentaria se constituye en un registro integral de
las tendencias temporales de los cambios ocurridos en los cuerpos de agua a lo largo del
tiempo, que contiene valiosa informacin histrica sobre las caractersticas del ambiente en el
momento de su formacin y de las modificaciones temporales resultado de las actividades
antropognicas [1]. Por lo anterior, la columna sedimentaria es un compartimiento natural
muy til para la reconstruccin de eventos ambientales en el pasado y tales registros pueden
proveer datos especficos acerca de los flujos antropognicos de los contaminantes
procedentes del desarrollo urbano e industrial [2,3].

Ante la ausencia de informacin relativa al estado y la evolucin de la contaminacin en la


zona costera, y si existe la posibilidad de obtener registros sedimentarios inalterados, el
estudio de la columna sedimentaria puede permitir la reconstruccin de la historia de la
contaminacin por metales pesados y compuestos orgnicos persistentes como los
hidrocarburos poliaromticos y plaguicidas. A partir de estos registros es posible obtener
datos especficos acerca de los cambios temporales tanto en las tasas de acumulacin
sedimentaria como en los flujos de contaminantes; sin embargo, la interpretacin apropiada
de esta valiosa informacin depende bsicamente de la obtencin de una tasa de acumulacin
confiable.

El 210Pb (T= 22.3 y) es un radionclido natural que se utiliza para fechar sedimentos
depositados durante los ltimos 100-150 aos [4]. Este mtodo es comnmente usado en
asociacin con 137Cs, un radionclido artificial cuya distribucin global en los sedimentos
tiene su origen en las pruebas atmicas que se realizaron alrededor del mundo, mayormente a
finales de la dcada de los aos 50 e inicio de los 60.
La presente gua pone especial nfasis en los mtodos de muestreo que permiten sentar las
bases para un fechado pertinente, tomando en cuenta el anlisis de parmetros geoqumicos y
sedimentolgicos complementarios (tales como humedad, porosidad, tamao de grano y
contenido de carbono orgnico e inorgnico) que pueden ayudar a mejorar la comprensin
tanto de las variaciones temporales en las tasas de acumulacin sedimentaria como de las
concentraciones de contaminantes en los sitios de estudio.

En esta gua se proponen mtodos de muestreo y anlisis de sedimentos para la obtencin de


geocronologas recientes derivadas de los radionclidos 210Pb y 137Cs, as como para la
reconstruccin histrica (~100 aos) de los flujos de metales pesados y compuestos orgnicos
persistentes, hacia el medio marino.

Se incluyen los cuidados necesarios para asegurar la calidad de los datos analticos de las
concentraciones de contaminantes y presenta los mtodos ms comunes de normalizacin de
las concentraciones de tales contaminantes, con el objeto de facilitar la compresin de su
variabilidad natural y, por tanto, la evaluacin del grado de contaminacin.

1. OBJETIVO GENERAL

Reconstruir la historia de la contaminacin por metales pesados (como Ag, As, Cd, Co, Cr,
Cu, Hg, Ni, Pb, Se, Sn, V, Zn) y compuestos orgnicos (hidrocarburos poliaromticos y
plaguicidas), a partir del estudio de cores sedimentarios recolectados en la zona costera del
Gran Caribe, fechados con el mtodo de 210Pb.

2. DISEO DEL MUESTREO


2.1. Metas

El diseo del muestreo es una de las fases ms importante en un proyecto de investigacin, ya


que gran parte del xito de cada programa de estudio est en la clara definicin de los
objetivos y la estrategia de muestreo. En nuestro caso en particular se pretende:

Obtener cores sedimentarios no perturbados que permitan la reconstruccin de la


geocronologa reciente utilizando los mtodos de 210Pb y 137Cs.
Determinar la concentracin de elementos de inters ecolgico, tales como Ag, As, Cd, Co,
Cr, Cu, Hg, Ni, Pb, Se, Sn, V, Zn; as como de otros elementos de inters geoqumico (Al,
Ba, Br, I Ca, Cl, Fe, Mg, Mn, Na, K, P, Rb, Si, Sr, Ti y Zr) acumulados en la columna
sedimentaria de los sitios de inters.

Identificar y cuantificar el contenido de hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs) y


plaguicidas organoclorados, presentes en la columna sedimentaria de las diferentes reas
de estudio. Los compuestos especficos a estudiar son:

Hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs): Acenafteno, acenaftileno, antraceno,


benzo[a]antraceno,
benzo[a]pireno,
benzo[e]pireno,
benzo[b]fluoranteno,
benzo[k]fluoranteno, benzo[g,h,i]perileno, bifenilo, criseno , dibenzo[a,h]antraceno,
dibenzotiofeno, fenantreno, fluoranteno, fluoreno, indeno[1,2,3c,d]pireno, naftaleno,
perileno, pireno, 1-metil naftaleno, 2-metil naftaleno, 2,6-dimetil naftaleno, 2,3,5-trimetil
naftaleno, 1-metil fenantreno.
Plaguicidas organoclorados (POCs): Aldrin, alpha-clordano, dieldrin, 4,4'-DDD, 4,4'DDE, 4,4'-DDT, endrin, endosulfan I, endosulfan II, endosulfan sulfato, endrin aldehido,
endrin cetona, alpha-HCH, beta-HCH, delta-HCH, gamma-HCH (Lindano), heptacloro,
heptacloro epxido, metoxicloro, gamma-clordano, cis-nonacloro, trans-nonacloro, 2,4'DDD, 2,4'-DDE, 2,4'-DDT.

Determinar si es posible, el grado de contaminacin por metales, hidrocarburos


poliaromticos y plaguicidas organoclorados en cada sitio de estudio.

Cuantificar la variacin temporal de los flujos (g cm-2 y-1) de los contaminantes de inters
en cada una de las reas de muestreo.

2.2. Seleccin de los sitios de muestreo

2.2.1. Informacin bsica para el muestreo

Una vez se ha decidido cul es el rea de inters, para la seleccin de los sitios de recoleccin
de los cores sedimentarios se requiere contar con tanta informacin bsica como sea posible,
incluyendo:

10

a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)

fotos areas/satelitales
mapa batimtrico
registro de dragados
hidrodinmica de la zona
inventario de focos de contaminacin
cuencas hidrogrficas de influencia
mapa de distribucin de tamao de grano
mapas de contaminacin superficial
datos de calidad del agua e informacin sobre las poblaciones bentnicas.

2.2.2. Caractersticas del sitio de muestreo

Cuando se tiene como objetivo realizar una reconstruccin histrica de la contaminacin a


partir de cores sedimentarios, los sitios recomendados para la recoleccin de cores
sedimentarios son aquellos que presentan:

depsito preferencial de sedimentos finos (fangosos);


una tasa de sedimentacin entre 0.25 y 1.0 cm y-1;
una profundidad mnima de 15 m;
cierto grado de compactacin (evitar el sedimento demasiado poroso, susceptible a la
resuspensin); y
condiciones de hipoxia-anoxia (contenido de oxgeno disuelto <0.1 mg L-1), en las cuales
la actividad biolgica es mnima (macroinvertebrados bentnicos bivalvos, poliquetos, etc.).
Con el objeto de reducir la posibilidad de problemas de mezcla, se recomienda evitar los
sitios con actividad de dragado conocida; pesca de arrastre; fondeadero de embarcaciones o
trnsito de embarcaciones impulsadas con varas en el fondo. Se sugiere asimismo, realizar el
muestreo en poca de secas.
Se debern elegir sitios que evidencien condiciones de impacto antrpico tales como
descargas industriales o cambio en el uso del suelo y del agua; asimismo, se recomienda
mantenerse dentro del rea de influencia de las fuentes de contaminacin (la cual depender
de cada sitio en particular).
En el caso de aquellos lugares en los cuales no existan trabajos preliminares que aporten
informacin bsica para la eleccin del sitio de muestreo, antes de la recoleccin de cores
sedimentarios, se recomienda realizar un estudio de sedimentos superficiales en el rea de
inters (ver seccin 3).
2.3. Recomendaciones generales durante el muestreo

A continuacin se presentan algunas recomendaciones bsicas durante la campaa de


muestreo:

Desarrollar el plan de campaa de muestreo en conjunto con todo el personal involucrado


en el mismo.
Verificar que todo el personal involucrado en el muestreo est capacitado para cumplir con
los objetivos establecidos en el diseo del muestreo.
Mantener las medidas de seguridad durante el muestreo y navegacin.
Asegurar que todo el personal involucrado en el muestreo utilice guantes y evite el uso de
protectores solares y repelentes, ya que estos pueden contaminar los cores.
No fumar durante el muestreo.

11

De ser posible, parar el motor de la embarcacin y recolectar la muestra en el lado contrario


al sitio de descarga del agua de lastre o de las sentinas.
3.

SEDIMENTOS SUPERFICIALES

Los pasos recomendados para el estudio de sedimentos superficiales se presentan en la Fig. 1.


Esta secuencia se inicia a partir de la seleccin del sitio de muestreo, de conformidad con las
instrucciones descritas previamente en la seccin 2.2.
3.1. Muestreo

Los sedimentos superficiales sern muestreados en una rejilla de 20 a 30 estaciones de


muestreo, utilizando una draga tipo Van Veen.

Antes de ser utilizada, la draga deber lavarse para retirar cualquier rastro de sedimento de
muestreos previos; as como deber enjuagarse cada vez que se use, con agua del sitio de
muestreo.
Los contenedores y utensilios de plstico que sern utilizados para manipular muestras
destinadas al anlisis de metales deben ser lavados secuencialmente en HCl (2N) y
HNO3(2N), enjuagados con agua destilada y secados al aire, protegidos de fuentes de
contaminacin.

Se deber realizar un registro de informacin bsica de cada sitio de muestreo, utilizando el


formato diseado para este propsito (ver seccin 5).

Fig. 1:

Secuencia de trabajo para el estudio de sedimentos superficiales.


12

Se tendr cuidado de recolectar solamente la capa superficial de los sedimentos


recuperados con la draga (1 cm de espesor). Esto tiene el propsito de asegurar
homogeneidad en la estrategia de muestreo y evitar que sedimentos recientes se mezclen
con sedimentos demasiado antiguos. Esta separacin deber realizarse con la ayuda de una
esptula del material adecuado para evitar la contaminacin de la muestra; por ejemplo, de
plstico en el caso de las muestras que sern analizadas por metales pesados.

Las muestras de sedimento se colocarn en bolsas de plstico de peso conocido (taradas) y


se registrar el peso hmedo.

Con el fin de evitar la confusin y prdida de material en los diferentes pasos del proceso
del estudio, las muestras debern ser cuidadosamente identificadas y etiquetadas de
conformidad con las instrucciones provistas en la seccin 6. Se deber asegurar que las
etiquetas estn marcadas firmemente en el exterior de la bolsa que contiene la muestra; y
de preferencia, se deber colocar una segunda bolsa plstica que evite que la etiqueta sea
borrada.
3.2. Anlisis de humedad y prdidas por ignicin

Los sedimentos debern ser analizados por humedad y prdidas por ignicin (PPI).

Para el anlisis de humedad (%) las muestras se secarn a una temperatura de 45C en estufa
y se registrar el peso seco. Se deber pesar en balanza granataria con una precisin mnima
de 0.001 g. Se recomienda verificar el peso de la muestra seca hasta encontrar un valor
constante, es decir, hasta que las diferencias entre pesadas sea <1%). El porcentaje de
humedad de la muestra se calcula utilizando la frmula siguiente:
Humedad (%) =

(Peso fresco

Peso sec o )
x 100
Peso fresco

Las muestras se disgregarn a mano para separar las alcuotas necesarias para los anlisis
subsecuentes (Tabla 1).
Para el anlisis de prdidas por ignicin (PPI, %) se pesarn 0.5 g de sedimento seco un crisol
de porcelana, en una balanza granataria, con una precisin mnima de 0.001 g. La muestra se
calcinar en una mufla a 550C durante 4 horas (tomar el tiempo una vez que la temperatura
deseada ha sido alcanzada y estabilizada). La muestra se dejar enfriar hasta 80-100C y se
transferir a un desecador, donde se dejar enfriar a temperatura ambiente antes de volver a
pesarse. Las PPI se calculan como sigue:
PPI (%) =

(Peso inicial

Peso calcinado )
x 100
Peso inicial

Los laboratorios debern garantizar que el anlisis de las muestras sea reproducible y para
ello es importante tener en consideracin los diversos factores que afectan el anlisis de PPI;
por ejemplo, la posicin de la muestra en el interior de la mufla. Se recomienda que las
muestras se introduzcan hacia el fondo de la mufla, ya que las muestras colocadas cerca de la
puerta del equipo estarn sujetas a una menor temperatura que aquellas al fondo; asimismo,
debe asegurarse que las muestras estn bien distribuidas en los crisoles y evitar que estos sean
demasiado pequeos.

13

3.3. Preparacin de muestras para anlisis subsecuentes

Una vez realizados los anlisis de humedad y de PPI, el resto de la muestra se separar en
bolsas de plstico, de tamao adecuado a la cantidad de muestra requerida para los anlisis
subsecuentes (distribucin de tamao de grano y metales) de conformidad con la Tabla 2,
donde se muestran las cantidades mnimas y ptimas necesarias para cada anlisis. Se hace
notar que la cantidad mnima ha sido pensada para aquellas muestras de sedimento de las que,
debido a un alto contenido de humedad, no se cuente con las cantidades ptimas de sedimento
para cada anlisis.

Cada bolsa deber ser codificada apropiadamente de acuerdo a las instrucciones de la


seccin 6 y Tabla 2.

Se separarn de 1 a 2 g de sedimento SIN MOLER para el anlisis de tamao de grano por


dispersin de rayo lser.

El resto de la muestra se moler en mortero, de preferencia de gata. El mortero debe ser


previamente lavado con jabn libre de fosfatos y enjuagado con agua corriente;
posteriormente deber recibir un enjuague con agua destilada y otro con HCl diluido (2M);
finalmente, deber enjuagarse 3 veces con agua desionizada para eliminar por completo los
residuos cidos. Se recomienda limpiar muy bien el mortero de gata entre muestras.

14

4.

CORES SEDIMENTARIOS

4.1. Estrategia de muestreo de cores

Una vez recopilada la informacin documental generada por estudios previos en la zona
(secciones 2.2.1. y 2.2.2.) se podrn elegir los sitios mas convenientes para la recoleccin de
los cores sedimentarios. A continuacin se listan las indicaciones seguidas para el muestreo
en el proyecto RLA/7/012:
Nmero y localizacin de estaciones: se escogieron 3 estaciones de muestreo por rea de
inters.

Nmero de cores sedimentarios: debido a la incompatibilidad que existe para la


manipulacin de muestras, dependiendo del anlisis a que sern destinadas (uso de plstico
para anlisis de metales, y de vidrio o metal para el anlisis de compuestos orgnicos) se
recolectaron 3 cores sedimentarios en cada estacin.

Propsito de los cores: de conformidad con la Tabla 1, el core I se destin al anlisis de


radionclidos (geocronologa), metales y parmetros geoqumicos; el core II para
contaminantes orgnicos (hidrocarburos poliaromticos y plaguicidas organoclorados); y
el core III se conserv como testigo (ver seccin 4.6.).

Para la recoleccin de las muestras se utiliz un nucleador de gravedad tipo UWITEC, que
permite recolectar 3 cores de manera simultanea, aunque en caso necesario, tambin
permite la recoleccin de cores de forma individual.
Toda la informacin relativa al muestreo de cores sedimentarios, incluyendo localizacin y
caractersticas del sitio de muestreo deber ser cuidadosamente registradas en la planilla de
recoleccin de cores de sedimentos (seccin 5.2.).

Core

Tabla 1: Cdigos numricos para los cores

II

III

Anlisis a realizar

Radionclidos, metales y parmetros geoqumicos

Contaminantes orgnicos

Testigo

4.2. Limpieza de material para muestreo de cores


4.2.1. Equipo de muestreo

Antes de ser utilizados, los nucleadores sern lavados para retirar cualquier rastro de
sedimento de muestreos previos y sern enjuagados cada vez con agua del sitio de muestreo.
4.2.2. Material para metales pesados

Antes de ser utilizados, los contenedores y utensilios de plstico que sern utilizados para
manipular muestras destinadas al anlisis de metales deben ser lavados secuencialmente en
HCl (2N) y HNO3(2N), enjuagados con agua destilada (o milliQ) y secados al aire, protegidos
de fuentes de contaminacin.
15

4.2.3. Material para contaminantes orgnicos

Los contenedores y utensilios de vidrio que sern utilizados para manipular muestras
destinadas al anlisis de contaminantes orgnicos deben ser lavados con agua y jabn antes de
usarse.
4.3. Parmetros in situ

Los parmetros complementarios que se recomienda determinar durante la recoleccin de las


muestras se listan a continuacin:

Temperatura (Sonda multiparamtrica)


Salinidad (Sonda multiparamtrica)
Oxgeno disuelto (Sonda multiparmetrica)
Profundidad de la columna de agua (Ecosonda)
Parmetros meteorolgicos (temperatura del aire, velocidad y direccin del viento), si
la embarcacin cuenta con estacin meteorolgica.

4.4. Manejo de cores en el campo


4.4.1. Inspeccin del core

Considerando que el objetivo principal es reconstruir la geocronologa reciente (100-150


aos) de la contaminacin, cada vez que se recolecte un core, se deber realizar una
inspeccin visual para verificar:
(a)

(b)

que tenga una superficie horizontal;

la ausencia de vestigios de mezclado o perturbacin, ya sea fsica o biolgica, tales


como grietas, burbujas de aire atrapado, resuspensin, parches de mezcla de sedimento
de diferentes colores o texturas, conchas de bivalvos y tubos de poliquetos, etc.

En caso de que algn core presente una superficie inclinada o alguna indicacin de mezcla, se
recomienda desecharlo y reintentar la recoleccin.
4.4.2. Cuidados durante el muestreo

Una vez tomados los cores de sedimentos en la estacin seleccionada, se deber:

Completar los datos correspondientes en la planilla de recoleccin de cores (seccin 5.2.)


Codificar y etiquetar los cores cuidadosamente, como se indica en la seccin 6.2.

Se tomar una fotografa tcnica en la que el core est acompaado de una escala mtrica
de referencia. Si no es posible hacerlo en el campo, se tomar en el laboratorio tan pronto
sea posible.

Asegurar que durante la operacin de muestreo los cores se mantengan en el lugar ms


fresco de la embarcacin, protegidos del sol y de cualquier posibilidad de contaminacin
por polvo o lluvia (colocar su tapa o una bolsa plstica sobre cada tubo).
Mover los cores con precaucin, evitando golpearlos durante el transporte.

Manipularlos muy cuidadosamente en todo momento en posicin vertical, para lo cual se


colocarn en una rejilla, que impida que se incline para evitar mezclado;
16

Conservarlos en condiciones de refrigeracin (4C), siempre que sea posible.


4.5. Manejo de cores en el laboratorio

Se recomienda dejar reposar los cores en el laboratorio (en el sitio en que ser procesado) al
menos 24 h, para asegurar la sedimentacin de partculas en suspensin en la superficie
acuosa del core.

Se eliminar la mayor cantidad posible del agua sobrenadante, usando una manguera flexible
de plstico transparente (dimetro menor a 1 cm) teniendo cuidado de no resuspender la capa
superficial. El agua sobrenadante remanente ser recolectada con ayuda de una pipeta
automtica y se adicionar, despus de una evaporacin parcial (volumen mximo de 10 ml),
a la primera seccin cortada del core.
Si no se ha realizado en el campo, se tomar una fotografa tcnica en la que el core est
acompaado de una escala mtrica de referencia.
4.5.1. Corte del core

Los cores se cortarn utilizando el instrumento de corte de acero inoxidable provisto junto
con los nucleadores de gravedad (por ejemplo UWITEC o similar). Se deber tener cuidado
de descontaminar los instrumentos de corte entre muestras por medio de un enjuague con
agua destilada. Las muestras debern colocarse en bolsas de plstico que debern ser
codificadas de conformidad con la seccin 6.3. de este manual.

Con el objetivo de obtener una buena resolucin en el anlisis geocronolgicos, los cores se
cortarn en secciones de 1 cm de espesor. Considerando que la tasa de sedimentacin en una
zona costera es de 0.25 a 1.0 cm ao-1 y asumiendo una tasa promedio de 0.5 cm ao-1, en 50
cm esperaramos contar con sedimentos acumulados durante 100 aos.
Tomando en cuenta que el tubo del nucleador UWITEC tiene un dimetro de 9 cm, una capa
de 1 cm de espesor tendra aproximadamente 95 g de sedimento hmedo (20.25 cm2 x 3.1416
x 1 cm x 1.5 g cm-3).
Es importante tener en consideracin que la extrusin del core sedimentario provoca friccin
del sedimento al interior del tubo muestreador y que, debido a la cohesividad de algunos
sedimentos (sobre todo aquellos altamente lodosos), van quedando residuos de sedimento
adheridos a las paredes interiores del tubo muestreador, con lo cual es posible contaminar las
muestras mas profundas con restos de las muestras mas superficiales. Por lo anterior, para
eliminar el riesgo de contaminacin generado por el contacto con el tubo muestreador, se
sugiere que siempre que sea posible, se utilice un anillo de material inocuo (metlico, de
plstico o un vaso de vidrio, dependiendo del anlisis que se vaya a efectuar posteriormente)
con un dimetro un poco mas pequeo que el tubo muestreador, para cortar la porcin mas
externa (una circunferencia de al menos 0.5 cm de espesor) de cada seccin cortada.
Se recomienda el uso de guantes de ltex (de preferencia sin talco) para manipular las
muestras, as como utilizar nicamente material de plstico para el manejo de las submuestras
de metales pesados. Asimismo, slo deber utilizarse instrumentos de vidrio, acero inoxidable
y papel aluminio, para el manejo de las muestras que sern destinadas al anlisis de
contaminantes orgnicos.

Una vez iniciado el corte de cada submuestra, se debern registrar inmediatamente las
caractersticas del sedimento, utilizando la planilla de caracterizacin de los cores (seccin
5.3.). De ser posible, se recomienda realizar fotografas de cada corte.
17

Se recomienda separar los macrorestos presentes en los intervalos del core, tales como trozos
de madera, pedazos de rocas y conchas, utilizando una pinza: (a) de plstico, en el caso del
core I; o (b) de metal, para el sedimento que ser analizado por compuestos orgnicos del
core II. Los macrorestos se almacenarn en bolsas de nylon y se registrar la profundidad a la
que fueron encontrados en la Planilla de caracterizacin de los cores (Anexo 1). En el caso de
conchas de organismos, se recomienda identificar la especie correspondiente.
4.6. Procesamiento por tipo de core

4.6.1. Core I: radionclidos, metales y parmetros geoqumicos

Utilizando una esptula plstica colocar las muestras frescas en bolsas de plstico de peso
conocido (tarados). Pesar la muestra hmeda en una balanza con una precisin mnima de
0.001 g.

Secar a temperatura 45C en estufa; se recomienda verificar el peso, al intervalo de tiempo


que sea necesario (se verificar en cada core, hasta que las diferencias entre pesadas sea <1%,
es decir, peso constante) y registrar el peso seco. Calcular el porcentaje de humedad de la
muestra utilizando la frmula siguiente:
Humedad (%) =

(Peso fresco

Peso sec o )
x 100
Peso fresco

Una vez secas, las muestras deben ser disgregadas en la propia bolsa ayudndose de la mano
de un mortero, ya que el secado en estufa tiende a formar rocas que no se pueden deshacer
fcilmente. Este tratamiento debe servir nicamente para permitir separar las alcuotas para
(a) anlisis de tamao de grano; y (b) el resto de los anlisis.

Para el anlisis de prdidas por ignicin (PPI) se utilizar una alcuota de sedimento seco de
peso conocido (~0.5 g) de cada seccin del core, que ser pesada en una balanza con
precisin mnima de 0.001g. La muestra ser calcinada en un crisol de porcelana, a 550C
durante 4 horas. La muestra se dejar enfriar hasta 80-100C y se transferir a un desecador,
donde se dejar enfriar a temperatura ambiente antes de volver a pesarse. El porcentaje de PPI
se calcula como sigue:
PPI (%) =

(Peso inicial

Peso calcinado)
x 100
Peso inicial

Se separarn de 1 a 2 g de sedimento SIN MOLER para el anlisis de tamao de grano por


dispersin de rayo lser. El resto de la muestra ser molida en mortero (de preferencia de
gata) para su distribucin entre los laboratorios analticos que realizarn los anlisis
subsecuentes. El mortero debe ser previamente lavado con jabn libre de fosfatos y enjuagado
con agua corriente; posteriormente deber recibir un enjuague con agua destilada y otro con
HCl diluido (2M); finalmente, deber enjuagarse 3 veces con agua desionizada para eliminar
por completo los residuos cidos. Tomar en cuenta que la molienda deber ser realizada de
las capas mas profundas a las ms recientes, para reducir los riesgos de contaminacin entre
muestras. Se recomienda asimismo, limpiar muy bien el mortero de gata entre muestras; y
lavar el mortero cada vez que se cambie de core.

18

Anlisis

Tabla 2. Mtodos de anlisis y alcuotas requeridas.


Unidad

Mtodo

Cdigo

Mnimo (g)

Optimo (g)

Core I: Radionclidos, metales y parmetros geoqumicos


Humedad
Prdidas por ignicin
C, N
Metales
210
Pb, 137Cs
210
Pb (210Po)
Tamao de grano

%
%
%
%
Bq kg-1
Bq kg-1
%

HAPs
Plaguicidas
Mercurio

mg kg-1
mg kg-1
mg kg-1

Temperatura agua
Salinidad del agua
Oxgeno disuelto

Estufa (45 C)
Mufla (550 C)
Analizador elemental
Fluorescencia rayos-X
Gama espectrometra
Alfa espectrometra
Dispersin lser

HUM
PPI
C-N
XRF
GAM
ALF
GRA

0.5
1.0
4.0
20
0.5
1.0

GC-FID, GC-MS
GC-ECD
AMA

HAP
PLA
AMA

5
5
0.5

10
10
2.0

Core II: Compuestos orgnicos

Anlisis opcionales

C
Sonda
Sonda
-1
mg L Sonda

T
S
OD

Total
0.5
1.5
5.0
25
1.0
2.0

Las alcuotas para los anlisis subsecuentes sern colocadas en bolsas de plstico, de tamao
adecuado a la cantidad de muestra requerida para cada anlisis, de conformidad con la Tabla
2, donde se muestran las cantidades mnimas y ptimas necesarias.

Se hace notar que la cantidad mnima ha sido pensada para los intervalos del core
sedimentario en los cuales, debido a un alto contenido de humedad, no se cuente con las
cantidades ptimas de sedimento para cada anlisis. No obstante, se hace hincapi en que es
importante separar la cantidad ptima siempre que sea posible.
4.6.2. Core II: contaminantes orgnicos

Debido a que el contacto de los sedimentos con plstico podra provocar una contaminacin
por ftalatos (compuestos que se utilizan para dar flexibilidad a muchos plsticos como el
PVC), el sedimento que se usar para analizar los contaminantes orgnicos, ser manipulado
nicamente con instrumentos de vidrio o metlicos. Se recomienda evitar que los sedimentos
tengan contacto con las paredes del tubo muestreador, por consiguiente, la muestra
correspondiente ser obtenida del centro del core, separando el exterior con la ayuda de un
aro de tefln o vidrio (podra utilizarse un vaso de dimetro menor al nucleador).
La muestra fresca ser colocada en recipientes (o recortes) de papel de aluminio prepesados
(tarados). Se registrar el peso hmedo; se secarn en estufa (a una temperatura mxima de

19

45C) hasta peso constante y se calcular el contenido de humedad (ver seccin 4.6.1.). Una
vez secas, las muestras se disgregarn en mortero de porcelana para su distribucin.

Las alcuotas de sedimento destinadas al anlisis de componentes orgnicos se colocarn en


recipientes (o recortes) de papel aluminio y, una vez bien envueltas, se introducirn en bolsas
de plstico para su distribucin. La cantidad de muestra necesaria se define en la Tabla 2,
donde se muestran las cantidades mnimas y ptimas necesarias, as como el pas asignado
para su realizacin.
Las muestras de sedimentos destinadas al anlisis de compuestos orgnicos debern ser
conservadas en refrigeracin (a 4C) hasta su anlisis.
4.6.3. Core III: testigo

El core III (testigo) se conservar cortado y seco para ser utilizado en caso de necesidad de
anlisis adicionales no considerados anteriormente.

Este core ser procesado simultneamente para ser analizado tanto por metales como por
compuestos orgnicos; por tanto, las muestras de cada seccin sern divididas en 2 alcuotas:
(a) una para el anlisis de componentes orgnicos obtenida de la fraccin central del core,
utilizando un vaso de vidrio; y (b) la otra, colectando el sedimento remanente para el anlisis
de metales, utilizando los utensilios de plstico. Ambas debern ser apropiadamente
codificadas (ver seccin 6.3.).

Las muestras destinadas al anlisis de metales, se colocarn en bolsas de plstico y las


muestras que sern utilizadas para el anlisis de componentes orgnicos, se sern depositadas
en recipientes (o recortes) de papel aluminio. En ambos casos, se registrarn los pesos
hmedos y se secarn hasta peso constante, en estufa a temperatura menor a 45C, con el
objeto de determinar el contenido de humedad (ver seccin 4.6.1.).
Una vez secas, las muestras se disgregarn en mortero de porcelana y sern conservadas
como testigo para ulteriores anlisis.
4.7. Conservacin de las muestras

Es importante que una vez que las muestras secas destinadas al anlisis de metales pesados se
conserven en un desecador para evitar que vuelvan a tomar humedad del ambiente durante el
tiempo de espera para ser analizadas. Los laboratorios debern asegurarse que las muestras
estn secas y, en caso contrario, se deber volver a secar el material antes de proceder a
cualquier anlisis.

Las muestras de sedimentos para el anlisis de compuestos orgnicos debern ser conservadas
en refrigeracin (a 4C) hasta su anlisis. En los laboratorios, las muestras debern ser
igualmente conservadas en refrigeracin hasta su extraccin; los extractos de las muestras
sern mantenidos a 4C hasta su anlisis instrumental; luego de lo cual deben ser tambin
almacenados en oscuridad a -20C. Se recomienda guardar congelados los extractos restantes
del anlisis de las muestras, as como los sedimentos sobrantes, hasta el final del estudio.

20

5.

REGISTROS DE MUESTREO

Con la finalidad de poseer informacin bsica del lugar y condiciones del sitio de muestreo
para el momento de la recoleccin, se debe completar manualmente la Planilla de recoleccin
correspondiente.
5.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales

La informacin bsica del muestreo de sedimentos superficiales (Anexo 1) contempla los


siguientes datos:
a)
b)
c)
d)
e)
f)

fecha (da, mes, ao, hora)


nombre de los responsables de la campaa y de la toma de muestras.
nmero de estacin
localizacin geogrfica (coordenadas)
profundidad del sitio de muestreo
En la seccin de observaciones, se detallar cualquier pormenor que permita
identificar caractersticas especficas de la muestra (desembocadura de un ro, color,
olor, presencia de restos de conchas en el sedimento, etc.).

En la medida de lo posible sera conveniente contar con informacin complementaria tal


como: temperatura, salinidad y oxgeno disuelto, que pueden ser medidos con sonda
multiparamtrica; as como, informacin sobre parmetros meteorolgicos (temperatura del
aire, velocidad y direccin del viento), si la embarcacin cuenta con estacin meteorolgica.
5.2. Planilla de recoleccin de cores sedimentarios

La informacin bsica del muestreo de cores sedimentarios deber registrarse en la planilla


correspondiente que se presenta en el Anexo 1, incluyendo los siguientes datos:

a) Ubicacin geogrfica (coordenadas)


b) Fecha y hora del muestreo (da, mes, ao, hora)
c) Datos hidrogrficos (direccin y velocidad de las corrientes y mareas, temperatura,
etc)
d) Informacin meteorolgica (direccin y velocidad del viento)
e) Identificacin de la muestra (cilindro usado o muestreador, cdigo del core, longitud
del core)
f) Nombre de los responsables de la campaa y de la toma de muestras.
g) En la seccin de observaciones, se detallar a qu profundidades se producen
cambios de color y otras caractersticas macroscpicas que se observen desde el
exterior (conchas, espacios vacos, burbujas, etc.).

5.3. Planilla de caracterizacin de cores sedimentarios

Se debern registrar las caractersticas de los sedimentos tales como olor, textura aparente de
la muestra, color (de conformidad con la tabla Munsell) y presencia de macrorestos utilizando
la planilla correspondiente que se encuentra en el Anexo 1. En esta planilla tambin, debern
incluirse los pesos hmedo, seco y calcinado, que permitirn calcular los contenidos de
humedad y el porcentaje de prdidas por ignicin de cada muestra.

21

6.

CODIFICACIN DE MUESTRAS

6.1. Sedimentos superficiales

A fin de que haya una identificacin unvoca de las muestras superficiales es necesario
asignar un cdigo a cada una de las muestras recolectadas. Por ejemplo, en el caso del
proyecto RLA/7/012 las muestras de sedimentos superficiales se etiquetaron como sigue:
Cdigo del Proyecto, Cdigo del Pas, Fecha (dd/mm/aa), Estacin (nmero arbigo), de
conformidad al ejemplo que se muestra:
cdigo del pas

estacin

RLA7012VEN121107-1
cdigo del
proyecto

fecha
(ddmmaa)

6.2. Cdigos para cores sedimentarios en el campo

En el mismo ejemplo, los cores fueron etiquetados de la siguiente manera: Cdigo del
Proyecto, Cdigo del Pas (presentados en la seccin 6.1.), Fecha (dd/mm/aa), Estacin
(letra), #Core (en nmero romano) de conformidad al ejemplo que se muestra a continuacin:
cdigo del pas

estacin

RLA7012VEN121107AI
cdigo del
proyecto

fecha
(ddmmaa)

core

6.3. Cdigos del intervalo del core sedimentario

Siguiendo el mismo ejemplo, las secciones de los cores de sedimentos se codificaron de la


siguiente manera: al cdigo del core, se le aadir la indicacin del intervalo de corte (en cm)
de conformidad al ejemplo que se presenta a continuacin:
intervalo
estacin de corte

cdigo de pas

RLA7012VEN121107AI0-1
cdigo de
proyecto

fecha
(ddmmaa)

core

Este cdigo ser registrado en la Planilla de caracterizacin de los cores (ver Anexo 1).

22

6.4. Cdigos de las alcuotas de sedimento para anlisis

Una vez pesadas las muestras secas sern divididas de conformidad a los anlisis que sern
realizados. Las alcuotas de sedimento de cada seccin del core deben codificarse de la
siguiente manera: al cdigo del intervalo del core se le aadir un cdigo que identificar el
tipo de anlisis al que ser destinada, de conformidad con la Tabla 2. A continuacin se
presenta un ejemplo, considerando una muestra superficial (intervalo 0-1 cm) destinada al
anlisis de espectrometra gama (GAM) del proyecto RLA7/012:
intervalo
estacin de corte

cdigo de pas

RLA7012VEN121107AI0-1GAM
AM
cdigo de
proyecto

fecha
(ddmmaa)

core

anlisis

Con la finalidad de evitar la prdida de alguna etiqueta por desprendimiento o dao causado
por la humedad o contacto con el sedimento, se recomienda que las etiquetas se coloquen
entre dos bolsas en cuyo interior se conservar la submuestra.

23

7.

GEOCRONOLOGA CON 210Pb

La recoleccin de un core sedimentario inalterado en la zona costera puede resultar difcil


debido a todas las posibles fuentes de perturbacin del sedimento que existen (p.e. alta
actividad biolgica, mezcla fsica, entre otras). Por esta razn, se recomienda que, antes de
iniciar los anlisis de contaminantes se asegure que se cuenta con un core sedimentario que
sea til para la obtencin de geocronologas con 210Pb.
7.1. Criterio de evaluacin de cores para fechado con 210Pb

Los datos de PPI son una buena aproximacin de las concentraciones de la materia orgnica
de los sedimentos [5] y el perfil de PPI respecto a la profundidad permitir estimar de manera
gruesa, si las concentraciones de la materia orgnica presentan la tendencia tpica de
decaimiento exponencial, resultado de la descomposicin por accin bacteriana [6]. Los
perfiles tpicos de degradacin de la materia orgnica normalmente slo pueden ser
observados en una columna sedimentaria mnimamente alterada, as que un perfil de
concentraciones de PPI que muestre esta tendencia, indicara la ausencia de mezcla en el core
sedimentario, y por lo tanto, buenas posibilidades de proveer un fechado confiable con el
mtodo de 210Pb.

Se recomienda que la seleccin del core que ser utilizado para el fechado con 210Pb est
basada en los datos de prdidas por ignicin (PPI) del core I de cada estacin de muestreo.
7.2. Seleccin del core para anlisis de 210Pb

Bajo la suposicin descrita en la seccin anterior, el anlisis de 210Pb con fines de fechado
ser realizado en el core I de la estacin de muestreo cuyo perfil de PPI presente la mejor
aproximacin a un decaimiento exponencial con la profundidad.
7.3. Estrategia de anlisis de 210Pb

Se recomienda realizar inicialmente una malla de prueba que incluya anlisis a cada 5 cm de
profundidad del core sedimentario (es decir, en un core de 50 cm de profundidad, se
analizarn 10 muestras). Estos datos permitirn realizar una evaluacin preliminar de las
tendencias del perfil de 210Pb respecto a la profundidad, con lo cual se determinar la
factibilidad de obtener un fechado confiable a partir de ese core. El perfil de 210Pb obtenido
debera mostrar tendencias comparables a la desintegracin exponencial, en cuyo caso se
analizar la totalidad de los intervalos en los cuales exista 210Pb en exceso.
Slo se debern realizar los anlisis geoqumicos y de contaminantes, cuando se haya
confirmado la pertinencia del perfil de 210Pb para obtener un fechado confiable.

7.4. Cores alterados

En la Fig. 2 se presenta el diagrama de flujo que describe la secuencia de trabajo propuesta


con los cores sedimentarios. En caso de que se determine que el core I del sitio A no es
adecuado para ser fechado debido a que se encuentra perturbado, se realizar el anlisis de
210
Pb del core I del sitio B y se seguir el mismo procedimiento descrito en las secciones 7.2.
y 7.3. En el caso de que se determine que el core I del sitio B se encuentra igualmente
alterado, se proceder al anlisis del core I del sitio C.

24

Sitio de muestreo

Core I

Core II

Core III

Corte, secado

Corte, secado

Corte, secado

NO

Archivo de Sedimentos

PPI
SI

NO

Anlisis
exploratorio
de 210Pb
SI
Plaguicidas

HAPs

Hg

Gama

C, N

Granulometra

Metales

Fig. 2: Diagrama de flujo del mecanismo del procesamiento de muestras.

25

8. ENSAYOS A DESARROLLAR

Se recomienda que antes de comenzar a analizar las muestras de sedimento, se realicen


ensayos previos con materiales de referencia para verificar la precisin y exactitud del
mtodo. En el Anexo 2 se incluyen un formato y un ejemplo para el informe de resultados
analticos, los cuales debern presentarse en unidades del sistema internacional.
8.1. Anlisis recomendados

Los mtodos listados a continuacin, utilizados en el proyecto RLA/7/012 estn descritos en


detalle en el Anexo 3.
8.1.1. Contenido de humedad

Se utiliza para calcular la porosidad y la densidad in situ del sedimento, con lo cual se estima
la masa acumulada en cada seccin del core (til para compensar los efectos de la
compactacin en los perfiles de 210Pb y los contaminantes). Las muestras hmedas y secas
debern ser pesadas en balanza con precisin mnima de 0.001 g y se recomienda verificar
que la diferencia entre pesadas sea menor a 1% para poder considerarse como peso constante.
8.1.2. Prdidas por ignicin (PPI)

Provee una estimacin del contenido de materia orgnica en los sedimentos. Aunque se sabe
que normalmente sobreestima los valores de materia orgnica debido a la prdida de agua
estructural en minerales arcillosos, es una tcnica simple y barata que permite conocer
rpidamente los perfiles de concentracin de materia orgnica.
8.1.3. Distribucin de tamao de grano

Permite conocer el contenido porcentual de las tres fracciones principales de tamao de grano
(arenas, limos y arcillas) y es til tanto para explicar desde los valores atpicos de 210Pb en
caso de perfiles anmalos (diferentes al decaimiento exponencial) como para normalizar los
valores de metales pesados. En el Anexo 3 se presentan las recomendaciones para la
preparacin de las muestras para el anlisis del tamao de grano.
8.1.4. Composicin elemental

Este anlisis nos permite conocer las concentraciones de elementos indicadores de procesos
diagenticos en la columna sedimentaria (Fe, Mn), del aporte de material terrgeno a los
sedimentos (Al, Ti) y de metales contaminantes tales como As, Cd, Hg, Cu, V, Pb y Zn.
8.1.5. C, N, TIC y TOC

El anlisis de la concentracin y flujos de C y N es til para identificar el proceso de


enriquecimiento de los cuerpos de agua por nutrientes (tendencias de eutrofizacin) y para
evaluar la procedencia de la materia orgnica presente en los sedimentos (a partir del clculo
de las proporciones C/N).

26

8.1.6. 210Pb

Es uno de los trazadores radiactivos utilizados para obtener la geocronologa de los cores
sedimentarios. En el proyecto RLA7/012 el 210Pb se estim por espectrometra alfa, a travs
de la determinacin de 210Po (asumiendo equilibrio radiactivo entre ellos). En el Anexo 3 se
presenta un mtodo [7].
8.1.7. 226Ra y 137Cs por espectrometra gama

El mtodo de fechado por 210Pb requiere de la determinacin de 226Ra y de la corroboracin


de fechas utilizando al radionclido artificial 137Cs. Las determinaciones de ambos
radionclidos puede ser realizada por espectrometra gamma de alta resolucin y bajo fondo.
8.1.8. Mercurio total

El mercurio total se puede cuantificar utilizando Analizadores Directos de Mercurio (AMA)


siguiendo el mtodo de referencia USEPA [8].
8.1.9. Hidrocarburos aromticos policclicos

Los anlisis de HAPs se pueden realizar por el mtodo de cromatografa de gases (GC-FID o
GC-MS) dependiendo de las capacidades de cada laboratorio.
8.1.10. Plaguicidas (hidrocarburos organoclorados)

Los anlisis de plaguicidas pueden ser realizados por cromatografa de gases (GC-ECD).
8.2. Anlisis opcionales

8.2.1. Temperatura y salinidad

Estas mediciones sirven para caracterizar el ambiente en la zona de inters. Sus valores se
determinan utilizando una sonda multiparamtrica.
8.2.2. Oxgeno disuelto

La determinacin de este parmetro servir para reconocer el grado de oxigenacin de las


aguas de fondo, con lo cual se podra entender mejor los perfiles de metales redox-sensibles
tales como Fe, Mn y/o Cd. Sus valores se determinan utilizando una sonda multiparamtrica.
8.2.3. Composicin mineralgica

Provee informacin acerca de los componentes minerales mayoritarios en el sedimento, como


por ejemplo, la distribucin de minerales arcillosos, para identificar la procedencia de los
sedimentos. Se realiza por el mtodo de difraccin de rayos X.

27

8.3. Control de calidad analtico

Los laboratorios debern analizar rutinariamente muestras por duplicado, blancos de


reactivo y materiales de referencia certificados. Es importante la participacin de los
laboratorios en ejercicios de intercalibracin y de intercomparacin.

Asimismo se recomienda a los laboratorios que, para obtener la mayor reproducibilidad de


los resultados, se aplique el mismo procedimiento analtico a todas las muestras analizadas
(incluyendo blancos, duplicados, etc.).

28

[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
[8]

REFERENCIAS

GOLDBERG, E.D. 1963. Geochronology with 210Pb, In: Radioactive Dating.


Proceedings of a Symposium, International Atomic Energy Agency, Vienna., 121131.

AXELSSON, V., EL-DAOUSHY, F., 1989. Sedimentation in the Edsviken bay


studied by the X-ray and the Pb-210 methods. Geografiska Annaler 71A.

VALETTE-SILVER N., 1993. The use of sediment cores to reconstruct historical


trends in contamination of estuarine and coastal sediments. Estuaries 16:577-588.

KRISHNASWAMI, S., LAL, D., MARTIN, J., MEYBECK, M., 1971.


Geochronology of lake sediments. Earth and Planetary Science Letters 11, 407-414.

DEAN, W. E., Jr. 1974. Determination of carbonate and organic matter in calcareous
sediments and sedimentary rocks by loss on ignition: comparison with other
methods. Journal of Sedimentary Petrology 44:242-248.
BERNER R. A., 1980. Early diagenesis: A theoretical approach. Princeton Series in
Geochemistry, Princeton University Press, Princeton, N.J., 241 pp.
FLYNN, W.W., 1968. The determination of low levels of polonium-210 in
environmental materials. Analytical Chimica Acta 43: 221-227.

USEPA, 1998. Mercury in solids and solutions by thermal decomposition,


amalgamation and atomic absorption spectrometry. Method 7473.
http://www.epa.gov/SW-846/pdfs/7473.pdf

29

ANEXO 1

30

1.1. Planilla de recoleccin de sedimentos superficiales


ORGANISMO INTERNACIONAL DE ENERGA ATMICA
Proyecto RLA/7/012
Pas___________________ Institucin:________________________________________ Sitio de muestreo:________________________________________________________________________
Fecha (dd/mm/aa):________________________________________________ Mtodo de recoleccin:_______________________Espesor de la muestra recolectada:__________________________
Estacina

Latituda

Longituda

Prof (m)a

Hora

Temp

Salinidad

pH

OD

Marea

Viento

Responsable de la campaa: ___________________________________________________________________________________________________________________________________


Nombre del responsable de la toma de muestras: __________________________________________________________________________________________________________________
Observaciones:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
a

Informacin imprescindible. Nota: favor de adjuntar un mapa con coordenadas de las estaciones de muestreo.

31

1.2. Planilla de recoleccin de cores de sedimentos


ORGANISMO INTERNACIONAL DE ENERGA ATMICA
Proyecto RLA/7/012
Pas______________Institucin:_______ _________________________________Localidad______________________________Estacin__________________
Fecha (dd/mm/aa):__________________Hora (24h):___________Profundidad: ______________Lat__________________________Long___________________
Condiciones climticas: estado del mar (calma, oleaje fuerte, etc):__________________________Viento: Direccin:___________Velocidad (m.s-1):__________

Cobertura de nubes: _____________________Responsable de la campaa: ____________________________________________________________________


Temperatura (C)

Salinidad

pH

Superficie
Fondo
Cdigo del Core

Longitud (cm)

Oxgeno disuelto
(mg.L-1)

Responsable de recoleccin

Observaciones:_________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________________________________
____________________________________

32

1.3. Planilla de caracterizacin de los cores


ORGANISMO INTERNACIONAL DE ENERGA ATMICA
Proyecto RLA/-7/012
Pas_______________Institucin:_________________Localidad_________________________Estacin__________Fecha (dd/mm/aa):______________

Responsable de Corte: ____________________________Longitud del Core (cm) ______________Cdigo del Core:______________________________


Seccin
(cm)

Color

Olor

Textura

Macrorestos

PesoHm (g)

PesoSeco (g)

PPIi (g)

PPIf (g)

Observaciones:_________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________________
33

ANEXO 2

34

2.1. Instrucciones para la preparacin de los informes de resultados analticos


Dr. Alberto Quejido Cabezas
Centro de Investigaciones Energticas,
Medioambientales y Tecnolgicas (CIEMAT)
Espaa
A continuacin se describe la informacin que los laboratorios analticos debern presentar al informar
los resultados de los anlisis que les fueron asignados (ver anexo A, donde se listan los ensayos que
realizar cada laboratorio). Se deber presentar un informe de resultados por cada core analizado.
1. Informacin general

Anlisis: lista de los anlisis realizado(s)


Laboratorio: nombre del laboratorio o unidad que realiz los anlisis (institucin y pas).
Personal: persona(s) responsable(s) de los resultados
2. Descripcin de los mtodos

Cada laboratorio participante har una breve descripcin de los mtodos de anlisis utilizados,
incluyendo la siguiente informacin:
a) Preparacin de la muestra: Describir brevemente el tratamiento que se le realiza a la muestra
antes del ensayo, por ejemplo: secado, molienda, tamizado, etc.

b) Descripcin del mtodo de ensayo: Descripcin del mtodo que incluya al menos los equipos
principales utilizados, los mtodos de calibracin y la referencia del mtodo estndar
utilizado.

c) Control de calidad: Mtodo y frecuencia de los controles de calidad, incluyendo enumeracin


de materiales de referencia empleados y reporte de los valores obtenidos para los materiales de
referencia certificados.

d) Incertidumbre: Breve descripcin del mtodo utilizado para el clculo de las incertidumbres y
las fuentes consideradas.
3. Presentacin de resultados

Los resultados de los anlisis debern ser presentados en el siguiente formato.


Cdigo de la muestra*
Segn instrucciones
descritas en el manual

Elemento/Radionclido/Mineral/Compuesto/Parmetro

Actividad/Concentracin/UNIDAD

Incertidumbre absoluta UNIDAD

Pueden reportarse varios elementos en un mismo informe que provengan del mismo ensayo; ejemplo:
radionclidos por gama-espectrometra, elementos por FR-X, etc.
Las unidades en las que se informan los resultados deben ser claramente establecidas en el encabezado
de cada columna (de conformidad con el anexo A).
4. Cdigos de identificacin de las muestras

Cada informe de ensayo deber conservar el cdigo de procedencia del corer incluyendo el anlisis
(ver instrucciones de codificacin del manual). Ejemplo: RLA7012CUB060208BI-XRF.

35

2.2. Ejemplo de informe analitico


NOMBRE DEL LABORATORIO ASIGNADO

INSTITUCION A LA QUE PERTENECE


REF: Cdigo de core y anlisis
EJ: RLA7012MEX010508AIII-CN

INFORME DE RESULTADOS
DE CARBONO TOTAL, CARBONO INORGNICO Y NITRGENO TOTAL
Madrid, Espaa, 1 de octubre de 2008
Laboratorio asignado: Divisin de Qumica del CIEMAT

Tcnica utilizada: anlisis por combustin y analizador especfico de carbono orgnico total
Responsables de los anlisis:
Da. Perla Griselle Mellado Vazquez, becaria del OIEA
Da. Cristina Garca Diego, tcnico del Laboratorio de Anlisis Inico y Elemental
Dr. Alberto Jos Quejido Cabezas, Jefe de la Divisin de Qumica
DESCRIPCIN DEL MTODO
Preparacin de las muestras.

Las muestras recibidas en la Divisin de Qumica del CIEMAT fueron tradas directamente
por parte del becario del Proyecto, Da. Perla Griselle Mellado Vzquez, siendo las
cantidades enviadas suficientes para la medida de los parmetros a determinar. Las muestras
no tenan un grado de molienda suficiente para la preparacin directa para anlisis elemental,
por lo que se tuvo de procesar de nuevo el material enviado. La muestra se termin de
homogeneizar y se pulveriz a un tamao de grano de unas 63 m, con un mortero de gata.
Descripcin del mtodo de anlisis

1.2.1 Anlisis de carbono y nitrgeno total

El carbono total (Ctot) y nitrgeno total (Ntot) se determinaron con un analizador elemental
LECO TRUSPEC. Se pesan por duplicado, del orden de 100 a 150 mg de la muestra
previamente secada, molida y homogeneizada, dentro de un contenedor de Sn, en una balanza
analtica. El contenedor se cierra hermticamente y se coloca en el muestreador automtico,
desde donde se introduce en el horno de combustin. En este horno se mantiene durante 2 a 3
minutos en varias etapas, en presencia de distintos contenidos de O2 en la corriente del gas
portado (perfil de combustin) para asegurar su completa oxidacin. Los gases generados en
todo este tiempo son recogidos en un contenedor de 4.5 litros y una vez mezclados, una
alcuota pequea de los mismos fluye a los detectores dnde son determinados el CO2
mediante un detector de infrarrojo y el N2, previo paso de los gases por el tubo de reduccin
de Cu, por el de conductividad trmica.
Para establecer las curvas de calibrado, se utilizan dos patrones certificados, con diferentes
contenidos de C y N, para cubrir un amplio intervalo de calibracin: un patrn de Suelo (Soil
LECO / 502-062 / Lote 1012) con contenidos de N 0.130 0.018 (k=2) % y de C 1.30 0.04
(k=2) % y el Patrn Suelo (Soil LECO / 502-309 / Lote 1002), N 0.80 0.02 (k=2) % y C
10.14 0.10 (k=2) %. Se pesan dentro del contenedor de Sn diferentes cantidades, del orden
de 50, 100 y 150 mg de estos materiales de referencia certificados y se introducen en el
36

analizador de modo similar a las muestras. Al representar la seal obtenida en los detectores
frente a los mg absolutos de C y N presentes en los patrones, se obtienen las curvas de
calibrado para el N y el C.
Previamente se introducen varias muestras como blancos, habitualmente una cpsula de Sn
vaca y el rea media obtenida se resta automticamente para estos elementos, tanto de la
seal obtenida para los patrones como de las muestras.
Una vez finalizado el anlisis, se establece el valor medio del blanco y se obtienen las curvas
de calibrado a partir de los resultados de los patrones. La curva de calibrado del N se ajusta a
una calibracin lineal de primer grado y la del C se realiza un ajuste cuadrtico. El contenido
de C y N de las muestras se recalcula a partir de las nuevas curvas de calibrado obtenidas.
1.2.2 Anlisis de carbono inorgnico total

La determinacin de Carbono Inorgnico Total (TIC) se realiza utilizando el mdulo de


Anlisis de Muestras Slidas SSM-5000 (Shimadzu), mediante una pre-acidificacin con
cido fosfrico en un horno a 200 C. Este mdulo es un accesorio especial para las series de
analizadores de Carbono Orgnico Total, (Shimadzu). El CO2 producido se transporta, en
corriente de aire, y se mide en el analizador de infrarrojos no dispersivo NDIR de alta
sensibilidad del TOC-V. Se sigue el procedimiento de anlisis descrito en la norma Europea
UNE-EN 13137:2002. Para la cuantificacin se emple una lnea de calibracin a partir de
CaCO3 (R2=0.9991).
El Carbono Orgnico Total (TOC) se establece por diferencia a partir de los resultados
obtenidos de C total y C inorgnico segn la norma UNE reseada anteriormente
Control de calidad

1.3.1. Anlisis de carbono y nitrgeno total

Se analizan al menos los dos patrones por duplicado y un par de blancos cada 10 muestras. A
lo largo del periodo de anlisis se efectuaron un total de 25 medidas de cada uno de los
patrones
Se han medido los materiales de referencia certificados Soil LECO / 502-062 / Lote 1012 y
Soil LECO / 502-309 / Lote 1002. Los resultados obtenidos son los siguientes:
Soil LECO / 502-062 / Lote 1012
Elemento Obtenido Incertidumbre
1.315
0.078
Ctot (%)
0.1317
0.0044
Ntot (%)

Certificado
1.30
0.130

Incertidumbre
0.02
0.009

Dif (%)
1.2
1.3

Soil LECO / 502-309 / Lote 1002


Elemento Obtenido Incertidumbre
10.08
0.018
Ctot (%)
0.7859
0.0008
Ntot (%)

Certificado
10.14
0.80

Incertidumbre
0.05
0.01

Dif (%)
-0.64
-1.8

1.3.1. Anlisis de carbono inorgnico total


Pendiente de confirmacin
Clculo de incertidumbre

La incertidumbre se ha calculado exclusivamente a partir de al menos de medidas replicadas


de todas las muestras del core, por lo que se trata de un ensayo de reproducibilidad. Las masas

37

tomadas de las muestras son diferentes, por lo que los resultados medidos se han
transformado en porcentaje real sobre la muestra de la seccin.
Adicionalmente, se han comparado las incertidumbres obtenidas para las muestras, con las
incertidumbres obtenidas en las medidas de los materiales de referencia, mediante la
aplicacin de pruebas F, observndose generalmente una incertidumbre comparable entre
ambos tipos de materiales, si bien es superior en las muestras que poseen un contenido muy
bajo de N total.
Referencia

RLA7012MEX010508AIII0-1
RLA7012MEX010508AIII1-2
RLA7012MEX010508AIII2-3
RLA7012MEX010508AIII3-4
RLA7012MEX010508AIII4-5
RLA7012MEX010508AIII5-6
RLA7012MEX010508AIII6-7
RLA7012MEX010508AIII7-8
RLA7012MEX010508AIII8-9
RLA7012MEX010508AIII9-10
RLA7012MEX010508AIII10-11
RLA7012MEX010508AIII11-12
RLA7012MEX010508AIII12-13
RLA7012MEX010508AIII13-14
RLA7012MEX010508AIII14-15
RLA7012MEX010508AIII15-16
RLA7012MEX010508AIII16-17
RLA7012MEX010508AIII17-18
RLA7012MEX010508AIII18-19
RLA7012MEX010508AIII19-20
RLA7012MEX010508AIII20-21
RLA7012MEX010508AIII21-22
RLA7012MEX010508AIII22-23
RLA7012MEX010508AIII23-24
RLA7012MEX010508AIII24-25
RLA7012MEX010508AIII25-26

UC
0.02
0.06
0.00
0.01
0.01
0.01
0.02
0.03
0.04
0.04
0.08
0.06
0.08
0.00
0.02
0.06
0.04
0.03
0.02
0.06
0.01
0.01
0.06
0.05
0.04
0.01

Ctot (%)

RSD (%)
1.19
3.54
0.00
0.90
0.47
0.42
1.25
1.82
2.40
3.14
5.62
4.71
7.04
0.00
2.05
5.34
4.12
2.95
2.27
6.40
0.84
0.83
6.22
5.47
3.86
1.46

Ntot (%)
UN
RSD (%)
0.021
14.09
0.007
5.24
0.007
5.66
0.021
13.69
0.014
8.84
0.000
0.00
0.007
4.56
0.007
4.88
0.007
5.66
0.007
7.44
0.007
7.44
0.007
7.44
0.015
21.37
0.023
31.87
0.017
24.96
0.010
16.46
0.004
5.48
-------------------

Soil LECO / 502-062 / Lote 1012


0.078
5.91
0.0044
Soil LECO / 502-309 / Lote 1002
0.018
0.18
0.0008
UC, UN= Incertidumbre de las mediciones de Ctot y Ntot, respectivamente.
RSD (%)= desviacin estndar relativa

38

3.33
0.10

RESULTADOS
Carbono total (Ctot) y nitrgeno total (Ntot)
Ntot (%)
Ctot (%)
Conc
UC
Conc
UN
RLA7012MEX010508AIII0-1
1.785
0.021
0.146
0.021
RLA7012MEX010508AIII1-2
1.600
0.057
0.135
0.007
RLA7012MEX010508AIII2-3
1.520
0.000
0.125
0.007
RLA7012MEX010508AIII3-4
1.570
0.014
0.155
0.021
RLA7012MEX010508AIII4-5
1.505
0.007
0.160
0.014
RLA7012MEX010508AIII5-6
1.695
0.007
0.140
0.000
RLA7012MEX010508AIII6-7
1.695
0.021
0.155
0.007
RLA7012MEX010508AIII7-8
1.550
0.028
0.145
0.007
RLA7012MEX010508AIII8-9
1.475
0.035
0.125
0.007
RLA7012MEX010508AIII9-10
1.125
0.035
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII10-11
1.385
0.078
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII11-12
1.200
0.057
0.095
0.007
RLA7012MEX010508AIII12-13
1.105
0.078
0.070
0.015
RLA7012MEX010508AIII13-14
1.110
0.000
0.071
0.023
RLA7012MEX010508AIII14-15
1.035
0.021
0.068
0.017
RLA7012MEX010508AIII15-16
1.060
0.057
0.059
0.010
RLA7012MEX010508AIII16-17
1.030
0.042
0.065
0.004
RLA7012MEX010508AIII17-18
0.960
0.028
<0.05
RLA7012MEX010508AIII18-19
0.935
0.021
<0.05
RLA7012MEX010508AIII19-20
0.995
0.064
<0.05
RLA7012MEX010508AIII20-21
0.845
0.007
<0.05
RLA7012MEX010508AIII21-22
0.855
0.007
<0.05
RLA7012MEX010508AIII22-23
0.910
0.057
<0.05
RLA7012MEX010508AIII23-24
0.905
0.049
<0.05
RLA7012MEX010508AIII24-25
0.915
0.035
<0.05
RLA7012MEX010508AIII25-26
0.970
0.014
<0.05
UC, UN= Incertidumbre de las mediciones de Ctot y Ntot, respectivamente.
Referencia

Carbono inorgnico total (TIC)


Se analizaron una de cada 5 muestras del core, a fin de determinar el fondo de carbonatos
del mismo, dado que los niveles de Carbono total son muy similares a lo largo del perfil.
El carbono orgnico total se calcul por diferencia entre Ctot y Ctic.
Referencia

RLA7012MEX010508AIII0-1
RLA7012MEX010508AIII5-6
RLA7012MEX010508AIII10-11
RLA7012MEX010508AIII15-16
RLA7012MEX010508AIII20-21
RLA7012MEX010508AIII25-26

Carbono inorgnico
Conc (%)
UTIC
0.398
0.002
<0.30
<0.30
0.469
0.001
0.625
0.016
0.746
0.003

39

Carbono orgnico
Conc (%)
UTOC
1.388
0.021
1.695
0.007
1.385
0.078
0.591
0.057
0.220
0.017
0.224
0.014

ANEXO 3

40

3.1. Contenido de humedad en el sedimento


Ruiz-Fernndez A.C.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa Mxico
Materiales:
Sedimento hmedo (seccin del core)
Estufa (45C)
Balanzas ( 0.001 g)
Bolsas de plstico con cierre hermtico
1. Determinar el peso de la bolsa de plstico (tara).
2. Introducir el sedimento hmedo.

3. Registrar el peso total (bolsa+sedimento).

4. Secar el sedimento en la estufa a una temperatura mxima de 45C, el tiempo que sea
necesario hasta llegar a peso constante. Se ha decidido utilizar esta temperatura para
evitar la prdida por volatilizacin de compuestos tales como Hg y contaminantes
orgnicos. El peso constante se alcanza cuando la diferencia entre pesadas de una sola
muestra es menor a 1%.
5. Retirar la muestra de la estufa y colocarla en un desecador hasta que est a
temperatura ambiente.
6. Pesar y anotar el peso del sedimento seco + bolsa.

7. Calcular el contenido de humedad relativa (en porcentaje, %) como sigue:


Humedad (%) =

(Peso se dim ento hmedo

Peso se dim ento sec o )


x 100
Peso hmedo

41

3.2. Prdidas por ignicin (PPI)


Ruiz-Fernndez A.C.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
Mxico
La determinacin del porcentaje de materia orgnica en sedimentos por medio del mtodo de
Prdidas por Ignicin (PPI) est basado en la prdida de peso ocasionada por la combustin
de los sedimentos hasta cenizas y dixido de carbono a 550 C. La muestra debe estar
perfectamente seca (verificar que se haya llevado a peso constante) y por tanto el resultado
est basado en porcentaje en gramos de sedimento seco.
1. Materiales:

Crisoles de porcelana
Mufla con capacidad de calentamiento a 550 C (temperatura constante)
Balanza analtica

2. Procedimiento:

Secar los crisoles de porcelana durante al menos 8 h en una estufa a 105 C. Dejarlos enfriar
en desecador y registrar el peso hasta que se hallen a temperatura ambiente.

Homogeneizar la muestra de sedimento seco (verificar que se encuentra a peso constante) y


pesar alrededor de 0.5 g (de preferencia molido) en una balanza de al menos 3 dgitos. Llevar
a combustin a 550 C durante 4 horas (Heiri et al., 2002). Retirar de la mufla cuando la
temperatura haya descendido a 100 C y dejar enfriar en desecador. Pesar nuevamente.
Las PPI son calculadas como sigue:

PPI550 = (PSIinicPSF550)/PSIinic)*100

Donde PPI550 representa las prdidas por ignicin a 550C (en porcentaje), PSIinic representa
el peso seco de la muestra antes de la combustin y PPI550 el peso de la muestra despus de
la combustin a 550C (ambos pesos en gramos).

La prdida de peso debera ser proporcional a la cantidad de materia orgnica contenida en la


muestra y Dean (1974) demostr una fuerte correlacin entre las PPI a 550C y el contenido
de carbono orgnico determinado cromatogrficamente en sedimentos lacustres. No obstante,
es importante resaltar que el contenido de materia orgnica (estimado por PPI) es equivalente
a 1.72 veces el contenido de Carbono orgnico (Nelson and Sommers, 1982)
3. Referencias

Dean, W. E. Jr., 1974. Determination of carbonate and organic matter in calcareous sediments and
sedimentary rocks by loss on ignition: Comparison with other methods. J. Sed. Petrol. 44:242248.

Heiri, O., Lotter A. F., Lemcke G., 2001. Loss on ignition as a method for estimating organic and
carbonate content in sediments: reproducibility and comparability of results. Journal of
Paleolimnology 25: 101110, 2001.
Nelson, D.W.,Sommers, L.E., 1982. Total carbon, organic carbon, and organic matter, in A.L. Page,
R.H. Miller, and D.R. Keeney, Eds., Methods of Soil Analysis (Part 2, 2nd Ed.), pp. 539-579.
American Society of Agronomy, Monograph 9.

42

3.3. Determinacin de 210Po (espectrometra alfa; basado en el mtodo de Flynn, 1968).


Ruiz-Fernndez A.C.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
Mxico.
REACTIVOS
HCl concentrado y 0.5 N
HNO3 concentrado
HF concentrado
209
Po como trazador
cido ascrbico
H2O desionizada MilliQ
Alcohol metlico
Limpiador de plata
Pintura acrlica en aerosol
Jabn libre de fosfatos
MATERIALES
Balanza analtica
Recipientes de tefln (50 ml de capacidad) con tapa de rosca, cerrado hermtico
Micropipetas de volumen variable (capacidad mxima de 5, 1 y 0.1 ml)
Plancha de calentamiento con control de temperatura
Tubos de centrfuga (50 ml)
Centrfuga
Vasos de precipitado de vidrio (250 ml)
Discos de plata, 2.5 cm dimetro
Agitador orbital
Espectrmetro alfa
PROCEDIMIENTO
1. Pesar de 0.1 a 0.5 g de sedimento seco y molido en un recipiente de tefln (con tapa
hermtica) utilizando una balanza con precisin mnima de 0.001 g.

2. Agregar una cantidad conocida de trazador de 209Po y registrar el peso


3. Agregar 4 ml HClconc+5 ml HNO3conc+1 ml HFconc

4. Cerrar hermticamente el recipiente y calentar a 150C por 8 horas (o durante la noche).


5. Retirar de la plancha y esperar a que el recipiente se enfre a temperatura ambiente.

6. Abrir el recipiente, enjuagar la tapa con HClconc y verter el enjuague en el recipiente.

7. Evaporar la mezcla de cidos a temperatura controlada (<900C) hasta sequedad. Nota: es


un buen momento para comenzar a preparar los discos de plata para el depsito de los
istopos de Po (ver instrucciones en el punto 16).
8. Agregar HClconc nuevamente y dejar evaporar. Repetir este paso 2 veces.

43

9. Resuspender el residuo usando HCl 0.5N, cuidando de enjuagar minuciosamente las


paredes del recipiente y transferir la solucin de la muestra a un tubo de centrfuga de 50
ml.
10. Centrifugar a 4000 rpm por 10 minutos y recuperar la solucin sobrenadante en un vaso
de precipitado de 250 ml. Resuspender el residuo con HCl 0.5N, centrifugar nuevamente
por 10 minutos y agregar el sobrenadamente al vaso de precipitado con la muestra del
centrifugado anterior.

11. Agregar aproximadamente 200 mg cido ascrbico (o hasta que la solucin se torne
incolora)
12. Colocar un disco de plata en el fondo del vaso de precipitado con la cara pulida hacia
arriba y colocar el vaso de precipitados en un agitador orbital, a temperatura ambiente,
durante 8 horas.

13. Sacar el disco de plata del vaso de precipitado, enjuagar con H2O desionizada;
posteriormente con alcohol metlico y dejar secar.

14. Una vez que el disco est seco, guardar en una cajita de plstico o cartn (Nota: un sobre
de papel o una bolsita de plstico funcionan de igual forma) anotando claramente la clave
de identificacin de la muestra.

15. Poner el disco de plata en el detector alfa y esperar a que ambos istopos (trazador de
209
Po y 210Po de la muestra) alcancen al menos 400 cuentas (equivalentes a 5% de
incertidumbre de conteo).

16. El disco de plata (2 cm de dimetro, 0.25 cm de espesor) debe limpiarse previamente con
solucin limpia-plata para eliminar rastros de oxidacin. Estos discos normalmente tienen
una cara pulida y otra sin pulir; si ste es el caso, se recomienda tener cuidado de
identificar la cara pulida y pintar la cara no pulida con pintura acrlica en spray, con lo
cual se evitar el depsito de los istopos de Po en la cara que no estar expuesta a los
detectores. Dejar secar la pintura al menos 2 h antes de usar los discos.

44

3.4. Determinacin de radionclidos por espectrometra gama

MIPSA

Cd: L-SA-132
MANUAL DE INSTRUCCIONES Y PROCEDIMIENTOS
CENTRO DE ESTUDIOS AMBIENTALES DE
Rev: 04
CIENFUEGOS-CUBA
Pg: 45 de 139
PROCEDIMIENTO PARA ESPECTROMETRIA GAMMA

ELABOR:
HECTOR CARTAS AGUILA

REVIS:
ELIECER MACHIN
RODRIGUEZ

APROB:
CARLOS ALONSO
HERNANDEZ

EMISIN:

REVISIN:

1. Objetivos

1.1.- Establecer los requisitos y el orden de trabajo para realizar el ensayo Espectrometra
Gamma.
2. Alcance
2.1.- Es aplicable a las mediciones gamma espectromtricas realizadas en sistemas con
detector semiconductor HPGe.
3. Referencias

Knoll. G.F Radiation Detection and Measurement. John Wiley & Son. New York. 1979.

Technical Report 295. Measurements of Radionuclides in Food and the Environment. OIEA.
Vienna. 1989.
Sistems Application Studies, PSD No.17, ORTEC. The Minimum Detectable Activity
Concept.

Quality Control for Environmental Measurements Using Gamma-Ray Spectrometry.


Environmental Monitoring and Support Lab, Las Vegas, Nev.
Reporte Tcnico CNM-MED-PT-0002. Gua BIPM/ISO para la expresin de la incertidumbre
en las mediciones. Los Cus, Quertaro, Mxico, 1994.
ASTM D 3648 Standard Practices for the Measurement of Radioactivity.

ANSI N42.14-1991. Calibration and Use of Germanium Spectrometer for the Measurement
of Gamma-Ray Emission Rates of Radionuclides.
Analysis of gamma spectra. Forschungszentrum Karlsruhe. Fortbildungszentrum fur
Technik und Umwelt.

IAEA Interregional Training Course Determination of Radionuclides in Environmental


Samples. Austria-Germany, 22 June - 17 July 1998.
4. Definiciones

Actividad: Nmero de desintegraciones radiactivas en la unidad de tiempo. La unidad de esta


magnitud en el SI es el Becquerel(1Bq=1s-1).

Actividad Especfica: Es la actividad normalizada por los valores de las magnitudes propias
de la muestra ensayada y el proceso de muestreo.

45

Area: Regin del pico por encima de la frontera superior del Pedestal que contiene los conteos
correspondientes a los cuantos gamma del radionclido en la muestra.

Eficiencia Absoluta de Pico: Nmero de conteos registrados bajo el pico de absorcin total de
energa entre el nmero total de cuantos gamma con esa energa emitidos por la muestra
durante el tiempo de medicin. Depende de la geometra de medicin. Ver 3.1.

Espectro: Funcin discreta que relaciona el nmero de conteos y el nmero del canal
atendiendo a la energa que los cuantos gamma depositan en el detector.

Geometra de Medicin: Es la configuracin espacial que ocurre en el conjunto muestradetector, donde ejercen gran influencia en los resultados de las mediciones: la forma del
envase donde est contenida la muestra y la posicin del mismo con respecto al detector.
Existen diversas geometras de medicin.

Integral: Regin del pico que contiene los conteos del fondo ms los conteos del radionclido
en la muestra; Integral = Area + Pedestal.
Lmite Crtico: se define como aquel valor de tasa de conteo neta el cual debe ser excedido
antes de plantearse que la muestra contiene algn material radiactivo medible superior al
fondo. Ver 3.3.

Nivel "Less Than": con, l se describe la cantidad de material radiactivo que pudiera estar
presente aunque ste no sea detectado; se define como la tasa de conteo neta mxima que una
muestra pudiera tener; es un concepto basado en la tasa de conteo neta que se mide, siendo
sta menor que el lmite crtico. Ver 3.3.
Lmite de Deteccin: se define como la cantidad ms pequea de material radiactivo que
puede ser detectada con algn grado de confianza especificado. Ver 3.3.

Lmite de Determinacin: se define como la menor tasa de conteo neta, la cual puede ser
detectada con una incertidumbre relativa especificada.

Pedestal: Regin del pico delimitada por sus fronteras en la zona que contiene los conteos del
fondo.

Tasa de Conteo: Nmero de conteos registrados en determinada zona del espectro dividido
por el tiempo durante el cual se registraron.
5. Complementarios

5.1.- Metodologa para el clculo del rea del fotopico y estimacin del tiempo de medicin.
5.2.- Frmulas para el clculo de la actividad especfica segn el tipo de muestra.
6. Responsabilidades

Es responsabilidad del Especialista en Mediciones Fsicas cumplir con lo regulado en este


procedimiento.
7.

Desarrollo

7.1. Introduccin:

Los sistemas espectromtricos permiten obtener la relacin entre la cantidad de cuantos


gamma que inciden en el detector y la energa de los mismos. La presencia de un
radionclido en la muestra se determina por un aumento de los conteos en las zonas
46

energticas de sus cuantos gamma caractersticos. Una vez registrada la informacin de cada
radionclido, estando el sistema calibrado, podemos determinar la actividad de los mismos.

El ensayo Espectrometra Gamma tiene como objetivo determinar la actividad especfica de


los radionclidos en la muestra objeto de ensayo; para lograrlo deben ejecutarse las acciones
segn determinado orden.
7.2. Orden de Trabajo

7.2.1.Monitoree y registre en el registro primario los parmetros ambientales, los cuales deben
estar en el intervalo siguiente: Temperatura: [18,26]C y Humedad Relativa: [48,60]%.
7.2.2.Chequeo de los parmetros de Control.

7.2.2.1. Consiste en la comprobacin peridica del valor de los parmetros del detector que
pueden variar por alguna causa. Se comprueban el valor de la eficiencia del detector para
determinada energa y determinada geometra y el valor del nmero de conteos del fondo para
determinado intervalo energtico.

7.2.2.2. Coloque un patrn adecuado en el lugar medicin, ajuste la posicin del pico en el
canal que le corresponde, colecte el espectro y calcule el rea del pico garantizando una
incertidumbre relativa menor que 5%. Utilice la metodologa explicada en el Anexo 1 o algn
programa procesador de espectros previamente validado, por ejemplo Silena e Interwinner y
finalmente calcule la eficiencia absoluta de pico segn la siguiente frmula:
Rt - Rf

=-----------Ap P

donde
Rt: es la tasa de conteo del radionclido del patrn ms el fondo.
Rf: es la tasa de conteo del radionclido en el fondo.
Ap: es la actividad del patrn

P: es probabilidad de emisin de los cuantos gamma segn el esquema de desintegracin del radionclido.

Nota: actualice la actividad del patrn el da de la medicin teniendo en cuenta que ocurri la desintegracin del
radionclido en el intervalo de tiempo transcurrido desde la fecha de referencia hasta el da de la medicin.
Utilice la siguiente frmula:
Ap = Ao exp(-0.693 t/T)

Ao: actividad del patrn reportada para la fecha de referencia.

t : tiempo transcurrido desde la fecha de referencia hasta el da de la medicin.

T: perodo de semidesintegracin del radionclido que conforma el patrn. Puede ser


encontrado en tablas de datos nucleares.
7.2.2.3. Lleve el valor obtenido a un grfico de control previamente confeccionado segn
procedimiento L-SA-015 y analice el comportamiento del parmetro.

47

7.2.2.4. Si del anlisis del grfico de control concluye que la eficiencia est controlada,
tiene un requisito a su favor para realizar el ensayo, si est fuera de control no realice el
ensayo, chequee los parmetros ambientales, el voltaje de trabajo del detector y la geometra
de medicin o analice el funcionamiento de todos los elementos del sistema para detectar
aquel que contribuye a la no aptitud.
7.2.2.5. Colecte el espectro de fondo durante 2000s y determine la Integral para el intervalo
(300 - 1400) Kev.
7.2.2.6. Acte como en 7.2.2.3 pero con el valor de tasa de conteos correspondiente a la
Integral determinada.

7.2.2.7. Si el fondo est controlado tiene el segundo requisito a su favor para realizar el
ensayo.

7.2.2.8. Si est fuera de control y sospecha una posible contaminacin, proceda a


descontaminar el detector con cido ctrico al 1%, alguna solucin aglutinante(EDTA) y agua
destilada. Para ello tome paos humedecidos con las sustancias mencionadas, utilizando
guantes impermeables y alternando limpie la superficie del detector; cambie de paos varias
veces utilizando una misma sustancia, para garantizar el arrastre total de la contaminacin.
7.2.2.9. Posteriormente repita los pasos desde 7.2.2.5 al 7.2.2.7 hasta que el parmetro
est controlado.
7.2.2.10. Salve los resultados del chequeo de los parmetros de control, mostrando evidencias
del control del sistema para efectuar las mediciones.

7.2.2.11. El requisito fundamental para ejecutar el siguiente paso del ensayo es que los dos
parmetros a la vez estn controlados.
7.2.3.

Medicin de las Muestras.

7.2.3.1. Consiste en obtener el espectro de la muestra durante un tiempo que garantice la


incertidumbre relativa en el clculo de la actividad especfica exigido en el modelo
acompaante.
7.2.3.2. Las muestras para mediciones gamma espectromtricas llegan al rea envasadas y
con su modelo acompaante. Chequee que la muestra cumpla con las caractersticas de alguna
de las geometras para las cuales se realiz la calibracin y que el modelo acompaante posea
todos los datos necesarios para realizar los clculos.

7.2.3.3. Si al inspeccionar la muestra entregada cumple con los requisitos, acptela firmando
en el Registro de Entrega de Muestras y Modelos de la persona que lo entrega; si no est de
acuerdo con la entrega, rechcela y las causas como una no conformidad.

7.2.3.4. Una vez chequeados los parmetros de control y cerciorado del correcto
funcionamiento del sistema espectromtrico, acte de la siguiente forma:
7.2.3.5. Cubra la muestra con un material fino para evitar la contaminacin accidental del
detector, colquela en el lugar de medicin y colecte su espectro.
7.2.3.6. Debe tener en cuenta que:
-

Las muestras selladas para medir Ra-226 y Th-232 en condiciones de equilibrio con
sus especies hijas deben esperar al menos 20 das para ser medidas.

48

Las muestras se miden un tiempo que garantice la incertidumbre relativa en el clculo


de la actividad especfica reflejada en el modelo acompaante. Utilice la frmula del
Anexo 1 para estimar este tiempo de medicin

Las muestras con separacin radioqumica previa se miden primeramente, durante un


tiempo que permita calcular el rendimiento qumico del proceso. Si el valor obtenido
se corresponde con el requerido por el procedimiento se contina la medicin de la
muestra, si no se detiene la medicin y se le entrega la muestra al tcnico que realiz
la separacin, anotando lo ocurrido en el modelo acompaante, este hecho se
considera una no conformidad.

7.2.3.7.Salve los espectros colectados con el mismo cdigo de la muestra y consrvelos como
evidencia del ensayo.
7.2.4. Procesamiento del espectro.

7.2.4.1.Consiste en la identificacin de los picos en el espectro atendiendo al conocimiento de


la funcin Energa - Canal; la identificacin de los radionclidos presentes en la muestra, la
determinacin de los datos necesarios para el clculo de actividades. Los resultados
obtenidos se salvan como evidencias del proceso de ensayo. Acte como sigue:
7.2.4.2.Determine la energa que le corresponde a cada pico en el espectro, con la ayuda de
una tabla de datos nucleares identifique a los radionclidos cuyos cuantos gamma poseen un
valor de energa muy cercano a alguno identificado. Es suficiente una incertidumbre de 0.5
KeV para el HPGe. De los radionclidos identificados seleccione el real presente en la
muestra, teniendo en cuenta el porciento de salida de los cuantos gammas, la presencia o no
de otros fotopicos que pueda tener ese radionclido, el perodo de semidesintegracin y la
probabilidad de estar presente en el tipo de muestra medida, desarrolle estas habilidades.
7.2.4.4.Clculo de la actividades.

7.2.4.4.1. Determine el rea y la incertidumbre relativa de los picos por donde se propone a
efectuar el clculo de actividades. Vea Anexo 1.

7.2.4.4.2. Con los datos anteriores calcule la tasa de conteo neta Rs para cada pico por la
siguiente frmula:
Rs = Rt Rb
y su incertidumbre
u(Rs)=[u2(Rt)+u2(Rb)]
donde

Rt: tasa de conteo total debido a la presencia del radionclido en la muestra y en el fondo.
Rb: tasa de conteo debido a la presencia del radionclido en el fondo.
u(Rs): incertidumbre en la tasa de conteo neta.

49

u(Rt): incertidumbre en la tasa de conteo total.

u(Rb): incertidumbre en la tasa de conteo del fondo.


7.2.4.4.3.- Calcule el lmite crtico Lc durante el tiempo de medicin segn:
Rb

Tb

Tb

Lc = k [ ------ ( 1 + -------- ) ]
donde

T: tiempo de medicin de la muestra.


Tb: el tiempo de medicin del fondo.

k= 1.65 es el factor de confianza para las pruebas de una cola correspondiente al 95%.
7.2.4.4.4. Si se cumple 0<Rs<=Lc calcule el valor less than Lt segn:
Lt = Rs + k u(Rs)
7.2.4.4.5. Los valores anteriores corresponden a valores de tasa de conteo, los mismos se
transforman en actividad absoluta dividiendo por la probabilidad de salida gamma P y la
eficiencia y en actividad especfica normalizando adems, por las caractersticas propias de
la muestra y el proceso de muestreo segn las frmulas del Anexo 2. La actividad absoluta A
correspondiente a una tasa de conteo neta mayor que el lmite crtico se calcula segn:
Rs

A = ---------y su incertidumbre u(A) por

u(A) = A { [u(Rs)/Rs]2 + [u()/]2 + [u(P)/ P ]2}


u(P)/ P : incertidumbre relativa en la probabilidad de salida gamma.
7.2.4.4.6. La incertidumbre en la determinacin de la actividad especfica se determina
aplicando la Ley de Propagacin de Incertidumbres en las ecuaciones del Anexo 2 y
valorando el aporte de la incertidumbre de cada magnitud a la incertidumbre total. De forma
general se obtendr la siguiente frmula:
n

u(Ae) = Ae { [u(A)/A]2 + [u(Xi)/Xi]2 }


i =1

50

donde:

u(Ae): incertidumbre en la actividad especfica.


Ae: actividad especfica.

u(A)/A: incertidumbre relativa de la actividad absoluta.

u(Xi)/Xi( i =1...n):incertidumbres relativas de la n magnitudes caractersticas de la muestra y


el proceso de muestreo.
7.2.4.4.7. Cuando se analizan radionclidos de vida media corta, los cuales pueden
desintegrarse durante la etapa de muestreo(tmuest. > 0.01T); por ejemplo en el muestreo de
aerosoles y precipitaciones atmosfricas, se multiplica el valor de la actividad por el
coeficiente de desintegracin durante el muestreo:
0.693(tmuest./T )

-------------------------------1-exp[-0.693(tmuest./T )]

tmuest.: Tiempo de muestreo.


T: Perodo de semidesintegracin del radionclido.
7.2.4.4.8.Cuando se analizan radionclidos de vida media corta, los cuales pueden
desintegrarse durante la etapa de medicin(tmed. > 0.01T), se multiplica el valor de la
actividad por el coeficiente de desintegracin durante la medicin:
0.693(tmed./T )

-------------------------------1-exp[-0.693(tmed./T )]

tmed.: Tiempo de medicin.


T: Perodo de semidesintegracin del radionclido.
7.2.4.4.9. Cuando se desee corregir la actividad hacia la fecha de muestreo, se multiplica el
valor de la misma por el coeficiente de correccin por desintegracin:
exp(0.693 tdes./ T1/2)
tdes.: Tiempo transcurrido desde el muestreo hasta la medicin.
51

T: Perodo de semidesintegracin del radionclido.


7.2.4.4.10. Cuando se analizan radionclidos con energa de sus cuantos gamma menores que
100 Kev, como el Pb210, el 241Am y el 234Th, y existe diferencia entre la densidad del patrn y
la densidad de la muestra a medir, se multiplica el valor de la actividad por el coeficiente de
atenuacin por autoabsorcin:
m m xm [1-exp(-p p xp)]

-----------------------------------p p xp [1-exp(-m m xm)]

m, p: Coeficientes msicos de atenuacin de muestra y patrn.


m, p: Densidades de la muestra y patrn.

xm, xp: Grosor efectivo de atenuacin para muestra y patrn.


a)

Siempre que no existan en la muestra y en el patrn macrocantidades de elementos con


Z>20, el coeficiente msico de atenuacin se evaluar segn la ecuacin:
= [1.287E-0.435] cm2g-1

donde E es la energa de los cuantos gamma expresada en Kev.


b) El grosor efectivo de atenuacin en el caso del vial se evaluar segn la ecuacin:
X= 0.2r + 0.8[h +d ]
2

donde r, h y d son el radio, la altura y el dimetro del vial respectivamente.


c)

En el caso de recipientes cilndricos colocados en el tope del detector, el grosor efectivo


de atenuacin se considera la altura de la muestra en el cilindro.

7.2.5. Reporte de los Resultados.

7.2.5.1. Reporte los resultados de la siguiente forma:

a) Si la tasa de conteo neta es mayor que el lmite crtico; reporte la actividad especfica
correspondiente y su incertidumbre.

b) Si la tasa de conteos neta es menor o igual que el lmite crtico y mayor que cero;
reporte que el valor de la actividad especfica es menor que la actividad especfica
correspondiente al valor "less than".
52

c) Si la tasa de conteos neta es menor que el lmite crtico y menor o igual que cero;
reporte que el valor de la actividad especfica es menor que la actividad especfica
correspondiente al lmite crtico.
7.2.5.2. Para cuestiones prcticas de informacin calcule el lmite de deteccin segn:
Ld = k2/T + 2Lc
y el lmite de determinacin segn:
f

4T Rb(T+Tb)

2
q

Lq = --------- { 1+ [1+ ------------------] }


2T

2
q Tb

donde fq es el recproco de la incertidumbre relativa especificada. Estos valores se


transforman en actividad dividiendo por la probabilidad de salida gamma y la eficiencia, y en
actividad especfica segn las frmulas del Anexo 2.
7.2.5.3.Realice el procesamiento del espectro mediante programas validados.
7.2.6.Terminado el ensayo, los envases se lavan con abundante agua y luego se someten a la
limpieza con una de las sustancias descontaminantes siguientes:
7.2.6.1. Mezcla 1.
-

Detergente: 5g

HCl: 50-80 g

Hexametafosfato de sodio: 10g


H2O: hasta 1 litro.

7.2.6.2. Mezcla 2.
-

Detergente: 3g

H2O: hasta 1 litro.

HCl: 35-100 ml

7.2.6.3.Prepare las sustancias anteriores en un recipiente apropiado, sumerja los envases y


frote con un cepillo por espacio de uno a tres minutos.
7.2.6.4.Extraiga los envases y enjuguelos con agua destilada y squelos.

7.2.6.5.Analice el fondo radiactivo de los envases con el sistema espectromtrico. Si estn


limpios siga segn
53

7.2.7, si no, repita los pasos relacionados con la limpieza.

7.2.7.Guarde los envases limpios en un lugar apropiado; suminstrelos al tcnico


responsable del pretratamiento cuando los necesite.
Complementos

Metodologa para el clculo del rea del fotopico y estimacin del tiempo de medicin.
1. Clculo del rea o nmero de conteos en el fotopico.
Este clculo es manual, se conoce la distribucin de los conteos por canales, todo pico posee
tres caractersticas bsicas: la Integral(Nt), el Pedestal o Back(Nb) y el Area o Conteos
Netos(N). Estas magnitudes se determinan como sigue:
N = Nt - Nb
b1

Nt = Ni
i=a2
a2-1
b2
Nb = ( Ni + Ni )
i=a1
i =b1+1

(b1-a2+1)
----------------(a2-a1+b2-b1)

donde Ni son los conteos en el canal i y a1, a2, b1, b2 son los nmeros de los canales
respectivos o valores de energa asociados. Vea el siguiente esquema:
Conteos

2.

a1

a2

b1

b2

Canales

Incertidumbres en el clculo del rea del fotopico.

Aplicando la Ley para la Propagacin de Incertidumbres en la expresin para el clculo del


Area, determinamos la incertidumbre segn:

54

b1-a1+1

u(N) = [ Nt + Nb (-----------------)] ,

a2-a1+b2-b1

utilizando un factor de cobertura de 1.645, correspondiente al nivel de confianza del 90% en


la distribucin normal, obtenemos la incertidumbre relativa segn:
1.645 u(N)
-------------N
Esta incertidumbre, expresada en porciento, coincide con la reportada por el Silena.
3.

Estimacin del tiempo de medicin.

El tiempo de medicin para lograr una incertidumbre relativa establecida a priori en el clculo
de la actividad especfica se estima por la siguiente frmula:
Rt
T = -------------------------------------------------------------2

donde:

{[u(Ae)/Ae] -[u()/] -[u(Xi)/Xi] }(Rt-Rb) -u (Rb)


2

i =1

T: Tiempo de medicin
Rt: Tasa de conteo total(muestra ms fondo); la misma se estima previamente durante un
tiempo de medicin corto.
u(Ae)/Ae: incertidumbre relativa en el clculo de la actividad especfica; la misma se toma del
modelo acompaante.
u( )/ :incertidumbre relativa en la determinacin de la eficiencia.
u(Xi)/Xi( i =1...n):incertidumbres relativas de la n magnitudes caractersticas de la muestra y el
proceso de muestreo.
Rb: Tasa de conteo del fondo.
u(Rb):incertidumbre de la tasa de conteo del fondo.
5.2. Frmulas para el clculo de la actividad especfica segn el tipo de muestra.
En todos los casos se parte de la actividad absoluta o simplemente actividad(A) expresada en
Becquerels.
1.

Para determinaciones en suelos, sedimentos, arenas, substratos:

a)

Se mide en peso ceniza, se reporta en peso seco


1000 PC
Ae = -------------- A
m PI

m : peso ceniza de la muestra medida(g) .


PI : peso seco a incinerar(g).
PC : peso ceniza correspondiente a PI(g).
55

Ae : Actividad Especfica(Bq/Kg de peso seco)


b)

Se mide en peso seco, se reporta en peso seco.

Se toman PC y PI iguales a 1 en la frmula anterior.


2.

Para determinaciones en alimentos y pastos.

a) Se mide en peso ceniza, se reporta en peso fresco


1000 PS PC
Ae = ---------------- A
m PH PI
m : peso ceniza de la muestra medida(g).
PH : peso hmedo o fresco(g).
PS : peso seco (g).
PI : peso seco a incinerar(g).
PC : peso ceniza correspondiente a PI(g).
Ae: Actividad Especfica(Bq/Kg de peso fresco).
b)

Se mide en peso seco, se reporta en peso fresco.


1000 PS
Ae = --------------- A
m PH

Ae, A, PS y PH igual que en 2. a).


m : peso seco medido(g).
c)

Se mide en peso hmedo o fresco, se reporta en peso fresco.


1000
Ae = ---------- A
m

Ae y A igual que en a).


m : peso hmedo o fresco(g).
3.

Para determinaciones en Aerosoles.


M
Ae. = ---------- A
m Vf

m : peso ceniza de la muestra medida(g).


M : peso ceniza total de la muestra incinerada(g).
Vf : Volumen de aire filtrado (m3).
Ae. : Actividad Especfica (Bqm-3).

56

4. Para determinaciones en las Precipitaciones Atmosfricas.


M 30
Ae. = -------------- A
m Te S
m : peso ceniza de la muestra medida(g).
M : peso ceniza total de la muestra incinerada(g).
S : Area de la bandeja(m2).
Te : Tiempo de exposicin(d).
Ae. : Actividad Especfica(Bqm-2mes-1).

57

3.5. Preparacin de muestras para anlisis de tamao de grano.


Dr. Alberto Quejido Cabezas
Centro de Investigaciones Energticas
Medioambientales y Tecnolgicas (CIEMAT)
Espaa
PROCEDIMIENTO TCNICO
Centro de
Investigaciones
Energticas,
Medioambientales
y
Tecnolgicas

LABORATORIO GRAL DE QUMICA


ANALTICA

Preparacin de muestras para anlisis de

Cdigo:

Edicin:

En Vigor:
Pgina: 1-3

tamao de grano

1.- OBJETO

Acondicionamiento de las muestras de sedimento marino en estado seco para realizar anlisis
granulomtrico por el mtodo de dispersin de rayo lser.
2.- MBITO DE APLICACIN
Este procedimiento puede ser utilizado para preparar las muestras de sedimento del proyecto
RLA7012, que han sido secadas a 45 C, para realizar anlisis granulomtricos.
3.- DOCUMENTACIN DE REFERENCIA
Procedimiento Standard para la preparacin de las muestras para el anlisis granulomtrico.
4.- DESCRIPCIN

Este procedimiento describe y regula los pasos a seguir para el tratamiento de muestras de sedimento
marino que han sido secadas a 45C para realizar el anlisis granulomtrico.
4.1.- Pesar aproximadamente 0.5 gramos de sedimento seco en un vaso de precipitado limpio y seco,
previamente etiquetado y tarado, utilizando una balanza de tres dgitos (0.001 g).
4.2.- Humedecer la muestra con aproximadamente 15 ml de agua a temperatura ambiente.

4.3.- Colocar el vaso en un bao de ultrasonido. Aplicar ultrasonidos en intervalos de 15 minutos por
cada hora, durante 5 horas.
4.4.- Dejar reposar la muestra y retirar el agua sobrante con una pipeta Pasteur.

58

3.6. Composicin elemental por fluorescencia de rayos-X


Ruiz-Fernndez A.C.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
Mxico
Los anlisis de components mayoritarios y metales pesados son realizados utilizando el
sistema de fluorescencia de rayos-X Spectro X lab 2000, Spectro Analytical Instruments.
Se colocan 4 g of de sedimento seco y molido en un contenedor de polietileno de baja
densidad, cuyo fondo se ha recubierto con un trozo de membrane Prolene. Con la ayuda de
una herramient de tefln, el sedimento se comprime cuidadosamente para formar una pastilla
relativamente compacta.
El anlisis espectral y los clculos cuantitativos se realizan utilizando el mtodo calibrado de
evaluacin interna del software del equipo y desarrollando una combinacin de 3 mediciones
con diferentes objetivos para los rayos-X. Esto permite la determinacin de concentraciones
totales para elementos con nmero atmico entre 13 (Al) y 92 (U).
Se realizan anlisis rutinarios de rplicas (n=6) de alcuotas de los materiales de referencia
OIEA 158, 405 y 433, los cuales normalmente muestran Buena concordancia entre los valores
analticos y certificados para la mayora de los elementos considerados en el certificado, con
exactitudes por encima del 90% e incertidumbres por debajo del 8% para la mayora de los
metales analizados.

59

3.7. Determinacin de C total, N total, TIC y TOC


Dr. Alberto Quejido Cabezas
Centro de Investigaciones Energticas
Medioambientales y Tecnolgicas (CIEMAT)
Espaa

Carbono total (Ctot) y nitrgeno total (Ntot)

A continuacin se describe el procedimiento de anlisis utilizando un analizador elemental


LECO TRUSPEC:
Pesar entre 100 a 150 mg de sedimento seco, molida y homogeneizado, dentro de un
contenedor de estao, en una balanza analtica (precisin de 0.0001 g).
Cerrar hermticamente el contenedor y colocar en el muestreador automtico, desde donde se
introduce en el horno de combustin, donde se mantiene de 2 a 3 minutos en varias etapas, en
presencia de distintos contenidos de O2 en la corriente del gas acarreador (perfil de
combustin) para asegurar su completa oxidacin.
Los gases generados en todo este tiempo son recogidos en un contenedor de 4.5 litros y una
vez mezclados, una alcuota pequea de los mismos fluye a los detectores donde se determina
el CO2 mediante un detector de infrarrojo y el N2, previo paso de los gases por el tubo de
reduccin de Cu, por el de conductividad trmica.
Para establecer las curvas de calibracin, se debern utilizar patrones certificados, con
diferentes contenidos de C y N (que incluya el intervalo de valores de la muestra).
Es importante hacer determinaciones de blancos (habitualmente una cpsula de Sn vaca) y
los valores obtenidos deben ser restados de los aquellos obtenidos tanto para los patrones
(para la curva de calibracin) como en la muestra.
La curva de calibrado del N se ajusta a una calibracin lineal de primer grado y la del C se
realiza un ajuste cuadrtico.
El contenido de C y N de las muestras se recalcula a partir de las nuevas curvas de calibrado
obtenidas.

Carbono inorgnico total (TIC)

Esta determinacin se realiza utilizando el mdulo de Anlisis de Muestras Slidas SSM5000 (Shimadzu), mediante una pre-acidificacin con cido fosfrico en un horno a 200 C.
El CO2 producido se transporta en corriente de aire y se mide en el analizador de infrarrojos
no dispersivo NDIR de alta sensibilidad del TOC-V. Se sigue el procedimiento de anlisis
descrito en la norma Europea UNE-EN 13137:2002. Para la cuantificacin se emple una
lnea de calibracin a partir de CaCO3 (R2=0.9991).

Carbono orgnico total (TOC)

Este valor se calcula por diferencia a partir de los resultados obtenidos de Ctot y TIC segn la
norma UNE reseada anteriormente

60

3.8. Procedimiento operativo normalizado para la determinacin de mercurio total por


el analizador directo de mercurio DMA-80
DETERMINACIN DE MERCURIO TOTAL

POR ANALIZADOR DIRECTO DE


MERCURIO DMA-80
LABORATORIO DE MERCURIO
AMBIENTAL CIRA/UNAN

Revisado por: Francisco Picado P. Aprobado por:


Especialista-Analista.
Junette Molina M.
26. 02. 2009
Jefe de rea Analtica
03. 03. 2009

PON-MA-01
Elaborado por: Emilio Pea T.
Revisin: 1.1
Vigente desde: 2008-05-25
Autorizado por:
Vctor Martnez H.
Jefe de rea Tcnica, Aseguramiento y Control de la
Calidad. 10. 03. 2009

A. Seccin de procedimiento.
1. Alcance y aplicacin

1.1 En este procedimiento se describe la metodologa para la realizacin del anlisis de


mercurio total a muestras de suelos y sedimentos utilizando el analizador de
mercurio total DMA-80.
1.2 El rango de trabajo tpico de este mtodo es de 0.05 - 600 ng. El vapor de mercurio
primero se pasa a travs de una celda de absorbancia de paso ptico largo y luego a
travs de otra de paso ptico corto, la longitud de la primera celda con respecto a la
segunda guarda una relacin de 10:1. La misma cantidad de mercurio se mide dos
veces utilizando dos sensibilidades diferentes.
1.3 El limite de deteccin del instrumento (LDI) para este mtodo es de 0.01 ng de
mercurio total, hmeda con una mezcla de cidos fuertes seguido por la adiccin de
un agente reductor para generar el vapor de mercurio elemental (Hg). Mas adelante,
el vapor de mercurio elemental es generado a travs de combustin directa de la
muestra a ser analizada.

1.4 Generalmente, el nivel de mercurio en suelo es menos de 0.2 mg/kg de peso seco
(ppm). Cuando el nivel de mercurio total en suelo es encontrado que excede pocos
mg/kg (ppm), existe un riesgo de que el mercurio migrar del suelo hacia otros
sectores ambientales. En estos casos, la contaminacin de mercurio en sistemas
acuticos de los alrededores debe ser investigada.
2. Resumen del mtodo
2.1

El mtodo usa calentamiento controlado en un horno de descomposicin oxigenado


para liberar el mercurio de muestras slidas o acuosas. La muestra es secada y
descompuesta trmica y qumicamente dentro del horno de descomposicin. Los
productos de descomposicin son llevados por el flujo de oxigeno a la seccin
cataltica del horno. Se completa la oxidacin y los halgenos y xidos de azufre /
nitrgeno son atrapados en el tubo catalizador. Los productos de descomposicin
restantes son llevados a un amalgamador que atrapa selectivamente el mercurio.
Despus el sistema es lavado con flujo de oxigeno para remover cualquier producto
de descomposicin o gases generados, el amalgamador es entonces calentado
rpidamente liberando as el vapor de mercurio. El flujo de oxigeno lleva el vapor de
mercurio a travs de las celdas de absorbancia colocada en el paso de luz de un
61

espectrofotmetro de absorcin atmica de longitud de onda nica. La absorbancia


(altura o rea de pico) es medida a 253.7 nm como una funcin de la concentracin
de mercurio.
3. Interferencias

3.1 Usar reactivos de alta pureza, libres de mercurio para obtener resultados fiables.

3.2 Mas adelante en este mismo procedimiento se describe el mtodo de cuarteo con fin de
homogenizar, esto aplicado solo para muestras de suelo, en este caso podra haber
prdidas de mercurio por friccin, as que se recomienda tener mucho cuidado.
3.3 Posible prdida de mercurio por evaporacin al captar la muestra desde el punto de
muestreo si no se preserva a bajas temperaturas al instante, ms aun cuando se
realizan los muestreos cercanos al medio da.
3.4 Los reactivos deben de ser revisados previo al anlisis, ya que sus propiedades pueden
cambiar por el tiempo de almacenamiento.

3.5 Cuando se realiza la curva de calibracin, es conveniente identificar las botecitos de


cuarzo a fin de evitar una contaminacin cruzada.

3.6 Los efectos de memoria entre anlisis pueden encontrarse cuando se


analizan muestras de alta concentracin de mercurio (200 ng) antes de
analizar una de baja concentracin (25 ng).
3.7 Tpicamente para minimizar los efectos de memoria, analizar las muestras en
lotes de baja y alta concentracin, analizando los de baja concentracin primero. Si
no es posible dividir las muestras en lotes entonces se podran analizar blancos con
un tiempo de descomposicin.
4. Muestreo y preservacin de la muestra
4.1

Sedimentos

4.1.1 Para ros los puntos de muestreo permiten una fcil coleccin de sedimentos
escogidos a intervalos de 50-200 m. Corriente abajo desde el punto de
descarga del agua residual industrial o drenaje de la ciudad, por otra parte es
deseable que se designen al menos dos puntos corriente arriba para colectar
sedimento como control. Los sitios de coleccin para las muestras
de sedimentos son usualmente especificados para ambos, orillas y centro
del ro. Si el ro es ancho, incrementar el nmero de puntos de muestreo.
4.1.2 Para reas de lagos, humedales y ocanos, centrar radialmente los puntos de
muestra sobre el punto de partida o boca del ro y llevar un plano de rejilla
segn sea necesario.
4.1.3
4.1.4

La toma de muestras en lagos a diferentes niveles de profundidad requiere


del
empleo de una botella para muestreo (Van Dorn, Malchanov, etc.).

Usar de preferencia contenedores de vidrio o polietileno debidamente


lavados.
Almacenar las muestras en un lugar oscuro y fro. Muestras que contengan
mercurio metlico o divalente debern ser almacenadas en un freezer.

62

4.2 Suelos

4.2.1

4.2.2

Dibuje una malla sobre un mapa del sitio contaminado y dependiendo de la


contaminacin sospechada o verificada, escoger reas de muestreo que
pueden ir de los 100 m2 (10x10 m) a 900 m2 (30 X 30 m) en sitios donde la
contaminacin no es tan extrema. Se escogen 5 puntos y se colectan
muestras individuales de cada uno de ellos: el punto del centro de cada
rejilla y 4 sub-puntos alrededor de l. Aunque las localizaciones de los 4
sub-puntos no son precisamente trazados, es deseable colectar las 4
muestras en direccin norte, sur, este y oeste del punto central.
En cada punto de muestreo, colectar las muestras de suelo entre la
superficie del suelo y 50 cm de profundidad. Especficamente colectar las
muestras individuales de dos regiones separadas, una entre la superficie del
suelo y a un punto de 5 cm por debajo de a superficie y la otra en el rea
desde 5 cm a 50 cm por debajo de la superficie del suelo. Despus de
colectar las muestras de suelo remover la basura de cada muestra y
homogenizar cada muestra por mezclado con mtodo de cuarteo.

Despus de la homogenizacin, mezclar un peso igual de cada muestra para obtener


una sola muestra de composicin final. Similarmente, para el mtodo de mezclado
de los 5 sitios mezclar un peso igual de cada una de las muestras (homogenizado con
el mtodo de pretratamiento de suelo mencionado anteriormente) para obtener una
sola muestra para el anlisis de mercurio.
5. Precauciones de seguridad

5.1 Para realizar este anlisis es necesario usar gabacha, guantes y anteojos de proteccin.

5.2 Tener mucho cuidado ya que se trabaja continuamente con H2SO4, HNO3, HCl y
HClO4 tambin con la manipulacin de KMnO4 puesto que mancha por su efecto
oxidante, si esto ocurriera enjuagar con una solucin de Hidroxilamina previamente
preparada y posteriormente con abundante agua del grifo. En caso de exposicin de
cidos en la piel, enjuagar con abundante agua del grifo, si es ingerido buscar
atencin medica pertinente, en caso de exposicin de los vapores apartarse
completamente del lugar de exposicin y buscar un lugar ambientado con aire fresco.
5.3

5.4

Tener sumo cuidado cuando se manipulen las muestras ya que pueden provenir
de posibles sitios contaminados de alta concentracin, asimismo con los
Materiales de Referencia Certificados (CRM por sus siglas en ingles). En caso de
exposicin en la piel enjuagar con abundante agua del grifo, si es injerido buscar
atencin mdica pertinente.

Almacenar los desechos tanto de reactivos como muestras y otros en


recipientes de desechos rotulados para tal fin, tener cuidado en no mezclar los
desechos. No desechar en el desage del grifo. Al hacer esto utilizar gabacha,
guantes de ltex, anteojos de seguridad y mascarilla.

Nota: Deje siempre limpio su puesto de trabajo. Asegrese de guardar todos los reactivos que
haya utilizado en el anlisis.
6. Reactivos.
63

6.1 HNO3 libre de mercurio para anlisis de trazas.


6.2 Caoln libre de mercurio
6.3 Slice libre de mercurio

6.4 HCl libre de mercurio para anlisis de trazas


7. Instrumental y materiales.
7.1 Analizador Directo de Mercurio total DMA-80 (Milestone).
7.2 Botes de Cuarzo.
7.3 Botes de Nquel
7.4 Mufla con rango de Temperatura de 150 a 1000 C
7.5 Matraces Volumtricos aforados: 10, 100 y 1000 ml.
7.6 Pipetas Serolgicas y Volumtricas clase A de : 0.2 , 0.5, 1.5 y 10 ml
7.7 Balanza analtica Metler AE 160 con precisin de 0.001 mg.
7.8 Viales de 20 ml de capacidad.
7.9 Guantes de Ltex
7.10 Oxigeno de alta pureza 99%
7.11 Pipetas automticas de 20 a 1000 L
7.12 Morteros de gata.
7.13 Bandejas plsticas o metlicas para cuarteo de muestras
7.14 Microespatulas
7.15 Peras de seguridad
7.16 Pizetas
7.17 Kleenex, papel toalla.
Nota: Todo el material de vidrio deber estar lavado segn el procedimiento pertinente.
8. Homogenizacin de la muestra

8.1.1 Para el caso de las muestras de suelo, se debe aplicar el mtodo del cuarteo,
mencionado anteriormente, pero primero se debe hacer pasar la muestra de
suelo por un cedazo de malla para hacerla apta para el anlisis. Debido a que
las muestras son tomadas en forma de rejilla, hablando de un total de 5
muestras por sitio correspondiente a un punto central y la de los cuatro puntos
cardinales, estas tendrn que ser homogenizadas y luego mezcladas para
obtener una nica muestra final representativa de ese sitio, y esto se hace por
medio del mtodo en mencin.

8.1.2 Se comienza homogenizando cada una de las muestras individualmente por el


mtodo mencionado que consiste en colocar la muestra en una bandeja plstica
de 25 x 40 cm aproximadamente y moler la muestra con un mortero o una
cuchara de esptula hasta obtener una consistencia de la muestra fina.

8.1.3 Una vez obtenida dicha consistencia se esparce la muestra sobre todo el rea de
la bandeja de una forma homognea y se divide en cruz por en medio de la
bandeja con esptula para obtener cuatro partes casi iguales las que se
mezclaran en forma de equis para obtener dos partes casi iguales y por ltimo
se mezclan estas dos partes restantes.
8.1.4 Repetir el paso 8.1.3 unas 8 a 12 veces.

8.1.5 Luego de haber cuarteado los 5 puntos se mezclan pesos iguales (pueden ser
20-25 gramos) de cada uno de los puntos se aplica de nuevo el cuarteo segn
64

8.1.3.

8.1.6 Para el caso de sedimento, si la muestra tiene un alto contenido de


agua, centrifugarlo para remover la capa superior de agua y homogenizarlo bien
antes de someterlo a anlisis.
9. Calibracin del mtodo
9.1

9.2
9.3

El equipo debe encontrarse en condiciones tales que los valores de lnea base
sean Io mas bajos posibles. Abs (Height) < 0.005.esto se logra alternando botes
de cuarzo conteniendo HNO3 5 % (recin preparado) con botecitos vacos hasta
asegurar un valor apropiado de la lnea base.
Antes de empezar a calibrar, la lmpara de Hg. debe de estar en unas condiciones
ptimas de estabilidad, para ello es conveniente encender el equipo a primera hora de
la maana y dejar que la lmpara se caliente al menos durante unas 2 horas.
Preparar los estndares el mismo da de la calibracin. Estos han de ser preparados
por diluciones sucesivas a partir de una disolucin estndar certificada de 1000 mg/L
de Hg. Como disolvente se emplear el blanco de HNO3 5% v/v , a no ser que se
requiera otro para alguna aplicacin especifica. El orden normal de dilucin con los
volmenes relativos ser:

65

NOTA: Es importante que las pipetas utilizadas en la preparacin de los patrones se


encuentren apropiadamente calibradas. Se recomienda preparar los patrones en viales
desechables de polietileno (o de otro material apropiado) de 25 ml.

Inicio de la calibracin:

9.3.1 Medir blancos sucesivos hasta obtener valores de fondo apropiados (Abs <
0.005).
9.3.2 Medir al menos 3 replicas de cada estndar.

9.3.3 Asignar a la medida de la seal de que son estndares de calibracin (smbolo


el Calibrador) en el software, tras lo cual escribir la pestaa RESULT el valor
de
la concentracin del patrn. Adems, introducir el peso de la muestra gramos
tomando:
Disolucin 1g/ml -> Vol. (ml) = Peso (g)

9.3.4 Observar la dispersin de los resultados tras las medidas de las replicas. Si hay
66

uno o varias replicas que se alejan entre si, aadir una cuarta o quinta replica a
fin de estimar el valor medio de Absorbancia para el estndar medido.

9.3.5 Aceptar o rechazar medidas en funcin de la dispersin de los resultados.

9.3.6 Ajustar el mtodo de ajuste de la curva. En general ser un ajuste cuadrtico


(square).
9.3.7 Grabar cada una de las medidas en la curva asignada.

9.3.8 Al terminar todas las replicas de los estndares de una de las curvas (baja o alta
concentracin) establecer el criterio de aceptacin de resultados, estimando si es
conveniente repetir algn estndar, en funcin de la proporcionalidad de
las absorbancia de las mismas.
9.3.9 NUNCA ACEPTAR UNA CURVA CON R2 < 0,99X.

9.3.10 En el caso de que la calibracin se prolongue ms de un da, en el segundo


da,
limpiar de nuevo los botes y volver a calibrar desde el punto donde se dejo en
las
mismas condiciones de estabilidad de la lmpara. Tambin es necesario volver a
preparar los estndares a procesar ese da.
10. Procedimiento del anlisis.

10.1 Para comenzar el anlisis, primero asegrese que la curva de calibracin este cargada.
Active la hoja "DMA-80 Calibration" y escoja la curva que utilizar.
10.2 Regrese a la tabla "Methods".

10.3 Use un mtodo pregrabado o cree uno nuevo. En la lnea "Method Name" asgnele un
nombre al mtodo. Cambie los parmetros del mtodo si es necesario y grbelos.

10.4 En la tabla "Program" cambie los parmetros de trabajo del instrumento para cada
muestra, tales como secado, descomposicin y tiempo de espera, si es necesario. El
tiempo de secado vara con el volumen de la muestra o con el porcentaje de agua en
la muestra y tienen que ser calculado usando la siguiente ecuacin:

Tiempo de secado (seg)= Volumen de muestra (L) X0.6

Tiempo de secado (seg)= Peso de muestra (mg) X 0.6 X % H2O.

10.5 Para muestras inorgnicas secas: Tiempo de secado = 10 Segundos.

10.6 Para muestras con alto contenido orgnico: Tiempo de secado 30 a 90 seg

10.7 Temperatura de secado=200 C para !a mayora de las muestras.( Reduzca el tiempo


de secado si est trabajando muestras inflamables)Ver notas de aplicacin.
10.8 Tiempo de descomposicin es 3 min. para la mayora de las muestras.

10.9 Incrementar el tiempo de descomposicin si el resultado del anlisis es alto en


RSD(>5%)
10.10 Aada 30 segundos y analice las muestras determinando la RSD de nuevo.

67

Por ejemplo, el carbn requiere 300 sec (Para otras vea el libro de aplicacin de este
manual).

10.11 Temperatura de descomposicin = 650C para la mayora de las muestras (Vea


tambin las notas de aplicacin) .Tiempo de purga es 60 segundos para la mayora
de las muestras.

10.12 Despus de que todas las muestras han sido cargadas en la bandeja (en el caso de
modo automtico) y los datos son introducidos en el "DMA-80 Measurement",
abra la tabla de resultados del "DMA-80 Measurement /Data" y presione Start.
10.13 A medida que la muestra es analizada, comenzar a aparecer en la tabla "Result" la
absorbancia bajo la columna "Height", la cantidad de Hg. en la muestra en la
columna "Hg (ng)", y la concentracin de Hg. en la "C (g/kg)"

10.14 Una vez que el equipo est en condiciones de operacin pesar por triplicado la cantidad
de muestra adecuada. El peso de muestra se decide en funcin del rango de
concentracin, cuanto mayor sea la concentracin mayor el efecto de memoria.
10.15 Para suelos y sedimentos comenzar con 10 mg, si la seal de absorbancia es muy baja
y la reproducibilidad baja incrementar a 25 mg, si es idntica a la anterior entonces
probar de 50 a 100 mg.

10.16 Todas las rplicas deben de ser pesadas por el mismo operador, Tratando de que la
muestra quede extendida en todo el botecito sin terminar de extenderla con la
esptula. Si al pesar el peso no es exacto, no extraer muestra sino anotar la cantidad
pesada.
10.17 Seleccione en el software del equipo el mtodo que se va a aplicar a las muestras o
cree un nuevo mtodo.
10.18 Cree un nuevo archivo de muestras para grabar los datos de las muestras que se van a
leer. Seleccione entre modo sencillo o automtico.

10.19 Chequee si el archivo de calibracin es el correcto ya que el equipo carga


automticamente el archivo que uso la ltima vez.
10.20 Corra algunos blancos para asegurarse que el sistema esta limpio.

10.21 Chequee la curva de calibracin midiendo un estndar o una muestra de referencia


certificada.
10.22 Mida las muestras por triplicado
11. Rampa de temperatura / tiempo

Tiempo para elevacin de temperatura al inicio: Unos 30 segundos


PARA MUESTRAS SLIDAS (SEDIMENTOS)
PRUEBA No
1
2
3

RAMPA
30 s
30 s
30 s

Criterio de Aceptacin; SI 1a=3a Aceptar 1a

68

PLATEAU
30 s
90 s
120 s

Si 1a< 2a = 3a Aceptar 2a
12. Tiempo y temperatura de combustin

12.1 Cuanto mayor el tiempo, mayor es la segundad de que todo el Hg ha sido atomizado,
pero mas elementos diferentes pueden acompaar al Hg con el consecuente deterioro
del catalizador y la amalgama.
12.2 Temperatura por Defecto: 650 C

12.3 En principio es adecuada para sedimentos y otras matrices excepto aquellas con un
porcentaje muy elevado de Hg asociado a silicatos. En estas matrices elevar la
temperatura de combustin,
12.4 Si no se puede atomizar todo el Hg porque queda parte ocluido en silicatos, entonces
hay que efectuar una digestin hmeda de la muestra con HF, luego proceder a la
eliminacin de HF con H3BO3 o HCIO4 (No recomendable).

12.5 En general el tiempo de descomposicin suele ser 1 minuto superior al tiempo de


secado (rampa + Plateau).
Rampa: 1 minuto

Plateau: Tiempo Total - 1 minuto.

Para muestras slidas; Tiempo de secado + 1 minuto

12.6 A la hora de medir una muestra con muy baja concentracin podemos utilizar la
opcin de preconcentracin que nos permite el software smbolo }+

12.7 En un archivo de anlisis se introducen tantas replicas como furamos a preconcentrar


(en el caso de lquidos no es recomendable superar 4 replicas debido a posibles
perdidas de Hg.).La sealamos con el smbolo }+ y a continuacin la primera y
ultima replica que vamos a preconcentrar. De esta manera todas las replicas sern
preconcentradas en la amalgama sin realizarse el paso de desorcin trmica de la
misma ( a 900 C) hasta la ultima replica. El resultado ser un valor medio de todas
las replicas introducidas.

12.8 Siempre en la aplicacin es conveniente comparar los resultados con el valor de un


material de referencia. Como muestra de referencia o control puede emplearse una
muestra propia suficientemente contrastada y homogenizada. Es recomendable
almacenar estas muestras en fro conveniente que sean almacenadas en fro a fin de
preservar su contenido de Hg. (Ej.: el Hg. es bastante voltil y puede dar lugar a
prdidas por su tapn.
12.9 Comenzar la lectura de las muestras
13. Clculo y expresin de los resultados.

13.1 Los clculos son expresados automticamente en el registrador del equipo.

13.2 Cerciorarse siempre de imprimir una hoja de resultados para archivo y hacer un
respaldo electrnico en la carpeta. Resultado de Anlisis de Mercurio Total DMA-80
en la computadora ubicada en la oficina del Laboratorio de Mercurio Ambiental

69

B. Seccin de control de calidad

Procedimiento de control de calidad


1. Control de la exactitud.
1.1

1.2

Para comprobar la exactitud del anlisis se debe analizar una muestra de


algn material de referencia certificado acorde con la matriz de las muestras
analizadas, siguiendo lo indicado en la "Seccin de procedimientos". Comparar el
resultado con su valor de referencia y lmites de aceptacin. Cuando ste no se
encuentre dentro del rango de los lmites, revisar el procedimiento y repetir el anlisis.
En cada grupo de muestras analizadas medir uno o dos estndares
comprendidos entre el rango de resultados obtenidos en las muestras analizadas.

2. Control de la precisin.

Las muestras siempre se analizan en lotes de al menos 5 replicas y los resultados son aceptados
cuando el coeficiente de variacin sea menor del 10%. Si no se logra obtener estos
porcentajes se recomienda repetir el anlisis.
3. Porcentaje de recobro.

Realice un anlisis de una muestra con agregado (Muestra con agr.) de de acuerdo a la
concentracin obtenida de las muestras analizadas.
4. Estndar de control.

Verifique la curva de calibracin corriendo dos estndares intermedios en cada sesin de


trabajo.
5. Lmite de deteccin.

5.1 Determine el lmite de deteccin (LD) del mtodo segn lo descrito en el PROC-MA-01
del Manual de Procedimientos Operativos del Control de Calidad del laboratorio
(MPOACCL).
7. Cartas de control.

7.1 Elabore y mantenga al da las cartas de la Muestra Control, segn lo descrito en el PROCMA-02 del MPOACCL.
C. REFERENCIAS

CIRA/UNAN 2003. Procedimiento Operativo Normalizado para la determinacin de nitratos por el


mtodo espectrofotomtrico de reduccin con cadmio. Manual de mtodos analticos del laboratorio
de Aguas Naturales. Determinacin de aniones por cromatografa lquida (PON-AN-23). Revisin
1.1 Managua.
Mercury Anlisis Manual. March 2004. Ministry of the Environment, Japan.
Milestone DMA-80 User Manual. Revisin 6/2007.

EPA method 7473. Mercury in solids and solutions by thermal decomposition, amalgamation,
70

and

atomic

absorption

spectrophotometry

en http://www.epa.gov/sw-846/pdfs/7473.pdf

PON-MA-HgTotal-01. Determinacin de mercurio total por el mtodo del Analizador de Mercurio


HG-3500V.
Manuscrito elaborado por el Dr.Rodolfo Fernndez, CIEMAT, Espaa, Mayo 2008.

71

3.9 Anlisis de contaminantes orgnicos en muestras de sedimentos


Jos Sericano
Texas A&M University
USA
Introduccin
La determinacin de contaminantes orgnicos, tales como hidrocarburos alifticos, aromticos
policclicos y totales, y plaguicidas clorados, en muestras de sedimentos requiere la extraccin
previa y aislamiento de estos contaminantes de la matriz (Fig. 1). Para ello, una porcin de la
muestra de sedimento es secada a muy baja temperatura, justo hasta sequedad, y extrada con
disolventes apropiados utilizando un aparato Soxhlet. El extracto es luego concentrado y
purificado por cromatografa en columna antes de su anlisis instrumental. Muestras de
control de calidad son procesadas, con cada lote de muestras, de manera idntica a las
muestras autnticas.

Figura 1

Diagrama de flujo del anlisis de plaguicidas clorados, hidrocarburos


alifticos y totales e hidrocarburos aromticos policclicos en muestras de
sedimento.

72

Tratamiento previo de la muestra, preservacin y almacenamiento

La muestra de sedimento recolectada debe ser colocada en recipientes de vidrios previamente


tratados y libres de contaminantes orgnicos. De no ser posible su congelamiento inmediato,
la muestra debe ser mantenida en hielo hasta su arribo al laboratorio donde debe ser
almacenada a -20C en su recipiente original hasta su secado siguiendo las instrucciones del
Manual Operativo. Los extractos de las muestras son mantenidos a 4C hasta su anlisis
instrumental; luego de lo cual deben ser tambin almacenados en oscuridad a -20C.
Extraccin y purificacin

Materiales de laboratorio

Todo material de vidrio de laboratorio debe ser lavado con agua y jabn/detergente de
laboratorio, secado con acetona y secuencialmente enjuagado una vez con acetona, dos con
hexano, y dos con diclorometano; estos ltimos enjuagues con disolventes calidad
plaguicidas. Alternativamente, el material no volumtrico, se puede dejar secar destapado y
una vez seco, tapar con papel de aluminio y quemar en mufla a 440C por 4 horas. Dejar
enfriar y guardar en un lugar protegido, sin remover el papel de aluminio hasta el momento de
su utilizacin.
Los siguientes materiales de laboratorio son necesarios para el anlisis de contaminantes
orgnicos en muestras de sedimentos:

- Balanza analtica con capacidad de pesar 0,0001 mg


- Balanza analtica con capacidad de pesar 0,1 g
- Balones de fondo plano (o redondo) de 250 y 500 mL
- Bao de agua con calentamiento regulado a 60-70C
- Cartuchos de celulosa o cermicos previamente extrados en aparato Soxhlet
- Cilindros graduados, 250 y 1000 mL de capacidad
- Columnas cromatogrficas de 300 mm de longitud x 13 mm de dimetro interno con
reservorio superior de 250 mL y llave de tefln.
- Columnas de concentracin tipo Snyder de tres bolas
- Desecador
- Embudos, diferentes tamaos de vidrio borosilicato
- Esptulas de acero inoxidable
- Estufa con circulacin de aire regulado a 63-65C
- Extractores Soxhlet
- Gas nitrgeno para evaporacin
- Lana de vidrio calcinada a 440C por 4 horas o previamente extrada con disolventes
- Micro pipeta de 100 L
- Ncleos de ebullicin, de vidrio o tefln, previamente lavados con disolventes
- Papel de aluminio calcinado
- Pinzas
- Pipetas Pasteur descartables de 1 mL y bulbos de goma
- Tijeras
- Tubos concentradores tipo Kuderna-Danish de 25 mL, graduados y con tapones
esmerilados de vidrio
- Varilla de vidrio de 50 cm
- Vasos de precipitados de 10 mL para la determinacin de peso seco
- Vasos de precipitados de 50, 250 y 500 mL
- Viales de vidrio oscuro de 1 y 7 mL con tapa protegida con pelcula de tefln

73

Todo material volumtrico para medidas de la muestra o agregado de estndares y


disoluciones de enriquecimiento debe ser previamente calibrado.
Reactivos

- Acetona, calidad plaguicidas o equivalente


- Acido clorhdrico, grado reactivo 12 N
- Agua libre de contaminantes orgnicos
- Almina, Bsica Brockmann I, grado cromatogrfico, ~150 mesh o equivalente,
activada a 440C por 4 horas y mantenida en estufa a 120C. Para utilizar, se deja
enfriar a temperatura ambiente en desecador
- Arena lavada y calcinada a 440C por 4 horas
- Cobre metlico, grado analtico, 20-30 mesh
- Diclorometano, calidad plaguicidas o equivalente
- Hexano, calidad plaguicidas o equivalente
- Pentano, calidad plaguicidas o equivalente
- Slica, Grado 923, 100-200 mesh o equivalente, activada en estufa a 170C por 24
horas antes de utilizar; dejar enfriar a temperatura ambiente al usar
- Disolucin de enriquecimiento
- Disolucin de estndares internos
- Disolucin de estndares de recuperacin
- Sulfato de sodio (Na2SO4), granular anhidro, calcinado a 440C por 4 horas y
mantenido en estufa a 120C. Para utilizar, se deja enfriar a temperatura ambiente en
desecador

Determinacin de peso seco (porcentaje de humedad)

Una alcuota de aproximadamente 1 g de muestra de sedimentos perfectamente homogenizada


es pesada en un vaso de precipitados, previamente tarado, de 10 mL. Despus de secada en
estufa con circulacin de aire a 63-65C por 24 horas, la alcuota es pesada y regresada a la
estufa por 2 horas antes de una segunda pesada. Si la diferencia entre las dos pesadas es
menor o igual a 0,02 g, la segunda lectura es utilizada para calcular el porcentaje de peso seco
de la muestra. Si la diferencia es mayor a 0,02 g, se regresa la muestra a la estufa y se vuelve
a pesar despus de 2 horas y as sucesivamente hasta obtener una diferencia de peso menor a
0,02 g.
Determinacin de peso seco (porcentaje de humedad) - Paso a paso

Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.

Coloque un vial o vaso de precipitados de 10 mL y registre el peso del mismo (Peso del Vial).

Revuelva cuidadosamente, con una esptula de acero inoxidable previamente lavada con disolventes,
la muestra ya homogenizada de sedimento y pese, sin volver a tarar la balanza, aproximadamente 1 g
de muestra dentro del vial (Vial+Muestra hmeda)

Prepare las muestras destinadas al control de calidad (blanco, muestra duplicada, muestra enriquecida
y material de referencia) de la misma manera que las dems muestras. En el caso del blanco, el Peso

74

del Vial y Vial+Muestra hmeda sern iguales.

Clculos

Registre cualquier caracterstica de las muestras que le llame la atencin mientras trabaja (e.g., olor,
color, trozos de vegetacin, conchas, etc.). Todo componente extrao (e.g., trozos de vegetacin,
conchas, organismos) no deberan incluirse en la muestra a secar.
Una vez finalizadas todas las muestras, coloque los viales con las muestras hmedas dentro de una
bandeja de laboratorio y coloque en estufa con circulacin de aire a 63-65C por 24 horas.
Pasadas las 24 horas, retire con cuidado y proteccin adecuada, la bandeja de la estufa y coloque en
desecador. Permita que los viales se equilibren con la temperatura del laboratorio por 30 minutos.
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.

Coloque uno de los viales y registre el peso del mismo (Vial+Muestra seca #1).
Finalizados todos los viales, regrese la bandeja a la estufa a 63-65C por 2 horas.

Despus de las 2 horas, retire la bandeja de la estufa con cuidado y proteccin adecuada la bandeja de
la estufa y coloque en desecador. Permita que los viales se equilibren con la temperatura del
laboratorio por 30 minutos.
Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales del
operador.
Tare la balanza vaca hasta que el indicador de peso lea 0,000 g.

Coloque uno de los viales y registre el peso del mismo (Vial+Muestra seca #2).

Si la diferencia entre las dos ltimas lecturas es menor o igual a 0,02 g, calcule el porcentaje de peso
seco utilizando la segunda lectura.
Si la diferencia es mayor a 0,02 g regrese la muestra a la estufa por 2 horas y repita el pesado como se
indic.

Determine la Diferencia Porcentual Relativa (DPR) entre los pesos secos calculados para la muestra
original y muestra duplicada. La DPR debera estar entre los rangos especificados por el laboratorio
como aceptables, generalmente 25%. Si la DPR es mayor a 25% vuelva a pesar ambas muestras
para corroborar los pesos y/o revise los clculos. Si despus de recalcular los pesos secos, la DPR
continua siendo mayor a 25% es posible que la muestra no este homogenizada correctamente.
Notifique a su supervisor antes de proseguir.
Para el blanco, la diferencia absoluta de los pesos del vial antes y despus del secado debera ser igual
o menor a 0,02 g.

(Vial + Muestra Seca) - (Peso del Vial)


* 100
% Peso Seco =
(Vial + Muestra hmeda) - (Peso del Vial)

% Peso Seco Muestra Original - % Peso Seco Muestra Duplicada


* 100
Diferencia Porcentual Relativa =
% Peso Seco Muestra Original + % Peso Seco Muestra Duplicada

75

Extraccin de la muestra

Una cantidad pesada de muestra seca y perfectamente homognea es transferida a un cartucho


de celulosa o cermico y ste es colocado en el extractor Soxhlet. Note que es importante que
todo componente extrao al sedimento (e.g., trozos de vegetacin, conchas, organismos) no
sean incluidos en la muestra a extraer. Trecientos mL de diclorometano y 3-5 ncleos de
ebullicin son agregados a un baln de 500 mL. El extractor es unido al baln y el cartucho,
con muestra en su interior, es humedecido con unos 50 mL de diclorometano.

Una vez armado el extractor Soxhlet, cada muestra y muestras correspondientes al control de
calidad son sembradas con los estndares de recuperacin correspondientes y, aquellas
seleccionadas a ser enriquecidas, con la disolucin conocida de analitos. El extractor Soxhlet
es colocado sobre una fuente de calentamiento con un ciclo de extraccin cada 5-6 minutos
(e.g. 10-12 ciclos por hora) por un mnimo de 8 horas u 80 ciclos.
Terminada la extraccin, se adosa una columna tipo Snyder de tres bolas al baln de 500 mL
y el extracto es concentrado a 10-15 mL sobre bao de agua a 60-65C. Alternativamente, la
concentracin del extracto puede realizarse en rotoevaporador cuidando de que la temperatura
del bao de agua no sobrepase los 35C y evitando la contaminacin cruzada entre muestras.
Si el extracto contiene algo de la muestra que ha pasado o material particulado, ste debe ser
filtrado utilizando un embudo de vidrio que contenga sulfato de sodio sobre un tapn de lana
de vidrio calcinada antes de su concentracin. El extracto concentrado a 10-15 mL es
transferido a un tubo de concentracin de 25 mL. El baln de 500 mL es enjuagado 2 3
veces con diclorometano y los enjuagues transferidos al tubo de concentracin. Se agrega un
ncleo de ebullicin, el extracto es concentrado y el disolvente cambiado por hexano (por el
agregado sucesivo de pequeas porciones de hexano) sobre bao de agua a 60-65C bajo una
suave corriente de nitrgeno. Volumen final del extracto antes de la limpieza en columna de
cromatografa debe ser de aproximadamente 2 ml en hexano.
Extraccin de la muestra Paso a paso

Pese con exactitud a la segunda cifra decimal, la cantidad de sedimento a extraer. Es importante que no
incluya en la pesada componentes extraos al sedimento (e.g., trozos de vegetacin, conchas,
organismos).

Agregue 300 mL de diclorometano a un baln identificado claramente con el cdigo propio de la


muestra y batera analtica, agregue 5-6 ncleos de ebullicin y conecte el extractor Soxhlet al baln.
Con una esptula, previamente lavada con diclorometano, transfiera la muestra seca a un cartucho de
extraccin, de celulosa o cermico, previamente extrado con diclorometano por 8 horas a 10-12 ciclos
por hora. Con una pinza enjuagada con diclorometano acomode el cartucho dentro del extractor
Soxhlet y agregue 50 mL de diclorometano para humedecer la muestra con cuidado de no empujarla
fuera del cartucho.
Adicione los estndares de recuperacin a todas las muestras, incluyendo las muestras destinadas al
control de calidad, y adicione las disoluciones de analitos de inters a las muestras destinadas a ser
enriquecidas.
Disolucin de estndares de recuperacin e internos (ver Anexos)

Las disoluciones de estndares de recuperacin e internos se preparan pesando las cantidades apropiadas de los compuestos
puros, transferidos cuantitativamente a un matraz volumtrico, y diluyendo con hexano o disolvente similar no clorado. Las
disoluciones de estndares de recuperacin e internos son de uso individual y deben prepararse y almacenarse como tal.
Las disoluciones de estndares de recuperacin e internos deben ser preparadas de manera tal que la adicin de 0,100 mL a
la muestra, antes de su extraccin y antes de su anlisis instrumental, respectivamente, resulte en concentraciones finales
comprendidas entre el nivel ms bajo y el ms alto de la curva de calibracin cuando el volumen final del extracto es
ajustado a aproximadamente 1 mL. Todos los analitos de inters presentes en la muestra son cuantificados en base a un
estndar de recuperacin y la recuperacin de este en base a un estndar interno. Por este motivo, si se esperan
concentraciones muy altas o muy bajas de los compuestos de inters en las muestras, las cantidades agregadas de
estndares de recuperacin, internos y los volmenes finales de los extractos deben ser ajustados convenientemente.

76

Disolucin de enriquecimiento (ver Anexos)


La disolucin de enriquecimiento (o de siembra) contiene todos o una buena seleccin de los analitos de inters que van a
ser utilizados para fortalecer un blanco o muestra enriquecidos. Esta disolucin se prepara pesando las cantidades
apropiadas de los compuestos puros, transferidos cuantitativamente a un matraz volumtrico, y diluyendo con hexano o
disolvente similar no clorado. La disolucin de enriquecimiento debe ser preparada de manera tal que la adicin de 0,100
mL al blanco o a la muestra, antes de su extraccin, resulte en concentraciones finales de analitos que, en el volumen final
del extracto de 1 mL, estn comprendidas entre el nivel ms bajo y el ms alto de la curva de calibracin.

Conecte un condensador al Soxhlet, coloque sobre la fuente de calentamiento y extraiga, como


mnimo, durante 8 horas bajo campana. Ajuste la temperatura hasta lograr un ciclo de extraccin cada
5-6 minutos 10-12 ciclos por hora. Tenga especial cuidado en controlar peridicamente que se
produzca el ciclo cuando el disolvente en el extractor Soxhlet est a nivel del sifn y que no est
simplemente rebalsando gota a gota.

En general, se espera tener un mnimo de 80 ciclos. Si los ciclos son ms demorados se puede
mantener la extraccin por ms horas. En esta situacin, se debe tener cuidado de tener suficiente
volumen de diclorometano en el baln para realizar el ciclo y una reserva para evitar perdidas por
recalentamiento o secado. Agregar disolvente al baln como sea necesario durante la extraccin.
Una vez finalizada la extraccin, deje enfriar el extractor Soxhlet hasta que paren los ciclos y retire el
condensador.

Agregue unos 4-5 ncleos de ebullicin frescos al baln, conecte una columna de destilacin tipo
Snyder de tres bolas y coloque el baln en un bao de agua a 60-65C para concentrar el volumen a
10-15 mL. Alternativamente, el extracto puede ser concentrado en un rotoevaporador cuidando que la
temperatura del bao de agua no sobrepase los 35C. Evite la contaminacin cruzada entre muestras.

Transfiera el volumen a un tubo de concentracin de 25 mL y enjuague el baln con pequeas


porciones de diclorometano. Recoja los lquidos de lavado en el mismo tubo de concentracin.
Agregue un ncleo de ebullicin al tubo de concentracin y coloque sobre bao de agua a 60-65C
hasta concentrar el extracto a aproximadamente 1 mL en diclorometano bajo una corriente suave de
nitrogeno.

Sin retirar del bao, agregue al tubo de concentracin 10 mL de hexano y lleve nuevamente a 1 mL
bajo una corriente suave de nitrgeno. Repita este paso tantas veces como sea necesario hasta
reemplazar todo el diclorometano por hexano, lo cual se evidencia por la ausencia de ebullicin en el
lquido.

Limpieza con slica gel/almina en columna de cromatografa

La columna de cromatografa se llena con diclorometano, se coloca un tapn de lana de vidrio


calcinada en el fondo de la columna para retener el material adsorbente y sobre ella 1 cm de
sulfato de sodio anhidro o de arena lavada y calcinada para lograr una superficie uniforme.
Diez gramos de almina (previamente activada y parcialmente desactivada con 1% de agua,
peso en peso) es agregada en seco sobre el diclorometano y dejada decantar dentro de la
columna. Veinte gramos de slica gel (previamente activada y parcialmente desactivada con
5% de agua, peso en peso) es suspendida en diclorometano antes de su agregado a la columna.
Una vez que la reaccin de la slica gel con el diclorometano ha terminado (no se observa la
formacin de burbujas de gas) se agrega la slica gel sobre la almina y se deja decantar.
Aproximadamente 2 cm de sulfato de sodio anhidro o de arena lavada y calcinada es agregada
al tope de la columna y, sobre ella, 1-2 cm de cobre activado (ver Limpieza con slica
gel/almina en columna de cromatografa Paso a paso). En este punto, la columna
contiene, en diclorometano y de abajo hacia arriba, 1 tapn de lana de vidrio, 1 cm de arena
lavada, 10 gramos de almina parcialmente desactivada, 20 gramos de slica parcialmente
desactivada, 2 cm de sulfato de sodio anhidro o de arena lavada y 1-2 cm de cobre activado
para la remocin de azufre. Se eluye el diclorometano de la columna hasta alcanzar la
superficie superior del cobre activado y se agregan 50 mL de pentano. Se permite que el
pentano eluya de la columna y reemplace el diclorometano hasta que alcance el cobre
77

activado. En este punto, la columna est lista para recibir el extracto concentrado de la
muestra.

El extracto de la muestra concentrado a 2 ml en hexano es transferido a la columna mediante


el uso de una pipeta Pasteur descartable. El agregado es eludo hasta alcanzar la superficie del
cobre activado, y el disolvente es recogido en un baln de 250 mL colocado debajo de la
columna. El tubo concentrador que contena la muestra es enjuagado 2-3 veces con pequeas
porciones (~1 mL) de una mezcla de diclorometano:pentano (1:1) y los enjuagues agregados a
la columna siguiendo el procedimiento anterior entre agregados. Doscientos mL de la mezcla
de diclorometano:pentano se agregan a la columna y son recogidos en el baln de 250 mL a
una velocidad de aproximadamente 1 ml por minuto (gota a gota). Esta fraccin contiene
hidrocarburos alifticos, aromticos policclicos y totales, y plaguicidas clorados.
Limpieza con slica gel/almina en columna de cromatografa Paso a paso

Preparacin de la columna

Retire el sulfato de sodio, almina y slica gel de la estufa y colquelos en un desecador para enfriar
a temperatura ambiente (ver Extraccin y purificacin, Materiales de laboratorio, Reactivos).

Retire la arena lavada y calcinada de la estufa y coloque sobre la mesa para enfriar a temperatura
ambiente

Nota: al retirar materiales de la estufa use siempre guantes de proteccin o pinzas largas adecuadas
para manejar objetos pesados. Los recipientes de arena, slica y almina pueden pesar hasta 1 Kg. y
estn calientes. Asegrese de que todos los recipientes estn cubiertos con papel aluminio.

Preparacin de la slica y almina desactivadas

Calibre la balanza antes de su uso de acuerdo a las instrucciones del fabricante e indicaciones del
cuaderno de calibracin del laboratorio. Registre la fecha de calibracin, pesa utilizada e iniciales
del operador.
Coloque un baln de 1000 mL con boca esmerilada y embudo sobre la balanza y tare el peso hasta
que el mismo lea 0,000 g

Agregue almina dentro del baln y pese. El peso total de la almina debera ser igual a 10 g x n
muestras. Generalmente se pesa una cantidad extra (i.e., 10-15 g) en caso de accidentes o de
necesitar ms al construir las columnas. Registre este peso.

Vuelva a tarar el baln con la almina hasta que el mismo lea 0,000 g y desactive parcialmente el
adsorbente con el agregado de 1% (peso en peso) de agua libre de contaminantes orgnicos al baln.
Nota: la cantidad de agua es calculada al multiplicar el peso total de almina en el baln x 0,01. Por
ejemplo, si el peso total de almina en el baln es de 171,2 g, se debe agregar 171,2 g x 0,01 =
1,712 1,7 g de agua. Es conveniente no agregar toda el agua en el mismo lugar para evitar la
formacin de grumos.
Coloque otro baln de 1000 mL con boca esmerilada y embudo sobre la balanza y tare el peso hasta
que el mismo lea 0,000 g
Agregue slica dentro del baln y pese. El peso total de la slica debera ser igual a 20 g x n
muestras. Generalmente se pesa una cantidad extra (i.e., 20-25 g) en caso de accidentes o de
necesitar ms al construir las columnas. Registre este peso.

Vuelva a tarar el baln con la slica gel hasta que el mismo lea 0,000 g y desactive parcialmente el
adsorbente con el agregado de 5% (peso en peso) de agua libre de contaminantes orgnicos al baln.
Nota: la cantidad de agua es calculada al multiplicar el peso total de almina en el baln x 0,05. Por
ejemplo, si el peso total de almina en el baln es de 363,1 g, se debe agregar 363,1 g x 0,05 =
18,15 18,2 g de agua. Es conveniente no agregar toda el agua en el mismo lugar para evitar la
formacin de grumos.
Tape los dos balones y agite bruscamente al inicio, para romper grupos que se pudieran haber
formados, y ms suavemente cada 5-10 minutos por una hora para equilibrar la humedad.

78

Preparacin del cobre activado

Nota: el cobre activado sirve para remover el azufre que pueda interferir durante el anlisis de los
extractos por cromatografa de gases y detector de captura electrnica (plaguicidas clorados).

Coloque aproximadamente 50 g (para 24 muestras) de cobre metlico en un vaso de precipitados de


250 mL.
Agregue, bajo campana, y con mucho cuidado, una cantidad de cido clorhdrico necesaria para
cubrir el cobre.
Agite el cobre con una varilla de vidrio durante unos segundos y deje reposar por 5 minutos.

Coloque un embudo de vidrio con el vstago tapado con lana de vidrio sobre otro vaso de
precipitados de 500 mL y transfiera, cuidadosamente y bajo campana, el cobre con el cido.

Lave el cobre activado con abundante agua libre de contaminantes orgnicos hasta remover todo el
cido. La mezcla de cido y agua de lavado debe ser neutralizada con bicarbonato de sodio y
desechada de acuerdo a las normas del laboratorio.
Enjuague el cobre lavado con 3 4 porciones de 20 mL de metanol seguido de 3 4 porciones de
20 mL de diclorometano y de 3 4 porciones de 20 mL de hexano, desechando los disolventes de
acuerdo a las normas del laboratorio.
Almacene el cobre activado bajo hexano en un vaso de precipitados cubierto y debidamente
identificado. Es importante activar el cobre al momento de utilizar ya que con el tiempo pierde
afectividad o se desactiva totalmente.

Preparacin de la mezcla de diclorometano:pentano (1:1)

La mezcla de diclorometano:pentano (1:1) es preparada al mezclar cantidades iguales de pentano y


diclorometano.
Mida 2 litros de pentano utilizando un cilindro graduado y vierta en una botella de 4 litros.

Utilizando el mismo cilindro graduado, mida 2 litros de diclorometano y agrguelos a la botella de 4


litros. Tape la botella y agite vigorosamente para lograr un mezclado completo. Agite nuevamente
antes de cada uso. Este volumen es suficiente para aproximadamente 18 muestras.

Preparacin de la columna

Asegure las columnas cromatogrficas (30 cm x 13 mm con llave de tefln y reservorio de 250 mL)
a sus soportes dentro de la campana. El total de columnas debe ser el mismo que el nmero de
extractos a limpiar.
Coloque un recipiente de 250 mL bajo la columna para recoger los disolventes de desecho.

Abra la llave y, utilizando una botella de lavado, enjuague las columnas 3 veces con
aproximadamente 10 mL de metanol cada vez seguido de 3 enjuagues con aproximadamente 10 mL
de diclorometano cada vez.

Enjuague los extremos de una pinza y de una tijera con diclorometano y corte una porcin de lana
de vidrio calcinada suficiente para cubrir el fondo de la columna. Con una varilla de vidrio,
enjuagada con diclorometano, empuje la lana de vidrio hacia el fondo de la columna.
Cierre la llave y llene la porcin de la columna cromatogrficas con diclorometano.

Coloque un embudo sobre la columna y agregue un 1 cm de arena lavada dentro de cada columna
utilizando una esptula de acero inoxidable enjuagada con diclorometano.
Coloque un vaso de precipitados de 50 mL sobre una balanza calibrada y tare su peso.

Pese aproximadamente 10 g (0,1 g) de almina parcialmente desactivada por columna.

Vierta la almina en la columna utilizando un embudo. Enjuague el embudo y el interior del


reservorio de la columna con pequeas porciones de diclorometano para asegurarse que toda la
almina es transferida hacia la columna. Abra brevemente la llave de la columna para facilitar el
decantado de la almina.

79

Luego del agregado de la almina, coloque un vaso de precipitados de 50 mL sobre la balanza


calibrada y tare su peso. Pese aproximadamente 20 g (0,2 g) de slica parcialmente desactivada por
columna.
Agregue diclorometano a cada vaso de precipitados y mezcle bien con una varilla de vidrio hasta no
observar desprendimientos de burbujas de gas.

Vierta la mezcla de slica gel/diclorometano dentro de la columna utilizando un embudo. Enjuague


el vaso de precipitados, el embudo y el interior del reservorio de la columna con pequeas porciones
de diclorometano para asegurarse que toda la slica es transferida hacia la columna. Abra
brevemente la llave de la columna para facilitar el decantado de la slica.

Agregue 2 cm de sulfato de sodio anhidro o arena lavada sobre la slica. Si es necesario enjuague el
reservorio con pequeas porciones de diclorometano para asegurar la transferencia completa de
sulfato de sodio anhidro o arena a la columna.
Agregue, con cuidado para evitar alterar la superficie de la columna, 1-2 cm de cobre activado para
la remocin de azufre).

Abra la llave de la columna para que eluya el diclorometano hasta alcanzar la superficie de cobre
activado, recogiendo los desechos en recipientes adecuados.
Agregue 50 mL de pentano y eluya hasta alcanzar la superficie de cobre activado.

Cierre la llave y la columna esta lista para recibir el extracto de la muestra.

Enjuague la punta inferior de la columna de cromatografa (por debajo de la llave) con


diclorometano

Purificacin del extracto

Reemplace el recipiente de desechos con un baln de 250 mL. Cada baln deber estar debidamente
identificado con el cdigo de la muestra y batera de anlisis.

Transfiera los extractos de los tubos de concentracin a las columnas utilizando pipetas Pasteur
descartables. Los extractos de las muestras estn, a este punto, concentrados en aproximadamente 2
mL en hexano.
Abra la llave de la columna y permita que el extracto se introduzca dentro de la columna. Cierre la
llave.
Enjuague el tubo de concentracin con 1 ml del disolvente de elucin (1:1 diclorometano:pentano) y
agregue el lavado a la columna utilizando la misma pipeta Pasteur por muestra.

Abra la llave de la columna y permita que el primer lavado se introduzca dentro de la columna.
Cierre la llave.

Repita los dos pasos anteriores con dos enjuagues adicionales del tubo de concentracin usando la
mezcla de elucin y permitiendo que el lavado se introduzca completamente dentro de la columna
antes del agregado siguiente.
Luego de la transferencia completa de los extractos a las columnas y de sus respectivos enjuagues,
agregue, con cuidado para no disturbar la superficie de la columna y evitar as la resuspensin de la
muestra, 200 mL de la mezcla diclorometano:pentano utilizando un cilindro graduado.
Abra la llave y eluya la muestra a una velocidad de unos 2 mL por minuto, ajustando la llave como
sea necesario

Una vez que ha eludo el volumen total de la mezcla de diclorometano:pentano, cierre la llave.
Retire y cubra el baln. Retire las columnas de cromatografa y deseche apropiadamente la slica y
almina utilizadas.

Los extractos limpios de las muestras estn listos para ser concentrados para su anlisis
instrumental.

Concentracin final del extracto

Agregue unos 4-5 ncleos de ebullicin al baln, conecte una columna de destilacin tipo Snyder de
tres bolas y coloque el baln en un bao de agua a 60-65C para concentrar el volumen a 10-15 mL.
Alternativamente, el extracto puede ser concentrado en un rotoevaporador cuidando que la

80

temperatura del bao de agua no sobrepase los 35C. Evite la contaminacin cruzada entre
muestras.

Transfiera el volumen a un tubo de concentracin de 25 mL y enjuague el baln con pequeas


porciones de diclorometano. Recoja los lquidos de lavado en el mismo tubo de concentracin.
Agregue un ncleo de ebullicin al tubo de concentracin y coloque sobre bao de agua a 60-65C
hasta concentrar el extracto a aproximadamente 1 mL en diclorometano bajo una corriente suave de
nitrogeno.
Sin retirar del bao, agregue al tubo de concentracin 10 mL de hexano y lleve nuevamente a 1 mL
bajo una corriente suave de nitrgeno. Repita este paso tantas veces como sea necesario hasta
reemplazar todo el diclorometano por hexano, lo cual se evidencia por la ausencia de ebullicin en
el lquido.

Transfiera cuantitativamente a viales de cromatografa, cuidando de enjuagar el tubo de


concentracin con 2 3 pequeas porciones de hexano, y adicione los estndares internos
correspondientes a todas las muestras, incluyendo las muestras destinadas al control de calidad (ver
Anexos).

Agregue hexano, o permita evaporar espontneamente el exceso de solvente bajo campana, para
ajustar a aproximadamente 1 mL y proceda con el anlisis instrumental.

Anlisis Instrumental

Los conceptos que se discuten en las secciones siguientes son generalidades que aplican tanto
al anlisis de hidrocarburos alifticos y totales por cromatografa de gases asociada a un
detector de ionizacin de llama, como a la determinacin de plaguicidas clorados por
cromatografa de gases asociada a un detector de captura electrnica, o a la determinacin de
hidrocarburos aromticos policclicos mediante cromatografa de gases asociada a un detector
de espectrometra de masas. La nica excepcin es el control de la degradacin de plaguicidas
clorados en el puerto de inyeccin.
Lmites de deteccin

Los lmites de deteccin del mtodo para los anlisis rutinarios deben ser determinados antes
de comenzar los anlisis siguiendo las indicaciones proporcionadas en el Federal Register
(1984), resumidas en el cuadro siguiente, o similar. En su defecto se pueden utilizar las
concentraciones de la disolucin de calibracin ms baja usada en los anlisis, ajustada por el
peso de muestra extrada.
Definicin y procedimientos para la determinacin de los lmites de deteccin del mtodo

Definicin

El lmite de deteccin del mtodo (LDM) se define como la concentracin mnima de una substancia que
puede ser medida y reportada con una certeza del 99% de que la concentracin determinada es distinta de
cero. El LDM debe ser determinado a partir del anlisis de una matriz especfica que contiene el analito.
Aplicacin

Este mtodo esta designado para ser aplicado a una variedad de muestras que van desde el blanco del mtodo
a distintas matrices. El LDM para un mtodo analtico bien definido puede variar de acuerdo al tipo de
muestra y es esencial que todos los pasos analticos detallados en el mtodo analtico sean incluidos al
determinar el LDM.
Procedimiento
1.
2.

Estime el limite de deteccin del mtodo como el valor de la concentracin que corresponde a una
relacin seal:ruido del instrumento de 3 a 5
Previo a la determinacin del LDM, analice la muestra para determinar la concentracin nativa del

81

analito bajo estudio.

 Si la concentracin determinada est comprendida entre dos a cinco veces el lmite de deteccin
estimado, proceda con el estudio como se indica a continuacin.

 Si la presencia del analito no es detectada, proceda con el estudio como se indica a


continuacin.
3.

 Si la concentracin determinada es mayor al rango recomendado, debe conseguir una muestra


de la misma matriz proveniente de un rea menos o no contaminada y vuelva a analizar.

Una vez determinada la concentracin nativa del analito, analice un mnimo de siete alcuotas
(enriquezca adecuadamente si en la muestra no se detect el analito bajo estudio, o analice sin
agregados si la concentracin del analito resulto dentro de los lmites recomendados) y procese de
acuerdo al mtodo analtico. Incluya un blanco de mtodo en la batera analtica.



Si esta determinacin confirma que la concentracin del analito est dentro del rango
recomendado, prosiga con los clculos

Si esta determinacin indica que la concentracin del analito est por fuera del rango
recomendado, obtenga una nueva muestra y repita los pasos 2-3.

4. Calcule la varianza (S) y desvo estndar (s) de las medidas replicadas:

1
S =
X i2

(n - 1) i =1

donde:

5.

i =1

X i / n

s = S2
Xi, i=1 a n son los resultados analticos finales obtenidos de las alcuotas analizadas
es la suma de los valores X de i=1 a n

Calcule el LDM de la siguiente manera:

donde:

LDM = t (n -1, 1- =0.99) (s)

LDM = lmite de deteccin del mtodo

t(n-1, 1-=0.99) = valor t del test de Student apropiado para un nivel de confianza de 99% y un
desvo estndar con n-1 grados de libertad
6.

s = desvo estndar de los anlisis replicados

El intervalo de confianza del 95% para el LDM calculado en el punto 5 se calcula de acuerdo a las
siguientes ecuaciones derivadas de la distribucin Chi-cuadrado para los grados de libertad.

Lmite de confianza inferior (LCI) = 0,64 LDM

Lmite de confianza superior (LCS) = 2,20 LDM

Alternativamente se puede pueden utilizar las concentraciones de la disolucin de calibracin ms baja usada

en los anlisis, ajustada por el peso de muestra extrada, para estimar los limites de deteccin. Por ejemplo,

en la medicin de plaguicidas clorados por cromatografa de gases asociada a un detector de captura


electrnica, se recomienda un rango de concentraciones de calibracin entre 200 y 5 ng/mL (ver informacin

en Anexos). Si el peso de muestra extrada es de 10 gramos, y concentrada a un volumen final de 1 mL, el


limite de deteccin estimado es:

LDM estimado =

C min 5 ng/mL
=
= 0,5 ng/g
PM 10 g/mL

82

donde:

LDMestimado = lmite de deteccin estimado del mtodo

Cmin = concentracion de la disolucion de calibracion mas baja


PM = peso de muestra extrada

Control de calidad analtica

Los controles de calidad requeridos para el anlisis cuantitativo de los compuestos de inters
estn resumidos en Tabla 1 y discutidos en detalle a continuacin. Estos criterios pueden ser
modificados por el encargado del laboratorio segn lo considere necesario.
Calibracin inicial del instrumental

La calibracin de todo instrumento debe realizarse antes de correr las muestras. En el caso del
anlisis de plaguicidas clorados es preferente realizar la curva de calibracin con un mnimo
de cuatro niveles utilizando una ecuacin cuadrtica o exponencial para compensar por el
limitado rango de linealidad del detector de captura electrnica. La calibracin es considerada
aceptable si presenta un coeficiente de correlacin (r) 0,9950 (i.e., R2 0,9900) para todos
los analitos presentes en las disoluciones. Si este criterio no se satisface para un analito en
particular y el mismo se encuentra presente en las muestras, la calibracin debe realizarse
nuevamente seguida del anlisis de las muestras. En el anlisis de hidrocarburos alifticos y
totales o hidrocarburos aromticos policclicos mediante un detector de ionizacin de llama o
de masas, respectivamente, muchos ms estables y de respuesta lineal comparados con el
detector de captura electrnica, es posible realizar, adems de las calibraciones anteriores, una
calibracin basada en los factores de respuesta relativos obtenidos de las disoluciones de
calibracin para demostrar la linealidad del detector utilizado.
Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial

La calibracin inicial del instrumental puede durar das o semanas pero su validad debe
controlarse al cada vez que se comienza una batera analtica y cada 12 horas, como mximo,
mediante la inyeccin de una disolucin con concentraciones comprendidas dentro del rango
de calibracin.

83

Tabla 1. Requerimientos de control de calidad para el anlisis cuantitativo de


contaminantes orgnicos
Parmetro

Calibracin inicial del


instrumental
(utilizando factores de
respuesta relativos)
Calibracin inicial del
instrumental
(utilizando una ecuacin
cuadrtica o exponencial)
Verificacin de
mantenimiento de la
calibracin inicial
Identificacin cualitativa de
los compuestos de inters
(GC/ECD y GC/FID)
Identificacin cualitativa de
los compuestos de inters
(GC/MS)

Blanco de instrumento

Control de degradacin en el
sistema
(anlisis de plaguicidas)
Recobre de estndares de
recuperacin
Blanco de laboratorio

Muestra duplicada

Blanco de laboratorio
enriquecido
Blanco de laboratorio
enriquecido en duplicado
Muestra enriquecida
Muestra enriquecida en
duplicado

Material de referencia
certificado

Criterio de Control de
Calidad

Frecuencia

Mnimo de 4 disoluciones de
calibracin con un desvo porcentual
relativo de los factores de respuesta
igual o menor a 15%
Mnimo de 4 disoluciones de
calibracin con un coeficiente de
correlacin >0,990

Al comienzo de una batera analtica

Control de calibracin (ConCal);


error menor a 25% con respecto a
las concentraciones nominales
Tiempos de retencin dentro de 4
segundos de los tiempos de
referencia
Tiempos de retencin dentro de 4
segundos de los tiempos de
referencia
Diferencia entre tiempos de
retencin de iones seleccionados no
mayor de 2 segundos
Instrumental libre de contaminacin

Luego de la calibracin inicial y cada


12 horas como mximo

La degradacin de compuestos ms
lbiles no debe ser mayor al 15%
Recuperacin entre 40 a 120% de
todos los estndares de recuperacin
No ms de dos analitos detectados
en concentraciones >3 veces el
lmite de deteccin del mtodo
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters que
resulten >10 veces el lmite de
deteccin del mtodo
Recuperacin entre 40 a 120% para
el 80% de los analitos de inters
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters
Recuperacin entre 40 a 120% para
el 80% de los analitos de inters
Diferencia porcentual relativa <30%
para todos los analitos de inters
Recuperacin de los analitos de
inters, presentes en
concentraciones >10 veces el lmite
de deteccin del mtodo, dentro del
rango certificado

84

Al comienzo de una batera analtica

Todas las muestras


Todas las muestras

Antes de realizar la calibracin (o


control de calibracin) y de comenzar
el anlisis de las muestras
Antes de realizar la calibracin (o
control de calibracin) y de comenzar
el anlisis de las muestras
Todas las muestras
Uno por batera analtica
Una por batera analtica
Uno por batera analtica. Pueden
reemplazar la muestra enriquecida y
muestra enriquecida en duplicado si no
se dispone de suficiente material
Uno por batera analtica. Pueden ser
reemplazados por el blanco
enriquecido y blanco enriquecido en
duplicado si no se dispone de
suficiente material
Uno por batera analtica si est
disponible. Puede ser reemplazado por
una muestra enriquecida

Secuencia analtica

Si la batera de muestras extradas por el laboratorio incluye, por ejemplo, 16 muestras


originales adems de las muestras destinadas al control de la calidad (blanco, muestra
duplicada, blanco enriquecido, muestra enriquecida, muestra enriquecida en duplicado,
material de referencia), la secuencia analtica del instrumento puede tomar la forma siguiente:
Orden

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31

Secuencia Analtica

I.D.
W1000
W1001
W1002
W1003
W1004
W1005
Q3645
Q3646
Q3647
Q3648
Q3649
Q3650
K1518
W1006
K1519
K1522
K1523
K1525
K1526
K1527
K1540
K1541
W1007
K1542
K1543
K1544
K1545
K1546
K1547
K1548
W1008

Clase
Disolvente
Disolucin de Calibracin 1
Disolucin de Calibracin 2
Disolucin de Calibracin 4
Disolucin de Calibracin 5
Disolucin de Calibracin 3 (control)
Blanco
Blanco enriquecido
Muestra duplicada
Muestra enriquecida
Muestra enriquecida en duplicado
Material de referencia certificado
Muestra 1
Disolucin de Calibracin 3 (control)
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 5
Muestra 6
Muestra 7
Muestra 8
Muestra 9
Cal 3 (control)
Muestra 10
Muestra 11
Muestra 12
Muestra 13
Muestra 14
Muestra 15
Muestra 16
Disolucin de Calibracin 3 (control)

Note que en este ejemplo se utilizan cuatro niveles de calibracin, dejndose el nivel
intermedio (i.e., Calibracin 3) como disolucin independiente para controlar la validez y
mantenimiento de la calibracin inicial durante la corrida analtica.
Identificacin cualitativa de los compuestos de inters

La identificacin cualitativa de un analito en el extracto de muestra por cromatografa de


gases se basa en la comparacin del tiempo de retencin del mismo con el tiempo de
retencin promedio observado para ese compuesto en las disoluciones de calibracin. La
diferencia entre los tiempos de retencin no debe ser mayor a 4 segundos. El analista
experimentado debe utilizar la seleccin manual de picos y correccin de la lnea de base
cuando sea apropiado y ajustar el tamao de la ventana de tiempo de retencin para asegurar
que todos los compuestos sean identificados correctamente. La intensidad del pico elegido no
debe ser menor a tres veces el ruido de base.

Es importante destacar que, para la identificacin cualitativa de un analito por medio de


cromatografa de gases asociada a espectrometra de masas, es necesario, adems del
requerimiento de 4 segundos mencionado anteriormente para los tiempos de retencin, tener
una diferencia menor a 2 segundos entre los tiempos de retencin correspondientes a los
iones seleccionados como de cuantificacin y confirmacin.

85

Blanco del instrumento

El blanco de instrumento (o blanco de disolvente) es inyectado y analizado antes de cada


secuencia analtica para verificar la operacin del cromatgrafo y la ausencia de
contaminacin en el sistema. Los anlisis no deben ser iniciados hasta que el blanco del
instrumento est completamente libre de compuestos contaminantes. En caso de problemas
con el blanco del instrumento, se deben tomar acciones correctivas como, por ejemplo,
reemplazo de la jeringa, inyecciones repetidas de disolvente, limpieza del puerto de inyeccin
con cambio del inserto de vidrio, retiro de una porcin de la columna de cromatografa o
reemplazo de la columna.
Control de la degradacin en el sistema (anlisis de plaguicidas)

Despus de comprobar que el instrumental se encuentra libre de contaminantes, se debe


controlar que el sistema no presenta sitios activos que puedan degradar a los compuestos ms
lbiles en el anlisis de plaguicidas clorados. Una disolucin de compuestos seleccionados
(e.g., DDT y Aldrin que son conocidos por su degradacin en el puerto de inyeccin bajo
ciertas condiciones) es utilizada para verificar si el sistema es inerte. La degradacin de estos
compuestos en la puerta de inyeccin no debe ser mayor a un 15% de la cantidad inyectada
para considerar que el sistema est listo para iniciar una corrida analtica. Si la degradacin de
cualquiera de estos compuestos es mayor al 15% se debe corregir el problema antes de
comenzar con los anlisis. Esto puede representar el cambio del inserto de vidrio y del sello
inferior del inyector o retiro de una porcin de la columna.
Recobre de estndares de recuperacin

Todas las muestras, incluyendo aquellas introducidas por el laboratorio y destinadas al control
de calidad, son sembradas con las cantidades adecuadas de los estndares de recuperacin
apropiados para el anlisis correspondiente. Estos estndares son utilizados para determinar la
concentracin de los analitos de inters y para evaluar el comportamiento del mtodo. Esto se
hace utilizando como referencia a uno o ms estndares internos. Distintos anlisis pueden
requerir diferentes estndares de recuperacin e internos y los lmites de recuperacin
aceptables para estndares de recuperacin son definidos durante el desarrollo del mtodo.

En general, el anlisis rutinario de contaminantes orgnicos requiere que la


recuperacin de los estndares agregados est comprendida entre el 40 al 120% de
la cantidad sembrada. Si esto no se logra, se deben revisar los clculos, evaluar
posibles interferencia con cualquiera de los dos tipos de estndares (de
recuperacin e internos), errores de siembra, problemas con las soluciones de
siembre, etc. En el caso de recuperaciones constantemente por encima de 120%, se
debe sospechar una posible concentracin de la disolucin que lo(s) contiene(n)
por evaporacin del solvente.

Si la recuperacin del estndar utilizado para determinar las concentraciones de los


analitos de inters en una o ms muestras presenta una recuperacin por encima
del 120% se debe sospechar la existencia de interferencias si el mismo estndar en
las disoluciones de calibracin y en la mayora de las muestras de la batera
analtica est en control. De ser posible, es conveniente tener ms de un estndar
de recuperacin para evitar este problema.
Si la causa de una recuperacin fuera de lmites no es identificada, el extracto debe
ser re-analizado. Si el re-anlisis rinde una recuperacin dentro de los lmites

86

establecidos, la muestra puede ser reportada, caso contrario debe regresarse al


laboratorio para una nueva limpieza o para su re-extraccin. Si an persiste el
problema, la muestra se reporta con la notacin correspondiente.
Blanco de laboratorio

El blanco de laboratorio (o blanco de mtodo) es utilizado para demostrar que no existieron


problemas de contaminacin en el laboratorio durante el procesamiento de la batera analtica.
Se requiere un blanco del mtodo para cada grupo de muestras que son procesadas al mismo
tiempo.

Un blanco es aceptable cuando no contiene ms de dos analitos de inters en


concentraciones mayores a 3 veces los lmites de deteccin establecidos para el
mtodo (LDM). Si existieran ms de dos analitos de inters en el blanco en
concentraciones mayores a 3 veces los lmites de deteccin del mtodo, puede
necesitarse la re-extraccin de todas las muestras.

Si cualquiera de los analitos de inters detectados en el blanco de laboratorio


presenta una concentracin mayor a 3 veces el lmite de deteccin, pero no es
detectado en las muestras en concentraciones mayores al lmite de deteccin, el
resultado de ese analito en el blanco debe ser identificado como 3>LDM y se
contina con el anlisis y reporte.

Cuando un analito de inters se detecta en el blanco de laboratorio en una


concentracin mayor a 3 veces el lmite de deteccin y la concentracin del mismo
compuesto en las muestras es 10 veces mayor que la concentracin encontrada en
el blanco, el valor en el blanco es identificado como 3>LDM y las muestras se
reportan al considerarse que la contaminacin evidenciada en el blanco de
laboratorio es relativamente insignificante.

Cuando un analito de inters se detecta en el blanco de laboratorio en una


concentracin mayor a 3 veces el lmite de deteccin y la concentracin del mismo
compuesto en las muestras es menor a 10 veces la concentracin encontrada en el
blanco, las muestras de esa batera analtica debern ser re-extradas y reanalizadas. Si no se dispone de suficiente muestra para hacerlo, las
concentraciones encontradas se pueden reportar pero el analito en el blanco debe
ser identificado con el calificador 3>LDM y en las muestras con el calificador
B (Blanco de laboratorio contaminado).

Muestra duplicada

El anlisis de la muestra duplicada es utilizado para estimar el grado de homogeneidad de las


muestras y, en conjunto con la muestra original, la precisin de los anlisis. Se requiere una
muestra enriquecida en cada batera analtica. Se espera que las diferencias porcentuales
relativas entre las concentraciones encontradas en la muestra original y muestra duplicada
sean menores al 25%. Si estas diferencias son mayores en ms de un 20% de los analitos
detectados en concentraciones mayores a 10 veces el lmite de deteccin se requiere una
accin correctiva. Esto puede incluir, revisin de las integraciones e identidades de los picos
del cromatograma y clculos, re-inyeccin y re-anlisis de ambas muestras, mantenimiento
y/o nueva calibracin del equipo o re-extraccin de la batera analtica.

87

Blanco de laboratorio enriquecido y blanco de laboratorio enriquecido en duplicado

El blanco de laboratorio enriquecido es utilizado para estimar la precisin analtica del


mtodo. Puede reemplazar a la muestra enriquecida cuando no se dispone de suficiente
material para producirla. El blanco de laboratorio enriquecido en duplicado es utilizado para
estimar la precisin analtica y, conjuntamente con el blanco de laboratorio enriquecido, la
exactitud de los anlisis. Se requiere un blanco de laboratorio enriquecido en cada batera
analtica.

El anlisis de un blanco de laboratorio enriquecido es aceptable cuando el 80% de


los analitos de inters presentan una recuperacin entre 40 y 120% de la cantidad
sembrada.

Si el criterio anterior no se cumple, se impone una accin correctiva la cual puede


incluir la revisin de los clculos y/o re-anlisis, re-extraccin del grupo de
muestras y re-calibracin o mantenimiento del equipo.

Si la batera analtica incluye un blanco de laboratorio enriquecido en duplicado,


las recuperaciones de analitos sembrados en este y en el blanco de laboratorio
enriquecido no deben presentar una Diferencia Porcentual Relativa (DPR) mayor
al 30%.

Muestra enriquecida y muestra enriquecida en duplicado

El anlisis de la muestra enriquecida es utilizado para estimar la exactitud de los anlisis en


presencia de la matriz. La muestra enriquecida en duplicado es utilizada para estimar la
precisin analtica y, conjuntamente con la muestra enriquecida, la exactitud de los anlisis.
Se requiere una muestra enriquecida en cada batera analtica. Cuando no se dispone de
material suficiente para producir una muestra enriquecida, la misma puede ser sustituida por
el blanco de laboratorio enriquecido.

El anlisis de la muestra enriquecida es aceptable cuando la recuperacin del 80%


de los analitos de inters se encuentran entre 40 y 120% de la cantidad sembrada.
Es posible que la recuperacin de uno o varios analitos se vea invalidada por las
altas concentraciones presentes naturalmente en la muestra. En este caso, slo se
consideran, para el cmputo, las recuperaciones de los analitos que no presentan
este problema. Si la mayora de o todos los analitos presentan este problema, se
dice que la muestra seleccionada para su enriquecimiento no es vlida y se
continua con el anlisis de las muestras en la batera analtica.

Si las concentraciones nativas en la muestra no son un problema y ms del 20% de


los analitos de inters presentan recuperaciones por fuera de los lmites
establecidos, se debe considerar revisar las integraciones e identidades de los picos
del cromatograma, repasar los clculos, o re-analizar el extracto. Si an no se
cumple con el criterio de control de calidad, se deber decidir la re-extraccin de
las muestras.
Si la batera analtica incluye una muestra enriquecida en duplicado, las
recuperaciones de analitos sembrados en esta y en la muestra enriquecida no deben
presentar una Diferencia Porcentual Relativa (DPR) mayor al 30%.

88

Material de referencia certificado

El anlisis de un material de referencia certificado es utilizado para estimar la precisin y


exactitud analtica del mtodo. Si no se dispone de un material de referencia certificado el
blanco de laboratorio enriquecido puede utilizarse con este propsito. Se requiere el anlisis
de un material de referencia certificado en cada batera analtica.

El anlisis de un material de referencia certificado es aceptable cuando el 80% de


los analitos de inters, presentes en el material en concentraciones mayores a 10
veces el LDM, se encuentran dentro de los rangos de concentraciones certificadas

Si el criterio anterior no se cumple, es necesario revisar las integraciones e


identidad de los picos del cromatograma, repasar los clculos o re-inyectar el
extracto. Si an no se cumple con el criterio de control de calidad, se deber
decidir la re-extraccin de las muestras.

Evaluacin de los parmetros de control de calidad analtica


Recobre de estndares de recuperacin

Los porcentajes de recobro de los estndares de recuperacin en los extractos de muestras son
estimados comparando la respuesta relativa del estndar de recuperacin en la muestra con la
obtenida de las disoluciones de calibracin. El laboratorio deber tomar las acciones
correctivas apropiadas cada vez que la recuperacin de los estndares de recuperacin estn
fuera del rango buscado (ver: Control de calidad analtica, Recobre de estndares de
recuperacin). En general, se considera aceptable una recuperacin comprendida entre 40120% calculada como:
Rec. de Estndares (% ) =
donde:

A reM A eiC
*
*100
A eiM A reC

(1)

= rea en muestra del estndar de recuperacin


= rea en muestra del estndar interno
= rea promedio del estndar de recuperacin en soluciones de
calibracin
A eiC
= rea promedio del estndar interno en soluciones de calibracin.
Esto asume que las concentraciones de estndares de recuperacin e internos en las soluciones
de calibracin son iguales a las sembradas en las muestras. Si las concentraciones son
distintas, entonces:
AreM
AeiM
A reC

Rec. de Estndares (% ) =
donde:

CreM
CeiM
C reC

CeiC

(A reM / C reM ) (A eiC / CeiC )


*
*100
(A eiM / CeiM ) ( A reC / C reC )

= concentracin del estndar de recuperacin en muestra


= concentracin del estndar interno en muestra
= concentracin del estndar de recuperacin en soluciones de
calibracin
= concentracin del estndar interno en soluciones de calibracin

89

(2)

Muestra Original versus Muestra Duplicada - Diferencia porcentual relativa

Las concentraciones encontradas en la muestra original y su muestra duplicada deben ser


comparables para certificar la homogeneidad de las muestras y la precisin de los anlisis
(ver: Control de calidad analtica, Muestra duplicada). De no cumplirse con los
requerimientos de control de calidad, el laboratorio deber implementar las acciones
correctivas necesarias.

(C C )
md
Diferencia Porcentual Relativa (DPR) = mo
* 100
C mo + C md

donde:

Cmo
Cmd

(3)

= concentracin encontrada en la muestra original


= concentracin encontrada en la muestra duplicada

Recuperacin de analitos de inters en muestras enriquecidas y materiales de referencia


certificados

Una buena recuperacin de los analitos agregados a las muestras enriquecidas, o duplicacin
de concentraciones certificadas en materiales de referencia, son indicativos de una buena
tcnica de laboratorio. El porcentaje de recuperacin de los distintos analitos sembrados en
muestras enriquecidas es calculada utilizando la ecuacin:

(C * M me Cmo * M mo )
Porcentaje de recuperacin = me
*100
A ad

donde:

(4)

= concentracin encontrada en la muestra enriquecida


Cme
Cmo
= concentracin encontrada en la muestra original
Mme
= tamao de muestra enriquecida
Mmo
= tamao de muestra original
Aad
= concentracin de analito adicionado a la muestra enriquecida
Calcule y reporte el porcentaje de recuperacin de todos los analitos de inters adicionados a
las muestras enriquecidas y todos los compuestos con concentracin certificada en los
materiales de referencia. Note que, por definicin, Cmo en el blanco de laboratorio enriquecido
y su duplicado es igual a cero. El laboratorio deber implementar las acciones correctivas
necesarias si los requerimientos de control de calidad no se cumplen (ver: Control de calidad
analtica, Muestra enriquecida y muestra enriquecida en duplicado y Material de referencia
certificado).

90

4.9.1. Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por cromatografa de gases con


detector de captura electrnica

Introduccin

Los plaguicidas clorados son rutinariamente cuantificados mediante la tcnica de


cromatografa de gases asociada a un detector de captura electrnica (GC/ECD, por sus siglas
en ingls). Esta tcnica es muy sensible y capaz de determinar estos compuestos
contaminantes a niveles trazas (e.g., ng g-1 o pg g-1). El mtodo que se describe es aplicable a
extractos de muestras de sedimentos luego de la limpieza apropiada.
Los plaguicidas clorados de inters para este estudio se limitan a:
Plaguicidas clorados

Aldrin
alpha-clordano
Dieldrin
4,4'-DDD
4,4'-DDE
4,4'-DDT
Endrin

Endosulfan I
Endosulfan II
Endosulfan sulfato
Endrin aldehido
Endrin cetona
alpha-HCH

Plaguicidas clorados
adicionales

Gamma-clordano
Cis-nonacloro

Trans-nonacloro
2,4'-DDD

beta-HCH
delta-HCH
gamma-HCH (Lindano)
Heptacloro
Heptacloro epxido
Metoxicloro
2,4'-DDE
2,4'-DDT

Equipamiento y materiales

Cromatgrafo de gases asociado a un detector de captura electrnica

El cromatgrafo de gases debe poseer un inyector tipo split/splitless y tener la capacidad de


utilizar una columna capilar en horno de temperatura programable asociada a un detector de
captura electrnica normal o micro detector. La columna comnmente utilizada para el
anlisis de plaguicidas tiene las siguientes caractersticas: columna capilar de 30 m de
longitud x 0,25 mm de dimetro interno y una fase liquida DB-5 de 0,25 m de espesor. Otras
columnas de similares caractersticas pueden utilizarse. Es conveniente contar con un inyector
automtico con capacidad de realizar inyecciones de 1 a 4 L. Una segunda columna de
diferente polaridad, tipo DB-17ht o equivalente, puede ser utilizada para la confirmacin de
los compuestos de inters. El programa utilizado para el anlisis de plaguicidas por
cromatografa de gases y captura electrnica es el siguiente:
Temperatura del inyector: ............................. 275C
Temperatura del detector:.............................. 325C
Programa de temperatura del horno:
Temperatura inicial: .......................... 100C mantenida por 1 minuto
1ra rampa de calentamiento................ 5,0C min-1
Temperatura final 1ra rampa ............. 140oC mantenida por 1 minuto
2da rampa de calentamiento ............... 1,5C min-1
Temperatura final 2da rampa.............. 250C mantenida por 1 minuto
3ra rampa de calentamiento................ 10C min-1
Temperatura final 3ra rampa .............. 300C mantenida por 5 minuto
Gas transportador .......................................... Helio a ~1,5 mL min-1
Gas secundario (make-up) ......................... Argn/Metano (95:5) a ~40 mL min-1
Tiempo total de corrida ................................. 94.3 minutos

Estas condiciones pueden ser modificadas para mejorar el perfil cromatogrfico si es


necesario.
91

Calibracin del Cromatgrafo

La calibracin del cromatgrafo de gases para el anlisis de plaguicidas debe realizarse


utilizando uno de los mtodos indicados anteriormente (ver Control de calidad, Calibracin
del instrumental). Debido a la reducida linealidad del detector de captura electrnica, es
recomendable calibrar el instrumental utilizando una ecuacin de tipo cuadrtica o
exponencial.
Anlisis cromatogrfico de las muestras

Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe inyectar 1 2 L de hexano (ver: Control de calidad, Blanco
del instrumento) seguido de similar volumen de la disolucin de control de la degradacin
(ver: Control de calidad, Control de la degradacin en el sistema), para comprobar que el
sistema est libre de contaminantes y no se observa degradacin de los compuestos ms
lbiles en el puerto de inyeccin. El anlisis de las muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de
los extractos.

Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Control de degradacin

La disolucin utilizada para comprobar que el sistema no presenta sitios activos que puedan
degradar a los analitos ms lbiles contiene compuestos como el DDT y Aldrin, conocidos
por su fcil degradacin en el puerto de inyeccin bajo ciertas condiciones (ver: Control de
calidad, Control de la degradacin en el sistema). Esta disolucin se prepara pesando las
cantidades apropiadas de los compuestos puros, transferidos cuantitativamente a un matraz
volumtrico, y diluyendo con hexano o disolvente similar no clorado para lograr
concentraciones similares a las intermedias de la curva de calibracin. Esta disolucin debe
contener, en su forma final y lista para utilizar, las cantidades adecuadas de estndares de
recuperacin e internos.
Control de degradacin Paso a paso

El DDT y endrin pueden ser fcilmente degradado en el puerto de inyeccin del cromatgrafo si el
mismo, o el principio de la columna, estn sucios. Esta suciedad resulta de la acumulacin de residuos
de alto punto de ebullicin de muestras analizadas previamente.

Prepare una disolucin de concentracin conocida, y correspondiente a la regin central de la curva de


calibracin, de 4,4-DDT y endrin.

Inyecte 2 L de esta disolucin y analice utilizando el mtodo que va a utilizar para el anlisis de los
extractos de las muestras.
Registre la presencia y cantidades de los productos de degradacin del 4,4-DDT (4,4-DDE y 4,4DDD) y endrin (endrin cetona y endrin aldehido).

92

Calcule el porcentage de degradacin utilizando las siguiente frmulas:

(rea de 4,4'-DDE + rea de 4,4'-DDD)


* 100
% Degradacin de 4,4'-DDT =

(rea de 4,4'-DDT + rea de 4,4'-DDE + rea de 4,4'-DDD)

(rea de endrin cetona + rea de endrin aldehido)


* 100
% Degradacin de endrin =

(rea
de
endrin
+
rea
de
endrin
cetona
+
rea
de
endrin
aldehido)

Si la degradacin de cualquiera de los dos analitos es superior al 15% se necesita corregir el problema
antes de proceder con la calibracin y anlisis de los extractos de las muestras.

Identificacin cualitativa de los analitos de inters

Para identificar un pico como correspondiente a un analito de inters se deben seguir el


criterio discutido anteriormente (ver: Control de calidad, Identificacin cualitativa de
compuestos de inters). La Figura 2 muestra el orden de elucin y respuestas relativas de los
insecticidas clorados, estndares de recuperacin y estndar interno; la concentracin de cada
analito es 100 ng/mL.

Figura 2.

Insecticidas clorados por cromatografa de gases y detector de captura


electrnica.

93

Calibracin inicial, verificacin de la calibracin y determinacin cuantitativa de los


analitos de inters

Debido al comportamiento poco lineal del detector de captura electrnica es conveniente


calibrar el cromatgrafo utilizando un ajuste de curva que se acomode a ese comportamiento.
As, el procedimiento de ajuste de curva mediante ecuaciones cuadrticas o exponenciales
resultan, por lo general, mas robustas que un ajuste de regresin lineal o el uso de factores de
respuestas relativos.
Ecuacin cuadrtica

La curva de calibracin se establece a partir de la informacin adquirida de la inyeccin de los


distintos niveles de calibracin. El ajuste de curva puede realizarse utilizando una ecuacin de
la forma:
Y = b 0 + b1 x + b 2 x 2

donde:

(5)

x
= cantidad del analito de inters en ng
b0, b1, y b2 = coeficientes de la ecuacin cuadrtica. Si la ecuacin es forzada por
cero, entonces b0 = 0
Y
= rea modificada del analito de inters definido como:
A
Y = a
A re

* C re

(6)

donde:

= rea del compuesto


Aa
Are
= rea del estndar de recuperacin
Cre
= masa de estndar de recuperacin en ng
Para aquellos picos cromatogrficos que satisfacen el criterio de identificacin cualitativa
(ver: Control de calidad analtica, Identificacin cualitativa de los compuestos de inters).

Ecuacin exponencial

Como una alternativa a la ecuacin cuadrtica, se puede utilizar una ecuacin exponencial de
la forma:
donde:

Y = A XB

Y
X
A
B

=
=
=
=

(7)

concentracin relativa (razn de concentraciones entre Ca y Cre)


rea relativa (razn de reas entre Aa y Are)
pendiente de la ecuacin
coeficiente exponencial

Calibracin inicial

El criterio de aceptabilidad de la calibracin inicial requiere que el desvo estndar relativo,


expresado como porcentaje, de los factores de respuesta de cada compuesto en las
disoluciones de calibracin sea igual o menor al 15%.
94

Verificacin de la calibracin inicial

La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters

A partir de la informacin adquirida por la inyeccin de los distintos niveles de calibracin, se


calculan los coeficientes que satisfacen la ecuacin de ajuste escogida y se utilizan para los
clculos de concentraciones de los respectivos analitos de inters en las muestras. La solucin
a la ecuacin cuadrtica (5):
x=

b1 + b12 4 b2 (b0 Y )
2 b2

(8)

producir la cantidad de cada analito de inters en el extracto analizado. Para determinar la


concentracin del compuesto en la muestra, se deber dividir el valor encontrado por el peso
de muestra extrado para expresar la concentracin como ng g-1.

En el caso de utilizar una ecuacin de calibracin tipo exponencial (7), la misma se puede
expresar como:
A
Ca
= A a
C re
Are

donde:

Ca
Cre
Aa
Are

=
=
=
=

(9)

concentracin del analito (ng mL-1)


concentracin del estndar de recuperacin utilizado (ng mL-1)
rea del analito que se mide
rea del estndar de recuperacin utilizado

Como Ca y Cre se refieren a las concentraciones del analito y estndar de recuperacin en el


mismo volumen de extracto, ambos pueden ser substituidos por sus cantidades. Reacomodando los trminos de la ecuacin y dividiendo ambos lados de la misma por la
cantidad de muestra extrada, es posible expresar la concentracin del analito de inters como
ng g-1:
[Analito](ng g-1 )

donde:

A
B
Aa
Are

=
=
=
=

A M
= A a * re
Mt
Are
B

pendiente de la ecuacin
coeficiente exponencial
rea del analito que se mide
rea del estndar de recuperacin utilizado
95

(10)

Mre

= cantidad de estndar de recuperacin, en ng, agregado a la muestra


antes de la extraccin
= tamao de muestra, en gramos

Mt

Control de calidad de los clculos

Las concentraciones de los analitos de inters se basan en los factores de respuestas de esos
compuestos en las disoluciones de calibracin. En general, los sistemas cromatogrficos
modernos poseen programas de computadoras que permiten realizar estos clculos de manera
casi automtica. No obstante es importante entender los conceptos que se utilizan en estos
clculos para poder reproducir, en forma manual y como un control de calidad adicional,
algunos de los resultados producidos por el software. Es prudente confirmar las
concentraciones calculadas con clculos independientes. Varias concentraciones
seleccionadas al azar deben ser confirmadas utilizando, por ejemplo, la ecuacin 8 10 segn
sea el tipo de calibracin realizada, en una hoja de clculo comercial (Excel o similar) y
comparadas con los valores reportados. Ambas concentraciones deben coincidir exactamente
excepto por errores de redondeo.
Ejemplo de clculos de concentraciones

La siguiente informacin es recopilada del libro del laboratorio y del impreso del anlisis utilizando el software
del cromatgrafo de gases. Para generalizar el ejemplo, se omiten los nombres del analito, estndar de
recuperacin y estndar interno.
Cdigo de la muestra: ................................................................ F99999
Peso de la muestra: .................................................................... 5.211 g
Masa de estndar de recuperacin adicionado:.......................... 90.8 ng
Volumen final: ........................................................................... 1.0 mL
concentracin de estndar de recuperacin (Cre) ....................... 0,0000908 g mL-1
Coeficientes de la curva de calibracin:
b0 = 0.0000
b1 = 0.4814
b2 = -205.9000
rea del estndar de recuperacin (Asu): ................................... 228.95
rea del analito A (Aa)........................................................... 24.211
Valor calculado por el software.............................................. 3.863 ng g-1

Utilizando la ecuacin:

x=
donde:

b1 + b12 4 b 2 (b 0 Y)

(3)

2 b2

A
Y = a
A re

* C re

(2)

Clculo manual de la concentracin del analito A

24.211
-1
-1
Y =
* 0,0000908 g L = 0,000009602 g L
228.95
[Analito A ] =

0,4814 + 0,4814 2 4 * (205,9) * (0 0,000009602)

[Analito A ] =

2 * (205,9)

= 0,000020119 g L1

0,000020119 g L1 * 1000 ng g 1 * 1000 L mL1


= 3,861 ng g 1
5,211 g

La diferencia porcentual relativa entre la concentracin obtenida mediante el uso del software del cromatgrafo

96

de gas y el calor obtenido manualmente deben coincidir exactamente excepto por errores de redondeo.

(3,863 ng g -1 3,861 ng g -1 )
Diferencia Porcentual Relativa =
* 100 = 0,05%
-1
-1

3,863
ng
g
+
3,861
ng
g

Dilucin de un extracto

Si la respuesta instrumental de un analito excede la respuesta observada para el mismo


compuesto en la disolucin de calibracin ms concentrada, el extracto requiere una dilucin
apropiada. Para obtener una respuesta relativa (e.g. relacin entre respuesta del compuesto y
su estndar de recuperacin) dentro de rango de concentraciones utilizadas para calibrar el
cromatgrafo se procede a un nuevo agregado de estndares de recuperacin antes de reanalizar la muestra.
Dilucin de un extracto Paso a paso

Antes de hacer la dilucin, asegrese que el volumen del extracto original es exactamente 1 mL,
ignorando la cantidad inyectada en el cromatgrafo (i.e., 1 2 L).

Dependiendo de la dilucin requerida, tome el volumen adecuado y exacto del extracto original y
colquelo en un nuevo vial. Por ejemplo, si la muestra necesita ser diluida 10 veces, tome
exactamente 0,100 mL los que se diluirn a aproximadamente 1 mL (ver Tabla a continuacin).
Siembre con 0,100 mL de la disolucin de standards de recuperacin.

Lleve a aproximadamente 1 mL con hexano o disolvente similar no clorado y regrese al


cromatgrafo para su re-inyeccin y anlisis.
El extracto diluido debe ser analizado para determinar solamente la concentracin de aquellos
analitos que exhibieron una concentracin superior al nivel ms alto de calibracin.

Dilucin
Requerida

Volumen de
extracto original

Volumen de disolucin
de estndares de
recuperacin

Volumen de
disolvente(2)

Volumen
final(2)

5 veces
0,200 mL
0,100 mL
~ 0,700 mL
~ 1 mL
10 veces
0,100 mL
0,100 mL
~ 0,800 mL
~ 1 mL
20 veces
0,050 mL(1)
0,100 mL
~ 0,850 mL
~ 1 mL
50 veces
0,020 mL(1)
0,100 mL
~ 0,880 mL
~ 1 mL
100 veces
0,010 mL(1)
0,100 mL
~ 0,890 mL
~ 1 mL
500 veces
0,002 mL(1)
0,100 mL
~ 0,898 mL
~ 1 mL
(1)
es aconsejable realizar una dilucin intermedia.
(2)
al utilizar los estndares de recuperacin para determinar la concentracin de los analitos de
inters se produce una compensacin interna y no es necesario llevar a volumen exacto.

97

Mantenimiento del cromatgrafo de gas y detector de captura electrnica

Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su detector de captura electrnica. A saber:

La jeringa debe ser enjuagada con el disolvente apropiado despus de cada


inyeccin. Esto puede hacerse manualmente o mediante el uso del inyector automtico.

Evite la inyeccin de extractos que contengan restos importantes de disolventes


clorados (e.g., diclorometano) o altos contenidos de azufre (e.g., sedimentos anxicos)

El sello de inyeccin (i.e., septum) deber cambiarse luego de unas cuantas


inyecciones, dependiendo del estado de la aguja de la jeringa, para evitar fugas y
variaciones en los tiempos de retencin.

Un inserto de vidrio nuevo deber instalarse apenas se presenten signos de


degradacin de los compuestos ms lbiles. Incluso, si se observa un incremento
importante en el porcentaje de degradacin de analitos en la disolucin de control de la
degradacin, es conveniente reemplazar el inserto antes de llegar al nivel de accin del
15%.

En ocasiones es necesario reemplazar, junto con el inserto de vidrio, el sello


inferior de la puerta de inyeccin (i.e., gold seal) para evitar degradacin o arrastre de
los picos.

Si luego de reemplazar el inserto y sello an se observa degradacin, arrastre o


disminucin en la respuesta de los analitos de inters, ser necesario remover las primeras
dos vueltas de la columna capilar (extremo conectado a la puerta de inyeccin).

Los tanques de gases de arrastre (helio) y auxiliares (mezcla de argn:metano o


nitrgeno) deben cambiarse antes de que estn vacos para evitar suciedad que pueda
incrementar el ruido de base o contaminar columna y/o detector. En general, es preferible
cambiar el tanque cuando la presin en el mismo cae por debajo de las 500 psi.

Todo mantenimiento que se realice al cromatgrafo de gas o detector de captura


electrnica, incluyendo cambios de tanques de gases, debe ser registrado en un cuaderno o
libro destinado para este fin y dedicado exclusivamente a un solo equipo.

Documentacin

Al momento de recibir las muestras para su anlisis instrumental, el analista debe tambin
recibir, en un folder debidamente identificado, copias de las hojas del laboratorio que
corresponda al lote analtico y en donde se documenta el proceso de las muestras incluyendo
los problemas encontrados, accidentes ocurridos y/o comentarios relevantes (e.g., posibilidad
de doble adicin de estndares de recuperacin, perdidas de muestra por derrames,
evaporacin del extracto a sequedad, etc.). De existir, tambin se debe incluir en el folder la
documentacin de iniciacin o pedido de anlisis donde se identifica la persona responsable
del proyecto que pueda responder ante cualquier duda (e.g., tipo de anlisis a realizar,
cantidad de muestra a extraer, volumen de estndares de recuperacin e internos a sembrar y
reporte final de las concentraciones).
Al realizar el anlisis instrumental, el analista debe agregar a este folder copia de la secuencia
analtica, informacin sobre el blanco del instrumento, disolucin de control de la
degradacin, calibracin del instrumento, impresiones de los cromatogramas y sus anlisis y
copia del reporte finalizado. Este reporte final deber incluir, adems de los resultados de las
muestras analizadas, informacin sobre las muestras de control de calidad (blanco de
98

laboratorio, muestra duplicada, muestra enriquecida y material de referencia) y sus parmetros


(recuperacin de estndares de recuperacin, diferencia porcentual relativa entre originales y
duplicados, recuperacin de analitos de inters en blancos y muestras fortificadas, duplicacin
de resultados certificados para el material de referencia).
Reporte de concentraciones

Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.

99

4.9.2. Determinacin cuantitativa de hidrocarburos alifticos y totales por cromatografa de


gases con detector de ionizacin de llama

Introduccin

Los alcanos normales, de C10 a C35, pristano y fitano, son cuantitativamente determinados
mediante la tcnica de cromatografa de gases asociada a un detector de ionizacin de llama
(GC/FID, por sus siglas en ingls). Esta tcnica es muy sensible y capaz de determinar estos
compuestos contaminantes a niveles trazas (e.g., ng g-1 o pg g-1). El mtodo que se describe es
aplicable a extractos de muestras de sedimentos luego de la limpieza apropiada.
Los hidrocarburos alifticos de inters para este estudio se limitan a:
Hidrocarburos
Alifaticos

n-Decano (n-C10)
n-Undecano (n-C11)
n-Dodecano (n-C12)
n-Tridecano n-(C13)
n-Tetradecano (n-C14)
n-Pentadecano (n-C15)
n-Hexadecano (n-C16)
n-Heptadecano (n-C17)
n-Octadecano (n-C18)
n-Nonadecano (n-C19)

n-Eicosano (n-C20)
n-Heneicosano (n-C21)
n-Docosano (n-C22)
n-Tricosano (n-C23)
n-Tetracosano (n-C24)
n-Pentacosano (n-C25)
n-Hexacosano (n-C26)
n-Heptacosano (n-C27)
n-Octacosano (n-C28)

n-Nonacosano (n-C29)
n-Triacontano (n-C30)
n-Hentriacontano (n-C31)
n-Dotriacontano (n-C32)
n-Tritriacontano (n-C33)
n-Tetratriacontano (n-C34)
n-Pentatriacontano (n-C35)
Pristano
Fitano

Equipamiento y materiales

Cromatgrafo de gases asociado a un detector de ionizacin de llama

El cromatgrafo de gases debe poseer un inyector tipo split/splitless y tener la capacidad de


utilizar una columna capilar en horno de temperatura programable asociada a un detector de
ionizacin de llama. La columna comnmente utilizada para el anlisis de hidrocarburos
alifticos y totales tiene las siguientes caractersticas: columna capilar de 30 m de longitud x
0,25 mm de dimetro interno y una fase liquida DB-5 de 0,25 m de espesor. Otras columnas
similares caractersticas pueden utilizarse. Es conveniente contar con un inyector automtico
con capacidad de realizar inyecciones de 1 a 4 L. El programa utilizado para el anlisis de
plaguicidas por cromatografa de gases y detector de ionizacin de llama es el siguiente:
Temperatura del inyector: ............................. 290C
Temperatura del detector:.............................. 320C
Programa de temperatura del horno:
Temperatura inicial: .......................... 35C mantenida por 1 minuto
1ra rampa de calentamiento................ 8,0C min-1
Temperatura final 1ra rampa ............. 95oC mantenida por 0 minuto
2da rampa de calentamiento ............... 6,0C min-1
Temperatura final 2da rampa.............. 300C mantenida por 9 minuto
3ra rampa de calentamiento................ 15C min-1
Temperatura final 3ra rampa .............. 320C mantenida por 4 minuto
Gas transportador .......................................... Helio a ~2 mL min-1
Gas secundario (make-up) ......................... Helio a ~33 mL min-1
Gases de combustin
Hidrogeno:......................................... ~30 mL min-1
Air: .................................................... ~350 mL min-1
Tiempo total de corrida ................................. 57 minutos
100

Estas condiciones pueden ser modificadas para mejorar el perfil cromatogrfico si es


necesario.
Calibracin del Cromatgrafo

La calibracin del cromatgrafo de gases para el anlisis de hidrocarburos alifticos y totales


debe realizarse utilizando uno de los mtodos indicados anteriormente (ver Control de
calidad, Calibracin del instrumental). Debido al comportamiento estable del detector de
ionizacin de llama y su respuesta lineal, es aconsejable calibrar el instrumental utilizando
factores de respuesta relativos o una regresin de ajuste lineal.
Anlisis cromatogrfico de las muestras

Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe inyectar 1 2 L de hexano (ver: Control de calidad, Blanco
del instrumento) para comprobar que el sistema est libre de contaminantes. El anlisis de las
muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de los extractos.
Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Identificacin cualitativa de los analitos de inters

Para identificar un pico como correspondiente a un analito de inters se deben seguir el


criterio discutido anteriormente (ver: Control de calidad de los anlisis, Identificacin
cualitativa de compuestos de inters). La Figura 3 muestra el orden de elucin y respuestas
relativas de los insecticidas clorados, estndares de recuperacin y estndar interno; la
concentracin de cada analito es 100 ng/mL.

101

Figura 3.

Hidrocarburos alifticos por cromatografa de gases y detector de


ionizacin de llama.

Calibracin inicial, verificacin de la calibracin y determinacin cuantitativa de los


analitos de inters

El detector de ionizacin de llama es estable y presenta un comportamiento lineal por lo que


es posible calibrar el cromatgrafo utilizando un ajuste de regresin lineal o el uso de factores
de respuestas relativos. El factor de respuesta de cada compuesto, relativo a su estndar de
recuperacin, se calcula a partir de la informacin adquirida de la inyeccin de los distintos
niveles de calibracin mediante la siguiente ecuacin:

FRR =

donde:

FFR
Aa
Are
Ca
Csu

=
=
=
=
=

Aa
Ca
A su
C su

A C
FRR = a re
A re C a

factor de respuesta relativo


rea del compuesto
rea del estndar de recuperacin
concentracin del compuesto en ng
concentracin de estndar de recuperacin en ng

102

(11)

Calibracin inicial

El criterio de aceptabilidad de la calibracin inicial requiere que el desvo estndar relativo,


expresado como porcentaje, de los factores de respuesta de cada compuesto en las
disoluciones de calibracin sea igual o menor al 15%.
Verificacin de la calibracin inicial

La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters

A partir de la informacin adquirida por la inyeccin de los distintos niveles de calibracin, se


calcula el factor de respuesta relativo promedio para cada compuesto en las disoluciones de
calibracin. Estos factores de respuesta relativos promedios se utilizaran para los clculos de
concentraciones de los respectivos analitos de inters, mezcla compleja no resuelta. Los
factores de respuesta relativos promedios se calculan como:
1
FRR = *
n

FFR
n

j=1

(12)

donde:

FRR
= factor de respuesta relativo promedio
n
= total de disoluciones de calibracin
j
= numero de disolucin
Para el clculo de concentraciones, basado en estos factores de respuestas relativos:
A a C re
C =
A FRR M
t
re

donde:

C
Aa
Cre
Are

FRR

Mt

=
=
=
=
=
=

concentracin del analito de inters en muestra


rea del compuesto
masa de estndar de recuperacin en ng
rea del estndar de recuperacin
factor de respuesta relativo promedio
tamao de muestra, en gramos

103

(13)

Determinacin de la Mezcla Compleja No Resuelta (MCNR)

Para la determinacin de la concentracin de la MCNR en una muestra se utiliza el factor de


respuesta promedio de todos los alcanos presentes en las disoluciones de calibracin:

A c M re

MCNR =

A
FRR
M
t
re

donde:

MCNR
Ac
Mre
Are

FRR

Mt

(14)

= concentracin de la Mezcla Compleja No Resuelta en muestra


= rea corregida del cromatograma, la cual se define como el rea total
del cromatograma menos el rea que corresponde a la deriva por
temperatura y el rea de todos los picos resueltos, incluyendo los
estndares subrogados e internos aadidos a la muestra
= cantidad de estndar de recuperacin en ng, agregado a la muestra
antes de la extraccin
= rea del estndar de recuperacin
= factor de respuesta relativo promedio
= tamao de muestra, en gramos

Determinacin de hidrocarburos totales

Para la determinacin de la concentracin de hidrocarburos totales en una muestra (Figura 4)


se utiliza el factor de respuesta promedio de todos los alcanos presentes en las disoluciones de
calibracin:

A tc M re

[HcT] =

A
FRR
M
t
re

donde:

[HcT]
Atc
Mre
Are

FRR

Mt

(15)

= concentracin de hidrocarburos totales en muestra


= rea total corregida del cromatograma, la cual se define como el rea
total del cromatograma menos el rea que corresponde a la deriva por
temperatura y el rea de los estndares subrogados e internos
aadidos a la muestra
= masa de estndar de recuperacin en ng, agregado a la muestra antes
de la extraccin
= rea del estndar de recuperacin
= factor de respuesta relativo promedio
= tamao de muestra, en gramos

104

Figura 4.

Hidrocarburos totales por cromatografa de gases y detector de ionizacin


de llama.

Control de calidad de los clculos

El clculo de las concentraciones de los analitos de inters se basa en los factores de


respuestas de esos compuestos en las disoluciones de calibracin. En general, los sistemas
cromatogrficos modernos poseen programas de computadoras que permiten realizar estos
clculos de manera casi automtica. No obstante es importante entender los conceptos que se
utilizan en estos clculos para poder reproducir, en forma manual y como un control de
calidad adicional, algunos de los resultados producidos por el software. Es prudente confirmar
las concentraciones calculadas con clculos independientes. Varias concentraciones
seleccionadas al azar deben ser confirmadas utilizando, en una hoja de clculo comercial
(Excel o similar), ecuaciones acorde a la calibracin y comparadas con los valores reportados.
Ambas concentraciones deben coincidir exactamente excepto por errores de redondeo muestra
(ver Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por cromatografa de gases con
detector de captura electrnica, Control de calidad de los clculos).
Dilucin de un extracto

Si la respuesta instrumental de un analito excede la respuesta observada para el mismo


compuesto en la disolucin de calibracin ms concentrada, el extracto requiere una dilucin
apropiada. Para obtener una respuesta dentro de rango de concentraciones utilizadas para
calibrar el cromatgrafo se procede a un nuevo agregado de estndares de recuperacin antes
de re-analizar la muestra (ver Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por
cromatografa de gases con detector de captura electrnica, Dilucin de un extracto)

105

Mantenimiento del cromatgrafo de gas y detector de ionizacin de llama

Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su detector de ionizacin de llama. A saber:

La jeringa debe ser enjuagada con el disolvente apropiado despus de cada


inyeccin. Esto puede hacerse manualmente o mediante el uso del inyector
automtico.
El sello de inyeccin (i.e., septum) deber cambiarse luego de unas cuantas
inyecciones, dependiendo del estado de la aguja de la jeringa, para evitar fugas y
variaciones en los tiempos de retencin.

Un inserto de vidrio nuevo deber instalarse apenas se presenten signos de


degradacin o arrastre de los analitos de inters. En ocasiones es necesario
reemplazar, junto con el inserto de vidrio, el sello inferior del inyector (i.e., gold
seal).
Si luego de reemplazar el inserto y sello an se observa arrastre o disminucin en
la respuesta de los analitos de inters, ser necesario remover las primeras dos
vueltas de la columna capilar (extremo conectado a la puerta de inyeccin).

Los tanques de gases de arrastre (helio) y auxiliares (mezcla de argn:metano o


nitrgeno) deben cambiarse mucho antes de que estn vacos para evitar suciedad
que pueda incrementar el ruido de base o contaminar columna y/o detector. En
general, es preferible cambiar el tanque cuando la presin en el mismo cae por
debajo de las 500 psi.

Todo mantenimiento que se realice al cromatgrafo de gas o detector de captura


electrnica, incluyendo cambios de tanques de gases, debe ser registrado en un
cuaderno o libro destinado para este fin y dedicado exclusivamente a un solo
equipo.

Documentacin

La documentacin que debe recibir el laboratorio junto a los extractos de las muestras a
analizar, as como la documentacin que el analista debe agregar a la carpeta correspondiente
se discute en la seccin correspondiente al anlisis de plaguicidas clorados (ver
Documentacin).
Reporte de concentraciones

Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.

106

4.9.3. Determinacin de hidrocarburos policclicos aromticos por cromatografa de gases con

detector de espectrometra de masas

Introduccin

Los hidrocarburos policclicos aromticos pueden ser determinados por cromatografa de


gases asociada a espectrometra de masas (GC/MS, por sus siglas en ingls). Esta tcnica es
capaz de determinar estos compuestos contaminantes a niveles trazas (e.g., ng g-1). El mtodo
que se describe es aplicable a extractos de sedimentos luego del tratamiento apropiado. Los
hidrocarburos policclicos aromticos de inters para este estudio se limitan a:
Hidrocarburos
Aromticos
Policclicos

Acenafteno
Acenaftileno
Antraceno
Benzo[a]antraceno
Benzo[a]pireno
Benzo[e]pireno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[k]fluoranteno
Benzo[g,h,i]perileno

Bifenilo
Criseno
Dibenzo[a,h]antraceno
Dibenzotiofeno
Fenantreno
Fluoranteno
Fluoreno
Indeno[1,2,3c,d]pireno

Naftaleno
Perileno
Pireno
1-metil Naftaleno
2-metil Naftaleno
2,6-dimetil Naftaleno
2,3,5-trimetil Naftaleno1-metil
Fenantreno

Equipamiento y materiales
Cromatgrafo de gases asociado a un detector de espectrometra de masas

El cromatgrafo de gases debe poseer un inyector tipo split/splitless y tener la capacidad de


utilizar una columna capilar en horno de temperatura programable asociada a un
espectrmetro de masas. La columna capilar ms utilizada para el anlisis de contaminantes
orgnicos posee una 30 m de longitud x 0,25 mm de dimetro interno y una fase liquida DB5ms de 0,25 m de espesor o similar. Es conveniente contar con un inyector automtico con
capacidad de realizar inyecciones de 1 a 4 L. El programa utilizado para el anlisis de
hidrocarburos aromticos policclicos por cromatografa de gases asociado a un detector de
espectrometra de masas es el siguiente:
Temperatura del inyector: ............................. 300C
Programa de temperatura del horno:
Temperatura inicial: .......................... 60C mantenida por 0 minuto
1ra rampa de calentamiento................ 15C min-1
Temperatura final 1ra rampa .............. 150oC mantenida por 0 minuto
2da rampa de calentamiento ............... 5C min-1
Temperatura final 2da rampa.............. 220C mantenida por 0 minuto
3ra rampa de calentamiento................ 10C min-1
Temperatura final 3ra rampa .............. 300C mantenida por 10 minuto
Gas transportador .......................................... Helio a ~1,0 mL min-1
Tiempo total de corrida ................................. 38 minutos

Estas condiciones pueden ser modificadas para mejorar el perfil cromatogrfico si es


necesario.
Calibracin del Cromatgrafo

La calibracin del cromatgrafo de gases para el anlisis de hidrocarburos policclicos


aromticos debe realizarse utilizando uno de los mtodos indicados anteriormente (ver
107

Control de calidad de los anlisis, Calibracin del instrumental). Debido a la marcada


linealidad del detector de espectrometra de masas, es aconsejable calibrar el instrumental
utilizando factores de respuesta relativos o una regresin de ajuste lineal.
Anlisis cromatogrfico de las muestras

Como se ha mencionado, las muestras dedicadas al control de calidad (e.g., blanco, muestra
en duplicado, muestra enriquecida, y material de referencia) y muestras que componen el lote
analtico son analizadas como una sola secuencia analtica con las disoluciones de calibracin
o de control de la calibracin (ver Control de calidad analtica, Calibracin inicial del
instrumental y Verificacin del mantenimiento de la calibracin inicial). Antes de comenzar
la secuencia analtica, se debe correr un blanco del instrumento para comprobar que el sistema
est libre de contaminantes. El anlisis de las muestras se hace inyectando de 1 a 4 L de los
extractos.
Es importante destacar que las muestras dedicadas al control de calidad dentro de un lote
analtico deben ser evaluadas en conjunto ya que el incumplimiento de los criterios
preestablecidos en una de esas muestras no significa necesariamente el rechazo de todas las
muestras en esa extraccin.
Identificacin cualitativa de los analitos de inters

Para identificar un pico como correspondiente a un analito de inters se deben seguir el


criterio discutido anteriormente (ver: Control de calidad de los anlisis, Identificacin
cualitativa de compuestos de inters). La Figura 5 muestra el orden de elucin y respuesta
relativa de hidrocarburos aromticos policclicos y estndares de recuperacin e interno; la
concentracin de cada analito es 500 y 100 ng/mL, respectivamente.
Adicionalmente, la determinacin de mltiples iones individuales (e.g., ion primario y 1 2
iones de confirmacin; Tabla 2) que presentan una respuesta adecuada y pocas posibilidades
de interferencias se deben ajustar a los siguientes criterios de calidad:

Las masas caractersticas de cada analito deben mostrar su mxima intensidad en


al mismo ciclo de lectura (barrido de espectro) o separados por un ciclo como
mximo.

Las intensidades relativas de los iones seleccionados para el analito de inters


deben corresponder a los valores obtenidos en el mismo GC/MS con una
tolerancia mxima de 20%.

108

Figura 5. Hidrocarburos aromticos policclicos por cromatografa de masas.

109

Tabla 2. Iones de cuantificacin y confirmacin seleccionados para la determinacin de


hidrocarburos aromticos policclicos y estndares correspondientes por espectrometra
de masas
Analito
d8-Naftaleno (Est. de Recuperacin)
Naftaleno
1-metil Naftaleno
2-metil Naftaleno
2,6-dimetil Naftaleno
2,3,5-trimetil Naftaleno
Bifenilo
Acenaftileno
d10-Acenafteno (Est. de Recuperacin)
Acenafteno
d10-Fluoreno (Est. Interno)
Fluoreno
Dibenzotiofeno
d10-Fenantreno (Est. de Recuperacin)
Fenantreno
1-metil Fenantreno
Antraceno
Fluoranteno
Pireno
Benzo[a]antraceno
d12-Criseno (Est. de Recuperacin)
Criseno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[k]fluoranteno
Benzo[e]pireno
d12-Benz(a)pireno (Est. Interno)
Benzo[a]pireno
Perileno
Indeno[1,2,3-c,d]pireno
Dibenzo[a,h]antraceno
Benzo[g,h,i]perileno
1

In de
Cuantificacion
136
128
142
142
156
170
154
152
164
154
176
166
184
188
178
192
178
202
202
228
240
228
252
252
252
264
252
252
276
278
276

In de
Confirmacin

Abundancia Relativa (%)


del In de Confir. 1

134
127
141
141
141
155
153
153
162
153
174
165
152
184
176
191
176
101
101
226
236
226
253
253
253
260
253
253
277
279
277

15
15
80
80
75
95
35
15
95
100
85
95
15
15
20
55
20
15
15
20
30
30
30
30
30
20
30
20
25
25
25

Las Abundancias Relativas son mostradas como referencia nicamente

Calibracin inicial, verificacin de la calibracin y determinacin cuantitativa de los


analitos de inters

El detector de espectrometra de masas es estable y presenta un comportamiento lineal por lo


que es posible calibrar el cromatgrafo utilizando un ajuste de regresin lineal o el uso de
factores de respuestas relativos. El factor de respuesta de cada compuesto, relativo a su
estndar de recuperacin, se calcula a partir de la informacin adquirida de la inyeccin de los
distintos niveles de calibracin mediante la siguiente ecuacin:

FRR =

donde:

FFR

Aa
Ca
A su
C su

= factor de respuesta relativo


110

A C
FRR = a re
A re C a

(16)

Aa
Are
Ca
Csu

= rea del in de cuantificacin correspondiente al compuesto


= rea del in de cuantificacin correspondiente al estndar de
recuperacin
= concentracin del compuesto en ng
= concentracin de estndar de recuperacin en ng

Calibracin inicial

El criterio de aceptabilidad de la calibracin inicial requiere que el desvo estndar relativo,


expresado como porcentaje, de los factores de respuesta de cada compuesto en las
disoluciones de calibracin sea igual o menor al 15%.
Verificacin de la calibracin inicial

La calibracin inicial debe controlarse cada 10-12 muestras o cada 12 horas como mximo
mediante la inyeccin de una disolucin preparada para tal fin o reinyeccin de uno de los
niveles intermedios de las disoluciones de calibracin. Se considera que la calibracin inicial
es an aceptable si las concentraciones determinadas para esta disolucin no difieren ms que
un 25% del valor nominal.
Determinacin cuantitativa de los analitos de inters

A partir de la informacin adquirida por la inyeccin de los distintos niveles de calibracin, se


calcula el factor de respuesta relativo promedio para cada compuesto en las disoluciones de
calibracin. Estos factores de respuesta relativos promedios se utilizaran para los clculos de
concentraciones de los respectivos analitos de inters, mezcla compleja no resuelta. Los
factores de respuesta relativos promedios se calculan como:
1
FRR = *
n

FFR
n

j=1

(17)

donde:

FRR
= factor de respuesta relativo promedio
n
= total de disoluciones de calibracin
j
= numero de disolucin
Para el clculo de concentraciones, basado en estos factores de respuestas relativos:

A a C re
C =
A FRR M
t
re

donde:

C
Aa
Cre
Are
FRR

Mt

=
=
=
=

concentracin del analito de inters en muestra


rea del in de cuantificacin correspondiente al compuesto
masa de estndar de recuperacin en ng
rea del in de cuantificacin correspondiente al estndar de
recuperacin
= factor de respuesta relativo promedio
= tamao de muestra, en gramos

111

(18)

Control de calidad de los clculos

El clculo de las concentraciones de los analitos de inters se basa en los factores de


respuestas de esos compuestos en las disoluciones de calibracin. En general, los sistemas
cromatogrficos modernos poseen programas de computadoras que permiten realizar estos
clculos de manera casi automtica. No obstante es importante entender los conceptos que se
utilizan en estos clculos para poder reproducir, en forma manual y como un control de
calidad adicional, algunos de los resultados producidos por el software. Es prudente confirmar
las concentraciones calculadas con clculos independientes. Varias concentraciones
seleccionadas al azar deben ser confirmadas utilizando, en una hoja de clculo comercial
(Excel o similar), ecuaciones acorde a la calibracin y comparadas con los valores reportados.
Ambas concentraciones deben coincidir exactamente excepto por errores de redondeo (ver
Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por cromatografa de gases con detector
de captura electrnica, Control de calidad de los clculos).
Dilucin de un extracto

Si la respuesta instrumental de un analito excede la respuesta observada para el mismo


compuesto en la disolucin de calibracin ms concentrada, el extracto requiere una dilucin
apropiada. Para obtener una respuesta dentro de rango de concentraciones utilizadas para
calibrar el cromatgrafo se procede a un nuevo agregado de estndares de recuperacin antes
de re-analizar la muestra (ver Determinacin cuantitativa de plaguicidas clorados por
cromatografa de gases con detector de captura electrnica, Dilucin de un extracto)
Mantenimiento del cromatgrafo de gases y detector de espectrometra de masas

Existen varios pasos simples que pueden ayudar a mantener el buen funcionamiento del
cromatgrafo de gas y su espectrmetro de masas. Para el buen mantenimiento del
cromatgrafo de gases se debe:

Enjuagar la jeringa con el disolvente apropiado despus de cada inyeccin. Esto puede
hacerse manualmente o mediante el uso del inyector automtico.

Cambiar el sello de inyeccin (i.e., septum) luego de unas cuantas inyecciones,


dependiendo del estado de la aguja de la jeringa, para evitar fugas y variaciones en los
tiempos de retencin.

Instalar un inserto de vidrio nuevo apenas se presenten signos de degradacin o arrastre


de los de los analitos de inters, especialmente los hidrocarburos aromticos policclicos
ms pesados. Es conveniente utilizar un inserto de vidrio con lana de vidrio en su
interior para favorecer la volatilizacin, y su entrada en columna, de los hidrocarburos
aromticos policclicos ms pesados
En ocasiones, reemplazar, junto con el inserto de vidrio, el sello inferior del inyector
(i.e., gold seal) para evitar degradacin o arrastre de los picos. Si luego de reemplazar el
inserto y sello an se observa degradacin, arrastre o disminucin en la respuesta de los
analitos de inters, ser necesario remover las primeras dos vueltas de la columna
capilar (extremo conectado a la puerta de inyeccin).

Cambiarse el tanque del gas de arrastre (helio) antes de que est vaco para evitar
suciedad que pueda incrementar el ruido de base o contaminar columna y/o detector. En
general, es preferible cambiar el tanque cuando la presin en el mismo cae por debajo de
las 500 psi.

112

Para el buen mantenimiento del detector de espectrometra de masas se debe:

Limpiar la fuente, incluyendo el reemplazo del filamento de emisin, cada vez que sea
necesario.

Renovar el aceite de las bombas de vacio anualmente o ms frecuentemente si es


necesario.
Controlar que no existan prdidas de vacio luego de que se abra y limpie el
espectrmetro de masas.

En general, todo mantenimiento que se realice al cromatgrafo de gas o espectrmetro de


masas, incluyendo cambios de tanques de gases, debe ser registrado en un cuaderno o libro
destinado para este fin y dedicado exclusivamente a un solo equipo.
Documentacin

La documentacin que debe recibir el laboratorio junto a los extractos de las muestras a
analizar, as como la documentacin que el analista debe agregar a la carpeta correspondiente
se discute en la seccin correspondiente al anlisis de plaguicidas clorados (ver
Documentacin).
Reporte de concentraciones

Las concentraciones son generalmente reportadas, con tres decimales, como ng g-1 peso seco.
4.9.4. Preparacin de las disoluciones de siembra (estndares de recuperacin, internos
y enriquecimiento)

Por conveniencia, las disoluciones de los estndares de recuperacin, internos y de siembra se


preparan de manera tal que la concentracin final de los mismos en los extractos de las
muestras y muestras de control de calidad son comparables a los niveles presentes en las
disoluciones de calibracin. En el caso de las muestras enriquecidas, una recuperacin del
100% de los analitos sembrados en dar una respuesta de detector similar al nivel 3 de
calibracin.
Estndares de Recuperacin

Los estndares de recuperacin se agregan a todas las muestras a analizar y de control de


calidad (e.g., blanco, muestra duplicada, blanco enriquecido, muestra enriquecida, muestra
enriquecida en duplicado, material de referencia) antes de su procesamiento por el laboratorio.
El uso de estndares de recuperacin en los clculos permite compensar por prdidas sufridas
durante el procesamiento de la batera de muestras por el laboratorio y es independiente del
volumen final del extracto o volumen del mismo inyectado en el cromatgrafo.
Estndares Internos

Los estndares internos se agregan a todos los extractos a analizar y de control de calidad
(e.g., blanco, muestra duplicada, blanco enriquecido, muestra enriquecida, muestra
enriquecida en duplicado, material de referencia) antes de su anlisis por cromatografa. El
uso de estndares interno permite conocer la magnitud de las prdidas sufridas durante el
procesamiento de la batera de muestras en el laboratorio y es independiente del volumen final
del extracto y volumen del mismo inyectado en el cromatgrafo.
113

Disoluciones de Enriquecimientos de Analitos

Estas disoluciones se usarn para enriquecer aquellas muestras destinadas a evaluar la


recuperacin de los compuestos de inters por el mtodo utilizado sin (e.g., blanco
enriquecido) y con (e.g., muestra enriquecida, muestra enriquecida en duplicado) el efecto del
sedimento que se extrae. La comparacin de muestra enriquecida con su duplicado permite no
slo evaluar la capacidad del laboratorio para recuperar y determinar concentraciones en
presencia de la matriz estudiada sino tambin la habilidad del mismo para reproducir
resultados.

114

PLAGUICIDAS CLORADOS

Estndares de recuperacin (ULTRAScientific, CUS-9738)


Analito

4,4-dibromooctafluorobifenilo
2,2,4,5,6-pentaclorobifenilo (PCB 103)
2,2,3,3,4,5,5,6-octaclorobifenilo (PCB 198)

CAS#

Concentracin

CAS#

Concentracin

CAS#

Concentracin

010386-84-2
060145-21-3
068194-17-2

200,01,0 g/mL
200,01,0 g/mL
200,01,0 g/mL

Estndar interno (~1 gramo de droga slida)


Analito

2,4,5,6-tetracloro-m-xileno (TCMX)

010386-84-2

NA

Plaguicidas clorados (ULTRAScientific, CUS-9736)


Analito

Aldrin
Alpha-clordano
Gamma-clordano
Dieldrin
Endusulfan I
Endosulfan II
Endosulfan sulfato
Endrin
Endrin aldehido
Alpha-HCH
Beta-HCH
Delta-HCH
Gamma-HCH
Heptacloro
Heptacloro epxido
Metoxicloro
Cis-nonaclor
Trans-nonacloro
2,4-DDD
2,4-DDE
2,4-DDT
4,4-DDD
4,4-DDE
4,4-DDT
Endrin cetona

000309-00-2
005103-71-9
005103-74-2
000060-57-1
000959-98-8
033213-65-9
001031-07-8
00072-20-8
007421-93-4
000319-84-6
000319-85-7
000319-86-8
000058-89-9
000076-44-8
001024-57-3
00072-43-5
005103-73-1
039765-80-5
000053-19-0
003424-82-6
000789-02-6
000072-54-8
000072-55-9
000050-29-3
053494-70-5

115

201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL
201,01,0 g/mL

PLAGUICIDAS CLORADOS POR GC/ECD


Disoluciones de Calibracin
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
(a)
(b)
(c)

Volumen de disolucin
de analitos

Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndar interno
solvente
recuperacin
(Slido)
CUS-9736
CUS-9738
(2000 g/mL)
(200 g/mL)
(200 g/mL)
0,050 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
6,450 mL
0,200 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
6,300 mL
4,000 mL (a)
0,050 mL
5,000 mL (c)
90,700 mL
0,800 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
5,700 mL
2,000 mL (a)
1,000 mL (b)
0,500 mL (c)
4,500 mL
Requiere dilucin previa de 1:200 (e.g., 0,050 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:200 (e.g., 0,050 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:1000 (e.g., 0,010 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).

Volumen
Final

10,000 mL
10,000 mL
100,000 mL
10,000 mL
10,000 mL

Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares de recuperacin y estndar interno, en cada solucin
de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5

Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
5
20
40
80
200

Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
100
100
100
100
100

Concentracin del
estndar interno
(ng/mL)
100
100
100
100
100

Note que los niveles de concentracin de las soluciones de calibracin, especialmente el


Nivel 1, dependen del tipo de analito, mtodo y sensibilidad del equipo utilizado por lo que
pueden ser ajustados segn sea necesario.
Disoluciones de Fortificacin (Siembra)

Estas disoluciones de fortificacin o siembra se deben preparar a partir de las soluciones


recibidas. Se recomienda la preparacin, concentracin de fortificacin o siembra y uso de las
distintas disoluciones como sigue:

116

Estndares de recuperacin

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 200 g/mL * 1000 ng/mL * 0,250 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 50 mL

Uso

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 ng/mL * 0,100 mL = 100 ng/mL

1 mL

Estndar interno

[Estndar Interno] (ng/mL) = 2000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,025 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 50 mL

Uso

[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 ng/mL * 0,100 mL = 100 ng/mL

1 mL

Analitos

[Analito] (ng/mL) = 200 g/mL * 1000 ng/mL * 0,100 mL = 400 ng/mL


1 g/mL 50 mL

Uso

[Analito] (ng/mL) = 400 ng/mL * 0,100 mL = 40 ng/mL

117

1 mL

HIDROCARBUROS ALIFATICOS Y TOTALES

Estndares de recuperacin (Absolute Standards # 72056, 72069 y 72072,


rspectivamente)
Analito

n-Dodecano-d26
n-Eicosano-d42
n-Tetracosano-d50

CAS#

Concentracin

CAS#

Concentracin

1000 g/mL
1000 g/mL
1000 g/mL

Estndar interno (Absolute Standards #72065)


Analito

n-Hexadecano-d34

1000 g/mL

Hidrocarburos alifticos (ULTRAScientific Custom Standard)


Analito

CAS#

n-Decano
n-Undecano
n-Dodecano
n-Tridecano
n-Tetradecano
n-Pentadecano
n-Hexadecano
n-Heptadecano
n-Octadecano
n-Nonadecano
n-Eicosano
n-Heneicosano
n-Docosano
n-Tricosano
n-Tetracosano
n-Pentacosano
n-Hexacosano
n-Heptacosano
n-Octacosano
n-Nonacosano
n-Triacontano
n-Hentriacontano
n-Dotriacontano
n-Tritriacontano
n-Tetratriacontano
n-Pentatriacontano
Pristano
Fitano

000124-18-5
001120-21-4
000112-40-3
000629-50-5
000629-59-4
000629-62-9
000544-76-3
000629-78-7
000593-45-3
000629-92-5
000112-95-8
000629-94-7
000629-97-0
000638-67-5
000646-31-1
000629-99-2
000630-01-3
000593-49-7
000630-02-4
000630-03-5
000638-68-6
000630-04-6
000544-85-4
000630-05-7
014167-59-0
000630-07-9
001921-70-6
000638-36-8

118

Concentracin
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL
200 g/mL

HIDROCARBUROS ALIFATICOS Y TOTALES POR GC/FID

Disoluciones de Calibracin
Soluciones
de
Calibracin

Volumen de disolucin
de analitos

Volumen de disolucin de estndares


de recuperacin e interno

Volumen de
solvente

Volumen
Final

(200 g/mL)
(1000 g/mL)
Nivel 1
1,000 mL (a)
0,500 mL (b)
8,500 mL
10,000 mL
Nivel 2
5,000 mL (a)
0,500 mL (b)
4,500 mL
10,000 mL
Nivel 3
0,625 mL
1,250 mL (b)
23,125 mL
25,000 mL
Nivel 4
0,750 mL
0,500 mL (b)
8,500 mL
10,000 mL
Nivel 5
2,000 mL
0,500 mL (b)
7,000 mL
10,000 mL
(a) Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
(b) Requiere dilucin previa de 1:25 de cada una de las soluciones en un mismo matraz (e.g., 0,200 mL de cada disolucin llevados
exactamente a 5 mL).

Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares de recuperacin y estndar interno, en cada solucin
de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5

Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
200
1000
5000
15000
40000

Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000

Concentracin del
estndar interno
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000

Note que los niveles de concentracin de las soluciones de calibracin, especialmente el


Nivel 1, dependen del tipo de analito, mtodo y sensibilidad del equipo utilizado por lo que
pueden ser ajustados segn sea necesario.
Disoluciones de Fortificacin (Siembra)

Estas disoluciones de fortificacin o siembra se deben preparar a partir de las soluciones


recibidas. Se recomienda la preparacin, concentracin de fortificacin o siembra y uso de las
distintas disoluciones como sigue:

119

Estndares de recuperacin

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL

Uso

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 20000 ng/mL * 0,100 mL = 2000 ng/mL

1 mL

Estndar interno

[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL

Uso

[Estndar Interno] (ng/mL) = 20000 ng/mL * 0,100 mL = 2000 ng/mL

1 mL

Analitos

[Analito] (ng/mL) = 200 g/mL * 1000 ng/mL * 1,250 mL = 50000 ng/mL


1 g/mL

5 mL

Uso

[Analito] (ng/mL) = 50000 ng/mL * 0,100 mL = 5000 ng/mL

120

1 mL

HIDROCARBUROS AROMTICOS

Estndares de recuperacin (ULTRAScientific, CUS-9737)


Analito

d8-Naftaleno
d10-Acenafteno
d10-Fenantreno
d12-Criseno

CAS#

Concentracin

CAS#

Concentracin

001146-65-2
015067-26-2
001517-22-2
001719-03-5

10025 g/mL
10005 g/mL
10005 g/mL
10005 g/mL

Estndares internos (ULTRAScientific, CUS-9739)


Analito

d10-Fluoreno
d12-Benz(a)pireno

081103-79-9
063466-71-7

10005 g/mL
10005 g/mL

Hidrocarburos aromticos policclicos (ULTRAScientific, CUS-9735)


Analito

CAS#

Acenafteno
Acenaftileno
Antraceno
Benzo[a]antraceno
Benzo[a]pireno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[e]pireno
Benzo[g,h,i]perileno
Benzo[k]fluoranteno
Bifenilo
Criseno
Dibenzo[a,h]antraceno
Dibenzotiofeno
Fluoranteno
Fluoreno
Indeno[1,2,3-c,d]pireno
Naftaleno
1-metil Naftaleno
2-metil Naftaleno
2,6 dimetil Naftaleno
1,6,7 trimetil Naftaleno
Perileno
Fenantreno
1 metil Fenantreno
Pireno

000083-32-9
000208-96-8
000120-12-7
000056-55-3
000050-32-8
000205-99-2
000192-97-2
000191-24-2
000207-08-9
000092-52-4
000218-01-9
000053-70-3
000132-65-0
000206-44-0
000086-73-7
000193-39-5
000091-20-3
000090-12-0
000091-57-6
000581-42-0
002245-38-7
000198-55-0
000085-01-8
000832-69-9
000129-00-0

121

Concentracin
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL
200810 g/mL

HIDROCARBUROS AROMTICOS POR GC/MS

Disoluciones de Calibracin
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
(a)
(b)

Volumen de disolucin
de analitos

Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndares internos
solvente
recuperacin
CUS-9735
CUS-9737
CUS-9739
(2000 g/mL)
(1000 g/mL)
(1000 g/mL)
(mL)
0,100 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
96,900 mL
0,500 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
96,500 mL
1,250 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
95,750 mL
2,500 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
94,500 mL
5,000 mL (a)
1,000 mL (b)
1,000 mL (b)
92,000 mL
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).

Volumen
Final
(mL)
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL
100,000 mL

Las concentraciones resultantes para los analitos, estndares de recuperacin y estndares


internos, en cada solucin de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5

Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
20
100
250
500
1000

Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
100
100
100
100
100

Concentracin de cada
estndar interno
(ng/mL)
100
100
100
100
100

Note que los niveles de concentracin de las soluciones de calibracin, especialmente el


Nivel 1, dependen del tipo de analito, mtodo y sensibilidad del equipo utilizado por lo que
pueden ser ajustados segn sea necesario.
Disoluciones de Fortificacin (Siembra)

Estas disoluciones de fortificacin o siembra se deben preparar a partir de las soluciones


recibidas. Se recomienda la preparacin, concentracin de fortificacin o siembra y uso de las
distintas disoluciones como sigue:

122

Estndares de recuperacin

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,100 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 100 mL

Uso

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 ng/mL * 0,100 mL = 100 ng/mL

Estndares internos

1 mL

[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,100 mL = 1000 ng/mL
1 g/mL 100 mL

Uso

[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 ng/mL * 0,100 mL = 100 ng/mL

1 mL

Analitos

[Analito] (ng/mL) = 2000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,125 mL = 2500 ng/mL


1 g/mL 100 mL

Uso

[Analito] (ng/mL) = 2500 ng/mL * 0,100 mL = 250 ng/mL

123

1 mL

HIDROCARBUROS AROMTICOS POR GC/FID

Disoluciones de Calibracin
Soluciones de
Calibracin

Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5
(a)
(b)

Volumen de disolucin
de analitos

Volumen de disolucin
Volumen de disolucin
Volumen de
de estndares de
de estndares internos
solvente
recuperacin
CUS-9735
CUS-9737
CUS-9739
(2000 g/mL)
(1000 g/mL)
(1000 g/mL)
(mL)
0,100 mL (a)
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,900 mL
0,500 mL (a)
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,500 mL
0,250 mL
0,200 mL
0,200 mL
99,350 mL
0,100 mL
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,900 mL
0,250 mL
2,000 mL (b)
2,000 mL (b)
7,750 mL
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).
Requiere dilucin previa de 1:100 (e.g., 0,100 mL de disolucin llevados exactamente a 10 mL).

Volumen
Final
(mL)
10,000 mL
10,000 mL
100,000 mL
10,000 mL
10,000 mL

Note que la solucin de calibracin a nivel 3 se prepara en mayor volumen para ser utilizada
cada vez que se requiera controlar la calibracin del cromatgrafo. Las concentraciones
resultantes para los analitos, estndares re recuperacin y estndares internos, en cada
solucin de calibracin, son las que se indican a continuacin:
Soluciones
de
Calibracin
Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5

Concentracin de cada
analito
(ng/mL)
200
1000
5000
20000
50000

Concentracin de cada
estndar de recuperacin
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000

Disoluciones de Fortificacin (Siembra)

Concentracin de cada
estndar internos
(ng/mL)
2000
2000
2000
2000
2000

Estas disoluciones de fortificacin o siembra se deben preparar a partir de las soluciones


recibidas. Se recomienda la preparacin, concentracin de fortificacin o siembra y uso de las
distintas disoluciones como sigue:

124

Estndares de recuperacin

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL

Uso

[Estndar de recuperacin ] (ng/mL) = 20000 ng/mL * 0,100 mL = 2000 ng/mL

1 mL

Estndares internos

[Estndar Interno] (ng/mL) = 1000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,500 mL = 20000 ng/mL
1 g/mL 25 mL

Uso:

[Estndar Interno] (ng/mL) = 20000 ng/mL * 0,100 mL = 2000 ng/mL

1 mL

Analitos

[Analito] (ng/mL) = 2000 g/mL * 1000 ng/mL * 0,250 mL = 50000 ng/mL


1 g/mL 10 mL

Uso

[Analito] (ng/mL) = 50000 ng/mL * 0,100 mL = 5000 ng/mL

125

1 mL

4.9.5. Ejemplos de curva de calibracin y calculos

Esta seccin ejemplifica la obtencin de las curvas de calibracin y uso de las ecuaciones de
clculos. A modo de ejemplo comparativo se muestran los procedimientos a seguir con el
agregado de estndares de recuperacin y cuatro niveles de calibracin (en este caso, el nivel
medio se utiliza como disolucin independiente para controlar la calibracin).
Independientemente del mtodo utilizado para realizar la calibracin del cromatgrafo de
gases, la informacin resultar de la forma:

126

Curva de Calibracin Utilizando el Estndar de Recuperacin

Disolucin de
Calibracin-Nivel 1
Disolucin de
Calibracin-Nivel 2
Disolucin de
Calibracin-Nivel 4
Disolucin de
Calibracin-Nivel 5

rea Analito X

rea Relativa =
rea Est. Rec.

Conc. Analito X
Conc. Relativa =

Conc. Est. Rec.

(5200/1800) = 2,8889

(200 ng mL-1/100 ng mL-1) = 2,000

(2392/2049) = 1,1674

(80 ng mL-1/100 ng mL-1) = 0,800

(442/1469) = 0,3009

(20 ng mL-1/100 ng mL-1) = 0,200

(124/1625) = 0,0763

(5 ng mL-1/100 ng mL-1) = 0,050

Curva de Calibracin

Concentraciones Relativas

2.500
2.000
1.500
1.000
0.500
2

0.000
0.000

R = 1.0000
0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

3.000

Areas Relativas

La curva de calibracin puede corresponder a ecuaciones de distintas formas. Por ejemplo:


donde:

Y = Concentracin Relativa

Y = A XB

X = rea Relativa

A & B = pendiente y coeficiente de la ecuacin, respectivamente

En este ejemplo, los valores de ajuste de curva A y B son 0,6811 y 1,016, respectivamente,
con un R2 de 1,0000.

127

Ecuaciones de Clculo Utilizando el Estndar de Recuperacin


Y = A XB

Conc. Relativa = A * rea Relativa

[Analito] (ng mL )
[Est. Subrogado] (ng mL
-1

-1

(1)

)B

(2)

rea Analito

= A *
rea Est. Subrogado

(3)

Masa Analito (ng)

rea Analito
Volumen (mL)

= A *
Masa Est. Subrogado (ng)
rea Est. Subrogado

Volumen (mL)

(4)

Masa Est. Subrogado (ng)


Masa Analito (ng)
rea Analito
*
= A *

Volumen (mL)
Volumen (mL)

rea Est. Subrogado

(5)

Masa Est. Subrogado (ng)


rea Analito
Volumen (mL)

= A*
*

Peso Muestra (g)


Peso Muestra (g)
rea Est. Subrogado

(mL)
Volumen

Volumen (mL)

(6)

Masa Analito (ng)

Volumen (mL)

Masa Est. Subrogado (ng)


rea Analito
*
= A *

Peso Muestra (g)

rea Est. Subrogado


B

[Analito] (ng g

-1

[Analito] (ng g

-1

peso seco)

Masa Est. Subrogado (ng)


rea Analito
100

*
= A *
*

rea
Est.
Subrogado
Peso
Muestra
(g)
Peso
Seco
(%)

(7)
(8)

Ejemplos de clculos

Considere los siguientes datos de laboratorio


Ejemplo A:

Muestra de
Peso de muestra
Porcentaje de peso seco
Estndar de recuperacin agregado
[Estndar de recuperacin]
Volumen final del extracto
Estndar interno agregado
[Estndar interno]

=
=
=
=
=
=
=
=

sedimento
10,82 gramos de peso hmedo
12,9%
0,100 mL
1000 ng mL-1
~ 1 mL
0,100 mL
1000 ng mL-1

Tomando la informacin de la Curva de Calibracin Utilizando el Estndar de Recuperacin


y el ejemplo A considere el siguiente cromatograma:

128

Analito X

.
E.I.

E.S.

.
rea =

3200

2285

4046

La ecuacin final para el clculo de concentraciones utilizando el estndar de recuperacin,


discutida anteriormente (ecuacin 8), es:

[Analito] (ng g

-1

Masa Est. Subrogado (ng)


rea Analito
100

peso seco) = A *
*

rea Est. Subrogado *


Peso
Muestra
(g)
Peso
Seco
(%)

Reemplazando en la ecuacin:

[Analito] (ng g

-1

peso seco)

4046
= 0,6811*

2285

1,016

100 (ng) 100


*
*
= 87,20 ng/g peso seco
10,82 (g) 12,9

En aquellas muestras donde se presupone una baja concentracin de los analitos de inters, se
puede concentrar el volumen final del extracto anterior a un volumen menor (por ejemplo a
aproximadamente 0,5 mL) para aumentar la seal del cromatgrafo de los mismos. En este
caso se debe ajustar adecuadamente (e.g., disminuir a la mitad) el agregado de estndares de
recuperacin e internos para obtener una respuesta similar a la observada para estos
estndares en los cromatogramas de calibracin y facilitar as una rpida comparacin visual
de la recuperacin, calidad de la inyeccin, etc.:
Ejemplo B:

Muestra de
Peso de muestra
Porcentaje de peso seco
Estndar de recuperacin agregado
[Estndar de recuperacin]
Volumen final del extracto
Estndar interno agregado
[Estndar interno]

=
=
=
=
=
=
=
=

sedimento
10,82 gramos de peso hmedo
12,9%
0,050 mL
1000 ng mL-1
~0,500 mL
0,050 mL
1000 ng mL-1

El siguiente cromatograma corresponde al ejemplo B:

129

Analito X

E.I.

rea =

Reemplazando en ecuacin (8):

[Analito] (ng g

-1

peso seco)

3260

E.S

2340

8012
= 0,6811*

2340

1,016

8012

50 (ng) 100
*
*
= 85,20 ng g -1 peso seco
10,82 (g) 12,9

El procedimiento opuesto debe seguirse si se sospecha de una muestra de concentraciones


altas. Los clculos se realizan de manera similar siempre teniendo en cuenta la cantidad de
estndar de recuperacin agregado al extracto o a la muestra antes de la purificacin o
extraccin y purificacin, respectivamente.
Calculo de recuperacin del estndar de recuperacin usando el estndar interno

La utilizacin de estndares internos permite calcular el recobre de los estndares de


recuperacin y poder evaluar la efectividad del mtodo de laboratorio. Si el agregado de
estndares de recuperacin e internos se hace correctamente, las concentraciones de stos en
el extracto final y en las disoluciones de calibracin sern iguales (i.e., 100 ng mL-1 cada uno)
y la relacin entre ellos se mantendr independientemente del volumen final del extracto. La
razn entre el estndar de recuperacin y el estndar interno en las disoluciones de calibracin
representa una recuperacin ideal del 100%. Un clculo simple utilizando como referencia
cualquiera de esas disoluciones de calibracin, o mejor an, utilizando el promedio de todas
las disoluciones de calibracin nos permite calcular la recuperacin del estndar de
recuperacin en la muestra como se ilustra a continuacin:

Disolucin de Calibracin-Nivel 1
Disolucin de Calibracin-Nivel 2
Disolucin de Calibracin-Nivel 4
Disolucin de Calibracin-Nivel 5
Promedio
Ejemplo A (vol. = 1,0 mL)
Ejemplo B (vol. = 0,5 mL)

rea
Estndar Interno
(E.I.)
2500
2933
2104
2304
3200
3260

130

rea
Estndar de
Recuperacin (E.R.)
1800
2049
1469
1625
2285
2340

Razn
(rea E.R./rea E.I)
0,7200
0,6986
0,6981
0,7053
0,7055
0,7141
0,7178

Recuperacin de Estndar Subrogado (%) =

0,7141
* 100 = 101.21%
0,7055

(Ejemplo A)

Recuperacin de Estndar Subrogado (%) =

0,7178
* 100 = 101,74%
0,7055

(Ejemplo B)

Reporte final de concentraciones

En general, el reporte final debe expresar estas concentraciones, con tres decimales despus
de la coma, en ng g-1 peso seco. Los calificadores que comnmente se utilizan para
caracterizar los datos son:
Tabla 3.

Calificadores de uso comn para caracterizar los datos


Significado

Calificador
ND

No detectado

NA

No aplicable

Interferencia

Q
B
d

EC

=
=

Por debajo del lmite de deteccin del mtodo


Resultado fuera de control
Contaminacin presente en el blanco

Dilucin

Excede el punto mximo de la calibracin

El laboratorio debe poseer un sistema de acciones correctivas que se active ante toda situacin
que afecta la calidad de los datos y no se cumplan los objetivos de precisin y exactitud
detallados en Tabla 4.

131

Tabla 4.

Objetivos de precisin y exactitud de los anlisis

Parmetros de calidad
de los datos

Estndares de recuperacin
Exactitud
Blanco enriquecido
Muestra enriquecida

Precisin
Muestras Duplicadas
Blanco enriquecido en duplicado
Muestra enriquecida en duplicado

Frecuencia

Objetivos a cumplir (a)

En cada muestra

Recuperacin entre el 40-120% de la


cantidad agregada

5 % de las muestras en
la batera analtica
(1:20) (a, b)

Recuperacin entre el 40-120% de la


cantidad agregada

5 % de las muestras en
la batera analtica
(1:20) (a, b)

Diferencia porcentual relativa entre


concentraciones de un mismo analito menor
al 25%

(a) por lo menos uno por batera analtica


(b) puede ser obviado si no se tiene suficiente muestra

Las planillas siguientes son ejemplos de reporte. Note que la informacin que se presenta en
estas planillas (e.g., encabezado y concentraciones que se mencionan) es totalmente ficticia y
slo sirve a los propsitos de ilustrar el reporte que se propone. La primera pgina muestra las
concentraciones de los analitos de estudio para cuatro muestras y sus calificadores
correspondientes. La segunda pgina muestra las concentraciones detectadas en el blanco de
laboratorio y compara la muestra original con su duplicado, incluyendo informacin sobre la
desviacin porcentual relativa entre las concentraciones de ambas. Aquellos analitos que
presentan una diferencia mayor al 25%, por ejemplo el 4,4-DDE, son calificados con una
Q por encontrarse fuera de los lmites deseados. La tercera pgina, da informacin sobre las
concentraciones encontradas en la muestra original y las recuperaciones de los analitos
adicionados a la muestra enriquecida y su duplicado asi como el desvo porcentual relativo
entre las recuperaciones de ambas muestras enriquecidas.
REFERENCIAS

Federal Register (1984). Definition and procedures for the determination of the Method
Detection Limits, 40 CFR (Code of Federal Regulations), Part 136, Appendix B rev. 1.11.

132

3.10. Factores de normalizacin


Ruiz-Fernndez A.C.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
Mxico.
La normalizacin es un proceso que puede reducir la discrepancia entre grupos de datos
tomando en cuenta las diferencias en la distribucin del tamao de grano y la mineraloga
(composicin del sedimento) de las muestras. En la Tabla 1 se presenta una lista de los
factores de normalizacin mas comnmente utilizados.
Las concentraciones tanto de los elementos metlicos como de los contaminantes orgnicos
normalmente covaran con el tamao de grano y el contenido de carbono orgnico en los
sedimentos. Esto es debido, por un lado, a que estos contaminantes muestran una mayor
afinidad por las partculas finas que por la fraccin gruesa; y por el otro, a que la materia
orgnica adems de ser altamente reactiva a estos compuestos, tiende a formar una pelcula
que recubre a las partculas sedimentarias, y al concentrarse en las partculas mas finas, se
convierte en un sustrato con una enorme rea superficial en comparacin con las arenas.

Con el propsito de compensar las variaciones de las concentraciones de los metales,


debidas a cambios en el tamao de grano o en la fraccin mineral de aluminosilicatos
(abundantes en los minerales arcillosos), se recomienda normalizar las concentraciones de los
metales respecto a las de los metales de referencia Al y/o Li. Una de las condiciones para
decidir cul metal de referencia es el mas apropiado para normalizar las concentraciones de
metales, es que exista una correlacin significativa entre el contenido de este elemento de
referencia y la abundancia de alguna fraccin de tamao de grano especfica (i.e. arcillas,
limos, arenas).
Existen varios mtodos de normalizacin utilizando a los metales de referencia; el primero
de ellos consiste en construir una curva de correlacin entre Al Li y la concentracin de
metales, utilizando bandas de confianza al 95% de probabilidad (Loring y Rantala, 1992). Los
valores por fuera de las bandas de confianza representan enriquecimiento anmalo (probable
contaminacin). Otro de los mtodos conlleva la divisin del contenido de los metales entre la
concentracin de Al o Li, con lo cual es posible comparar los niveles de enriquecimiento
respecto a la profundidad (o consecuentemente, respecto al tiempo); sin embargo, se obtiene
un valor adimensional que no es fcil de interpretar. Por tlimo uno de los mtodos mas
utilizados es el clculo del factor de enriquecimiento (FE), como sigue:
FE =

M i+

Ali
+
M bckg

Al
bckg

donde [M+i] y [Ali] representan los valores de la concentracin de metales y de Al (o Li)


respectivamente, en la profundidad i-sima del core; y [M+bckg] y [Albckg] representan las
concentraciones naturales o de referencia de los metales y de Al (o Li) para el sitio de
muestreo.
Dos elementos normalizadores tambin frecuentemente usados son el Fe y el Mn. Un
anlisis de correlacin entre las concentraciones de estos elementos y los metales puede ser
133

til para determinar si el enriquecimiento por metales en las capas superiores del core
sedimentario depende de la formacin de oxi-hidrxidos de Fe y Mn.

Adicionalmente, es tambin posible normalizar las concentraciones de los contaminantes


metlicos a partir de la realizacin de una curva de correlacin entre la concentracin de Corg y
la concentracin de metales, utilizando adems bandas de confianza al 95% de probabilidad.
Los valores por fuera de las bandas de confianza representan enriquecimiento anmalo
(probable contaminacin).

La materia orgnica es uno de los constituyentes mas importantes de los sedimentos debido
a su alta reactividad con componentes orgnicos e inorgnicos, incluyendo el 210Pb y los
contaminantes metlicos; por tanto, la variacin en el contenido de materia orgnica en los
estratos de los cores sedimentarios, puede crear cambios aparentes en los perfiles de 210Pb y
los contaminantes, an cuando el suministro de estos no haya cambiado. La determinacin del
carbono orgnico (Corg) en los sedimentos puede ser til para estimar el contenido de materia
orgnica en los sedimentos y suele utilizar para corregir las concentraciones de 210Pb y los
contaminantes de inters, al calcular las concentraciones libres de materia orgnica como
sigue:
[M+, 210Pb] x (100-%Corg)/100)

Por otro lado, el contenido de Cinorg es generalmente considerado como un diluyente de las
concentraciones de contaminantes como los metales en los sedimentos, por lo cual es
importante evaluar si la aparente disminucin en las tendencias de estos contaminantes se
debe a una disminucin del aporte al sedimento o si se debe en realidad a un incremento en
las concentraciones de Cinorg.
Referencias
UNEP/IOC/IAEA, 1995. Manual for the geochemical analysis of marine Sediments and
suspended particulate matter. Reference methods for Marine Pollution Studies No. 63. United
Nations Environment Programme. 74 pp.
Loring D.H, Rantala R.T.T., 1992, Manual for the geochemical analyses of marine sediments
and suspended particulate matter. Earth-Science Reviews, 32: 235-283.

134

Tabla 1. Factores de normalizacin


Factor

Indicador

Rol

Textura

Tamao de grano
<2000 m
Arenas
2000-63 m
Lodos
<63 m

Arcillas
<2 m
Si
Al

Fe
Sc
Cs
Li

Carbono orgnico

Variacin de tamao de grano de Determina patrones de arreglo y


minerales/compuestos acarreadores depsito de los metales
de metales
Minerales/compuestos de
grueso pobres en metales

tamao Usualmente diluyente de


concentraciones de metales

las

Minerales/compuestos de tamao de Usualmente son los principales


limos y arcillas, acarreadores de concentradores de elementos
metales
metlicos
Minerales arcillosos ricas en metales

Usualmente
metales*

acumulador

de

Qumico

Cantidad y distribucin de cuarzo Diluyente de grano grueso de


pobre en metales
concentraciones de metales

Aluminio silicatos, pero usado para Trazador qumico de aluminocompensar variaciones en tamao de silicatos,
particularmente
en
grano de alumino-silicatos finos minerales arcillosos
(limos y arcillas) ricos en metales
Lodos y arcillas ricos en metales Trazador
para
ricos en minerales de Fe (oxi- arcillosos ricos en Fe
hidxidos)
Sc estructural en arcillas

Cs estructural
feldespastos

en

arcillas

Li estructural en arcillas y micas

Materia orgnica de grano fino

Trazador de minerales arcillosos


concentradores de metales

y Trazador de minerales arcillosos


concentradores de metales

Trazador de minerales arcillosos,


particularmente sedimentos que
contienen
Al-silicatos
de
cualquier tamao

Frecuentemente acumulador de
metales como Hg y Cd

*Excepto en sedimentos derivados de erosin glacial de rocas gneas.


Fuente: UNEP/IOC/IAEA, 1995

135

minerales

PARTICIPANTES EN LA ELABORACIN DEL MANUAL


EDITORES: A.C. Ruiz-Fernndez y J.A. Sanchez-Cabeza
AUTORES:
Nicaragua
Valeria Delgado Quezada William
Vctor Manuel Martnez Herrera

Argentina
Jos Sericano
Cuba
Carlos Manuel Alonso Hernndez
Misael Daz Asencio
Jess Manuel Beltrn Gonzlez

Venezuela
William Senior Galindo
Milena Gonzlez
Fabiola Lpez Monroy
Arstides Mrquez
Ivis Fermin Mieres
Maj Britt Mostue de Crescente
Armando Jos Ramrez Rojas

Espaa
Alberto Quejido
Francia
Jean Michel Fernndez

OIEA-MEL
Joan-Albert Sanchez-Cabeza
Oficial Tcnico del Proyecto RLA7012

Mxico
Ana Carolina Ruiz Fernndez
COMIT CIENTIFICO ASESOR
Argentina
Jos Luis Sericano
Geochemical & Environmental Research
Group (GERG)
Texas A&M University

Mxico
Ana Carolina Ruiz Fernndez
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico, UNAM
Instituto de Ciencias del Mar y Limnolog,
(ICMyL)

Cuba
Carlos Alonso Hernndez
Centro de Estudios Ambientales de
Cienfuegos (CEAC)

OIEA
Jane Gerardo-Abaya
Departamento de Cooperacin Tcnica

Espaa
Alberto Quejido Cabezas
Centro de Investigaciones Energticas,
Medioambientales y Tecnolgicas
(CIEMAT)

Joan-Albert Sanchez-Cabeza
Departmento de Ciencias y Aplicaciones
Nucleares
Laboratorios del Ambiente Marino

136

PARTICIPANTES DEL PROYECTO RLA/7/012


Honduras
Sra. Danelia Sabilln
Secretara de Recursos Naturales y
Ambiente (SERNA)
Centro de Estudios y Control de
Contaminantes (CESCCO)

Colombia
Sr. Jess Garay
Instituto de Investigaciones Marinas y
Costeras (INVEMAR)
Costa Rica
Sr. Alfredo Donald Grant
Junta de Administracin Portuaria y.
Desarrollo Econmica de la Vertiente
Atlntica (JAPDEVA)

Jamaica
Sra. Sheries Simpson
National Environment and Planning
Agency
Projects Planning & Monitoring Branchr

Dra. Elizabeth Carazo Rojas


Centro de Investigacin en Contaminacin
Ambiental (CICA)
Universidad de Costa Rica (UCR)

Mxico
Sra. Ana Carolina Ruiz Fernndez
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico (UNAM)
Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa
(ICML)

Sr. Marco Antonio Sequeira Barquero


Instituto Costarricense de Acueductos y
Alcantarillados (AyA)
Cuba
Sr. Carlos Alonso Hernndez
Centro de Estudios Ambientales
Cienfuegos (CEAC)

Nicaragua
Sr. Vctor Martnez
Centro de Investigacin de los Recursos
Acuticos de Nicaragua (CIRA),
Universidad Nacional Autnoma de
Nicaragua (UNAN).

de

Republica Dominicana
Sr. Ramn Antonio Delanoy
Universidad Autnoma de Santo Domingo

Panam
Sr. Alexis Pea
Autoridad de Recursos Acuticos de
Panam

Guatemala
Sr. Nicols Solares
OBIMAR. Empresa Portuaria Quetzal

Sra. Zuleyka Maynard


Instituto de Investigaciones Cientficas
Avanzadas Servicios de Alta Tecnologa
de Panam (INDICASAT)

Hait
Sr. Exil Lucienna
Ministerio del Ambiente

137