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ASOCIACINUNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA


PRACTICA N. O4
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO MICROBIOLOGIA MEDICA

INTRODUCCION
Son coloraciones especiales que permiten colorear algunas bacterias que no tienen
afinidad con los colorantes de anilina como: las espiroquetas. As como tambin la
coloracin de microorganismos presentes en la sangre.

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MARCO TEORICO
COLORACIN DE VAGO
Es utilizado para la coloracin de grmenes espirilares y espiroquetas, que no se
colorean por el mtodo de Gram, ni por el Ziehl-Neelsen y que se colorean muy
dbilmente con el Leishman
Las espiroquetas son un grupo de bacterias que componen un importante linaje
filogentico. Pertenecen a la clase Schizomycetes, orden Spirochaetales.Fueron descritas
por primera vez por Ehrenberg y consideradas como protozoos hasta el descubrimiento
del microscopio electrnico, que permiti demostrar su peculiar estructura.Tienen forma
de espiral, como un sacacorchos, mviles, autopropulsados por rotacin por endoflagelos.
Se describen tres tipos de movimientos tpicos, giro, movimiento pendular y movimiento
ondulatorio.
Su tamao vara entre 0,1-3 m de dimetro y 5-120 m de longitud. Slo algunas
especies pueden ser cultivadas in vitro, necesitando medios altamente especficos y
complicados para su desarrollo.
La mayora de las espiroquetas son de vida libre o viven como comensales en el tracto
digestivo y la cavidad oral de los animales. Slo unas pocas son patgenas pero tienen
una importante repercusin en la salud.
Las espiroquetas patgenas para el ser humano se agrupan en tres gneros, Treponema,
Borrelia y Leptospira.

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OBJETIVO
El alumno aplicara las tcnicas de coloracin y conocer las diferencias morfolgicas de las
espiroquetas

MATERIALES
Lmina portaobjetos
Palito mondadientes
Solucin fisiolgica al 0.85%
Set de coloracin de Vago:
Mercuro cromo al 2%
Violeta de genciana
Asa de siembra en aro
Microscopio con lentes de 100X
Aceite de inmersin

PROCEDIMIENTO
1. En una lamina colocar una gota de suero fisiolgico al o.85%

2. Con el palito mondadientes obtener una muestra de sarro dentario y realizar un


frotis en capa fina extendiendo en sentido espiral de adentro hacia fuera.

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3. Fijar el frotis al calor suave

4. Cubrir con Mercuro cromo durante 3 minutos

5. Lavar con agua corriente

6. Cubrir el frotis con Violeta de genciana por 3 minutos

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7. Lavar con agua corriente

8. Secar y observar al microscopio con objetivo de inmersin.

RESULTADOS
Coloracin de Vago: Observar Treponema phagadeni, espiroqueta que se encuentra
formando parte de la flora normal de la boca, en forma de espiral y de color violetarosado.

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1. Cubrir con fucsina fenicada el frotis realizado en la lmina y calentar la preparacin con el
mechero de alcohol hasta apreciar el desprendimiento de vapores, repetir este procedimiento
por tres veces, evitando que hierva el colorante.

2. Lavar con agua corriente.

3. Decolorar con alcohol cido hasta que se aprecie una coloracin rosada.

4. Lavar con agua corriente

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5. Cubrir con colorante de contraste: Azul de metileno por un minuto.


6. Lavar con agua corriente

7. Secar y observar con lente de inmersin.

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RESULTADO
Las bacterias cido alcohol resistentes se tien de color rojo y las no cido alcohol
resistentes se tien de color azul

CONCLUSIONES
Mediante esta tincin de fucsina fenicada de ziehl-neelsen,se pone de manifiesto
la existencia de bacterias pertenecientes al gnero Mycobacterium logrando as
identificar un mtodo rpido en el diagnostico presuntivo de infeccin
micobacteriana (bacilo tuberculoso)

CUESTIONARIO
1Qu funcin cumple el aceite de inmersin?
Se sabe que el aire tiene tambin un ndice de difraccin de la luz aunque no muy
considerable. En el microscopio, la luz que sale de la fuente y atraviesa el condensador,
llega al objeto al cual debe iluminarlo a trasluz, para luego recorrer una columna de aire
hasta llegar al lente objetivo. Este ltimo tiene un ndice de difraccin de la luz equivalente
a 1.1515, muy superior al de la columna de aire, lo cual produce una alteracin en la
visualizacin del objeto. El aceite de cedro que tiene un ndice muy parecido al del
objetivo, es colocado desplazando a la columna de aire y resolviendo este problema en
forma aceptable. Slo debe usarse, sin embargo, con el objetivo de inmersin.
2. cmo se realiza el reporte de un proceso de coloracin Bk?
La observacin debe establecer en primer trmino si se encuentran BAAR en el extendido
y si los hay, el nmero aproximado de ellos por campo microscpico.
Cada campo microscpico debe observarse en superficie y profundidad, para esto se
utiliz constantemente el tornillo micromtrico. Los bacilos aparecen como bastoncillos

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delgados de color rojo y con grnulos en su interior, aislados, en pares o agrupados sobre
un fondo azul claro de la tincin de contraste. La contabilidad debe seguir una pauta
uniforme de observacin leyendo de izquierda a derecha del extendido un mnimo de 100
campos tiles distribuidos en el total del extendido.
El criterio a seguir en la baciloscopia es: el nmero de campos vara segn la cantidad de
bacilos encontrados:
1. Si no se encuentran bacilos debe examinarse por lo menos 100 campos tiles.
2. Si se encuentran de 1 a 10 bacilos por campo es suficiente observar 50 campos.
3. Si se encuentran ms de 10 bacilos por campo es suficiente observar 20 campos.
Terminada la observacin de la baciloscopia es requisito que se limpie con algodn el
objetivo de inmersin para evitar que se transporten fragmentos de una baciloscopia a
otra.
INFORME DE RESULTADOS.
Negativo: no se observan BAAR en 100 campos observados.
Positivo +: se observan menos de un bacilo por campo en promedio en 100 campos
observados.
Positivo ++: se observan de 1 a 10 bacilos por campo en promedio en 50 campos
observados.
Positivo +++: Se observan ms de 10 bacilos por campo en promedio en 20 campos
observados.
Es necesario encontrar como mnimo 4 BAAR en la Bac para reportarlo positiva, si se
encuentran de 1 a 3 bacilos esta es la conducta a seguir:
1. Ampliar la lectura a 200 campos.
2. Si lo anterior no modifica la lectura repetir la Bac.
3. Si se encuentra la misma cantidad de bacilos (1 a 3) se reporta como negativo
poniendo una nota en el diario de trabajo sobre lo observado

3-aparte del bacilo de koch que otros microorganismos son considerados como
BAAR?
Adems del Mycobacterium tuberculosis tenemos:
Mycobacterium Bovis
Mycobacterium africanum
Mycobacterium microti

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BIBLIOGRAFIA

Garrido Fara Germn Isauro, Miguel Angel Cornejo Cortes y Elsa Salinas
Jimnez , 2003 Manual de colorantes para laboratorios de Ciencias
biolgicas UNAM Mxico 95 pp.

Forbes, B.A., Sahm D. F. Weissfeld A.S. 1993 Bailey & Scott's Diagnostic
Microbiology. 506 pp

Schlegel, H. G.. 1997. Microbiologa general 9. ed. Barcelona : Omega,


654pp

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