Máster de Nutrición Vegetal

en Cultivos Hortícolas Intensivos

Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

MÓDULO 2: ABSORCIÓN Y TRANSPORTE DE
NUTRIENTES MINERALES
Mª Ángeles Ferrer Ayala
Dpto. Ciencia y Tecnología Agraria. Área Fisiología Vegetal
ETSIA. Universidad Politécnica de Cartagena
Mangeles.Ferrer@upct.es
Índice del módulo segundo:
1.-

Introducción......................................................................................................... 1

2.-

Las raíces como superficies absorbentes ............................................................ 2

3.-

las membranas biológicas ................................................................................... 8

4.-

Transporte pasivo y activo ................................................................................. 10

5.-

Transporte de solutos a través de la membrana ............................................... 16

6.-

Proteínas transportadoras de membrana.......................................................... 27

7.-

Transporte de iones en la raíz ........................................................................... 48

8.-

Absorción foliar de nutrientes........................................................................... 56

9.-

Resumen............................................................................................................. 57

10.-

APÉNDICES ..................................................................................................... 58

11.-

Bibliografía ........................................................................................................ 68

1.-

INTRODUCCIÓN

A excepción del carbono, las plantas terrestres toman los componentes esenciales de sus
tejidos del suelo. Los elementos minerales entran en la biosfera sobre todo a través del
sistema radicular y, en este sentido, las plantas actúan como verdaderos “mineros” de la
corteza terrestre. La absorción mineral de las plantas es un proceso muy efectivo. Ésto
se debe a la capacidad de éstas para absorber iones inorgánicos que se encuentran a
bajas concentraciones y al gran área superficial de las raíces. Después de su absorción,
los elementos minerales son almacenados, metabolizados o transportados vía xilema al
resto de la planta. Otros organismos, como bacterias y hongos también participan, junto
con las raíces, en la adquisición de nutrientes.
Una característica que comparten todas las células vivas es su capacidad para
mantener en su interior iones y moléculas notablemente fuera de equilibrio. En gran
medida, esta propiedad se debe a las características estructurales y funcionales de la
membrana plasmática1. El plasmalema es algo más que una doble capa lipídica
compuesta por distintos fosfolípidos y esteroles: contiene distintos tipos de proteínas,
algunas de ellas con una marcada actividad enzimática, a través de las cuales existe un
continuo tráfico de iones que permite a las células incorporar y acumular nutrientes,

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En las células vegetales la membrana plasmática recibe el nombre de plasmalema

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Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

excluir iones o sustancias tóxicas, o intervenir en distintas respuestas a estímulos
hormonales o medioambientales.
No todos los iones se transportan a través del plasmalema de la misma forma o a
través del mismo tipo de proteína. Algunos son transportados y acumulados en
condiciones cercanas al equilibrio, otros se transportan y se acumulan muy por encima o
muy por debajo de su potencial electroquímico.
En este módulo, hablaremos de las propiedades de las raíces que les permiten
absorber los nutrientes minerales de manera eficaz. A continuación, describiremos las
propiedades de las membranas, los tipos de proteínas transportadoras presentes en el
plasmalema y tonoplasto y, finalmente analizaremos varios aspectos de la absorción
foliar de nutrientes.

2.-

LAS RAÍCES COMO SUPERFICIES ABSORBENTES

El sistema radical tiene que cumplir normalmente una doble misión: la fijación de la
planta al suelo y la absorción de agua y sustancias minerales nutritivas.
Aunque la capacidad de captar nutrientes viene determinada genéticamente, ésta viene
limitada fundamentalmente por la disponibilidad de nutrientes en el suelo. No obstante,
el potencial de las plantas para obtener agua y nutrientes depende también de su
capacidad para desarrollar el sistema radicular, de forma que la raíz en desarrollo
“busque” agua y nutrientes allá donde estén.
El contenido de raíces en el suelo alcanza valores sorprendentes; así p. ej., en 1
m2 de suelo de un prado de Lolium perenne, a una profundidad de 70 cm, la masa
radicular es de 35 kg, la longitud total de la raíz de 55.5 km y la superficie radicular de
50 m2. Hay que tener en cuenta además, que la raíz crece continuamente y su
proliferación depende de la disponibilidad de agua y minerales (sobre todo N y P; ver
Fig. 2.1.A) en el microentorno que rodea a la raíz, la rizosfera. Si existe abundante agua
y nutrientes minerales, la planta desarrolla un sistema radicular pequeño (la raíz
representa en estas condiciones el 20-50% de la biomasa total de la planta). Si escasea el
agua y falta N, el sistema radical que se desarrolla puede representar el 90 % de la
biomasa vegetal (Bloom et al., 1993). Para estudiar las raíces en crecimiento bajo el
suelo se emplean técnicas especiales (ver Apéndice A: Rizotrones).
La forma cilíndrica y filamentosa de las raíces tiene una importancia
determinantes para la absorción de agua y solutos del suelo. Un cilindro posee una
mayor resistencia por unidad de área transversal que otras formas. Esta configuración
junto con la cofía (también denominada caliptra) ayuda a las raíces en crecimiento a
desplazar a un lado las partículas del suelo sin que la raíz se rompa. La forma
filamentosa de las raíces les posibilita explorar un volumen de suelo mucho mayor por
unidad de volumen radical que si fuesen esféricas o discoidales.
Para que la absorción de agua y nutrientes sea máxima las raíces incrementan su
superficie de absorción por mediación de los pelos absorbentes también denominados
radicales. Un pelo radical es una célula epidérmica modificada que posee una
prolongación filamentosa que puede llegar a alcanzar unos 1.5 mm de longitud (ver
Fig. 2.3). Los pelos radiculares son poco longevos (3-9 días) y la zona donde se ubican
los pelos radicales mide sólo 1-2 cm de longitud. A pesar de ello se ha calculado que
una planta desarrollada de centeno presenta más de diez millones de pelos radicales,
cuya longitud total alanza los 10.000 km y cuya superficie total corresponde a un
cuadrado de 20 m de lado. Esto equivale a unas 50 veces la superficie de todo el sistema
caulinar, incluidas las hojas.

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Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

2.1.- LOS SISTEMAS RADICULARES DIFIEREN EN FORMA PERO ESTÁN
BASADOS EN ESTRUCTURAS COMUNES

La forma de los sistemas radicales, al igual que el sistema caulinar, difiere mucho entre
las distintas especies vegetales y depende del hábitat de éstas. En las monocotiledóneas,
el desarrollo de la raíz comienza con la emergencia de tres a seis raíces primarias. A
continuación, aparecen las raíces adventicias, denominadas nodales. Más tarde, las
raíces primarias y nodales se alargan y se ramifican extensivamente formando un
complejo sistema radicular fasciculado (Fig. 2.1.B y C). En el sistema radicular
fasciculado, todas las raíces tienen el mismo diámetro (excepto cuando las condiciones
ambientales o las interacciones con patógenos modifican la estructura radicular), por lo
que es difícil distinguir la raíz primaria. Por el contrario, en dicotiledóneas, el sistema
radicular consta de una raíz principal que puede crecer en grosor como resultado de la
actividad del cambium secundario. De esta raíz principal se desarrollan raíces laterales
que dan lugar a un sistema radicular ramificado (raíz axonomorfa, ver Fig. 2.2).
B. Suelo seco

A

Control

Fosfato

amonio

C. Suelo irrigado

Nitrato

potasio

Figura 2.1. A) Proliferación de raíces de cebada en zonas limitadas de arena fertilizada
con fosfato, nitrato, amonio y potasio. Las porciones delimitadas por barras de los
sistemas radiculares se cultivaron durante 21 días en compartimentos de arena
separados con cera, a través de la cual las raíces pueden crecer pero la solución de
nutrientes no fluye. Las distintas zonas se fertilizaron con una solución de nutrientes
que contenía niveles altos (H) o bajos (L) del nutriente indicado. El control recibió
niveles altos de los elementos en las tres zonas. Malcolm Drew llevó a cabo estos
experimentos en 1975. Este investigador mostró que las raíces crecen preferentemente
en regiones que contienen mayores niveles de nutrientes. De esta forma, se optimizan
los recursos ya que, para la planta desarrollar tanto en zonas de suelo ricas como pobres
en nutrientes un sistema radicular uniforme supondría un “gasto de recursos”
innecesario. B y C) Sistema radicular fasciculado en trigo (monocotiledónea). (A)
Sistema radicular de una planta de trigo adulta (3 meses de edad) crecida en suelo seco.
(B) Sistema radicular de una planta de trigo crecida en suelo irrigado. En el sistema
radicular fasciculado, el eje de la raíz primaria no es distinguible. Obsérvese que la
morfología de la raíz se ve afectada por la cantidad de agua presente en el suelo.
Tomado de Taiz y Zeiger (1998).

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se ha sugerido que podría estar implicada en 1) lubricar la región que va a penetrar la raíz. Figura 2. proceso denominado respuesta gravitrópica. y 4) favorecer la interacción entre la raíz y los microorganismos del suelo. La función precisa del mucigel se desconoce aunque. que rodea normalmente al ápice radicular. Ambas plantas han recibido un suministro adecuado de agua. segrega una substancia gelatinosa denominada mucigel. Sistema radicular de dos dicotiledóneas: remolacha azucarera (A) y alfalfa (B). 4 . El sistema radicular de la remolacha azucarera representado corresponde al de una planta de 5 meses. 2) proteger el ápice de la desecación. en el caso de la remolacha. En la Figura 2. que es la señal que dirige el crecimiento de la raíz. para formar la caliptra.3 se muestra un esquema general de la región apical de una raíz. se observa una raíz principal y.2. En los dos sistemas. 3) promover la transferencia de nutrientes hacia la raíz. y el sistema radicular de la alfalfa es el típico de una planta de 2 años. las células se dividen tanto en dirección basal. Además. La caliptra es primordial en la percepción de la gravedad.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes El desarrollo del sistema radicular tanto de monocotiledóneas como de dicotiledóneas depende de la actividad del meristemo apical radicular. se observa que la porción superior de la raíz principal está engrosada ya que actúa como tejido de almacenamiento. En la zona meristemática. La caliptra protege a las delicadas células meristemáticas durante el movimiento de la raíz por el suelo. para formar células que se diferenciarán en tejidos funcionales de la raíz como en dirección apical.

Sección longitudinal de la región apical de una raíz. las células de la raíz que se encuentran a unos 0. Estas células generan la cofía o caliptra y los tejidos superiores de la raíz. las células se elongan rápidamente y sufren una serie final de divisiones para producir un anillo central de células que se denomina endodermis. esta región se conoce como centro quiescente.5 mm del ápice. el cual transporta metabolitos del tallo a la raíz. y el xilema.7-1. una estructura hidrofóbica que impide el movimiento apoplástico del agua o de solutos hacia el interior de la raíz. En la zona de elongación. aparecen en la zona de maduración. La endodermis divide a la raíz en dos regiones: el córtex hacia el exterior y la estela hacia el interior. por ello. y las células se expanden por igual en todas las direcciones. periciclo Primordio radicular lateral Células corticales epidermis emergencia de una raíz lateral Pelo radicular Zona de maduración Vaso maduro Células endodérmicas diferenciadas Diferenciación de los primeros vasos del xilema Máxima velocidad de elongación celular Zona de elongación Diferenciación de los primeros vasos del floema Cese de la división celular en la mayoría de los tejidos Meristemo apical División celular máxima Centro quiescente Cofia o caliptra Figura 2. La estela contiene los elementos vaculares de la raíz: el floema. En esta zona. la deposición de suberina en las paredes celulares radiales forma la denominada banda de Caspari. (1998).3.4 mm del ápice.1 mm del ápice empiezan a dividirse a mayor velocidad. 1998. las células diferenciadas producen xilema.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Tomado de Taiz y Zeiger. Después de unas pocas divisiones celulares lentas. que transporta agua y solutos hacia el tallo. floema y córtex. La división celular en el “verdadero” ápice de la raíz es relativamente lenta y. 5 . La división celular disminuye otra vez a unos 0. formados en las células epidérmicas. Las paredes celulares de esta capa de células endodérmicas se van a engrosar y. Los pelos radiculares. La zona de elongación empieza a unos 0. Las células meristemáticas se localizan cerca del extremo de la raíz. Tomado de Taiz y Zeiger.

• El potasio. • En maíz y en arroz.3. mientras que otros afirman que los nutrientes se absorben a lo largo de toda la superficie radicular (Nye y Tinker. 1978). nitrato. 2. 1991). 1998). como ocurre en maíz (Karhirad et al. De hecho. • En varias especies. 1972). conviene determinar la zona de entrada de los iones al sistema radicular. 1977. 1998). 1994). los pelos radiculares son los más activos para la absorción del fosfato (Fohse et al. En los últimos años se han llevado a cabo diversos estudios experimentales que apoyan ambas hipótesis dependiendo del ion y de la especie analizados. 6 .Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes El floema se desarrolla antes que el xilema [ver Fig. Los carbohidratos de 6 átomos de carbono (hexosas) funcionan además como compuestos osmóticamente activos en los tejidos de la raíz.. por ejemplo • La absorción radicular del calcio en cebada parece estar restringida solamente a la región apical. Se piensa que la baja velocidad de división celular en el centro quiescente puede deberse a un aporte insuficiente de carbohidratos en esta región. • El hierro puede incorporarse bien por la región apical como en cebada (Clarkson y Sanderson 1978). este proceso es relativamente lento (Bret-Harte y Silk. la elongación celular depende de la acumulación de solutos. el movimiento de los carbohidratos depende de la difusión por el simplasto y. 1973). y es aquí donde el xilema desarrolla la capacidad de transportar grandes cantidades de agua y solutos hacia el tallo. donde el floema no se ha desarrollado. Los pelos radiculares.. Greenwood. el ápice radicular absorbe más rápidamente el amonio que en la zona de elongación (Colmer y Bloom. 2.2. 1990) y para la absorción del nitrato (Colmer y Bloom.. aparecen en la zona de maduración. Algunos investigadores sostienen que los nutrientes se absorben sólo en las regiones apicales de las raíces principales y laterales (Bar-Yosef et al. amonio y fosfato pueden ser absorbidos libremente en cualquier zona de la superficie de la raíz (Clarkson y Sanderson. Los carbohidratos permiten un rápido crecimiento de las células proporcionando energía y los esqueletos carbonados necesarios para la síntesis de compuestos orgánicos.. 1982). Por ejemplo. o bien a lo largo de toda la superficie. pero en maíz es en la zona de elongación donde se observan las mayores velocidades para la acumulación del potasio (Sharp et al. lo que corrobora que la función de éste es crítica cerca del ápice radicular. son necesarias grandes cantidades de carbohidratos para poder mantener las divisiones y las elongaciones celulares en las zonas de crecimiento apical. con su gran superficie para la absorción de agua y solutos. Las elevadas velocidades en la absorción de nutrientes en las zonas apicales de la raíz se deben a la fuerte demanda de nutrientes en esos tejidos y a la relativamente elevada disponibilidad de nutrientes en el suelo que rodea a estas zonas. como el potasio y el nitrato. diferenciación de los vasos del floema (rojo) y xilema (azul)].. En el ápice de la raíz. Así.DIFERENTES ZONAS DE LA RAÍZ ABSORBEN DIFERENTES IONES MINERALES Además del tamaño y ramificación de las raíces.

En el suelo. lo que genera un gradiente de concentración entre la solución del suelo y la raíz. va a ser la velocidad de difusión la que limita el movimiento de los nutrientes hacia la superficie de la raíz. y de la cantidad de nutrientes presentes en la solución del suelo. y el flujo masivo pueden incrementar la disponibilidad de nutrientes en la superficie de la raíz. como de la concentración de dicho nutriente en la superficie próxima a la raíz. la reducción de los nutrientes disminuye conforme nos acercamos a la superficie de la raíz. el flujo masivo juega un papel importante en el proceso de absorción de nutrientes. a favor del gradiente de concentración. nutrient depletion zone). en esta zona. Bajo estas condiciones.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes para incrementar la presión osmótica dentro de la célula. El amonio es la fuente de nitrógeno “preferida” para mantener la división celular en el meristemo debido a que los tejidos meristemáticos sus reservas de carbohidratos son a menudo limitadas y la asimilación de amonio consume menos energía que la de nitrato. la concentración de nutrientes es relativamente elevada. Cuando la velocidad del flujo del agua y la concentración de nutrientes en el suelo son elevadas.4. La cantidad de nutrientes que llega a la raíz por el flujo masivo depende de la velocidad del flujo del agua del suelo a la planta. los nutrientes minerales se mueven de una región de alta concentración de nutrientes a otra región en la que la concentración es menor. 1987). Como se observa en la Figura 2. En la difusión. La difusión de nutrientes. el flujo masivo proporciona sólo una pequeña fracción del total de los nutrientes minerales necesarios para el correcto crecimiento y desarrollo de las plantas (Mengel y Kirkby. Cuando la difusión es demasiado lenta (para mantener cerca de la raíz una zona de alta concentración de nutrientes) se forma una zona de reducción de nutrientes (del inglés. Cuando la absorción de nutrientes por las raíces es elevada y la concentración de los nutrientes en el suelo baja. La concentración de nutrientes en la superficie de la raíz es muy baja. Conviene tener en cuenta que la toma de un nutriente va a depender tanto de la afinidad de los transportadores que facilitan su incorporación a la planta. El ápice de la raíz y los pelos radiculares crecen en suelo no explorado y. 7 . los nutrientes son transportados por el movimiento del agua del suelo hacia la raíz. los nutrientes pueden moverse hacia la superficie de la raíz bien por flujo masivo o por difusión. la cual depende de la velocidad de transpiración. En el flujo masivo.

La formación de esta zona de reducción de nutrientes revela un aspecto muy importante sobre la nutrición mineral. Todas las membranas biológicas tienen una estructura básica común: una doble capa (bicapa) bien de fosfolípidos o. 1998. de la presencia de un patógeno. Además. la membrana debe facilitar y promover el continuo tráfico de iones y moléculas a su través. Esto mismo es válido para las membranas internas que delimitan los diferentes compartimentos celulares presentes en el interior de la célula eucariota. y también de las señales procedentes de células vecinas.1. Unido a este grupo fosfato. Esta zona de reducción se forma cuando la velocidad de incorporación de un nutriente supera la velocidad con la que éste es reemplazado en la solución del suelo.NATURALEZA DE LA MEMBRANA Como hemos comentado en el apartado anterior. Esta reducción provoca una disminución localizada de la concentración del nutriente en el área adyacente a la superficie radicular. A continuación. Tomado de Taiz y Zeiger. Sin crecimiento. en el caso de los cloroplastos de glicosilglicéridos. que en las células vegetales recibe el nombre de plasmalema. la membrana plasmática debe disponer de un control continuo de la velocidad de movimiento de cada uno los distintos solutos (que son muchos) que la atraviesan. Los fosfolípidos son una clase de lípidos formados por dos cadenas de ácidos grasos esterificados a dos de los grupos hidroxilo del glicerol. la membrana debe también actuar como transmisor de las condiciones físicas del entorno. o cuando excreta los productos residuales. Formación de una zona de reducción de nutrientes en la región adyacente a la raíz. en la cual se encuentran embebidas proteínas. Como es el único contacto con el medio externo. La composición de los lípidos y de las proteínas varía en las diferentes membranas.. Una adquisición óptima de nutrientes depende tanto de la capacidad para incorporar los nutrientes minerales del suelo como de la capacidad del sistema radicular para crecer en suelo no explorado. vamos a describir brevemente la naturaleza de las membranas biológicas. se encuentra una 8 . 3. 3. Para llevar a cabo estas tareas. como el que tiene lugar cuando la célula ingiere nutrientes esenciales.- LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS Las células vegetales están separadas del medio que las rodea por una membrana plasmática. de composición relativamente constante de un medio externo con una composición extremadamente variable. El tercer grupo hidroxilo está ligado covalentemente a un grupo fosfato. Debido a que las raíces agotan los minerales de la rizosfera. su efectividad en la obtención de los minerales del suelo viene determinada no sólo por la velocidad de extracción de los minerales de la solución del suelo sino de su continuo crecimiento.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2. El plasmalema separa un medio interno. las raíces rápidamente agotarían los minerales del suelo adyacente a su superficie radicular. lo cual confiere a cada tipo de membranas unas características funcionales únicas.4. la célula está rodeada por una membrana que delimita su extensión y mantiene las diferencias esenciales entre el contenido de la célula y su entorno y permite la existencia de determinados compartimentos en su interior.

etc. ácido linoleico (dos dobles enlaces.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes componente variable. estigmasterol. Este proceso está catalizado por enzimas denominadas desaturasas.. denominada cabeza polar. Los esteroides. y los glicolípidos aunque. 18:1). también son componentes de las membranas vegetales. etanolamina. la cabeza polar. Las cadenas de ácidos grasos de los fosfolípidos y de los glicosilglicéridos pueden tener diferente longitud (normalmente contienen de 14 a 24 carbonos). Las plantas como organismos poiquilotérmicos (organismos que no pueden regular la temperatura de su cuerpo) mantienen la fluidez de sus membranas en condiciones de bajas temperaturas aumentando el porcentaje de ácidos grasos insaturados. o inositol. 18:2) y α-linolénico (tres dobles enlaces. La presencia de un doble enlace cis genera una suave curvatura en la cadena que impide que las moléculas de lípido puedan empaquetarse una contra otra y. como el ácido oleico (un doble enlace. colesterol. Normalmente. La fluidez también depende de la temperatura. Los fosfolípidos son moléculas anfipáticas es decir. una de las colas presenta uno o más dobles enlaces cis (es decir. está insaturada). tienen un extremo hidrofílico. 9 . por lo tanto. 18:3). menos abundantes. colina. afectan a la fluidez de la misma (aumenta la fluidez). las dos colas hidrocarbonadas. y un extremo hidrofóbico. que puede ser un residuo de serina. La fluidez de la membrana juega un papel crucial en la función de ésta. como el sitosterol.

las moléculas grandes tienen un 3 10 . del retículo y otras endomembranas de las células vegetales están constituidas por una bicapa de fosfolípidos en la que se encuentran embebidas proteínas. cs.1. respectivamente. la distancia. Las proteínas periféricas desempeñan diversas funciones en la membrana. Esta cubierta de azúcares. De acuerdo con la ley de Fick la velocidad de transporte o la densidad de flujo (Js). x. la fosfatidilcolina. que pasa a través de una unidad de área por unidad de tiempo es igual al gradiente de concentración multiplicado por una constante de proporcionalidad llamada coeficiente de difusión de la substancia s. la mayoría de las proteínas que quedan al descubierto sobre la superficie celular y algunas de las moléculas lipídicas de la monocapa externa tienen cadenas de oligosacáridos unidos covalentemente. Ds: Js= . (C) Estructura química de un fosfolípido típico. Esta asimetría no sólo se refiere a las proteínas.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2. externa e interna. como los microtúbulos y los microfilamentos de actina. integrales y periféricas. otra parte con la región hidrofóbica de la membrana y una tercera parte con el interior de la célula. Las proteínas periféricas se unen a la superficie de la membrana mediante enlaces no covalentes.5. 4. El coeficiente de difusión es característico de cada substancia (ver Tabla 2. La mayoría de estas proteínas atraviesan la bicapa lipídica de forma que parte de la proteína interactúa con el exterior de la célula. Las proteínas integrales se encuentran embebidas en la bicapa lipídica. tales como puentes de hidrógeno y enlaces iónicos. denominada glicocáliz. de forma activa cuando lo hace en contra de dicha fuerza. y algunas de estas cadenas son reconocidas por proteínas (lectinas) que intervienen en procesos específicos de adhesión célula-célula. algunas están involucradas en las interacciones entre el plasmalema y los componentes del citoesqueleto. Las proteínas asociadas a la bicapa lipídica son de dos tipos. en m y el coeficiente de difusión en m2s-1. s. Las proteínas que forman canales iónicos son siempre proteínas integrales de membrana. esto es. Por ejemplo. en mol m. Además. sino también a los lípidos. Las membranas presentan asimetría. se mueve de forma pasiva si lo hace a favor de la fuerza física que actúa sobre ella y. esto es. (B) Micrografía electrónica en la que se observa la membrana plasmática de células meristemáticas de la raíz de Lepidium sativum. es decir.Ds (δcs/δx) donde el flujo difusivo Js viene expresado en mol m-2 s-1. ayuda a proteger la superficie celular del daño mecánico y químico. para lo cual se requiere energía metabólica. lo que refleja las diferentes funciones de las dos caras de la membrana celular. la cantidad de soluto. decimos que una substancia difunde. Tomado de Taiz y Zeiger (1998).- TRANSPORTE PASIVO Y ACTIVO Las substancias para desplazarse necesitan energía. también denominadas intrínsecas y extrínsecas. (A) La membrana plasmática. el citosol. la concentración. Al microscopio electrónico el plasmalema aparece como dos densas líneas separadas por un espacio claro de un grosor total de 8 nm. existen diferencias entres sus dos mitades.

Valores calculados a 20ºC y una presión de 1 atmósfera 11 .67 x 10-9 1. El signo negativo indica que la difusión se realiza desde la zona de alta concentración hacia la zona de menor concentración. la distancia (x) la combinamos con el coeficiente de difusión en un término denominado resistencia (r).52 x 10-9 1. Ambos son ejemplos de una ley general que puede enunciarse como: El movimiento (flujo) de una substancia es igual a la fuerza impulsora dividida por la resistencia. la cual establece que el flujo de una corriente eléctrica en un conductor es proporcional a la fuerza impulsora.10 x 10-9 0. el voltaje.51 x 105 2.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes coeficiente de difusión bajo).95 x 105 Datos tomados de Nobel (1999) a b Valores calculados para soluciones diluidas a 25ºC. entonces la ecuación anterior puede expresarse como: Js= Δcs/r Así. m s-1: Js= Ps Δcs Tabla 2.2 x 10-9 1. Coeficientes de difusión en soluciones acuosas y en aire Pequeños solutos en aguaa Substancia Dj (m2 s-1) Alanina Citrato Glucosa Glicina Sacarosa Ca2+ (con Cl-) K+ (con Cl-) Na+ (con Cl-) CO2 0. Las unidades de la resistencia son unidades de tiempo por unidad de distancia (s m-1).66 x 10-9 0.1. e inversamente proporcional a la resistencia opuesta por el conductor. depende del medio (por ejemplo.5 x 10-9 1. En lugar de la resistencia podemos encontrar en la bibliografía la permeabilidad (Ps).7 x 10-9 Proteínas globulares en aguaa Masa (kDa) 15 1000 molecular Dj (m2 s-1) 1 x 1010 1 x 1011 Gases en aireb Gas CO2 H2O O2 Dj (m2 s-1) 1. Esta ecuación es análoga a la ley de Ohm. El gradiente de concentración (δcs/δx) es aproximadamente Δcs/Δx es decir. la diferencia de concentración de la substancia s (Δcs) entre dos puntos separados por la distancia Δx.9 x 10-9 1. de esta forma se puede visualizar fácilmente que el flujo difusivo es proporcional a la magnitud de la fuerza impulsora Δcs e inversamente proporcional a la resistencia.92 x 10-9 0. La permeabilidad es el recíproco de la resistencia (Ps= 1/r) y sus unidades son unidades de distancia por unidad de tiempo. la difusión en el aire es más rápida que en medio líquido) y no es una constante ya que varía con la concentración y con la temperatura. Si expresamos la diferencia de concentraciones como Δcs (que es la fuerza impulsora de la difusión) y.42 x 105 1. r.

Conviene tener en cuenta que el movimiento de moléculas por difusión es siempre espontáneo. los campos eléctricos y la gravedad. aunque esta última rara vez contribuye al transporte.5 s 10-9 m2 s-1 Este cálculo muestra que una pequeña molécula difunde rápidamente distancias de dimensiones celulares. Estos ejemplos numéricos ponen de manifiesto que el proceso de difusión puede ser efectivo dentro de las dimensiones celulares pero. a favor de un gradiente de concentración o de un gradiente electroquímico hasta que se alcance el equilibrio. Así. Para determinar el significado de esta expresión vamos a considerar dos ejemplos numéricos. ¿cuánto tiempo tarda una pequeña substancia en difundir la distancia equivalente al eje mayor de una célula eucariota típica? El coeficiente de difusión de un soluto pequeño. no se produce movimiento neto de solutos. a menudo. En el transporte en sistemas biológicos puede intervenir además otras fuerzas como la presión hidrostática. como la glucosa. ¿qué ocurre con la difusión a mayores distancias? Podemos calcular el tiempo necesario para que esa misma molécula se mueva una distancia de 1 m (que es por ejemplo. Pero. a menos que se le aplique una fuerza. El transporte activo no es espontáneo y requiere energía metabólica y una forma de llevarlo a cabo es acoplándolo a la hidrólisis del ATP. Primero. que es solo de unos pocos meses. es función de la diferencia de concentración. Esta ecuación muestra que el tiempo requerido para que una substancia difunda una cierta distancia aumenta en relación con el cuadrado de la distancia. tendríamos: tc= ½ = (50 x 10-6 m)2 = 2. la longitud de una hoja de maíz). es aproximadamente 10-9 m2 s-1.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes A partir de la ley de Fick se obtiene una expresión que nos permite calcular el tiempo necesario para que una proporción de moléculas difundan a una cierta distancia a partir de su posición de origen. En el equilibrio. es demasiado lento para el transporte de sustancias a largas distancias. El movimiento de moléculas a favor de gradiente se denomina transporte pasivo. 12 . y obtendríamos: tc= ½ = (1 m)2 = 109s ≈ 32 años 10-9 m2 s-1 un valor que excede en varios órdenes de magnitud la vida media de una planta de maíz. y el tamaño de una célula unos 50 µm. Por ejemplo. Para calcular la fuerza que determina el movimiento pasivo de una substancia o la energía necesaria para mover una substancia en contra de gradiente es necesario medir el gradiente de energía que. El movimiento de substancias en contra de su gradiente electroquímico se denomina transporte activo. el tiempo para que difunda la mitad de una población inicial de moléculas (tc = ½) a una distancia concreta viene dado por la siguiente ecuación: tc= ½ = (distancia)2 K Ds donde K es una constante que depende de la forma del sistema (para facilitar los cálculos posteriores utilizaremos un valor de K= 1) y Ds es el coeficiente de difusión.

expresa la contribución del volumen molar parcial de j (Vj) y la presión (P) al potencial químico de j. j μj* + RT ln Cj + Potencial Concentración químico de (actividad) j bajo condiciones estándar zj FE + Vj P Componente potencial eléctrico Componente presión hidrostática Donde: μj es el potencial químico del soluto j en julios por mol (J mol –1). en soluciones muy diluidas la actividad es aproximadamente igual a la concentración (mol vol-1) de j. la componente eléctrica que se aplica sólo a iones en disolución. zj FE . El potencial químico del agua (es decir.5 J mol –1 mV –1) y E es el potencial eléctrico del sistema. Cj es la concentración (sería más apropiado utilizar en la ecuación la actividad del soluto. -1 para aniones monovalentes. (El volumen parcial molal de j es el cambio en volumen por mol de substancia j añadida al sistema. es un factor de corrección que eliminaremos en las futuras ecuaciones y puede por tanto ignorarse). excepto en el movimiento del agua por ósmosis.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes La suma de estos componentes se denomina potencial químico y cuantifica la capacidad de trabajo que un soluto posee. El potencial químico se define como la suma de los potenciales de concentración. etc. +2 para cationes divalentes. R es la constante universal de los gases (8. T es la temperatura absoluta en grados kelvins.). F es la constante de Faraday (96.314 J mol –1 K –1). z es la carga electrostática del ion (+1 para cationes monovalentes. y el potencial químico en condiciones estándar: μj = Potencial químico para un soluto dado. VjP. para una adición infinitesimal). 13 . μj* es el potencial químico en condiciones estándar (C=1 y E= 0. Este término contribuye en menor medida al potencial químico que los términos relacionados con la concentración y con la componente eléctrica. y el último término. el potencial hídrico) depende de la concentración de solutos disueltos y de la presión hidrostática del sistema. eléctrico e hidrostático .

la reacción debe estar acoplada con un proceso que disminuya su energía libre y que sea más negativo que – (μjB . para una adición infinitesimal en condiciones constantes. En general. La importancia del concepto de potencial químico es que incluye la suma todas las fuerzas que pueden actuar sobre una molécula para dirigir el transporte neto. permite considerar la contribución de una substancia individual (en nuestro caso j) a la energía libre del sistema. Relación entre el potencial químico. la difusión (transporte pasivo) siempre provoca el desplazamiento de substancias desde zonas de mayor potencial químico a 14 . El movimiento neto del soluto j entre los compartimentos A y B depende de la magnitud relativa del potencial químico de j en cada compartimento. μj. representado aquí por la altura de las barras.μjA.6. el movimiento en contra de dicho gradiente requiere energía y se denomina transporte activo.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Membrana Semipermeable Potencial químico en el compartimento A μj A Potencial químico en el compartimento B μj B Descripción Transporte pasivo (difusión) ocurre espontáneamente a favor del gradiente de potencial químico μjA > μjB μj A μj B En el equilibrio no hay movimiento neto μjA = μjB Transporte activo tiene lugar en contra del gradiente químico μj A μj B μjA < μjB ΔG para el movimiento de j de A a B es igual al μjB . y Δμj es la contribución de un soluto j al total del cambio de la energía libre (ΔG) al sistema. El escribir la ecuación en términos de potencial químico. μ. El término μ puede describirse como la energía libre parcial molal de un soluto j: representa el aumento en energía libre por mol de j añadido. y el transporte de moléculas a través de una barrera semipermeable. Para que el conjunto tenga un ΔG negativo.μjA ) Figura 2. El movimiento a favor del gradiente de potencial químico ocurre espontáneamente.

Si tomamos como ejemplo la difusión a través de la membrana de un soluto no cargado como la sacarosa. para determinar el gradiente de potencial químico necesario para transportar 1 mol de sacarosa de un compartimento en que se encuentra a una concentración de 10-1 M a otro de concentración diez veces menor. Así.01/0. además. Así para la difusión del potasio tendremos que: ΔμK+ = μK+i . Así. el potencial químico de la sacarosa en un sistema presenta sólo una componente: la debida a la concentración.μse = (μs* + RT ln C si ) .son permeables. hay que tener en cuenta.5. Tomemos a modo de ejemplo una sal.(μs* + RT ln C se) = RT (ln Csi. el potencial químico de la sacarosa por ejemplo dentro de la célula (compartimento “i”) se puede expresar: μsi Potencial químico de la sacarosa dentro de la célula μs* = + Potencial químico de la sacarosa en condiciones estándar RT ln C si Concentración (actividad) El potencial químico de la sacarosa fuera de la célula (compartimento “e”) sería: μse = μs* + RT ln C se La fuerza que determina el movimiento de la sacarosa entre los dos compartimentos viene dada por el gradiente de potencial químico.μK+e 15 .Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes zonas de menor potencial.314 (J mol –1 K –1) x 298 (K) x 2. cada uno tiene su propio potencial químico. La fuerza impulsora para la difusión del soluto está relacionada con la magnitud del gradiente de concentración.1)= . a 25ºC. el cloruro potásico y supongamos que tanto K+ y Cl.ln Cse) = RT ln Csi/Cse Si la diferencia en el potencial químico es negativa. El movimiento en contra del gradiente químico es indicativo de un transporte activo (Fig. sería: Δ μs Δ μs = RT ln Csi/Cse = RT x 2.303 log 10 Csi/Cse = 8.6). la componente del potencial eléctrico. Es frecuente encontrar la ecuación escrita con logaritmos decimales para facilitar los cálculos. indica que el proceso puede ocurrir espontáneamente (la membrana presenta una permeabilidad finita al soluto).706 kJ mol –1 Pero. Δ μs = μsi . si la molécula que queremos transportar posee carga eléctrica. 2. Como estos iones difunden independientemente.303 log 10 (0.

el valor de la permeabilidad (Ps) puede determinarse empíricamente siempre que el flujo de una substancia pueda medirse y las concentraciones interna y externa sean conocidas. depende de la composición de la membrana y de la naturaleza química del soluto.- TRANSPORTE DE IONES A TRAVÉS DE LA MEMBRANA En el movimiento de K+ Cl. La membrana puede permitir o restringir el movimiento de una substancia a su través. Esta ecuación pone de manifiesto que los iones. 2. como la capacidad de un soluto para penetrar en la membrana. ΔμK+ = RT ln (C K+i /C K+e) + F(Ei. Como hemos dicho.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes = RT ln (C K+i /C K+e) + z K+ F(Ei. El equilibrio se produce cuando Δ μj =0. en este caso recordemos que zCl. la permeabilidad se puede expresar en términos de coeficiente de difusión del soluto en la membrana.pero. que son difíciles de medir. como analizaremos. z=+1 tendremos. Debido a la importancia del campo eléctrico en el transporte en el transporte biológico. 16 . Sin embargo. como el potasio.Ee). de modo que las concentraciones en las proximidades de la membrana son inciertas. Esta propiedad se conoce como permeabilidad de la membrana. m s-1). habrá una capa límite en la cual la concentración varía con la distancia a la membrana (Fig.Ee) y como la carga electrostática del K+ es +1. sin embargo. 5. ya que la capa estará localizada dentro de la pared celular.7). La permeabilidad. Cerca de la membrana. difunde tanto en respuesta a su gradiente de concentración (C K+i /C K+e) como a la diferencia de potencial eléctrico entre los dos compartimentos (Ei. A pesar de la complejidad teórica. que añade un factor al movimiento de iones. Generalmente la membrana retrasará la difusión y reducirá la velocidad a la que se alcanza el equilibrio. En un sentido amplio. μ con frecuencia se denomina potencial electroquímico y Δμ es la diferencia de potencial electroquímico entre dos compartimentos.= -1. no puede alterar las condiciones finales de equilibrio. sólo es posible medirlos en la solución de cualquiera de los dos lados de la misma. la permeabilidad depende de otros factores adicionales. donde la agitación no es posible.entre dos compartimentos hay que tener en cuanta que están separados por una membrana biológica. El principal problema en la estimación de la permeabilidad es la obtención de los valores de concentración en las proximidades de la membrana. Esta capa límite no puede eliminarse mediante una agitación de la solución sobre todo cuando se trabaja con células vegetales. Una expresión similar se puede obtener para el anión Cl. la permeabilidad puede ser medida determinado la velocidad a la que un soluto atraviesa una membrana bajo unas condiciones específicas (las unidades de la permeabilidad son unidades de distancia por unidad de tiempo por ejemplo. Esto implica que los iones pueden ser conducidos pasivamente en contra se su gradiente de concentración si se aplica el voltaje adecuado (campo eléctrico) entre los dos compartimentos. ya que. La permeabilidad o resistencia de la membrana por sí misma.Ee) La magnitud y el signo de esa expresión determinan la fuerza motora de la difusión del K+ a través de la membrana y su sentio.

8) más rápidamente que el Cl-. Así. El resultado será una ligera separación de cargas. La presencia de capas no agitadas cerca de las membranas impide determinar la concentración de los solutos en la superficie de la membrana. Figura 2. las membranas biológicas son más permeables al K+ que al Cl-). En las células vegetales.8. 2. El potencial de membrana que aparece como resultado de la difusión se denomina potencial de difusión. 1997. Los iones K+ y Clatravesarán la membrana de forma independiente (por separado).Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes A continuación describiremos los factores que influyen en la distribución de iones a través de la membrana. los verdaderos gradientes a través de la membrana no pueden calcularse.1..8). 2. difundiendo a favor de sus respectivos gradientes de potencial electroquímico. a menos que la membrana sea muy porosa. Tomado de Flowers y Yeo. Consideremos que las dos disoluciones de KCl están separadas por una membrana como ocurre en la Figura 2. pueden generar un potencial eléctrico de membrana (voltaje). que generarán un potencial electroquímico a través de la membrana (ver Fig.7. 17 .difundirán inicialmente a través de la membrana en proporciones diferentes (de hecho. Capas límite. por tanto. Como consecuencia de estas permeabilidades diferentes. el K+ y el Cl. las permeabilidades de los dos iones serán diferentes.EL POTENCIAL DE DIFUSIÓN SE DESARROLLA CUANDO IONES DE DISTINTA CARGA SE MUEVEN A TRAVÉS DE LA MEMBRANA A DIFERENTE VELOCIDAD Cuando las sales difunden a través de una membrana. pues el K+ difundirá desde la célula (compartimento A fig. ya que su espesor aumenta debido a la presencia de la pared celular. provocando la aparición de un potencial eléctrico negativo con respecto al medio. Y. la concentración real de solutos es inferior a la medida. las capas no agitadas son particularmente importantes. 5. Estos parámetros pueden utilizarse para predecir la relación entre el gradiente eléctrico y el gradiente de concentración de un ion.

los iones potasio y cloro difundirán a mayor velocidad hacia el compartimento B y. un potencial de membrana de –100 18 . La existencia de un potencial de membrana implica que hay una distribución desigual de cargas a través de la membrana. 1998. Las soluciones siempre contienen el mismo número de aniones que de cationes. Si la concentración de cloruro potásico es mayor en el compartimento A ([KCl]A > [KCl]B). Por ejemplo. Tomado de Taiz y Zeiger. Como las membranas son más permeables al potasio que al cloro.8. los iones potasio difundirán más rápidamente que los iones de cloro y tendrá lugar una separación de cargas (+ y -).Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Condiciones iniciales [KCl]A>[KCl]B El potencial de difusión persiste hasta que se alcance equilibrio Condiciones de equilibrio: [KCl]A = [KCl]B En el equilibrio. no obstante el número real de iones desequilibrados es despreciable en términos químicos. Desarrollo del potencial de difusión y separación de cargas entre dos compartimentos separados por una membrana que presenta mayor permeabilidad para los cationes. el potencial de difusión es igual a cero Figura 2. Un principio importante que debemos tener presente cuando estudiamos el movimiento de iones a través de la membrana es el principio de la neutralidad eléctrica. se establecerá un potencial de difusión.

Sin embargo. la cantidad de soluto que atraviesa una unidad de área de membrana por unidad de tiempo).2. no hay ningún desequilibrio de cargas en toda la masa celular. como el K+ se mueve más rápidamente que el Cl. pero el potencial de difusión se mantiene y puede medirse. la difusión de los iones K+ transportaría cargas a través de la membrana hasta que el potencial de membrana equilibrara el gradiente de concentración. es decir.a través de la membrana. el flujo pasivo.001%. 5. Finalmente.LA ECUACIÓN DE NERNST RELACIONA EL POTENCIAL DE MEMBRANA Y LA DISTRIBUCIÓN DE UN ION EN EL EQUILIBRIO Como la membrana es permeable tanto a los iones K+ como a los iones Cl-.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes mV (milivoltios).000 en el interior de la célula. el gradiente de concentración desaparece y el potencial de difusión también. es debido a la presencia de un único anión extra en el exterior de la célula por cada 100. así en el equilibrio también serán iguales los potenciales electroquímicos del interior y el exterior de la célula: μji = μje y para cualquier ion (simbolizado por el subíndice j): μj* + RT ln Cje + zj FEe = μj* + RT ln Cji + zj FEi Agrupando los términos. se obtiene que la diferencia en el potencial eléctrico entre los dos compartimentos en el equilibrio es: Ei. En nuestro ejemplo de difusión del KCl. es el mismo en ambas direcciones. la neutralidad eléctrica se mantiene porque. El transporte estaría entonces en equilibrio. Dado que para producirse un cambio en el potencial se requieren muy pocos iones.Ee = RT (ln Cje/ Cji) 19 . el potencial de difusión resultante retarda el movimiento del K+ y acelera el del Cl-. Cuando la distribución de cualquier soluto a través de la membrana alcanza el equilibrio. una diferencia de concentración de sólo el 0. Cuando el sistema se aproxime al equilibrio. como el que se encuentra en membranas de muchas células vegetales. todos estos aniones extra se encuentran inmediatamente adyacentes a la superficie de la membrana. en el ejemplo anterior no se alcanzará el equilibrio para ningún ion hasta que los gradientes de concentraciones se reduzcan a cero.. si la membrana fuera permeable sólo a los iones K+ . J (por ejemplo. ambos iones difunden en la misma proporción. este equilibrio se alcanza casi instantáneamente. Como se observa en la Figura 2. desde el exterior al interior y desde el interior al exterior: Je→i = J i→e Los flujos están relacionados con Δμ.8. incluso aunque el gradiente de concentraciones no hubiera cambiado.

El citosol contiene un gran número de cargas fijas. log 10 –1= -1). esta ecuación permite. Cji = 10 x Cje). que un potencial de membrana de -59 mV mantendría un gradiente de concentración de diez veces de un ion que fuera transportado por difusión pasiva (es decir.303 nos da 59 mV.3 RT (log Cje/ Cji) z jF Esta relación. ácidos nucleicos. Además. que no difunden. Conviene recordar que el interior de la célula es negativo con respecto al exterior. Es decir. calcular el potencial con el cual el ion estará en equilibrio.7 mV y. Hay que destacar que una diferencia en las concentraciones de 10 veces para un catión monovalente corresponde a un potencial de Nersnt de -59 mV (Ce/ Ci = 1/10. luego tendríamos: ΔEn = 59 (log Cje/ Cji) donde ΔEn viene expresado en mV. que mediante un transporte pasivo la concentración de un ion monovalente en el interior de la célula es 10 veces superior a la concentración de ese mismo ion en el exterior. etc. las células bombean de forma activa diversos cationes como H+. multiplicado por 2. a partir de una simetría en la concentración. como los grupos amino (NH4+) y carboxilo (-COO-) de macromoléculas como proteínas. Todo esto hace que en el citosol predominen las cargas negativas y que en las paredes celulares se acumulen cationes. La ecuación de Nernst puede simplificarse a 25ºC y para un catión monovalente de la siguiente forma: RT/zF vale 25. conocida como ecuación de Nernst. Ca2+ y Na+ al apoplasto. Todas las células muestran un potencial de membrana que es debido a la distribución asimétrica de los iones entre el interior y el exterior de la célula. 20 . De la misma forma.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes z jF Esta diferencia en el potencial eléctrico se conoce como potencial de Nernst (ΔEn) para un ion: ΔEn = Ei – Ee y ΔEn = RT (ln Cje/ Cji) z jF o ΔEn = 2. pone de manifiesto que en el equilibrio la diferencia de concentraciones de un ion entre dos compartimentos está equilibrada por la diferencia de voltaje entre los dos compartimentos.

Uno de los microelectrodos se inserta en la célula (normalmente en la vacuola o en el citoplasma) a estudiar.LA ECUACIÓN DE NERNST PUEDE USARSE PARA DISTINGUIR ENTRE TRANSPORTE ACTIVO Y PASIVO La ecuación de Nernst puede utilizarse en todo momento para calcular si un ion dado se encuentra en equilibrio y. determinados experimentalmente. Diagrama de un par de microelectrodos usados para determinar el potencial de membrana.3.. El microelectrodo se conecta a un voltímetro. realizada en raíces de guisante por Higinbotham et al. 5. 2. veamos a continuación un ejemplo. obtenidos mediante la ecuación de Nernst. Tomado de Taiz y Zeiger. Todos los iones se encuentran en el interior de las células a mayor concentración que en el medio externo. se utiliza para determinar si un ion ha sido transportado.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes El potencial de membrana de puede determinar insertando un microelectrodo en la célula y midiendo la diferencia de voltaje entre el interior de la célula y una solución estándar externa (Fig. se compara ese valor con el potencial de membrana medido experimentalmente. y los valores reales. o excretado. 21 . A continuación. Se aprecia además que sólo en el caso del K+ la concentración teórica y la experimental son similares. (1967). se determina experimentalmente las concentraciones interna y externa del ion en cuestión y con estos valores se calcula el potencial de Nernst para ese ion.2 se muestra una comparación de los valores de concentración teórica.9.9). Los potenciales de membrana de las células vegetales están comprendidos entre – 60 y – 240 mV. Figura 2. y el otro se mantienen en una solución estándar de electrolito que sirve de referencia. que registra la diferencia de potencial eléctrico entre el compartimento celular y la solución de referencia. La desigualdad entre las dos magnitudes demuestra la presencia de procesos de absorción activa de iones. Por el contrario. mediante transporte activo o pasivo. lo cual indica que este ion está en equilibrio pasivo. 1998. Para ello. En la Tabla 2. las concentraciones de los demás cationes es inferior a la de equilibrio.

Sin embargo. luego ha tenido que aplicarse energía para acumular el ion en la célula). otras presentan una acumulación activa de Na+.(μj* + RT ln Cje + zj FEe) agrupando los términos eléctricos y los de concentración. indicando que su toma se debe a un transporte activo (en el equilibrio se obtiene que Δμ > 0. el ion se ve empujado a entrar al interior de la célula. 22 .Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes por lo que debe existir algún mecanismo que secrete estos iones al exterior. etc. Si Δμj/F es positivo. finalmente Δμj /F = zj (Em – EN) Δμj /F. Estos equilibrios pueden calcularse a partir de la expresión del potencial electroquímico de los iones.2 pueden considerarse representativos del comportamiento de buen número de especies: los aniones se acumulan activamente. RT ln (Cje/ Cji) = EN zF y tendríamos que: Δμj = [zj F (Ei – Ee)] – (EN zjF) el término (Ei – Ee) corresponde al potencial de membrana Em y. algunas plantas son capaces de acumular K+ activamente. Los resultados descritos en la Tabla 2. se obtiene multiplicando la carga del ion “j” por la diferencia entre el potencial de membrana y el potencial de Nernst para ese ion. impidiendo de este modo que alcancen la concentración de equilibrio. el comportamiento no es uniforme. el ion está sometido a una fuerza física que tiende a sacarlo del interior de la célula y cuando tiene valor negativo. resulta Δμj =[zj F (Ei – Ee)] – [RT ln (Cje/ Cji)] Mediante la ecuación de Nernst podemos expresar un cociente de concentraciones como un potencial eléctrico es decir. mientras que los cationes entran de forma pasiva e incluso existen mecanismos para su secreción. expresado en mV y. El trabajo necesario para incorporar un mol de un ion a la célula es igual a la diferencia del potencial electroquímico de ese ion entre el interior y el exterior de la misma: Δμj = µji -µje = (μj* + RT ln Cji + zj FEi ). Los aniones presentaron unas concentraciones internas mayores que las teóricas. es el gradiente de potencial electroquímico para un ion “j”.

9 y la expresión queda por tanto: Ci= Ce x exp [.0272 28 exterior Cl- 1 0. c Aquellos iones que se encuentran en la raíz a mayor concentración que la predicha por la ecuación de Nernst. Por el contrario. Como T = 298ºK.25 x exp [-(+2)(-110)/(58.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Tabla 2. Concentración Dirección Concentración interna (mM) Ion en el medio fuerzas c a b externo (mM) Teóricos Experimentales pasivas K+ 1 74 75 Na+ 1 74 8 interior Mg2+ 0. siendo el citosol y la vacuola los compartimentos celulares más importantes.9)].340 3 interior Ca2+ 1 5. su acumulación se ha producido contra estas diferencias de potencial utilizando energía metabólica (acumulación activa).25 1.00005 19 exterior equilibrio a Calculada para cada ion a partir del potencial de membrana y su concentración en el medio externo. RT/F= 58.2. Así. por lo que un mecanismo de secreción es necesario para impedir su acumulación pasiva.2 es una simplificación. Comparación de las concentraciones iónicas determinadas experimentalmente con las del equilibrio pasivo en tejidos de raíces de guisante. Ce= 0. Tomado de Higinbotham et al. Debido al volumen relativamente pequeño del citosol de la mayoría de las células de las angiospermas es difícil efectuar mediciones de este tipo. los primeros estudios que se efectuaron para determinar las relaciones iónicas en plantas se llevaron a cabo en algas como 23 . la mayor parte de los cationes están a menor concentración de la predicha por el equilibrio pasivo.25 y n= + 2. por lo que el citosol queda restringido a una delgada capa entre el tonoplasto (la membrana de la vacuola) y el plasmalema. aplicando la ecuación de Nernst. Las células vegetales presentan gran cantidad de compartimentos internos cada uno de ellos con una composición iónica diferente.0136 7 exterior H2PO4- 1 0.9)]= 1 340 b Las raíces se equilibraron frente a un medio de la concentración indicada en la columna 2. a una temperatura de 25 ºC hasta que su concentración no varió con el tiempo.(n)(-110)/(58. Ci= 0. El potencial de membrana calculado fue de -110 mV. son impulsados hacia el exterior por las diferencias de potencial electroquímico. (1967). Por ello. Solamente el potasio se encuentra en equilibrio pasivo. para el ion Mg2+. En una célula vegetal madura.360 2 interior NO3- 2 0.25 0. la vacuola ocupa el 90 % o más del volumen celular. El ejemplo presentado en la Tabla 2.0136 21 exterior SO42- 0.

El control de la concentración de iones en el citosol es importante para la regulación de las enzimas metabólicas. En general. Las concentraciones iónicas en el citosol y en la vacuola están controladas por procesos de transporte pasivo (fechas discontinuas) y activo (flechas continuas). Tomado de Taiz y Zeiger.. En la mayoría de las células vegetales la vacuola ocupa más del 90 % del volumen celular y contiene la mayor parte de los solutos celulares. La contribución de todos los iones al potencial de difusión de la membrana viene dado por la ecuación de Goldman: 24 . y lo mismo ocurre con el exceso de protones. En la Figura 2. el potencial de Nernst de una sola especie iónica rara vez puede describir el potencial de difusión real de la membrana. casi un milímetro de diámetro y un volumen de citosol apreciable. en las células vegetales el K+ se acumula dentro del citosol y de la vacuola de forma pasiva excepto. La pared celular que rodea al plasmalema no representa una barrera de permeabilidad y por tanto no afecta al transporte de solutos. 5. mientras que el pH de la vacuola y del apoplasto son generalmente más ácidos (pH ≈ 5-6).10 se representan a modo de resumen las conclusiones de estos estudios y los llevados a cabo con plantas superiores. Figura 2. cuando la concentración extracelular de éste es muy baja y.2).LA ECUACIÓN DE GOLDMAN RELACIONA EL POTENCIAL DE DIFUSIÓN Y EL GRADIENTE DE IONES Hay muchos iones que atraviesan las membranas de las células vegetales de forma simultánea.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Nitella o Chara. en este caso su absorción se realiza de forma activa. Esta eliminación de H+ permite mantener el pH del citosol constante y próximo a la neutralidad (pH ≈ 7.10. El Na+ y el Ca2+ se eliminan activamente del citosol hacia el espacio extracelular y hacia la vacuola. cuyas células internodales poseen varios centímetros de longitud.4. 1998. Todos los aniones se acumulan activamente en el citosol. Por ello.

. Estos resultados ponen de manifiesto que el potencial de difusión no es el único componente que contribuye al potencial de membrana y. Cualquier mecanismo de transporte activo que provoque el movimiento de una carga eléctrica neta.EL TRANSPORTE DE PROTONES ES EL PRINCIPAL DETERMINANTE DEL POTENCIAL DE MEMBRANA Cuando se conocen las permeabilidades y los gradientes de los iones.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Esta ecuación nos proporciona un valor bastante aproximado del valor real del potencial de difusión de una membrana. y es común en las células de todos los organismos. Siempre que un ion entra o sale fuera de la célula sin ser equilibrado con el movimiento de un contraión de carga opuesta. luego el coeficiente de permeabilidad para el Na+ y para Cl. Sin embargo. En estas condiciones. a ambos lados de la membrana. modificará el valor de potencial de membrana respecto al predicho por la ecuación de Goldman. 5. debe existir otro mecanismo. La energía metabólica necesaria para llevar a cabo este tipo de transporte casi siempre es proporcionada por la hidrólisis del ATP. Este tipo de transporte se denomina bomba electrogénica. En dicha ecuación se asume que la difusión de los iones es independiente y a favor del gradiente de potencial químico y que para determinar el valor del potencial de difusión de la membrana basta con conocer las concentraciones (C) y las permeabilidades (P) de los tres iones más relevantes de la célula es decir el K+.son nulos. mientras que el calculado (a partir de la ecuación de Goldman) oscila entre –80 a –50 mV. Pues bien. La relación entre la ecuación de Goldman y la ecuación de Nernst puede verse fácilmente si se considera una membrana que sólo es permeable a un ion por ejemplo el K+. es posible calcular el potencial de difusión de la membrana mediante la ecuación de Goldman.11). la ecuación de Goldman se reduce a la ecuación de Nernst para el K+. en plantas y en hongos. Por ejemplo. es decir una enzima que bombea de forma activa (utiliza energía metabólica. El cianuro inhibe la síntesis de ATP y. los valores experimentales del potencial de membrana son mucho más negativos que los obtenidos a partir de la ecuación de Goldman. Na+ y Cl-. ATP) protones al exterior (es decir saca protones del interior de la célula y los vierte al exterior) y que se denomina ATP foforilasa de protones o H+-ATPasa del plasmalema.5. 2. En las plantas se ha demostrado la dependencia del potencial de membrana del ATP observando el efecto del cianuro (CN-) en el potencial de membrana (Fig. por tanto. este exceso de voltaje se debe a la acción de una bomba electrogénica. dominan la ecuación. en estas condiciones el potencial de membrana se encuentra cercano al potencial de 25 . Los valores así calculados son muy similares a los valores experimentales ya que estos tres iones son los que presentan una mayores concentraciones y coeficientes de permeabilidad en las células vegetales y por tanto. se crea un voltaje a través de la membrana. el potencial de membrana medido en células del tallo y de raíces de plántulas está comprendido entre –130 a –110 mV.

26 . sino también en bacterias. Na+ y Cl-.11. el cual corresponde al movimiento pasivo de K+. hongos y algunas células animales como las epiteliales del riñón. En estos orgánulos. Figura 2. Por consiguiente. El H+ es transportado electrogénicamente a través de la membrana plasmática no sólo en plantas. se inhibe este transporte. A continuación vamos a describir la estructura y función de las proteínas de membrana implicadas en el transporte activo y pasivo en las células vegetales. El colapso del potencial de membrana tras la adición de cianuro indica que el ATP es necesario para el mantenimiento del potencial. algas. un cambio en el potencial de la membrana causado por una bomba electrogénica cambiará las fuerzas de difusión de todos los iones a través de la membrana. En presencia de cianuro. Por ejemplo. el pH citosólico se acidifica. El cianuro bloquea la producción de ATP en las células. 1998. el potencial de membrana de las células vegetales tienen dos componentes: el potencial de difusión y otra componente debida al transporte electrogénico de iones. Esto pone de manifiesto que el transporte activo de protones al exterior de la célula es electrogénico. esta proteína de transporte se denomina ATP sintasa debido a que forma ATP en lugar de hidrolizarlo.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes difusión de Goldman. La síntesis de ATP en mitocondrias y cloroplastos también depende de una H+ATPasa. Tomado de Taiz y Zeiger. la producción de ATP se reestablece y se restaura el potencial de membrana. El potencial de membrana de células de guisante se colapsa cuando se añade cianuro (CN-) al medio. Como analizamos anteriormente. Si se elimina el cianuro del medio. y el pH del medio externo aumenta mientras que. el transporte de H+ al exterior de la célula puede generar la fuerza motora necesaria para la difusión pasiva de K+ al interior de la ce´lula.

Debido a la naturaleza hidrofóbica del interior de la membrana. probablemente debido a las fuertes interacciones con los extremos polares de los lípidos y por su pequeño tamaño. para iones y moléculas polares grandes (glucosa. incluso pequeñas moléculas polares (agua. 180 daltons) las membranas biológicas son mucho más permeables que las artificiales. Entre las moléculas polares el agua presenta una elevada permeabilidad. una proteína transportadora transporta específicamente un tipo de solutos también pude transportar otras substancias relacionadas.o de solutos no cargados como la sacarosa. cuando una molécula aumenta en tamaño y polaridad su permeabilidad disminuye. Cuando se comparan los valores de permeabilidad de las bicapas artificiales con los de las membranas biológicas se pueden encontrar importantes similitudes y diferencias (Fig. En la Figura 2. De la misma forma. Normalmente. en plantas el transportador de K+ de la membrana plasmática puede también transportar otros cationes monovalentes Rb+ y Na+ aunque. 44 daltons. Además. el extracelular y el intracelular.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos 6. Las moléculas no polares como el O2 (32 daltons) atraviesan la membrana rápidamente. de ahí su gran diversidad. transportadores (carriers) y bombas. una proteína involucrada en el transporte de aminoácidos neutros puede transportar glicina. o lisina. Estas proteínas transportadoras se clasifican en tres grupos: canales. lo que les permite regular el tráfico de sustancias y por ende la composición iónica del interior de la célula. CO2. las membranas sintéticas puras son altamente impermeables a los iones. el transportador de K+ no es efectivo en el transporte de aniones como el Cl. que posee carga negativa. Por otro lado.- Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS DE MEMBRANA Como hemos visto en el apartado 3. 92 daltons) también difunden rápidamente aunque. Por ejemplo. En general. glicerol. Las moléculas no polares y muchas pequeñas substancias polares. alanina o valina pero no ácido aspártico. en los estudios de permeabilidad se utilizan membranas artificiales constituidas por un solo tipo de fosfolípidos (bicapas lipídicas que carecen de proteínas). Sin embargo. 27 . Las proteínas transportadoras presentan especificidad en el transporte de solutos. la mayoría de las substancias importantes en la nutrición y en el metabolismo celular no pueden atravesar la bicapa lipídica directamente por lo que deben ser transportadas mediante proteínas de membrana. Esto se debe a la presencia de proteínas transportadoras que facilitan la entrada de iones y de otras moléculas polares. Aunque generalmente. el cual posee carga positiva. es el K+ el ion que se transporta preferentemente. 18 daltons. su permeabilidad es ligeramente menor. Las moléculas que presentan valores de permeabilidad similares en ambos tipos de membranas difunden directamente a través de la fase lipídica de la membrana.12). Hemos comentado que los iones son moléculas hidrofílicas inmiscibles en los lípidos de la membrana y que para atravesarla requieren de mecanismos específicos de transporte.1 la membrana celular es una barrera que separa dos medios acuosos de distinta composición.12 se muestran los valores de permeabilidad de las bicapas artificiales para varias substancias. presentan unos valores de permeabilidad similares en ambos tipos de membrana. las bicapas lipídicas son altamente impermeables a los iones por muy pequeños que éstos sean. Por el contrario. 2.

Distinguiremos.2. En primer lugar. 2. para el paso de diversas moléculas a través de membranas sintéticas y biológicas. lo que pone de manifiesto del papel de las proteínas transportadoras.1. 6. para la mayoría de las moléculas polares los valores de P son mucho mayores en las membranas biológicas.1..Canales iónicos Los canales iónicos. en centímetros por segundo. Terminaremos examinado la estructura y dominios funcionales de varios transportadores presentes en el plasmalema y el tonoplasto. Los valores de P para las moléculas no polares y algunas substancias no cargadas como el agua.12.1. sin embargo. vamos a describir el papel de los canales iónicos y de los transportadores en el transporte de solutos a través de las membranas. Tomado de Taiz y Zeiger. en general son proteínas transmembrana que funcionan como poros selectivos en la membrana. sino que desarrollan tres funciones fundamentales: a) Permiten el flujo de iones a su través a una velocidad muy superior a la de cualquier sistema biológico (108 iones s-1 frente a 103 iones s-1 que mueve un transportador o una ATPasa-H+) b) Son capaces de discriminar qué iones pasan a su través. es decir presentan selectividad iónica.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2. Coeficientes de permeabilidad. entre el transporte primario y el transporte activo secundario.14).13). La región del canal que determina la especificidad se denomina filtro selectivo (ver Fig.. P. El transporte a través de un canal es siempre pasivo.LOS CANALES IÓNICOS Y LOS TRANSPORTADORES FACILITAN EL TRANSPORTE DE SOLUTOS A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS Existen dos tipos de proteínas transportadoras que facilitan la entrada de solutos a través de la membrana: los canales iónicos y los transportadores (carriers) (Fig. a continuación. son similares en ambos sistemas pero. los canales iónicos no son simples poros acuosos conductores. 6. 1998. El 28 . La especificidad del transporte viene dada por el tamaño del poro y la densidad de la superficie cargada en su interior.

proceso al que denominamos reactivación del canal. al estímulo que determina el cambio conformacional se pueden clasificar los canales iónicos en a) activados por cambios en el voltaje (canales voltaje-dependientes). y su especificidad viene determinada principalmente. la magnitud de la corriente que cruza la membrana depende de la densidad de canales. Sin embargo. por las propiedades biofísicas del canal. Las proteínas canal actúan como poros en la membrana. Los canales y los transportadores pueden mediar el transporte pasivo de solutos a través de las membranas (por simple difusión o difusión facilitada). El transporte activo primario se lleva a cabo mediante bombas que transforman la energía metabólica (ATP) en energía útil para el transporte de solutos en contra de su gradiente de potencial electroquímico. esta 29 . a favor del gradiente de potencial electroquímico.14) y dos no conductores (estados inactivo y de reposo). los cambios en el potencial de membrana) aumenta la probabilidad de apertura de los canales. proteín quinasas). es decir. las proteínas del canal son capaces de adoptar diversos estados conformacionales. Atendiendo a sus propiedades cinéticas (activación-inactivación). ATP. la probabilidad de apertura de algunos canales es mínima. ver Fig. que permite el paso de iones a su través cuando las puertas están abiertas. En general.13. Por tanto.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes transporte a través de los canales puede o no implicar una unión transitoria del soluto con la proteína canal c) En respuesta a un estímulo. Los transportadores se unen a la molécula que transportan en un lado de la membrana y la liberan en la cara opuesta. nucleótidos cíclicos. Los tres tipos de proteínas transportadoras: canales. de la conductancia del canal abierto y de cuánto tiempo el canal permanece en dicho estado. Para que el canal vuelve a abrirse es necesario que el canal inactivado pase al estado de reposo. b) activados tras la interacción de un antagonista con su receptor específico localizado en la superficie de la membrana celular (canales receptor-dependientes). pero sí pueden abrirse en respuesta a un estímulo adecuado. La despolarización celular (es decir. A nivel del potencial de reposo celular. que sólo un reducido número de canales puede abrirse al azar. Figura 2. la probabilidad de apertura disminuye como consecuencia del proceso de inactivación iniciado simultáneamente por el de activación. c) activados por mediadores intracelulares (calcio. existe un estado conductor (estado abierto. pero si la despolarización se mantiene. así el canal pasa al estado inactivo-cerrado desde el cual no puede volver a abrirse. 2. transportadores (carriers) y bombas.

ya que la despolarización de la membrana puede inducir la liberación de moléculas señal y activar canales activados por receptores/mediadores. Figura 2. rapidly activated) y los que se activan lentamente (tipo S. en respuesta al potencial de membrana producen la apertura o cierre del canal. como su propio nombre indica es que los canales tipo R se abren y se cierran rápidamente en respuesta a un estímulo [por ejemplo un cambio en el voltaje (los cambios en el voltaje. mientras que muchos ligandos endógenos pueden también modificar el potencial de membrana celular y activar canales voltaje-dependientes. en función del tiempo que permanecen abiertas en respuesta a un estímulo prolongado. el control de la apertura y el cierre de los estomas. 1998. entre otros) pero también permiten el transporte de pequeñas 30 . es decir los cambios en el potencial de membrana. slowly activated). La diferencia entre ambos canales. La secuencia de esta puerta consiste en una serie de aminoácidos básicos que proporcionan carga positiva y que. Ambos tipos de canales también se han identificado en el tonoplasto y. Las subunidades reguladoras β también pueden estar presentes.(la actividad de estos canales es de gran importancia para la regulación de importantes procesos fisiológicos como el mantenimiento de la turgencia celular. son los principales estímulos que promueven la apertura de los canales)] mientras que los canales tipo S permanecen abiertos mientras dure el estímulo.14. De lo anteriormente expuesto se puede deducir que en las células vegetales existen importantes tipos de canales que facilitan el transporte de ciertos iones. Modelo de un canal regulado por voltaje (canal de K+) de una célula vegetal. la regulación de la elongación celular. como los canales de K+ y Cl.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes división es muchas veces artificial. Así. se han caracterizado los canales que se activan rápidamente (denominados tipo R. fast vacuolar channels) o canales vacuolares lentos (SV. Tomado de Taiz y Zeiger. Así mismo y mediante la técnica de patch clamp (ver Apéndice B) se han podido distinguir dos tipos de “puertas” en los canales. se denominan como canales vacuolares rápidos (FV. slow vacuolar channels). El canal está compuesto por un tetrámero de la subunidad principal (α) que contiene un filtro selectivo y una puerta regulada por voltaje.

No cabe duda que su identificación en células vegetales ha revolucionado la visión de las relaciones hídricas de las plantas. la existencia de las acuaporinas proporciona a la planta a) una ruta de baja resistencia al flujo de agua en condiciones de elevada transpiración.2. de forma alternada expone en primer lugar la zona de unión al soluto en una cara de la membrana y luego en la otra. 6. estas proteínas se han identificado en todos los seres vivos. 2 La Real Academia Sueca de las Ciencias concedió el premio Nobel de Química 2003 a los profesores Meter Agre por el descubrimiento de las acuaporinas.Transportadores o carriers En el transporte mediado por un transportador o carrier la substancia a transportar se une a una región específica de la proteína.15. Esta apertura puede estar regulada por un ligando o por el valor del potencial de membrana. y Roderick Mackinnon por el estudio de la estructura de los canales iónicos 31 . La unión provoca un cambio conformacional reversible que. 2. simplemente cambiando la composición de lípidos se controlaba el flujo de agua. Los canales iónicos permiten la comunicación directa del interior y el exterior de la célula y facilitan el paso de un elevado número de iones en cada apertura.15). Tomado de Campbell & Reece (2002). Los transportadores o carriers se unen selectivamente a los iones en una de las superficies y sufren cambios conformacionales que permiten al ion atravesar la membrana. Los canales que facilitan el transporte de moléculas de agua se denominan acuaporinas2. Figura 2.. El descubrimiento de las acuaporinas fue bastante sorprendente para la comunidad científica ya que. desde el aislamiento de la primera acuaporina en 1991 en eritrocitos humanos. b) facilita el paso del agua por la endodermis radicular y c) permite controlar el flujo del agua en la planta.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes moléculas como el agua. Los dos modelos de difusión facilitada. la célula es capaz de modificar la permeabilidad al agua de sus membranas según se requiera. El transporte finaliza cuando la substancia se disocia del lugar de unión del transportador (ver Fig. Hoy en día. Así. de esta forma. Los solutos pueden transportarse a favor de su gradiente electroquímico mediante canales iónicos (a) y proteínas transportadoras (b). Dicho control se llevaría a cabo regulando la actividad y la expresión de los genes que codifican para acuaporinas y.1. hasta entonces se pensaba que la bicapa lipídica era suficientemente permeable al agua y que.

Esta bomba se encuentra en la membrana plasmática de las células vegetales. como por ejemplo el proceso de acumulación de cationes en la célula. como su propio nombre indica. La bomba primaria del plasmalema es una bomba de protones que los saca del citosol y los excreta hacia el apoplasto. La unión y la liberación de las moléculas de las proteínas transportadoras son similares a la unión y liberación de las moléculas de una enzima en una reacción. sin gasto de energía metabólica. Estas bombas son proteínas de membrana que mueven iones (masa y carga) en contra de su gradiente de potencial electroquímico. La energía metabólica se transforma en energía útil para el transporte de iones en las membranas a través de la actividad de las bombas primarias (ver Fig. Por el contrario. los transportadores pueden transportar entre 100 a 1000 iones o moléculas por segundo. procesos que tienen lugar en contra del potencial electroquímico de los iones. y es semejante a la difusión (la que se realiza a través de la bicapa) es decir.2. esto es 106 veces más lento que el transporte mediando por un canal. canales o carriers. la velocidad del transporte es de varios órdenes de magnitud más lenta que la llevada a cabo a través de un canal. y puede transportar una mayor variedad de substancias.EL TRANSPORTE PRIMARIO ESTÁ MEDIADO POR BOMBAS Y ESTÁ ACOPLADO A UNA FUENTE DE ENERGÍA METABÓLICA Hasta ahora hemos visto el transporte pasivo de solutos es decir. 2. 6. como veremos más tarde. se denomina difusión facilitada. puede ser pasivo o activo. Normalmente. utilizando energía metabólica y generando gradientes tanto de concentración como eléctricos. Por el contrario. la acumulación de aniones y la secreción de cationes. La ATPasa de H+ de la membrana crea un gradiente de potencial electoquímico de H+ en la membrana plasmática mientras que la ATPasa de H+ vacuolar (V-ATPasa) y 32 . La bomba primaria de las células animales es la bomba ATPasa de Na+-K+. un transporte electroneutro. la bomba ATPasa H+-K+ de la mucosa gástrica es electroneutra: por cada H+ que bombea al exterior toma un K+. Ésta es una bomba electrogénica ya que impulsa la salida de tres iones Na+ y la entrada de dos iones K+ consumiendo ATP. El transporte pasivo mediado por proteínas. En general. Las células vegetales no tienen bombas de Na+-K+..16). Por el contrario. El transporte mediado por transportadores. en el tonoplasto y en varios sistemas de endomembranas tanto de células animales como vegetales. no implica un movimiento neto de carga. Las bombas iónicas se han caracterizado como electrogénicas o electroneutras. aquel que tiene lugar a favor de un gradiente de potencial electroquímico. se utiliza la cinética enzimática para caracterizar el transporte mediado por transportadores. a diferencia del transporte mediado a través de un canal iónico. El transporte de iones que tiene lugar a través de las bombas primarias se denomina transporte primario. precisan de un aporte de energía. de hongos y de bacterias. el transporte electrogénico hace referencia al transporte de un ion en el cual se produce un movimiento neto de carga a través de la membrana. De hecho. se transporta una substancia a favor de su gradiente electroquímico.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Debido al cambio conformacional necesario para llevar a cabo este tipo de transporte.

La bomba primaria que energetiza al plasmalema es una ATPasa de protones Cuando los protones son expulsados del citosol por las ATPasas de H+ electrogénicas se crea un potencial de membrana y un gradiente de pH a expensas de la hidrólisis del ATP. o fuerza protón motriz o Δp.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes la pirofosfatasa de H+ (H+-PPasa. para diferenciarlo de aquellas situaciones en que el transporte está acoplado directamente a una reacción metabólica. como el gradiente de potencial electroquímico para el H+. Como se observa. se denomina transporte secundario activo.16. Un modo de transportar estos compuestos sería mediante cotransporte es decir. 6. son necesarios otros mecanismos que permitan el transporte activo del resto de solutos imprescindibles para el desarrollo vegetal. no existe un flujo asociado de otro ion que compense el déficit de carga positiva del citoplasma. La bomba primaria que energetiza al plasmalema es una ATPasa de protones. entre -160 y -250 mV. Son muchos los estudios que sugieren que. como la hidrólisis del ATP. por el que el transporte de una sustancia proporciona la energía necesaria para la acumulación de otra en contra de su potencial electroquímico. acoplar la energía liberada por el transporte de un soluto que se mueve a favor de su potencial electroquímico con la incorporación de otro ion que se desplaza en contra de su potencial. utiliza la energía contenida en la molécula de pirofosfato para excretar protones) bombean electrogénicamente protones dentro del lumen de la vacuola y de las cisternas del aparato de Golgi. Figura 2.2. Por tanto. Tomado de Campbell & Reece (2002).. La energía acumulada asociada a H+ puede expresarse por tanto. Esta enzima hidroliza ATP para bombear H+ al exterior de la célula. Esto hace que el potencial de membrana de las células vegetales sea muy negativo. que consta de dos componentes: una asociada a la asimetría de concentración de H+ y como diferencia de potencial eléctrico (ver Apéndice C: Teoría Quimiosmótica): 33 . Este mecanismo.1. en células vegetales sólo el H+ y el Ca2+ se transportan mediante bombas primarias.

mediante una proteasa. el ATP que usan proviene mayoritariamente del metabolismo respiratorio. las ATPasas de H+ del plasmalema se denominan de tipo P porque forman una unión covalente con el fosfato (Pi). En dicho dominio se encuentra el residuo aspártico que se fosforila durante el ciclo catalítico y al que puede unirse el ortovanadato.4).. El dominio catalítico se encuentra en la cara citosólica de la membrana. por ej. probablemente. cada gen codifica una isoforma diferente de la enzima. pH. el Em de las células vegetales. cuando se pretende una inhibición de la bomba se usan inhibidores de la respiración (i. en el funcionamiento de la ATPasas de H+ no existe un flujo asociado de otro ion que compense. cianuro o azida) que cortan el suministro de ATP. Debido a la particular unión con el Pi durante la catálisis. la presencia de concentraciones de ortovanadato del orden de micromolar inhibe la actividad de la bomba.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes ΔμH+/F= Em – ENH+ En células vegetales. por tanto. En segundo lugar. en consecuencia. si bien la inhibición in vivo es mucho más pequeña debido. Las ATPasas de H+ están codificadas por una familia multigénica. Es importante destacar que la actividad de ATPasas de H+ del plasmalema y. el componente eléctrico es mucho más importante que la asimetría de concentración por dos razones. la asimetría de protones que genera la bomba se disipa parcialmente debido a la capacidad amortiguadora del medio externo. En vesículas aisladas del plasmalema. por otro. durante cada ciclo de bombeo de H+ al exterior. En primer lugar. las ATPasas de H+ del plasmalema son sensibles a la presencia de ortovanadato (HVO42-). temperatura (como cualquier otra enzima) y por señales específicas.e. como luz. Por esta razón. constituida por al menos 10 miembros y. y a los mecanismos de homeostasis del pH del citoplasma. proveniente del ATP.17 muestra el modelo funcional propuesto para una ATPasas de H+ de levaduras. un análogo del fosfato (HPO42-). se mantiene en oscuridad. la enzima se activa de forma irreversible. enzima que es muy similar a la presente en el plasmalema de las células vegetales. En la literatura bioquímica. La proteína consta de 10 dominios transmembrana y varios dominios hidrofílicos presentes tanto en la cara citoplásmica como en la apoplástica. Algunos de los dominios transmembrana forman un poro que permite el transporte de H+. Por ej. El efecto autoinhibidor del dominio C-terminal puede también regularse mediante la acción de proteín quinasas y fosfatasas.. ni siquiera parcialmente como en células animales con la bomba Na+-K+. por un lado. La regulación de la actividad de la ATPasas-H+ mediada por señales específicas está controlada por un dominio especializado autoinhibidor presente en el extremo Cterminal de la proteína. sean fotosintéticas o no. a la escasa permeabilidad de las membranas a este ion. La Figura 2. y por el ataque por patógenos (Palmgren. el déficit de carga positiva del citosol. estas enzimas añaden (las quinasas) o eliminan residuos fosfato a residuos serina o treonina del dominio autoinhibidor. uno de los mecanismo de respuesta a patógenos en tomate es la activación de 34 . La actividad de las ATPasas-H+ del plasmalema se regula por la concentración de sustrato (ATP). Este dominio autoinhibidor permite regular la actividad de la misma y si se elimina. fitohormonas. que compite con el fosfato del ATP por la unión al sitio activo de la enzima (ver Tabla 2. 2001).

Adaptado de Azcón-Bieto y Talón. Tabla 2. RE Velocidad (ion/segundo) H+ Iones Transportados Pirofosfatasa Tipo V (tipo Tp) - Endomembranas 60 (variable) 38 a 82 H+. Características de las tres clases de enzimas que bombean protones. K+.. Propiedad Tipo F (tipo F0F1) Localización celular Procariotas Eucariotas ATPasas Tipo P (tipo E1E2) Membrana Plasmática Membrana Plasmática Mitocondria Cloroplasto Membrana Plasmática. Na+.1-Difosfato Ninguno 2a3 1H+ : 1 PPi Hidrólisis de ATP Hidrólisis de PPi 0 1 ≥ 2 (plantas) ≥ 1 (plantas) 1 >10 4 (16 kD. Ca2+ H+ H+ Azida Ortovanadato Bafilomicina A1 Nitrato Intermediario Covalente Ninguno Aspartil fosfato Ninguno Función Nº subunidades diferentes Periféricas Intrínsecas 2a 3 Síntesis de ATP 5 (F1) 3-8 (F0) Nº genes (Arabidopsis) Masa molecular 500 kDa Tonoplasto 60 (variable) Inhibidores Estequiometría H+ : ATP ¿Membrana Plasmática? 1.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes fosfatasas que eliminan residuos fosfato del dominio autoinhibidor de las ATPasas-H+ del plasmalema. 1999. activan estas enzimas que forman parte de la cascada de respuestas que activan los mecanismos de defensa de las plantas. subunidad c) 1 (subunidad C) 1 100 kDa 750 kDa (complejo) 8 a 10 subunidades diferentes 81 kDa 1 Hidrólisis de ATP Nota: Los nombres antiguos aparecen entre paréntesis. De esta forma.4. 1993 y Sze et al. 35 .

Esta enzima posee diez dominios transmembrana (representados en color verde) y un dominio autoinhibidor en el extremo C-terminal. es mucho menos activa que ésta. 2002. Esta bomba es también de tipo P ya que el bombeo de Ca2+ requiere la formación de un intermediario fosfatado durante la catálisis.17. La regulación de los niveles de calcio intracelulares se llevan a cabo controlando la apertura de los canales iónicos de Ca2+ que permiten su difusión a la vacuola y al retículo endoplásmico.1 µM es este compartimento celular. además de ser menos electrogénica que la ATPasas de H+. Pequeñas fluctuaciones en la concentración de Ca2+ citosólico alteran drásticamente la actividad de muchas enzimas (muchas enzimas se inhiben a concentraciones de calcio superiores a 1 µM). Membrana plasmática Dominios transmembrana Espacio extracelular Dominio regulador Citoplasma Figura 2. Esta enzima excreta Ca2+ del citosol al tiempo que incorpora H+ en un proceso dependiente de ATP. La contribución de esta bomba a la acumulación de energía en el plasmalema es muy pequeña ya que. que son los principales reservorios de este ion en el protoplasma y modulando la actividad de las bombas Ca2+-H+ ATPasa. para mantener su concentración en torno a 0. La pared celular y el espacio apoplástico son ricos en calcio pero la concentración del Ca2+ en el citosol se mantiene a niveles muy bajos a pesar del fuerte gradiente electroquímico para la difusión del Ca2+ hacia el interior de la célula. Su función es evacuar el Ca2+ del citoplasma. las plantas poseen en el plasmalema un segundo tipo de bomba primaria que también pertenece a las ATPasas de tipo P: una Ca2+-H+ ATPasa. Tomado de Taiz & Zeiger. 36 .Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Además de las ATPasas de H+. Representación bidimensional de la bomba ATPasa H+ del plasmalema. Conviene recordar que el calcio es un ion muy importante y su concentración debe regularse de forma muy estricta. que conducen el Ca2+ del citosol al espacio apoplástico.

La fuerza que impulsa la acumulación de agua y que permite la generación de la turgencia en las células es osmótica3. hace relativamente poco tiempo que se conocen los mecanismos responsables.2. los cuales contribuyen a mantener un pH bajo en la vacuola ya que estos compuestos actúan como tampones. regula el tráfico de iones y de otros metabolitos entre el citosol y la vacuola. y oxálico. Estudios bioquímicos recientes realizados en frutos de limón sugieren que el bajo pH de las vacuolas de estos frutos se debe al efecto combinado de dos factores: (1) la baja permeabilidad del tonoplasto a los protones. que permite la generación de un gradiente de pH acentuado. el potencial osmótico de éstas debe mantenerse en unos valores adecuados para permitir la entrada de agua desde el citoplasma. El valor del potencial osmótico es idéntico al de presión osmótica (π). concretamente V-ATPasa-H+. La hiperacidificación vacuolar es la responsable del sabor agrio de ciertos frutos (limón) y vegetales (ruibarbo). aunque el pH de las vacuolas de algunas especies es muy bajo.. por tanto.Las bombas primarias del tonoplasto: la ATPasa de protones y la pirofosfatasa Aunque se sabe desde hace mucho tiempo que la vacuola es el compartimento celular donde las células vegetales almacenan agua y solutos. el origen del potencial osmótico es la acumulación de iones. donde Ci es la concentración de solutos del sistema. málico. El tonoplasto. Este fenómeno se conoce como hiperacidificación (ver Tabla 2. 3 Este proceso es de gran relevancia ya que la elongación de las células vegetales depende de la entrada de agua a las vacuolas.5). pero poseen signo opuesto es decir: ψs= -π. Por esta razón. Medidas directas con microelectrodos indican que el pH vacuolar se encuentra alrededor de 5.2. la presión osmótica es siempre positiva y el potencial osmótico siempre posee valores negativos. el transporte del tonoplasto ha permanecido relativamente inaccesible hasta que no se han desarrollado los métodos adecuados para la obtención de vacuolas intactas y vesículas de tonoplasto. Sin embargo. capaces de bombear protones al interior de la vacuola de forma muy efectiva. El valor del potencial osmótico (ψs) para la soluciones diluidas ideales es ψs= -RT Ci. 37 . Otro factor importante que contribuye al sabor agrio de estos frutos y vegetales es la acumulación de ácidos orgánicos como el cítrico. el lumen vacuolar es típicamente ácido y positivo. La energía que se emplea en el tonoplasto para mover iones está asociada a la actividad de bombas primarias. y pueden tener un pH de 1. en la vacuola. En otras palabras. de esta función. asociados al tonoplasto. principalmente el K+.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes 6. que es la membrana que delimita la vacuola. (2) la presencia de bombas primarias especializadas. como el plasmalema regula la entrada y salida de solutos de la célula. A su vez. En el tonoplasto existen dos tipos de bombas primarias y ambas bombean protones hacia el interior de la vacuola.

se genere un gradiente de potencial electroquímico de protones muy marcado (téngase en cuenta el valor de pH en la vacuola. se transportan hacia el lumen vacuolar aniones como el Cl. 6.7 2.9-2.m. Este tipo de transporte se estudiará en detalle en el siguiente apartado.) 5. pH vacuolar de varias especies hiperacidificantes Tejido Especie pH Frutos Lima (Citrus aurantifolia) Limón (Citrus limonia) Cereza (Prunus cerasus) Pomelo (Citrus paradisi) 1. en contra de su gradiente electroquímico.o el malato2. además. Para ello.- La ATPasa de protones vacuolar La identificación de los dos tipos de bombas presentes en el tonoplasto ha sido posible gracias al desarrollo de técnicas que permiten el aislamiento de vacuolas purificadas.5). mediante un sistema de transporte activo secundario. pH 5. según la especie considerada. Gracias a estos trabajos se descubrió la presencia en el tonoplasto de un nuevo tipo de bomba ATPasa-H+.3 1.procedentes del citosol a través de canales iónicos.9-1. impulsa la entrada de aniones a la vacuola y.5 2.4 (6:45 a. como muchas suculentas. mecanismo de reacción y tipo de inhibidores (ver Tabla 2. que provoca un descenso del pH vacuolar durante la noche.2. Otro aspecto a tener en cuenta es el mantenimiento de la electroneutralidad. y en el citoplasma.5 3. que como hemos comentado transporta protones hacia el interior de la vacuola. La existencia de este transporte de aniones permite no sólo mantener la electroneutralidad sino que.0 Hojas Oxalis deppei Begonia semperflorens Begonia lucerna Oxalis sp. Tabla 2.6 1.4).0-7. Rumex sp.5 0. La componente eléctrica de la fuerza ion motriz. La ATPasa de protones vacuolar (V-ATPasa) difiere de la ATPasa de protones del plasmalema (P-ATPasa) en su estructura. presenta un tipo especial de fotosíntesis denominada metabolismo ácido de las crasulaceas (CAM).5 (4:00 p. debido a la entrada masiva de H+. la asimetría en la concentración de H+) se va a aprovechar para incorporar cationes y azúcares dentro de la vacuola.4 1.5.6 2. el gradiente de pH (es decir. entre 5-20 mV (dentro de la vacuola positivo).2.1. generada por estas bombas.) * El pH vacuolar de Opuntia fluctúa a lo largo del día. pH entre 7.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes La actividad de las bombas electrogénicas de protones presentes en el tonoplasto hace que el potencial de membrana que soporta el tonoplasto sea mucho menor que el soportado por el plasmalema y éste oscila. La ATPasa de protones vacuolar se 38 . Opuntia phaeacantha* 1.m. Esta planta.

las subunidades de las V-ATPasas se organizan en un complejo catalítico periférico. Modelo del motor rotatorio de una V-ATPasa.uni-osnabrueck. http://www. compuestos que no afectan a las P-ATPasas (ver Tabla 2. forma un poro que permite el transporte de H+ hacia el interior del lumen vacuolar.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes denomina de tipo V y se parece mucho más a otras bombas de protones . Mientras que las ATPasa-H+ de tipo P. compuestos por al menos 10 subunidades diferentes.las bombas FATPasas.4). de apariencia lobulada muy característica. Al igual que las FATPasas. Vo que facilita el transporte de protones (ver Fig. Por la similitud existente entre las F-ATPasas y las V-ATPasas se ha asumido que operan como pequeños motores giratorios. Además. En ella se ilustra entre otros aspectos la rotación del complejo ATP sintasa del cloroplasto en la sección titulada “From light to ATP”. Junge. Sin embargo. presentes en el plasmalema.18). aproximadamente de 750 kDa. El complejo catalítico V1 se puede disociar fácilmente del tonoplasto. y un complejo canal integrado en la membrana. 2. V1. Los distintos componentes estructurales de este complejo catalítico se nombran con letras mayúsculas (A-H).18. El complejo V0. las V-ATPasas durante su acción no se forma un intermediario fosforilado. Como se aprecia en la figura este complejo está constituido por varios polipéptidos.biologie. Figura 2. las ATPasa-H+ de tipo V son complejos enzimáticos de gran tamaño. las V-ATPasas se inhiben específicamente con el antibiótico bafilomicina y por nitrato.html 39 .de/Biophysik/Junge/overheads. un inhibidor de las PATPasas. y por tanto. no son sensibles a ortovanadato. están constituidas por un solo péptido de 100 kDa. Los 4 Es recomendable visitar la página web del profesor W.presentes en mitocondrias y cloroplastos4.

3.19 se muestra 40 . Forgac (Tufts University) http://www.2. En estas situaciones.22). Éstas actúan de forma secuencial y permiten la rotación del eje D y de las 6 subunidades c.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes distintos polipéptidos que forman el complejo V0 se designan con letras minúsculas. a través de la membrana. los niveles de ATP son muy reducidos por lo que se cree que estas enzimas representan un sistema de reserva para mantener las actividades celulares esenciales en situaciones de estrés. de tamaño molecular elevado. Esta enzima consta de un único péptido que tiene un peso molecular de unos 80 kDa. 6. independientemente del gradiente de H+ o del potencial electroquímico. al ser organismos sésiles.2.Los transportadores ABC Otra familia de transportadores activos presentes en el tonoplasto y que obtienen su energía de la hidrólisis del ATP son los transportadores denominados transportadores ABC (del inglés.edu/sackler/physiology/faculty/forgac/ 6. de esta forma. La H+-PPasa utiliza la energía resultante de la hidrólisis del pirofosfato inorgánico (PPi) para bombar protones al interior de la vacuola. las células vegetales pueden usar la energía de la hidrólisis del pirofosfato en algunas reacciones glicolíticas al igual que en el transporte de protones en el tonoplasto.. Así. Se ha propuesto que la hidrólisis del ATP se cataliza en cada una de las subunidades A del complejo catalítico V1. 6. En la Figura 2. Tomado de la página web del Dr. Estos transportadores utilizan la energía procedente de la hidrólisis del ATP para transportar moléculas orgánicas. Así. generar el mismo gradiente de potencial electroquímico de H+.EL TRANSPORTE SECUNDARIO ACTIVO UTILIZA LA ENERGÍA ALMACENADA EN LA FUERZA ION MOTRIZ La fuerza protón motriz generada por el transporte electrogénico de H+ por las bombas primarias se puede utilizar para llevar a cabo el transporte de otras substancias en contra de su gradiente de potencial electroquímico. mientras que la V-ATPasa parece transportar dos protones por molécula de ATP hidrolizada. Como las H+ATPasas de tipo P. la energía disponible por ion de H+ transportado es aproximadamente la misma.tufts. Aunque la energía libre liberada por la hidrólisis del PPi es menor que la liberada tras la hidrólisis del ATP.2. esta falta es compensada por el hecho de que la H+PPasa vacuolar sólo transporta un protón por cada molécula de PPi hidrolizada. los transportadores ABC forman un intermediario fosforilado durante la catálisis. 2. la pirofosfatasa de H+ (H+-PPasa). ATP-binding cassette) (ver Fig.3. y por tanto se inhiben con ortovanadato. Conviene destacar que las plantas. tienen un metabolismo más versátil que el de los animales.- La pirofosfatasa de H+ En el tonoplasto. y cada enzima puede.2. se encuentra otro tipo de bomba primaria de protones. La H+-PPasa y otras enzimas que utilizan PPi son inducidas en algunas plantas cuando los niveles de oxígeno son bajos (hipoxia) o por frío (chilling). que participa junto con la V-ATPasa en la generación del gradiente de protones a través del tonoplasto.2.

éste sufre un cambio conformacional quedando los lugares de unión expuestos en el otro extremo de la membrana. S. los lugares de unión a la proteína están expuestos hacia la cara externa y pueden captar un protón. Cuando las dos moléculas están ligadas al transportador. Figura 2. provocando que el transportador vuelva a su conformación original. (A) En la conformación inicial. El ciclo se completa con la difusión del protón y de la otra molécula ligada de sus lugares de unión.19. (C) La unión con S da lugar a otro cambio conformacional de forma que quedan expuestos los lugares de unión y sus substratos en el interior de la célula. Modelo hipotético del transporte secundario activo. (D) La liberación del protón y de S en el interior de la célula restaura la 41 .Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes cómo podría operar este tipo de transporte. La energía conductora del proceso puede acumularse como fuerza protón motriz (representado por un triángulo en la derecha de A) y puede emplearse para incorporar un substrato (S) en contra de su gradiente de concentración (triángulo de la izquierda). (B) Esta unión provoca un cambio conformacional que permite la unión a la proteína del substrato. El transportador es una proteína transmembrana con un lugar de unión para los protones accesible desde el exterior de la membrana. Este lugar se une al ion o molécula que se va a transportar activamente. La unión con el protón hace accesible otro lugar de unión.

En ambos casos. Tanto substratos neutros como cargados puede ser transportados por este proceso. Así. Y. A diferencia del transporte primario. el substrato en cuestión se mueve en contra de su potencial electroquímico. En el transporte de intercambio o antiporte (antiport) la entrada de protones a la célula “cuesta abajo” favorece la salida de un soluto en contra de su gradiente electroquímico (“cuesta arriba”) (ver Fig. el transporte secundario disipa la diferencia de potencial acumulada en la membrana y es electroforético.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes conformación original del transportador y permite que éste inicie un nuevo ciclo.2. Tomado de Taiz y Zeiger. electrogénico. Figura 2. 42 . por tanto. Dos ejemplos de transporte activo secundario acoplados a un gradiente de protones. (B) Antiporte. (A) Simporte. los H+ circulan a través de la membrana. otros muchos iones o compuestos orgánicos pueden transportarse junto con uno o dos protones en contra de su gradiente. el ion o el soluto que se transporta junto con los protones lo hace en contra de su gradiente electroquímico. por ejemplo el ion sodio. utilizando este gradiente. 1998. la energía conductora de este transporte proviene de la fuerza ion motriz. hacia el exterior mediante las bombas primarias y regresan a la célula mediante los transportadores activos secundarios. la energía disipada por el regreso de los protones a la célula es acoplada con la salida de una molécula de la célula. por ejemplo.20. Sin embargo. la energía disipada por la entrada de los protones a la célula es acoplada a la incorporación de una molécula a la célula.19 se denomina transporte unidireccional o simporte (symport) porque las dos substancias se mueven en la misma dirección a través de la membrana.20). que genera una diferencia de potencial eléctrico y es. por ejemplo un azúcar. en el caso de las células vegetales de H+. Tomado de Taiz y Zeiger (1998). El ejemplo representado en la Figura 2. En ambos tipos de transporte secundario. por lo que es un transporte activo. y no de la hidrólisis del ATP. En el transporte secundario la entrada de protones disipa la fuerza ion motriz generada por las bombas primarias y despolariza la membrana. Teniendo esto en cuenta podemos afirmar que una célula depende de un sistema de transporte activo primario acoplado a la hidrólisis del ATP para establecer un gradiente de potencial electroquímico de un ion.

debido a la reducción del voltaje de la membrana. La disminución del potencial de membrana se debe a la carga positiva (H+) que entra en la célula junto con la glucosa. se observa simultáneamente una reducción en el potencial de membrana. Por consiguiente.22 se representan varios procesos de transporte localizados en el plasmalema y en el tonoplasto. La incorporación de glucosa a la célula se lleva a cabo mediante cotransporte con protones (ver figura de la izquierda). Sin embargo. En la 43 . Efecto de la incorporación de glucosa sobre el potencial de membrana y el pH externo de la planta acuática Lemma gibba.2. H2PO4-. hay que tener en cuenta que incluso el transporte a través de un canal está mediado por una ATPasa de H+. sacarosa. En la Figura 2.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes En las plantas y en los hongos. Figura 2. un aumento del pH externo y la toma de glucosa (Fig. ya que la difusión del K+ viene dada por el potencial de membrana.21. la bomba de protones trabaja más deprisa para restablecer el voltaje inicial y el gradiente de pH mientras se produce la toma de glucosa. cuando se añade glucosa a células vegetales sumergidas en un medio salino simple. los azúcares y los aminoácidos se toman mediante transportadores de tipo simporte. Se piensa que la mayoría de los gradientes iónicos a ambos lados de la membrana en las células vegetales superiores se generan y se mantienen por el gradiente de potencial electroquímico de H+.21). aminoácidos y otras substancias entran en la célula mediante transportadores tipo simporte específicos. sin embargo. El potasio cuando se encuentra a muy bajas concentraciones en el exterior se incorpora a la célula mediante un transportador tipo simporte activo. Esta despolarización de la membrana es transitoria. pero a altas concentraciones el K+ puede entrar por difusión mediante canales específicos de K+. NO3-. Y este gradiente de H+ se genera por la acción de las bombas de protones electrogénicas. el cual se mantiene en valores más negativos que los del potencial de equilibrio para el K+ por la acción de la bomba electrogénica. Se cree que el Na+ se transporta fuera de la célula mediante un transportador tipo antiporte Na+-H+ y que el Cl-.

Estas observaciones son las esperadas durante el cotransporte de glucosa y protones. debido a la entrada de H+ a la célula. Tomado de Taiz y Zeiger (1998) y Campbell & Reece (2002). Cuando se añade 50 mM de glucosa al medio. 44 . y al mismo tiempo se observa que el potencial de membrana disminuye. lo que indica que los protones “desaparecen” del medio externo. Con el tiempo. un aumento en la actividad de la bomba restablece los valores de pH y de potencial de membrana iniciales. se observa un aumento del pH.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes figura de la derecha se observa que antes de la adición de glucosa el pH del medio externo es de 5.7 y el potencial de membrana de -250 mV.

Esquema general con el que se pretende dar una visión general de los distintos canales iónicos y carriers presentes en el tonoplasto y plasmalema de las células vegetales.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2.22. Tomado de Taiz y Zeiger (2002) 45 .

Algunos estudios cinéticos del transporte de iones a través de la raíz muestran varias componentes saturables para un mismo soluto (ver Fig. Estos resultados se han interpretado asumiendo la presencia de diferentes transportadores para un mismo soluto en el mismo tejido. se ajusta a una curva de Michaelis-Menten: v= Vmax S/ (Km +S) donde S sería la concentración del ion. Así. en el transporte mediado por un carriers el transporte se satura. La constante Km. refleja las propiedades de un lugar de unión dado. en el medio externo. el transporte celular puede estudiarse mediante el empleo de la cinética enzimática ya que. y no la concentración del soluto.24). la velocidad de transporte. recientemente. Estos resultados parecen indicar que la toma de glucosa a bajas concentraciones se realiza mediante un transportador activo (transportador tipo simporte sacarosa-H+) y a concentraciones mayores. la sacarosa penetra en la célula a favor de su gradiente de concentración y.23B se muestra la incorporación de sacarosa por los protoplastos de soja en función de la concentración externa de sacarosa. en la difusión la velocidad de incorporación de una molécula es directamente proporcional a la concentración externa de la molécula transportada. cada uno de ellos con un valor de Km diferente para el soluto transportado (Epstein. se ha caracterizado el canal de la entrada de K+ y se han secuenciado y clonado los genes de los canales moduladores de la entrada de K+ (inward-rectifying K+ channels) y de los transportadores de tipo simporte. la toma de glucosa sigue una cinética lineal y no saturable.4. que equivale a la concentración de soluto que determina una velocidad de incorporación igual a la mitad de la velocidad máxima de transporte. su incorporación no se ve afectada por la presencia de inhibidores de la síntesis del ATP y. Una ventaja de las aproximaciones cinéticas es que abre nuevas perspectivas a la hora de analizar la regulación del transporte. Por el contrario. Sin embargo.ANÁLISIS CINÉTICOS PERMITEN ELUCIDAR LOS MECANISMOS DE TRANSPORTE Hasta ahora hemos descrito el transporte celular en términos energéticos. A concentraciones superiores a ésta. parece ser que el transporte no saturable se podría llevar a cabo mediante un transportador de baja afinidad. 1972). En general conviene tener en cuenta que el transporte de un ion puede ser tanto activo como pasivo cuando se analiza un amplio rango de concentraciones para un soluto dado. o soluto. 2. 2.. En la Figura 2. por tanto. La inhibición de la síntesis de ATP bloquea el transporte saturable pero no afecta al lineal. Vmax hace referencia a que el lugar de unión del transportador está siempre ocupado. la que se convierte en el factor limitante del proceso.23A) y es la concentración del transportador. es decir tiende a una velocidad máxima (Vmax) que no puede excederse y que es independiente de la concentración del soluto. El sistema de transporte de alta afinidad responsable de la toma de K+ a bajas concentraciones parece estar mediado por un transportador secundario activo tipo simporte que incorporaría K+ junto con H+ y que también 46 . ligado al soluto (ver Fig. el transporte mediado por proteínas transportadoras o carriers implica una unión y una disociación de los solutos al “sitio activo” de las proteínas. En el caso del K+. v. La incorporación aumenta bruscamente con la concentración y comienza a saturarse a una concentración de 10 mM. Es decir. como hemos visto.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes 6.

típica de un transportador o carriers. debido a la unión del soluto a transportar con el carriers. probablemente un transportador de baja afinidad por el substrato. la velocidad de incorporación de la sacarosa por las células de soja muestra una cinética saturable. El tipo de transporte de un soluto puede cambiar en función de la concentración de éste en el medio (derecha). a bajas concentraciones (1 a 10 mM). Por otra parte. Sin embargo. lo que sugiere la existencia de otro tipo de transportador de sacarosa. El transporte mediado por un transportador muestra cinéticas de saturación. A concentraciones de sacarosa superiores. La importancia fisiológica de este sistema de transporte que utiliza el gradiente de potencial electroquímico favorable a la entrada de Na+ para impulsar la incorporación de determinados nutrientes esenciales está aún por determinar. Observada Predicha por la cinética de Michaelis-Menten Concentración sacarosa (mM) Figura 2. luego.23. el transporte de baja afinidad del K+ se explicaría de forma más adecuada si se considera que la toma de K+ se realiza a través de un canal iónico. como inicialmente se pensaba. análisis cinéticos detallados del sistema de transporte de baja afinidad (toma de K+ a altas concentraciones de K+) revela que la velocidad de incorporación de K+ no es saturable.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Velocidad Carriers Difusión Concentración externa del soluto a transportar Velocidad de incorporación de sacarosa (nmol x 106 células x h) permite la entrada Na+ en lugar de H+. que codifica un transportador de alta afinidad por el K+ y que incorpora K+ en cotransporte con Na+. Recientemente. lo que se observa es una velocidad de incorporación mayor y que ésta aumenta de forma lineal durante un amplio rango de concentraciones (50 mM). si el transporte de sacarosa se llevara a cabo con este transportador la velocidad máxima sería de 57 mol por 106 células por hora pero. Por ejemplo. 47 . se ha aislado un gen en trigo denominado HKT1. la difusión a través de un canal iónico es directamente proporcional a la concentración del soluto transportado (izquierda). Tomado de Taiz y Zeiger (2002).

Sin embargo. El transporte de potasio en las raíces de cebada muestra dos fases diferenciadas. entonces se induce la formación de un segundo transportador de sulfato de elevada afinidad capaz de “trabajar” de forma efectiva aun a concentraciones de sulfato micromolares. sería un sistema de transporte de alta afinidad. Se han observado cinéticas de absorción parecidas a las mostradas en la Fig.- TRANSPORTE DE IONES EN LA RAÍZ Los nutrientes minerales absorbidos por la raíz son transportados a la parte aérea arrastrados por la corriente transpiratoria a través del xilema. Este tipo de cinética de incorporación se denomina cinética bifásica y sugiere la existencia de dos mecanismos para el transporte de potasio. también lo es el movimiento posterior de los iones minerales desde la superficie de la raíz al córtex y. Así por ej. continuamente disponible).02 a 0. No sólo la toma inicial de nutrientes es un proceso muy regulado y altamente específico.03 mM y. a continuación. El transporte iónico a través de los distintos tejidos que constituyen la raíz obedece las mismas leyes biofísicas que gobiernan el transporte celular. sería un sistema de baja afinidad (que puede o no mostrar cinéticas de saturación) debido a la difusión del potasio a través de un canal. activo.24. A continuación. al xilema.24 para otros cationes y aniones. El primero. el sistema de absorción es de baja afinidad y constitutivo (se expresa siempre y por tanto. 7. Si el contenido de sulfato en el medio desciende hasta valores inferiores al umbral crítico (que causan deficiencia).. de tipo simporte y con un valor de Km para el potasio entre 0. la anatomía de las raíces impone ciertas restricciones especiales al movimiento de los iones.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2. el segundo. Tomado de Taiz y Zeiger. cuando la raíz dispone de gran cantidad de sulfato. 1998. vamos a discutir las rutas y los mecanismos 48 . 2.

Principales compartimentos presentes en las células vegetales y rutas de transporte. los iones pueden desplazarse a lo largo de un tejido a través de las paredes celulares sin entrar en 49 . Compartimentos: célula Pared celular citosol vacuola plasmodesmos Simplasto: espacio constituido por el citoplasma de las distintas células que presenta continuidad a través de los plasmodesmos Ruta Transmembrana.25. Tonoplasto Plasmalema Compartimentos: tejidos Simplasto Apoplasto Rutas de transporte lateral Apoplasto: espacio extraprotoplasmático constituido por las paredes celulares y los espacios aéreos y que puede presentar continuidad en el seno de un tejido apoplasto simplasto Ruta Simplástica: las sustancias que entran al citoplasma. La compleja estructura de los plasmodesmos probablemente regula esta vía de transporte. Cuando hablamos del transporte de pequeñas moléculas. simplástica y apoplástica. 7. Conviene tener en cuenta que un soluto puede “pasar” de una ruta de transporte a otra. ARNm y otras moléculas grandes como los virus) Ruta Apoplástica. transmembrana.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes involucrados en el movimiento radial de los iones desde la superficie de la raíz a los vasos conductores del xilema. Los solutos y el agua se mueven atravesando de forma reiterada el plasmalema y las paredes celulares.LOS SOLUTOS SE MUEVEN TANTO POR EL APOPLASTO COMO POR EL SIMPLASTO Hasta ahora. (Recordad que por esta vía se desplazan ciertas proteínas.. una vez que han atravesado el plasmalema.1. pueden desplazarse célula a célula vía plasmodesmos. la pared celular podemos considerarla como un entramado de polisacáridos y proteínas abierto a través del cual los nutrientes minerales pueden difundir fácilmente (ver Apéndice D: La pared celular). el citosol y las vacuolas son los principales compartimentos presentes en la mayoría de células vegetales. Debido a que todas las células vegetales están rodeadas por la pared celular. B) A nivel tisular existen dos compartimentos: el apoplasto y el simplasto. El agua y los solutos disueltos en ésta difunden a través de las paredes celulares y de los espacios aéreos Figura 2. en nuestra discusión del transporte celular de iones no hemos incluido a la pared celular. Esto va a proporcionar a los tejidos u órganos de las plantas tres rutas para el movimiento radial de solutos. También pueden penetrar al interior de la vacuola. El tráfico de sustancias entre estos compartimentos está regulado por proteínas transportadoras específicas (canales y carriers) presentes en el plasmalema y en el tonoplasto. A) La pared celular.

forman una estructura denominada plasmodesmos. Lámina media plasmalema Partículas proteicas adheridas a la membrana externa del RE Pared celular tonoplasto Retículo endoplásmico (RE) Citoplasma vacuola plasmodesmos Partículas proteicas presentes en la Desmotúbulo cara interna del RE que forman el denominado “central rod” y por tanto. permea libremente tanto en la célula como en la pared celular.5 Podemos determinar el volumen del apoplasto de un tejido simplemente comparando la toma de agua marcada con 3H y de manitol marcado con 14C.26. constituyen un simplasto único. Dicho transporte puede controlarse. Diagrama ilustrativo de cómo los plasmodesmos conectan el citoplasma de células adyacentes.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes el interior de célula (ver figura 2. El agua. regulando el tamaño de los microcanales y permitir la entrada de moléculas de mayor tamaño. Tomado de Taiz y Zeiger.25). los plasmodesmos carecen de lumen Partículas proteicas adheridas a la membrana externa del RE Partículas proteicas “incrustadas” en la membrana plasmática que rodea al plasmodesmo “Central rod” Plasmalema Partículas proteicas “incrustadas” en la membrana plasmática “Manga” citoplásmica Microcanales Sección transversal de un plasmodesmo Figura 2. el citoplasma no aparece como un en espacio individualizado 5 Apoplasto. Este espacio continuo constituido por todas las paredes celulares se denomina espacio libre o apoplasto. 2000. Al hallarse unidos entre sí los protoplastos de las células vivas por medio de plasmodesmos. Los plasmodesmos son puentes citoplásmicos (rodeados por membrana) que atraviesan las paredes celulares y que permiten la comunicación entre células adyacentes. Las medidas de este tipo normalmente muestran que entre el 5 y el 20 % del volumen de un tejido vegetal está ocupado por las paredes celulares. 2002 y Buchanan et al. El movimiento de sustancias a través de los plasmodesmos se denomina transporte simplástico.. El apoplasto puede definirse como el espacio externo a la membrana plasmática donde se encuentra la pared celular y que puede presentar continuidad en el seno de un tejido 50 . El manitol es un azúcar-alcohol no permeable que se equilibra en el espacio libre pero que no puede entrar a la célula. Los plasmodesmos son conexiones citoplasmáticas que atraviesan la pared celular entre células contiguas. junto con dominios específicos del retículo endoplásmico. por el contrario. Como resultado de estas uniones. La membrana plasmática de las células vegetales.

en la cual se representan los rasgos más distintivos de la estructura primaria de una raíz. la interna corresponde al desmotúbulo. Así. se ha demostrado que el agua. los iones y los pequeños solutos pueden moverse célula a célula libremente a través de los plasmodesmos. que parece ocurrir por un proceso análogo al transporte de moléculas entre el núcleo y citoplasma. selectividad y afinidad de los canales y transportadores localizados en el plasmalema de las células de la endodermis determinan. Si se observa un plasmodesmo en sección transversal con el microscopio electrónico de transmisión (MET). Estudios con microscopía electrónica de alta resolución han demostrado que hay proteínas globulares de enlace ("linking proteins") incrustadas en la membrana plasmática que rodea al plasmodesmo. Teniendo en cuenta todo lo anterior. en última instancia. se puede apreciar que el apoplasto forma una sistema continuo desde la superficie de la raíz hasta el córtex pero. una barrera infranqueable en el camino hacia el xilema: tanto el agua como los nutrientes deben obligatoriamente atravesar el plasmalema de las células que componen la endodermis. en el límite entre el el córtex y el cilindro vascular (la estela) se encuentra una capa de células especializadas: la endodermis. Los plasmodesmos son poros cilíndricos de 20-60 nm de diámetro. se advierte que están constituidos por una doble membrana: la externa corresponde a la membrana plasmática y. transmembrana o simplástica .LOS IONES SE MUEVEN POR LAS RAÍCES TANTO POR EL SIMPLASTO COMO POR EL APOPLASTO Si nos fijamos en la Figura 2. si no que se origina un compartimento continuo.2. cada célula posee su propia membrana y la comunicación célula a célula se lleva a cabo mediante puentes proteicos denominados unión en hendidura o gap que permiten el paso directo de pequeñas moléculas entre células. 51 . de manera que el desmotúbulo no tiene lumen (Fig. La permeabilidad. dada su hidrofobicidad. En células animales por el contrario. El transporte entre célula y célula está limitado a la "manga citoplasmática" que rodea al desmotúbulo. Pero..Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes e independiente de las células contiguas. 2. que es un túbulo del retículo endoplasmático. Estas proteínas dividen la manga citoplasmática en microcanales que determinan el tamaño máximo de las moléculas que pueden desplazarse por difusión al mismo tiempo que establecen el tráfico selectivo de macromoléculas. 7. 2. Los componentes de la cara interna de la biomembrana que forma el desmotúbulo se fusionan entre sí. un ion puede desplazarse en dirección radial en la raíz siguiendo la ruta apoplástica . En consecuencia no sólo las paredes celulares forman un espacio continuo en el seno de un tejido.27.25). interconectado vía plasmodesmos. Las paredes radiales y tangenciales de la endodermis están impregnadas con lignina y suberina y estos depósitos hidrofóbicos se conocen como banda de Caspari. mediante inyección de colorantes y estudios de resistencia eléctrica de las células que contienen gran número de plasmodesmos. y en la cara externa del desmotúbulo. que recibe el nombre de simplasto (Fig. Entre ambas membranas hay un espacio citoplásmico denominado manga citoplasmática.26). qué solutos y a qué velocidad se incorporan o se liberan. La existencia de la banda de Caspari en las células de la endodermis supone.

los iones deben entrar al simplasto antes de entrar a la estela debido a la presencia de la banda de Caspari. por la diferencia de concentración osmótica entre el cilindro central y el cortical y la existencia de una barrera semipermeable de paso obligatorio en el 52 . Banda Endodermis de Caspari Rutas simplástica y transmembrana periciclo xilema floema córtex epidermis Ruta apoplástica Figura 2. el ion vuelve a entrar al apoplasto y difunde hacia las traqueidas o los elementos conductores del xilema. b) permite que la planta pueda mantener una concentración iónica más elevada en el xilema que en la solución del suelo que rodea a la raíz.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes independientemente de la ruta seguida. (Recordad que las barreras de semipermeabilidad celular no están en la pared celular. simplástica y apoplástica. Movimiento radial de iones a través de la raíz. Es decir. Finalmente. La existencia de la banda de Caspari interrumpe el transporte vía apoplasto y los solutos deben atravesar el plasmalema de la endodermis. difunde de célula a célula hasta llegar al xilema. pues las fases lipídicas de las membranas biológicas son barreras efectivas contra la difusión no selectiva de iones hacia el cilindro central de la raíz. Esto desempeña una función decisiva. por la ruta apoplástica y. las cualidades transportadoras de una biomembrana se determinan a partir de las proteínas transportadoras que contiene). Una vez que el ion ha entrado a la estela a través de las conexiones simplásticas de la endodermis. El movimiento radial del agua y los nutrientes a través de la raíz puede seguir tres rutas: transmembrana. sino en las membranas y que. Tomado de Taiz y Zeiger (2002). la de barrera selectiva. la raíz como un todo. es decir hacia el suelo.27. La presencia de la banda de Caspari es de gran importancia ya que a) impide que el ion pueda regresar mediante difusión hacia el exterior.

algunas plantas como las confieras no desarrollan presión de raíz. desde la estela a los elementos conductores del xilema para que puedan ser transportados hacia la parte aérea de la planta. Las gotas de agua similares al rocío que aparecen a primeras horas de la mañana. cuando el movimiento de agua a través de la planta es más rápido. o del córtex o de las células endodérmicas. y el agua se desplaza hacia dentro del xilema por ósmosis.LAS CÉLULAS PARENQUIMÁTICAS PARTICIPAN EN LA CARGA DEL XILEMA Una vez que los iones se encuentran en el simplasto deben pasar. El proceso por el cual los iones salen del simplasto y entran en las células conductoras del xilema se denomina carga del xilema. suele ser baja. Por lo que su presencia no está generalizada y su intensidad. La presión radicular es menos efectiva durante el día. que se genera en el xilema de la raíz y empuja el agua verticalmente hacia arriba. Esta presión no es suficiente para llevar el agua hasta la parte más alta de un árbol de gran porte. desde las células circundantes. los iones deben salir del simplasto al apoplasto y.3. en plantas de pequeño porte ponen de manifiesto la existencia de la presión radicular. De esta manera. como ocurre durante la noche. y podrían salir de las células vivas de la estela (posiblemente debido al poco oxígeno disponible en el interior de la raíz. recordad que es necesario el ATP para mantener la actividad de las bombas primarias y que un 6 Otra de las consecuencias de la presencia de la endodermis en la raíz es la existencia de la presión radicular. Según este modelo de difusión pasiva.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes transporte radial (endodermis). Como los elementos conductores del xilema son células muertas.. gota). como hemos visto a lo largo de este módulo los iones pueden “entrar” al xilema mediante difusión que. Estas gotas no son rocío sino que proceden del interior de la hoja. Aunque en este proceso de carga del xilema pasiva podría haber alguna etapa (sólo una) en la que pudiera haber un requerimiento de energía metabólica. variable según las especies. que fuerza al agua y a los iones disueltos a subir por el xilema hacia arriba. el aumento de concentración dentro del xilema causa una disminución del potencial hídrico del mismo. 7. este fenómeno lo conocemos con el nombre de gutación (del latín “gutta”. debido a la transpiración. La carga del xilema es un proceso que no se conoce todavía con exactitud a pesar de haber sido objeto de numerosos estudios. Esta etapa en la que se podría ser necesaria una fuente de energía metabólica sería el paso de los iones a través de la membrana bien en las células epidérmicas. 53 . los iones se transportaría pasivamente hacia la estela vía simplasto a favor de su gradiente electroquímico. actúa físicamente como un osmómetro y puede generar así una presión hidrostática o presión radicular 6que puede facilitar la toma de nutrientes. ¿Cómo pueden llegar los iones al xilema? Pues. atravesar la membrana plasmática por segunda vez. Cuando la transpiración es muy reducida o nula. y reducir la cavitación. como sabemos es un proceso pasivo. Dado que los tejidos vasculares en la raíz están rodeados por la endodermis. Se crea así una presión positiva llamada presión de raíz (presión radicular). las células de la raíz pueden aún secretar iones dentro del xilema. en condiciones de baja transpiración. más aún. los iones no tienden a salir del xilema.

el potencial disminuye en el xilema. El incremento substancial de potencial electroquímico para el K+ y el Cl. Cl-. En el eje horizontal se muestran los diferentes tejidos que se encuentran en una sección transversal de la raíz.entre la solución externa y la epidermis indica que los iones son incorporados en la raíz mediante un mecanismo de transporte activo. Entre los trabajos que apoyan esta hipótesis de difusión pasiva se encuentran los llevados a cabo por Bowling y colaboradores. lo que indica que los iones son transportados al xilema mediante difusión a favor del gradiente de potencial electroquímico. se observa una caída en el potencial electroquímico de los iones estudiados en el punto de liberación al xilema (ver Fig. 2. las raíces se sumergen en una disolución 1mM de KCl y 0.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes cambio en la actividad de éstas provoca un cambio en el potencial de membrana que puede afectar a la actividad de los canales iónicos) a las células conductoras del xilema. Tomado de Taiz y Zeiger. y NO3. alto Potencial electro químico Cloro (Cl-) Potasio (K+) bajo Solución exterior Epidermis Córtex Endodermis Parénquima xilemático Elementos del xilema Banda de Caspari Tejidos radiculares Figura 2.1 mM de CaCl2.28). Estos investigadores determinaron el potencial electroquímico de varios iones en diferentes tejidos radiculares de maíz usando microelectrodos selectivos (ver Fig. Para determinar el potencial electroquímico. Diagrama ilustrativo de los perfiles del potencial electroquímico del potasio y el cloro en raíces de maíz. Esto provoca un aumento de su potencial electroquímico.28). El electrodo de referencia se coloca en la solución que baña la raíz y el electrodo de medida (específico para ion) se introduce en los diferentes tejidos radiculares. SO42-.28.se toman de forma activa en las células epidérmicas y corticales. De hecho. lo que facilitaría su transporte pasivo vía simplasto a favor del gradiente de potencial desde estos tejidos hasta el xilema.2. Por el contrario. Observaron que algunos iones como K+. Na+. 54 . 1998.

con cicloheximida. inhiben el proceso de carga del xilema pero no afectan a la toma de iones en el córtex. o con una citoquinina. Estos resultados sugieren que la salida de iones de las células de la estela se regula de forma independiente a la toma de éstos por las células corticales. se ha visto que la toma de iones en el córtex y los procesos de carga del xilema operan de forma independiente. Podemos medir la relación entre ambos procesos simplemente colocando un segmento de raíz entre dos compartimentos y añadiendo un ion radiactivo en uno de ellos (el compartimento A en este caso). 1979). En cebada. Con un tipo de “dispositivo” como el que aparece en la Figura 2. es posible realizar medidas simultáneas de la toma de iones dentro del citoplasma de las células epidérmicas o corticales y de la carga del xilema. La membrana plasmática de las células parenquimáticas del xilema contiene bombas primarias de protones. no es un simple proceso de difusión pasiva. 1998. Tomado de Taiz y Zeiger. Estudios bioquímicos recientes sugieren que las células parenquimáticas del xilema desempeñan un papel crucial en el proceso de carga del xilema. acuaporinas. Este descubrimiento sugiere que el flujo de iones de las células parenquimáticas del xilema a los elementos conductores. Figura 2.29.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Sin embargo. existen en la literatura otros estudios que indican que la etapa final de la carga del xilema se lleva a cabo mediante un proceso activo en la estela (Lüttge y Higinbotham.. La actividad de estos canales está regulada tanto por el potencial de membrana como por la concentración de calcio citosólico (De Boer y Wegner. y una gran variedad de canales iónicos tanto de entrada como de salida de iones. 1997). se han identificado dos tipos de canales para la salida de cationes en las células parenquimáticas del xilema: canales específicos para la salida de K+ y canales no selectivos para la salida de cationes. benziladenina. Medida de la toma de iones por la raíz y de la carga del xilema. y la velocidad de aparición en el compartimento B proporciona una medida de la carga del xilema. Mediante tratamientos con inhibidores y hormonas vegetales. La velocidad de desaparición del elemento en el compartimento A proporciona una medida de la toma de ese ion. Así por ejemplo. por ej.29. 55 . los tratamientos con inhibidores de la síntesis proteica. sino que se encuentra bajo un estricto control metabólico.

que puede ser importante durante la etapa de rápido crecimiento. Cutícula Capa cuticular Capa de pectina Pared celular primaria Pared celular secundaria Plasmalema Citoplasma ectodesmos Figura 2. sobre todo debido a las altas exigencias tecnológicas de los cultivos. lo que implica un manejo óptimo y un estricto control de la variable nutricional. B. 56 . cobre es más efectiva y económica que la aplicación a través del suelo. Es frecuente que en la superficie cuticular aparezcan excrecencias céreas ( C). Estructura de la pared externa de una célula epidémica mostrando la ordenación de los ectodesmos (en rojo) y la influencia de los agentes surfactantes en la adhesión de las gotas de solución a la superficie. En los últimos años. la aplicación foliar de nutrientes minerales como el hierro.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos 8.- Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes ABSORCIÓN FOLIAR DE NUTRIENTES La raíz es la principal vía para la absorción de nutrientes pero. A. La nutrición foliar puede reducir el periodo de retardo (lag) entre la aplicación y la toma del nutriente por la planta. está adquiriendo gran relevancia la técnica denominada fertilización foliar. retención de una gota con surfactante (trazo verde). retención de una gota sin surfactante (trazo amarillo). ya que éstos son adsorbidos por las partículas del suelo y por tanto. éstos también pueden ser absorbidos por las hojas. Puede también evitar el problema de toma limitada de nutrientes en el suelo. muy particularmente para los micronutrientes.30. Por ejemplo. Tomado de Guardiola y García (1990). manganeso. En la superficie de las paredes de las células epidérmicas se deposita una capa especial compuesta por sustancias lipídicas denominada cutícula. están menos disponibles.

Esta diferencia de voltaje. se genera un potencial eléctrico denominado potencial de difusión.2. Los transportadores se unen al soluto en un lado de la membrana y lo liberan en el otro lado. entre las que se incluye el gradiente de concentración. 9. El transporte de solutos a favor del gradiente químico (i. La especificidad del transporte viene determinada por las propiedades de los canales y de los transportadores. se integran en una expresión conocida como potencial electroquímico. Los canales iónicos son proteínas transportadoras que atraviesan la membrana formando poros por los cuales los solutos difunden a favor de su gradiente de potencial electroquímico. Cuando los cationes y los aniones atraviesan la membrana a diferentes velocidades. También los nutrientes pueden incorporase a través de los ectodesmos. cambian el potencial de membrana del valor creado mediante difusión. Las bombas electrogénicas.30). Aunque la toma a través de los estomas podría ser una vía de entrada de nutrientes se cree que la arquitectura del poro estomático impide la penetración de líquidos (Fig. Las fuerzas conductoras que permiten el transporte biológico. el gradiente de potencial eléctrico y la presión hidrostática. transportadores o carriers y bombas primarias. Todos los potenciales de difusión a través de la membrana se recogen en la ecuación de Goldman. La extensión con la cual las membranas permiten o restringen el movimiento de una substancia se denomina permeabilidad.- RESUMEN Las plantas intercambian solutos con el medio que las rodea y entre los diferentes tejidos y órganos que forman el cuerpo de la misma.30). las cuales llevan a cabo el transporte activo y transportan una carga neta. Tanto el transporte a nivel celular como el transporte a largas distancias está controlado por las membranas celulares. se ha visto en todas las células vivas y. que reducen la tensión superficial. Las membranas contienen proteínas especializadas. Para cada ion. se genera por una distribución asimétrica de los iones dentro y fuera de las mismas. la relación entre la diferencia de voltaje a través de la membrana y la distribución de un ion en el equilibrio se describe mediante la ecuación de Nernst. difusión) se conoce como transporte pasivo. El movimiento de solutos en contra del gradiente de potencial electroquímico se conoce como transporte activo y requiere energía metabólica. son incorporados a las células o retransportado a otras partes de la planta.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes La toma de nutrientes por las hojas es más efectiva cuando la solución nutritiva permanece en la hoja como una delgada película.. o potencial de membrana. La composición de la membrana y las propiedades químicas de los solutos son los principales determinantes de la permeabilidad de la membrana. El movimiento de los nutrientes a la planta se cree que se realiza mediante difusión a través de la cutícula y penetración al apoplasto del mesófilo de donde. que facilitan el transporte de solutos. del mismo modo que los nutrientes transportados por el xilema. La ecuación de Nernst muestra que la diferencia de concentración de un ion entre dos compartimentos está equilibrada con la diferencia de voltaje existente entre dichos compartimentos.e. como el detergente Tween 80. Para conseguir esta capa fina se suele añadir a las soluciones nutritivas surfactantes químicos. 57 . canales iónicos. canales hidrofílicos de naturaleza extracitoplásmica que facilitan el intercambio entre el espacio interior de la hoja y el exterior (Figura 2.

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Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

En las plantas, una familia de bombas de protones, H+-ATPasas proporcionan la
fuerza conductora primaria para el transporte de sustancias a través del plasmalema.
Otras dos bombas electrogénicas de protones actúan con este fin en el tonoplasto. Las
células vegetales tienen además ATPasas que bombean Ca2+ y que participan en la
regulación de la concentración del calcio intracelular y transportadores ABC (ATPbinding cassette) que usan la energía del ATP para transportar grandes moléculas a la
vacuola. El gradiente de potencial electroquímico generado por las bombas
electrogénicas de protones es utilizado para transportar otras substancias en un proceso
denominado transporte secundario. Estudios genéticos revelan la multitud de genes, y
sus correspondientes proteínas transportadoras, que dan cuenta de la versatilidad del
transporte en las plantas. Estudios electrofisiológicos llevados a cabo con la técnica del
patch clamp permiten estudiar un único canal, y por consiguiente, determinar la
permeabilidad y la actividad (gating) de un canal individual.
Los solutos se mueven entre las células bien por los espacios
extraprotoplásmicos (apoplasto) o por el citoplasma (vía simplasto). Los citoplasmas de
células vecinas están conectados por puentes citoplásmicos denominados
plasmodesmos, que facilitan el transporte por el simplasto. Cuando un ion entra en la
raíz, puede entrar al citoplasma de una célula epidérmica o puede difundir por el
apoplasto hasta el córtex donde es incorporado al simplasto (debido a la presencia de la
banda de Caspari en la endodermis) y, desde ese punto, transportado hasta el
parénquima xilemático del mismo modo que los iones de la ruta simplástica.

10.- APÉNDICES
10.1.- APÉNDICE A: RIZOTRONES

Para estudiar las raíces en el suelo se requiere de un mecanismo que nos permita
observarlas directamente. Ya en 1873, el botánico alemán Julius Sachs estudió el
sistema radicular usando un recipiente que tenía una cara de cristal. En la actualidad,
existen grandes laboratorios que disponen de cámaras subterráneas para la observación
del sistema radicular. Estas cámaras se denominan rizotrones (del Griego rhizos, que
significa “raíz” y tron, que significa “instrumento para el estudio”) y permiten analizar
el crecimiento radicular mientras la parte aérea de la planta se encuentra expuesta a las
condiciones naturales.
En un rizotrón, las raíces crecen en una cámara con paredes de vidrio. Las cuadrículas
en el cristal indican la profundidad del suelo. Los detalles de la morfología (tipo de raíz
y distribución) bajo condiciones naturales pueden observarse con unos microscopios
especiales, montados cerca de las paredes de cristal de la cámara. Además, puede
medirse la cinética del crecimiento radicular simplemente tomando fotografías a
diferentes intervalos de tiempo. Los fisiólogos vegetales utilizan esta información
(velocidad de crecimiento) y la relacionan con los cambios en la composición de
nutrientes y con los niveles de agua disponible en el suelo para calcular la actividad de
la raíces a lo largo del perfil del suelo.

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Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

Debido al elevado coste que conlleva construir y mantener un rizotrón, éstos se han
substituido por minirizotrones o periscopios de raíces. Los minirizotrones son tubos
transparentes de plástico que se introducen en el suelo con un cierto ángulo de
inclinación y cerca de la planta que quiere examinarse. Un dispositivo óptico como un
espejo inclinado con una lente de aumento o una pequeña videocámara se introduce en
el tubo para observar las raíces (ver figura). Este dispositivo proporciona información
sobre la densidad de raíces en el suelo, el crecimiento y fenología de la misma.

10.2.- APÉNDICE B: TÉCNICA DEL PATCH CLAMP

El uso de la técnica denominada patch clamp en el estudio de las membranas vegetales
ha permitido obtener información muy útil de las propiedades de las membranas que
difícilmente se podría haber obtenido con otras técnicas. Los estudios
electrofisiológicos convencionales con electrodos intracelulares son válidos para la
determinación, a nivel macroscópico, del potencial de membrana y otras propiedades
eléctricas de las células vegetales. Hubo que esperar a los años setenta para que el
examen aislado de los canales de iones se convirtiera en realidad. La técnica del
pinzamiento de membrana (patch clamp), por cuyo descubrimiento recibieron en Nobel
de Fisiología en 1991 los profesores Neher y Sakmann, permitió acceder a esos detalles
Esta técnica consiste en adherir (que no insertar) un electrodo de punta roma a la
superficie de la membrana y se puede registrar la corriente que entra en la pipeta a
través de la zona de la membrana unida a la célula o separada de ésta (Figuras 1 y 2). La
pipeta se llena con una solución de electrolito y, junto con la membrana, se coloca en
una solución que contiene un segundo electrodo. Posteriormente se mide el flujo de
corriente que se produce al aplicar una serie de voltajes entre los electrodos.
Obviamente, para aplicar esta técnica a células vegetales es necesario disgregar las
células del tejido y eliminar la pared celular mediante un tratamiento enzimático. Se

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Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes

obtiene de este modo una célula vegetal sin pared celular que se denomina protoplasto.
La adhesión del extremo de la micropipeta (con un diámetro de 1µm) con el protoplasto
se denomina sellado y debe tener una resistencia elevada, normalmente se sitúa
alrededor de 109 ohmios (GΩ), que permite reducir el ruido de fondo (debido a la
ruptura) lo suficiente para obtener una alta resolución de la corriente asociada al flujo
iónico de un solo canal.

Figura 1. Micrografía de una micropipeta empleada en la técnica del patch clamp unida
a la superficie de un protoplasto de una célula de la aleurona de cebada. Tomado de
Taiz y Zeiger, 1998.
Cuando se consigue un sellado firme se puede seguir succionando y quitar la
porción de membrana delimitada por la apertura de la micropipeta de forma que, el
interior de la célula se encuentra en contacto con la solución de la micropipeta (así se
pueden introducir diferentes soluciones dentro de la célula a través de la micropipeta).
En esta configuración denominada en “célula total” (ver Fig. 2), la corriente eléctrica
medida refleja la suma total del flujo iónico, tanto activo como pasivo, a través de la
membrana de la célula entera es decir, se puede registrar el comportamiento eléctrico de
la célula de forma similar a como se haría con un microelectrodo pero, podemos alterar
la composición química de la célula permitiendo que diferentes compuestos difundan
desde la pipeta al citoplasma.
Si en vez de succionar tiramos del electrodo se consigue una pequeña porción de
membrana, un parche, separada de la célula. Debido a que estas zonas de la membrana
contienen muy pocos canales, esta configuración (membrane patch configuration, ver
Fig. 2) permite estudiar los cambios bruscos de corriente provocados durante la apertura
y el cierre de unos pocos canales e incluso esta técnica es lo suficientemente sensible
para detectar los cambios en la conformación de un solo canal (Figura 3).
Como los protoplastos son esféricos es fácil determinar su volumen y la ausencia
de conexiones eléctricas con otras células facilita los cálculos de flujos iónicos por
unidad de área de membrana. Otra ventaja del método del patch clamp es la capacidad
para distinguir entre un suceso eléctrico de la membrana plasmática y del tonoplasto y la
posibilidad de controlar la composición tanto del citosol como la de la solución de
referencia.

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A esta propiedad de abrirse y cerrarse se denomina gating y la probabilidad de apertura refleja la actividad del canal. la permeabilidad de una membrana para un determinado ion es un valor integrado del número de canales. la actividad de los que se encuentran incluidos en el pequeño trozo que se retira. cuya pendiente es una medida de la conductancia del canal (Figura 3). 1998.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Figura 2. está determinada por su conductancia y por la magnitud de la fuerza ion motriz (AzcónBieto y Talón. los canales se denominan canales regulados por voltaje (voltage-gated-channels). Como cada tipo de canal tiene sus propios mecanismos de 61 . Esquema de la configuración de la pipeta y del protoplasto en un experimento de path clamp. Tomado de Taiz y Zeiger. se conoce que la entrada y la salida de K+ están reguladas por dos tipos de canales (Maathuis et al. La representación gráfica de la intensidad de corriente que atraviesa los canales en función del voltaje que se aplica da lugar a las denominadas curvas I-V (intensidad/voltaje). su conductancia y su actividad (gating) (Azcón-Bieto y Talón. 2000). 1997). Actualmente. Cuando el número de canales abiertos aumenta en respuesta al potencial de membrana. 2000).. El flujo de iones que pasa a través de los canales es. pues. En el primer caso se registra la actividad de los sistemas de transporte de toda la célula y. Los experimentos de patch clamp revelan que los canales están abriéndose y cerrándose continuamente a una velocidad altísima (Fig. en el segundo. La cantidad de iones que fluyen a través de un canal cuando está abierto. Los canales más abundantes en el plasmalema y en el tonoplasto son los canales de K+. 3). Los canales que modulan la salida de K+ (outwardrectifying channels) se abren sólo cuando el potencial de membrana favorece la salida mediante difusión de K+ y. se puede acceder al interior de la célula (whole-cell configuration) o retirar una pequeña porción del plasmalema (membrane patch configuration). un proceso discontinuo. los canales moduladores de la entrada de K+ (inwardrectifying channels) se abren sólo cuando el potencial de membrana favorece la entrada mediante difusión del K+. succionando o tirando. Asumiendo que el flujo de iones a través de la bicapa lipídica de las membranas es nulo. La pipeta debe quedar firmemente adherida al exterior de la célula (sellado) tras lo cual.

Registro continuo de la intensidad de corriente asociada al flujo de K+ a través de segmento de plasmalema durante un experimento de pinzamiento de membrana (patch-clamp). cuya pendiente es un estimador de la conductancia del canal. induce el cierre de canales de entrada de K+ y la apertura de canales de salida de K+ y de canales aniónicos. En este caso. hormonas. Además. el cierre del estoma (Azcón-Bieto y Talón. lo que determina la pérdida de turgencia de las células oclusivas y. toxinas. da lugar a las curvas I-V. se trata de un canal reversible. Por ejemplo.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes regulación. de forma independiente. La representación gráfica de la intensidad de corriente que atraviesa los canales. 62 . en función del voltaje aplicado. la célula puede controlar la velocidad de la difusión. en consecuencia. en respuesta a la oscuridad o al ácido abscísico. un aumento de la concentración de calcio citosólico en el citoplasma de las células oclusivas. tanto la de entrada como la de salida. La intensidad de corriente que atraviesa los canales es proporcional a la diferencia de potencial eléctrico aplicado a ambos lados de la membrana. Tomado de Azcón-Bieto y Talón ( 2000). 2000). la actividad de los canales es sensible a una serie de estímulos ambientales y fisiológicos como luz. etc. Figura 3.

Consideremos el siguiente ejemplo.. Mitchell introdujo el término “fuerza ion motriz”(Δp) para indicar la diferencia de potencial electroquímico entre los protones dentro y fuera de la célula. 2. R es la constante de los gases. F es la constante de Faraday. Es conveniente expresar Δp en unidades de potencial electroquímico. una célula bañada por una solución de 1 mM KCl y 1 mM de sacarosa. la expresión resultante para la fuerza ion motriz sería: Δp= ΔE – 59 ΔpH donde Δp se expresa en milivoltios. El paso de protones a favor de su gradiente eléctrico y químico puede emplearse para llevar a cabo un trabajo celular debido a que el cambio en la energía libre es negativo. o de cualquier otro compartimento. En las plantas. la expresión general para la fuerza protón motriz quedaría como: Δp= ΔμH+ = ΔE . y si sustituimos este valor. T es la temperatura absoluta.3. para ello hay que dividir ambos términos por la constante de Faraday: Δp= ΔμH+ = ΔE + 2. el gradiente de protones desempeña un papel crucial 1) en el transporte a través de las membranas (sobre todo del plasmalema y del tonoplasto) y 2) en la síntesis de ATP mediante fosforilación oxidativa y fotofosforilación (procesos que tiene lugar en las membranas internas de las mitocondrias y del cloroplasto).2. un potencial de membrana de –120 mV y como resultado del bombeo de protones por una H+-ATPasa la diferencia de pH entre el interior y el 63 .3RT/F= 59 mV.3 RT log ([H+]i/[H+]e) donde ΔμH+ es el gradiente de potencial electroquímico de protones.3 RT log ΔpH F F A 25°C. ΔE es el potencial de membrana. Si ΔpH se define como pHi-pHe. y los superíndices “i” y “e” hacen referencia al interior y al exterior de la célula respectivamente.3 RT log ([H+]i/[H+]e) F F Como pH=-log [H+].APÉNDICE C: TEORÍA QUIMIOSMÓTICA El término “quimiosmosis” fue introducido por el premio Nobel británico Peter Mitchell para explicar el acoplamiento entre el gradiente de potencial electroquímico de los protones a través de una membrana selectivamente permeable y la realización de trabajo celular. Este proceso puede representarse mediante la siguiente ecuación: ΔG= ΔμH+ = FΔE + 2.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes 10. el término log([H+]i/[H+]e) se puede simplificar a –(pHi-pHe).

Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes exterior de la célula de dos unidades de pH.μse = 2. la componente eléctrica y el gradiente de pH.APÉNDICE D. Este entramado de redes poliméricas que constituyen la pared celular actúa a modo de filtro. Δp. Así. que equivale a -120 mV. proteínas y fenoles en una solución ligeramente ácida. la concentración de K+ en el interior de la célula será de 100 mM. Hay que tener en cuenta que este gradiente de concentración tan elevado no se puede conseguir en los sistemas biológicos ya que las células cuentan con mecanismos que regulan la concentración de solutos y alcanzados ciertos niveles.238 mV ¿Cuánto potasio puede entrar en la célula usando este Δp? Debido a que el potasio tiene carga positiva y el potencial de la membrana dentro de la célula es negativo. Δµs utilizando las fórmulas descritas en la página 14 de este módulo es: Δ μs = μsi .4. intervendrán en su transporte las dos componentes del potencial electroquímico (es decir. 10. se ha usado para generar una asimetría de concentración de 1/100 para el potasio a ambos lados de la membrana. restringiendo 64 . El transporte de sacarosa en plantas se lleva a cabo mediante un transporte con protones de tipo simporte.3 RT log (Csi/Cse) log Csi/Cse = (FΔp)/( 2. Usando la ecuación de Nernst podemos calcular que en el equilibrio con una concentración externa de 1 mM de K+ y un ΔE= -120 mV. ΔμH+ = FΔp= 2. Esto es. podemos calcular que para una concentración externa de sacarosa de 1 mM (10-3 M).3 RT) Así. La pared celular confiere fuerza mecánica a la célula vegetal e impide la entrada de organismos potencialmente patógenos.3 RT log (Csi/Cse) En el equilibrio. la componente eléctrica de la fuera protón motriz. se bloquean los transportadores. un Δp de –238 mV se equilibrará con una concentración interna de sacarosa de 10 M. La fuerza protón motriz puede usarse también para la incorporación de sacarosa (un compuesto que no tiene carga) en contra de su gradiente de concentración. LA PARED CELULAR Y EL POTENCIAL DE DONNAN La pared celular es una estructura altamente organizada compuesta por una red tridimensional de microfibrillas de celulosa que se encuentran embebidas en una matriz constituida por polisacáridos (hemicelulosas y pectinas). el potasio puede entrar a través de los canales iónicos por la componente eléctrica de Δp. Como la sacarosa se cotransporta junto con los protones. lo que impide su transporte.. si empleamos la ecuación anterior obtendríamos: Δp =-120 mV-59(2) mV= . -238 mV en nuestro ejemplo).

5-5 nm. pero queda un gradiente 65 . La absorción en el AFS. por lo que se genera un potencial conocido como potencial de Donnan. Pero la pared posee algunas características que van a “limitar” la difusión de pequeñas moléculas..e. los ácidos galacturónicos de las pectinas y glucurónicos de los xilanos). no resulta influida de modo considerable por las bajas temperaturas ni por los inhibidores del metabolismo. bien porque es impermeable o bien porque se encuentre fijo. Además. la pared celular posee gran cantidad de cargas negativas residuales debidas a la presencia de grupos carboxílicos disociados (i. Figura 1. el ácido D-αgalacturónico. Los aniones fijados o con difusión dificultada (por ej. al no ser un proceso metabólico. se alcanza la neutralidad eléctrica. Si este proceso continúa hasta la neutralización de las cargas fijadas. Este potencial también aparece en el plasmalema y en todas aquellas fases capaces de mantener cargas no difundibles. Estas cargas netas no pueden difundir a través de la pared. Por ejemplo. El apoplasto haciendo referencia a la solución acuosa que se encuentra en él. Estructura del principal componente de las pectinas. grupos carboxilo disociados) atraen a los cationes libremente móviles de los alrededores. El AFS se subdivide en dos partes para las partículas cargadas: en el espacio libre acuoso (inglés. El diámetro de los poros de las paredes celulares oscila entre 3. o sea que las sustancias en el AFS pueden ser fácilmente arrastradas de nuevo al exterior.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes la difusión de las moléculas en función de su tamaño. WFS) los iones difunden en la solución que se encuentra en el apoplasto. El potencial de Donnan se define como el potencial de difusión que ocurre cuando un contraión no puede difundir a través de la membrana. que convierten a la pared celular en un intercambiador de iones (un sistema Donnan). se denomina “espacio libre aparente” (inglés apparent free space. en el espacio libre de Donnan (Donnan free space. con importantes consecuencias para la concentración de iones concretos en las cercanías de la membrana plasmática: los cationes se acumulan en la pared celular y los aniones son excluidos (Grignon y Sentenac. Es obvio que el tamaño de los poros no restringe la difusión de moléculas cuya masas molecular sean inferiores a 15 kDa. water free space. AFS).. 1991). el camino entre las microfibrillas es muy tortuoso y la difusión va a ser mucho más lenta que los procesos de difusión libre. se encuentran fijas en la misma. Los grupos carboxilo libres de los restos galacturosil pueden estar disociados y dar lugar a la formación de puentes de calcio. DFS) se fijan por acción de las cargas del apoplasto: AFS= WFS+DFS (ver figura 2).

es decir. mientras que para el Cl. Veamos lo expuesto con un ejemplo numérico. mientras que en el compartimento exterior. en el equilibrio. 66 . en un compartimento. debemos suponer que existe equilibrio de cargas es decir. Si llamamos Ce a la concentración inicial de K+e. hasta que las fuerzas motrices (gradiente de potencial por un lado. en el caso que esté fijado un anión. gradiente de concentración por otro) se equilibran. la fase de Donan en equilibrio con el entorno está siempre cargada negativamente. el Cl. los iones potasio han penetrado en contra de gradiente de concentración. e.x) (Ce . Así pues.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes químico para los cationes. y Ci a la concentración inicial de K+i y x a la cantidad de K+ = Cl. Imaginemos dos compartimentos separados por una fase de Donnan. por ejemplo P-. desde el ámbito más próximo (compartimento 1) al más remoto (compartimento 2) respecto a los aniones fijados.que difunde del compartimento e al i. los productos de los iones difundibles debe ser igual [K+]e [Cl-]e = [K+]i [Cl-]i o bien (Ce .difundirá desde el exterior. hacia el interior. tendremos (10 –x) (10 –x) = (5 + x) x 100 – 20x + x2= x2 + 5x x=4 En el equilibrio tendremos que la concentración del K+ será Ce= 6 y Ci= 9. difunden cationes de 1 a 2. existen iones difundibles como el K+ y el Cl-. es decir que el sistema no está en equilibrio.su Ce= 6 y Ci= 4. por ejemplo en el interior. Inicialmente. hay cargas negativas no difundibles. i.x) = (Ci + x) x Si consideramos que Ce = 10 y Ci= 5. se cumple que: [K+]e = [Cl-]e [K+]i = [P-]i En esta situación. e. El equilibrio resultante se llama equilibrio de Donan. Se caracteriza porque la fase de Donan que contiene los iones fijados no difundibles presenta una concentración total de iones superior a la fase externa y porque se mantiene un gradiente de potencial (potencial de Donan) cuya dirección viene dada por la carga del ion no difundible. que es igual a la de Cl-e. y los iones K+ le acompañarán por el efecto de cargas. por lo que los iones cloruro han penetrado a favor de gradiente.

en cambio los aniones (rojo) son impermeables y se encuentran exclusivamente en el compartimento 1. El potencial que se forma en una membrana selectivamente permeable se llama potencial de Donnan. Para los cationes (+). Los cationes difunden siguiendo su gradiente de concentración desde 1 hacia 2 hasta que el potencial eléctrico que se forma compensa al gradiente de concentración. Ambos compartimentos forman el espacio aparentemente permeable a los iones del apoplasto (AFS). Establecimiento de un potencial de Donnan.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes A 2 1 B Espacio libre de Donnan (DFS) Apoplasto Espacio libre acuoso Plasmalema Espacio libre aparente Espacio libre de Donnan (DFS) Figura 2. los compartimentos 1 y 2 son permeables. Tomado de Sitte et al. (2004). Distribución de Donnan. estableciéndose así distribuciones de donan. 67 . momento en que se deja de percibir un flujo neto de cationes. los iones disueltos en agua pueden permanecer en el espacio de acceso libre a la difusión (WFS) pero además también junto a las estructuras superficiales del plasmalema y junto a los polímeros cargados de la pared celular respectivamente (DFS). Representación esquemática del espacio libre aparente formado por el espacio libre de Donnan y el espacio libre acuoso en los apoplastos de las células vegetales. B. A. El gráfico ilustra que en los apoplastos.

Plant Physiol. Biblioteca Científica KenoGard. 2000 Campbell NA.. EE UU. F. Barcelona. 1999 Sitte P. Biochem Biophys Acta 2000. Sinauer Associates. 1990 Hopkins WC. Physicochemical & Environmental Plant Physiology. Sites of absorption and translocation of iron in barley roots. Academic Press.. 2000 Buchanan BB. Inc. Fundamentos de Fisiología Vegetal. Bresler E. Biology. Fisiología Vegetal I: Nutrición y transporte. Ephritikhine G. Second Edition. Principles of Plant Nutrition. Weiler EW. 1465:199-218 Bar-Yosef B. Maryland. New York. Second Edition. Introduction to Plant Physiology. Annu. Sci. Mineral Nutrition of plants: Principles and Perspectives. Plant Physiol. Sinauer Associates. Madrid. MA. Madrid. (eds). 1999 Mengel K. Zeiger E. 1998 Taiz L. Theoretical model and experimental determination of its parameters.A. Zeiger E. 36:783-800 Bloom AJ. Gruissem W. McGraw-Hill-Interamericana. 1995 Guardiola JL. 35ª Edición. Barcelona. 1978. Plant Physiology. Hanson JB. 1972 Flowers TJ. Yeo AR. John Wiley & Sons. Soil. Pearson Educations. 61:731-736 68 . Elementos de Fisiología Vegetal. 16:199-206 Clarkson DT. Vinauger M. Plant Physiology. Talón M. S.. Smart Dr.. Third Edition. 1993. Sixth Edition. Biochemistry & Molecular Biology of Plants. Inc. I. American Society of Plant Physiologist. Tracer and microautoradiographic studies. Strasburger. Maurel C. García-Luis A. San Diego.. Sunderland. 1987 Nobel PS. San Francisco. 1997 Gil-Martínez. Colcomber J. Second Edition. 2002 Específica del tema Barbier-Brygoo H. Bresinsky A. Publishers. Sunderland. Frachisse Jm.A. Kirkby EA. Anion channels in higher plants: functional characterization. Sanderson J. Ediciones Mundi Prensa. MA. Körner C. 1972.Oikos-Tau. International Potash Institute. Publishers. El transporte de solutos en las plantas. Bern. Plant Cell Environ. Editorial Síntesis. 2002 Epstein E. 31:239-298 Clarkson DT. Rev. Jackson LE. Jones RL. Uptake of phosphorus by plants growing under field conditions. Rockville. Inc. Reece JN.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes 11. Kadereit JW.. 1980. Kafkafi U. 2004 Taiz L. Madrid. Tratado de Botánica. Root growth as a function of ammonium and nitrate in the root zone.BIBLIOGRAFÍA General Azcón-Bieto J. molecular structure and physiological role. Wiley. The mineral nutrition of higher plants. Ediciones Omega S.

Springer. Wegner LH. University of California Press. Phosphorous efficiency of plants. 1998. 1977. 50:955-966 Dittmer HJ. Palmgren MG. 118:505-512 Lüttge U. 22:453-464 Fohse D. Sentenac H. Plant Cell Environ 2001. Soc. 1991. 2001. Wilk WK. Investigación y Ciencia. root hairs and cation-anion balance for phosphorus influx in 7 plant species. Exp. Bloom AJ. 6269 Sharp RE. The movement of ions to the xylem exudate of maize roots.Máster de Nutrición Vegetal en Cultivos Hortícolas Intensivos Módulo II: Absorción y transporte de nutrientes Colmer TD. Regulatory mechanisms of ion channels in xylem parenchyma cells. Investigación y Ciencia 1993. Plant Cell Environ. Rev. Etherton B. Villalba JM. 21:240-246 De Boer AH. Plant Physiol. Ion transport in roots: measurement of fluxes using ion-selective microelectrodes to characterize transporter function. 296:351-362 Grignon C. Li X. 2:236-243 Neher E. Berlín. Plant Soil 1991. 11:677-689 69 . Lon. 1992. Maathuis FJM. Tinker PB. 132:261-272 Greenwood DJ. Molecular mechanisms and regulation of plant ion channels. Bot 1997. Cur Opin Plant Biol 1999. Gaedeke N. pH and ionic conditions in the apoplast. Growth of the maize primary root at low water potentials. Hsiao TC. 2. Biol. Annu. Palmgren MG.fluxes along roots of rice and maize. Energization of plant cell membranes by H+-pumping ATPases: regulation and biosynthesis. 52: 817-845 Serrano R. Sanders D. Philos. Bowling DFG. 1990. Plant plasma membrane H+-ATPases: powerhouses for nutrient uptake. Müller-Röber B. Zimmermann. Plant Physiol. A quantitative study of the roots and root hairs of a winter rye plant (Secale cereale). Yermiyahu U. A comparison of net NH4+ and NO3. Role of growth and deposition of hexose and potassium in osmotic adjustment. Transport in plants. Plant Cell 1999. 2. Plasma membrane transport in context-making sense out complexity. Trans. Annu. Jungk A. Bot. Sakmann B. Am. Higinbotham N. Plant Mol. 24:1-14 Nye PH. 1979. 1937. Modelling of crop response of nitrogen fertilizer. Plant Physiol 1998. J. Solute movement in the soil-root system. Biol. J. Bomba de protones de la membrana vegetal. 48:441-449 Czempinki K. 14-22 Newman IA. La técnica del pinzamiento de membrana. 1971. 93:13371346 Sze H. Plant Physiol. Bot. Foster RJ. Exp. [Biol] 1982. Exp. Significance of root radius. Computation of surface electrical potencials of plant cell membranes. Mineral ion contents and cell transmembrane electropotentials of pea and oat seedling tissue. Plant Physiol. 42:103-128 Higinbotham N. Claassen N. Rev. CA. 1967. R. Berkeley. Bot 1999. J. Plant Mol. J. 24:417-420 Dunlop J. Rytwo G. 42: 37–46 Kinraide T.