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Objetivos

Relacionar el consumo de glucosa al cambio de pH
Interpretar el efecto de los inhibidores y los desacoplantes de la cadena de
transporte de electrones.
Describir como es que la glucosa genera cambios de pH.

Conclusión
Se observó un aumento en el pH debido al consumo de glucosa por la levadura ya
que libero hidrogeniones a la matriz extracelular de esta para utilizarlos para la
producción de ATP.
Análisis.
El desacoplante no inhibe directamente a cualquiera de los transportadores de
electrones de la cadena respiratoria.
Es por esto, que a pesar de la presencia del desacoplante en la levadura, el pH
del medio extracelular seguía bajando, porque la célula seguía produciendo ATP
por medio de las vías metabólicas anaeróbicas, y éste se hidrolizaba en la ATPasa
de la membrana plasmática para permitir el bombeo de protones.

y se observó que al agregar estas sustancias a la mezcla con levadura. Cuando estos electrones se transfieren al oxígeno molecular. Durante la práctica se utilizaron el dinitrofenol y la azida de sodio. esta diferencia puede explicarse por la forma en que actúa cada uno de estos compuestos en la fosforilación oxidativa. la cual los transfiere al oxigeno molecular para producir agua. estas donan sus electrones a la cadena. El dinitrofenol es un agente desacoplante que permite la continuación del transporte electrónico. A partir de este momento comienza la glucólisis. es transportado dentro de la mitocondria. Este proceso se denomina fosforilación oxidativa. Estos resultados reflejan lo planteado en la hipótesis. son moléculas ricas en energía que poseen un par de electrones con elevado potencial de transferencia. así que no puede salir de la célula una vez que ha entrado. por lo que el bombeo de protones estaba siendo intervenido de alguna forma.Puede observarse claramente una variación en el pH al comparar las tres graficas. el NADH y el FADH2 formados durante la glucólisis. La glucólisis es la ruta metabólica principal que permite la transformación metabólica de lashexosas en piruvato. pero impide la fosforilación de ADP a ATP. se libera una gran cantidad de energía. Este paso se realiza por dos razones: la glucosa-6-fosfato no puede difundirse a través de la membrana porque no es sustrato de los transportadores de glucosa. observándose una disminución gradual del pH que es mas pronunciada en el experimento 3 en el que se uso el inhibidor azida de sodio. desacopla a las reacciones que producen energía de las que la conservan [4]. es decir. y sirve de base para la síntesis anaeróbica de ATP en muchas células. facilitando así su metabolismo posterior. es decir hay un consumo constante y disminución en la concentración de glucosa lo que se deduce por la disminución del pH el cual indica un aumento en la concentración de H+ y por tanto la hidrólisis de la glucosa. Cuando los hidrógenos son sustraídos de estos por la acción de las deshidrogenasas. la disminución de pH no era tan evidente. el cual genera un gradiente de concentración de protones H+ a través de la membrana la descarga de este gradiente se encuentra acoplada enzimáticamente a la formación de ATP a partir de ADP y Pi (el proceso inverso a la hidrólisis de ATP). el cual entra en el ciclo de Krebs de la matriz mitocondrial. La fosforilación oxidativa resulta influida por cierto número de agentes químicos. Además se observo también en los resultados que la azida de sodio hacia que la disminución del pH en comparación con el dinitrofenol fuera mayor. oxidándose a CO2 y generando NADH+ + H y FADH2 para la cadena respiratoria [3]. Su característica es que estimula la velocidad de consumo de oxígeno de las mitocondrias intactas en . La transferencia del grupo fosforilo del ATP al grupo hidroxilo del carbono 6 de la glucosa está catalizada por la enzima hexoquinasa[2] . La glucosa entra en las células por medio de proteínas transportadoras específicas y tiene un destino principal: fosforilarse mediante el ATP y formar glucosa-6-fosfato. en la oxidación de ácidos grasos y en el ciclo del ácido cítrico. donde el complejo enzimático piruvato deshidrogenasa lo transforma en Acetil-CoA. el dinitrofenol mantiene casi que constante el pH en comparación con la azida de sodio. si se observan los datos (tablas 1 y 2) y las graficas (grafica 2 y 3). además la adición del grupo fosforilo comienza a desestabilizarla. El piruvato procedente de este proceso y otros azúcares relacionados y que tiene lugar en el citosol. Consiguientemente.

y éste se hidrolizaba en la ATPasa de la membrana plasmática para permitir el bombeo de protones.Los agentes desacoplantes. que a pesar de la presencia del desacoplante en la levadura.oxidorreductasa[5] .ausencia de ADP. no desacoplan la fosforilación glucolítica ni afectan. la actividad ATPásica de la mitocondria es muy débil. En este caso. en lugar de ello. es decir. Éste impide tanto la estimulación del consumo de oxígeno por el ADP. Sin embargo. Además provoca en aquellas un gran aumento de actividad hidrolítica sobre el ATP. Los agentes desacoplantes actúan rompiendo o eliminando un intermediario o un estado de energía elevada generado por el transporte electrónico. o sea el estado producido por el transporte electrónico [5]. impiden el mecanismo de formación de ATP que utilice el intermediario de energía elevada. a otras reacciones celulares que no sean la fosforilación oxidativa. porque la célula seguía produciendo ATP por medio de las vías metabólicas anaeróbicas. Es por esto. este tipo de agentes no inhiben directamente a cualquiera de los transportadores de electrones de la cadena respiratoria. el pH del medio extracelular seguía bajando. en este caso. impidiendo el transporte de los electrones hacia el oxígeno. de modo directo. la azida de sodio actúa a nivel del Complejo IV citocromo c-oxidasa haciendo un enlace irreversible con el grupo hemo. mientras que en ausencia de este agente desacoplante. como la fosforilación de ADP aATP. el dinitrofenol actúa a nivel del complejo I donde impide el paso de los 2 electrones del NADH a la ubiquinona . . La azida de sodio es un inhibidor de la fosforilación oxidativa. sintetiza ATP en vez de gastarlo.