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de La Consolidacin

del Mar
Grau
REACCIONES DE Ao
HEMAGLUTINACIN
DIRECTA
E de
INDIRECTA
(Grupo ABO y Rh)
Alumna: Livia Quispe Huamn

PRCTICA 5

REACCIONES DE HEMAGLUTINACIN
DIRECTA E INDIRECTA (Grupo ABO y
Rh)
PGINA 1

Livia Quispe Huamn| Asignatura:


Inmunologa |
Cristhian Villar

/ Docente:

REACCIONES DE HEMAGLUTINACIN DIRECTA E INDIRECTA (Grupo ABO y Rh)


Alumna: Livia Quispe Huamn
PRCTICA 5
INTRODUCCIN
La hemaglutinacin es una reaccin de aglutinacin, especficamente involucrando al
eritrocito como el portador del antgeno o del anticuerpo. La determinacin de grupo
sanguneo se basa en la reaccin antgeno-anticuerpo, la cual se puede llevar a cabo
de forma directa (determinando los antgenos presentes en la superficie del eritrocito del
paciente al contacto del reactivo anti A, B, AB o D) o indirecta (determinando los
anticuerpos presentes en el suero del paciente y enfrentndolo a eritrocitos conocidos
(A, B o AB).

OBJETIVOS
-

Comprender las bases tericas de la reaccin de aglutinacin para la


determinacin de grupo sanguneo, mtodo directo e indirecto.

Conocer los diferentes factores que contribuyen a la reaccin.

Determinar grupo sanguneo O

MARCO TEORICO
El grupo sanguneo son los tipos en que se ha clasificado la sangre de las personas en
relacin con la compatibilidad de los hemates y suero de otro individuo que la recibe.
Segn la clasificacin de Landsteiner (clasificacin hoy universal) y se denominan: O, A,
B, AB. Se caracterizan por las diferentes combinaciones de dos aglutingenos
existentes en los glbulos rojos y de dos aglutininas contenidas en el suero.
Los eritrocitos poseen antgenos en su membrana que son distintos para cada individuo;
las pruebas utilizadas para establecer la hemoclasificacin sangunea relacionada a los
diversos grupos sanguneos, aprovechan las caractersticas inmunolgicas que expresa
cada individuo de acuerdo a su particular codificacin gentica. En dichas pruebas se
evidencian los antgenos y/o anticuerpos del grupo sanguneo, de acuerdo a su
comportamiento in vitro.
En el sistema ABO se investigan tanto antgenos o aglutingenos como los anticuerpos
o isoaglutininas naturales. El factor Rh es un aglutingeno encontrado en 1940 por
Landsteiner y Weiner, en los glbulos rojos de primates (Macacusrhesus) y que tambin
existe normalmente en el 85% de los humanos, que por esta causa se denomina Rh
positivos. En el sistema Rh, existen varios antgenos: D, C, c, E, e; sin embargo, de
rutina, solo se determina la presencia del antgeno D en los eritrocitos y de acuerdo a su
presencia o ausencia se dice que un individuo es Rh D positivo o Rh D negativo.
FUNDAMENTO DE LA DETERMINACIN DEL GRUPO ABO: Los antgenos de los
hemates son estructuras qumicas que proporcionan propiedades especficas a su
superficie y que solo pueden detectarse con anticuerpos que corresponden a esos
antgenos la mayora de estas reacciones antgeno-anticuerpo implican la aglutinacin o
hemlisis de los hemates.

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Alumna: Livia Quispe Huamn
PRCTICA 5

MATERIALES QUE UTILIZAMOS


-

Pipetas azul y Amarillo.

Micropipetas automticas de 100 uL y de 1.0 ml.

8 tubos de ensayo

Suero fisiolgico al 0.9 %

Lmina portaobjeto

Palillos

Tubos de ensayo

Sangre total extraida en tubo lila del grupo sanguineo O

Suero de grupos A, B y O

Glbulos rojos lavados al 2 % de A y B

Reactivos Anti-A, Anti-B y Anti-D

Guantes
PROCEDIMIENTO

MTODO

EN

LMINA

(HEMOCLASIFICACIN DIRECTA)
-

Marcar en la lmina portaobjeto como A, B, O.

Agregar una gota en los tres espacios de la sangre total.

Adicionar una gota de anti A, anti B, anti AB y anti D.

Mezclar cada preparacin con un palillo.

Rotar manualmente cada lamina con cuidado de que no se mezclen.

Observar aglutinacin y registrar los resultados.


Resultados: Presenta aglutinacin en el grupo O (4 +)

A
O

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Imagen Nro. 1: tomada en la prctica

MTODO EN TUBO
-

Lavado de los glbulos rojos del grupo

En tubo de ensayo rotular GRL al 2 %

Agregar 100 uL de sangre total del grupo Oluego llenar el tubo con
SSF hasta las tres partes del tubo

Centrifugar durante 3 min. A 2,500 RPM

Repetir tres veces consecutivos

GRL al 2%

Pipetear 500 uL de GRL en un tubo de ensayo

Luego agregar 950 uL de SSF

Rotular tres tubos con A, B, Y Rh

Agregar 50 uL de la suspensin de GRL al 2 % en cada uno de los tubos

Colocar una gota de suero Anti-A, Anti-B, y Anti-D en el tubo respectivo.

Mezclar cada tubo y centrifugar 1 min. a 3,400 RPM

Resuspender suavemente los botones celulares y observar aglutinacin:


RESULTADOS: Presenta aglutinacin en el tubo Rh (4+)

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Imagen Nro. 2: tomada en la prctica

HEMOCLASIFICACIN INVERSA
Mtodo en tubo
-

Rotular tres tubos como A, B y O.

Adicionar dos gotas de suero (Anti-O) del paciente a cada tubo.

Agregar una gota de GRL al 2 % del grupo A al tubo rotulado como A, una gota
de eritrocitos del grupo B al tubo rotulado como B y una gota de eritrocitos del
grupo O al tubo rotulado como O.

Incubar de 5 minutos a temperatura ambiente

Centrifugar por 1 minuto a 3400 RPM.

Resuspender los botones celulares y observar aglutinacin.

Interpretar los resultados.

RESULTADOS: No present aglutinacin en el grupo O


O

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Imagen Nro. 3: tomada en la prctica

BIBLIOGRAFA DE REFERENCIA
-

Rose NR et al. Manual of Clinical Laboratory Immunology. 6th ed. Washington,


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ASM, 2000.
-

Stites D et al. Inmunologa Clnica. Mxico, El Manual Moderno, 1998.

Dr. Salomn Grispan: REVISIN DE LITERATURA GRUPOS SANGUINEOS ABO Y Rh

CUESTIONARIO
a. Cules son los carbohidratos presentes en los grupos A, B, AB y O
El Antgeno A (grupo A) est compuesta por el antgeno H y en la galactosa ms externa,
tiene unida una acetilgalactosa.
El antgeno B (grupo B), tiene la misma base del antgeno h, pero tiene unida otra
galactosa en la galactosa del final.
El grupo AB, tiene antgenos A y B alternados a lo largo en su membrana y no posee
antgenos H.
El Antgeno H (Grupo O) est compuesto por una galactosa, una acetilglucosa, una
galactosa y una fructosa, unida a la cermica en la primera galactosa.

b. Complete el siguiente cuadro

DONADOR DE
ERITROCITOS

Antgeno en la superficie del


eritrocito

Anticuerpo en el plasma

Grupo 0

AB

Grupo A

Grupo B

Grupo AB

AB

c. Qu inmunoglobulina son los anticuerpos presentes en el grupo ABO?


A: IgM e IgG
B: IgM e IgG
O: IgG
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d. Qu inmunoglobulina son los anticuerpos presentes en el Rh?


Rh: IgG

e. Por qu la reaccin de aglutinacin es ms evidente en la determinacin de ABO


que en Rh?, explique su respuesta
Porque el grupo ABO los anticuerpos son IgM y en Rh IgG. Como
aprendimos la inmunoglobulina IgM es un pentmero el cual permite mayor
adhesin entre Ag-Ac.

BIBLIOGRAFIA:

Dr. Salomn Grispan: GRUPOS SANGUINEOS ABO Y Rh (internet)

Carlos Alberto Arbelez Garca: Banco de sangre-Sistema de Grupo Sanguneo ABO


(internet)

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