PREPARACIÓN DE COLORANTES

Práctica No. 5 (Tinción Simple).
Cristal violeta.
Cristal violeta.................................... 1 g
Agua destilada.............................. 100 ml.
Preparación:
Disolver el colorante en el agua.
Safranina.
Safranina...................................... 0,5 g
Agua destilada.............................. 100 ml.
Preparación:
Disolver el colorante en el agua.
Práctica No. 6 (Tinción de bacterias usando azul de metileno)
Azul de metileno.
Azul de metileno............................ 3 ml.
Etanol de 95%............................. 20 ml.
Agua destilada............................ 100 ml.
Preparación:
Disolver el colorante en alcohol.
Agregar el agua y filtrar.
Práctica No. 7 (Tinción de Gram).
Tinción de Gram Modificado
Colorante primario.
Cristal violeta: …………….…. 2,5 gr.
Agua destilada: ………………… 1000 ml.
Preparación:
Disolver el colorante en agua destilada y llevar a un volumen de 1 litro. Guardar en
frasco de vidrio color ámbar.
Solución sensibilizante.
Bicarbonato de sodio: ……….. 12,5 grs.
Agua destilada: ……….. 1000 ml.
Preparación:
Disolver el bicarbonato en agua destilada y llevar a un volumen de 1 litro. Guardar
en frasco de vidrio.
Mordiente (lugol).
Yodo: …………………………. 20 grs.
Hidróxido de sodio 1M: ……… 100 ml.

. 2 g Agua destilada.100 ml.. Etanol de 95 %: …………..... 300 ml............. Preparación: ..............……. el 90%).......... 900 ml.... Guardar en frasco de vidrio color ámbar... Otra técnica para preparar colorantes para la Tinción de GRAM Cristal violeta y oxalato de amonio....... Preparación: Mezclar cada uno de los solutos en su disolvente respectivo... Solución de yodo yodurado......... Agua destilada: ………………......… 750 ml....... 1 g Yoduro de potasio..... Alcohol acetona... (Lugol) Yodo (químicamente puro).... 250 ml. Fucsina básica (solución saturada en Etanol) ........... 300 ml............. Agregar agua suficiente para obtener un total de 300 ml...................................... hasta obtener una solución saturada....... Etanol (95%).. 80 ml...Preparación: Disolver el yodo en 100 ml........... (Reactivo de Hucker) Solución A: Cristal violeta (pureza del colorante de por lo menos....... Dejar la solución de oxalato de amonio en reposo durante una noche o calentar ligeramente hasta que se solubilice... Agua destilada.... 500 ml.......... Decolorante... Etanol 95% ..................... Guardar en frasco de vidrio color ámbar.... 20 ml........... Acetona: ………………........... Colorante de contraste...... Preparación: Combinar el yodo y el yoduro de potasio con la ayuda de un mortero.. Acetona ... agregar agua destilada y llevar a un volumen de 1 litro.. Almacenar la solución en un frasco de vidrio color ámbar...... Lavar el contenido de éste con pequeñas alícuotas de agua destilada.. Solución B: Oxalato de amonio..... disolver poco a poco Fucsina básica............ 0....…….................. se adiciona agua destilada hasta completar un volumen de 1 litro................... Mezclar las dos soluciones y filtrar... de hidróxido de sodio 1M.. Preparación: En 100 ml de etanol al 96%.....................8 g........ Agitar fuertemente....... 2 g............. NOTA: Estos colorantes deben madurar por un mínimo de 30 días para obtener mejores resultados........

. Agregar el agua destilada....... Práctica No.25 g Etanol (95%) . Preparación: Disolver el colorante en 10 ml... Tinción de esporas.............. Safranina al 5% Safranina …………......... 90% ........ Agua destilada ……………………… 100 ml..... Almacenar en frasco de vidrio color ámbar..Mezclar los ingredientes respectivos de cada combinación para su uso.. Safranina (pureza del colorante... de etanol....25 g Agua destilada ... Agua destilada.. Técnica de Schaeffer y Fulton Verde de malaquita al 5% Verde de malaquita ……………… 5 g. añadir lentamente el agua destilada a completar un volumen de 100 ml.....……………… 5 g.. una vez logrado....... ........ Agua destilada ………………… 90 ml... Fucsina básica ………………… 1 g.... 0.... 5 g..... Safranina Safranina .. Nigrosina 10% Nigrosina …………………………. 8 Técnicas especiales para Tinción de Organelos.............. Fenol ……………………….5 ml... Agua destilada ……………........ 100 ml...... 10 g. 1000 ml... 10 ml.. Formaldehido 37% …………… 0.. 0........ Safranina........... Filtrar.. 10 ml....... Técnica de Moeller: Ácido crómico 5% Ácido crómico ………….... Etanol 95% ……………………. 100 ml. 5 g.. Fucsina fenicada (Zielhl-Neelsen)... Preparación: Mezclar en un mortero hasta conseguir un homogeneizado completo. Técnica de Wirtz Verde de malaquita: Solución acuosa saturada de verde malaquita... Agua destilada ……………………… 100 ml.

......……............5 g Agua destilada ………………. 100 ml... 100 ml. Solución B Ácido tánico ..2 g....... 100 ml Para preparar la solución de uso........... 20 g...…............. Etanol 95% ....... dejar enfriar...……................. Fucsina básica ……………….... se mezclan cantidades iguales de las soluciones A.......... Agua destilada ……………………….. B y C y se guarda en frasco cerrado herméticamente en el refrigerador donde es estable durante varias semanas. 5 g Agua de anilina básica ……………............... 3 g Agua destilada ......... 1g Agua destilada ……………...........5 ml de formaldehido y filtrar. hervir durante 10 minutos..Preparación Disover 10 g de nigrosina en 100 ml de agua destilada......... 0...............5 g Agua destilada .. 100 ml Colorantes para cápsulas Colorantes de Maneval modificado Colorante de Maneval “A” (colorante primario) Solución acuosa de rojo congo al 1% Rojo congo …………………….....30 ml .......... añadir 0. Tinción de Flagelos Colorante para Flagelos de Leifson: Solución A Fucsina básica ........... Colorante de Maneval “B” (colorante de contraste) Solución acuosa de fenol al 5% -----------------------. 1.... 100 ml. 1. Solución saturada de sulfato ferroso Solución alcohólica saturada de fucsina ácida Solución de fucsina básica 5% en agua de anilina básica: Anilina básica …………………. Colorante para Flagelos Solución de Loffler Solución acuosa de ácido tánico al 20 % Ácido tánico ………………………............................. 100 ml Solución C Cloruro de sodio . 100 ml............…...

.. 100 ml Fenol . de fenol en agua destilada y completar el volumen a 100 ml........10 ml Solución acuosa de cloruro férrico al 30% ----------........... 200 ml Agua . Solución acuosa de ácido acético glacial al 20% ---....... Se deja reposar durante 24 horas. Disolver los 30 g.......................... Disolver los 5 g........... Solución acuosa de fucsina ácida al 1% -----------...........4 ml Cloruro férrico ………………. Lactofenol: Ácido láctico ............ 100 ml.… 100 ml Preparación del colorante de Maneval “B” (colorante de contraste) Mezclar : Solución acuosa de fenol al 5% ------------------------..…......… 0......2 ml AZUL DE ALGODÓN............ 80 ml...…. 10 ml Glicerina ……………… 20 ml Azul de anilina …….. 100 ml Azul Algodón o azul de lactofenol Solución de azul algodón Sol.. se deja enfriar y se añade el azul de anilina...... el agua destilada y la glicerina..................2 ml Fucsina ácida ………………….…...... 10 ml Glicerol ... 100 ml.. 5 g...10 ml Ácido acético glacial ……...........Fernol ………………………................ Para preparaciones microscópicas en fresco de mohos.... ..4 ml Solución acuosa de fucsina ácida al 1% -----------........ 100 g Glicerol .....1 gr Acido láctico …………...... Agua destilada ……………... Agua destilada ……………...............30 ml Solución acuosa de ácido acético glacial al 20% ---. Solución acuosa de cloruro férrico al 30% ----------.......... 30 g.. Otra forma de prepararlo es: Fenol …………………… 0. 8 ml Agua destilada ……….... 20 ml..…. 1 g Agua destilada ……………..5 g Se disuelve calentando ligeramente en fenol.............. el ácido láctico............. Agua destilada ……………... 10 ml Agua ... 80 ml Mezclar la solución de azul algodón con la solución de lacto fenol a partes iguales............... Se filtra y se guarda en botella de color topacio............…......... de cloruro férrico en agua destilada y completar el volumen a 100 ml...... saturada de azul algodón (azul anilina soluble) .....

disueltos en la menor cantidad de agua(más o menos 5 ml) .Mezcla Crómica : se prepara con 4 o 5 gramos de dicromato de sodio o de potasio. grado técnico. y disolver con mucho cuidado con100 ml de ácido sulfúrico concentrado. .