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Universidad Técnica de Ambato
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Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos
Ingeniería Bioquímica
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Ingeniería de Bioproceso
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Presente y futuro de los biosensores microbianos
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electroquímicos
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Integrantes:
Acosta Michael
Bustillos Diana
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Mera Anabel
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Moya Jenny
Palacios Diego
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Fecha: 04/07/2016
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En el caso de los biosensores microbianos electroquímicos. Se pueden clasificar en dos tipos: . en el que se genera una señal medible proporcional a la concentración de analito/s. es muy interesante la inmovilización de los microorganismos en polímeros conductores electrónicos. Los reactivos químicos de entrecruzamiento utilizados frecuentemente. inmovilizado. Entrecruzamiento con agente bifuncionales: utiliza reactivos como el glutaraldehído.o. y se procede a su electrodeposición aplicando un potencial constante de +1.o. albúmina. Las células estarían expuestas a potentes grupos reactivos y a otras condiciones de reacción severas que comprometen su viabilidad.2 V vs SCE. . también afectan a la viabilidad celular. y sobre ellas (e y f). metabolice O2 y no sustrato. Las células microbianas son fácilmente manipulables y tienen mejor viabilidad y estabilidad en ambientes in vitro. . los primeros gránulos de polímero b) y su crecimiento alrededor de las células (c y d). Se emplean microorganismos como fuente de enzimas intracelulares. pueden monitorizarse los analitos de interés. Atrapamiento y adsorción: para células viables. Técnicas de inmovilización La inmovilización de los microorganismos en los transductores tiene un papel esencial en la fabricación de los biosensores microbianos y condiciona su funcionamiento y estabilidad.) en contacto íntimo con un transductor físico adecuado. por lo que. Inmovilización covalente: para enzimas y anticuerpos. Se utiliza un electrodo de platino sumergido en una disolución de anilina en presencia del polímero y del material biológico. En dicha figura se aprecian las células adsorbidas sobre la superficie del electrodo de platino a). Figura 1.Biosensores microbianos Son dispositivos analíticos que surgen de la combinación de un microorganismo (m. Utilizando distintos tipos de sensores de gases o de iones. Micrografías electrónicas de barrido de Brevibacterium ammoniagenes atrapadas en un polímero de sulfonato de poli(estireno)-polianilina (PSS–PANI). se han empleado con éxito para la inmovilización de células en varios soportes (gelatina. clara de huevo). La selección de la técnica y/o el soporte de inmovilización dependen de la naturaleza del biomaterial (células viables o no viables) y del sustrato y la configuración del transductor empleado. Los microorganismos extremófilos hacen posible la fabricación de biosensores menos susceptibles de inhibirse por solutos y más tolerantes a ambientes de pH subóptimo.Biosensores de medición de respiración: Se basan en la inmovilización de microorganismos aeróbicos sobre un electrodo de O2. Se induce a que el m. Ventajas de los biosensores microbianos: - Se emplean microorganismos como elemento de reconocimiento: Los microorganismos están presentes en todas partes y son capaces de metabolizar una variedad de compuestos químicos. Un enfoque común consiste en retener las células en las proximidades de la superficie del transductor mediante membranas como las de diálisis.o. la determinación de esta especie se la realiza por medio de la disminución de la presión parcial del gas (O2).Biosensores de medición de metabolismo: Son capaces de detectar el metabolito producido por una reacción catalizada por el m. inmovilizado.

Ante esto ha surgido una estrategia para identificar analitos generados por los microorganismos. basada en combinar los microorganismos con mediadores redox que facilitan las reacciones de transferencia electrónica entre el compuesto en estudio y la superficie del electrodo. Pseudomonas putida y Pseudomonas fluorescens en combinación con polímeros de osmio. Otra d sus características es la amplia sensibilidad. Mox y Mred son las formas redox del mediador. a) esquema de oxidación del sustrato S catalizasa por la enzima DH (deshidrogenasa) en la membrana d un microorganismo. S. Un problema que se ha presentado es la poca eficiencia del proceso de transferencia electrónica del sistema biocataítico microbiano al electrodo. Nuevos desarrollos impulsan el empleo de electrodos de pasta de carbono con nanotubos de carbono (CNTs). se basan en utilizar un potencial fijo entre un electrodo (con microorganismos) y otro de referencia.Biosensores microbianos electroquímicos Estos sensores son amperométricos. eliminando la necesidad de aislar enzimas individuales. b) Funcionamiento de un biosensor microbiano para la detección de glucosa. Presente y futuro de los biosensores microbianos electroquímicos. (2011). . También se han desarrollado biosensores microbianos potenciométricos (miden concentración de especies de estudio con la diferencia de potencial). En este grupo se incluyen los biosensores conductimétricos (relaciona concentración de analito y cambios de conductividad asociadas a la producción y consumo de especies iónicas durante la actividad metabólica) Figura 1. Se produce la reducción u oxidación de un producto metabólico electroactivo generándose una variación de corriente que se relaciona con la concentración de compuestos de interés. Fuente: Campuzano. Los microorganismos más utilizados son Gluconobacter oxydans. para la detección de glucosa y fenol. Una ventaja de estos biosensores es que utilizan microorganismos como microrreactores.

El ferricianuro formado alcanza el electrodo y se reoxida. Respuesta electroquímica se genera por cronoamperometría. aplicable para aguas dulces y marinas. PET. Un sistema basado en la eucariota Saccharomyces cerevisiae y un doble medidor de ferricianuro y menadiona. a) Esquema y b) sección transversal del biosensor microbiano utilizado para la determinación de DBO. polietilentereftalato. Un sensor en la escala de µL con volumen de 560µL y dos electrodos de carbono. Este biosensor permite determinar DBO en intervalo de 6. aplicando potencial de 900mV al electrodo de trabajo durante 3s y tomando la respuesta final del cronoamperograma como señal analítica.6 a 220mg O2/L en 15 minutos. La menadiona es un medidor lipofilico que puede penetrar en la membrana externa de la célula. Análisis Ambiental Análisis ambiental Biosensor amperométrico basaso en S. cerevisiae para determinacion de Cu Demanda biológica de oxígeno (DBO) Desarrollo de biosensores microbianos para evitar el largo tiempo de método DBO5 y estimar de forma precisa y rápida del índice de polución en aguas industriales y naturales. forma un radical que transfiere el electrón al ferricianuro. . generando la respuesta electroquímica. El ferricianuro transporta electrones desde el centro redox de enzimas bacterianas reducidas a la superficie del electrodo en presencia de compuestos orgánicos. nitrotoluenos y nitrofenoles Biosensores microbianos (BM) Geneticamente modificados con actividad organofosforo-hidrolasa Detectan tóxicos organofosforados BM electroquímicos Detección del p-nitrofenol Se relaciona con la concentración de fenol BM de organofosfatos p-nitrofenil sustituidos En determinación de fenol y derivados Degradación de fenol (como fuente de carbono) Microchips BM micro-fluidico (toxicidad del agua) Determinaciòn de metales pesados Por actividad metabólica de bacterias Análisis aguas residuales Aplicaciones.Detección de nitrobenceno.

dmo .google. 2011.es%2Fdescarga%2Fartic ulo%2F3794107. BIBLIOGRAFÍA Campuzano. 107(4).ec/url?sa=t&rct=j&q&esrc=s&source=web&cd=6&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKE wiPt8eJsNbNAhWF9R4KHYf2BOEQFgg2MAU&url=https%3A%2F%2Fdialnet.unirioja. (2011).126130881%2Cd. Presente y futuro de los biosensores microbianos electroquímicos. An. S.pdf&usg=AFQjCNHxolili8lLbyqKeevKxfsrSvfgww&bvm=bv. 350–357 Recuperado de https://www.Biosensores para análisis de alimentos.com. Quím.