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OT-ASAT

GPT-ALAT

40
74

u/l
u/l

(5 - 37)
(5 - 40)

La alaninoaminotransferasa (ALT GPT) y la aspartatoaminotransferasa (AST GOT) son


enzimas que se encuentran en los hepatocitos. Son marcadores sensibles de lesin
heptica, pero slo la ALT es especfica (AST tambin est en msculo cardaco y
esqueltico, rin, cerebro, pncreas, pulmones, leucocitos y hemates).
No existe correlacin entre las cifras de transaminasas y el grado de lesin heptica. La
elevacin de las transaminasas tiene un valor impredecible . No obstante existen unos
rangos de valores que nos pueden orientar sobre la etiologa
Existen variaciones de la normalidad: el lmite superior de normalidad es ms alto en
personas de raza negra, hispanos y varones; adems este lmite se eleva con la edad y el
peso corporal. Valores inferiores al doble de la cifra considerada normal pueden no tener
importancia clnica una vez descartados los procesos apuntados en la siguiente tabla que
incluye las causas ms frecuentes:

Causas hepticas

Causas extrahepticas

Consumo excesivo de
alcohol
Medicamentos
Hepatitis vrica (B y C)

Ejercicio intenso

Hgado graso
Enfermedades de vas
biliares

Las pruebas de laboratorio de primer paso que se solicitan ante la aparicin incidental
(aislada) en un sujeto sano de esos ligerisimos valores de TOG y TPG son: hemograma,
bioqumica, estudio de coagulacin, proteinograma y serologa hepatitis B y C.
Adems se realiza peticin de Tcnicas de imagen como la Ecografa abdominal (que es lo
que han solicitado a Ud) que sirve para evaluar el tamao, morfologa y ecogenicidad del
hgado, el calibre y contenido de la va biliar, los vasos hepticos y explorar la existencia de
tumores.
INTRODUCCIN
En los procesos de anlisis clnicos que involucren directamente al tejido heptico, resulta
de gran utilidad el determinar los niveles sericos de Transaminasas , como lo son la
alanina aminotransferasa (ALT TGP) y la aspartato aminotransferasa (AST TGO), ya
que comparando los valores de actividad ALT v/s AST, es posible determinar el origen
heptico, en su defecto cardiaco , al observar alteraciones en estos patrones
enzimticos.
Por otro lado , resulta muy til para diferenciar hepatitis alcohlicas de otras hepatitis
agudas, esto relacionando AST/ALT: En las hepatitis alcohlicas(con necrosis) este ndice

es generalmente mayor a 1 (AST aumentada por sobre ALT), mientras que en las hepatitis
virales es generalmente menor a 1 (AST disminuida ante ALT).
En fin cualquiera que sea el caso , la determinacin de estas enzimas adquiere
importancia diagnstica cuando sus valores son enfrentados con valores de otras enzimas
de similar origen tisular, permitiendo as completar un perfil enzimtico de rganos como el
hgado.
MTODO DE REFERENCIA Y DE RUTINA
TGO
(AST, ASPARTATO AMINOTRANFERASA)
METODO DE IFCC (FEDERACION INTERNACIONAL DE QUIMICA CLINICA)
Descripcin.
La Aspartato aminotransferasa es una enzima que se encuentra localizada tanto a
nivel citoplasmtico como mitocondrial, de all que se diga que es una enzima
bilocular , se encuentra ampliamente distribuida en msculo esqueltico, rin ,
cerebro y principalmente en higado y corazn, donde esta en mayor
concentracin.Cualquier alteracin en estos tejidos, se vera reflejado en un aumento
en el torrente circulatorio de esta enzima, el cual ser directamente proporcional al
dao tisular.
En aquellos pacientes con afecciones hepticas se observan las mayores elevaciones de
AST, sobre todo en aquellos casos de hepatitis con necrosis.
Fundamento.
La reaccin es catalizada por la TGO (AST), sta desplaza la reaccin hacia la formacin
de Oxaloacetato que reacciona con la MDH (Malato Deshidrogenasa), de modo que la
velocidad de oxidacin del NADH medida a 340 nm, es directamente proporcional a la
actividad de TGO en la muestra.
En el medio de reaccin hay adems LDH (Lactato Deshidrogenasa) suficiente para
consumir los cetocidos de origen endgeno, evitando as su interferencia.
Reaccin.
TGO
L-aspartato + 2-oxoglutarato Oxalacetato + L-glutamato
Oxalacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+
MDH
Muestra.

Suero, Plasma (Heparinizado, EDTA).


Muestras hemolizadas no se aceptan ya que poseen elevados niveles de AST
dentro de los eritrocitos.
Linealidad.
Si el cambio por minuto de absorbancia excede de 0.160 (340nm y 334 nm) 0.080 (365),
diluir la muestra 1+ 4 con suero fisiolgico. Multiplicar el resultado por 5.
La absorbancia inicial debe ser superior a 0.8 A. En caso de no serlo se puede estar en
presencia de actividades enzimticas muy elevadas y obtener resultados errneos. Diluir la
muestra y reprocesarla.
Metodologa de Anlisis.

*Lectura: Hg 365 nm, 340 nm, 334 nm.


*Paso ptico: 1 cm.
*Temperatura: 37C.
*Medicin: Contra aire.
Los reactivos y cubetas deben ser llevados a la temperatura del ensayo, la que debe
mantenerse constante durante el desarrollo del test.
Valores Normales.
37C (U/L)
Hombre

Hasta 37

Mujer

hasta 31

Ventajas.

Simple y Rpido
Desventajas.

Resulta imposible o poco prctico modificar las mezclas reactivas


preestablecidas.

Sueros hemolizados dan valores falsamente aumentados.

Los sueros con concentraciones de cetocidos endgenos elevados generan


valores
falsos elevados.

Pacientes hemodializados o con hipovitaminosis u otras patologias asociadas


con dficit de Piridoxal Fosfato (coenzima), generan valores falsamente
disminudos.
Consideraciones.

A mayor temperatura se obtiene mayor sensibilidad , pero un menor rango de


linealidad .

La preincubacin con parte del reactivo es para evitar interferencia con


cetoacidos endgenos del suero.

El Piridoxal fosfato es una coenzima necesaria en la actividad de la TGO, por


ello esta ltima se ve afectada en ausencia de la misma. ejemplo: pacientes
hemodializados o con hipovitaminosis.

Para evitar contaminacin de reactivos , usar pipetas nuevas y no intercambiar


las tapas de los reactivos.
MTODO DE RUTINA Y REFERENCIA.
TGP
(ALT, ALANINA AMINOTRANFERASA)
METODO IFCC (FEDERACION INTERNACIONAL DE QUIMICA CLINICA)
Descripcin.

La alanina aminotranferasa es una enzima que tiene como nica localizacin el citoplasma
, de ah que se le denomine unilocular. Su mayor actividad la presenta en el tejido heptico
y la menor actividad en msculo esqueltico, corazn, rin, pncreas y eritrocitos (en ese
orden).
Por lo tanto la destruccin o cambio en la permeabilidad de membrana celular provoca la
liberacin de ALT a la circulacin sangunea. Su aumento se debe principalmente a
alteracin heptica (como colestiasis, hepatitis txicas o virales).
En hepatitis viral el aumento de ALT precede a la aparicin de ictericia, si los valores estn
aumentados por sobre 6 semanas, nos debe hacer pensar en una hepatitis activa o el
comienzo de una hepatitis crnica.
Fundamento.
La reaccin catalizada por ALT esta desplazada hacia al formacin de piruvato, que
reacciona inmediatamente con la LDH (Lactato Deshidrogenasa), de modo que la
velocidad de oxidacin del NADH, medida a 340 nm, es proporcional a la actividad de ALT
en la muestra. El exceso de LDH en el medio es para consumir cetocidos de origen
endgeno, evitando as su interferencia.
Reaccin.
TGP
L-alanina + 2-oxoglutarato Piruvato + L-glutamato
Piruvato + NADH + H L-lactato + NAD+
LDH
Muestra.
Suero, plasma heparinizado o EDTA.
El oxalato , la heparina no inhiben la actividad enzimtica , pero pueden causar cierta
turbidez.
La ALT es estable en suero durante 3 dias a temperatura ambiente y hasta una semana a
4C.En
la orina se encuentra poca o ninguna actividad, por lo cual no se recomienda para el
anlisis.
Porcentaje de prdida de
actividad.
Refrigerada

10%

Hasta 25C

17%

Linealidad.
Si el cambio por minuto de absorbancia excede de 0.160 (340 nm y 334 nm) 0.080 (365
nm), diluir la muestra 1 + 4 con suero fisiolgico. Multiplicar el resultado por 5.
La absorbancia inicial debe ser superior a 0.80 A. En el caso de no serlo se puede estar en
presencia de actividades enzimticas muy elevadas y obtener resultados errneos. Diluir la
muestra y reprocesarla.
Valores de referencia.
37C (U/L)

Hombre

Hasta 40

Mujer

Hasta 31

Metodologa de anlisis.

Lectura: Hg 365 nm, 340 nm, 334 nm.

Paso ptico: 1 cm.

Temperatura: 37C.

Medicin: contra aire.


Los reactivos y cubetas deben ser llevados a la temperatura del ensayo, la que debe
mantenerse constante durante el desarrollo del test.
Ventajas.

Simple y Rpido.

El uso de buffer TRIS nos permite que el NADH sea ms estable que en otros
mtodos que usan fosfato.

El piridoxal 5-Fosfato(PP) es un activador ms efectivo de la ALT en buffer Tris


que en el de fosfato.

Este mtodo tiene una alta especificidad , carencia de interferencias, alta


linealidda, reproductibilidad y rapidez.
Desventajas.

Sueros hemolizados generan valores falsos elevados, debido a que el eritrocito


contiene 3 a 5 veces ms ALT que el suero.

Sueros con concentraciones de cetocidos endogenos elevados generan valores


falsamente elevados.
Consideraciones.

Muestras de pacientes hemolizadializados o con hipovitaminosis u otras


patologas asociadas
con dficit de Piridoxal Fosfato generan valores falsamente disminuidos.

A mayor temperatura , mayor sensibilidad, pero menor rango de linealidad .

Una absorvancia inicial bajo 0,800 D.O., estando reactivos en condiciones,


indica una

muestra con muy alta actividad de TGP. Por lo tanto es necesario diluir la
muestra.

Cuando la tcnica se realiza como ensayo de punto final, la reaccin presenta


un efecto de retroinhibicin por piruvato, este disminuye la linealidad.

No es conveniente modificar la formulacin de un fabricante luego de adquirir


los reactivos.
MTODOS ALTERNATIVOS.

Mtodo de Reitman y Frankel.


Esta es una reaccin acoplada con dinitrofenilhidrazina (DNPH). Es una tcnica
colorimtrica y cuantitativa.
Reaccin.
Alanina + cetoglutarato Glutamato + Piruvato
Piruvato + DNPH Complejo formado por Pir-DNP-Hidrazona.
La lectura se hace a 505 nm. Es una reaccin de punto final.
Es necesario un tiempo de retardo de la reaccin con cetoglutarato, lo que permite el
consumo de cetoglutarato endgeno y todo otro proceso que consuma NADH. Este retardo
no debe ser inferior a 90 segundos.
Muestra.

Suero.
Mtodo de Wrodlewski y LaDue.
Este es un mtodo enzimtico cuantitativo.
Alanina + cetoglutarato Glutamato + Piruvato
LD
Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+
Esta es una medicin del consumo de NADH a 340 nm. Es de uso muy frecuente.
La diferencia con el mtodo de referencia es que este mtodo requiere un tiempo de
retardo no inferior a 90 segundos antes de la reaccin con cetoglutarato para
permitir el consumo de cetoglutarato endogeno y todo otro proceso que consuma
NADH.
Adems se recomienda un perodo de preincubacin de 10 minutos con el cofactor
piridoxal-5-fosfato.
Muestra.

Suero
MTODO ALTERNATIVO.
(mtodo propuesto por la AACC)
A propuesto un mtodo para los laboratorios pequeos de Qumica Clnica, el cual
se diferencia del de la IFCC en que:
1.- Se emplea un solo reactivo para evitar el procedimiento en dos pasos.
2.- La reaccin se lee despus de 150 segundos , durante los 180 segundos
siguientes.
3.- No se agrega Fosfato de Piridoxal.
BIBLIOGRAFIA
Ttulo: Procedimientos Tcnicos de Laboratorio Clnico
Autor : Instituto de Salud Pblica de Chile
Editorial: El Instituto
Santiago Chile 1994

Ttulo: Qumica Clnica


Autor: Anderson, Shauna C.
Cackyne, Susan.
Editorial Interamericana.
Mexico 1995
Ttulo: Qumica Clnica Mtodos.
Autor: Pesce, Amadeo J.
Kaplan, Lawrence A.
Editorial Panamericana
B.A 1991 Argentina.