Ao de la Consolidacin del Mar de Grau

INFORME DE PRCTICA
DETERMINACIN DE AMILASA
LIPASA

Alumna: Livia Quispe H.

Docente: Flix lvarez
Asignatura: Bioqumica II
Aula: 212

AO 2016

Determinacin de Amilasa y Lipasa

ACCION DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDON
Introduccin:
El almidn es un polisacrido de una estructura compleja est formado por dos tipos de
cadenas: amilosa y amilopectina La amilosa abunda en las leguminosas y la amilosa en
los cereales. Las propiedades del almidn de una especie vegetal dependen del %
relativo de cada cadena. Su estructura permite que al penetrar el lugol se forme una
disolucin en presencia de un color azul oscuro esta caracterstica nos permite identificar
la presencia del almidn. El almidn puede romperse o hidrolizarse por medios qumicos o
enzimticos, por medio de la amilasa (saliva) y el jugo pancretico. La amilasa rompe los
enlaces entre los azucares que conforman al almidn y finalmente despus de su accin
deja glucosa libre y maltosa. (1)
OBJETIVOS:

Identificar la accin de la amilasa de la saliva sobre el almidn.

Identificar los productos de la accin de la amilasa sobre el almidn.
Caracterizar la digestin enzimtica realizada por la secrecin de las glndulas
salivales.

MATERIAL:

3 tubos de ensayo rotulados 1, 2, 3 y 4.

Micropipeta de 1000 uL.
Material biolgico:
Muestra de saliva.
Sustancias:
Agua destilada.
Harina 10 mg.
Reactivo: Lugol.

PROCEDIMIENTO:
1.
2.
3.
4.
5.

En el tubo 1, agregar 5 ml de agua destilada y 1 mg harina = Solucin A.

En el tubo 2, agregar 4 ml de agua destilada y 1 ml de saliva = Solucin B.
En el tubo 3, agregar 2 ml de solucin A y 2 ml de solucin B.
Incubar a 37 C por 10 minutos.
En el tubo 4, agregar 1 ml del tubo 3 ms 2 gotas de lugol.

FUNDAMENTO DE LA PRUEBA
Amilasa + Almidn

37
10C

Maltosa + Amilasa

RESULTADOS:
El precipitado que se form present un color azul-oscuro tal y como se ve en la imagen.
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Determinacin de Amilasa y Lipasa

Imagen Nro. 1

Por lo tanto la prueba fue positiva.

CONCLUSIN:
La amilasa es un enzima hidrolasa que tiene la funcin de digerir el glucgeno y el
almidn para formar azcares simples, se produce principalmente en las glndulas
salivales

(sobre

todo

en

las

glndulas

DETERMINACIN DE AMILASA EN SUERO

INTRODUCCIN
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partidas)

en

el

pncreas.

Determinacin de Amilasa y Lipasa

La amilasa, denominada tambin amilasa salival, ptialina o tialina, es un enzima y, se
produce principalmente en las glndulas salivales (glndulas partidas) y en el pncreas.
Funcin de la amilasa en el organismo:
Su funcin es la de digerir el glucgeno y el almidn para la sntesis de azucares simples.
Se realiza la prueba principalmente para diagnosticar o controlar enfermedades del
pncreas e igualmente puede detectar algunos problemas del tubo digestivo.
IMPORTANCIA CLNICA:
En la Nutricin la enzima amilasa presenta gran importancia ya que degrada los alimentos
que generalmente estn formados por compuestos que no se asimilan y que se deben
transformar en cuerpos solubles en el agua para poder ser ingeridos y absorbidos en el
tubo digestivo este proceso es muy importante debido a que es en los alimentos donde se
encuentran las sustancias que emplea el organismo para su nutricin.
TCNICA DE AMILASA:
Fundamento:
Suero o plasma, separado lo antes posible de los hemates. Las pruebas de laboratorio se
basan en la medicin de la actividad enzimtica sobre un sustrato de almidn que
constituye el reactivo con el cual se enfrenta la enzima presente en la muestra, el almidn
es degradado a glucosa y esa degradacin es proporcional a la actividad de la amilasa.
MATERIALES
Materiales para extraccin sangunea.
- Algodn.
- Alcohol 70%.
- Equipo de vacuteiner.
- Aguja para vacuteiner.
- Ligadura.
- Guantes.
- Tubos al vaco (color rojo).
- Contenedor de objetos corto punzantes.
- Esparadrapo.
Micropipetas automticas de 1000 uL y 100 uL.
Tips de color Azul y amarillo.
Cronmetro.
Fotocolormetro.
Reactivos de Amilasa A y B.
TOMA DE MUESTRA:
Para obtener el suero, se extrae sangre de una vena en el tubo rojo de modo
convencional, despus de 10 minutos centrifugar por 5 minutos.
PROCEDIMIENTO
Tabla Nro. 1
Reactivo A
2,5 ml
Muestra problema (suero)
0.10 ml
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Determinacin de Amilasa y Lipasa

Reactivo B
0.50 ml
Mezclar e incubar por 3 min. Y luego leer las Abs. 1`, 2`, 3`.
Leer a una absorbancia de 405 nm.
VALOR REFERENCIAL
El rango normal en suero es de 28 100 U/L.
FRMULA PARA EL CALCULAR EL RESULTADO
Valor = /Min. Absorbancias x 2930.
RESULTADO
Absorbancias:
1. = 0.110
2. = 0.137
3. = 0.094
Resta:
Abs. 2 Abs. 1 = 0.027
Abs. 2 Abs. 3 = 0.043
Suma:
0.027 + 0.043 = 0.07
Promedio.
0.07/2 = 0.035
[FAL] = 0.035 x 2930 = 102 UI/L
[FAL] = 102 UI/L
CONCLUSIN
Es importante la amilasa ya que degrada los alimentos que generalmente estn
formados por compuestos que no se asimilan.
Permite controlar enfermedades del pncreas e igualmente puede detectar
algunos problemas del tubo digestivo
El resultado sali ligeramente alto, al parecer se debi al fotocolormetro ya que
las absorbancias no salieron en forma ascendente. La tercera absorbancia sali
muy bajo.

DETERMINACIN DE LIPASA EN SUERO

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Determinacin de Amilasa y Lipasa

INTRODUCCIN
La lipasa es una enzima digestiva secretada por el pncreas. El aumento de los niveles
de lipasa se utiliza para evaluar muchas condiciones mdicas. La lipasa es especialmente
til en el diagnstico de la pancreatitis ya que el pncreas es el nico rgano que lo
segrega.
FUNCIN:
La lipasa ayuda en la digestin de las grasas para romper los triglicridos en cidos
grasos y glicerol. Los cidos grasos son la fuente de energa preferida para el corazn,
as como el de los msculos durante el esfuerzo prolongado. El metabolizar las
grasas proporciona energa durante las horas de ayuno. La lipasa se libera en el torrente
sanguneo cuando las clulas pancreticas estn daadas. Los niveles elevados indican
enfermedad pancretica, as como la pancreatitis aguda y crnica.
IMPORTANCIA CLNICA:
Tambin ayuda a confirmar el cncer de pncreas. Muchas de las condiciones de
pncreas son diagnosticadas con los niveles de lipasa, incluyendo quistes, inflamacin, y
la inflamacin de la vescula biliar.
VALORES NORMALES:
0 160 UI/L
MATERIALES
Materiales para extraccin sangunea.
- Algodn.
- Alcohol 70%.
- Equipo de vacuteiner.
- Aguja para vacuteiner.
- Ligadura.
- Guantes.
- Tubos al vaco (color rojo).
- Contenedor de objetos corto punzantes.
- Esparadrapo.
Micropipetas automticas de 1000 uL y 100 uL.
Tips de color Azul y amarillo.
Cronmetro.
Fotocolormetro.
Reactivos de Lipasa A y B.

TOMA DE MUESTRA:

Determinacin de Amilasa y Lipasa

Para obtener el suero, se extrae sangre de una vena en el tubo rojo de modo
convencional, despus de 10 minutos centrifugar por 5 minutos.
PROCEDIMIENTO
Tabla Nro. 2
Blanco
Muestra
Estndar
Agua
0.01 ml
Muestra
0.01 ml
Estndar
0.01 ml
Rvo. A
1 ml
1 ml
1 ml
Mezclar e incubar a 37 C por cinco minutos
Rvo. B
0.6 ml
0.6 ml
0.6 ml
Leer a una absorbancia de 578 nm.
1ra absorbancia a los 60.
2da absorbancia a los 90 .
VALOR REFERENCIAL
El rango normal en suero es de < 60 U/L.
FACTOR
50.8 UI/L.
FRMULA PARA EL CALCULAR EL RESULTADO
ABS = Abs. 2 Abs. 1
Luego: Abs.M - Abs. B x Factor
Abs. S - Abs. B
RESULTADO
Absorbancias:
Blanco
Muestra
Standar

1ra Lec. = 0.297

1ra Lec. = 0.329
1ra Lec. = 0.309

Tabla Nro. 3
2ra Lec. = 0.301
2ra Lec. = 0.350
2ra Lec. = 0.330

[Lipasa] = 0.021 - 0.004 x 50.8 UI/L

0.025 - 0.004
[Lipasa] = 0.017 x 50.8 UI/L = 41.1 UI/L
0.021
[Lipasa] = 41.1 UI/L

1ra Lec. 2da Lec.= 0.004

1ra Lec. 2da Lec.= 0.021
1ra Lec. 2da Lec.= 0.025

Determinacin de Amilasa y Lipasa

CONCLUSIN
La lipasa se libera en el torrente sanguneo cuando las clulas pancreticas estn
daadas.
Los resultados sali dentro de los valores normales.
Bibliografia
1. http://tere-suarez.blogspot.pe/2011/11/informe-practica-2-accion-de-la-amilasa.html
2. http://med.unne Lipasa.edu.ar/revista/revista158/4_158.pd.
3. http://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20090516205824AAd0v5l