Universidade Federal do Maranho

Centro de Cincias sociais, Sade e Tecnologia

Departamento de Licenciatura em Cincias Naturais- biologia
Professor: Richard Pereira Dutra

PROPRIEDADES FENLICAS E O DECORRENTE ASPECTO ANTIOXIDANTE

DO EXTRATO hidroalcolico de Melissa

officinalis L. (Lamiaceae)

IMPERATRIZ- MA
2016

Eliseu Carvalho Silveira

Rayssa Esthefany Santos Silva.

PROPRIEDADES FENLICAS E O DECORRENTE ASPECTO ANTIOXIDANTE

DO EXTRATO hidroalcolico de Melissa

officinalis L. (Lamiaceae)

O presente trabalho tem por finalidade

obteno da segunda nota da disciplina
tcnicas laboratoriais em qumica.
Professor: Richard Pereira Dutra

Imperatriz- MA
2016

Sumrio
Resumo.............................................................................................................3
1- Introduo...................................................................................................4
2- Objetivo geral..............................................................................................5
2.1- Objetivo especifico.....................................................................................5
3- Materiais e mtodos......................................................................................5
3.1- Coleta e secagem das folhas.................................................................5
3.2- Triturao..............................................................................................5
3.3- Macerao e filtrao............................................................................5
3.4- Concentrao e secagem.......................................................................5
3.5- Preparo da soluo estoque...................................................................5
3.6- Teste qualitativo- Fitoqumico..............................................................5,6.
3.6.1- Teste para fenis e taninos.................................................................6
3.6.2- Teste para esterides e triterpenoides................................................6
3.7- Teste quantitativo- Espectrofotomtrico...............................................6
3.7.1- Avaliao do teor de flavonides.......................................................6
3.7.2- Avaliao do teor de fenis................................................................6
4-Resultados e discusso....................................................................................7
4.1- Grfico da curva padro de cido glico...............................................8
4.2- Grfico da curva padro de quercetina.................................................8
5-Concluses......................................................................................................9
6-Referencias bibliogrficas..............................................................................10

3
Resumo
A planta Melissa Officinalis L. pertencente famlia (Lamiaceae), espcie rica em
compostos fenlicos e leos essenciais, possuindo alta variabilidade de atividades biolgicas
tais como antiinflamatrias, antitumoral e hepatoprotetoras, seu leo pode ter ao
antifngica, de forma a ser utilizada como planta medicinal h dcadas, e podendo assim ser
includa na farmacopia. A composio qumica da famlia (Lamiaceae) abundante em
fenis, flavonides, taninos, entre outros compostos fenlicos, sendo estes agentes
influenciadores ao aroma caracterstico da espcie. Na M. officinalis L. podem ser encontradas
altas taxas desses compostos fazendo com que sua atividade antioxidante seja considerada
alta, tal atividade se d devido ao fato dessa funo orgnica atuar como sequestradora de
radicais livres. O corrente trabalho efetuou testes fitoqumicos para a verificao da presena
de taninos, fenis, esterides e terpenos bem como teste espectrofotomtrico a fim de avaliar
a concentrao de fenis e flavonides existentes na M. officinalis L, executados a partir de
extrato hidroalcolico das folhas de M. officinalis L. Estudos anteriores apontaram uma
concentrao mais elevada desses compostos, bem como a presena de taninos em M.
officinalis.

Palavras chave: compostos fenlicos; plantas medicinais; frmacos; antioxidante.

4
1- Introduo
A planta Melissa officinalis L. popularmente conhecida como erva cidreira
pertencente famlia (Lamiaceae) nativa da Europa meridional, espcie amplamente
distribuda em regies tropicais e subdividida em sete famlias. demasiadamente utilizada
como planta medicinal, considerada assim uma planta fitoterpica. Alm de possuir leos
essenciais, suas folhas so ricas em compostos fenlicos tais com flavonides, quercetina ,
cido rosmarnico, cido cafico, dentre outros (Barnes ET AL 2005).
Os terpenos isolados encontrados na M. officinalis L. possuem capacidade redutora de
movimentos espontneos em camundongos (Wagner e Sprinkmeyer, 1973. E uma reduo em
outros parmetros de comportamento aps a administrao de seu extrato hidroalcolico
(Soulimani ET AL, 1991).
Os compostos fenlicos apresentam larga multiplicidade de atividades biolgicas
como aes antiinflamatrias e hepatoprotetoras. Entre eles os flavanoides que possuem
capacidade de inibir atividades monooxigense, lipooxigenase, ciclooxigenase (Svobodov ET
AL 2003). Estes compostos podem apresentar ainda ao pr-oxidante (Galati ET AL ., 1999;
Chan ET AL 1999). Atravs de uma ao citotxica, agindo como compostos
anticarcinognicos in vivo (Galati ET AL 2002).
Tais compostos podem representar importantes agentes preventivos de
oxidao(Psotov ET AL 2003), sendo estes seqestradores de radicais livres ou quelantes de
metais, agindo sobre radicais como o perxido de hidrognio (H 2O2), Fe3+/Fe2+ e xido ntrico
(NO), atravs de dois distintos processos: o primeiro envolve a inibio da formao de
radicais livres e o segundo compreende a sua eliminao(Svobodov ET AL, 2003; Soares
2002).

2-Objetivo Geral
O presente trabalho tem como objetivo verificar a concentrao de fenis e
flavonoides bem como a presena de taninos, esterides e triterpenoides presentes na
Melissa officinalis L (erva cidreira), por meio de teste espectrofotomtrico e fitoqumico.
2.1-Objetivo especfico
Auxiliar o aprendizado da disciplina, tcnicas laboratoriais em qumica, fazendo o uso
de prticas em laboratrio a fim de obter maior conhecimento quanto ao uso de vidrarias e
equipamentos nele encontrado, bem quanto execuo do extrato de plantas.

3-Materiais e Mtodos
3.1-Coleta e secagem das folhas:
As folhas de M. officinalis L. foram coletadas no municpio de imperatriz-MA, durante
a manh e submetidas secagem em temperatura ambiente por um perodo de 4 dias.
3.2-Triturao:
Aps a secagem as folhas foram cuidadosamente amassadas e colocadas para
triturao em moinho de facas.
3.3- Macerao e filtrao:
Foram utilizadas para a macerao 20g das folhas de M. Officinalis L trituradas em
uma proporo de 1:10 em etanol 70% por um perodo de 4 dias. Em seguida filtradas com o
auxilio de uma bomba a vcuo.
3.4- Concentrao e secagem:
Aps a filtragem a amostra foi condicionada a concentrao em evaporador rotativo,
acoplado a um banho de aquecimento a temperatura de 45C e posteriormente para secagem
com o auxilio de um dessecador.
3.5- Preparo da soluo estoque:
Com a amostra j seca e com aparncia resinosa foram pesados 20mg para preparo da
soluo, que foi diluda em 10 mL de etanol.

3.6-Teste qualitativo- Fitoqumico:

3.6.1-Teste para fenis e taninos:
Com a amostra em um tubo de ensaio foram adicionadas trs gotas de soluo alcolica
de cloreto frrico (FeCl3) e em seguida agitou-se o mesmo aps observou-se a variao de cor
ou a formao de precipitado abundante, escuro, e comparado com o teste em branco usando
apenas gua e FeCl3.
Colorao varivel entre o azul e o vermelho indicativo da presena de fenis, quando o
teste branco for negativo.
Precipitado escuro de tonalidade azul indica presena de taninos piroglicos (taninos
hidrolisveis) e verde, a presena de taninos flabobnicos (taninos condensados ou
catquicos).
3.6.2- Teste pra esterides e triterpenoides:
Foi extrado do extrato seco uma pequena massa e diludo em 1 mL de clorofrmio,
triturando bem o resduo com o solvente. E a seguir foi filtrada a soluo clorofrmica gota a
gota em um pequeno funil fechado com uma bolinha de algodo. Aps foram adicionados 1
Ml de anidrido actico, o tubo foi agitado suavemente e cuidadosamente foram postas trs
gotas de cido Sulfrico ( H2SO4) concentrado. Tornou-se a agitar e observou-se o
desenvolvimento de cores.
Colorao azul evanescente seguida de ver permanente indicativa da presena de
esterides livres.
Colorao parda at vermelha indica tirtepenoides penta-ciclicos livres
3.7- Teste quantitativo- Espectrofotomtrico
3.7.1- Avaliao do teor de flavonides
Para o preparo das diluies foram adicionados 3 mL de etanol em um tubo de ensaio,
e aps 500 L da soluo estoque, por fim 500 mL de cloreto de alumnio(AlCl 3). O branco,
ou seja, sem a presena da amostra foi executado apenas com etanol e AlCl 3. Foi realizado em
duplicata a fim de minimizar possveis erros.
3.7.2- Avaliao do teor de fenis
Para o preparo das diluies adicionou-se a 2,8 mL de gua destilada (H 2O), 1 mL de
carbonato de sdio (Na2CO3), e 100 L do extrato e por fim foram colocados 100 L de folim.
Para o preparo do branco foi utilizado apenas gua, carbonato de sdio e o folim. Foi
realizado em duplicata para minimizar possveis erros.

4-Resultados e Discusses:
Rendimento extrativo e apurao de dados mediante teste fitoqumico
O extrato hidroalcolico de M. officinalis L. realizado por meio de macerao obteve
rendimento de 18,18%.
O teste pra fenis e taninos apresentou colorao azul clara, sem formao de
precipitado indicando resultado positivo apenas para fenis (tabela 1). Entretanto estudos
sobre a M.officinalis L. apontam grande teor de taninos em suas folhas (Teske e Trentini,
1999).
Teste pra esterides e triterpenoides: apresentou colorao azul com leves faixas
pardas ao fundo do tubo indicando resultado positivo para esterides e triterpenos (tabela 1).
Os terpenos isolados contidos em M. officinalis L. apresentam capacidade inibidora de
movimentos espontneos em camundongos (Wagner e Sprikmeyer , 1973)
Tabela 1. Resultado do teste fitoqumico do extrato hidrocoolico de M. officinalis.
Teste fitoqumico

Fenis

Taninos

Melissa officinalis

Esterides

Triterpenoides

Nota: positivo (+); negativo (-)

Para o teste espectrofotomtrico foram obtidos os resultados a seguir
O teor de fenis e flavonides de M. officinalis L. quantificado aps testes
espectrofotomtricos, apresentou absorbncia de 0, 273 para flavonoides e 0, 388 para fenis
(tabela 2), no entanto o estudo feito sobre a atividade antioxidante m.officinalis apontam
ndices considerveis de flavonides (Teske e Trentini, 1994), responsveis pelo aroma
caracterstico da espcie (Evans 2002; Judd ET AL, 1999).
O alto teor de flavonoides pode indicar significativos agentes preventivos da oxidao
se comparado ao cido rosmarnico (Psotov ET AL, 2003). A M. officinalis L. apresenta
cerca de 5% de compostos fenlicos em folhas como quercetina e cido rosmarnico (Barnes
ET AL, 2005).

Tabela 2. Resultados do teste espectrofotomtrico do extrato hidrocoolico de M.

officinalis L.
Dados

Fenis absorbncia

Flavonoides absorbncia

A1
A2

0.383
0.393

0.262
0.294

Mdia

0.388

0.273

Concentrao g/mL

6,14

4,02

Curva padro de cido glico

4.000
3.500

f(x) = 0.07x - 0.02

R = 0.99

3.000
2.500
2.000
1.500
1.000
0.500
0.000
0

10

20

30

40

50

60

8
4.1- Grfico da curva padro de cido glico:

4.2- Grfico da curva padro de quercetina:

Curva padro de quercetina

1.5
f(x) = 0.06x + 0.04
R = 1

Linear ()

0.5
0
0

10

15

20

25

9
5-Concluses
Conclui-se ento que a planta M. officinalis L da famlia laminaceae possui em sua
composio qumica compostos fenlicos, tais como os flavonoides e taninos, estes
compostos apresentam grande variedade de atividades biolgicas, entre elas ao
antiflamatria e antioxidante. A ao antioxidante desses compostos se d devido ao fato de
atuarem como quelantes de metais ou como arrebatadores de radicais livres. Seus compostos
fenlicos tambm influenciam o aroma de sua espcie, sendo eles compostos aromticos. O
corrente trabalho obteve resultados inferiores quanto ao nmero de fenis e flavonides,
relacionado a estudos sobre a atividade antioxidante de M. officinalis L. e a registros de altos
teores desses compostos.

10
6-Referncias
TESKE M, TRENTINI AMM. Herbarium, 2nd. Ed. Curitiba: Laboratrio Botnico, p.410, 1994.
WAGNER H, SPRINKMEYER L. ber die pharmakologische Wirkung von Melissengeist, Dtsch Apoth Ztg,
113:1159-66, 1973.

BARNES J, Anderson LA, Phillipson JD. Plantas medicinales: gua para los profesionales
de la salud. Barcelona 1 ed. 2005: Pharma editors,
CHAN T, Galati G, OBrien PJ. Oxygen activation during peroxidase catalysed
metabolism of flavones or flavanones. Chem. Biol. Interac, 122:1525, 1999.
EVANS, WC. Trease and Evans: Pharmacognosy. 15th ed. London: W.B. Saunders, 2002

GALATI, G, Chan, T, Wu B, OBrien PJ, Glutathionedependent generation of reactive

oxygenspecies by the peroxidase-catalyzed redox cycling of flavonoids. Chem. Res.
Toxicol, 12:521525, 1999.
Galati G, Sabzevari O, Wilson JX, OBrien PJ. Prooxidant activity and cellular effects of
the phenoxyl radicals of dietary flavonoids and other polyphenolics.Toxicology, 177: 91
104, 2002.
PSOTOV J, Lasovsky J, Vicar J. Metal-chelating properties, electrochemical behavior,
scavenging and cytoproctive of six natural phenolics. Biomedical Papers, 147(2):147-53,
2003.
SOARES SE. cidos fenlicos como antioxidantes. Revista de Nutrio, 15 (1):71-81,
2002.
SVOBODOV A, Psotov J, Walterov D. Natural phenolics in the prevention of UVinduced skin damage. A review. Biomedical Papers, 147(2):137-45, 2003.