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Universidad Autnoma del Estado de Mxico

Facultad de Qumica
Licenciatura en Ingeniera Qumica
Cuarto semestre

QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL


MANUAL DE LABORATORIO

Dr. Jorge Javier Ramrez Garca

2015

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

NDICE
I- Introduccin General

II Propsitos Generales del Curso


III Reglamento de Laboratorio
IV Prcticas
Practica

Valoracin de HCl con NaOH potenciomtricamente y


comparacin de la curva experimental con la obtenida en
forma terica

Practica

Determinacin potenciomtrica de los puntos de equivalencia


del cido fosfrico.

Practica 3

Uso y aplicaciones de la espectrofotometra de ultravioleta


visible en los colorantes rgano sintticos

Practica

Preparacin de la curva de calibracin para determinar Cr


VI

Practica

Determinacin de plomo en suelo urbano mediante


espectroscopa de absorcin atmica

Practica

Manejo de Muestras para ser ledas en Espectrofotometra de


Luz Infrarroja.

Practica

Examen de laboratorio

Practica

Determinacin de etanol en bebidas alcohlicas por


cromatografa de gases.

Practica

Determinacin de colorantes por HPLC.

Practica

10

Determinacin de azcares por Calorimetra Diferencial de


Barrido. (DSC).
2

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

I.- INTRODUCCIN GENERAL


El Ingeniero Qumico debe tener el criterio adecuado para escoger correctamente las
tcnicas analticas que le ayuden a conocer la composicin y las caractersticas sensoriales,
fsico-qumicas y microbiolgicas de los diferentes tipos de productos para entender sus
comportamientos, con el fin de transformarlos y conservarlos.
Para tal efecto tiene a su disposicin una serie de mtodos de anlisis como:
1. Los anlisis sensoriales
2. Los anlisis fsico-qumicos
3. Los anlisis microbiolgicos
Los anlisis fsico-qumicos se pueden clasificar en dos grupos fundamentales, a partir
de los procedimientos utilizados para su desarrollo:
1. Los mtodos de anlisis que utilizan procedimientos qumicos
2. Las tcnicas fsicas para caracterizar y medir sustancias qumicas.
En la asignatura de Qumica Analtica Instrumental se tratarn los temas relacionados a
la teora de las tcnicas instrumentales basadas en principios fisicoqumicos.

Potenciometra
Espectrofotometra de UV
Espectrometra de Absorcin Atmica
Espectrofotometra infrarroja
Cromatografa de Lquidos
Cromatografa de Gases
Anlisis Trmicos

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Qumica Analtica Instrumental

II.- PROPSITOS GENERALES DEL CURSO PRCTICO

Este curso prctico tiene el propsito de capacitar al alumno en el conocimiento y la


aplicacin de las principales tcnicas analticas especiales (mtodos instrumentales), en la
identificacin y/o cuantificacin de los componentes orgnicos e inorgnicos en cantidades
mayores hasta nivel de traza.
Para eso, el alumno deber aplicar la metodologa cientfica para tomar la decisin:
Qu mtodo y como aplicarlo a un anlisis especfico? :
-componente a analizar
- identificacin y/o cuantificacin
- muestreo
- preparacin de la muestra
- mtodo de anlisis.
El alumno demostrar su dominio del conocimiento en la redaccin propia del reporte del
experimento:
- investigacin de la tcnica y su aplicacin
- parte experimental (material, reactivos y equipo de laboratorio, preparacin de la muestra,
desarrollo del anlisis)
- resultados y discusin
- conclusiones
- bibliografa

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Qumica Analtica Instrumental

III.- REGLAMENTO DEL LABORATORIO


1 - HORARIO DE LABORATORIO
- Mircoles de 09:00 a 12:00 horas. (grupo 45)
- jueves de 17:00 a 20:00 horas. (grupo 46)
- Laboratorio 5 y Laboratorio de Instrumental de la Facultad de Qumica.
- Se aceptara un retraso mximo de 10 minutos.
- Se aceptaran mximo 3 retrasos, al cuarto retraso el alumno no podr entrar a la practica
y se le reportar una falta.
- Para tener derecho a examen ordinario de la asignatura, el alumno deber acreditar el 80%
de las prcticas de laboratorio. En el caso de examen Extraordinario o titulo de suficiencia
deber acreditar el 80% de asistencia.
2 - NORMAS
- Se respetaran las normas de seguridad de los laboratorios donde se trabaja.
- El uso de la bata es OBLIGATORIO.
- El alumno que no traiga bata, no podr entrar al laboratorio y realizar la prctica. Se le
Considerar como falta.
- Se respetarn a los otros grupos de la Facultad de Qumica que trabajen en el mismo
laboratorio o laboratorios vecinos.

3 - MATERIAL Y EQUIPOS
- El material que se utilizar durante la sesin de laboratorio est a cargo de los alumnos.
- Cada grupo de alumnos deber preparar el material en la maana.
- De no ser as, no se podr realizar la prctica y se considerar como falta.
4 - REPORTE DE LABORATORIO
- Se entregara a los alumnos el manual de laboratorio con el descriptivo de las diferentes
prcticas.
- En caso de modificar una prctica se avisar con una semana de anticipacin a los alumnos y
se les entregar el nuevo temario.
- Cada grupo de alumnos deber llegar a la prctica con el protocolo redactado:
a) Titulo de la prctica

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Qumica Analtica Instrumental

b) Objetivos de la prctica
c) Introduccin breve de la tcnica empleada y justificacin
d) Lista de reactivos, material y equipo
e) Preparacin de la muestra
f) Metodologa y descripcin del anlisis
Al iniciar la prctica, se verificar el protocolo y se calificar (50% de la
calificacin global de la prctica).
-A la siguiente prctica, se entregara el reporte final de la prctica:
g) Resultados y discusin
h) Conclusiones
Se calificar a ese momento la segunda parte (50% de la calificacin global de la
prctica).
La calificacin general correspondiente a la parte de laboratorio ser el promedio de las
calificaciones de los reportes y participar en un 20% de la calificacin general de la asignatura
de Qumica analtica.

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Qumica Analtica Instrumental

ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL.


La palabra INSTRUMENTO, es todo aquello de lo que se vale para efectuar una
accin. En forma estricta, todos aquellos anlisis en los que utilicemos cualquier objeto,
para efectuar alguna medicin podra considerarse dentro del campo del Anlisis
Instrumental.
Prcticamente cualquier propiedad fsica caracterstica de un elemento particular o
de un compuesto, puede ser la base de un mtodo para su anlisis.
Por lo tanto, la absorcin de la luz, la conductividad de una solucin, o la
ionizabilidad de un gas, puede servir como herramienta analtica.
Una de las diferencias primordiales en los dos tipos de anlisis, es el tipo de
propiedad que se analiza (Qumica o Fsica).
Desde el punto de vista prctico, no se puede considerar a ninguna de las dos
clasificaciones como la ms importante, ya que cada una tiene su funcin y aplicacin.
El anlisis por Va hmeda, es el antecedente del Anlisis Instrumental, por razones
histricas, y de hecho, debe considerarse como fundamento del anlisis, ya que cuando
algn mtodo instrumental no da resultados positivos, tenemos que recurrir a un mtodo
por va hmeda, que por lo general ya est estudiado y que no presenta problemas.
El Anlisis Qumico por va hmeda, tiene cuando menos 200 aos de desarrollo,
mientras que el Anlisis Instrumental, tiene solamente 50 aos.
Es casi imposible desligar los dos tipos de anlisis, y es difcil creer que el Anlisis
por va hmeda sea totalmente desplazado por el Anlisis Instrumental.
Un analista debe dominar los dos tipos de anlisis, para resolver cualquier problema
qumico. Por otra parte, ambos tipos de anlisis estn ligados, ya que la preparacin o
separacin de la muestra, casi siempre se hace por alguna tcnica de va hmeda, antes del
anlisis por va instrumental.

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Qumica Analtica Instrumental

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO


FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 1
Valoracin de HCl con NaOH potenciomtricamente y comparacin de la
curva experimental con la obtenida en forma terica
INTRODUCCIN
En numerosos anlisis qumicos es necesaria la utilizacin de soluciones cidos y bases
fuertes de concentraciones conocidas.
La concentracin de dichas soluciones puede determinarse por medio de titulaciones o
valoraciones de neutralizacin.
La titulacin o valoracin es la operacin bsica de la volumetra, mediante la cual se
agrega solucin patrn o un peso exacto de reactivo puro disuelto a la muestra que se
analiza, hasta que se completa la reaccin.
Se considera que una titulacin de neutralizacin o valoracin cido - base termina cuando
el nmero de equivalentes del cido es igual al nmero de equivalentes de la base,
momento en el cual se alcanza el punto de equivalencia de la reaccin.
El punto de equivalencia de la titulacin es un concepto terico; la estimacin prctica de
su valor se conoce como punto final.
Para las titulaciones cido - base, los dos mtodos ms comunes para la determinacin de
los puntos finales son el empleo de indicadores coloreados o el uso de un peachmetro para
controlar el pH de la solucin en funcin del volumen del titulante agregado.
Sin embargo, la mayora de las veces no se encuentra en punto final en el volumen que se
espera.
OBJETIVO

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Qumica Analtica Instrumental

Observar que parmetros influyen en la valoracin potenciomtrica para que no se


encuentre el punto final en el volumen calculado y sobreponer la curva experimental con la
calculada de forma terica.

REACTIVOS

EQUIPO

HCl Conc.
NaOH
Ftalato de potasio
Carbonato de sodio
Indicador Naranja de Metilo
Indicador Fenolftalena

Potencimetro
.

MATERIAL
1 Matraz aforado de 100 mL
1 Matraz aforado de 250 mL
Micropipetas de volumen variable
Un soporte universal
Una parrilla con agitacin
Una pinzas de tres dedos
Una bureta de 50 mL
Un agitador magntico (Tamao arroz)
3 vasos de precipitados de 250 mL
3 vasos de precipitados de 50 mL

Una perilla
Una pizeta
Esptula
Papel para limpiar los electrodos

EXPERIMENTAL
1. Prepar 100 mL de HCl aproximadamente 0.1N y valore con Carbonato de sodio,
para determinar su concentracin real.
2. Prepar 250 mL de NaOH aproximadamente 0.1N y valore con Ftalato de potasio,
para determinar su concentracin real.
3. Realice la titulacin con 25 mL de HCL con el NaOH preparado,
4. Coloque los datos de la titulacin en una hoja de Excel y sobreponga la curva
Experimental con la obtenida de forma terica.
Cuestionario
1.- Numere los requisitos que deben cumplir la solucion patrn ideal.
2.- Discuta que parmetros influyen en la determinacin del punto final.
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3.-Qu % de error encontr entre el punto final experimental comparado con el


calculado.

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FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 2
DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE LOS PUNTOS DE EQUIVALENCIA
DEL CIDO FOSFRICO.
INTRODUCCIN
Una forma del electrodo de vidrio consiste en un tubo de vidrio terminado en un ampolla de pared
fina, con un contacto de platino sumergido en una solucin reguladora, en presencia de una solucin
problema. Su potencial (EG) depende del pH y viene expresado por la ecuacin:
R T
E G cons tan te
ln a H
F
Donde a H designa la actividad de los iones hidrgeno en la solucin problema. El conocimiento
del potencial exacto de este electrodo no es de gran importancia ya que incluye un potencial de
asimetra (debido posiblemente a tensiones en la interfase de vidrio/solucin) que se encuentra a
travs de la membrana de vidrio incluso cuando las soluciones de uno y otro lado, son de la misma
actividad. En la prctica sin embargo, puede medirse el pH en el curso de una valoracin empleando
el dispositivo indicado ms abajo. En consecuencia puede utilizarse este pH como indicador en
valoraciones cido/base, ya que el punto de equivalencia experimenta un cambio relativamente
grande. En esta experiencia se conecta en serie el electrodo de vidrio con un electrodo de referencia.
OBJETIVO
El objetivo de esta prctica es determinar potenciomtricamente los puntos de equivalencia del
cido fosfrico por medio de la primera derivada.
MATERIALES Y REACTIVOS
Un potencimetro
Un soporte universal
Un agitador magntico
Una parrilla con agitacin
Una pinzas de tres dedos
Una bureta de 50 mL
Un matraz erlenmeyer de 250 mL
Un matraz aforados de 100 mL
Un matraz aforado de 50 mL
Una pizeta
Una perilla

Solucin de cido fosfrico 0.2 (50 mL


Solucin de hidrxido de sodio 0.5 M (100 mL)

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Qumica Analtica Instrumental

Cuatro vasos de precipitados de 50 mL


Papel para limpiar los electrodos
Esptula
Micropipeta

MTODO
En un matraz erlenmeyer de 250 mL se vierten 50 mL de cido fosfrico y se valora con hidrxido
de sodio hasta tener un volumen considerable despus del ltimo punto de equivalencia.
REPORTE
Los resultados se tabulan de la siguiente manera:
VOLUMEN DE
PH
HIDRXIDO DE SODIO
EN ML

D(PH)/DV

Trace en ecxel los siguientes grficos:


a) pH en funcin del volumen en mL de hidrxido de sodio
d ( pH )
b)
en funcin del volumen en mL de hidrxido de sodio
dv
c) Sobre poner ambas grficas.

pH

d(pH)/dv

NaOH en mL

NaOH en mL

(b)

(a)

Los puntos de inflexin que se observan en la primera curva corresponden a los picos que aparecen
en la segunda grfica.

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Qumica Analtica Instrumental

Determinar en que pH se encuentran los puntos de equivalencia.


Explicar porque se encuentran tan slo dos puntos de equivalencia en la valoracin de este cido.
Realizar el diagrama de distribucin del cido fosfrico y verificar que los pKa coincidan con los
puntos de equivalencia, en caso contrario, discuta los resultados.

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FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 3
USO Y APLICACIONES DE LA ESPECTROFOTOMETRIA DE ULTRAVIOLETA
VISIBLE EN LOS COLORANTES ORGANOSINTTICOS

INTRODUCCIN
Los colorantes utilizados por la industria como son el rojo 40, amarillo 5, etc. son
factibles de ser analizados por espectrometra de absorcin, de una manera rpida y con
alta exactitud.
PROPSITO
El alumno aprender a utilizar el equipo de ultravioleta-visible para analizar la
pureza de los colorantes organosintticos por medio del modo de barrido.
Aprender a dar lectura a un espectro de ultravioleta, a identificar los parmetros de
medicin en el espectro y a sacar conclusiones a travs de la lectura de esos parmetros.
APLICACIN
Aplicable a colorantes artificiales alimenticios.

FUNDAMENTO TEORICO
La absorcin molecular en la regin ultravioleta y visible del espectro depende de la
estructura electrnica de la molcula. La absorcin de energa se cuantifica y da por
resultado la elevacin de los electrones desde orbitales en el estado bsico a orbitales de
mayor energa en un estado excitado. Para muchas estructuras electrnicas, la absorcin no
ocurre en una porcin fcilmente accesible de la regin ultravioleta. En la prctica, la
espectrometra ultravioleta est limitada en gran parte a los sistemas conjugados.
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Qumica Analtica Instrumental

Sin embargo se tiene gran ventaja en cuanto a la selectividad de la absorcin


ultravioleta: los grupos caractersticos pueden reconocerse en molculas de complejidad
ampliamente variable. Una gran parte de la molcula relativamente compleja puede resultar
transparente en el ultravioleta de modo que existe la posibilidad de obtener un espectro
similar al de una molcula bastante mas simple. Mas bien nuestro objetivo consiste en
establecer las correlaciones entre los espectros y la estructura que puede utilizar el qumico.
El espectro ultravioleta est formado por una grfica de la longitud de onda en funcin de la
intensidad de absorcin.

Intensidad
A

nm
Figura 1. Representacin de una grfica de un espectro de ultravioleta.
Los datos frecuentemente se muestran en forma de grfica o presentacin tabular de
la longitud de onda en funcin de la absorptividad molar o el logaritmo de la absorptividad
molar max o log mx
El uso de la absorptividad molar como unidad de la intensidad de absorcin tiene la
ventaja de que todos los valores de intensidad se refieren al mismo nmero de especies
absorbentes.
Las longitudes de onda en la regin ultravioleta generalmente se indican en
nanmetros (lnm=10-7 cm) o amstroms, (1A= 10-8 cm). Ocasionalmente, la absorcin se
indica en nmeros de onda; nosotros estamos principalmente interesados en la regin de
ultravioleta que se extiende desde 200 hasta 300 nm. La atmsfera es transparente en est
regin que resulta ser fcilmente accesible con la ptica del cuarzo.
La energa total de la molcula es la suma de su energa electrnica de unin, su
energa vibracional y su energa rotacional. La magnitud de estas energas disminuye en el
orden siguiente:
Eelec, Evib, y Erot. La energa absorbente en la regin ultravioleta produce cambios en la
energa electrnica de la molcula que resulta de las transiciones de electrones de valencia
en la molcula.
Estas transiciones consisten en la excitacin de un electrn desde un
orbital molecular lleno al siguiente orbital de energa mayor. El orbital anti-enlace se
designa por un asterisco se indica de la siguiente forma: *
La relacin entre la energa absorbida en una transicin electrnica y la frecuencia
(v), longitud de onda y nmero de ondas de la radiacin que produce la transicin es:
E=hv=hc/=hvc
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Qumica Analtica Instrumental

Donde h es la constante de Planck, y c la velocidad de la luz.E es la energa absorbida en


una transicin electrnica en una molcula desde un estado de energa bajo hasta un estado
de energa alto (estado excitado). La energa absorbida depende de la diferencia de energa
entre el estado bsico y el estado excitado; cuanto menor es la diferencia de energa mayor
la longitud de onda de la absorcin. El exceso de energa en el estado excitado puede dar
por resultado la disociacin o ionizacin de la molcula o se puede volver a emitir en forma
de calor o luz. El desprendimiento de energa en forma de luz da por resultado la
fluorescencia o fosforescencia.
Ya que la energa ultravioleta es cuantificada, el espectro de absorcin que se
origina de una transicin electrnica simple debe consistir en una lnea discreta simple.
Los espectros de las molculas simples en estado gaseoso consisten en picos de
absorcin estrechos, representando cada uno de los mismos una transicin desde una
combinacin particular de niveles vibracionales y rotacionales en el estado bsico
electrnico hasta una combinacin correspondiente en el estado excitado; Donde los niveles
se designan como v0, v1, v2 y as sucesivamente.
En las molculas de mayor complejidad que contienen ms tomos, la multiplicidad de los
subniveles vibracionales y la cercana de su espaciamiento da lugar a que las bandas
discretas se derrumben, obtenindose bandas de absorcin amplias.
Las principales caractersticas de una banda de absorcin son su posicin e
intensidad. La posicin de la absorcin corresponde ala longitud de onda de la radiacin
cuya energa es igual a la requerida para la transicin electrnica. La intensidad de la
absorcin depende principalmente de dos factores: la probabilidad de interaccin entre la
energa de radiacin y el sistema electrnico para elevar el estado bsico al estado
excitado, as como la polaridad del estado excitado.
La absorcin intensa se presenta cuando la transicin va acompaada de un gran
cambio en el momento de transicin. La absorcin con mx 104 es una absorcin de alta
intensidad; la absorcin de baja intensidad corresponde a los valores de mx 103. Las
transiciones de baja probabilidad son transiciones prohibidas.
La intensidad de la absorcin puede expresarse como trasmitancia (T) definida por
T= I/I0
Donde I0=intensidad de la energa radiante que incide en la muestra e I=intensidad
de la energa radiante que sale de la muestra. Una expresin ms conveniente para la
intensidad de absorcin es la que se deriva de la ley de Lambert-Beer:
log10= (I0/I) =kcb= A
donde k = constante caracterstica del soluto
c = concentracin del soluto
b = longitud de la trayectoria a travs de la muestra
A = absorbancia
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Cuando c se expresa en moles por litro = A = cb donde l trmino se conoce


como absorptividad molar.
Si ahora se define la concentracin c del soluto como g/l, la expresin se
transforma en
A = abc
donde a es la absorptividad y consecuentemente relacionada con la absorptividad
molar mediante
= aM
donde M es el peso molecular del soluto.
La intensidad de una banda de absorcin en el espectro ultravioleta generalmente
se expresa como la absorptividad molar a la mxima absorcin, mx o log mx. Cuando se
desconocen la constitucin de un material absorbente, la intensidad de la absorcin puede
expresarse en la forma:
Ecm% =A / cb
Donde
c = concentracin en gramos por 100 mL
b = longitud de la trayectoria a travs de la muestra en centmetros.

IDENTIFICACION ESPECTROMETRICA DE COMPUESTOS ORGANICOS


Es necesario definir algunos trminos que frecuentemente se utilizan en la descripcin de
los espectros electrnicos.
CROMFORO. Un grupo insaturado covalentemente que es responsable de la
absorcin electrnica por ejemplo C=C, C=O Y NO2.
AUXCROMO. Un grupo saturado que, cuando se encuentra unido a un
cromforo, altera tanto la longitud de onda como la intensidad del mximo de absorcin;
por ejemplo OH, Cl.
Desplazamiento batocrmico. Es el desplazamiento de la absorcin a una mayor longitud
de onda debido al efecto del solvente.
Desplazamiento hipsocrmico. Es el desplazamiento de la absorcin a una menor longitud
de onda debido a un efecto de solvente.
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Qumica Analtica Instrumental

Efecto hipercrmico. Aumento de la intensidad de absorcin.


Efecto hipocrmico. Disminucin de la intensidad de absorcin.
Las caractersticas de absorcin de las molculas orgnicas en la regin ultravioleta
dependen de las transiciones electrnicas que pueden ocurrir y del defecto del medio
atmico en las transiciones.
La siguiente figura se resume las facilidades relativas con que pueden ocurrir las
diversas transiciones.

* de anti-enlace
* de anti-enlace
E

n(p) sin enlace

de enlace
de enlace
An cuando los cambios de energa no se muestran a escala, se puede observar fcilmente,
por ejemplo que la transicin n * requiere de menor energa que la transicin .
Las transiciones n * tambin denominadas bandas R de los grupos cromforos
simples tal como el grupo carbonilo es prohibido y las bandas correspondientes se
caracterizan por bajas absorptividades molares, tambin estn caracterizadas por el
desplazamiento hipsocrmico.
Cuando las bandas adicionales hacen su aparicin, la transicin n * se desplaza a una
mayor longitud de onda pero puede quedar hundida en bandas de mayor intensidad.
Las bandas atribuidas a las transiciones * ( bandas K) aparecen en el espectro de las
molculas que tienen estructuras .
Estas transiciones * estn caracterizadas por una alta absorptividad molar,mx
10000.
Las transiciones * ( bandas K) de los sistemas di o polieno conjugados pueden
distinguirse de las correspondientes a los sistemas de enona al observar el efecto de
cambiar la polaridad del solvente. Las transiciones * de los sistemas dieno o polieno
no son esencialmente sensibles a la polaridad del solvente, los dobles enlaces de
hidrocarburo no son polares. Sin embargo, las absorciones correspondientes de las enonas
quedan sometidas al desplazamiento batocrmico, el cual frecuentemente va acompaado
del aumento en la intensidad conforme se incrementa la polaridad del solvente.
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Qumica Analtica Instrumental

Las bandas B ( bandas bencnica) son caractersticas de los espectros de molculas


aromticas y heteroaromticas. El benceno muestra una banda de absorcin amplia, con
picos mltiples, en la regin del ultravioleta cercano entre 230 y 270 nm.
Cuando un grupo cromoforo est unido al anillo aromtico, las bandas B se observan a
mayores longitudes de onda que las transiciones *
Las bandas E ( bandas etilnicas), igual que las bandas B, son caractersticas de las
estructuras aromticas. Las bandas E1 y E2 del benceno se observan cerca de 180 nm y 200
nm respectivamente. La sustitucin auxocrmica lleva la banda E 2 a la regin del
ultravioleta cercano.
En la sustitucin auxocrmica, el heterotomo con el par solo de electrones comparte
estos electrones con el sistema de electrn del anillo, facilitando la transicin .
La absorptividad molar de las bandas E generalmente vara entre 2000 y 14 000.
ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD
1)
2)
3)
4)

Las soluciones preparadas debern ser desechadas en la tarja.


Se deber usar bata, la cual deber estar debidamente abrochada.
No se deber pipetear con la boca.
Para prevenir contaminacin de los estndares, se deber lavar la esptula de pesada y
enjuagar los matraces volumtricos.
5) No secar con papel higinico las celdas de cuarzo pues se rayan.
6) No derramar muestra dentro del equipo.
MATERIALES Y METODOS
Balanza analtica
Espectrofotmetro
Matraz volumtrico de 1000 mL (2)
Vaso de precipitado de 100 mL
Vaso de precipitado de 500 mL
Pipeta de 25 mL
Matraz volumtrico de 500 mL
Agua destilada
Estndares de colorantes hidrosolubles: Amarillo 5, Amarillo 6, Azul 1, Rojo 40.

PROCEDIMIENTO
A) Uso del equipo, lectura del espectro, modos de operacin.
Pesar el estndar con el fin de obtener una concentracin de 0.01 g/l y aforar en
matraz volumtrico. Colocar la muestra dentro de una celda de cuarzo y efectuar un barrido
espectofotomtrico de 380 a 750 nm. Determinar la absorbancia a la mxima longitud de
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Qumica Analtica Instrumental

onda. Repetir la operacin para otras concentraciones con el fin de que se obtenga una
absorbancia que caiga dentro de la linearidad que marca la ley de Beer.

Reportar:
Procedimiento de anlisis de la muestra
Longitud de onda de l pico o picos mximos
Explicar los modos de operacin del equipo.
Tabla1
Colorante
Amarillo 5
Amarillo 6
rojo 40
Azul 1

de Onda (nm)
428
484
502
630-625

Con. (g / l)
0. 01
0. 01
0. 01

18

absortividad (l / g cm)
53
55
55.6

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Qumica Analtica Instrumental

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FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 4
PREPARACIN DE LA CURVA DE CALIBRACIN PARA
DETERMINAR Cr VI
INTRODUCCIN
La espectroscopia es muy til como tcnica de anlisis cuantitativo, en compuestos muy
diversos, desde los orgnicos complejos hasta inorgnicos y metales como Cr, siempre y
cuando sean grupos cromforos , que posean color o formen complejos coloridos.
OBJETIVO
Que el alumno aplique los conocimientos adquiridos acerca de la espectrofotometra visible
en la elaboracin de una curva de calibracin con el fin de realizar un anlisis cuantitativo
de muestras problema.
MATERIAL

12 Matraces aforados de 25 mL.


2 matraces aforados de 100 mL
1 matraz aforado de 50 mL
2 pipetas volumtricas de 10 mL
5 pipetas volumtricas de 1mL
1 frasco color ambar
1 vaso de pp de 500 mL

Difenilcarbazida
HNO3 concentrado
K2Cr2O7
H2SO4

REACTIVOS

EXPERIMENTAL
Preparar las siguientes disoluciones:
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Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

1) Disolucin de difenilcarbazida (DFC).


Pesar 0.125g de DFC y disolver en un matraz volumtrico de 25 mL con acetona, y aforar.
Almacenar en un frasco color mbar y refrigerar.
2) Solucin de HNO3 al 10%
En un matraz aforado de 100 mL, colocar 10 mL de HNO3 concentrado y aforarlo con agua
destilada.
3) Disolucin Madre de Cromo (500 g/L)
Pesar 0.141 g de K2Cr2O7 y ponerlo en 30 mL de agua. Agregar 10 mL de HNO3 al 10% y
aforar con agua a 100 mL y medir el pH.
4) Disolucin estndar (STD) de Cromo (VI)
Tomar 1mL de la solucin Madre y aforar a 100 mL
5) Disolucin de H2SO4 1.2 M
En un matraz volumtrico de 50 mL, aadir 3.33 mL de H2SO4 concentrado y aforar.
PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR LA CURVA DE CALIBRACIN
En 11 matraces aforados de 25 mL adicionar en cada uno de ellos las siguientes cantidades
de solucin STD de Cr VI.
mL. 0 2
g 0 10

4 6 8
10
20 30 40 50

12
60

14
70

16
80

18
20 (solucin STD de Cr VI)
90 100

A cada matraz adicionar 1 mL de H2SO4 y 1mL de DFC y aforar a 25 mL con agua


destilada, posteriormente se procede a leer en el equipo UV-VIS para realizar la curva de
calibracin.
PROCEDIMIENTO PARA CUANTIFICAR Cr VI.
Una vez, que se tienen las disoluciones preparadas, se realiza los siguientes pasos para
cuantificar en el mismo equipo:
En un matraz volumtrico de 25 mL:
1) Agregar 1 mL de la muestra
2) Agregar 1 mL de H2SO4 1.2 M
3) Agregar 1 mL de DFC
4) Agregar 1 mL de HNO3 al 10%
20

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

5) Aforar con agua destilada


Medir el pH de la disolucin. Posteriormente se procede a cuantificar con la curva de
calibracin realizada.
UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO
FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 5
DETERMINACIN DE PLOMO EN SUELO URBANO MEDIANTE
ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN ATMICA
Fundamento
La utilizacin del compuesto Pb-tetraetilo como antidetonante en algunas gasolinas
constituye una fuente de contaminacin adicional provocada por los motores de combustin
que la utilizan. El plomo liberado junto a los gases de combustin se deposita en el suelo en
forma de pequeas partculas, en su mayor parte en forma de xido de plomo. En algunas
calles de nuestras ciudades en las que el trfico es intenso se pueden encontrar
concentraciones de plomo en el suelo urbano del orden de 2000 ppm o incluso superiores.
En das de viento este elemento puede ser inhalado por los transentes, incorporado a las
aguas y a las plantas.
Su elevado carcter txico ha obligado a dictar una normativa europea por la que se
prohibir a partir del ao 2000 la circulacin de vehculos que utilicen combustibles que
contengan dicho elemento.
En esta prctica se determina el contenido en plomo de una muestra de suelo
urbano suministrada por el alumno. Para ello se somete a la misma a un proceso previo de
lixiviacin con una disolucin cida, al objeto de extraer el elemento y separarlo del resto
insoluble. Seguidamente se determina por espectroscopa de absorcin atmica.
Reactivos y disoluciones necesarias
cido ntrico concentrado
Disolucin de cido ntrico 0.01 M.
Solucin patrn de Pb de 1000 ppm.
Material e Instrumentacin necesarios
Espectrofotmetro de absorcin atmica.
Lmpara de ctodo hueco de Pb.
Papel de filtro de cenizas conocidas.
21

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Matraces aforados de 50 mL.


Tamiz
Condiciones de trabajo del Espectrofotmetro de absorcin atmica
-

Intensidad de la lmpara: 10 mA.


= 283.3 nm.
Rendija (slit) = 0.7nm.
Flujo de gases: Aire (4.5), Acetileno (2.0).

Procedimiento de operacin
1. Tratamiento de la muestra
Pesar exactamente alrededor de 0.5 g de muestra, previamente tamizada y desecada
durante 2 h. a 110 C, y transferirla a un vaso de precipitado de 100 mL. Aadir 5 mL
de HNO3 y calentar en una parrilla hasta casi sequedad. Aadir 10 mL de HNO 3 0.01
M, calentar unos minutos para disolver las sales y filtrar. Transferir el lquido filtrado a
un matraz de 50 mL y aforarar con HNO3 0.01 M.
2. Determinacin de plomo en la disolucin de la muestra
-

Preparar varias disoluciones patrn de Pb a partir de la disolucin de 1000 ppm, en las


concentraciones indicadas en la tabla siguiente. Utilizar matraces de 10 mL y aforar
con cido ntrico 0.01 M.
Estndar de Pb 1000 ppm
Volumen (mL)

[Pb]Final
(ppm)
2
6
10
20
40
60
80

22

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Encender el espectrofotmetro de A.A. e introducir los parmetros de trabajo para


medir en condiciones ptimas. Medir las absorbancias de las disoluciones patrn y de la
muestra problema, ajustando el blanco con una disolucin de HNO3 0.01 M.

Si el contenido en plomo de la muestra problema fuera demasiado elevado y la medida


de absorbancia se saliera del intervalo de calibracin, se diluye la disolucin problema
con HNO3 0.01 M y se repite la medida.

Resultados
Peso de la muestra es de:
[Pb](ppm)
Absorbancia

10

20

40

60

80

Problema

Clculos
Realizar una grfica con las absorbancias obtenidas frente a la concentracin de Pb.
Ajustar una recta a los puntos experimentales, y a partir de la misma calcular el
contenido en plomo de la disolucin problema y posteriormente el que hay en la
muestra.
[Pb]muestra es de:

23

(g/g)

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

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FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 6
MANEJO DE MUESTRAS PARA SER LEDAS EN ESPECTROFOTOMETRA
DE LUZ INFRARROJA.
INTRODUCCIN
Espectroscopia de infrarrojo.
La espectroscopia de luz infrarroja tiene una gran aplicacin en el anlisis
cualitativo y cuantitativo. Su principal utilizacin ha sido la identificacin de compuestos
orgnicos, que por lo general presentan espectros complejos en el infrarrojo medio con gran
nmero de mximos y mnimos que resultan tiles al efectuar comparaciones.
En muchos casos el espectro de infrarrojo medio proporciona una huella nica con
unas caractersticas que se distinguen fcilmente de los modelos de absorcin del resto de
compuestos; solo los ismeros pticos absorben exactamente de la misma forma.
La ordenada de la grfica corresponde a una escala lineal de transmitancia y la
abscisa mide linealmente los nmeros de onda en unidades de cm 1.
La regin infrarroja del espectro electromagntico incluye la radiacin con nmeros
de onda entre los 12 800 y los 10 cm -1, lo que corresponde a longitudes de onda de 0.78 a
1000 m1.
La tabla 1 identifica las regiones del Espectro de infrarrojo desde el punto de vista
de las aplicaciones y del instrumento a utilizar la regin del espectro.
Tabla 1. Regiones del espectro infrarrojo.
Regin Intervalo de longitudes Intervalo de nmeros Intervalo de
de onda(), m
de onda(), cm-1
frecuencias(), Hz
Cercano 0,78 a 2,5
12 800 a 4000
3,8 x 1014 a 1,2 x 1014
Medio
2,5 a 50
4000 a 200
1,2 x 1014 a 6,0 x 1012
Lejano 50 a 1000
200 a 10
6,0 x 1012 a 3,0 x 1013
La ms 2,5 a 670
4000 a 670
1,2 x 1014 a 2,0 x 1013
utilizad
a
24

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

La gran mayora de las aplicaciones analticas del espectro infrarrojo se han


restringido al uso de una parte de la regin comprendida entre los 4000 y los 400 cm-1 ( de
2,5 a 25 m). Sin embargo en la analtica actual se van encontrando un nmero creciente de
aplicaciones de la espectroscopa infrarroja cercana y lejana.
Adems de su aplicacin como herramienta en anlisis cualitativo, las medidas en el
infrarrojo tambin estn encontrando un uso cada vez mayor en el anlisis cuantitativo. En
este caso, su elevada selectividad a menudo hace posible la cuantificacin de una sustancia
en una mezcla compleja, no siendo necesaria una separacin previa. El principal campo de
aplicacin de este tipo de anlisis se halla en la cuantificacin de contaminantes
atmosfricos que provienen de procesos industriales.
Cambios dipolares durante las vibraciones y las rotaciones.
Por lo general, la radiacin infrarroja no es suficientemente energtica como para producir
las transiciones electrnicas que se dan cuando se trata de las radiaciones ultravioleta y
visible.
La absorcin de radiacin infrarroja se limita as en gran parte a especies moleculares para
las cuales existen pequeas diferencias de energa entre los distintos estados vibracionales y
rotacionales.
Para absorber radiacin infrarroja, una molcula debe experimentar un cambio neto en el
momento dipolar como consecuencia de un movimiento de vibracin o de rotacin. Slo en
estas circunstancias, el campo elctrico alternante de la radiacin puede interaccionar con la
molcula, y causar as cambios en la amplitud de algunos de sus movimientos. Por ejemplo,
la distribucin de carga alrededor de una molcula tal como el cloruro de hidrgeno no es
simtrica, ya que el cloro posee una mayor densidad electrnica que el hidrgeno. Por
tanto, el cloruro de hidrgeno posee un momento dipolar significativo, y por ello se dice
que es una molcula polar. El momento dipolar est determinado por la magnitud de la
diferencia de carga y por la distancia entre ambos centros de carga.
Dado que la molcula de cloruro de hidrgeno vibra, se produce una fluctuacin regular del
momento dipolar lo que origina un campo que puede interaccionar con el campo elctrico
asociado a la radiacin. Si la frecuencia de la radiacin iguala exactamente a la frecuencia
de vibracin natural de la molcula, ocurre una transferencia neta de energa que da lugar a
un cambio en la amplitud de la vibracin molecular; como consecuencia se absorbe la
radiacin. De manera anloga, la rotacin de molculas asimtricas alrededor de sus
centros de masa produce una fluctuacin dipolar peridica que puede interaccionar con la
radiacin.
Cuando se trata de especies homonucleares como el O2, N2 o Cl2, el momento dipolar no se
altera durante la vibracin o la rotacin y, este tipo de compuestos no absorben en el
infrarrojo.
Tcnicas para la manipulacin de las muestras.
25

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

1-. Muestra de gases.


El espectro de un lquido de bajo punto de ebullicin o de un gas se puede obtener
permitiendo a la muestra que se expanda en una cubeta a la que se le ha hecho el vaco.
Existe una variedad de cubetas para este objeto, con longitudes de camino ptico que varan
desde unos pocos centmetros a varios metros. Las mayores longitudes de camino ptico se
obtienen en cubetas compactas que poseen superficies reflectantes interna, de modo que el
haz pasa numerosas veces por la muestra antes de salir de la cubeta.
2-. Disolventes.
No existe un solo disolvente que sea transparente en toda la regin del infrarrojo medio.
El agua y los alcoholes se utilizan rara vez, no slo porque absorben intensamente, sino
porque tambin atacan a los haluros de metal alcalino, que son los materiales ms comunes
que se utilizan en las ventanas de las cubetas. Por estas razones, es necesario secar los
disolventes indicados en la figura anterior antes de ser utilizados.
Debido a la tendencia de los disolventes a absorber, las cubetas para el infrarrojo suelen ser
mucho ms estrechas (0,1 a 1 mm) que las empleadas en las regiones ultravioletas y visible.
Los caminos pticos en el infrarrojo requieren por lo comn, concentraciones de muestra de
0,1 a un 10 %. Con frecuencia, las celdas son desmontables, con espaciadores de Tefln que
permiten variar la longitud del camino ptico. Las celdas de camino ptico fijo se pueden
llenar o vaciar con una jeringa hipodrmica.
Las ventanas de cloruro de sodio son las ms utilizadas y aun teniendo cuidado, stas
finalmente se velan debido a la absorcin de humedad. Si se pulen con un polvo
amortiguador vuelven a su condicin original.
3-. Lquidos puros.
Cuando la cantidad de muestra es pequea o cuando no se dispone del disolvente
apropiado, es habitual obtener los espectros del lquido puro. En este caso, slo una pelcula
muy delgada tiene un camino ptico suficientemente corto como para producir espectros
satisfactorios. Por lo comn, una gota del lquido puro se comprime entre dos placas de sal
de roca para obtener una placa con un grosor de 0.01 mm o menos. Las dos placas se
mantienen unidas por capilaridad y se colocan entonces en la trayectoria del haz. Sin duda,
con esta tcnica no se obtienen datos de transmitancia muy reproducibles, pero resulta
satisfactoria para muchas investigaciones cualitativas.
4-. Slidos.
Los espectros de slidos que no pueden disolverse en un disolvente transparente al
infrarrojo, se obtienen con frecuencia dispersando el analito en una matriz lquida o slida,
y analizando la mezcla resultante. Estas tcnicas requieren que el tamao de la partcula del
26

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

slido suspendido sea menor que la longitud de onda del haz infrarrojo; si no se cumple
esta condicin, se pierde una parte de la radiacin por dispersin.
Uno de los mtodos utilizados para preparar la mezcla a analizar consiste en triturar de 2 a
5 mg de una muestra finamente pulverizada (tamao de partcula 2 m) en presencia de
una o dos gotas de un aceite pesado de un hidrocarburo (Nujol). Si es probable que
interfieran las bandas del hidrocarburo, se puede utilizar Fluorolube, un polmero
halogenado. En cualquier caso, la mezcla resultante se examina luego como una delgada
pelcula entre planas de sal.
En una segunda tcnica, se parte de un miligramo o menos de una muestra finamente
triturada que se mezcla ntimamente con unos 100 mg de polvo de bromuro de potasio
desecado. La mezcla se puede efectuar con un mortero, y mejor an en un pequeo molino
de bolas. La mezcla se comprime luego en un troquel especial a una presin de 700 a 1000
kg/cm2, para obtener un disco transparente. Se obtienen mejores resultados si se forma el
disco en el vaco para eliminar l aire ocluido. A continuacin, el disco se coloca en el haz
del instrumento para su anlisis espectroscpico. Los espectros resultantes a menudo
presentan bandas a 345 y 1640 cm-1 (2,9 y 6,1 m) debidas a la humedad absorbida.

5-. Reflectancia difusa.


La espectroscopia de reflectancia difusa en el infrarrojo se ha convertido en una tcnica
importante para la determinacin rutinaria de los constituyentes en slidos finamente
divididos. De hecho es ampliamente utilizada en la determinacin de protenas, humedad,
almidn, aceites, lpidos y celulosa en productos agrcolas tales como granos y aceites de
semillas, etc.
En la espectroscopa de reflectancia en el infrarrojo cercano, la muestra finamente
pulverizada se irradia con una o ms bandas de radiacin de longitud de onda comprendida
entre 1 y 2,5 m, o 10 000 y 4000cm-1. Se produce una reflectancia difusa, en la que la
radiacin penetra a travs de la superficie de la capa de partculas, excita los modos de
vibracin de las molculas del analito, y luego se dispersa en todas direcciones. De este
modo, se produce un espectro de reflectancia que depende de la composicin de la muestra.
En el grfico se escribe en el eje de la ordenada el logaritmo de la inversa de la reflectancia
R, donde R es el cociente entre la intensidad de radiacin reflejada por la muestra y la
reflectancia de un patrn, como puede ser el sulfato de bario u xido de magnesio
finamente pulverizados. Para las mediciones de la reflectancia, las muestras se pulverizan
hasta un tamao de partcula controlado y homogneo y se mide su reflectancia a dos o
ms longitudes de onda. Para establecer las longitudes de onda ptimas se ha de emplear un
tiempo y un esfuerzo considerables.
La gran ventaja de los mtodos de reflectancia en el infrarrojo cercano es su rapidez y su
simplicidad en la preparacin de la muestra.
27

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Aplicaciones cualitativas de la absorcin en el infrarrojo medio.


La identificacin de un compuesto orgnico a partir de los espectros de infrarrojo es un
proceso en dos etapas. La primera etapa implica la determinacin de los grupos funcionales
que parece ms probable que estn presentes, examinando la regin de frecuencias de
grupo, que abarca la radiacin comprendida desde los 3600 cm -1 a los 1200 cm-1
aproximadamente. La segunda etapa consiste en una comparacin detallada del espectro
desconocido con los espectros de compuestos puros que contienen los grupos funcionales
encontrados en la primera etapa. En este caso, la regin de la huella digital, de 1200 cm -1
a 600cm-1, es muy til, debido a que pequeas diferencias en la estructura y la constitucin
de una molcula provocan cambios significativos en el aspecto y la distribucin de los
picos en esta regin. En consecuencia, una gran coincidencia de la regin de "huella
digital" (as como en otras) entre los espectros de dos compuestos constituye casi una
evidencia de su identidad.
La frecuencia aproximada ( o nmero de onda) en la que un grupo funcional, como C=O,
C=C, CH, CC, o OH, absorbe radiacin infrarroja, se puede encontrar en tablas
especializadas.
Debido a las interacciones con otras vibraciones asociadas con uno o ambos tomos que
forman el grupo, estas frecuencias denominadas frecuencias de grupo rara vez
permanecen invariables. Por otra parte, los efectos de las interacciones suelen ser pequeos;
como consecuencia de ello, se puede asignar un intervalo de frecuencias dentro del cual es
muy probable encontrar el pico de absorcin para un grupo funcional determinado.

La tabla 2 muestra de forma abreviada las frecuencias de grupo para algunos de los grupos
orgnicos funcionales ms comunes.
Enlace

Tipo de compuesto

CH

Alcanos

CH

Alqueno
C C
H

CH
CH

Alquinos (CCH)
Anillos aromticos

OH

Alcoholes, fenoles
Alcoholes con puente de
hidrgeno, fenoles.
cidos carboxlicos
cidos Carboxlicos con
puente de hidrgeno
Aminas, amidas
Alquenos
Anillos aromticos
Alquinos
Aminas, amidas
Nitrilos
Alcoholes, teres, cidos
carboxlicos, steres
Aldehdos, cetonas, cidos
carboxlicos, steres

NH
CC
CC
CC
CN
CN
CO
CO

Intervalo de frecuencias, cm-1

Intensidad

2850 2970
1340 1470
3010 3095
675 995

Fuerte
Fuerte
Media
Fuerte

3300
3010 3100
690 900
3590 3650
3200 3600

Fuerte
Media
Fuerte
Variable
Variable, a veces ancha

3500 3650
2500 2700
3300 3500
1610 1680
1500 1600
2100 2260
1180 1360
2210 2280
1050 1300
1690 1760

28

Media
Ancha
Media
Variable
Variable
Variable
Fuerte
Fuerte
Fuerte
Fuerte

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental
NO2

Nitrocompuestos

1500 1570
1300 1370

Fuerte
Fuerte

Tabla 3. PROPIEDADES DE LOS MATERIALES PARA VENTANAS EN INFRARROJO

Material
CLORURO DE
SODIO (NaCL)
BROMURO DE
POTASIO (KBR)
CLORURO DE
POTASIO (KCl)
IODURO DE
CESIO (CsI)
SILICA FUNDIDA
(SiO)
FLORURO DE
CALCIO(CaF)
FLORURO DE
BARIO (BaF)
BROMOIODUYR
O DE TALIO(Krs5)
BROMURO DE
PLATA (AgBr)
SULFITO DE
ZINC
POLICRSITALINO
(IRTRAN-2)
ZnS
SELENURO DE
ZINC
POLICRISTALINO
(IRTRAN-4)
ZnSe
TELURIO DE
CADMIO (CdTe)
POLIETILENO
(ALTA
DENSIDAD)

ndice de refraccin Rango de transmisin til cm-1

Rango de transmisin til


1 000 cm-1(10m)

Solubilidad en
agua(g/g de agua)

0.25-16

40 000-625

1.49

36 (a 20C)

0.25-26

40 000-385

1.52

65.2 (a 20 C)

0.25-20

40 000-500

1.46

34.7

0.30-50

33 000-200

1.74

160

0.20-4

50 000-2 500

Insoluble

0.20-9

50 000-1 100

1.51 X 10 -3

0.2-13

50 000-770

1.42
(a 3333 cm-1)
1.39
(a 2000 cm-1)
1.42

0.6-40

16 600-250

2.37

4.76 x 10 -2

0.5-35

20 000-285

12 s 10-6

1-14

10 000-715

2.2
(aproximado)
2-20

Insoluble

1-19.5

10 000-515

2.41

Insoluble

2-2.28

5 000-360

2.67

Insoluble

16-333

625-30

1.54
(a 5 000cm-1)

Insoluble

0.12

Debe observarse que aunque la mayora de las frecuencias de grupo estn en


intervalo de 3600 cm-1 a 1250 cm-1, unas pocas veces se encuentran en la regin de la
huella digital. Estas incluyen la vibracin de tensin C-O-C a unos 1200 cm -1 y la
vibracin de tensin C-Cl en 700 a 800 cm-1.
En la regin de la huella digital entre 1200 y 700 cm -1 pequeas diferencias en la
estructura y la constitucin de las molculas originan cambios importantes en la
distribucin de los picos de absorcin. Como consecuencia, la estrecha correspondencia
entre dos espectros en esta regin ( y en otras ) constituye una evidencia de la identidad de
los compuestos que producen los espectros. La mayora de los enlaces simples originan
bandas de absorcin a estas frecuencias y como sus energas son aproximadamente iguales,
29

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

se produce una fuerte interaccin entre los enlaces vecinos. Las bandas de absorcin son
pues el resultado combinado de estas distintas interacciones y dependen de la estructura
bsica general de la molcula.
Debido a su complejidad, raramente es posible la interpretacin exacta de los
espectros en esta regin; por otra parte, esta complejidad es la que conduce a la
singularidad y por consiguiente a la utilidad de la regin para fines de identificacin.
PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un anlisis cualitativo de algunos empaques usados
en la industria.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Espectrofotmetro de Luz
Infrarroja.
2. Que el estudiante aprenda a manejar una muestra para ser tratada en IR
3. Qu el estudiante compare los resultados obtenidos entre los mtodos de manejo de
muestra para IR.
FUNDAMENTO TERICO
Dependiendo de la forma de manejar una muestra para ser leda por IR ser el
resultado del espectro o interferograma obtenido, ya que una muestra puede ser disuelta,
pulverizada o leda de manera directa; de la forma como sea tratada depender la cantidad
de interferencias o picos de fondo que deban tomarse en cuenta, para interpretar un espectro
de IR.
ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD
Todo el material debe estar perfectamente seco y limpio al igual que las manos de quien manipule
las muestras.

MATERIALES Y METODOS
1.-Espectrofotmetro de Luz Infrarroja Nicolet
2.-Esptula
3.- Mortero de gata con pistilo de gata
4.- Ventanas par IR de NaCl
5.- Prensa
6.- Dado para pastillas de IR
7.- Soporte para pastillas

REACTIVOS:
Las sustancias que a continuacin se mencionan deben ser grado espectro, a menos que se
indique lo contrario.
KBr
30

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Cloroformo
Progesterona
Argn HUP
PROCEDIMIENTO
a) Pastilla
1. Coloque una pequea cantidad de KBr (20mg aprox.) en el mortero de gata y
mulalo un poco.
2. Arme el dado para hacer pastillas como le indique el profesor (a) y coloque el KBr
dentro del dado.
3. Elabore una pastilla con ayuda de la prensa y retrela con las pinzas, no la toque con las
manos.
4. Coloque la pastilla en el soporte para pastillas.
5. Lala como background en el equipo de FT-IR.
6. Retire el soporte y la pastilla del equipo, retire la pastilla del soporte y regrsela al
mortero completa, adicione la punta de la esptula de progesterona y muela todo junto
un poco.
7. Elabore nuevamente una pastilla con esta mezcla.
8. Colquela en el soporte para pastillas y lala como sample
en el equipo FT-IR.
9. Imprima el espectro resultante.
b) Lquida
10. Coloque en un vial una pequea cantidad de progesterona y adicione lo menos posible
de cloroformo para disolverla.
11. Coloque dentro de la celda para lquidos de NaCl, cloroformo. Tape perfectamente y lea
como background en el equipo de FT-IR
12. Limpie la celda con flujo de argn.
13. Adicione la progesterona disuelta en cloroformo a la celda de lquidos.
14. Colquela en el porta celdas y lala como sample en el equipo de FT-IR.
15. Imprima el espectro resultante

c) Film o pelcula
16. Coloque una gota de cloroformo entre dos ventanas de NaCl.
17. Coloque las ventanas en el porta ventanas y lea como background.
18. Retire las ventanas y coloque un poco de progesterona disuelta en cloroformo entre dos
celdas de NaCl.
19. Lea como sample en el equipo de FT-IR.
20. Imprima el espectro resultante.
REPORTE
1. Interprete cada uno de los espectros basndose en las tablas de la introduccin.
2. Compare los espectros resultantes
31

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

3. Reporte lo que observa en cada uno de los espectros que imprimi.

CUESTIONARIO.
1. Cul es la principal diferencia entre los espectros de IR obtenidos?
2. A qu crees que se deban estas diferencias?
3. Para que es necesario correr un background antes de cada corrida de IR?
4. Investiga de que materiales pueden ser las celdas de IR y por qu se usan ms
comnmente, las elaboradas con NaCl?

EVALUACIN:
50% Cuestionario
50% Reporte de la prctica

32

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO


FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 7
EXAMEN DE LABORATORIO

PROPOSITO
Que el estudiante tenga el criterio de seleccionar una tcnica de Anlisis Instrumental para
identificar y cuantificar una muestra problema proporcionada por el profesor.

MATERIALES Y REACTIVOS
Sern prestados por el encargado de Laboratorio de acuerdo a la Necesidad de la muestra
problema.

33

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO


FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 8
DETERMINACION DE ETANOL EN BEBIDAS ALCOHOLICAS
POR CROMATOGRAFIA DE GASES
INTRODUCCIN
La cromatografa es una tcnica en donde se lleva a cabo la separacin de compuestos con
el propsito de identificar, cuantificar o purificar cada uno de los componentes de una mezcla de
solutos, basndose en las velocidades con las que se mueve cada soluto a travs de un medio poroso
arrastrado por un solvente, una mezcla de solventes o por gas.
Existen diferentes divisiones en la prctica para la cromatografa como la de adsorcin,
reparto, intercambio inico, exclusin molecular, y por afinidad. En esta cromatografa un soluto
gaseoso (vapor de un lquido voltil) es transportado por una fase mvil gaseosa.
De acuerdo al tipo de fases estacionaria se clasifica en dos:
La fase estacionara suele ser un lquido no voltil que recubre el interior de la columna o
un soporte slido de grano fino. Esta forma ms comn de cromatografa de gases se llama
cromatografa de reparto o de particin gas lquido.
En ocasiones se utilizan como fase estacionaria partculas slidas sobre las que el soluto
puede adsorberse.
En este caso la tcnica se denomina cromatografa de adsorcin gas slido.

PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un anlisis cualitativo y cuantitativo de mezclas de sustancias
orgnicas.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Cromatgrafo de Gases.
2. Que el estudiante aprenda a hacer un anlisis cualitativo de una mezcla de sustancias
orgnicas.
3. Que el estudiante aprenda a hacer un anlisis cuantitativo de una muestra problema, a partir
de una curva de calibracin, mediante el mtodo del estndar externo y del estndar interno.
4. Qu el estudiante compare los resultados obtenidos entre los mtodos de cuantificacin
empleados.

34

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

FUNDAMENTO TERICO
La cromatografa de gases se utiliza para separar, identificar y cuantificar
cualquier material que contenga una presin de vapor apreciable (1 a 1000 mm Hg) a una
temperatura de operacin de la columna (medio de separacin) desde 70 C a 400 C.
Anlisis cualitativo
Se basa en la diferencia de velocidades de migracin de los componentes de una
mezcla entre dos fases; una estacionaria y una mvil (gas), de tal manera que cada
componente es selectivamente retenido por la fase estacionaria y eluye a un cierto tiempo
(tiempo de retencin), dependiendo del programa empleado para su anlisis.
Anlisis cuantitativo
El auge creciente de la cromatografa durante las ltimas cuatro dcadas se debe en
parte a su rapidez, simplicidad, relativamente bajo costo, y a su gran aplicabilidad como
herramienta de separacin. Su uso se ha extendido tanto porque puede tambin
proporcionar informacin cuantitativa acerca de las especies separadas. Por lo tanto
debemos tener en cuenta los aspectos cuantitativos aplicados a todos los tipos de
cromatografa.
La cromatografa en columna cuantitativa se basa en la comparacin de la altura, o
del rea, del pico del analito con la de uno o ms estndares. En cromatografa plana, el
rea cubierta por las especies separadas sirve como parmetro analtico. Si se controlan las
condiciones adecuadamente, esos parmetros varan linealmente con la concentracin.
Mtodo del % de rea
- Todos los componentes deben ser registrados.
- El factor respuesta para todos es el mismo.
- % de rea.
Ai
100
Se obtiene mediante la frmula % A
Ai
*PICO No.
1
2
3
4
TOTAL
*Datos de la muestra

Tr (min.)
2.71
3.48
4.23
5.78

AREA
85,000
72,000
43,200
25,305
225,505

% DE AREA
37.6931
31.9283
19.1570
11.2215
100

Mtodo del % de Normalizacin.


- Todos los componentes deben ser registrados.
- El factor respuesta para cada componente de la muestra es diferente.
- Se emplea un estndar de cada uno de los componentes de la muestra para determinar el
factor de respuesta.
-

35

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental
*PICO No.
1
2
3
4
TOTAL
*Datos de la muestra

Tr (min.)
2.71
3.48
4.23
5.78

AREA
85,000
72,000
43,200
25,305
225,505

% DE AREA
37.6931
31.9283
19.1570
11.2215
100

tr (min.)
2.71
3.48
4.23
5.78

AREA
50.000
70.000
80.000
65.000

CONC (mg)
15
15
15
15

Datos de la muestra estndar


*PICO No.
1
2 (ref)
3
4

Como se calcula el factor de respuesta.


Factor de Respuesta (FR)
FRi = Ci x
Ai

ref = estndar de referencia.


i = Analito
C = Concentracin
A = Area

A ref
C ref

FR 1= __15
x
50.000

70.000 = 1.4
15

FR1= 1.4

FR 2= __15
x
70.000

70.000 = 1.0
15

FR2= 1.0

FR 3= __15
x
80.000

70.000 =0.875
15

FR3= 0.875

FR 4= __15
x
65.000

70.000 = 1.076
15

FR4= 1.076

Porciento de normalizacin %N
%N =

Ai x
FR i
ni=1 Ai x FR i

100

% N 1 = _______________(85.000) (1.4)_____________
(85.000) (1.4) + (72.000) (1) + (43.200) (0.875) + (23.305) (1.076)
% N 1 = _________119.000_______
119,000+72,000+37,800+ 25,076.18

% N1 = 46.8732

% N2 = (72.000) (1)
253,876.18

%N2 = 28.3602

%N3 = (43,200) (0.875)


253,876.18

x 100

% N 3= 14.8891

x 100

36

%N4 = 9.8773

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

%N4 = (23,305) (1.076)


253,876.18

X 100
%N T = 99.9998

Mtodo del Estndar Externo.


Se debe inyectar primero la mezcla en el cromatgrafo con cantidades conocidas de cada
uno de sus componentes de inters y determinar el factor de respuesta de cada componente. La
relacin de la cantidad de estndar con la respuesta (usualmente el rea del pico) es conocida como
factor de calibracin para ese componente particular.
Cuando se analiza una mezcla de concentracin desconocida, la cantidad de cada componente
es obtenida multiplicando
- El factor de respuesta para todos es calculado.
- Se inyecta siempre la misma cantidad.
Hacer cromatograma problema y las reas halladas dividirlas por el factor de respuesta.
Calibracin y Patrones
El mtodo ms sencillo para el anlisis cromatogrfico cuantitativo implica la preparacin
de una serie de disoluciones de patrn de composicin a la de la muestra. A continuacin se
obtienen los cromatogramas de los patrones y se representan las alturas o reas de pico en funcin
de la concentracin. La representacin de los datos debera originar una lnea recta que pasara por
el origen de coordenadas; los anlisis se basan en esta grfica. Para una mayor exactitud es
necesario una estandarizacin frecuente.
Al utilizar este mtodo, la fuente ms importante de error en los anlisis es normalmente la
incertidumbre en el volumen de la muestra; ocasionalmente la velocidad de inyeccin de la muestra
es tambin un factor a considerar. A menudo, las muestras son pequeas (aproximadamente 1
microlitro) y la incertidumbre asociada con la inyeccin de un volumen reproducible de ese tamao
con una microjeringa puede significar un cierto porcentaje relativo, tal vez de varias unidades. La
situacin se pone ms de manifiesto en la cromatografa gas-lquido, donde la muestra se ha de
inyectar en un bloque de inyeccin caliente; aqu, la evaporacin en el extremo de la aguja puede
conducir a una gran variacin del volumen inyectado.
Datos de la muestra. i=1
*PICO No.
1
2
3
4
TOTAL
*Datos de la muestra

tr (min.)
2.71
3.48
4.23
5.78

AREA
85,000
72,000
43,200
25,305
225,505

Datos de la muestra estndar

37

% DE AREA
37.6931
31.9283
19.1570
11.2215
100

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental
*PICO No.
1
2 (ref)
3
4

tr (min.)
2.71
3.48
4.23
5.78

AREA
50.000
70.000
80.000
65.000

CONC (mg)
15
15
15
15

Como obtener el factor de calibracin.


Factor de Calibracin (FC)
FCi= C ci
A ci
FC1 = 15 mg = 3.000x 10 -4
50,000
FC2 = 15 mg = 2.142 x10 -4
70,000
FC3 = 15mg
= 1.875 x 10-4
80,000
FC4 = 15 mg
= 2.307 x 10-4
65,000

FC1 = 3.000x 10 -4
FC2 = 2.142 x10 -4
FC3 = 1.875 x 10-4
FC4 = 2.307 x 10-4

Cantidad del componente (cx)


Cxi = (ACi) (FCi)
C1= (85,000) (3.000x 10 -4) = 25.5 mg

C1= 25.5 mg

C2 = (72,000) (2.142 x10 -4) = 15.4 mg

C2= 15.4 mg

C3 = (43,200) (1.875 x 10-4) = 8.1 mg

C3= 8.1 mg

C4 = ( 25,305) (2.307 x 10-4)= 5.8 mg

C4= 5.8 mg

EXACTITUD DEL VOLUMEN INYECTADO (FV)


FV= V im
V is

Vim = Volumen inyectado de muestra


Vis = Volumen inyectado de estndar.
Entonces:
Cxi = (A C i) ( F C y)

FVi
El mtodo del estndar interno.
En cromatografa cuantitativa la mayor precisin se consigue por el uso de patrones internos debido
a que se evitan las incertidumbres que se introducen en la inyeccin de la muestra. En este
procedimiento, el estndar interno elegido debe reunir las siguientes caractersticas:
- Proporcionar un pico bien resuelto
- Aparecer en el cromatograma en la mitad del mismo.
- No debe encontrarse en la muestra

38

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Su composicin debe ser similar a la de los componentes de la mezcla.

1-. Se realiza un cromatograma patrn con todas las sustancias y el estndar interno con cantidades
conocidas. *
2-. Realizar el cromatograma problema con una cantidad de estndar interno conocida. *
(hacer 3 inyecciones y promediar)
3.- Conociendo el rea del analito (Ai), l rea del estndar interno (Aref), y el factor de repuesta de
ambos (FRref =1), as como la concentracin del estndar interno realizar el siguiente clculo para
conocer la concentracin de i.
Ci = (Cref x Ai x Fri) / Aref

ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD


1
2
3

Todo el material de vidrio debe estar limpio


Usar Siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, pipetear con una propipeta, no
con la boca.
Los residuos que se generen de la prctica debern deponerse en el envase destinado para ello.

MATERIALES Y MTODOS.
Agua Destilada
Problema (bebida alcohlica)
Acetona R.A.
Matraces volumtricos de 10mL
Pipetas volumtricas de 5 y 1 mL
Cromatgrafo de Gases Varian 3300
Columna megaboro de polaridad media.
Integrador Varian 4290
Papel para integrador
PROCEDIMIENTO.
Preparar una curva de calibracin de Etanol con las concentraciones al 10, 20, 30, 40% de Etanol en
agua agregando a cada matraz una cantidad de acetona que ser el std interno (preparar 10mL de
cada std; agregar 1 mL de acetona para cada std).
Tomar 5mL de muestra y colocarla en un matrz volumtrico de 10mL en agregar 1 mL de acetona
y aforar con agua destilada.
Leer las muestras en el Cromatgrafo de Gases, ajustando la sensibilidad y rango.
Columna:
Programa de columna: 40C /5 min. a 150C/min, 10/min.
Temperatura del inyector: 200C
Temperatura del detector: 250C
Flujo de gas acarreador: 5mL/min.
Los datos obtenidos para la curva de calibracin graficarlos concentracin en % contra el rea.

39

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

Leer la muestra problema y el rea obtenida interpolarla en la grfica elaborada para conocer su
concentracin.
Realizar las operaciones matemticas correspondientes al estndar interno.
Reportar la cantidad de Etanol presente en la muestra.
Nota: Si la bebida escogida es edulcorada hacerla pasar previamente por una cama de carbn para
retener los azucares y colorantes que pudiese contener.

CUESTIONARIO
1.- Cul es el fundamento de la Tcnica de Cromatografa de Gases?
2.- Qu caractersticas debe tener una muestra para poder ser analizada por Cromatografa de
Gases?
3.- Si la muestra que voy a analizar es polar, Qu tipo de columna debo emplear para el anlisis?
4.- Cuales son las partes de un Cromatgrafo de Gases?
5.-Qu caractersticas deben tener los gases que se emplean para el detector FID?
6.- Qu es el tiempo de retencin relativo?
7.- Dibuja un diagrama de un Cromatgrafo de Gases y menciona cul es el trayecto de un analito
dentro del equipo?

EVALUACIN:
Valor del cuestionario 50%
Valor del reporte
50%

40

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO


FACULTAD DE QUMICA
PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL
PRCTICA 9
DETERMINACIN DE ACIDO ACETIL SALICLICO
POR HPLC

INTRODUCCIN
PRINCIPIOS BSICOS DE LA CROMATOGRAFA.
La cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC), fue introducida como tcnica
analtica en los aos 60. La cromatografa es un mtodo de anlisis inmediato que permite
la separacin de uno o varios componentes de una mezcla para lograr su identificacin o
cuantificacin utilizando las diferencias entre sus constantes de equilibrio, con la
participacin de la fase mvil en la que los componentes de la mezcla son solubles y la
fase estacionaria o fija que va a ejercer sobre ellos un efecto retardador. A este sistema que
permite efectuar la separacin se denomina sistema de fases.
Despus de la inyeccin, la mezcla disuelta en la fase mvil es transportada a travs de la
columna y las molculas entran en contacto con la fase estacionaria provocando los
fenmenos de intercambio que darn origen a la separacin.
El proceso de separacin
La separacin de sustancias presentes en una mezcla depende del hecho de que un
compuesto sea retenido mas tiempo en la fase estacionaria que otro. En la superficie de la
fase estacionaria, se ejercen fuerzas de atraccin que retienen o adsorben durante un corto
instante los compuestos a separar.
Despus de un cierto tiempo, dichos compuestos regresan a la fase mvil (eluyente) y son
transportados a otro sitio de la columna, volviendo a iniciarse el proceso de separacin un
repetido nmero de veces.
La retencin de un compuesto depende mucho del eluyente. As una sustancia puede ser
ms o menos retenida segn la fase mvil utilizada.
El tiempo que tarda una sustancia desde que es inyectada en l aparato hasta que sale de la
columna se denomina tiempo de retencin (tr).
La retencin de una sustancia depende tanto de la naturaleza de la fase estacionaria como
de la fase mvil con que se trabaje.

41

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

La separacin de una mezcla en sus diferentes componentes se debe principalmente a la


estructura porosa del soporte en la fase estacionaria. La ventaja de este tipo de estructuras
reside en la enorme rea superficial que se genera.
La fase mvil fluye a travs de las partculas del soporte quedando retenidas en los poros.
De esta manera, la muestra en estudio pasa a travs de toda la superficie de la fase
estacionaria y sus componentes son separados segn su tiempo de retencin.
De acuerdo al tipo de interaccin entre la fase estacionaria y las molculas en estudio
tenemos la siguiente clasificacin:
CROMATOGRAFIA

En fase gaseosa

En fase supercrtica

En fase Lquida

Columna

Adsorcin

Particin
(slice)

Intercambio
inico

Pares de
iones

Intercambio
de ligantes

placa
(CCF)

Transferencia
de carga

Afinidad

Exclusin

PROPSITO
Demostrar cuantitativamente el contenido de cafena y cido acetilsaliclico en un
analgsico mediante cromatografa lquida de alta eficiencia. Demostrar las ventajas de la
tcnica para control de calidad.

FUNDAMENTO TERICO
Observar el avance diferencial que se produce a lo largo de una columna de las distintas
fracciones de solutos inyectados.
As como apreciar que los distintos compuestos de una mezcla compleja, y demostrar que
cuanto ms avancen por la columna mejor separados quedan.
42

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Qumica Analtica Instrumental

ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD


1. Todo el material de vidrio debe estar limpio
2. Usar Siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, pipetear con una propipeta,
no con la boca.
3. Los residuos que se generen de la prctica debern deponerse en el envase destinado para
ello.

MATERIAL Y EQUIPO.
-

Columna ODS (Octadecilsilano) de 150 mm de largo por 4.5 mm de dimetro interno,


partculas de 5m.
Cromatgrafo de lquidos de alta eficiencia con detector UV (254 nm)
Microjeringa de 10 l
Centrfuga
Tubos para centrfuga
Mortero con pistilo.
REACTIVOS

Fase mvil: metanol agua (contenido 1% de cido actico) 45:55 v/v


Solucin de cafena 1.0 mg/mL (usando la fase mvil como disolvente)
Solucin de cido acetilsaliclico 10.0 mg/mL (fase mvil como disolvente)
Cafiaspirina o producto similar.
Metanol.
PROCEDIMIENTO

Se fija el flujo de la columna en 1 mL/min


1.- Determinacin del orden de elusin:
Inyecte 10 l de cada uno de los estndares por separado.
2.- Calibracin de la deteccin
Prepare varias mezclas de cafena y de aspirina a partir de las soluciones anteriores e
inyecte 10 l de cada mezcla por triplicado. Calcular el rea de los picos obtenidos y trazar
la curva de calibracin de cada componente.
3.- Cuantificacin del problema
a) Preparacin de la muestra:
Muela una tableta de Cafiaspirina y mezcle el polvo con 25 mL de metanol,
centrifugue y afore a 50 mL
b) Anlisis
Inyecte por triplicado 10 l de la solucin anterior.
43

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

c) Efecto de la longitud de onda:


Repita la inyeccin de 10 l a otras dos longitudes de onda diferentes ( por ejemplo 245 y
265). Establezca sus conclusiones.
CLCULO
El clculo se realizar por medio del Software, tomando en cuenta las concentraciones de
las soluciones de referencia y muestra, as como los tiempos de retencin.
A partir del Cromatograma que presente los mejores resultados, calcular el nmero
de platos tericos con la siguiente ecuacin:
tr

N = 16

tr

= 5.54

tr = tiempo de retencin del pico.


W = longitud del pico en la base definido como la distancia entre los puntos de interseccin
de las tangentes de inflexin con la lnea base.
= Longitud o ancho del pico a media altura

CUESTIONARIO
1.- Cul es el principio de la Cromatografa?
2.- Diferencia entre Cromatografa de Gases y Lquidos?
3.- Cules son los criterios para la eleccin de la fase mvil?
4.- Cuantos tipos de detectores existen?
5.- Qu funcin lleva a cabo la bomba?
7.- Qu es el tiempo de retencin?
EVALUACIN
El alumno reportar la concentracin final de las soluciones inyectadas, contrastadas a la
curva de calibracin.
FORMA DE REPORTE
El alumno entregar anexado a su reporte una copia de la informacin proporcionada por
el equipo con respecto a las soluciones que inyect.

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE MXICO


FACULTAD DE QUMICA

44

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

PRACTICAS DE QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL

PRACTICA 10
COMPARACION DE AZUCAR Y ASPARTAME POR
CALORIMETRIA DIFERENCIAL DE BARRIDO (DSC)
INTRODUCCIN
El procesado de los azcares amorfos no cristalinos es la base de la tecnologa
utilizada en la produccin de muchos alimentos, por ejemplo el empleo de la lactosa amorfa
en los productos lcteos en polvo. Existen procesos industriales de fabricacin de productos
con azucares en su composicin en los que se persigue la formacin de estructuras amorfas,
por ejemplo la concentracin de disoluciones a altas temperaturas y el posterior
enfriamiento rpido, la liofilizacin, el enfriamiento rpido de diluciones o la fusin de
cristales y su enfriamiento rpido. El criterio seguido para la estabilidad de los productos
amorfos es almacenarlos a temperaturas por debajo de la Tg. En este caso, el principal
inters radica pues en el estudio de transicin vtrea.
PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un anlisis trmico de compuestos de inters.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Calormetro Diferencial de
Barrido.
2. Que el estudiante aprenda interpretar un termograma.
3. Qu el estudiante compare los resultados obtenidos entre los 2 termogramas y los
discuta.
FUNDAMENTO TERICO.
El estudio de compuestos orgnicos, inorgnicos y matrices complejas como los
alimentos y compositos, se ha realizado en los ltimos aos por medio de la calorimetra
diferencial de barrido, ya que esta tcnica resulta de gran utilidad al ser empleada para
monitorear las condiciones de pureza, estabilidad, transicin vtrea, Tg de polmeros,
capacidad calorfica, etc..
La tcnica de la Calorimetra Diferencial de Barrido mejor conocida por sus siglas
en ingls DSC (Diferential Scanning Calorimetry), consiste en analizar los cambios de fase,
estudiando los cambios observados, por la medida del flujo calorfico dentro o fuera de la
muestra, (relativo a un material de referencia) como una funcin de la temperatura durante
el propio proceso.
Por ejemplo, el punto de fusin es un proceso endotrmico, durante el cual la
muestra toma en red cantidades de calor (determinadas por el calor de fusin molar de la
muestra), y se determina como un pico en la curva DSC. La posicin del pico en el eje de
temperatura, est determinada por el punto de fusin y la forma del pico est determinado
por la pureza de la muestra (entre otros parmetros).
En DSC la muestra y la referencia se mantienen a la misma temperatura (T= Ts -Tr
= 0) a travs de un programa controlador de la temperatura, cualquier diferencia de energa
en la fuente de la muestra y la referencia ser grabada en el programa de temperatura.
45

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

FUNCIONAMIENTO.
Antes de realizar medida alguna debe de calibrarse el calormetro para obtener en
unidades de mcal la constante de calibracin y la escala de caloras debe determinarse con
exactitud.
El rango de las temperaturas de operacin del DSC-7 Perkin Elmer es de
-68C a 500C.
TECNICAS DE MUESTREO.
Sobre un crisol limpio de Al3 se coloca la muestra, se tapa y se sella, el aspecto
cualitativo del termograma se ver afectado por la disposicin de la muestra aunque el rea
del pico no variar. Para obtener picos estrechos y finos debe asegurarse el contacto total de
la muestra con la superficie del crisol.
Existen crisoles que son capaces de soportar hasta 2 a 3 atm. dependiendo de su
forma y de la forma en que son prensados. Si la muestra se oxidara en el intervalo del
tiempo de trabajo deben usarse este tipo de crisoles mencionados y encapsulados en una
atmsfera inerte. Se ha observado tambin una clula pero su elevada masa da lugar a una
menor precisin en los datos de entalpia obtenidos.
ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD

Tener mucho cuidado al introducir las muestras a la celda del equipo, ya que no deben
presionarse, pues se corre el riesgo de daar los filamentos que se encuentran debajo de estas.
Asegurarse de que los pans que contengan las muestras estn bien sellados, para evitar fugas y
derrames que pueden daar el equipo.
Todo el material debe estar limpio, los crisoles o pans de aluminio se lavan con acetona y se
secan en la estufa, no se tocan con las manos.
Usar siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, ( usar pinzas, para transportar los
pans, no con la mano)
Los residuos que se generen de la prctica debern deponerse en el envase destinado para ello.

MATERIALES Y MTODOS.
1. Azcar
2. Aspartame
3. Gas Nitrgeno.
4. Paneles de aluminio para lquidos.
5. Esptula
6. Pinzas.
7. Calormetro Diferencial de Barrido DSC7 marca Perkin Elmer
8. Intra-cooler II marca Perkin Elmer.
9. Balanza analtica Mettler
10. Prensa para celdas de lquidos.
PROCEDIMIENTO.
46

Manual de laboratorio
Qumica Analtica Instrumental

1. Pesar 2.5 mg +/- 0.2mg de la muestra de azcar y aspartame por separado en paneles
limpios de aluminio previamente tarado
2. Sellarlo hermticamente con la prensa para lquidos
3. Colocar el panel que contiene el azcar en la celda de DSC con una referencia que
consiste en un panel vaco, exactamente igual al de la muestra.
4. Equilibrar la temperatura de la muestra e iniciar el calentamiento a partir de la
temperatura ambiente, a una velocidad de 20C/min hasta 240C.
5. Retirar el panel usado y colocar el que contiene la muestra de aspartame.
6. Analizar los resultados.
Temperatura inicial
30C
Temperatura final
240C
Velocidad de barrido 20 C/min
Peso de la muestra 2.5 mg (colocar el peso exacto)
Condiciones de encapsulamiento en paneles para lquidos
Atmsfera de trabajo Nitrgeno
7. Comparar los termogramas que se obtuvieron y discutirlos.
8. Opcional. Ingresar una muestra de un polvo para preparar agua y tratar de identificar
si lo que contiene es azcar o aspartame o bien otro edulcorante.
CUESTIONARIO
1.- Cul es el principio de la tcnica de Calorimetra Diferencial de Barrido?

2.- Para qu se emplea bsicamente la tcnica de Calorimetra Diferencial de Barrido?


3.- Cules son los cambios Fsicos o qumicos que pueden detectarse en un material y
como se representan estos en el termograma?
4.-Si mantengo un material a cierta temperatura por un tiempo conocido que tcnica estoy
empleando?
5.- Para analizar un compuesto desconocido, que precauciones debes tener para realizarle
un anlisis?
6.- Elabora un diagrama de flujo del DSC.
EVALUACIN:
Valor del cuestionario 50%
Valor del reporte
50%

47