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Estudo dirigido 2

1) Faa uma dissertao descrevendo a ativao cataltica do Ciclo de Krebs


em homogeneizados de msculo aps a adio de intermedirios dessa
via. Compare com a ativao do ciclo provocada pela adio de piruvato.
Explique.
Os intermedirios so os substratos de um determinada reao no
ciclo de Krebs, assim, a sua adio provoca a ativao cataltica
desse ciclo, aumenta a velocidade, pois esses intermedirios no
so consumidos, e sim regenerados, sendo consumido o Acetil COA,
produzindo mais CO2 do que a quantidade de carbono contida na
cadeia desses intermedirios. J na adio do piruvato acontece a
ativao estequiomtrica, sendo trs carbonos para trs CO 2, pois o
piruvato consumido.
2) Discuta a regulao do Ciclo de Krebs
O ciclo de Krebs regulado por eltrons alostricos e por
modificao covalente. As altas concentraes de NADH e acetil
COA inativam diretamente a enzima piruvato desidrogenase por
regulao alostrica e tambm estimulam a protena quinase
especifica, a qual fosforila e inativa o piruvato desidrogenase,
diminuindo o funcionamento da fosfoprotena fosfatase, pois suas
altas concentraes indicam um suprimento de energia suficiente.
Essa quinase tambm inativa por altas concentraes de
ATP,NAD+
e
piruvato,
parando
de
fosforilar
o
piruvato
desidrogenase, aumentando a ao da fosfatase, que remove o
grupo fosfato por hidrlise, ativando o piruvato desidrogenase.
3) Um dos intermedirios do Ciclo de Krebs atua como um regulador da
gliclise.Explique.
Esse intermedirio que atua como regulador da gliclise o citrato.
Quando ele comea a acumular ele inibe a PFK, pois o aumento da
glicose forma muito acetil COA, o acetil COA forma o citrato, mas
em uma condio de muito NADH ou ATP a sua converso inibida,
acumulando citrato e seu acumulo inibe a fosfofrutoquinase
(principal enzima da via glicoltica). Isso porque est formando
mais citrato atravs do acetil COA do que est sendo usdo pelo
ciclo de Krebs, se est acumulando sinal de que j tem muito
citrato para as reaes que utilizam para sntese de outras
molculas, como os lipdios.
4) Considere a seguinte afirmativa: O Ciclo de Krebs no consome oxignio.
Portanto, ele continua ativo na sua ausncia.

Proponha em linhas gerais uma experincia para verificar a afirmativa


acima. Deixe claro: as condies experimentais, o que voc vai medir e
discuta o resultado obtido.
Para testar a veracidade da afirmao deve ser feito dois
experimentos, no qual utizamos o msculo homogeneizado de uma
r e o monmero para medir a produo de CO2 no primeiro
experimento, na presena de acetil COA e O2 e no segundo, as
mesmas condies, mas sem o O2. A quantidade de CO2 produzida
nos dois casos determinar se a afirmao procede ou no. Isso
porque o CO2 padro para se medir o ciclo de Krebs, pois o
produto do ciclo e no utilizado, sendo eliminado no ar. Usar o
NADH como produto da afirmao no bom por ser usado em
outras coisas. Decidir fazer o experimento com levedura no uma
boa escolha por ser produzido CO2 mas da fermentao alcolica e
a adio da glicose no boa para ser usada como substrato desse
experimento por fazer parte da via glicoltica e no esta vista que
queremos testar.