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Universidad de Puerto Rico en Humacao

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Departamento de Biología

Ejercicio: Actividad Enzimática de las Células

Fernando J. Benítez González
Núm. de estudiante: 842-16-0624
14 de noviembre de 2016

20 mL de macerado de papa preparado como el primer procedimiento. marcador. La descomposición sería de esta manera 2 H2O2 H2O + O2. Una enzima es una proteína catalítica. 20 mL de agua. La hipótesis del ejercicio va a ser que las enzimas cuyo ambiente es ácido se puede desnaturalizar en bajas o altas temperaturas. Sin embargo. quisiera hacer mención que para elaborar esta introducción se utilizó información de los libros y los sitios electrónicos que aparecen en la referencia. Método Antes de haber realizado el procedimiento 1 de actividad enzimática de las células la ayudante de laboratorio nos proveyó los siguientes materiales para realizar el experimento de observar osmosis atraves del gradiente de concentración. 20 mL de solución fresca de peróxido de hidrógeno. marcador. Algunos factores que afectan las actividades enzimáticas son el PH y la temperatura.Introducción Los objetivos en este laboratorio se centralizan en observar la actividad de la catalasa en la papa. reloj. 3 probetas de 10 mL. Todas las enzimas son proteínas el cual están compuestas de muchos amino ácidos. 10 mL de macerado de papa compuesto de una papa cortada en pedazos (100 g) con 250 mL de agua. Altas temperaturas pueden desnaturalizar una proteína causando que pierda su tridimensionalidad. termómetro y removedor. 20 mL de agua destilada. removedor y una regla métrica. la catalasa es una enzima que rompe la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) en agua y oxígeno. Un catalizador es un agente químico que acelera una reacción. Además. se va a poner a prueba el efecto de la temperatura en la actividad enzimática de la catalasa. hay otras enzimas en el citosol que trabajan en un PH neutral por tanto las enzimas se acoplan a sitio en donde están asignadas. 25oC. regla métrica. Las enzimas son también sensitivas al PH por ejemplo la pepsina que se encuentra en el estómago es un ambiente bien ácido. Ahora bien. El ejemplo clásico es cuando una persona se corta se le aplica agua oxigenada. La idea general es la investigación de la catalasa en la papa y mediante los procedimientos se informará la actividad enzimática. . Fue de suma importancia que ya tenían preparados los baños de maría a 0oC. 37oC y 80oC. 20 mL de una solución de fresca de peróxido de hidrógeno al 3%. 3 probetas de 10 Ml. La razón es porque en la sangre se encuentra la catalasa y cuando se le aplica agua oxigenada se ven unas burbujas y eso es una señal de una reacción química. Para el segundo procedimiento los siguientes materiales que se utilizaron fueron: 8 tubos de ensayo. Estos instrumentos fueron: 2 tubos de ensayos. Sin mas preámbulos. reloj. El propósito de las enzimas es agilizar las reacciones para que así la célula pueda efectuar sus procesos cotidianos.

al tubo control se le añadió 3 mL de agua y se mezcló con cuidado. En la determinación de la actividad enzimática primero. se marcó a donde llegaba el peróxido en seguida se puso en la cubeta de hielo por 5 minutos. Ahora bien. 37oC y 80oC. después de tener los materiales listos podemos comenzar a describir lo pasos. a este se le derramó 3 mL de solución de peróxido y se hizo el mismo procedimiento del marcador que se hizo anteriormente. se utilizó una probeta en el cual se midió 3 mL del macerado de papa y se añadió a cada tubo. Aumento en volumen como función de tiempo del tubo control 100 80 Altura (mm) Aumento en volumen como Función de Tiempo 60 40 20 0 Tiempo (min) Resultados . Después. utilizando el marcador se fijó una línea hasta donde llegó el volumen del agua. utilizando la regla se midió cada tubo la altura del aumento en volumen después de 1 minuto. Luego. se marcó un tubo como control a 0oC y otro experimental a 0oC. Luego de este proceso. Posteriormente. Ya completado este paso se trabajó con el grupo experimental el cual es el más importante. También.Por lo general. Finalmente. Ahora bien. Ahora. Después. se repitió los mismos pasos para la agrupación de 25oC. se construyó una gráfica de altura como función de tiempo para los resultados de cada tubo. Esto se midió a base de la marca que se había hecho en cada tubo. se le añadió a cada tubo 3mL de macerado de papa y se colocaron los tubos a baño de maría de 0oC por 15 minutos. Por consiguiente. ya terminado el procedimiento 1 se siguió al procedimiento 2 en el cual en la parte inferior ya se estableció los materiales. se rotuló un tubo como control y otro como experimental. Después. al tubo experimental se añadió 3 mL del peróxido. Al nivel donde llegó el agua se trazó una línea con el marcador y se colocó rápidamente de nuevo en el baño de maría. se confeccionó una gráfica de altura de la espuma como función de temperatura para los resultados de los tubos experimentales. Prontamente. Para comenzar. al tubo control se le echó 3 mL de agua y se mezcló con cuidado. se midió el volumen cada minuto por un intervalo de 5 minutos. los procedimientos y materiales se obtuvieron del manual entregado por la profesora el cual en la sección de referencia hace mención. pasado los 5 minutos se utilizó la regla y se midio la altura en que cada tubo aumentó. Finalmente. Entonces.

De manera que esta primera prueba fue el mismo patrón durante el intervalo de los cinco minutos. esto siempre se espera del control ya que no es la variable que se estaba probando. Por lo general. En la gráfica a mano derecha se encuentran los valores en el eje de X (tiempo) y Y (altura) Aumento en volumen como función de tiempo del tubo experimental 100 80 60 Altura (mm) Aumento en volumen como Función de Tiempo 40 20 0 1 2 3 4 5 Tiempo (min) Tubo Experimental Tiempo Altura (min.Tubo Control Tiempo (min.) 1 Altura (mm) 0 2 0 3 0 4 0 5 0 En la primera gráfica el control no aumento nada por ende no hubo cambio.) (mm) 1 25 2 37 3 50 4 64 5 75 .

hasta el tercer minuto llego a 50 lo cual es un aumento considerable. Ya se puede determinar que hay una tendencia a aumentar cuando pasa cada minuto. al añadirle la solución de peróxido vemos que hubo un cambio rápido. En los primeros segundos ascendió a una altura de 25 milímetros. Como consecuencia. Después.Ahora bien. en el primer minuto de 25 milímetros ascendió a 37 milímetros. Altura de espuma como función de temperatura 100 80 60 Altura (mm) Altura de espuma como Función de Tiempo 40 20 0 0 25 37 80 Temperatura (C°) Altura de espuma como función de temperatura Temperatura Altura o (C ) (mm) 0 54 25 98 37 28 80 0 .

También. Estos resultados que se plasmaron en la gráfica se debe a que hubo una reacción química y esa fue las burbujas o espumas observadas esto es una consecuencia del mezclar pulpa de papa con agua oxigenada. La temperatura es un factor determinante en la actividad enzimática. compararemos los resultados obtenidos entre el grupo control con el grupo experimental del procedimiento 1. Debemos recordar que a medida que aumenta la temperatura va a incrementar la función de la enzima. Del primer minuto al segundo aumento 12 mm. del tercero al cuarto fue de 14 mm y del cuarto al quinto fue 11 mm. Por otro lado. ya en esta etapa falta poco para que la proteína se desnaturalice y el resultado se nota cuando la enzima se encuentra a 80oC en el cual ya está desnaturalizada. . Según. Este cambio si se podría utilizar como medida de la efectividad de la catalasa porque durante la reacción si se encuentra peróxido de hidrogeno (agua oxigenada) el cual es roto en agua y oxigeno por la catalasa y esa es la verdadera prueba de que la catalasa funciona. aunque entre 25oC y 37oC es relativamente cercana la disminución en altura de la actividad enzimática es alarmante. Por eso. De manera que esta es la explicación por la cual en un ambiente ácido la altura en 0o C y a 25oC es bien elevada. otra razón por la que se ven las espumas es que realmente se descompuso el peróxido de hidrogeno. en el grupo experimental a medida que fue aumentando los minutos la altura también aumentó. Cuando el ambiente se tornó ácido en este caso los tubos experimentales la estructura de la enzima cambia. La razón por la que llegamos a esta conclusión es que según la gráfica cuando la enzima está a los 25oC la altura está a 98mm por tanto está bien cerca de llegar a su VMAX. Después de haber llegado a su punto culminante se desarrolló un patrón en el cual decayó sustancialmente. La razón por la cual sabemos que no reaccionó fue porque no hubo burbujas y porque su altura no aumentó durante los cinco minutos. Discusión y Conclusión En primer lugar. del segundo al tercero aumento 13 mm. Ahora bien. La función de la catalasa es romper moléculas toxicas como el peróxido de hidrogeno pero como el agua no es toxica la catalasa no puede romper agua por esta razón es que tenemos los resultados en el grupo control. La gráfica reveló alturas diferentes depende la temperatura. Al haber este cambio la enzima a medida que va incrementando la temperatura hasta llegar a su punto de mayor producción que es cuando la temperatura está en los mas o menos los 27oC. 37o C y 80o C en el cual duro un período de 15 minutos.En la gráfica en la parte posterior se observó la reacción de la espuma a diferentes temperaturas como 0o C. Tal y como se esperaba en el grupo control se iba a quedar igual en otras palabras iba a ser constante ya que lo único que se le había añadido había sido agua y no iba a reaccionar. En otras palabras al no haber ningún compuesto tóxico en el control por es que fue constante. 25o C. los resultados en el eje de Y el más alto valor fue de 98 cuando el baño de maría se encontraba a 25o C.

octubre 11). (2013. & Cintrón. Sacado de http://lasaludi. la temperatura juega un rol importante en la actividad enzimática. NY: McGraw-Hill Dr. Sacado de http://quimica.laguia2000.. Enzima Catalasa. Carrie.com/rol-catalasa-sobre_105533/ Gonzalez. En el segundo procedimiento se utilizaron 8 tubos de ensayo el cual habían 4 que eran control y 4 que eran experimental. & Stiling. Alianza para el Aprendizaje de Ciencias y Matemáticas. Robert J. se cogía un experimental y un control y se introducía a 0oC y lo mismo se hacía con las otras temperaturas solicitadas.A base de estas conclusiones se puede determinar que parcialmente la hipótesis fue aceptada. Monica (2010. (2007 y 2009). Graham. (2014). Isabel G. Linda E. Eric P. (n/a).html Cardenas. si el ejercicio hubiera tenido más información se hubiera tenido una perspectiva de un cuadro mas completo para de esa manera llegar mas rápido a una conclusión adecuada. Pineda. Camilo A. Widmaier. (n/a). En . Factores que afectan la Actividad Enzimática. Después. En el primer procedimiento se aprendió que la catalasa únicamente funciona cuando está presente el peróxido de hidrógeno y que sin el durante los primeros 5 minutos no lleva a cabo ninguna actividad.edu/9180412/Informe_de_actividad_enzimatica King. Referencias Referencias sacadas de libros: Brooker. Motta. & Ruiz. El argumento por el cual decimos esto es que era cierto que en altas temperaturas en un ambiente ácido la proteína se puede desnaturalizar pero en bajas temperaturas la enzima sigue catalizando una actividad favorable. Yohandary. Algunas limitaciones para este ejercicio fue la falta de información provista ya que se tuvo que buscar referencias adicionales para poder tener un análisis y una conclusión de altura. Río Piedras: UPR & Humacao: UPR Referencias sacadas de sitios electrónicos: El Efecto PH sobre las Enzimas.ehowenespanol. Sacado de http://www. Biology Third Edition. Dr. Además. Rosa V. Sin embargo.. Avenue of Americas. Sacado de http://www. ¿Cuál es el Rol de la Catalasa?.info/ph-efecto-sobre-enzimas. Peter D.. Flores. Noel. Carlos J..com/conceptos-basicos/enzima-catalasa Resumen (Abstract) En este ejercicio se observó y estudió acerca de la catalasa en la papa y el efecto de la temperatura en la catalasa.academia. octubre 25).

Sin embargo. después de 37oC la actividad baja significativamente y cuando llega a 80oC la proteína se desnaturaliza. Por último.la gráfica se pudo demostrar que desde 0 oC hasta 25oC trabaja a un ritmo óptimo. . quisiera agradecerles a los autores de los libros y artículos el cual me ayudaron a hacer una conclusión de datos óptima para poder entender de manera sencilla como la actividad de enzimas trabaja y que factores cambian su escenario de juego.