SINCRONIZACION DE ESTRO Y

OVULACION
Bovinos, ovejas y cabras
Sincronizar el estro en las hembras en
anestro
Ventajas:






Detección de estros se reduce
disminuyendo $
facilita la inseminación artificial y
tranferencia de embriones
hembras conciben as temprano
crías nacen en una época de
abundancia aimentaria.
Hormonas usadas:
Gonadotropinas
GnRH
Progestágenos
Progesterona

En vacas la prostaglandina es importante
para la sincronización también GnRH
GnRH al dia 0
En el dia 7 PGF2α
Dia 8-9 GnRH
Dia 9-10 IA
Método Ovsynch en ovejas
1. Esponjas con progesterona el dia
0(acetato de fluorogestona o acetato
de medroxiprogesterona)
2. Se retira el dia 14 (7-9 según
literatura)
3. FSH o eCG
4. 48hr después IA
En cabras la esponja se deja hasta el día
11
SINCRONIZACION EN CERDAS Y YEGUAS


 Estrógenos
 Prostaglandinas
SCE se logra con el acortamiento (agentes
luteoliticos) o la extensión de la fase lútea
del ciclo (progestágenos).
PGF2α: inducen regresión del CL, regula su
vida y permiten el desarrollo de un nuevo
folículo.
Progesterona + progestágenos=Después
de la duración del CL logran un estro bien
sincronizado.Inhiben la liberación de LH Y
FSH al susender su adm. Se liberan
induciendo el estro y ovulación.
Estradiol: Induce la regresión del CL y
atresia del folículo dominante. La atresia
induce un crecimiento folicular.
Periodo voluntario de espera: Tiempo
que transcurre desde que pase hasta q se
debe volver a inseminar (47-70 días cuando
hay buena involución uterina).

Tasa de reprod. Aumenta cuando
se cruza por primera vez.
Mejora la tasa de reproducción
Aumenta el progreso genético
Tipos de anestro

INICIO
RETRASADO
PUBERTAD:
Afecta
reproductiva dejóvenes

DE
la

LA
tasa

POR LACTACION O ESTACIONAL:
cruza después de partos (hembras
viejas)
Se estimula madurez de folículos
por:
Natural: administración GnRH
Artificial: administración Hcg (Tipo
LH)





Gonadotropinas
PMSG (=LH)
GnRH
Progestagenos
Estrógenos
Protaglandinas

 CERDO: fase sin respuesta durante primeros 12-13 días del ciclo     La adm. Bioestimulos: Retirar a gazapos 24-48hrs antes del servicio. presentación de estros. Salina en utero para sincronizar el celo . pero puede no estar ovulando. Inducción de la análogos de GnRH ovulación: Se INSEMINACION ARTIFICIAL usan . pero % de preñez varia de acuerdo a la época) Los estrógenos en yeguas solo hacen q presente Sx de celo x hormonas exogenas. Estrogenos: se combinan con FSH o eCG GnRH: Estimula la liberación de LH y FSH (no es practico xq se administra cada 70 a 90 min). SINCRONIZACION DE CELO Y OVULACION EN PERRAS Y CONEJAS    Monoestricas estacionales No tiene metaestro Inducción del celo no antes de 4 meses del celo anterior xq hay involución uterina Formas para inducir el celo Cabergolina bromocriptina(agonistas de dopamina +usado en perros) y la CONEJAS    No presentan un ciclo estral Ovulación es por inducción Para identificar el celo se observa la conducta y vulva: Rosada: no celo Roja : celo Morada: pasando el celo La estimulación del cuello uterino en la copula produce un impulso que llega a la medula espinal y de ahí pasa al hipotálamo el cual segrega GnRH. eCG: 2 a 3 días antes de la IA o monta natural. De progestágenos en bovinos =yegua(son dispositivos no esponjas. Gonadotropinas: Malos resultados Sustancias dopaminergicas: Mejor resultado. prostaglandinas y ruptura del CL) Para acortar el anestro en yeguas se usa el fotoperiodo Se usa sol.incrementan niveles de fertilidad y prolificidad. esta lactación controlada semeja al eCG. acorta el anestro x su efecto estimulador de GnRH y FSH. acortando el diestro y acortando intervalo entre estros(efectos secundarios). al quitarlo aumentan estrógenos. crecimiento de folículos. Prostaglandinas: Induce luteolisis. nuevo ciclo estral) EQUINOS: fase sin respuesta (regresión del CL) durante primeros 4-6 días del ciclo Efecto dormitorio: perras que conviven juntas se sincronizan para entrar en celo debido a las feromonas.CERDAS ANESTRO: 6 semanas de lactación     Se usa PMSG(ovulación sincronizada) IA (expresión del estro) Uso de verraco(confirmación) Estrogenos ( induce ovulación) YEGUAS ANESTRO estacional Hormonas son ineficaces hasta el final de esta=difícil sincronizar ovulaciones   Progestagenos 9-13 dias PGF2α (regresion de CL.

evidentes contracciones anales (prostático ). Concentración de 100 millones de espermatozoides /ml El perro eyacula en 3 fracciones  1ra volumen pequeño x goteo y trasparente (prostático). Yema de huevo citratada 3. Aspecto. Uso de diluyentes - presión osmótica lo más isotónica sustancias tamponadas que permitan un buen pH sustancias coloidales para proteger a los espermas Vaca: 10.8 c. Diluyentes a base de leche Congelación del semen Dosis de inseminación - Vagina artificial: estimulación sexual Electroeyaculacion: Electrodos en el ano. Inseminación transcervical (endoscopio)  Inseminación quirúrgica(se exterioriza el útero). en el momento y sitio adecuado sin que se lleve a cabo la copula Ventajas     Mejoramiento genetico Evita enfermedades venéreas Uso d sementales valiosos q padecen alteraciones locomotoras Facilita la implementación de programas de sincronización y cruzamientos Examen del macho Evaluación de fertilidad  Examen microscópico(vol. Tipos de diluyentes 1.  3ra Se segrega en pulsos . - Volumen de eyaculado 2 a 30 ml. viscosidad)  Toro: la eyaculación media es de 4-5 c.  2da Rica en esperma y blanca. Diluyentes a base de glicocola glicerina 4. Métodos farmacológicos (xilacina y pilocarpina).5 a 38°C y protegido de la luz. Formas de colección del semen       Técnicas de recolección   y Masturbación.000 espermatozoides/ml Borrega : 50 espermatozoides millones millones Inseminación recto-vaginal cervical: Con un catéter o de de fijación INSEMINACION ARTIFICIAL EN PERROS Tecnicas: Inseminación artificial vaginal. . tubo colector a 37.c  Moruecos: 0.  Color del esperma:  Amarillo: Presencia de pus o de orina  Sonrosada o rojiza: Sangre fresca administración de fenotiazina  Color marrón: Elementos sanguíneos degenerados  o Blanquecino: Concentración escasa de espermatozoides o la administración de azul metileno.c.Técnica de reproducción asistida en la que se introduce el esperma en el aparato reproductor de la hembra por medios mecánicos. Medio de yema de huevo fosfatada 2. Vagina artificial(estímulos térmicos. mecánicos y de elasticidad) Electroeyacualción.

.*Después de la 3ra fricción no se recoge más liquido rico en esperma - CONEJOS - - - Volumen de 0.3 a 1. con la derecha se introduce por debajo del abdomen Pasada la pelvis.0 ml. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES (RECEPTORA)-pueden ser congelados Embriones se clasifican de acuerdo: grado de desarrollo y calidad. Una vez alcanzada la punta del cuerno. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES Técnica que consiste en la recolección de embriones de una hembra de gran mérito genético (donadora) antes de la nidación y la transferencia de estos a otras hembras de menor valor genético (receptoras) para completar la gestación. cerca de la unión uterotubárica. SÚPER-OVULACIÓN 2.Exposición del útero mediante incisión ventral media. 1. se toma la piel del dorso del animal.Se introduce sol. . Características que se analizan: . El medio recolectado es filtrado con una malla que permita el paso del medio y no de los embriones.Quirúrgico: 7 dias despues de la IA en cap y ov. el catéter se gira 180° y se prosigue la introducción hasta 8-14 cm. Laparoscopia Se introduce el laparoscopio. Se inyectan aproximadamente 40 a 50 ml de líquido por el catéter intravenoso y el lavado se realiza mediante el catéter de Foley. Salina amortiguada de fosfato . se introduce el catéter Foley a través de otra herida. Al observarse el útero. IA durante el estro con semen de macho valioso( 8 hrs despues del celo y antisuero anti-eCG) 3. No quirúrgico( método trasncervical) Uso d catéter de Foley de 23vías q se introduce al cérvix y se dirige a un cuerno uterino mediante manipulación rectal. . Se introduce un catéter intravenoso en la luz uterina. y se guía hacia uno de los cuernos uterinos antes de inflar el globo. RECOLECCIÓN DE EMBRIONES (DONANTE) . Finalizado el filtrado se lava la malla del filtro con PBS utilizando una jeringa y aguja fina. - - - *Las inyecciones de PGF2α y oxitocina facilitan la introducción del catéter en las cabras - - Extraer un embrión en sus primeras fases del desarrollo del aparato reproductor. Entonces se presiona el émbolo de la jeringa para depositar el semen y a continuación se retira el catéter lentamente. se insufla el globo para impedir el flujo Posteriormente el cuerno uterino se llena con 30 a 60 ml de Medio PBS que fluye en el recipiente de recolección mientras se da masaje suave al útero. 4. en que se hace tope con el cérvix.Se recolecta con una aguja roma de jeringa o un tubo de vidrio insertados en la luz a través de punción en la pared uterina. el fluido es recolectado en una caja Petri y se procede a la búsqueda de los embriones. Concentración entre 50 y 500 millones de espermatozoides Estímulo coital provoca la ovulación catéter curvado el otro extremo se acopla a una jeringa para aspirar el semen Con la mano izq.

5. x el recto para fijar el ovario contra la cabeza del transductor 7. Transferencia • • • • Se desechan embriones  Blastómeros de tamaño no uniforme  Detritos celulares en la mórula  Colapso del blastocisto  Desintegración de la figura mitótica  Blastómeros espumosos mal diferenciados  Fragmentación del material citoplásmico y nuclear  Forma anormal de la mórula o blastocisto Crio preservación convencional  Embriones se colocan en una solución concentrada de glicerol.5 ml. Ovoplasma vacuolado. las pajillas son sembradas (-4 a -7°C) y el enfriamiento continua hasta -30°C. • Apariencia de la zona pelúcida. B Regula Rodeado 4= Mórula compacta r parcialmente por 5= Blastocisto células temprano de cúmulos o con 6= Blastocisto maduro 7= Blastocistocitoplasma expandido irregular. C Malo Desnudo. 5. ASPIRACION FOLICULAR Aspiración folicular: Es una técnica donde se pueden obtener ovocitos inmaduros recolectados directamente de los folículos en los ovarios de un animal vivo o muerto.Dia 10 eCG .  Conejas Usadas como incubadoras in vivo 48hrs=potrillos (solo fines experimentales).Forma del embrión. • Tamaño del espacio perivitelino. Extraer heces del recto y limpiar vulva y perineo. momento en que se sumergen en nitrógeno líquido. D Degene rado Rodeado por fibrina con aspecto de tela de araña. Introducir el transductor acoplado al sistema de guía de aguja. Pasar solución fosfatada buferada 2. Sedacion xilazina y anestesia epidural con lidocaína 4. Progenie valiosa  Perras Luteinización y la producción de progesterona ocurren antes de la ovulación.Dias 0 estro .25 o 0. Número d blastómeros. CARACTERISITCA S DEL OVOPLASMA Ovoplasma granulado homogéneo y llena el espacio Edad de delimitadoN° por la zona pelúcida del celula embrion s Ovoplasma 6 dias 32-64 granulado no 7dias 160 homogéneo.Dias 12 PGF . a T° ambiente permitiénd que el embrión se equilibre durante 20 minutos. Innecesaria xq las hembras son politocas y tienen muchas crías sin necesidad de intervención humana. colocar al animal en la manga de contención y depilar el área crural 3. 200 el espacio de la zona pelúcida. Se introduce la mano izq.  Durante el proceso de enfriamiento.  Vacas . Receptora joven. se lava y desinfecta  Perforar pared abdominal . fragmentado y no llena el espacio delimitado por la zona pelúcida.  Se aloja el embrión en una pajilla de 0. Diferencia de tamaño entre blastómeros. Procedimiento(vacas) puncion en el 2-3 mes de gestacion 1.Dia 10-13 FSH CLA SIFI CAC CIÓ N A Dia 21-22 recuperacion de embriones CALID AD CARACTERISTIC AS CELULAS DEL CUMULUS Bueno Completamente rodeado por más de 3 capas de células de Grado de desarrollo cúmulos y citoplasma homogéneo. Color y textura de la masa celular. Puncionar y activar la bomba al vacio Ovejas  Ayuno de 24hrs  Se rasura desde el xifoides hasta la glándula mamaria.fertilidad y habilidad materna. libre de enfermedades. con periferia clara 7 dias 180y llena 8centro dias oscuro. 6. Gestacion 6.

Para su maduración son incubados más tiempo . FERTILIZACION IN VITRO Técnica para la reproducción asistida de mamíferos basada en el cultivo de espermatozoides y óvulos en condiciones controladas para generar huevos que inicien el desarrollo embrionario  Esencial selección y capacitación espermática para que la fertilización y fecundación se den de manera óptima  La calidad dependerá de la tasa de fertilización de los sementales. Clasificación de las hembras donantes según su estado reproductivo . 2. Se eliminan restos dejando solo ovarios 3.000:1 - Si se observan los 2 cuerpos polares dentro del gameto femenino quiere decir que se llevó a cabo la fertilización Capacitación de espermas: Proceso que ayuda al espermatozoide a adquirir la capacidad para fecundar un ovocito.  Por punción o aspiración con jeringa. Esto ocurre antes de la fertilización y se caracterizan por tres eventos: 1. desencadenadas por un pico de LH Maduración nuclear • Aparición de componentes esenciales del ciclo celular como factor promotor de la maduración MPF.Cerdas después del destete  Yeguas Técnicas para obtener ovocitos OPU (Ovum Pick-up):aspiración folicular transvaginal ovocitos inmaduros son recolectados de los folículos en los ovarios . corte de ovarios en animales muertos. . ya son las etapas en las que se realiza la OVH.Cerdas cíclicas. Lavar tres veces con solución salina fisiológica estéril 4. 3.Cerdas prepúberes . lactato) y albúmina sérica.  retira la parte central del trocar por donde se introdujo la guía con el laparoscopio se vuelve a perforar con el trocar  Mejor recoleccion con agujas de + diametro  De bicel corto son mejor MADURACION IN VITRO Serie de cambios tanto in vivo como in vitro.  CERDAS Formas de extracción de ovocitos  Vía endoscópica (aspiración). Ovocitos Se incuban con espermas capacitados d 6 a 24 horas. Puncion y extracción En los perros.  Vía vaginal (ecografía y aspiración con aguja fina) perfusión de oviducto. Transportados en suerso con suero fisiológico 2. In vitro se extrae el plasma seminal. Maduración citoplasmática • Capacitación ovocitaria • Modificaciones bioquímicas y morfológicas. -Expansión de las células de cúmulus. . los ovocitos son recogidos en anestro o diestro. -Eliminación del primer corpúsculo polar.Fertilización con semen congelado o refrigerado MICROINYECCIÓN DE ESPERMATOZOIDES   Pocos espermas y de mala calidad Permite inyectar un solo esperma en el ovulo  No es necesario preincubar a los espemas para capacitarlos Recolección de ovocitos en cadáveres 1. • Reanudación de meiosis Ovocitos en medios de cultivo+ suero fetal bov. permite la reanudación de la meiosis. . suplementado con fuentes energéticas (piruvato.Concentración de espermas y ovocitos 10. -Formación de la metafase II.

ultimo trimestre de gestación. la constitución genética de las crías es diferente a la de los padres. Se desechó el citoplasma dejando solo el núcleo 4.CLONACION Procedimiento de obtener una población de varios individuos genéticamente homogéneos a partir de uno solo mediante reproducción asexuada. Vacas Uso para la multiplicación de animales de alta productividad Enucleación Técnicas de micromanipulación se extrae el núcleo del óvulo. Activación química y reprogramación celular Cultivo in vitro de los embriones Durante 6 a 7 días los embriones se cultivan en una estufa con medios y condiciones especiales que permiten su desarrollo. los que presentaron desarrollo embrionario (hasta estado de blastocisto) fueron transferidos al útero de ovejas cabeza negra. 5. La enzima ADN ligasa es importante para lograr una buena unión. Cel. El citoplasma de un óvulo debe corresponder a la misma especie que el núcleo trasplantado Ovejas 1. Óvulos de ovejas cabeza negra. de glándula mamaria de oveja cabeza blanca. 2. Se extrajeron núcleos 3. Después la nueva célula se injerta en el útero de la hembra receptora. • Transferencia nuclear La célula del animal a clonar se transfiere al espacio perivitelino del óvulo "vacío". • Selección Células transfectadas se cultivan 2 tipos de células 1° dona el material genético 2° lo recibe Mediante electrochoques se fusionan las 2 células . 8 años. 2) Por gemelación: Partiendo de un óvulo fecundado. se retiró el núcleo quedando solo el citoplasma recubiertos por la zona pelucida. se cultivaron por 6 días. Los óvulos conteniendo el núcleo de la célula mamaria. Los nucleos de la oveja cabeza blanca se inyectaron en el citoplasma de la oveja cabeza negra 6. • Transfección Una vez unido el vector con el gen se transfecta a una célula. • Reproducción de ejemplares con genética de alto valor. de esta manera el óvulo recibe el núcleo y la información genética del animal a reproducir. . entre la membrana plasmática y la zona pelúcida. • Reinserción al sistema productivo de animales • Preservación genómica de especies X Factores que afectan la reprogramación nuclear= aborto y muerte perinatal Tipos de clonación 1) Transferencia de núcleos: se generan individuos que son copias iguales al progenitor (Dolly). El óvulo queda “vacío” de material genético. 3) clonación molecular: • Fragmentación Se retira un pedazo de ADN • Ligación Se une el pedazo de ADN con un vector formar una secuencia para ser incubado. Ventajas • Asegurar la transmisión y preservación del potencial genético del individuo a clonar. Fusión Mediante un pulso eléctrico la célula con el material genético del animal a clonar ingresa al citoplasma del óvulo. donde se permite un ambiente apto para su crecimiento. lo que le permite recibir a la célula del animal a clonar.

la preñez se confirma mediante ecografía Cabras: Técnica de recuperación de ovocitos. se inyectan núcleos Caballos: Animales de deporte Cerdos: Uso de órganos (xenotrasplantes) Perros y gatos: Copias de mascotas Vacas: Granjas farmacéuticas ESPERMAS X EYACULADO DE UN TORO: 9 mil millones .Transferencia receptoras. embrionaria a vacas Los embriones desarrollados en cultivo se transfieren a hembras receptoras que llevan a cabo la gestación.