UNIVERSIDAD NACIONAL JOSÉ MARÍA ARGUEDAS

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA DE: “DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS

DOCENTE

: Ing. Dennis Hernán Gutiérrez Martínez

JEFE DE PRÁCTICA

: Ing. Rosa Huaraca Aparco

ESTUDIANTES

: Cárdenas Salazar Mabel
: Yaliendo Huamán, Luis Alberto

ANDAHUAYLAS – PERÚ
2016

1. INTRODUCCIÓN:

1Los carbohidratos Según McKee (2003). REVISION LITERARIA: 2. Por medio de este informe daremos a conocer los cambios que se dieron en las sustancias al ser mezcladas en agua con (almidón). se llevó a cabo la identificación de carbohidratos lo cual hace referencia a los cambios que se dieron en cada uno de las muestras de fructosa. disacáridos o polisacáridos. mezcla. 2. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y también en los tejidos animales. y luego al aplicarles otros elementos reactivos como el lugol y el fehling a y b que permitieron identificar y comprobar los principales tipos de carbohidratos al que pertenecían cada una de las mezclas. Estos sirven como fuente de energía para todas las actividades celulares vitales. Existen muchos tipos de carbohidratos y se encuentran principalmente en los alimentos tipo almidón. fruta dulce (fructosa).Sabiendo que los carbohidratos también llamados “hidratos de carbono” son constituyentes de los tres principales grupos químicos que forman la materia orgánica junto con las grasas y proteínas. reacción. y así verificar si fueron positivos o negativos para cada uno. Palabras Claves: Fructosa. los carbohidratos son los compuestos orgánicos más abundantes de la biosfera y a su vez los más diversos. aunque también desempeñan una función importante para la estructura y el funcionamiento de las células. haciendo referencia a estos como fuentes de carbohidratos. sacarosa.2Clasificación de los Carbohidratos Atendiendo a la complejidad de su estructura los glúcidos se clasifican en: . almidón. así como en algunas bebidas endulzadas con azúcares. fideos y arroz. y el azúcar (sacarosa). tejidos y órganos 2. si fueron monosacáridos. y así pudimos observar cómo fueron esos cambios e identificar los tipos de carbohidratos a los que pertenecían cada uno de los elementos. sacarosa y almidón. carbohidratos con los que se trabajó con ayuda de la adición de otras sustancias que reaccionaron. carbohidratos. La principal función es proporcionar energía. teniendo en cuenta los colores que se adquirieron en cada una de las muestras y cuando fueron expuestas al calor con el baño maría. como glucosa o glucógeno. como el pan.

se encuentran en los ácidos nucleicos de todas las células vivas. la sangre contiene aproximadamente 0. Si este grupo carbonilo es terminal en la cadena. Los monosacáridos más importantes son:  Gliceraldehído y la dihidroxiacetona: ambos compuestos se encuentran en células vegetales y animales. La galactosa se halla en vegetales y animales en forma de numerosos derivados: glucolípidos (sustancia blanca del cerebro. Si se toma en cuenta el número de átomos de carbono se dividen en:  Triosas  Tetrosas  Pentosas  Hexosa y  Heptosas Los monosacáridos más sencillos son los de 3 átomos de carbono: el gliceraldehído o aldehído glicérido y la dihidroxiacetona. gomas. agar-agar.).. etc.Monosacáridos o azúcares simples: Son alcoholes con 3 hasta 7 átomos de carbono que contienen un grupo aldehído o cetónico. La glucosa es el azúcar circulante de los animales. el monosacárido es una aldosa. Requiere el humano para la síntesis de la lactosa (glándulas mamarias).08 % de glucosa. nervios).Disacáridos: . Se encuentra en frutas maduras. se conoce como dextrosa. mucílagos. desempeñan un papel muy importante en el metabolismo de los carbohidratos. polisacáridos complejos (pectinas. el monosacárido es una cetosa. si no se encuentra en posición terminal. ii. que se obtienen por oxidación de la glicerina.i. La ribosa es una intermediaria en la ruta metabólica de los carbohidratos y un componente de algunas enzimas.  La glucosa: Es el azúcar más abundante en la naturaleza. por lo que pueden considerarse como productos de oxidación de alcoholes polivalentes en los que una función alcohólica primaria o secundaria se transforma en un grupo carbonilo (CO).  La ribosa y la desoxirribosa: Se encuentran en la naturaleza en la forma cíclica de estructura furanosa.

también se logra con HCl. Los tres polisacáridos más importantes son: almidón. El término glucosídico se refiere al enlace carbono-oxígeno-carbono que une a los dos componentes del acetal. Su fórmula general es: Tienen sabor dulce. Polisacáridos: Son los carbohidratos más abundantes que existen en la naturaleza. La sacarosa está compuesta de dos unidades monosacáridas diferentes. aunque es un importante alimento básico. El almidón es un polvo blanco constituido por gránulos de estructura casi cristalina. El almidón está formado por dos fracciones estructurales: la amilosa y la amilopectina. cristalizan bien y son solubles en agua. Almidón: Es el carbohidrato de reserva más importante y la fuente principal de calorías en la dieta humana. Es un polisacárido de origen vegetal que constituye la principal reserva de energía de las plantas. Por esta razón al hidrolizarse se producen dos unidades monosacáridos. con eliminación de una molécula de agua. se emplea como edulcolorante de alimentos. Las enzimas catalizan la reacción de hidrólisis. El cuerpo humano es incapaz de utilizar la sacarosa o cualquier otro disacárido en forma directa (la molécula es muy grande y no pasa las membranas celulares). Los disacáridos naturales más importantes son: Sacarosa: También llamada azúcar de caña o de remolacha. una molécula de glucosa y una molécula de fructosa.Son glúcidos formados por dos moléculas de monosacáridos unidas entre sí por el denominado enlace glucosídico. Es insípido. no se presenta en el organismo animal. El disacárido debe fragmentarse por hidrólisis. . Sirven como sustancias alimenticias de reserva y como componentes estructurales de las células. glicógeno y celulosa. Es soluble en agua fría y al calentarse en agua tiende a formar una suspención coloidal llamada engrudo.

3Reaccion de molisch Permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una muestra. ya que el medio ácido favorece la hidrólisis previa del enlace glicosídico.2. dando reacciones coloreadas. Los furfurales se condensan con los fenoles para dar productos coloreados característicos. furfural o hidroximetilfurfural. aminas cíclicas o heterociclos) dando productos coloreados. Los oligosacáridos y polisacáridos también sufren estas reacciones. se basa en la acción hidrolizante y deshidratante que ejerce el ácido sulfúrico sobre estos compuestos. Como se sabe. sufren una deshidratación que conduce a la formación de un anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural. que son derivados aldehídicos del furano. Se disponen de diferentes técnicas. según se parta de pentosas o hexosas. Estos compuestos. ya que en medio ácido se hidroliza el enlace glicosídico. reaccionan con compuestos aromáticos (fenoles. Aunque son pruebas específicas de monosacáridos. los ácidos concentrados originan una deshidratación de los azúcares para rendir furfurales. . Los furfurales formados se combinan fácilmente con diversos fenoles y aminas. dependiendo del reactivo utilizado. los oligosacáridos y polisacáridos también dan positivo. empleados frecuentemente en el análisis colorimétrico Las pentosas y hexosas (tanto aldosas como cetosas) en presencia de ácidos minerales como el ácido sulfúrico y a temperaturas elevadas sufren procesos de deshidratación originando furfural (derivados de pentosas) o hidroximetilfurfural (derivados de hexosas) Los monosacáridos en caliente y medio muy ácido.

Se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores.000 ml. también conocido como Licor de Fehling. 3. no es una verdadera reacción química. agua. El ensayo con el licor de Fehling se funda en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído.4Reactivo de Fehling El reactivo de Fehling. Una vez frío. Sirve para demostrar la presencia de glucosa en la orina. Sal de Seignette (Tartrato mixto de Potasio y Sodio). 35 g. El almidón en contacto con el reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color azul-violeta característico. Éste se oxida a ácido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a óxido de cobre (I). Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre (II). hasta 1. por así decirlo. toma el color del ladrillo. sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula. el color desaparece. 150 g. se dice que es un azúcar reductor. Al reaccionar con monosacáridos. y el yodo se libera. ya que si se calienta el tubo. Este complejo es sensible a la temperatura. que forma un precipitado de color rojo.2. agua destilada. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas: Sulfato de cobre cristalizado. solución dehidróxido de sodio al 40%. se torna verdoso. si lo hace con disacáridos. Un aspecto importante de esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. hasta 1.5Reacción del lugol con los carbohidratos La reacción del Lugol es un método que se usa para identificar polisacáridos.6Tipos de azúcares reductores . es una disolución descubierta por el químico alemán Hermann Von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores. y también para detectar derivados de la glucosa como la sacarosa o la fructosa. y es útil para demostrar la presencia de glucosa en la orina. (D’Ocon. Esa coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. las espiras se reorganizan y se vuelve a ver el color. 1998) 2. apareciendo la coloración azul violeta. Por lo tanto. Si un azúcarreduce el licor de Fehling a óxido de cobre (I) rojo. Esto se debe a que las espiras del almidón se "desarman".000 ml. 2.

2EQUIPOS:  Baño isoeléctrico  Cocina eléctrica . 4MATERIALES EQUIPOS Y REACTIVOS: 4. que utilizan átomos libres para unir entre sí los anillos múltiples. 3. La estructura simple de los monosacáridos les permite romperse dos veces tan rápidamente como los disacáridos. mientras que los disacáridos se rompen en sus partes más pequeñas primero.1Materiales  01 juego de placas Petri  01 gotero  02 vaso precipitado de 500ml y 1000ml  Termómetro  01 matraz  Gradilla  8 tubos de ensayo 4. sacarosa. que tipo de glúcidos están presentes en determinados alimentos de consumo humano tomando como base los conocimientos teóricos adquiridos en la asignatura de bioquímica. 2.tienen estructuras cerradas.7Tipos de azúcares no reductores El tercer tipo de disacáridos. Los polisacáridos . maltosa y lactosa. tienen la estructura química abierta necesaria para actuar como agentes reductores. y tardan mucho más tiempo en descomponerse.almidones .Todos los monosacáridos (azúcares simples que no pueden descomponerse en moléculas más pequeñas) son azúcares reductores. 3OBJETIVO GENERAL: Comprobar mediante técnicas sencillas de laboratorio. y polisacáridos (azúcares con anillos químicas múltiples) son los azúcares no reductores. Dos de los tres tipos de azúcares disacáridos (con dos anillos de sustancias químicas).1OBJETIVOS ESPECÍFICOS:  Identificar azucares reductores y no reductores  Identificar el almidón y mediante su hidrolisis determinar el poder reductor de los azucares que lo conforman.

Caliente a 60° C y añada 1 ml de solución de glucosa al 5%. De la solución obtenida.2Reacciones de disacáridos i.1Reacción de fehling: Coloque en un tubo de ensayo 2 ml de fehling A y 2 ml de fehling B. 5. y sus características. Interprete la reacción que tuvo lugar. Caliente de 5-10 minutos aproximadamente a 70°C en baño maría. Con reactivo de fehling Repetir el ensayo practicado en 1. utilizando 1ml de solución de maltosa al 5% interprete el resultado.a + f. Observe si se forma insoluble. Balanza analítica 4. Hidrolisis de la sacarosa en un Erlenmeyer de 100 ml coloque 10ml de solución de sacarosa al 5%. ii. utilizando 1ml de solución de sacarosa al 5% en vez de la solución glucosa Interprete el resultado Repetir el ensayo practicado en 1.3Reacciones de polisacáridos: almidón . coloque 2ml en un tubo de ensayo y practique la reacción de fehling. agregue unos 15 ml de agua destilada y 10 gotas de ácido acético concentrado. Agite y caliente a ebullición durante 1 minuto.b)  Glucosa  Fructosa  Sacarosa  Almidon  5PROCEDIMIENTO: 5. 5.3REACTIVOS:  AGUA DESTILADA  Barfoed (solución de acetato de cobre en medio acético)  Lugol (solución de K1 y I2 e agua destilada)  Felling (f. Deje enfriar introduzca un trocito de papel de tornasol rojo y neutralice con solución de NaOH al 10%. Interprete sus resultados con ecuaciones.

iii. agregar unas gotas de agua destilada tibia para hacer una papilla. estableciendo que se produjo la reducción y que la prueba fue positivo. añadir 70 ml de agua destilada y calentar a ebullición durante 3 minutos. se pudo notar que al colocarle la solución de Fehling A cambio a un color verde luego cuando se le añadió la solución de Fehling B este cambio a un color azul. 2) 2 ml de Sacarosa 2 ml de Fructosa 2 ml de Glucosa 2 ml de Lactosa SUSTANCIAS Fehling A y B Fehling A y B Fehling A y B Fehling A y B REACCIÓN Positiva Negativo Positiva Positiva Todos los monosacáridos son reductores porque tienen un grupo Aldehído (aldosas) libre (en su forma acíclica). la muestra problema no resultó ser un polisacárido. Solubilidad de almidón en agua: En un Erlenmeyer e 100ml colocar o. Reacción de almidón con el yodo: En un tubo de ensayo coloque 3ml de engrudo de almidón. 5.1 gr de almidón . Por esa razón la Fructosa no es reductor ya que no poseen un carbono anomérico libre. deje enfriar y agregue una gota de solución diluida de I2 en KI. . En cambio en el segundo tubo se observó color amarillo pálido y luego anaranjado después de dejarlo enfriar. lo que indica que hubo una reacción negativa. ii. Observe la coloración. Glucosa y Maltosa). Caliente suavemente y luego deje enfriar Con reactivo de fehling : Repita el ensayo practicado en 1. pero como no apareció un color azul intenso. que nos indica una coloración rojo ladrillo a diferente nivel de coloración ya que esto se debe a la concentración de azúcar en cada solución. 6CALCULOS Y RESULTADOS 1) Podemos ver los resultados de las soluciones de azúcares reductores que son: (Fructosa.i. El almidón casi no es soluble en agua pero forma una dispersión coloidal que constituye el reactivo denominado “engrudo de almidón”. Lactosa. y en 3 pero utilizando 2ml del engrudo de almidón. 3) El primer tubo.4Reconocimiento de polisacáridos Colocar en un tubo de prueba la muestra problema verter unas gotas de reactivo de lugol.

ya que si se calienta el tubo. La reacción del almidón con el yodo. ya que se formó un precipitado de color rojo ladrillo (óxido cuproso). fructosa. no es una verdadera reacción química sino una reacción física que a su vez se forma un compuesto de inclusión que altera las propiedades físicas de esta molécula.  En cambio la sacarosa es un azúcar no reductor. maltosa y galactosa son azúcares reductores.  Un azúcar es reductor por la formación de un precipitado de color rojo ladrillo (óxido cuproso) y la decoloración de la solución. indicándonos una coloración azul negro. es decir. 7Discusiones  La prueba de Fehling nos permite identificar cual es un azúcar reductor. que contenía agua.4) En el primer tubo que contiene almidón al agregar dos gotas de yodo (lugol) nos dio una coloración azul negruzco esto se debe a que en esta reacción el yodo entra a la estructura helicoidal del almidón. por lo que se torna el color del reactivo de yodo que hemos añadido. debido a que el agua no es un polisacárido que se produce la reacción con el yodo. el color desaparece esto se debe a que en las espiras del almidón se produce una modificación y el yodo se libera.  Podemos concluir que las muestras de glucosa. nos dió una coloración amarillenta transparente. En el segundo tubo. RESULTADOS Y DISCUSIÓN: . La mayoría de los monosacáridos y algunos disacáridos poseen poder reductor. Este complejo que se forma es sensible a la temperatura. debido a que no se formó un precipitado de color rojo ladrillo. que los átomos de yodo se introduce entre las espirales provocando la absorción o fijación de yodo en las moléculas del almidón (amilosa).

el color desaparece. sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula. . HIDRÓLISIS DE ALMIDON El almidón se encuentra compuesto de amilosa y amilopectina. Esto se debe a que las espiras del almidón se "desarman". apareciendo la coloración azul violeta. las espiras se reorganizan y se vuelve a ver el color. No es una verdadera reacción química. Por su parte el lugol se encuentra compuesto de Yodo el cual queda impregnado en el centro de las hélices de la amilosa y es así como en presencia de almidón el producto se torna de un color morado. y el yodo se libera una vez frío.2 ml de Sacarosa 2 ml de Fructosa 2 ml de Glucosa 2 ml de Lactosa SUSTANCIAS Fehling A y B Fehling A y B Fehling A y B Fehling A y B REACCIÓN Positiva Negativo Positiva Positiva Todos los monosacáridos son reductores porque tienen un grupo Aldehído (aldosas) libre (en su forma acíclica). ya que si se calienta el tubo. Esto se comprobó en la práctica realizada ya que el almidón se torno de color violeta y la fructosa no. en donde salieron reductores la sacarosa. 8CONCLUSIONES:  La identificación de azucares reductores y no reductores se las comprobó por el método de Fehling A y B. La amilosa es un polisacarido helicoidal no ramificado con enlaces alfa 1-4. Este complejo es sensible a la temperatura. glucosa y lactosa reductores porque tienen un grupo Aldehído libre en su forma acíclica. Por esa razón la Fructosa no es reductor ya que no poseen un carbono anomérico libre IDENTIFICACION DE POLISACARIDOS Según Muñoz (2006) dice que el almidón en contacto con el Lugol toma un color azulvioleta característico se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón.

fructosa son de composiciones similares no muestran las mismas reacciones como el color al rato de identificarlas. Los carbohidratos son en general mas solubles en agua y solventes inorgánicos y menos solubles o insolubles en solventes inorgánicos  ¿Por qué unos glúcidos no reducen el reactivo de fehling y si lo hacen después de una hidrolisis? Porque no todos los glúcidos tienen un carbono que posea un grupo hemiatetálico libre. no se puede manifestar el poder reductor y la prueba de Fehling dará negativa. etc). El fruto cuando está inmaduro contiene altas cantidades de almidón.  ¿Por qué unos glúcidos se colorean con el yodo y otros no? La solución de yodo también reacciona con el glucógeno. kilos. apareciendo como grandes zonas en el fruto teñidas de azul. caso de la glucosa.  A pesar de que la glucosa. aunque el color producido es más castaño y mucho menos intenso. Esta prueba se utiliza como indicador del grado de madurez de los frutos. que son detectadas a través de la tinción con la prueba de almidón. di u oligosacáridos) mayor es su solubilidad. Pero si lo tienen ocupado por unión con otra molécula (por ejemplo la sacarosa) o por otra causa de tipo estructural. estos grupos o radicales tienen poder reductor y por eso dan positiva la prueba de Fehling.  Al momento de la hidrolisis del almidón que esta formado por amilosa y amilopectina. Entre más pequeñas sean las moléculas de carbohidratos (mono. 9CUESTIONARIO  ¿Por qué unos glúcidos son muy solubles y otros son muy poco? La solubilidad es la capacidad de una molécula de rodearse de moléculas de agua (o cualquier solvente).Mientras que el único no reductor es la fructuosa ya que este no poseen un carbono anomérico libre. Mientras que cuando un fruto esta maduro. . ese almidón se ha transformado en azúcares y por lo tanto no se tiñe en la prueba. cuando se trata de carbohidratos de peso molecular grande (polisacáridos) su solubilidad disminuye. por lo que referido a los carbohidratos significaría que es la capacidad de un carbohidrato de rodearse de moléculas de agua y se mide en cantidad necesaria de agua para solvatar cierta cantidad de un carbohidrato (en gramos.  A través de este informe pudimos ver como se identifican los tipos de carbohidratos de diferentes sustancias las cuales son mezcladas con reactivos químicos que ayudan a identificar estos tipos de glúcidos. miligramos. en la practica formo un color morado por el lugol que contiene yodo este queda adherido en las hélices de la amilosa dando positivo.

La base molecular de la vida. 3ª Ed. Vicente JC (eds): Fundamentos y Técnicas de Análisis Bioquímico. 4ª Ed. 1ª Ed. 1ª Ed. Escribe la reacción de hidrolisis de la sacarosa S + H2O +/H3O+/ G+F/H3O+/ 10BIBLIOGRAFIA:  D’Ocon MC. España). McKee JR (eds): Bioquímica. Anexos . España).  McKee T. En Devlin TM (eds): Bioquímica.  Harris RA (2004): Metabolismo glucídico I: Principales rutas metabólics y su control. En D’Ocon MC. Tudela J (eds): Prácticas de bioquímica. En Mckee T. García MJ. Experimentación y Simulación. Vicente JC (1998): Estudio general del metabolismo de los hidratos de carbono. Editorial Reverté (Barcelona. Mckee JR (2003): Hidratos de carbono. En Lozano JA. Editorial McGraw-Hill Interamericana (Madrid. España). Editorial Síntesis (Madrid. España). García MJ.  Muñoz E (2006): Propiedades químicas de los azúcares. Editorial Paraninfo (Madrid.