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PRCTICA #1

CALIBRACIN DE PIPETAS AUTOMTICAS (MTODO DE PESADA)

OBJETIVO:
Calibrar las pipetas automticas a travs del mtodo de pesada.
INTRODUCCIN:
Las pipetas automticas, son aparatos hermticos con un pistn cargado con un resorte que fuerza el
aire fuera de la pipeta al oprimir el botn pulsador de la parte superior de la pipeta. Este botn permite
desplazar un volumen conocido y generalmente ajustable de aire de la punta desechable de plstico
(tip). El volumen de aire desplazado se puede variar trabando un micrmetro de ajuste, localizado en
el frente del dispositivo o rotando la barra graduada hasta cada tope, segn el modelo de pipeta.
Enseguida se introduce la punta desechable dentro del lquido y la presin liberada sobre el botn
hace que el lquido sea aspirado por la punta. La punta se coloca contra la pared del vaso recipiente y
se oprime de nuevo el botn pulsador para vaciar completamente la punta.
En el mercado se dispone de numerosas pipetas automticas para situaciones que requieren la
transferencia repetida de un volumen particular. Pueden ser de volumen fijo o de volumen variable.
Tambin se dispone de pipetas de microlitro motorizadas, que se controlan por computadora y una
gran variedad de software para que estos dispositivos funcionen como pipetas, distribuidores de
volmenes mltiples, buretas y como medios para diluir muestras.
El intervalo de volmenes actualmente es muy variado. Existen micropipetas que miden en un rango
de volumen de 0.1 a 2.5 L, con un paso de 0.002L, hasta macropipetas con un rango de volumen
de 500 a 5000L, con un paso de 5L a 0.1 mL.
En general los fabricantes entregan con cada pipeta un certificado individual que documenta los datos
de produccin y los valores de la calibracin primaria.
Las pipetas automticas de volumen fijo son muy precisas, pero las de volumen variable no lo son
tanto. Estas ltimas son menos precisas que las aforadas, pero cuando en un anlisis se utiliza una
pipeta automtica de volumen variable, habiendo ajustado el volumen requerido y sin variarlo ms, su
precisin es comparable a una pipeta aforada de clase A.
Instrucciones para el manejo de una pipeta automtica
Ajustar el volumen girando la barra graduada hasta que en la escala aparezca el volumen deseado.
Colocar un tip o punta de plstico en la punta de la pipeta, segn sea el caso, haciendo una leve
presin para lograr un buen ajuste.
Oprimir el botn pulsador con el dedo pulgar, hasta el primer tope y sin soltarlo introducir
verticalmente la pipeta hasta que el tip se sumerja de 5 a 10 mm dentro del lquido.

Liberar lentamente la presin sobre el botn. Despus de 23 segundos retirar, siempre verticalmente,
la pipeta del lquido deslizando la punta contra la pared del recipiente.

Apoyando la punta contra la pared del recipiente donde se quiere colocar el lquido, presionar
lentamente el botn pulsador hasta el primer tope. Despus de un segundo y sin soltar el botn
pulsador, terminar de vaciar la pipeta presionando hasta el segundo tope.

Retirar la pipeta deslizando la punta contra la pared del recipiente.

MATERIAL Y REACTIVOS:
Pipetas automticas: 1000ul, 200ul, 10ul.
Agua destilada.
Termmetro.
Balanza
METODOLOGA:
1. Pesar un matraz Erlenmeyer de 100 mL, limpio y seco por fuera y en el cuello, con su
correspondiente tapn de goma (m0). Para ello tomarlo con una pinza o banda de papel.
2. Anotar la temperatura t del agua destilada con la que se va a trabajar.
3. Llenar la pipeta automtica con agua destilada y descargarla en el matraz
4. Retirar la pipeta.
5. Tapar el matraz Erlenmeyer y pesarlo (m1), con las mismas precauciones que la vez anterior.
m1 - mo = m agua, aire, t (masa del agua que vierte la pipeta en el aire, a la temperatura t)
6. Repetir la operacin vaciando nuevamente la pipeta en el mismo matraz sin tirar el agua
colocada anteriormente. Se obtendr una nueva masa, m2.
m2 - m1 = m agua, aire, t
7. Repetir la operacin hasta obtener 10 datos de masa y hacerles la correccin para obtener
V20C, multiplicndolo por el factor que corresponde a la temperatura de la experiencia. Se
corrige por el coeficiente de dilatacin del vidrio, pues el volumen de agua succionado por la
pipeta automtica es el mismo que el volumen de aire retenido en la camisa de vidrio que se
encuentra en el interior de la pipeta y por el cual se desplaza el pistn.

NOTAS:
Tolerancias de las pipetas
Para la mayora de las pipetas se considera los siguientes errores, estos cambian segn la marca,
modelo y diseo del fabricante.
Volumen
Nominal

20

50

100 200 500 1000 2000 5000 10000

Error
Sistemtico
Mximo
Permitido

0.05 0.08 0.125 0.12 0.2

0.5

0.8

1.6

4.0

8.0

16

40

Error
aleatorio
Mximo
Permitido

0.05 0.04 0.075 0.08 0.1

0.2

0.3

0.6

1.5

3.0

6.0

15.0 30.0

10

60

En la tabla siguiente se muestra el factor necesario para calcular el volumen calibrado a


diferentes temperaturas; en ella se han considerado las correcciones debidas tanto el
empuje del aire como el efecto de la temperatura en la densidad del agua y en la dilatacin
trmica del vidrio a diferentes temperaturas.
Temperatura Densidad del agua
3
T ( C)
(g/ cm )
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30

0.99997026
0.99996084
0.9995004
0.9993801
0.999247 4
0.999102 6
0.998946 0
0.998777 9
0.998598 6
0.998408 2
0.998207 1
0.997995 5
0.997773 5
0.997541 5
0.997299 5
0.997047 9
0.99799678
0.997516 2
0.997236 5
0.995947 8
0.995650 2

3
Volumen de 1 g de agua (cm ) Corregido
20C
a la temperatura indicada

1.001 4
1.001 5
1.001 6
1.001 7
1.001 8
1.002 0
1.002 1
1.002 3
1.002 5
1.002 7
1.002 9
1.003 1
1.003 3
1.003 5
1.003 8
1.004 0
1.004 3
1.004 6
1.004 8
1.005 1
1.005 4

1.001 5
1.001 6
1.001 7
1.001 8
1.001 9
1.002 0
1.002 1
1.002 3
1.002 5
1.002 7
1.002 9
1.003 1
1.003 3
1.003 5
1.003 8
1.004 0
1.004 2
1.004 5
1.004 7
1.005 0
1.005 3
-

Ejemplo:
Se desea calibrar una pipeta de 25.0 mL El frasco vaco tiene una masa de 10.283 g y despus de
llenarlo con el agua contenida en la pipeta la masa fue de 35.225. Si la temperatura del laboratorio era
de 23oC, encontrar el volumen vertido por la pipeta
Masa agua= 35.225-10.283= 24.942 g
Volumen de agua= (24.942g)(1.0035 ml/g) = 25.029 mL a 23OC)
La diferencia entre el volumen medido y el calibrado significa una incertidumbre en la medida del
volumen que deber ser incluido en el resultado final del mensurando.
La medida del volumen calibrado deber efectuarse varias veces de
obtenidos se van a distribuir segn una curva de distribucin gaussiana.

manera que los valores

El mximo de la curva corresponde con la media aritmtica de los valores () y el trmino


denominado desviacin normal (s) es una medida til de la dispersin de los datos debido a errores
aleatorios. En una curva gaussiana, el 95.5% de los datos se encuentran dentro del intervalo 2s y
el 99.7 en el intervalo 3s.
RESULTADOS:
Anotar los datos obtenidos en la siguiente tabla.
No. de pesadas

Volumen
(mL)

medido Masa
agua(mg)

de

Volumen
corregido
a 20o
C(Factor)

Diferencia
entre
los
volmenes
(medido
y
corregido)

Calcular la media, desviacin estndar y coeficiente de variacin (CV) para cada pipeta calibrada (es
decir por conjunto de pesadas). El %CV debe ser menor al 2% para tener un resultado aceptable.
%CV= (desviacin estndar/ media) *100
DISCUSIN
Interpretacin de los resultados y comparacin con la literatura cientfica.
CONCLUSIONES
Con base en los objetivos, deben ser muy concretas.
BIBLIOGRAFA
Harris, Daniel C., Quantitative Chemical Anlisis 7/e, 2007, W.H. Freeman
http://www.simet.gob.mx/Guas%20Tcnicas/CALIBRACION%20volumen%20mtod
o%20grav.