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Determinacin de protenas en zucaritas Kelloggs

Metodo AOAC: 984.13


Metodo Kjeldahl
OBJETIVO: Determinar protenas en cereal para desayuno mediante el mtodo
Kjeldahl el cual es la tcnica ms confiable para la determinacin de nitrgeno
orgnico.
FUNDAMENTO: El contenido protenico de los alimentos puede determinarse por
medio de diversos mtodos. La forma ms habitual es su cuantificacin de forma
indirecta y aproximada, bien a partir del contenido en nitrgeno de la muestra, o
bien deduciendo su cantidad a partir del contenido de uno o dos aminocidos
particulares que conforman la protena, fciles de identificar y de cuantificar por su
reactividad qumica especfica. Utilizaremos el mtodo volumtrico basado donde
las protenas se determinan indirectamente a partir de la determinacin del
nitrgeno, en el cual la muestra es digerida en H2SO4 usando CuSO4 como
catalizador, convirtiendo el N en NH3 el cual es destilado y tratado.
REACTIVOS:

NaOH disolver aproximadamente 450 g de NaOH en agua fra y diluir a 1 L


Oxido de aluminio
Solucin estndar de NaOH 0.1: tomar 4 g de NaOH y enrasar a 1L con
agua enfriada.
Solucin estndar de H2SO4 0.25 M
Sulfato cprico

MATERIALES

Balanza analtica
Equipo Kjerdahl
Matraz de digestin
Sistema de digestin
Manta calefactora

PROCEIMIENTO
Procedimiento para la deteccin de protenas por el mtodo Kjeldahl
1. Pesar alrededor de 1 g de muestra en un matraz de digestin Kjeldahl
2. Agregar 3 perlas de vidrio, 15 g de sulfato de potasio, 0.04 g de sulfato
cprico anhdrido, 0.5g de Al2O3 y 20 mL de cido sulfrico a 0.25M.
3. Calentar el matraz 5 minutos hasta la ebullicin, (Precalentar la plancha,
ajustar para llevar 250mL de agua a 25C a hervir en 5 minutos) hasta que
los vapores blancos densos limpien la boquilla del matraz. Agitar
suavemente y continuar calentando 90min.

4. Preparar el vaso de titulacin mediante la adicin de una solucin cida de


volumen apropiada, medida con precisin a la cantidad de agua, de manera
que la punta del condensador est sumergida lo suficiente. Aadir 3-4 gotas
de solucin indicadora.
5. Aadir 2-3 gotas de tirbutil citrato al matraz de digestin para reducir la
espuma; aadir 0.5-1g de Al2O3.
6. Aadir lentamente suficiente solucin de NaOH, tal que la muestra sea
altamente alcalina.
7. Inmediatamente conectar el matraz al aparato de destilacin, mezclar
completamente, y destilar a ebullicin aproximadamente 7.5 min. Hasta
150mL. Se recoge el destilado en el vaso de destilacin.
8. Titular el cido en exceso en destilado con solucin de NaOH estndar.
Corregir la determinacin en blanco de los reactivos. Calcule% N con:
N, %(p/p)=[(M acido)(2)(mL acido)-(mL bk)(M NaOH)- (mL bk)(M NaOH)]
[1400.67]/ mg test portion

BIBLIOGRAFIA
AOAC
http://www.ispch.cl/lab_amb/met_analitico/doc/ambiente%20pdf/Proteina.pdf
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/16338/Determinaci%C3%B3n%20de
%20proteinas.pdf?sequence=1

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