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Examen Combo en Placa de un paso para Materiales Requeridos no Suministrados 2.

El Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) solo indica la
TM
• Colector para la colección de la muestra • Cronómetro presencia de rotavirus y adenovirus en la muestra y no debe tomarse como único criterio para
Rotavirus y Adenovirus (Heces) confirmar la presencia de rotavirus y adenovirus como los agentes etiológicos de diarrea.
• Centrífuga y pipeta para dispensar 80 µL
Ficha Técnica 3. Si el resultado es negativo y los síntomas clínicos persisten, se recomienda efectuar exámenes
INSTRUCCIONES DE USO adicionales usando otros métodos. Un resultado negativo en ningún momento descarta la
Español Deje que la placa, la muestra, buffer y/o los controles alcancen una temperatura ambiente posibilidad de infección de rotavirus o adenovirus con baja concentración de partículas de virus.
Un rápido, examen de un paso para la detección cualitativa de rotavirus y adenovirus en heces humanas. estable (15-30°C) antes de la prueba. 4. Si el resultado de la prueba resulta negativo y los síntomas clínicos persisten, exámenes adicionales
Solo para uso profesional de diagnóstico in vitro. 1. Para colectar muestras fecales: utilizando otros métodos clínicos son recomendados. Un resultado negativo en ningún momento
Coleccione suficiente cantidad de heces (1-2 mL o 1-2 g) en un recipiente limpio y seco para obtener excluye la posibilidad de infección de adenovirus con baja concentración de partículas de virus.
USO INDICADO
suficientes partículas de virus. Los mejores resultados se obtienen si el examen se realiza en las 6 horas
El Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) es un inmunoensayo siguientes a la colección de la muestra. Las muestras colectadas pueden ser almacenadas por 3 días a VALORES ESPERADOS
cromatográfico rápido para la detección cualitativa de rotavirus y adenovirus en muestras de heces temperatura de 2-8 °C si no han sido examinadas durante las 6 primeras horas. Para almacenajes de El Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) ha sido comparado con
humanas para ayudar en el diagnóstico de infecciones de rotavirus y adenovirus. largo tiempo, las muestras deben mantenerse a una temperatura menor a -20°C. el método de aglutinación con látex, mostrando una precisión total de >99,9%.
RESUMEN 2. Para procesar muestras fecales:
• Para Muestras Sólidas: CARACTERÍSTICAS DEL DESEMPEÑO
La diarrea aguda en niños pequeños es una causa mayor de mortalidad en el mundo entero y uno de los Desenrosque la tapa del tubo colector de la muestra, Luego al azar clave el aplicador dentro de Sensibilidad Clínica, Epecificidad y precisión
principales motivos de mortalidad en los países en desarrollo.1 El Rotavirus es el agente responsable mas la muestra fecal en al menos 3 sitios diferentes para colectar aproximadamente 50 mg de
común por la gastroenteritis aguda, principalmente en niños pequeños.2 Su descubrimiento en 1973 y su El desempeño del Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) ha sido
heces (equivalente a 1/4 de guisante). No sacuda la muestra fecal. evaluado con 545 muestras clínicas colectadas de niños y adultos jóvenes en comparación con el método
asociación con la gastroenteritis infantil representó un avance muy importante en el estudio de la • Para Muestras Líquidas:
gastroenteritis no causada por infección bacterial aguda. El Rotavirus es transmitido vía oro-fecal con un de aglutinación por látex. Los resultados mostraron que el Examen Combo en Placa de Un Paso para
Sostenga el gotero verticalmente, aspire la muestra fecal, y luego transfiere 2 gotas (aproximadamente Rotavirus y Adenovirus (Heces) tiene alta sensibilidad y especificad para rotavirus y adenovirus.
periodo de incubación de 1-3 días. Sin embargo las muestras colectadas realizadas durante el segundo y 50 µL) dentro del tubo colector de la muestra que contiene el buffer de extracción.
quinto día de la enfermedad son ideales para la detección del antígeno, el rotavirus puede aún ser Método Aglutinación x Látex
Ajuste la tapa del tubo colector de la muestra, luego agite el tubo vigorosamente para mezclar la Resultados Totales
encontrado mientras continúe la diarrea. La gastroenteritis rotaviral puede causar mortalidad en Resultados Positivo Negativo
muestra con el buffer de extracción. Examen en Placa de Un
poblaciones de riesgo como las infantiles, de edad avanzada y pacientes inmunocomprometidos.3 En Paso de Rotavirus Positivo 178 3 181
3. Antes de abrir el sobre éste debe encontrarse a temperatura ambiente. Remueva la placa del sobre Negativo 0 131 131
climas temperados, las infecciones de rotavirus ocurren mayormente en los meses de invierno. Se ha laminado y úselo tan pronto sea posible. Los mejores resultados se obtienen cuando el examen se
informado de las afecciones endémicas así como las epidémicas que afectan a miles de personas.4 El 50% Resultados Totales 178 134 312
realiza inmediatamente después de abrirse el sobre laminado.
de las muestras, tomadas a niños hospitalizados que sufrían de enfermedades entéricas agudas, resultaron 4. Sostenga el tubo colector hacia arriba y rompa la punta del tubo colector de la muestra. Invierta el Sensibilidad Relativa: >99,9% (97,9% - 100,0%)* Especificación Relativa: 97,8% (93,6% - 99,5%)*
positivas para rotavirus.5 Los virus replican en el núcleo celular y tienden a ser huéspedes de especies tubo colector de la muestra y transfiera 2 gotas completas de la muestra extraída Exactitud Relativa: 99,0% (97,2% - 99,8%)* *95% Confidencia de Intervalos
específicas produciendo un efecto sicopático característico (CPE). Debido a que el rotavirus es (aproximadamente 80 µL) al pozo de la muestra (S) de la placa del examen, luego empiece a Método Aglutinación x Látex
extremadamente difícil de cultivar, es inusual usar métodos de aislamiento del virus para diagnosticar una Resultados Totales
cronometrar. Evite atrapar burbujas en el pozo de la muestra (S). Observe la ilustración de abajo. Resultados Positivo Negativo
infección. En cambio una variedad de técnicas se han desarrollado para la detección del virus en heces. Examen en Placa de Un
5. Espere hasta que las líneas coloreadas aparezcan. Lea los resultados a los 10 minutos después de Paso de Adenovirus Positivo 65 1 66
Las investigaciones han demostrado que los adenovirus entéricos, especialmente Ad40 y Ad41, son causa haber dispensado las gotas de la muestra. No lea resultados después de 20 minutos. Negativo 0 167 167
principal de diarrea en muchos de estos niños y en segundo lugar después de los rotavirus.6,7,8,9 Estos Nota: Si la muestra no migra (presencia de partículas) centrifugue la muestra diluida que contiene el Resultados Totales 65 168 233
virales patógenos han sido aislados en todo el mundo y pueden causar diarrea en los niños durante todo el vial del buffer de extracción. Colecte 80 µL del súper nadante y dispénselo en el pozo de la muestra Sensibilidad Relativa: >99,9% (94,5% - 100,0%)* Especificación Relativa: 99,4% (96,7% - 100,0%)*
año. Las infecciones son mas frecuentes en niños menores de 2 años, pero ha sido encontrada en pacientes (S). Comience a cronometrar y continúe desde el paso 5 hacia adelante de estas instrucciones. Exactitud Relativa: 99,6% (97,6% - 100,0%)* *95% Confidencia de Intervalos
de todas las edades. Estudios mas avanzados han determinado que los adenovirus están asociados con el
4-15% de todos los casos hospitalizados por gastroenteritis viral.5,6,7,8,9 La rápida y precisa diagnosis de Precisión
gastroenteritis debido a adenovirus es de ayuda para establecer la etiología de la gastroenteritis y lo relativo Intra-Ensayo
al manejo del paciente. Otras técnicas de diagnóstico como Microscopía electrónica (EM) e hibridización La precisión en las dentro-corridas fue determinado usando 10 réplicas de siete muestras: Una negativa,
del ácido nucleico son onerosas y muy laboriosas. Debido a la auto- limitada naturaleza de la infección de una de rotavirus bajo positivo, una de adenovirus bajo positivo, una de rotavirus medianamente positivo,
adenovirus, estos exámenes de costos onerosos e intensiva laboriosidad pueden no ser necesarios. una de adenovirus medianamente positivo, una de rotavirus altamente positivo y una de adenovirus
El Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) es un inmunoensayo altamente positivo. Las muestras fueron correctamente identificadas >99,9% de las veces.
cromatográfico rápido para la detección cualitativa de rotavirus y adenovirus en muestras de heces Inter-ensayo
humanas, proporcionando resultados en 10 minutos. La prueba utiliza anticuerpos específicos para La precisión entre-corridas fue determinada por 10 ensayos independientes en las mismas 7 muestras: Una
rotavirus y adenovirus para selectivamente detectar rotavirus y adenovirus en muestras de heces humanas. negativa, Una de rotavirus bajo positivo, una de adenovirus bajo positivo, una de rotavirus medianamente
PRINCIPIO positivo, una de adenovirus medianamente positivo, una de rotavirus altamente positivo y una de
El Examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) es un inmunoensayo adenovirus altamente positivo. Las muestras fueron correctamente identificadas >99,9% de las veces.
cualitativo de flujo lateral para la detección de rotavirus y adenovirus en muestras de heces humanas. Reacción Cruzada
En este examen la membrana es precubierta con anticuerpo de anti rotavirus en la región de la línea R del La reacción cruzada con los siguientes organismos fue estudiada a 1,0 x 109 organismos/ml. Los
examen y anticuerpo de anti adenovirus en la región de la línea A del examen. Durante la prueba, la siguientes organismos fueron encontrados negativos cuando se examinaron con el Examen Combo en
muestra reacciona con la partícula cubierta con el anticuerpo anti rotavirus y anticuerpo anti adenovirus. La Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces).
mezcla migra hacia arriba cromatográficamente en la membrana por acción capilar para reaccionar con el Staphylococcus aureus Neisseria gonorrhea Acinetobacter spp
anticuerpo anti rotavirus y el anticuerpo anti adenovirus en la membrana y generar una línea de color azul Pseudomonas aeruginosa Group B Streptococcus Salmonella choleraesius
o roja. La presencia de estas líneas de color en la región de la línea del examen indica un resultado positivo, Enterococcus faecalis Proteus vulgarisms Gardnerella vaginalis
mientras su ausencia indica un resultado negativo. Para servir como un control de procedimiento, una línea Group C Streptococcus Enterococcus faecium Acinetobacter calcoaceticus
de color siempre aparecerá en la zona de la región de control indicando que un apropiado volumen de Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis E.coli
muestra fue añadido y la reacción de la membrana se ha efectuado. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Branhamella catarrhalis Candida albicans Chlamydia trachomatis
REACTIVOS Hemophilus influenzae Neisseria meningitides
POSITIVO:
El examen contiene partículas cubiertas por anticuerpo anti rotavirus y anticuerpo anti adenovirus y Rotavirus Positivo: * Una línea de color aparece en la región de la línea de BIBLIOGRAFIA
anticuerpo anti rotavirus y anticuerpo anti adenovirus cubiertos por la membrana. control (C) y otra línea de control aparece en la región de la línea R. 1. Wadell, G. Laboratory Diagnosis of Infectious Diseases: Principles and Practices. New York:
PRECAUCIONES Springer-Verlag, Volume II, 1988: 284-300.
Adenovirus Positivo: * Una línea de control aparece en la región de la línea 2. WILHELMI I, ROMAN E, SANCHEZ-FAUQUIER A. Viruses causing gastroenteritis. Clin Microbiol
• Para Diagnóstico profesional in vitro únicamente. No usar la prueba después de la fecha de expiración. Infect. April. 2003, vol.9:247-262
• La prueba debe permanecer en el sobre sellado hasta su uso. de control (C) y otra línea de control aparece en la región de la línea A. 3. Cubitt, WD (1982) Rotavirus Infection: An Unexpected Hazard in Units Caring for the Elderly. Geriatric
• No coma, beba o fume en el área donde el espécimen o los kits son manipulados. Medicine Today 1: 33-38
• No utilizar la prueba si el sobre esta deteriorado. Rotavirus y Adenovirus Positivo: * Una línea de control aparece en la 4. Hung, T et al (1984) Waterborne outbreak of Rotavirus Diarrhoea in Adults in China caused by a Novel
• Maneje los especimenes como si contuviesen agentes infecciosos. Observe las precauciones región de la línea (C) y otras dos líneas de color aparecen en la región de Rotavirus. Lancet, May 26;1(8387): 1139-1142
establecidas contra cualquier daño microbiológico durante la prueba y siga los procedimientos la línea A y en la región de la línea R respectivamente. 5. Cukor, G; Perron, DM; Hudson, R and Blacklow, NR (1984) Detection of Rotavirus in Human Stools by
estándares para un buen descarte de los especimenes. Using Monoclonal Antibody. J. Clin. Microl. 19: 888-892
• Use vestimenta protectora como mandiles de laboratorios, guantes descartables, protección para *NOTA: La intensidad del color de la línea en la región del examen (A/R) varía dependiendo de la 6. Wood, D. J. and A. S. Bailey. “Detection of Adenovirus Types 40 and 41 in Stool Specimens by Immune
concentración de los antígenos del rotavirus o adenovirus presentes en la muestra. Por lo tanto, Electron Microscopy.” Journal of Medical Virology, 1987; 21: 191-199.
los ojos mientras los especimenes son examinados. 7. Nishio, Osamu, M. Ooseto, K. Takagi, Y. Yamasita, Y. Ishihara, and S. Isomura. “Enzyme-Linked
• La prueba, una vez utilizado, debe desecharse de acuerdo con las regulaciones locales. cualquier sombra de color en la línea de la región del examen (A/R) debe considerarse positivo.
Immunosorbent Assay Employing Monoclonal Antibodies for Direct Identification of Enteric Adenoviruses
• La humedad y temperatura pueden afectar los resultados adversamente. (Ad40, 41) in Feces.” Microbiol. Immunol. 1990; 34(10): 871-877.
NEGATIVO: Una línea de color aparece en la línea de la región de control 8. Wood, D. J., K. Bijlsma, J. C. de Jong, and C. Tonkin. “Evaluation of a Commercial Monoclonal
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD (C). Ninguna línea aparece en la zona de la región del examen (A/R). Antibody-Based Enzyme Immunoassay for Detection of Adenovirus Types 40 and 41 in Stool Specimens.”
Almacene como viene empacado en el sobre sellado ya sea a temperatura ambiente o refrigerada Journal of Clinical Microbiology, June 1989; 27(6): 1155-1158.
(2-30ºC). El dispositivo de casette de la prueba es estable hasta su fecha de expiración impreso en el 9. Thomas, Eva. E., D. Roscoe, L. Book, B. Bone, L. Browne, and V. Mah. “The Utility of Latex Agglutination
sobre sellado. El dispositivo o casette de la prueba debe permanecer en su sobre sellado hasta su uso. NO VÁLIDO: La línea de control no aparece. Volumen insuficiente del Assays in the Diagnosis of Pediatric Viral Gastroenteritis.” Am. J. Clin. Pathol. 1994; 101:742-746.
NO CONGELAR. No utilizar la prueba después de la fecha de expiración. espécimen o técnicas procesales incorrectas son las razones más frecuentes para
que el control de la línea no aparezca. Revise el procedimiento y repita la Índice de Símbolos
COLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA prueba con un nuevo dispositivo, si el problema persiste, descontinúe el uso del Consulte las Representante
Pruebas por kit
• La detección viral se mejora si la colección de la muestra se efectúa al comienzo de los síntomas. Se ha kit inmediatamente y contacte a su distribuidor local. instrucciones de uso autorizado
informado que la máxima excreción de heces del rotavirus y adenovirus en pacientes con gastroenteritis Solo para uso de
ocurre entre 3 y 5 días después del comienzo de los síntomas. Si las muestras se colectan mucho después diagnóstico in vitro Caducidad No reutilizar
CONTROL DE CALIDAD
de los primeros síntomas de diarrea, la cantidad de antígeno pueda que no sea suficiente para obtener una Un proceso de control esta incluido en la prueba. Una línea coloreada que aparece en la banda de la Almacenar entre
reacción positiva o el antígeno detectado pudiera no estar relacionado con el episodio diarreico. región de control (C) es considerada un procedimiento de control interno. Confirma el uso de volumen 2-30°C Número de lote REF Nº de referencia
• Las muestras de heces deben ser colectadas en un recipiente a prueba de agua, limpio, seco que no suficiente de espécimen, y una adecuada reacción de la membrana y técnicas procesales correctas.
contenga detergentes, preservativos o medios de cultivo. Estándares de control no son proporcionados con este kit, sin embargo se recomienda controles
• Los reactivos deben estar a temperatura ambiente antes de usarlos. Abon Biopharm (Hangzhou) Co., Ltd.
positivos y negativos para ser usados con la prueba como una buena práctica de laboratorio y para #198 12th Street East, Wellkang Ltd
MATERIALES verificar un buen rendimiento de ella. Suite B, 29 Harley Street
Hangzhou Economic & Technological
Materiales Suministrados LIMITACIONES Development Area, LONDON, W1G 9QR, U.K.
• Placas • Cuentagotas 1. El examen Combo en Placa de Un Paso para Rotavirus y Adenovirus (Heces) es para uso en Hangzhou, 310018, P.R.China
• Tubos colectores de espécimen con bufer de extracción • Ficha técnica diagnóstico in vitro únicamente. La prueba debe ser usada para la detección de rotavirus y
adenovirus humano en muestras de heces solamente. Ni el valor cuantitativo ni la proporción de Número: 1155993801
incremento en rotavirus y adenovirus humano puede ser determinado por este examen cualitativo. Data efetiva: 2010-12-24