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Invest Clin 45(2): 121 - 130, 2004

Frecuencia de la mutación ∆F508 en
pacientes venezolanos afectados con fibrosis
quística.
Alisandra Morales-Machin, Lisbeth Borjas-Fajardo, Lennie Pineda, Sandra González,
Wilmer Delgado, Wiliam Zabala y Erika Fernández.
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Maracaibo,
Venezuela.
Palabras clave: Fibrosis quística, mutación ∆F508, reacción en cadena de la
polimerasa.

Resumen. La Fibrosis Quística (FQ), es la enfermedad autosómica recesi-
va severa más frecuente en poblaciones caucásicas, en las que tiene una inci-
dencia de 1/2500 individuos. Se caracteriza por una alteración generalizada
de las glándulas exocrinas y es producida por más de mil mutaciones de un
gen localizado en la región 7q31, que codifica una proteína llamada Regula-
dor de la Conductancia Transmembrana de FQ (RCTFQ). La mutación más
frecuente es la ∆F508, que consiste en la deleción del codón que codifica a la
fenilalanina en la posición 508. El objetivo de este trabajo fue determinar la
frecuencia de la mutación ∆F508 en pacientes venezolanos afectados con FQ
mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP). Se estudiaron 30 pa-
cientes pertenecientes a 28 familias, que por clínica y 2 determinaciones de
cloruros en sudor > 60 meq/L fueron diagnosticados como afectados con FQ.
La detección de la mutación se realizó a partir de amplificación por RCP de
un segmento del gen de FQ de 98 pares de bases (pb) que contiene el codón
que codifica a la fenilalanina en la posición 508 y el cual está ausente en los
que tienen la mutación. La frecuencia del alelo ∆F508 fue de 26,79%, distri-
buídos en 6 homocigotos ∆F508 y 7 heterocigotos compuestos ∆F508/X. El
resto de las mutaciones, no ∆F508, representaron el 73,21%. La frecuencia
del alelo ∆F508 en esta muestra es menor a la reportada en países europeos.
En América Latina se ha observado una gran heterogeneidad en su frecuencia,
esta variación podría explicarse por los diferentes patrones de mestizaje dados
por migración externa y de las alteraciones moleculares de FQ que existen en
la población que se analice. En este trabajo, la mutación ∆F508 proviene de
abuelos en su mayoría (79,41%) nacidos en países mediterráneos y en Colom-
bia y en las no ∆F508, los abuelos son nacidos preferentemente en Venezuela
(79,27%) y Colombia (17,07%).

Autor de Correspondencia: Alisandra Morales-Machin, Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Uni-
versidad del Zulia, Hospital Universitario de Maracaibo. Maracaibo, Venezuela.

es la enfer. diagnósticos. while the no ∆F508 mutations come from grandparents who were born in Venezuela (79.79%. Abstract. con una inci. con síntomas de carácter predominante- medad autosómica recesiva severa más fre.27%) and Colombia (17. The reminder mutations (no ∆F508) repre- sent 73. Aceptado: 19-01-2004. y la frecuencia estimada nica de la FQ. Recibido: 06-06-2002.07%). 45(2): 121 . Frequency of ∆F508 mutation in venezuelan patients with cystic fibrosis. INTRODUCCIÓN La FQ cursa con un incremento de la viscosidad del moco en diferentes órganos. We studied thirty patients of twenty eight fam- ilies who were diagnosed with CF based on their clinical features and sweat chloride level > 60 mEq/l in two determinations. distributed in six homozygous and seven compound heterozygote ∆F508/X. Detection of the mutation was performed from the amplification of a 98 pair of bases (pb) CF gene seg- ment which contains the codon that encodes fenilalanine in the 508 position by PCR. ∆F508 is the most frequent mutation worldwide and it consists in a deletion of the codon that encodes fenilalanine at the 508 protein´s position. manifestándose dencia de 1 en 2. which exists in the analyzed populations. The ∆F508 allelic frequency was 26. Invest Clín 2004. a ∆F508 frequency highly heteroge- neous has been observed in Latin-American countries. the ∆F508 mutation comes mainly from grandpar- ents (79. polymerase chain reaction. with an incidence of 1 in 2500 live births. se han establecido criterios de portadores es de 1 en 104 personas (5). In this study.41%) who were born in Mediterranean countries and Colombia. notípica que puede simular varios cuadros cuencia del fenotipo en la población general clínicos (6-8). mente gastrointestinal.21%. pulmonar obstructi- cuente en la población blanca.733. tales como: presentar una o Investigación Clínica 45(2): 2004 . The aim of this study was to determine the fre- quency of the ∆F508 mutation in Venezuelan patients with CF using the Poly- merase Chain Reaction (PCR). Es una enfermedad con variabilidad fe- En Venezuela se ha publicado que la fre. La Fibrosis Quística (FQ). This variation results from mixed populations with a different genetic background influenced by ex- ternal migration and CF molecular alterations. On the other hand. vo crónico y genitourinario. This PCR product is absent in those who have the mutation.500 nacidos vivos y una en la piel por sudor con alto contenido de frecuencia de portadores de 1 en 25 (1-4). The ∆F508 frequency in our sample is less than the reported in European countries. It is characterized by a generalized disturbance in exocrine glands and it is caused by over one thousand mutations at the cystic fibrosis conductance regulator gene (CFTR) mapped at 7q31. ∆F508 mutation. Dada la gran variabilidad clí- es de 1 en 42.130 Key words: Cystic fibrosis. Cystic Fibrosis (CF) is the most common and severe autosomal recessive disease in Caucasian populations.122 Morales-Machin y col. sal.

que nar la frecuencia de la mutación ∆F508 en consiste en la deleción de 3 pares de bases pacientes afectados con FQ.3%) (20). Ve- 508 de la proteína. a quienes se les realizó historia clíni- sugiere que existe una ventaja selectiva de ca familiar y en los cuales se estableció el los heterocigotos. cos. Este fenómeno sugiere fuer- reportadas más de 1000 mutaciones cau. Así mismo. miento entre el alelo ∆F508 y varios haplo- tiene 27 exones y codifica una proteína lla. Se estudiaron 30 individuos. respectivamente. donde esas enfermedades son más esos pacientes.2%) (19) y mínima en Turquía (21. se diseminó un incremento en la concentración de Cl. tipos determinados por marcadores genéti- mada regulador de la conductancia trans. nos clínicos característicos y 2 determina- rotoxinas del Vibrio cholerae. La mutación más frecuente a nivel mundial El objetivo de este trabajo fue determi- (66%) (18) es la denominada ∆F508. probablemente. Según esta hipótesis. utilizando la Reacción en Cadena fica en gradiente de este alelo en Europa de la Polimerasa (RCP). humanas y que. La primera Zulia. mutado (12. locarpina (26). utilizando la técnica de Iontoforesis con Pi- tección haría que la presión selectiva au. ha sido el como un canal de cloro (15. el alelo ori- positivo para FQ ( elevación de los niveles ginado en las comunidades de agricultores séricos de tripsina inmunoreactiva) junto a procedentes del Asia Menor. nezuela. Han sido más analizado. Para explicar este hecho se han plan. 17). La distribución geográ. o his. revela- membrana de FQ (RCTFQ) que funciona do por las sondas KM19 y XV2C. durante las migraciones y los procesos de en sudor mayor de 60 meq/L utilizando la sedentarización que comenzaron en el suro- técnica de Iontoforesis con Pilocarpina en riente del continente y avanzaron lenta- dos o más ocasiones. pertene- teado dos hipótesis complementarias apoya. en Dinamarca MATERIALES Y MÉTODOS (87. temente la preservación ancestral de un santes de la enfermedad y sus frecuencias segmento genómico que incluye al gen varían en las diferentes poblaciones (9. La hipótesis señalada. atendidos en la (pb) en el gen. resultando en la deleción Unidad de Genética Médica de la Universi- del aminoácido fenilalanina en la posición dad del Zulia (UGM-LUZ) de Maracaibo. 45(2): 121 . fue favore- El gen de la FQ fue identificado en la cido por una ventaja selectiva para los hete- banda 31 del brazo largo del cromosoma 7 rocigotos. 16). Escherichia ciones de Cl– en sudor mayor de 60 mEq/L. 2004 . cientes a 28 familias evaluadas en la Unidad das por evidencias de tipo experimental y de Genética Médica de la Universidad del poblacional. entre los cuales el haplotipo B. molecularmente los 56 progenitores de pa. Mide 250 kilobases (Kb). que corresponde a un perío- o diferencia de potencial nasal alterado do temprano de la divergencia de las razas (9. o un examen de pesquizaje neonatal fundador. 25).Frecuencia de la mutación ∆F508 en pacientes venezolanos afectados con fibrosis quística 123 más características fenotípicas de FQ. vo (C-) representado por un individuo vene- Vol. gradiente observado se debe a un efecto nos. quienes estarían protegi. es apoyada (7q31) en el año 1985 y fue clonado en el por el fenómeno de desequilibrio de liga- año 1989 (11-14). durante el pe- mutaciones en ambos alelos del gen de FQ. muestra un gradiente noroeste-sureste con una frecuencia máxima. coli y Salmonella typhi (21-24) y esta pro. o identificación de dos mente hacia el noroccidente. ríodo neolítico. Se utilizó un control negati- prevalentes.130. sugiere que el toria de FQ en hermanos o primos herma. diagnóstico de FQ por la presencia de sig- dos de la acción deshidratante de las ente. 22. La segunda hipótesis.10). se estudiaron mentara la frecuencia de FQ fuera de Euro.

3 µL de obtenidos en el estudio molecular: 14. Se utilizaron los iniciadores CF1 5’. 5 vándose consanguinidad parental en 4.124 Morales-Machin y col. fía con película Polaroid instantánea 667. Estos iniciadores cons.2 µL de agua ultrapura.3’ donados por el Dr. nilalanina en la posición 508. También se usó un 12 min (28). durante 45 seg. desnaturalización prolongada a 94°C duran- sitivos.29% dNTP´s y 0. Los productos de la amplifica- control de sistema (CS) o mezcla de reac. a la cual se le extrajo el ácido rrespondientes a ambos fragmentos (95 y desoxirribonucleíco (ADN) genómico según 98 pb) y dos bandas de mayor tamaño. En 5 familias se recogió antece- mico en un volumen de 45 µL de reacción. lecular el ∅ 174. con la Se utilizó como marcador de peso mo- finalidad de conocer el probable origen geo. del exon 10 del gen de FQ. países latinoamericanos y Venezuela se va- rrera. El alelo normal se evidenció por la pre- Para el análisis molecular de la muta. El gráfico de la mutación. con cada reacción y se colocó en un controlador 2 determinaciones de Cl– en sudor. jo de Arias y col. El montaje de En 2 familias se estudiaron 2 hermanos la RCP se realizó con 200 ng de ADN genó. sin signos clínicos de FQ. meno. La detección de la mutación ∆F508 se los cuales son el resultado del apareamien- realizó a través de la amplificación de parte to de los 2 alelos. loró con el estadístico χ2. sencia de un fragmento de 98 pb y el alelo ción ∆F508 se le extrajo a cada individuo 5 mutado por un fragmento de 95 pb. 5 µL de En la Tabla I se observan los resultados cada iniciador. zolano. extensión a 72°C durante 1 tado con FQ heterocigoto compuesto para min y una extensión prolongada a 72°C de la mutación ∆F508. te 5 min y 30 ciclos de: desnaturalización a do con FQ homocigoto para la mutación 94°C durante 1 min. Inc. Monterrey.GTT GGC ATG GTT TGA TGA rencia de la frecuencia alélica entre varios CGC TTC.3’ lorada utilizando el estadístico d. dente de isonimia entre las parejas. 3 µL de MgCl2. afectados. se visualizó contó con el consentimiento informado de en un transiluminador de luz ultravioleta las familias estudiadas y la aprobación del (Hoefer Mod.. gel se coloreó con una solución de 5 Para la realización de este trabajo. se mg/mL de Bromuro de Etidio. UVTM-25) y se tomó fotogra- Comité de Bioética de la Unidad de Genéti. en gel de poliacrilamida al 12% en buffer Se registró el lugar de nacimiento de Tris-EDTA-Borato 1 x. versidad Autónoma de Nuevo León (UANL). 1. digerido con Hae III. térmico programable PTC-100 de la MJ Re- res de 60 mEq/L y con patrón molecular search. co- la técnica Fenol Sevag (27). México. los cuatro abuelos de los afectados. ca Médica de LUZ. de la Facultad de Medicina de la Uni. obser- conteniendo 25. RESULTADOS tan de 24 bases cada uno y limitan un seg- mento de 98 pb en cuyo interior se localiza Se estudiaron 28 familias y se analiza- el codón que codifica para el aminoácido fe. mediante la La diferencia observada entre el traba- RCP. con el siguiente programa: sin la mutación ∆F508 y dos controles po. ron molecularmente 30 afectados con FQ. rrespondientes a los llamados heteroduplex. sano.5 µL de Taq polimerasa por de los afectados con FQ resultaron homoci- Investigación Clínica 45(2): 2004 . alineamiento a 62°C ∆F508 y otro (C2+). En los mL de sangre periférica anticoagulada con heterocigotos se observaron dos bandas co- EDTA 5 mM. µL de solución amortiguadora 10X. (28) y este trabajo fue va- GTT TTC CTG GAT TAT GCC TGG CAC. uno (C1+) obtenido de un afecta. Hugo Ba. ción se separaron por electroforesis vertical ción sin ADN. obtenido de un afec. y la dife- y CF2 5’.

Colombia.5 No ∆F508 (X/X) 17 60.Frecuencia de la mutación ∆F508 en pacientes venezolanos afectados con fibrosis quística 125 TABLA I ESTUDIO MOLECULAR DE AFECTADOS CON FIBROSIS QUÍSTICA Genotipos Pacientes Alelos Alelos∆F508 Alelos No ∆F508 (X) n % (n) n % n % Homocigoto ∆F508/∆F508 4 14. la X representa un alelo no ∆F508/∆F508. ∆F508 provinieron de familias cuyos abue- El 73.79 Este trabajo gotos para el alelo ∆F508 (∆F508/∆F508). por lo cual se patrón molecular no se detectó la mutación asume la presencia de dos mutaciones no ∆F508. España.71% no se pudo evidenciar la puestos ∆F508/X y de los afectados en cuyo presencia de alelos ∆F508.2 41 Cuba 72 144 49 34 38 Colombia 24 48 17 35.21 TABLA II FRECUENCIA DE LA MUTACIÓN ∆F508 EN DIFERENTES PAÍSES Países Afectados Alelos Frecuencia Referencia N % Argentina 114 228 130 57 35 Brasil 190 380 180 47 37 México 10 20 13 59. ∆F508 o genotipo X/X. miento de los abuelos de los afectados.130. la cual venezolanos afectados con FQ en este tra. fue determinada a través del lugar de naci- bajo fue de 26.4 39 Venezuela 49 98 53 54 28 28 56 15 26.1 28 Chile 36 72 21 29.88% eran nacidos en Colom- ∆F508 (X).21% de los alelos restantes eran no los en un 55. lo- res de los homocigotos ∆F508 y en 7 de los calizados en 5 países: Venezuela.59% en Vene- En la Tabla II se observa la frecuencia zuela. La Fig. Los alelos no ∆F508.5 7 12.53% en Europa y 20. heterocigotos compuestos ∆F508 fue corro. 45(2): 121 .79%. bia.71 Total 28 100 56 15 26. ritariamente correspondieron a 79. 2 representa la procedencia La frecuencia del alelo ∆F508 en los probable de las mutaciones de FQ. Italia y Portugal. 23.29 8 8 14. mayo- latinoamericanos incluyendo Venezuela. de los heterocigotos com- ∆F508 y 60.71 34 0 0 34 60. Los 19 alelos borada la presencia de la mutaciòn ∆F508. En la Fig. 1 se muestra el patrón mole- 25% fueron heterocigotos compuestos cular de los afectados homocigotos ∆F508/X.29 0 0 Heterocigoto ∆F508/no ∆F508 7 25 14 7 12.27% fa- Vol. 2004 . En todos los progenito. en 2 alelos no se logró determinar el de la mutación ∆F508 en diferentes países lugar de origen.79 41 73.

C+2: Control positivo 2 (afectado con Fibrosis Quística. 80 17. A1: Patrón molecu- lar de afectado con Fibrosis Quística homocigoto ∆F508/∆F508. C+1: Control positivo 1 (afectado con Fibrosis Quística. (32. Heterocigoto com- puesto ∆F508/X). M: Marcador de peso molecular (∅174 digerido con Hae III). Investigación Clínica 45(2): 2004 . homocigoto ∆F508/∆F508). 1. M Cs C+1 C+2 C. Diagnóstico molecular de la mutación ∆F508 en afectados con Fibrosis Quística. 2. Bélgica y Francia 80% 0 Venezuela Colombia Europa (3. En Euro- pa esta frecuencia decrece progresivamente Fig. 45 a 55% en Italia Quística. milias con abuelos nacidos en Venezuela. las cuales son el resultado del apareamiento del fragmento de 95 y de 98 pb. A1 A2 A3 M 194pb Heteroduplex 118 pb 98pb 95pb Fig.126 Morales-Machin y col. 34). 30) y Norteamérica 75% (11). Varios estudios han demostrado 30 una variación considerable en la distribu- ción de la mutación ∆F508 en diferentes 20 poblaciones. Heteroduplex: Dos bandas de mayor tamaño.3 a 27% en Turquía (20. Lugar de nacimiento de los abuelos de hacia la zona del Mediterráneo siendo de 48 los pacientes afectados con Fibrosis a 50. 33) y 20. A3: Patrón molecular de afectado con Fibrosis Quística sin la mutación ∆F508 (X/X). C–: Control negativo (individuo sin Fibrosis Quística). Cs: Control de sistema (mezcla de reacción sin ADN).66% de Europa. 70 D F508 60 NO D F508 DISCUSIÓN 50 La mutación ∆F508 es la alteración 40 molecular más frecuente en los pacientes con FQ. Entre las poblaciones con ma- 10 yor frecuencia reportada se encuentran: Di- namarca 88% (19).6% en España (31). A2: Patrón molecular de afectado con Fibrosis Quística heterocigoto compuesto ∆F508/X.07% de Colombia y 3.

en el cual se analizaron princi. pudiendo esto reflejar a su vez ex- poblacional (38). estudio. es heterogénea. el sur de Europa y Co- se sabe tiene menor frecuencia de muta. que como tales como Africa. con una frecuencia por Arias y col para pacientes venezolanos. con la mutación ∆F508 en el gen de FQ.79% del alelo mericanas fue un estudio realizado en ∆F508 encontrada en la muestra de 56 cro- Argentina. el porcentaje de cos. el canos.2% (42). con el valor más bajo de 25% en el contribución de estos tres grupos puede ex- Departamento Bolívar y el más alto 66.Frecuencia de la mutación ∆F508 en pacientes venezolanos afectados con fibrosis quística 127 El rastreo de la mutación ∆F508 en La. En México la frecuencia del Estos resultados son sugerentes de que exis- alelo oscila entre 10% (37) y 50.001. La alta frecuencia de mutaciones de se por el proceso de mestizaje iniciado des. nos sugiere la aplicación de análi- nente. Según reportes de varios investiga. del alelo ∆F508 de 63% (35). venezolano y el 55.4% (40) y 48% (41) con variaciones en mestiza resultante de la mezcla racial entre los diferentes departamentos y regiones es. en la muestra analizada (36) p < 0. lombia e incluso mutaciones propias de la ción ∆F508 en relación con el Norte de Eu. Cuba y Co. en Colombia la La composición de la población vene- frecuencia a nivel nacional varía entre zolana. La tudiadas. En Chile la frecuencia mutación ∆F508. La mezcla con población negra tam- tinoamérica resulta de particular interés. que es posible que este alelo haya sido in.01. Brasil (38) y México (29) solo el 20. europeos del Sur. la frecuencia promedio reportada es ∆F508 dependiendo de la población que se de 47%. Con respecto a Chile.130. FQ No ∆F508 detectadas (68. La frecuencia de 26. de procedencia española e mutación ∆F508 varía sustancialmente en. una frecuencia de 34% (39). En Cuba se ha reportado tracción étnica diferencial según localidad.1% (29).42. Según el origen geográfico de los alelos En relación a estos países latinoameri. 45(2): 121 . 2004 . dieron asiento a distintas ondas migrato- El primer reporte de la frecuencia del rias. alelo ∆F508 para las comunidades latinoa. La variación de la frecuencia de esta abuelos venezolanos asciende a 79. se observa que la frecuencia en este cual fue determinado a través del lugar de estudio es significativamente baja si se nacimiento de los abuelos paternos y mater- compara con la reportada en Argentina nos de los afectados.59% de los abuelos de los pacien- p < 0. es de 29. italiana. en otro repor. con marcada heterogeneidad intra.88% eran de origen co- cativas en la distribución del alelo ∆F508 lombiano.33%) en este pués del descubrimiento de nuestro conti. quienes encuentran una frecuencia del ale- te más reciente se encontró una frecuencia lo ∆F508 de 54% (28) d: 39. seguidos de 23. mutación en Latinoamérica puede explicar. sis adicionales para determinar otras muta- dores la mayor fuente de mutaciones de FQ ciones ya reportadas y frecuentes en países provino del Sur de Europa (43). p < 0. región. mutaciones no ∆F508 (X). Vol. ropa.6% plicar las variaciones en la frecuencia de la en Santander (41). tes con la mutación ∆F508 eran de origen lombia no se observaron diferencias signifi. la frecuencia de la Sur de Europa.53% de origen del Como se observa. analice. En ten diferencias en la frecuencia del alelo Brasil. mosomas analizados en el presente estudio palmente descendientes de italianos y de difiere significativamente de la reportada otros grupos europeos.27%. Mientras que en los pacientes con tre diferentes grupos poblacionales y étni. así como el obviamente diferente ancestro troducido y diseminado a través de procesos indígena de las diferentes poblaciones que de migración y mestizaje. nativos y de negros. de 57% (36).01. ya bién debe influir en la variación observada. principalmente 35.

19:575-606. Lerer I. Cox T. 245: 1073-1080. Mornet E. Melmer G. Investigación Clínica 45(2): 2004 . Cole Genet 1991. Identifi- among Caucasians. trolitos del sudor en homocigotos y hete. Fibrosis quística de páncreas tations. 109-113. Sanjurjo. The diagnosis of Mut 2002. Nine muta. 116A: (mucoviscidosis): diagnóstico. Identification of the cystic fi- brosis gene: genetic analysis. Borgo G. Zsiga M. Science 1991. chloride channel by alteration of its anion Ronchetto P. Kerem B. Anderson M. Welsh M. Riordan J. Kerem B. Grzelczak Z. 1059-1065. 20: 153-263. Tsui I. Buchwald M. Smith 1993. characterization of complementary DNA. greso Venezolano de Genética 1994. Burns J. Defective intracellular transport and 7. Koch C. Frequency of the ∆F508 mutation on 11. A 8. Hidaka N. Ergon S. Rosenstein B. Graham C. Tsui L. Iannuzi M. the cystic fibrosis chromosomes in Den- Markiewicz D. V Con. Boué A. 40:218-224. Souza D. Tsui I. Chakravarti A. Risser D. Vázquez C. 505. Riordan J. Clin Genet 1991. Memorias de Avances en Genética. 1998. CFTR gene mutations. 44:48-49. Buchwald M. J 19. Sing C. Chou J. Paul S. Hill 12. Eds. Simon-Bouy B. Hum 10. Fine J. new genetic findings: Relationship of CFTR Am J Med Genet 1982. Lok S. 2001. Zsiga M. Identification of the cystic fibrosis gene: rocigotos de fibrosis quística. Cystic fibrosis: A worldwide análisis of medades metabólicas hereditarias. Re- distribución de la enfermedad. A. Am J Hum of cystic fibrosis. Cell 1990. Buchanan J. Devoto M. Clin Genet Souza D. mutations to genotype-phenotype manifes- 9. Santis G. 93: 364-368. 13. Macek M. 13:179. Gregory R. Collins F. markers on chromosome 7 for the cloning 2. En Pablo 262-267. tions in the cystic fibrosis (CF) gene ac. 3. Rozmahel R. Cutting G. Bellanti J. Kostuch M. Rommens J. Antonio Baldellou. 14. Abeliovich D. Collins F. Zielenski J. Frecuencia y chromosome walking and jumping. Mastella G. Biochemical and mo. White G. Am J Med Genet 2003. ulation groups indicates that a subset of Kennedy D. Experiencia diagnóstica con elec. Adv Hum M. O´Riordan C. Drumm M. Serre J. Buchwald M. REFERENCIAS Buchwald M. 4. Rolo M. Kulczycki L. Melmer G. Rozmahel R. Letter selectivity. mark. 253:202-205. Genet 1988. Science 1. Thompson S. Hum Genet 1994. Kerem B. erogeneity in cystic fibrosis. Identifica- count for 80% of the CF chromosomes in tion of the cystic fibrosis gene: cloning and French patients. Sferra T. Gregory R. Iannuzzi M. Erickson R. Hum Genet 1990. Demonstration that CFTR is a 6. Rozmahel R.128 Morales-Machin y col. Rommens J. (Resumen) search Articles 1989. Bobadilla J. Boué J. Johansen H. Zengerling S. cystic fibrosis mutations occur in common Riordan J. 50:1185-1194. N. Dean M. 16. The molecular biology of the cystic fibrosis gene. Cheng S. A. Paul S. Alon N. Curristin S. Rommens J. Howatt W. Analysis of four diverse pop. Kennedy D. 85:427-428. Heterogeneity in the processing of CFTR is the molecular basis severity of cystic fibrosis and the role of of most cystic fibrosis. 132: 589-595. Collins F. Phenotypic intrafamilial het. CFTR mutations-correlation with incidente Capitulo 47. Schwartz M. Dean M. to the editor. Ann Rev Med 1993. Diagnóstico y tratamiento de las enfer. Taillandier A. clinical perspective of cystic fibrosis and Phenotypic heterogeneity in cystic fibrosis. Plavsic N. Cabrini G. Farrel P. Brandt Pediatr. Markiewicz D. Kerem B. Tsui L. Science. 5. 245: 1066-1080. Am J Hum Genet cation and regional localization of DNA 1992. 17. Romeo G. 18. Marshall J.516. Rommens J. 44:133-144. Rosenstein B. A. J. 63:827-834. 15. 1989. cystic fibrosis: A consensus statement. data and application to screening. Mulligan R. Nash E. Smith A. Plavsic N. 43: 645-663. Cutting G. 1989. Drumm lecular genetics of cystic fibrosis.

Hum Genet 1990. sis of the pàncreas utilizing Pilocarpine by 36. cich S. Bienvenu T. Wine J. Gallegos M. tients. 2:1404. Giunta A. Hardcastle J. Rozov T. Manual del curso teórico J. Pediatr Res phic DNA haplotypes and ∆F508 deletion 1987. A test for concentra. Malik N. 1993. Cremonesi I. 545-549. Ludwig N. Pilotto R. 34. Colledge W. VI Congreso Venezolano de Genéti. Bosch A. 85: 420-421. 46:665-669. Segal E. patients. Gabriel S. Detec- Schmidtke J. 38. Parkler R. 22:271-276. Hyposecretion of 33. Genética mo. Evans M. Cantú J. Dalla . Barreiro C. Hum Mut 1993. Gibson L. Navas A. car- el 54% de los alelos patogénicos de CF en cinogénesis. y teratogénesis ambiental. Barrera H. Sánchez hereditarias. En: Reacción en cadena de la polime. 27. Grout M. Mercier B. Quinton P. Seia M. 30. Ferec C. Mueschenborn S. Rojas A. Behm J. 335:211. Nunes V. Spectrum of CFTR por la técnica de la Proteinasa K-Fenol Se. Iontoforesis. Brigman K. Grenoville M. mutation report from the cystic fibrosis 26. Rosario N. of 175 Italian cystic fibrosis patients. La mutación ∆F508 constituye no de Genética y 3ro. genetic analysis consortium. 107-109. Frequency of the ∆F508 de. Sangiulo F. Bol Méd guthrie cards. Nature 1988. 22. The cystic fibrosis genetic analysis con- the cystic fibrosis gene so frequent? Hum sortium. 266: Europe. 21. 1992. Romeo G. Gasparini P. Ruocco I. 1990. ca. Hum 23. Galietta LJ. Pediatrics 1959. 85:400-402. Phillips J. Arias S. Koprubasi F. Raskin S. Reis F. Lissens W. ∆F508 resistance to cholera toxin in the cystic fi. Fre- Hardcastle P. Tamizaje de 6 alelos en el gen de fibrosis práctico. Koller B. Ronchetto P. Savoia A. Chillon M. 409-410. Visich A. 10-12. tion of more than 94% cystic fibrosis muta- letion in the CFTR gene in Turkish cystic tions in a sample of Belgian population fibrosis patients. R. 49 familias Venezolanas estudiadas desde Puerto Vallarta. 47: 354-359. Marostica P. Accounting for quency of the DF508 mutation in a sample Cystic Fibrosis. Cyctic Fibrosis heterozygote Morral N. 2:16-20. Genet 1990. Nature 1988. Am J Med Genet 1993. Tanac R. DNA analysis of cystic fibrosis in lecular de la fibrosis quística: el alelo Brazil by direct PCR amplification from ∆F508 en familias mexicanas. 393:79-82. Fenu L. Rolo M. 25. 1978. 1989. Buhler E. Carniglia L. González N. Boucher 31.Frecuencia de la mutación ∆F508 en pacientes venezolanos afectados con fibrosis quística 129 20. Sociedad Venezolana de Genética. 131. Banting G. Hosp Infant Méx. 84: 1-5. 49: 335-343. Cardieri J. Gasparini P. multánea y dot blot reverso en una muestra 28. Why is 35. Ratcliff R. Aislamiento del ADN genómico Kaplan J. Estivill X.Piccola B. Pier G. Chertkoff L. Lewiston N. Giugliani R. 1994. de mutagénesis. Congreso latinoamerica- Ruggeri G. Gustin. mutations in Argentine cystic fibrosis pa- vag. Cooke R. Zaidi T. Am J Hum tion of electrolytes in sweat in cystic fibro. Baxter P. 2004 . Genet 1990. gene deletion in cystic fibrosis in Southern brosis mouse model. Wulf B. Molecular uses CFTR to enter intestinal epithelial genetic analysis of Turkish cystic fibrosis cells. Vnencak-Jones C. Audrezet M. Stutts M. 29. Bosch-Al-Jadooa N. Liebaers I. Devoto M. Stuhrmann M. Worldwide survey of the ∆F508 Genet. 51: 43-47. Barrera H. Russo S. Resúmenes de trabajos libres. Salmonella typhi Alkan M. México. 36:144-149. Taylor C. Universidad Autónoma de Nuevo quística (FQ) mediante amplificación si- León. Morán M. Science 1994. seleccionada. Bonduelle M. Casals T. Hum Genet 24. Lancet 1989. 45(2): 121 . 85: and identification of four novel mutations. Hagiwara G. Abreu F. Pignatti beta-adrenergically induced sweating in P. rasa en el diagnóstico de las enfermedades 37. Peinemann F. Flores S. Hundrieser J. 32. in 212 Italian CF families. Meluleni G. Goldhill J.130. Ann Gènèt 1993. Clinical Genetics 1997. Martínez R. IIdo. Hoffknecht N. 4. Vol. Novelli G. Polymor- cystic fibrosis heterozygotes. Vásquez R. 1995. Krishnamani M. Bremer S.

Orellana O. Naranjo Heredero L. Rojo M. three latin american countries. Aspillaga M. Gispert S. Myers A. Za. Am J Med Hum Genet 1994. Cystic fibrosis carrier screening I. Morales-Machin A. 22: 167-173. Plaza S. 39. 41. Restrepo C. Avendaño I. Borjas L. Collazo T. Bermudez A. Garavito P. Sánchez A.130 Morales-Machin y col. Gómez y. Am J Hum Genet 1995. rante I. Ramirez M. M. 94: 291-294. Magarino C. in hispanics. Li Z. Parra W. 56:544-547. Cala I. Aristizábal R. Rodas C. Prieto J. Suardiaz B. Rivero N. Gutierrez Méd Colomb 1997. Villalobos 42. Aristizábal G. Ucrós S. CFTR mu- Barrera-Saldaña H. 91:277-279. 45:55-57. Sánchez D. Bravo M. Acta 40. Genet 2000. Saa D. Escamilla J. ban cystic fibrosis families. Stand Gilbert F. Dueñas E. Rios J. Kaplan J. Frequency of Delta-F508 mu. M. Barón O. Delgado W. Estudios moleculares en pacien- 1995. Arzimanoglou I. Gómez M. CFTR mutations in tations in Chilean cystic fibrosis patients. Bienvenu T. Hum Hered Bernal J. tation and XV2C/KM19 haplotypes in Cu. Rojas A. Investigación Clínica 45(2): 2004 . Tuchman A. C. Largo I. Silva S. Chavez R. 43. Keyeux G. Correa A. tes colombianos con fibrosis quística. Pineda L. Anaya F.