Código: UPT-PIQ-01 Página 1 de 7

Fecha Rev.: 03/12/2010 Núm. Rev.: 0
Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle
Revisó: Academia de química
Aprobó: Mónica arrellano Córdova
“MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO”

1. Objetivo y Alcance
Determinación de oxigeno.
INTRODUCCIÓN.
Es una estimación de la cantidad de oxígeno que requiere una población microbiana
heterogénea para oxidar la materia orgánica de una muestra de agua en un periodo de 5 días.
El método se basa en medir el oxígeno consumido por una población microbiana en
condiciones en las que se ha inhibido los procesos fotosintéticos de producción de oxígeno en
condiciones que favorecen el desarrollo de los microrganismos.
1.1Objetivo. La práctica se encargara de establecer el método de análisis para la
determinación de la demanda bioquímica de oxigeno (DBO) en aguas naturales, residuales y
residuales tratadas.
1.2 Alcance
“Esta práctica aplica para su realización en el laboratorio del PE de Ingeniería Química de la
Universidad Politécnica de Tlaxcala”

2. Seguridad y declaraciones

2.1 Indicaciones de seguridad
1. Indicar en forma de listado las recomendaciones y aspectos de seguridad que se
deben verificar
2. Investigar las hojas de seguridad de los reactivos antes de utilizarlos en el
laboratorio.
3. Uso de mascarilla para el manejo de reactivos.
4. Es obligatorio el uso del equipo de protección personal.

3. Desarrollo de la práctica
3.1 Equipo necesario para el desarrollo de la práctica
Equipo de aireación con difusor

Incubador: Controlado por
termostato a 20ºC ± 1ºC.

Eliminar toda la luz para evitar
la posibilidad de producción
fotosintética de oxígeno
disuelto.

Balanza analítica con precisión
de 0,1 mg

Medidor de oxígeno disuelto

Material volumétrico

Balanza analítica

3.2 Sustancias o insumos
Documento Controlado

Fosfato mono básico de potasio (KH2PO4) Fosfato bibásico de potasio (K2HPO4) Fosfato dibásico de sodio heptahidratado (Na2HPO4•7H2O) Cloruro de amonio (NH4Cl) Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4•7H2O) Cloruro de calcio anhidro (CaCl2) Cloruro férrico hexahidratado (FeCl3•6H2O) Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) Hidróxido de sodio (NaOH) Sulfito de sodio (Na2SO3) 2-cloro-6 (triclorometil) piridina 5. Reactivo .: 03/12/2010 Núm.3 Fase 1 de la práctica: 3.12 Glucosa grado patrón primario (C6H12O6) Ácido glutámico grado patrón primario(C5H9NO4) Ácido clorhídrico (HCl) Acido nítrico (HNO3) 3.3. Documento Controlado .1 Preparación de soluciones a utilizar en la práctica. Reactivo Cant. Rev. Código: UPT-PIQ-01 Página 2 de 7 Fecha Rev.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” Cant.

75 g de fosfato di básico de potasio. Código: UPT-PIQ-01 Página 3 de 7 Fecha Rev. Rev. disolución de cloruro de calcio. Disolución de cloruro férrico. Disolución de sulfato de magnesio. Pesar aproximadamente 27. Pesar “ Estudiante” aproximadamente 8. Agregar aproximadamente 2. disolver en agua y diluir a 1 L. Antes de usar el agua de dilución debe ponerse a una temperatura aproximada de 20ºC. Colocar el volumen requerido de agua en un frasco y añadir por cada litro de agua1 mL de cada una de las siguientes disoluciones: disolución de sulfato de magnesio.0 g de hidróxido de sodio . disolver en 500 mL de agua y aforar a 1 L. libre de Documento Controlado . 2.: 03/12/2010 Núm. Pesar aproximadamente 1.8 mL de ácido sulfúrico concentrado a 500 mL de agua. mezclar bien y diluir hasta 1 L. El pH de la disolución debe ser de 7. Secar glucosa y ácido glutámico a 103ºC durante una hora.7 g de cloruro de amonio.0 mg de glucosa y 150. Disolución de cloruro de calcio.3 mg N/mL Fase 2 de la práctica: 3. diluir en agua y aforar a 1 L. 33. Disolución de sulfito de sodio. Disolución de cloruro de amonio. Esta disolución tiene una DBO5 de 198 mg/L 9.5 g de cloruro de calcio anhidro. La disolución contiene 0. disolver en agua y diluir a 1 L. Disolución de hidróxido de sodio (0. por lo que debe prepararse diariamente 8. 3.15 g de cloruro de amonio y disolver en 500 mL de agua. Pesar aproximadamente 22. Preparar inmediatamente antes de usarla. disolución de cloruro férrico y disolución amortiguadora de fosfatos. Disolución amortiguadora de fosfato. Preparar el agua de dilución diariamente.0 mg de ácido glutámico. Pesar aproximadamente y con precisión 150. Desechar el reactivo (o cualquiera de los siguientes reactivos) si hay algún signo de crecimiento biológico en el frasco de almacenamiento. Pesar aproximadamente 4. 2.2 con disolución de hidróxido de sodio y aforar a1 L.5 g de sulfato de magnesio heptahidratado. disolver en agua y diluir a 1 L. 6. Disolución patrón de glucosa-ácido glutámico. Pesar aproximadamente 0.1N). disolver en agua y diluir a 1 L.2 Preparación del agua para dilución. 1. Pesar aproximadamente 1. 5.4 g de Fosfato dibásico de sodio heptahidratado y 1. Analizar y almacenar el agua de la dilución.3.2. Esta disolución no es estable.575 g de sulfito de sodio. ajustar el pH a 7.25 g de cloruro férrico hexa hidratado. de tal forma que siempre tenga a mano agua de calidad garantizada.1N). 7.5 g de fosfato monobásico de potasio 21. Saturar con oxígeno aireando con aire filtrado.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” 1. Disolución de ácido sulfúrico (0. 4. disolver en agua y diluir a 1 L.

sembrar el agua de dilución. Tapar la botella tipo Winkler. La medición del OD debe ser realizada inmediatamente después de destapar la botella de Winkler. 4. 6.  Las concentraciones de OD se toman directamente de la lectura del instrumentó. Agregar 2 mL de la disolución alcalina de yoduro-acida. Posterior a la calibración del instrumento proceder a hacer la medición de la(s) muestra(s) siguiendo el procedimiento descrito a continuación. Si la muestra presenta alto contenido de biosidas como cloro o se sabe de su bajo contenido de materia orgánica. Código: UPT-PIQ-01 Página 4 de 7 Fecha Rev. grasas o cualquier sustancia que se adhiera a la membrana puede ser causa de baja respuesta en el electrodo.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” materia orgánica durante 1 h por lo menos. para evitar la absorción de oxígeno del aire por la muestra. Añadir 2 mL de ácido sulfúrico concentrado volver a. sodio 0. Los aceites. Continuar hasta la primera desaparición del color azul. 5.OD5 mg/L Documento Controlado . Determinación del OD inicial Método electrométrico La determinación del OD inicial se realiza por medio del método electrométrico con electrodo de membrana.3CÁLCULOS 1. agitar vigorosamente y dejar sedimentar el.3. Calcular la DBO5 Cuando no se utilice inóculo ni diluciones: DBO5 (mg/L) = ODi mg/L . Agitar uniformemente y leer directamente del instrumento la concentración de oxígeno. 3. Determinación del OD final Después de 5 días de incubación determinar el OD en las diluciones de la muestra. adicionar a la botella tipo Winkler que contiene la muestra (300 mL). en los controles y en los blancos.: 03/12/2010 Núm. Determinación de OD Para fijar el oxígeno.025 M agregando el almidón hasta el final de la titulación. Introducir el electrodo previamente lavado con agua a la muestra. precipitado. es necesario inocular la muestra. 2 mL de sulfato manganoso. tapar y mezclar por inversión hasta completa disolución del precipitado. Si se requiere. cuando se alcance un color amarillo pálido. 3. Rev. Titular 100 mL de la muestra con la disolución estándar de ti sulfato de.

Cuando se emplea una dilución: ODi mg/L . 2. Anexos Documento Controlado .1) Procedimientos relacionados “Anotar el título del o los procedimientos relacionados” En caso de no haber anotar “No existen procedimientos relacionados” 4.: 03/12/2010 Núm. y OD5 mg/L es el oxígeno disuelto al quinto día. Rev.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” donde: ODi mg/L es el oxígeno disuelto inicial.OD5 mg/L DBO5 (mg/L) = --------------------------------------------------------- % de dilución expresado en decimales 4. Código: UPT-PIQ-01 Página 5 de 7 Fecha Rev. Referencias 4.2) Documentos de referencia “Anotar los documentos que se toman como referencia” 5.

: 03/12/2010 Núm. Código: UPT-PIQ-01 Página 6 de 7 Fecha Rev.2 Formatos Documento Controlado .1 Formatos ACUSE DE ENTREGA DE MANUAL ELABORA: FECHA: SE ENTREGA MANUAL DE ASIGNATURA PARA: REVISION REVISION MODIFICACION APROBACION Otros ES TITULO: OBSERVACIONES: RECIBIO: FECHA: ACADEMIA DE INGENIERIA QUIMICA UPT-PIQ-01 F1 5. Rev.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” Anexos 5.

Rev. Código: UPT-PIQ-01 Página 7 de 7 Fecha Rev.: 0 Elaboró: María Elena Saldaña cuahutle Revisó: Academia de química Aprobó: Mónica arrellano Córdova “MEDICIÓN DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO” LISTA DE DISTRIBUCION SE ENTREGA UNA COPIA CONTROLADA DE MANUAL DE ASIGNATURA TITULO: SUSTITUYE AL DESTINO DEL DOCUMENTO: REVISION: RESGUARDO: ANTERIOR: No.2 Mapa de proceso del procedimiento. Documento Controlado . NOMBRE FECHA PUESTO FIRMA 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 OBSERVACIONES: ELABORA: ACADEMIA DE INGENIERIA QUÍMICA UPT-PIQ-01-F2 5.: 03/12/2010 Núm.