UNIVERSIDAD NACIONAL

JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERIA

“AÑO DE LA CONSOLIDACIÓN DEL MAR DE GRAU”

Practica nº 06

Tema : DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE GLUCOSA

ASIGNATURA : bioquímica

ESTUDIANTE : CÁRDENAS CHAMBILLA LEYDI MARYORI

CODIGO N° : 20115-122019

AÑO DE ESTUDIOS : 2do / CICLO: IV

DOCENTE : Dr. Roberto castellanos cabrera

TACNA, PERÚ-2017
PRACTICA Nº 06
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE GLUCOSA

MARCO TEÓRICO

La glucosa es un azúcar que es utilizada como fuente de energía para el organismo, esta se
incrementa en la sangre al ingerir alimentos diferentes al agua, lo que se consume desaparece de
la sangre mediante el empleo de una hormona reguladora producida por el páncreas conocida

pero inferiores a 60 mg/dL desencadena una hipoglicemia. El análisis de la glucosa permite medir la concentración de esta presente en la sangre para la prevención o diagnóstico de una diabetes mellitus o sacarina. cuando ocurre lo contrario se secreta otra hormona llamada glucagón que permite mantener los niveles de glucosa en sangre. El peróxido de hidrogeno formado reacciona bajo la catálisis de peroxidasa con fenol Objetivos:  Aprender la importancia de calcular con gran exactitud las cantidades de reactivos. entre 70y 110 mg/dL se consideran valores normales.  Determinar la absorbancia de glucosa mediante el uso del espectrofotómetro RESULTADOS Luego de preparar los tubos de ensayo con las cantidades indicadas en el cuadro y llevar a baño maría 90 ºC por 5 min. Seguidamente se procedió a medir la absorbancia donde se obtiene: CURVA DE CALIBRACION DE LA GLUCOSA CONCENTRACI ABSORBAN ON CIA . Su determinación se realiza después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa.como insulina. esta enfermedad se caracteriza por presentar valores superiores a 140 mg/dL.

5 0.95 0.9 0.3 0.433 0.7 R² = 0.9769374 múltiple 26 Coeficiente de determinación 0.4 0.194 0.8 1 CONCENTRACION DE GLUCOSA Estadísticas de la regresión Coeficiente de correlación 0. 0 0 0.6 0. 0.8 f(x) = 0.1 0 0 0 0.557 1 0.80385714 PENDIENTE 3 - INTERSECCION 0.56 ABSORBANCIA 575 nm 0.16x . DE.2 0.22 0.4 0.2 0.9544067 .19 0.865 DATOS OBTENIDOS 0.43 0.02376190 5 COEF.6 0.0.6 0.97693742 CORRELACION 6 1 0.87 0.18 0.8 0.2 0.22 0.4 0.

452330414 0.0% 95.08784 9.452330414 15 0.04776 0.0734990 Error típico 12 Observaciones 6 ANÁLISIS DE VARIANZA Promedio de Grados de Suma de los Valor crítico de libertad cuadrados cuadrados F F 83. ¿Cuánto tiempo se necesita para que el color se desarrolle completamente? Justifique su respuesta con una parcela de intensidad de color en función del tiempo . esto probablemente se deba a que no se midieron bien los compuestos debía contener cada tubo.023761 0.00079169 Residuos 4 0.473938833 Coeficien Error Estadístic Probabilid Inferior Superior Inferior Superior tes típico ot ad 95% 95% 95.171454 ón 46 8 0 2 02 9 0 0 Variable X 0.559951 1.05319 0.55995 1.005402105 Total 5 0.000791 1 1 81 0 16 6 6 26 CONCLUSIONES  Se puede concluir decidiendo que la línea de calibración no coincide con los puntos obtenidos del absorbancia.021608419 0. CUESTIONARIO 1. .446697 0.12393 0.803857 0.047762 0.150533 0.0% . - Intercepci 0.9430084 R^2 ajustado 18 0. . R^2 35 0.732255 Regresión 1 0.171454 0.678211 0.123930 0.

Enumerar las ventajas y desventajas de estos procedimientos. Vale decir. En la prueba de barfoed la reacción es positiva para la galactosa y ribosa. El aumento de la absorbancia en el segundo desarrollo de color es equivalente a la cantidad incremental de azúcar añadido. La razón por que dio negativo en la glucosa es sencilla porque esta pertenece al grupo aldehído como ya aviamos mencionado anterior mente y de esta forma no puede reaccionar con esta reacción. en tanto que el almidón es un disacárido que tienen menor poder de reductor al tener comprometido uno de sus carbonos anoméricos en el establecimiento del enlace glicosídico. basándose en la velocidad de reacción. que en presencia de un ácido fuerte producen rápidamente derivados furfúricos que reaccionan con un difenol llamado resorcina que está contenido en el reactivo de Seliwanoff. e. en los monosacáridos la formación del óxido cuproso es más rápido que en los disacáridos. porque al utilizar acetato cúprico y ácido acético con lo que solo los monosacáridos son capaces de reducir el cobre. 400-700 nm). Referencias Bibliográficas:  http://www.  REACCIÓN DE SELIWANOFF: Los carbohidratos se clasifican como cetosas o aldosas. formando así un precipitado rojo ladrillo. no reaccionan y por lo tanto dan un resultado negativo. que las cetosas en el carbono 2 tienen una función cetona.33 molar de acetato de cobre neutro en una solución de 1% de ácido acético.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/31%20INVERTASA%20ENSAYO.pdf . La fluctos da positiva porque pertenece al grupo cetona y como Esta prueba es específica para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro.metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así complejos coloreados rojo o rosado. Una técnica colorimétrica que emplea acido 3.  El tiempo en el cual actúa el DNS es de 5 min. Encuentra los procedimientos para al menos otros dos métodos comúnmente empleados para medir las concentraciones de azúcar. Obtener un espectro de absorción a través de longitudes de rango visible (i. Este reactivo se compone de una solución de 0. Justificar el uso de 575 nm seleccionados en el procedimiento.  LA PRUEBA DE BARFOED: Sirve para distinguir monosacáridos reductores de disacáridos reductores.5 dinitrosalicilico para la hidrolisis de polisacáridos presentes en una muestra.uco. 2. Determina las absorbancias por medio de un espectrofotómetro a 575 nm. 3.

 http://www.academia.com/jgnoejnnebir/determinacion-de-azucares-reductores-por-el-metodo-dns/ .edu/8255551/DETERMINACI%C3%93N_DE_AZ %C3%9ACARES_REDUCTORES_POR_LA_T%C3%89CNICA_DE_MILLER_DNS  https://prezi.