1 Síntesis de ATP

El modelo quimiosmótico propuesto por Peter Mitchell es el paradigma de este
mecanismo, la energía electroquímica inherente a la diferencia en la concentración de
protones y a la separación de cargas a través de la membrana mitocondrial interna
impulsa la síntesis de ATP a medida que los protones fluyen de manera pasiva de vuelta
hacia la matriz a través de un par asociado a la ATP sintasa.

• Mitchell utilizó el término quimiosmótico para describir las reacciones enzimáticas
en las que intervienen una reacción química y un proceso de transporte. En ésta
figura se muestra la definición operativa de ‘’acoplamiento’’

• La teoría quimiosmótica explica fácilmente la dependencia de la transferencia
electrónica de la síntesis de ATP en la mitocondria

• Cuando se rompen mitocondrias intactas mediante tratamiento con detergente o
corte mecánico, los fragmentos membranosos resultantes aún puede catalizar la
transferencia electrónica desde el succinato o el NADH al O 2 pero no hay síntesis
de ATP acoplada a esta respiración.

• Entre los desacopladores químicos se encuentra el 2,4-dinitrofenol DNP y el
carbonilcianuro p-trifluorometoxifenilhidrazona FCCP

• Predicción de la teoría quimiosmótica es que dado que el papel de la transferencia
de electrones en la síntesis mitocondrial de ATP es simplemente bombear
protones para crear el potencial electroquímico de la fuerza protón-motriz un
gradiente de protones creados artificialmente debería poder reemplazar la
transferencia de electrones como impulsor de la síntesis de ATP.

3 En la superficie de Fi el ATP está estabilizado en la reacción al ADP.

Los experimentos isotópicos con Fi (Proteína periférica membrana) purificado muestran

en la superficie de la enzima, la reacción
ADP + Pi ↔ ATP+ H 2 O facilmente reversible;

la energía libre de la síntesis de ATP es cercana a 0, cuando Fi hidroliza ATP en agua
marcada con 18º el Pi formado contiene, no un átomo de 18O, si no 3 o 4 átomos de 18O.
Esto indica que el enlace pirofosfato terminal del ATP se rompe y rehace repetidamente
antes de que el Pi abandone la superficie de la enzima con el Pi libre cada hidrólisis
pueden insertar 18O al azar en una de las 4 posiciones del Pi.

La ATP sintasa estabiliza el ATP respecto al ADP y al Pi uniendo el ATP más fuertemente
liberando la energía suficiente para contrarrestar el efecto de hacer ATP, ya que F0F1
unen ATP con una afinidad muy alta y el ADP con una afinidad mucho menor, debido a
una diferencia de energía de unión de unos 40 kJ/mol, misma energía que impulsa el
equilibrio a la formación de ATP.

se observa como el filamento marcado gira continuamente en una dirección. que se une muy fuertemente a la biotina. 19-26 Modelo de cambio de unión para la ATP sintasa.vacío se convierte en un sitio β -ADP. Paul Boyer propuso un mecanismo de catálisis rotacional en el que los tres sitios activos situados sobre Fi alternan en la catálisis de la síntesis de ATP. En otro experimento. que une débilmente ADP y Pi que difunden desde el disolvente. Probablemente el cilindro y el eje se mueven como una unidad. F1rediseñado por técnicas de ingenieríagenética para contener una serie de residuos His se une fuertemente a un portaobjetos de microscopio recubierto con un complejo de Ni. se une biotina covalentemente a una subunidad c de F0. La unión de biotina-avidina une ahora los filamentos de actina a la subunidad c. demostrando que el cilindro Fo de subunidades c rota. La fuerza protón-motriz hace que el eje central subunidad γ . se produce un salto discreto cada once marcos. mostrada como una flecha verde. La serie de micrografías de fluorescencia (leídas de izquierda a derecha) muestra la posición del filamento de actina a intervalos de 133 ms. En un momento determinado. que promueve la condensacion del ADP y Pi unidos para formar ATP. Observe que a medida que gira el filamento. el ATP no se puede liberar de uno de los sitios hasta que se fijen ADP y Pi al otro. y el sitio β . rote y que se ponga en contacto con cada par de subunidades αβ de forma sucesiva. requiere que al menos dos de los tres sitios catalíticos alternen en actividad. uno de estos sitios está en la conformación β -ATP (que une ATP fuertemente).6 La catálisis rotacional es la clave en el mecanismo de unión y cambio de la síntesis de ATP Sobre la base de detallados estudios cinéticos y de unión de las reacciones catalizadas por F0 F1. el sitio β -ADP se convierte en la conformación β -ATP. FIGURA 19-27 Rotación de F0y γ demostrada experimentalmente. tiene tres sitios de unión de nucleótidos de adenina no equivalentes. el filamento de actina se unió directamente sobre la subunidad y. El complejo F. Ello produce un cambio de conformación cooperativo en el que el sitio β -ATP se convierte en la conformación β -vacia y el ATP se disocia. uno por cada par de subunidades α y β .. está unida covalentemente a largos filamentos de actina marcados con una sonda fluorescente. La proteína avidina. . Cuando se aporta ATP como sustrato de la actividad ATPasa de F. un segundo está en la conformación) β -ADP (unióndébil) y un tercero está en la conformación β -vacía (unión muy débil). Este modelo. basado en observaciones experimentales. Fig.

el NADH resultante es oxidado por la cadena respiratoria. Lanzadera del glicerol 3-fosfato: Este medio alternativo para transportar equivalentes de reducción desde el citosol a la matriz mitocondrial actúa en el musculo esquelético y en el cerebro. Para que pueda salir de la vida el transportador de glutamato-aspartato. Paso 3. En la matriz el malato pasa dos equivalentes de reducción NAD+. Paso 4. el oxalacetato formado a partir del malato no puede pasar directamente al citosol. . Y por último.9 Sistemas de lanzadera envían indirectamente NADH citosólico a la mitocondria para su oxidación. en el citosol se regenera el oxalacetato. Primero debe transaminarse a aspartato. Para empezar tenemos que el NADH del citosol pasa dos equivalentes de reducción al oxalacetato. En el citosol. produciendo lo que viene siendo el malato por la acción de la malato deshidrogenasa citosólica. Paso 6. Paso 5. Lanzadera del malato-aspartato: Esta lanzadera para transportar equivalentes de reducción desde el NADH citosólico a la matriz mitocondrial se utiliza en hígado. con lo que se completa el ciclo. El malato formado atraviesa la membrana interna con la ayuda de malato a-cetoglutarato. Paso 2. Paso 1. la dihidroxiacetona fosfato acepta dos equivalentes de reducción del NADH en una reacción catalizada por la glicerol 3-fosfato del espacio intermembrana a la ubiquinona. riñón y corazón. Esta lanzadera no necesita de transporte de membrana.