Producción de bioetanol a partir de caña de azúcar mediante

fermentación con saccharomyces cerevisiae.

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Marcelo Valle, Maida Ramírez, Liliana Molina, Cesar Pinto, Leidys Marin, Haiger
Blanchar, Nelsy Cervantes, Wilman Gámez, Andrés Nieves, Greilis Quintero, Manuel
Reyes, Yisela Daza, María Díaz, Carlos Osorio, Yeiner Mindiola, Jelitza

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Programa de Ingeniería Agroindustrial, Facultad de Ingeniería Agroindustrial, Universidad Popular del Cesar,
Sede Sabanas, Valledupar, Cesar

RESUMEN.
Actualmente el biocombustible más importante es el alcohol carburante (Etanol), producto 100% renovable
obtenido a partir de cultivos bioenergéticos y biomasa, el cual es utilizado como oxigenante de la gasolina,
elevando su contenido en O2, lo que permite una mayor combustión en la misma disminuyendo las emisiones
contaminantes de hidrocarburos no oxidados completamente. Este alcohol se puede obtener de materias
primas como la caña de azúcar, almidón entre otros.
La materia prima a utilizar es la caña de azúcar, desarrollando procedimientos para efectuar la fermentación
alcohólica de azucares derivados del jugo de la misma, utilizando la levadura Saccharomyces Cerevisiae,
estableciendo condiciones iniciales de operación a pH de 4.5, Brix 16°, Temperatura de 30°C, 200 RPM, en
un intervalo de 46 horas; complementándolo con algunos sustratos.

Palabras Claves: Bioetanol, caña de azúcar, fermentación, Saccharomyces Cerevisiae, azucares reductores.

ABSTRACT
Currently the most important fuel is the fuel alcohol (ethanol), a product 100% renewable obtained from
energy crops and biomass, which is used as an oxygenate in gasoline, raising its O2 content, allowing greater
combustion in the same decreasing emissions of hydrocarbons not fully oxidized. This alcohol can be
obtained from raw materials such as sugarcane, starch and others.
The raw material used is sugar cane, devela procedures to effect the fermentation of sugar juice derivé from
the same, using the yeast Saccharomyces cerevisiae, establishing initial operating conditions at Ph 4.5, 19 °
Brix Temperature 30 ° C, 200 RPM in a 48 hour interval; complementing it with some substrates.

> 2�2�5�� + 2��2 Se tomaron 2Ml del jugo de caña y se adicionaron en un tubo de ensayo. 0. de panela en el mundo después de la India. para unos se perfila como un recurso energético Debido a que las materias primas usadas para la potencialmente sostenible que puede ofrecer obtención de bioetanol o biodiesel son empleados ventajas medioambientales y económicas a largo original y primordialmente en la producción de plazo en contraposición a los combustibles fósiles. MATERIALES Y MÉTODOS. con cualquier sustancia que tenga la forma Se elaboró la solución patrón de glucosa a las empírica de la glucosa. la baño de hielo a 4°C y transferimos el contenido de cerveza. (figura 1). más asimilable por las levaduras durante la glucosa y levadura (Saccharomyces cerevisiae).20. del productos agrícolas llamados agro-combustibles o rendimiento entre el combustible consumido y el biocombustibles ha sido impulsada recientemente generado en dicho proceso. no pudiendo obtenerse La caña de azúcar es una de las materias primas del petróleo (4).24. enseguida se agregaron 2 . Hexosa. 0.12.16. Colombia tuvo una producción de Etanol en los El jugo de caña fue comprado a una venta años de 2005-2015 (miles de litros) de 369. tales como el vino. originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de 2. Hidrolisis del jugo de caña. 0. finalmente con el espectrofotómetro leímos las absorbancias Figura 1. Curva patrón de glucosa.1991) 2.2.40. 0. Este etanol. plancha calefactora con agitador biológico de fermentación en ausencia de oxígeno magnético. El etanol es un combustible que puede producirse a partir de un gran número de plantas. Para la preparación del de azúcar comprende la extracción del jugo de sustrato se utilizó una jugo de caña. balanza analítica. con una La generación de combustibles a partir de variación. cada tubo a una celdilla por separado. por el sector energético los del sector alimentario.04.32.1. alcohol en forma de etanol (cuya fórmula química Posteriormente se tomaron 1 ml de cada solución es: CH3-CH2-OH).3. que sea una siguientes concentraciones: 0.08. sulfato de Azúcares) y su acondicionamiento para hacerlo magnesio-heptahidratado (MgSO4*7H20). �6�12�6 -------. 0. (CO2) en forma de gas y unas moléculas de ATP agregando a cada tubo 1 ml de reactivo de DNS. 1. autoclave. En cuanto a los equipos usados bioflo 2000 La fermentación alcohólica es un proceso fermenter. (Lt/HA/AÑO) (2). La diferencia radica en su materia prima más utilizada en países tropicales proceso de producción.36. Materiales y equipos. Colombia. conocido como alternativa a los altos precios del petróleo y como bioetanol. siendo este país el segundo productor 2. INTRODUCCION. alimentación humana. horno. peptona. 0. 2. 0. etc (3). Ecuación de fermentación alcohólica de de las muestras a 540nm (5). El bioetanol ha de ser tales como Brasil e India (1). en especial al sopesar los precios pagados de los alimentos. El llevaron a baño maría a una temperatura de 90ºC etanol resultante se emplea en la elaboración de por 5 minutos.722. esta alternativa plantea un mientras que para otros es el responsable de dilema para los productores frente al uso del grandes deforestaciones y del aumento del precio suelo.) para obtener como productos finales: un 0.5-dinitrosalicilico). obtenido desde biomasa. después se metabolismo celular energético anaeróbico. Con una tasa de rendimiento de 9000 ambulante de la ciudad de Valledupar. caña (rico en fosfato diácico de potasio (KH2PO4). sirve reactivo DNS (3.28. está sujeto a una fuerte polémica: la contaminación debida al dióxido de carbono. dióxido de carbono anterior y la agregamos a tubos de ensayo. el cava. Antes de la fermentación del jugo de caña se filtró El proceso de obtención de etanol a partir de caña y luego se pasteurizo. según el producto agrícola. la sacarosa. la fructosa. seguidamente enfriamos en un algunas bebidas alcohólicas. la sidra. 0. El bioetanol tiene las mismas características y Entre los cultivos bioenergéticos más usados para composición química que el etanol ya que se trata la producción de etanol la caña de azúcar es la del mismo compuesto.00. carbono (por regla general azúcares: como por Para la realización de la curva patrón se empleó el ejemplo la glucosa. es decir. fermentación. 0.P. con mayor rendimiento para la producción de bioetanol y es de especial relevancia para Colombia. glucosa (Ward. que consumen los propios microorganismos en su Se agitaron los tubos en el vortex. O.

glucosa 50g/Lt. utilizando una bomba de vacío para fermentación.1N. se adicionaron tres gotas de fenolftaleína al tubo. la reacción fermentativa se mantuvo a 30ºC. Vertido de jugo de caña para papel filtro. 2. 30°C y durante 3 horas. 2. 101ºC por 15 minutos. una excelente filtración Posteriormente se ajustó pH a 4. 2. en ausencia de Se utilizó jugo de caña de azúcar. luego se agregó NaOH al 25 % (p/v). Determinación de azucares reductores en el jugo de caña. La reacción se frenó en hielo. se bajó la temperatura a 30ºC.4. 2. Activación de la levadura 5%(v/v) de HCL al 37% y se agito nuevamente en saccharomyces cerevisiae.5 g/Lts. Activación de la levadura saccharomyces cerevisiae. hasta obtener un color ligeramente rosado. Para la determinación de azucares reductores. se realizó por duplicado adicionando a dos tubos de manera individual 1 ml del jugo diluido y se adicionaron a cada tubo de ensayo 1 ml de reactivo DNS. luego se agregó el 10% ( 0. Por último se neutralizo con una solución Imagen 1. El El erlenmeyer donde estaba el sustrato. Se vertió el jugo de caña esterilizado (1350ml) al bioreactor previamente esterilizado donde se le 2. constante a 200rpm. Se agitaron los tubos en el vortex. finalmente con el 2. se filtró el jugo con Imagen 1. a los que se les midieron absorbancia con el espectrofotómetro a 540nm.ml de una solución 50%(v/v) de HCL al 37%. . en la ciudad de Valledupar con condiciones iniciales de °Brix 16. Se tomaron muestras en los siguientes intervalos 0. Se llevaron los Erlenmeyer que contenían el jugo de caña herméticamente cerrados al autoclave donde se realizó la esterilización a 15 psi. levadura. Del jugo hidrolizado se tomaron 0. luego se mantuvo con agitación por 10 minutos. después se llevaron a baño maría a una temperatura de 90ºC por 5 minutos. seguidamente enfriamos en un baño de hielo a 4°C y transferimos el contenido de cada tubo a una celdilla por separado. 200rpm por 48 horas.MgSO4-7H20 0.350Lt) de jugo se vertió en tres Erlenmeyer de 500 mL cada uno para su posterior esterilización. el 90% (1. 34 y 46 horas. pH 5.7. KH2PO4 1 g/Lts. los °Brix se mantuvieron.9. 22.2 ml y se aforo a un volumen de 100 ml con agua destilada. 10. Tratamiento del jugo de caña de adiciono el sustrato en donde ya estaba activada la azúcar. Determinación de azucares reductores del jugo fermentado.6. comercializado oxígeno.5. el vortex (6).5 con HCl a 0. Posteriormente.3.15L) del volumen del jugo en un Erlenmeyer adicionándose a este un enriquecimiento de Pectona 5g/Lts.8. Esterilización. espectrofotómetro leímos las absorbancias de las muestras a 540nm. Fermentación. se inoculó tubo fue agitado en un vortex y calentado a 92 °C 2g/L de levadura.

12 0.014 0.9 0.4 0.6 0.6 R² = 0.1. 481 0.3 0. osa Destila 540nm en da ml 0.16 0.0 0. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.2: 100.2x .315 0. .5 0. Curva Patrón. luego se sumergieron en agua 4°C patrón.4 0.1 0.7 0.397 0. (Tabla 1).2 0 0 0. Concentraci Absorbanc 2. Seguidamente se hicieron las lecturas por duplicado. 3.10.28 0.99 0. Vol. 3.20 0.32 0.8 0.1 0.7 0. Evaluación del grado de Gluc Agua ón Estándar ia alcohol.5 0.156 0.701 1.40 0.36 0.8 f(x) = 2.0 0.para hacer la lectura se diluyo cada una de las Se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia muestras.0 0.3 0.806 Absorbancia (nm) 1 0.4 0.04 0. Se toma un 1ml de cada una de las diluciones y se añadió 1ml de DNS. por 5min. usando una relación 0. Datos para la construcción de la curva 90°C por 5min.24 0.3 0.00 0.2 0.6 0. Vol.0 1.11 0. llevándolas a baño de maría a Tabla 1. para cada una de las diluciones de glucosa.9 0.4 0.0.588 0.246 0.5 Concentracion (mg/mL) Grafica 1.2 0.0 0.1 0. Curva patrón de glucosa.

observada en la (gráfica 1) y el valor de las absorbancias que se encuentran en la (Tabla 2) se Muestras Tiempo °Brix llega a el valor de la concentración de azucares (Horas) reductores (g/l) de la muestra del jugo de caña en 1 0 15.60 la (Tabla 3).205 Grafica 2.3697969 3. Datos de absorbancia tomadas para la 3 22 12. No de 4 34 9. Tabla 4. Variación de los grados °Brix en 2 10 0.6985 Función del tiempo para el proceso Fermentativo.379 °brix 10 5 Tabla 3.3.4894799 Muestra Absorbancia (nm) 1 0. 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 No de Tiempo (horas) Muestra Tiempo Concentración de (Horas) Azucares Reductores en gr/l La curva refleja la disminución de los grados Brix a medida que aumenta el tiempo. . 2 10 183. 5 46 110.20 Tabla 2.25 (Horas) 540 1 0 0. promedio 0. 3 22 0.05 muestra.08 gL-1.3825 15 5 46 0. Esto es debido a 1 0 70. 3 22 244.1667729 Se calculó la concentración de azucares reductores sobre la curva de calibración y se obtuvo el resultado de 126. Determinación de Azucares Reductores en la Fermentación.1223244 3.968 20 4 34 0. 2 10 13.15 Muestra Tiempo Absorbancia 5 46 8.2. Variación de los grados °Brix en Utilizando la ecuación de la recta obtenida por la Función del tiempo para el proceso tendencia lineal de la curva de calibración Fermentativo.74870207 la conversión de los sustratos a Etanol. Determinación de azúcares reductores en jugo de caña.446 Abs.448 4 34 111. Datos de concentración de azucares reductores en g/l de las muestras de jugo de 0 caña de azúcar.450 2 0.

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