You are on page 1of 4

n 1883, Ringer a observat c, contraciile inimii izolate de broasc nceteaz atunci cnd a fost

eliminat CaCl2 din compoziia soluiei de meninere. Fenomenul e reversibil. Cincizeci de ani
mai trziu, Heilbrunn i Wiercinsky au demonstrat c injectarea CaCl2 direct n fibrele
nuchiului scheletic induce contracie i nici un alt cation nu provoac acest efect. Au
concluzionat c: Ca ar putea fi un activator al muchiului.
A.V. Hill, fondatorul fiziologiei musculare, a anticipat c activatorul muchiului trebuie s
provin dintr-o surs intern, dat fiind faptul c depolarizarea membranei este rapid urmat de
rspuns mecanic, de ex., un muchi scheletic poate fi activat n totalitate n mai puin de cteva
milisecunde. Difuzia unui activator de la suprafa spre interiorul fibrei ar necesita o durat de
timp mult mai mare.
n anul 1960 a fost demonstrat c reticulul sarcoplasmatic (SR) prezint activitate Ca2+-
ATP-azic. Aceasta presupune c membrana SR conine pompa de Ca2+ ce transport Ca2+din
sarcoplasm n lumenul SR cu consum de ATP. De altfel, s-a stabilit c SR conine cantiti mari
de sruri de Ca.
Experimentele lui Huxley i Taylor (1958). Aceti autori i-au pus ntrebarea, care poriune a
sarcomerului este implicat n activarea contraciei? Ei au montat o fibr izolat de broasc la
microscop, imersat n soluie de sruri fiziologic. S-a aplicat fibrei un impuls electric, cu
ajutorul unei pipete foarte subiri, pipet care a fost aplicat att la centrul benzii A, ct i al
benzii I. Banda I s-a scurtat cnd s-a aplicat pipeta pe banda I, n timp ce nu a fost semnalat nici
un rspuns atunci cnd a fost aplicat pe banda A (Fig. 33). S-a demonstrat mai trziu c n
muchiul broatei jonciunea tuburilor i SR sunt localizate n banda I, ceea ce susine conceptul
c stimularea electric a tuburilor din muchi se realizeaz cu Ca2+ din SR.
Reticulul sarcoplasmic (RS) este compartimentul de de depozitare a Ca2+ al muchiului. Acesta
formeaz o reea n sarcoplasm astfel nct fiecare fibr este nconjurat de reticul i n acest fel,
au acces direct la Ca2+. RS prezint prelungiri la cele dou capete formnd sacii terminali,
denumii cisterne. O unitate funcional este o triad, format din dou cisterne aparinnd la
dou RS adiacente i dintr-un tubul transvers (T) ntre ele (Fig. 34). Distana dintre cisternele
terminale i tuburile T este de 10-15 nm. Aceast deschiztur este cuprins de structurile
picior. n muchiul de broasc, tuburile transverse sunt localizate la nivelul liniei Z, iar n
muchiul mamiferelor sunt localizate la marginea benzilor A i I.
Fig. 35 este o schem a RS i jonciunii tuburilor T. Tuburile T se observ c sunt invaginate n
sarcolem. Structura picior acoper deschiztura dintre cisternele terminale i tuburile T. n
interiorul RS, Ca2+ este legat la calsechestrin, o protein care este ancorat la membrana
intern a cisternelor terminale. Dup stimularea muchiului, Ca2+ prsete cisternele terminale
i se leag la troponina C din sarcoplasm pentru a iniia procesul de contracie (v. i Fig. 37)

nainte de a fi stimulat muchiul, Ca2+ este descrcat continuu din cisternele terminale. Totui, o
parte din Ca2+ din sarcoplasm este recapturat prin zona longitudinal a RS; pompa de Ca2+
este mecanismul prin care se absoarbe Ca2+ i se realizeaz cu consum energetic susinut de
ATP. Odat ce Ca2+ a ajuns n interiorul tuburilor longitudinale, difuzeaz napoi n cisternele
terminale, unde va fi legat de calsechestrin, n zona de depozitare. O protein ce leag
calsechestrina de 30 kDa (Yamaguchi i Kasai, 1998) regleaz legarea Ca2+ la calsechestrin.
Cisterna terminal conine canalele de descrcare Ca2+ ale RS. Acest canal este format dintr-o
protein foarte mare (GM e de cca. 2.000.000) care umple ntreaga grosime a membranei RS i
iese n afara acesteia prin tuburile T. Domeniul hidrofil de ieirea canalului a fost vizualizat
prima dat cu ajutorul microscopului electronic ca structuri picior. Canalele de expulzie a Ca2+,
denumite i protein picior joncional, au fost identificate ca receptori pentru rianodin. Conin
un canal axial central i patru canaliculi radiali. Cnd canalul Ca2+ se deschide, Ca2+ prsete
RS, calsechestrina expulzeaz Ca2+ i o cantitate mai mare de Ca2+ este distribuit n
sarcoplasm.
Forma transduciei ntre tuburile T i jonciunea RS. Receptorii dihidropiridinei (DHP) din
tuburile T i canalele de expulzie a Ca2+ ale cisternelor terminale ale RS particip la transducie.
Receptorii DHP acioneaz ca senzori de tensiune; dac un potenial de aciune este propagat prin
tuburile T (v. Fig. 37), regiunile ionizate ale moleculelor receptorilor se propag rapid i
provoac modificri conformaionale n receptor. Canalele receptorilor DHP i de descrcare a
Ca2+sunt n direct opoziie la jonciune. Modificarea conformaional din receptorii DHP poate
conduce la deschiderea canalelor de descrcare a Ca2+. O serie de ipoteze au fost propuse pentru
conectarea micrii sarcinii msuratedin receptorii DHP cu descrcarea de Ca2+ din RS.

Cuplul excitaie-contracie
Cuplul excitaie-contracie (EC) descrie evenimentele determinate de stimularea electric a
muchiului pn la iniierea contraciei musculare. Durata descrcrii Ca2+ din RS n timpul
contraciei este de mare interes. Ashley i Ridgway (1968) au fost primii care au studiat aceast
interdependen. Ei au monitorizat modificrile concentraiei Ca2+ din timpul contraciei
musculare injectnd acvorin, o protein bioluminiscient ce leag Ca2+ n fibrele musculare.
Dup legarea Ca2+, acvuorinul emite lumin ce poate fi msurat; ca urmare a emisiei de
lumin, acvuorinul este inactivat i Ca2+ legat este eliberat.
O fibr muscular la care s-a injectat acvuorin a fost stimulat electric i s-a nregistrat primul
potenial de aciune. Fenomenul a fost urmat de emisie de lumin care reflect modificrile
concentraiei intracelulare a Ca2+. Cnd Ca2+ evideniat luminos atinge maximul de
luminozitate, tensiunea crete pn la o valoare maxim, moment n care semnalul luminos dat
de Ca2+ dispare (Fig. 36).
De obicei, indicatorii de fluorescen ai Ca2+, cum ar fi fura-2 i quin-2, sunt utilizai pentru
msurarea modificrilor concentraiilor intracelulare ale Ca2+ la nivel de nanomolar pn la
micromolar. Aceti indicatori sunt excitai la lungimi de und medii, cnd sunt fr Ca2+, apoi
cnd se formeaz legtura cu Ca2+. Msurnd raportul dintre intensitile fluorescenei la dou
lungimi de und excitatoare, se poate calcula concentraia Ca2+ liber. Descrcarea Ca2+ din RS,
atunci cnd s-a studiat pe muchiul de broasc prin microscopie cofocal a imaginii utiliznd
indicatori de fluorescen, fluo-3, s-a observat c descrcrile devin ridicate sub forma unei serii
de evenimente discontinue, finalizate printr-o scnteie. Nu este clar nc dac scnteile sunt
rezultatul deschiderii canalelor individual sau al deschiderii concertate a unui mnunchi de
canale (Rios .a., 1999).
Succesiunea evenimentelor. Dup stimularea muchiului, un potenial de aciune se propag
prin sarcolem, trece prin tuburile T i determin descrcarea Ca2+ din RS n sarcoplasm. Ca2+
se leag la TN i inhibiia combinrii actin-miozin ce predomin n rest va crete, contracia
fiind astfel asigurat. Ca2+ este veriga dintre excitaie i contracie. Fig. 37 arat c n muchiul
n repaus (A), membrana este negativ n interior i pozitiv la exterior (partea stng a figurii).
La muchiul scurtat (B), se observ inversarea polaritii dup stimulare i descrcare de Ca2+
din cisternele terminale ale RS ctre filamente (partea dreapt a figurii).
2.3. Subunitatea 3. Mecanismul biochimic al contraciei musculaturii
scheletice
Dei mecanismul prin care se realizeaz contracia nu e complet elucidat n toate detaliile
sale, a fost totui eleborat o teorie unitar, consistent, capabil s explice o serie de fenomene
ce nsoesc procesul contraciei, formulat de dou grupuri din Anglia, A.F. Huxley i
Niedergerke (1954), i H.E. Huxley i Hanson (1954): Teoria filamentelor glisante sau teoria
mecanismului glisant.

Experimente ulterioare au relevat faptul c n timpul contraciei, lungimea filamentelor subiri


constituite din actin i lungimea filamentelor groase ce conin miozin, rmn constante.Deci,
n timpul contraciei, lungimea sarcomerului i cea a benzii I se micoreaz, lungimea zonei de
suprapunere a filamentelor groase de cele subiri crete, lungimile filamentelor groase i subiri
rmn neschimbate. Prin urmare, filamentele trebuie s alunece unul peste cealalt.
Relaia lungime-tensiune. Interpretarea fiziologic a teoriei culisrii filamentelor a fost testat
prin msurarea tensiunii unei singure fibre musculare la diferite lungimi ale sarcomerului
(Gordon .a., 1966). Fig. 40 prezint datele obinute experimental. Tensiune maxim s-a
nregistrat la lungimea de repaus, ntre 2,0-2,25 , cnd toate punile au fost n regiunea de
suprapunere a filamentelor subiri i groase. Cnd fibra muscular s-a ntins astfel nct lungimea
sarcomerului s creasc de la 2,25 la 3,675 i consecutiv, numrul punilor din regiunea de
suprapunere a sczut de la maximum la zero, tensiunea a czut de la 100% la 0.
Punile sunt distribuite uniform de-a lungul filamentelor groase cu excepia unei nguste zone
goale din mijloc. Punile par a fi identice unt site-ul de interaciune dintre filamentele groase i
cele subiri. Tensiunea este suma algebric a tensiunilor produse n fiecare zon individual. n
timpul sau dup perioada de repaus, tensiunea e direct proporional cu numrul punilor din
regiunea de suprapunere a filamentelor groase i subiri.

Dup perioada de repaus, cnd filamentele subiri se ntlnesc la centrul benzii A sau ncep s
interacioneze cu punile din zonele opuse din dreptul lor, care au trecut de zona goal (din
mijlocul sarcomerului), tensiunea scade brusc.
Ciclul ncrucirii i relaia sa cu actomiozin ATP-aza. O schem a hidrolizei ATP-ului n
ciclul ncrucirii e prezentat n Fig. 41. Au loc urmtoarele faze importante:
- ATP disociaz actomiozina n actin i miozin; astfel filamentele subiri vor fi detaate
de pe cele groase, ATP se leag la capul miozinei din filamentele groase.
- ATP este hidrolizat de miozin; produsele ADP i Pi sunt legate la miozin.
Energiarezultat prin disocierea ATP-ului este acumulat n moleculele de miozin.
- Complexulmiozin.ADP.Pi este la un nivel energetic nalt; acesta este regimul
predominant pentru repaus.
Dup stimularea muchiului, inhibiia interaciunii actin-miozin impus de proteinele
reglatoare dispare i consecutive, miozina cu ADP i Pi legate se ataeaz la actin. Se crede c
unghiul de ataare a punilor este de 90o.
Interaciunea actin-miozin declaneaz eliberarea Pi i ADP de la capul miozinei, rezultate n
cursa util. Se crede c energia acumulat n moleculele de miozin conduce la o schimbare
conformaional a unghiului de nclinaie a punilor de legtur de la 90o la 45o. Aceast
nclinaie mpinge filamentul de actin aprox. 10 nm n direcia centrului sarcomerului, utiliznd
energia acumulat de miozin.
Cu un nou ATP, un alt ciclu poate ncepe i repetarea poate continua pn cnd mecanismul
reglator oprete interaciunea dintre actin i miozin. Dup cum se observ din Fig. 41, ATP este
necesar pentru faza 1, pentru detaarea miozinei de actin. n cazul unei depleii a ATP-ului,
ciclul nu poate fi nceput. Cnd actina i miozina sunt permanent legate n absena ATP, muchiul
devine rigid. Aceast stare este cunoscut sub numele de rigor mortis.