You are on page 1of 8

Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin

Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.

Relacin matemtica de la ley, en clculos simples:

1. Una disolucin de KMnO4 de concentracin 1,28 x 10-4 M, que presenta una transmitancia del 50% a 525
nm, cuando se midi, esta propiedad de la solucin, en una celda de 1 cm.

a. Para este valor de T, cuanto absorbe la solucin?

Sabemos que la relacin entre estos parmetros est definida por: A=-log T; entonces:

A=-log 0,5 = 0,3010

b. Qu concentracin debe tener la solucin para lograr una T=75%?.

Por la ley L-B: A= b c, si despejamos


log 0,75
= = = = 2.351,79 1 1
1 1,28 104

Y ahora despejamos c para calcular la concentracin:


log 0,75
= = 5,31 105
1 2.351,79 1 1

Para resolver:

2. Una muestra en una celda de 1 cm transmite 80% de una luz. La absortividad de la muestra es de 2,0 (gIL).
Cul es su concentracin?

3. Una solucin conteniendo 1 mg de Fe+3 como Fe(SCN) /100mL, transmite 70% de lo.
a. Cul es la absortividad molar de la solucin?
b. Cul ser la fraccin de luz o radiacin que no es transmitida por una solucin de Fe+3 cuatro veces
ms concentrada que la anterior?

4. Para un complejo Fe(SCN)3 cuya absortividad molar = 7 x 103, a 580nm. Calcular:


a. A, de una solucin 3,77 x 10-4M y L = 0,75cm.
b. T, de una solucin 2,85 x 10-4M y L = 0,75cm.
c. A, de una solucin que tiene la mitad de la transmitancia que la indicada en a, teniendo el mismo ancho
de el paso ptico.

5. Una solucin conteniendo 1 mg de Fe+3 como Fe(SCN) /100mL, transmite 70% de lo.
a. Cul es la absortividad molar de la solucin?
b. Cul ser la fraccin de luz o radiacin que no es transmitida por una solucin de Fe+3 cuatro veces
ms concentrada que la anterior?

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
Mtodos de calibracin

I. Patrn externo

1. El espectro continuo de la clorofila A, presenta dos bandas en la zona del visible, a 431 nm y a 663 nm.
Como la banda a 663nm tiene mayor y por lo tanto mayor absorbancia que la banda a 431 nm. Para
determinar el % de clorofila A en las algas de un lago. 0,2105 g un alga seca, se extrajo en 50 ml de
acetona al 90% por una 1 hora. La mezcla se filtr y se diluyo a 1.0 L, en un matraz aforado. La
absorbancia se midi a 663 nm en un espectrofotmetro, resultando un valor de 0,487.
Paralelamente se prepararon una serie de seis soluciones de concentracin conocida de clorofila A en
soluciones de acetona 90% se obtuvieron los siguientes datos:

Solucin Clorofila A en acetona 90% Absorbancia a 663 nm

1 1,80 x 10-6 M 0,144


2 3,60 x 10-6 M 0,259
3 5,40 x 10-6 M 0,442
4 7,20 x 10-6 M 0,564
5 9,00 x 10-6 M 0,717
6 1,08 x 10-5 M 0,843
Y su curva de calibracin:

Graficando estos datos y via regresin lineal, se obtiene la pendiente de la recta, m =7,81 x 104 L/mol.

Y si la longitud de trayectoria o ancho de la celda (b), fue de 1.00 cm, de la ecuacin obtenemos que:

= + = = 7,81 104 ( )1

Con este dato se puede operar por una de las siguientes de opciones:
a. Usando el valor de y de la ecuacin de la ley de Beer-Lambert calculamos la concentracin de clorofila a
concentracin de la solucin que se calcula:
0,487
= = = 6,24 106 = 6,24
7,81 104 1

b. Graficando los datos de A vs clorofila, y de este interpolando se obtiene directamente la concentracin de


clorofila con el valor de absorbancia de 0,487.

Las lneas de puntos en la grfica muestran esta interpolacin y el rendimiento de un valor aproximado c =
6,25 mol / L, este valor est de acuerdo con el valor obtenido anteriormente.

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
La masa de la clorofila un presente en las algas es:

1 893,5
6,25 = 5,58 5,58 104
1 106
y finalmente el % de clorofila:
5,58 10.3
0,2105
100 = 2,65 %

Como se demostr en este ejemplo, la espectrofotometra es una herramienta valiosa en anlisis cuantitativo.
En general, estos procedimientos de anlisis incluyen los siguientes pasos:

I. Una serie de soluciones con concentraciones conocidas se utilizan para medir la absorbancia del analito
y preparar una curva de calibracin (Beer-Lambert parcela ley).
II. La absorbancia se mide para la solucin de concentracin desconocida.
III. La concentracin desconocida se determina mediante el uso de la curva de calibracin.
Desarrollemos otro ejemplo:

2. Para los datos presentados a continuacin, seleccione el rango de concentracin la curva de calibracin
sigue la ley de Beer; (se us Cu(NO3)2, de alta pureza (99,9 % p/p).

Cu La grafica de todo el rango de concentracin de la tabla:,


A
mglitro se obtiene:
0,02 0,200 1,400
0,04 0,400 1,200 0,27; 1,259
Absorbancia

0,06 0,600 1,000


0,08 0,800 0,800
0,1 1,000 0,600
0,400
0,15 1,200
0,200
0,19 1,221
0,000
0,22 1,234 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3
0,25 1,250 ppm de Cu2+
0,27 1,259

En l se observa una desviacin de la ley de Beer.


Con estos datos:
a. Construira uno o dos graficas de calibracin.
b. Grafquelas y luego calcule la pendiente y el intercepto. Que parmetro analtico representa
cada uno de estos valores.
Conociendo de estudios previos que la concentracin de Cu debe estar alrededor de 0,05 ppm en la
muestras de agua y de 1,35 ppm en aceite lubricantes. Y asumiendo en ambos casos la matriz no presenta
interferencias.
c. Le sirven los datos para determinar concentraciones de Cu en muestras de aguas y/o de aceites
lubricantes?
d. Si no sirven para ambos tipos de muestras. En que rango de concentracin de Cu, deben ser
preparadas las curvas de calibracin, Es necesario diluir una o ambas muestras?

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
Solucin:

a. Si construimos dos curvas de calibracin, obtenemos

Primera zona Segunda zona


1,200 1,280
y = 10x - 7E-16

Absorbancia
Absorbancia

1,000 1,260
0,800 R = 1 1,240y = 0,4908x + 1,1268
0,600 1,220 R = 0,9991
0,400 1,200
0,200 1,180
0,000 0 0,1 0,2 0,3
0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12
ppm de Cu2+
ppm de Cu2+

El primer grafico (primera zona), muestra una relacin lineal entre A y Cu2+, con un valor de r=1,000
sigue la ley de Beer.
El segundo grafico (segunda zona), si bien muestra una relacin lineal entre A y Cu2+, con un valor de
r=0,9991; cuando analizamos la ecuacin de la recta:
y=0,4908 x+ 1,1268
y= mx + b con m= , como ya lo desarrollamos y b= 1,1268, valor que nos indica el valor de la
absorbancia cuando x=0, o sea cuando no hay analito en la solucin.
Del anlisis anterior la segunda zona no cumple la ley de Beer y por lo tanto no es usable para anlisis de
cuantificacin.

b. Para obtener los valores de intercepto y pendiente, solo usaremos el primer grfico:
y=10 x + 7 x 10-16 ; m= = 10 y b= 7 x 10-16 , valor de absorbancia cuando x=0, valor que
podemos indicar tan pequeo aproximarlo a cero.
c. El primer rango de concentraciones (grafico 1), es aplicable para cuantificar concentraciones de ion Cu en
aguas; pero no para ion Cu en aceites lubricantes.
d. Entre cero y 0,1 mg/ml de Cu2+. Esto nos indica que las muestras de aceite hay que diluirlas para que la
muestra analtica (la muestra que se mide), tenga una concentracin de Cu2+ en el rango indicado.
Si diluimos doscientas veces, tendremos por ejemplo: 1,35 1 = ?ppm x 20 ml

Para resolver:

1. Se pretende determinar el contenido en cadmio en un zumo de fruta comercial, eligindose como


tcnica de medida la Espectroscopia de Absorcin a una longitud de onda de 228.8 nm. El procedimiento
seguido fue el siguiente: se homogeniz el zumo mediante agitacin y se tomaron 5.00 ml que se
filtraron para retirar la pulpa. De la disolucin filtrada se tomaron 2.50 ml que se enrasaron a 25.0 ml en
un matraz aforado con HCl 1:1 (muestra analtica). Para la calibracin, se prepararon 5 disoluciones
patrn de cadmio partiendo de una disolucin estndar de 990 g ml.1, en cadmio tomando 20, 30, 40,
50 y 60l de dicho estndar y enrasando a 25.0 ml con HCl 1:1. Las seales de absorbancia obtenidas se
muestran en la siguiente tabla:

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
V patrn de Cd (l) Absorbancia
0 0,007
20 0,171
30 0,287
40 0,389
50 0,485
60 0,586
muestra 0,228

a. La curva de calibracin sigue la ley de Beer?. Cul es el valor de r?


b. Qu concentracin de cadmio expresada en ng/ml hay en el zumo de fruta?
2. Para analizar el la cantidad de protenas en un alimento, la protena se hizo reaccionar para formar un
producto coloreado, el cual se midi su absorbancia y usando los datos obtenidos para obtener una curva de
calibracin, segn:

ppm de protena Absorbancia


0 0
5,0 0,086
10,0 0,183
15,0 0,246
20,0 0,326
25,0 0,384
a. Construya la curva y con ella determine la ecuacin de la recta y el valor de , considerando que se us
una celda de 2,5 cm de ancho.
b. Usando la ecuacin anterior, calcule los ppm de protena de una muestra que registro un valor de
absorbancia 0,259.

II. Curva de Adicin Patrn mltiple

1. Los productos qumicos sensibles a la luz en la pelcula fotogrfica son los haluros de plata (es decir, los
compuestos inicos de plata y uno de los halgenos: flor, bromo, cloro y yodo). Por lo tanto, la plata a
menudo se extrae de residuos fotogrficos para la recuperacin comercial. La concentracin de ion
plata en una muestra de deshechos fotogrficos fue determinada por espectrometra de absorcin
atmica con el mtodo de adiciones estndar. Se obtuvieron los siguientes resultados:
Ag aadida: g/ml de solucin
0 5 10 15 20 25 30
de muestra original
Absorbancia 0,32 0,41 0,52 0,60 0,70 0,77 0,89

a. Grafique los datos y extrapolando calcule la masa de plata en la solucion con muestra que no se
le aadi estndar.
b. Determinar la concentracin de ion plata Ag+ en la muestra que no se le adiciono estndar.

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.

Solucin: 1
0,8

Absorbancia
0,6
0,4
y = 0,0186x + 0,3218
0,2
R = 0,9976
0
0 10 20 30 40
Masa del estndar aadido/ml de solucin en
g/ml

En el primer grafico vemos el punto de extrapolacin al eje x, en el que se obtiene un valor de 17,3 g/ml
de ion plata en la muestra original.

Otra alternativa es graficar en Excel y obtener la ecuacin de la recta y con ella obtener el valor de x
cuando no se aadio estandar (x=0; y =0,32, ver tabla); esto es valido porque se esta graficando A vs
cantidad de estndar aadido y la primera solucin no se le adicion estndar por lo que solo existe la
muestra original:
0,3218
As: = 0,0186 + 0,3218 = 0,186
= 17,3 /

Por ambas vias de solucin se llega al mismo valor de in plata

Para resolver:

2. La determinacin de la concentracin de fosfato en un polvo de lavado requiere primero la hidrlisis de


los componentes de tripolifosfato en el ion fosfato o sus formas protonadas. A continuacin, se puede
utilizar un mtodo colorimtrico cuantitativo en base a la absorcin del complejo amarillo del
vanadomolibdato fosfato y amonio. Se prepar una serie de soluciones estndar. A continuacin, el
complejo fue desarrollado en alcuotas de 10 ml de estas soluciones mediante la adicin de una alcuota
de 5,0 ml de una vanadomolibdato amonio. Las mediciones se realizaron en una celda de vidrio de 1,0
cm de paso de luz a 415 nm. Se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia.
solucin Conc. (mmol/L Absorbancia
1 0.00 0.0
2 0,1 0,15
3 0,2 0,28
4 0,3 0,40
5 0,4 0,55
6 0,5 0,70
a. Construya una curva de calibracin a partir de estos datos.
b. Mediante el mtodo de los mnimos cuadrados, derivar una ecuacin que relaciona la
absorbancia a la concentracin de fosfato.
c. Una solucin desconocida obtenido por hidrlisis de 1 g de detergente tratada de forma
idntica dio una absorbancia de 0,45. Determinar la concentracin de fosfato de esta solucin.

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
3. Para la determinacin de aluminio en muestras de agua de ro se aplic el mtodo de adicin de
estndar. Cada solucin, se prepar segn se detalla en la tabla y a cada una se le midi la seal,
obteniendo los resultados siguientes:

ml de ml de V total de
Absorbancia
muestra estndar Solucin
10 0 25 0,250

10 2 25 0,505

10 4 25 0,755

10 6 25 1,000

Determine la concentracin de Al en la muestra a partir de:

a. Una grfica de la seal medida, en funcin de la concentracin del estndar, (considere el


efecto de dilucin).
b. Una grfica de la seal medida, en funcin del volumen del estndar aadido.

4. Para la determinacin de aluminio en muestras de agua de ro se aplic el mtodo de adicin de


estndar. Cada solucin, se prepar segn se detalla en la tabla y a cada una se le midi la seal,
obteniendo los resultados siguientes:
ml de muestra ml de S V total de Solucin Seal

10 0 25 5,0

10 2 25 10,1

10 4 25 15,1

10 6 25 20,0

Determine la concentracin de Al en la muestra a partir de:

c. Una grfica de la seal medida, en funcin de la concentracin del estndar, (considere el efecto de
dilucin).
d. Una grfica de la seal medida, en funcin del volumen del estndar aadido.

5. Los siguientes datos se obtuvieron mediante la adicin de la misma cantidad de patrn interno a un
volumen fijo de soluciones que contienen cantidades conocidas de analito y a las muestras de la
concentracin de analito desconocida. Utilice Excel para determinar el porcentaje de analito en lo
desconocido y su incertidumbre.

Prof. M. Anglica Francos C.


Problemas de ley de Lambert-Beer y cuantificacin
Analtica QUI-1105 de analitos, usando mtodos de calibracin.
% de analito Seal del analito Seal del estndar interno

0.05 18.3 50.5


0.10 48.1 64.1
0.15 63.4 56.2
0.20 63.2 42.7
0.25 98.7 53.8
Muestra 58.9 49.4

6. Para la determinacin de aluminio en muestras de agua de ro se aplic el mtodo de adicin de estndar.


Cada solucin, se prepar segn se detalla en la tabla y a cada una se le midi la seal, obteniendo los
resultados siguientes:
ml de muestra ml de S V total de Solucin Seal

10 0 25 5,0

10 2 25 10,1

10 4 25 15,1

10 6 25 20,0

Determine la concentracin de Al en la muestra a partir de:

e. Una grfica de la seal medida, en funcin de la concentracin del estndar, (considere el efecto de
dilucin).
f. Una grfica de la seal medida, en funcin del volumen del estndar aadido.

7. Los siguientes datos se obtuvieron mediante la adicin de la misma cantidad de patrn interno a un
volumen fijo de soluciones que contienen cantidades conocidas de analito y a las muestras de la
concentracin de analito desconocida. Utilice Excel para determinar el porcentaje de analito en lo
desconocido y su incertidumbre.
% de analito Seal del analito Seal del estndar interno

0.05 18.3 50.5


0.10 48.1 64.1
0.15 63.4 56.2
0.20 63.2 42.7
0.25 98.7 53.8
Muestra 58.9 49.4

Prof. M. Anglica Francos C.