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USMP FMH SEMINARIO DE

BIOLOGA CELULAR Y
MOLECULAR 2016 SOLUCIONARIO

CSAR AMANZO
UNIVERSIDAD SAN MARTN DE PORRES - FACULTAD DE MEDICINA
USMP FMH Seminario de Biologa Celular y Molecular 2016 Solucionario

SEMANA 2
SEMINARIO I-1
ORIGEN Y EVOLUCION DE LAS CLULAS

1. Cules fueron las probables condiciones de la tierra y su atmsfera hace


aproximadamente 3,500 millones de aos atrs? Cmo relaciona este hecho con el
experimento de Miller y Urey?

Se ha aceptado desde hace mucho tiempo que la atmsfera de principios del Arcaico era anxica
y probablemente dbilmente reductora, y dominado por especies oxidantes tales como el CO 2,
N2, CO y H2O, con pequeas cantidades de H2, que se habra escapado rpidamente al espacio
exterior. La reduccin de los gases suministrados por la desgasificacin volcnica, como CH 4 y
NH3, habra sido destruida por radiacin UV (fotodisociacin), y pueden haber subsistido slo a
nivel local alrededor de los respiraderos hidrotermales.

La comprensin del origen de la vida fue en gran parte especulativa hasta que la dcada de 1920,
cuando Oparin y Haldane, trabajando independientemente, propusieron un modelo terico para
la "evolucin qumica". El modelo Oparin- Haldane sugiri que, bajo las condiciones fuertemente
reductoras, como se teoriza que fue el estado de la atmsfera de la tierra primitiva (hace 4,0 y
3,5 mil millones aos), las molculas inorgnicas podran formar espontneamente molculas
orgnicas (azcares simples y aminocidos).
En 1953, Stanley Miller, junto con su asesor de
postgrado Harold Urey, prueba esta hiptesis
mediante la construccin de un aparato que
simulaba la tierra primitiva de Oparin-Haldane.
Cuando una mezcla de gases en base a las
predicciones de la atmsfera primitiva fue
calentada y recibi una carga elctrica, se
formaron compuestos orgnicos. Por lo tanto, el
experimento de Miller-Urey demostr cmo
algunas molculas biolgicas, tales como
aminocidos simples, podran haber surgido
abiticamente, a travs de procesos no
biolgicos, en las condiciones que se consideran
similares a los de la tierra primitiva. Este
experimento proporcion la estructura para la
investigacin posterior sobre el origen de la vida.
A pesar de muchas revisiones y adiciones, el
escenario de Oparin-Haldane sigue siendo parte
del modelo en uso hoy en da. El experimento de
Miller-Urey es simplemente una parte del
programa experimental producido por este paradigma.
(http://ncse.com/files/pub/creationism/icons/gishlick_icons1.pdf)

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El experimento se hizo con el fin probar que la sntesis de compuestos orgnicos era
espontnea, a partir de molculas sencillas que se encontraban en la Tierra primigenia.
Partieron de la idea de Alexander Oparin y John Haldane, que dicha Tierra estaba compuesta
principalmente de NH3 (amoniaco), CH4 (metano), H2 (dihidrgeno), siendo estos tres la
composicin de la atmsfera original; H 2O (agua), siendo esta la que simulaba los ocanos.

El experimento consista en someter una mezcla de los compuestos nombrados


anteriormente a descargas elctricas de 60.000 voltios, dando como resultado, la formacin
de una serie de molculas orgnicas, entre la que destacan cido actico, ADP-Glucosa, y
los aminocidos: glicina, alanina, cido glutmico y cido asprtico; usados por las clulas
como los pilares bsicos para sintetizar sus protenas y que componen la cadena de ADN.
http://teoriaevolucin.blogspot.pe/2015/08/experimento-de-stanley-miller-y-harold.html

A
Production of Amino Acids Under Possible Primitive Earth Conditions Stanley L. Miller SCIENCE, Vol. 117 May. 15, 1953

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2. La controversia entre los partidarios de las teoras heterotrficas y teoras autotrficas


sobre el origen de los primeros organismos vivos contina vigente. Usted por qu
teora se inclina?, explique sus razones.

TEORA HETEROTRFICA TEORA AUTOTRFICA


La qumica prebitica es la prolongacin en En lugar de vincular la qumica csmica
nuestro planeta de la qumica csmica. con la bioqumica, los defensores de un
La posibilidad de producir fcilmente en origen de la vida autotrfico tratan de
condiciones prebiticas aminocidos vincular la bioqumica con la geoqumica.
simples, purinas, azcares, cidos grasos, y Wachterhauser sugiri especficamente
otras molculas orgnicas pequeas que un metabolismo primitivo evolucion
esenciales para la vida moderna es en la superficie de los minerales de pirita
demasiado sorprendente para ser fortuita. desde la reduccin de dixido de carbono
Origen de la vida lento (acumulacin usando sulfuro de hidrgeno H2S sobre
gradual) y fro (esencial para la estabilidad a sulfuro ferroso (FeS) como el agente
largo plazo de la materia orgnica). reductor.
El experimento de Miller y Urey se enmarca Las molculas orgnicas cargadas
dentro de esta teora: negativamente sintetizados por esta
En el experimento se emple agua (H2O), reaccin habran sido estabilizadas
metano (CH4), amoniaco (NH3) e hidrgeno mediante la unin a la superficie de pirita
(H2). Estas sustancias qumicas fueron cargada positivamente, formando de esta
selladas dentro de un conjunto estril de manera una red de dos dimensiones. El
tubos y recipientes de cristal conectados nmero y la diversidad de estas molculas
entre s en circuito cerrado. habran crecido autocatalticamente in situ
Uno de los recipientes estaba medio lleno por la fijacin de carbono, que conduce a
de agua lquida y otro contena un par de la auto-organizacin de las reacciones
electrodos. qumicas cclicas, produciendo ms y ms
Se calent el agua lquida para que se productos elaborados.
evaporase, y los electrodos emitan Russell y Hall (1997) sugirieron que la
descargas elctricas a otros recipientes, que fijacin de carbono primero se produjo
atravesaban el vapor de agua y los gases dentro de las redes minerales
de matraz, y que simulaban los rayos que tridimensionales formadas por la
se produciran en una atmsfera de Tierra precipitacin de monosulfuro de hierro de
primitiva. la mezcla de fluido hidrotermal rico en
Despus, la atmsfera del experimento se sulfuro y el agua que contiene hierro de un
enfri de modo que el vapor de agua ocano acidificado, el sistema sera
condensa de nuevo y las gotas volviesen al impulsado energticamente por una
primer recipiente, que se volva a calentar gradiente de pH geoqumica de origen
en un ciclo continuo, creando de esta natural.
manera, diferentes compuestos orgnicos. A diferencia de los partidarios del origen
Oparin saba que la Tierra careca de heterotrfico, por lo general a favor de un
oxgeno antes de la vida. origen caliente de la vida, la reaccin
La evidencia est en que cuando se extraen inicial est impulsada por una fuente de
rocas con hierro, este no est en forma de energa geotrmica.
xido sino en su forma metlica. La estabilidad de las molculas orgnicas
ya no es un problema, ya que estos
habran sido de corta duracin. Por el
contrario, la alta temperatura se supone
que ha aumentado la velocidad de las
reacciones en la superficie de los
minerales o dentro de estructuras
minerales.

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Tanto las teoras heterotrficas y teoras autotrficas se enfrentan con el problema de


finalizar con un protometabolismo que pueda proporcionar la energa y monmeros
para establecer el mundo del ARN.

(The origin of modern terrestrial life. HFSP Journal Vol. 1, September 2007)

3. Qu puede sealar del origen y evolucin temprana de la vida, hasta el surgimiento del
ltimo Ancestro Comn Universal? Resuma.

El origen de la vida implica la formacin de las biomolculas a partir de molculas inorgnicas y


bajo las condiciones de la tierra primitiva.
De acuerdo al enfoque heterotrfico (caldo primordial), en un ambiente fuertemente
reductor. Los primeros "sistemas vivos" habran surgido luego de la complejizacin gradual
del caldo prebitico.
De acuerdo al enfoque autotrfico en la superficie de minerales de pirita desde la reduccin
de dixido de carbono usando sulfuro de hidrgeno H 2S sobre sulfuro ferroso (FeS) como el
agente reductor. Las molculas orgnicas cargadas negativamente sintetizados por esta
reaccin habran sido estabilizadas mediante la unin a superficies de pirita cargadas
positivamente, formando de esta manera una red de dos dimensiones. El nmero y la
diversidad de estas molculas habran crecido autocatalticamente in situ por la fijacin de
carbono, que conduce a la auto-organizacin de las reacciones qumicas cclicas,
produciendo ms y ms productos elaborados.
La forma de transferir la energa adquirida ya sea desde el exterior (teora heterotrfica) o de las
reacciones en los fluidos en un entorno hidrotermal (teora autotrfica) para la posterior elaboracin
del sistema dentro de protoclulas.
Tanto las teoras heterotrficas y teoras autotrficas se enfrentan con el problema de finalizar con
un protometabolismo que pueda proporcionar la energa y monmeros para establecer el mundo
ARN.
La teora heterotrfica considera las primeras molculas orgnicas se producen por
reacciones totalmente independientes del metabolismo moderno y que el metabolismo del
mundo de ARN habra sido completamente borrado por el surgimiento de un nuevo
metabolismo basado en protenas-enzimas.
La teora autotrfica suelen directamente vincular el protometabolismo a las protenas
modernas (hipertermfilas) a travs de la coevolucin de ARN y pptidos.
Las ribozimas por s mismas sustituyen la funcin de los catalizadores ms antiguos el metabolismo
de clulas ARN podra haber sido construida sobre la ms antiguo protometabolismo, especialmente
si el mundo ARN se origin por s mismo en el marco de la evolucin darwiniana entre las protoclulas
en competencia.
La formacin de las protoclulas" fue probablemente esencial para la evolucin de replicadores
ARN y el establecimiento de cualquier protometabolismo impulsado por energa sostenida por:
1. El mantenimiento de un conjunto de replicadores ARN y sus correspondientes ARNs
genmicos (es decir, slo catalizadores encerrados por membranas pueden beneficiarse
de su propia reaccin).
2. Exclusin de potenciales competidores ARN parsitos externos,
3. La prevencin de la dilucin de las molculas y macromolculas.
Formacin de vesculas lipdicas a partir de cidos grasos o, mejor an steres de glicerol de cidos
grasos, con capacidad de someterse a varios ciclos de crecimiento y divisin. Los catalizadores
minerales son atrapados en el interior de vesculas durante este proceso, lo que sugiere que las
interacciones entre cidos grasos y minerales de la Tierra primitiva pueden haber producido el
encierro de diversas matrices de partculas minerales con propiedades catalticas.
Las vesculas que encapsulan ARN crecen preferentemente por captura de lpidos a expensas de
vesculas vacas. Esto se explica por el aumento de la presin osmtica en el interior de vesculas

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que contienen ARN debido a que los contra iones seleccionan las cargas negativas de ARN. Esta
presin osmtica es contrarrestada por la tensin de la membrana, conduciendo a la captacin de
cidos grasos. Este mecanismo podra haber favorecido que las vesculas que contienen molculas
cargadas, tales como el fosfato de ribosa y/o polifosfato, sobre los que contienen molculas neutras.
La encapsulacin de replicadores ARN habra inducido una forma primitiva de competencia entre las
primeras clulas ARN, ya que los que contienen replicadores ms eficientes habran crecido ms
rpido. En estos escenarios, la seleccin natural entre las protoclulas en competencia en la
ausencia de sistemas genticos podra haber sido impulsado originalmente por las caractersticas
fsico-qumicas de los primeros sistemas Por ltimo, el crecimiento de vesculas de membrana genera
un gradiente de pH transmembrana, lo que sugiere que algunas de las caractersticas universales de
los seres vivos podran tener su origen en las caractersticas fsico-qumicas fundamentales.
El ATP (adenosintrifosfato) y otros NTPs (nucletidos trifosfatos), incluyendo muchas bases
modificadas que no se incluyeron posteriormente en el ARN, probablemente se originaron por
primera vez como transportadores de energa en el protometabolismo y como coenzimas
catalizadores de pptidos antes del origen del RNA por s mismo.
Se discute actualmente como las ribozimas pudieron iniciar la reaccin autocataltica y evitarse la
degradacin de los productos, por la gran inestabilidad del ARN.
Durante la evolucin una polimerasa eficiente no slo fue capaz de replicarse a s mismo, sino
tambin logro replicar plantillas de catalizadores que producen ya sea ribozimas (o pptidos) tiles
para el metabolismo de la clula ARN.
Se generaron varios tipos diferentes de sntesis de pptidos catalizados por ribozima, pero slo uno
sobrevivi, llevando al aparato de traduccin moderna con ARNt y ribosomas
Se supone que el cdigo gentico primitivo era ms simple (por ejemplo, con un codn de dos
nucletidos y menos aminocidos) y se expandi en el curso de la evolucin.
Se supone que los mecanismos de transferencia de genes estaban en funcionamiento muy
tempranamente, lo que permiti el intercambio gentico entre clulas de ARN-protena. Este
perodo termin con el establecimiento de los modernos superfamilias de protenas por las diferentes
combinaciones de plegamiento proteico.
El ADN se origin probablemente mucho ms tarde que el ARN, es decir, en el mundo
ribonucleoprotena (tambin llamado "la segunda edad del mundo ARN)
Se supone generalmente que el ADN reemplaz al ARN, ya que es ms estable y se puede replicar
ms fielmente
Se ha propuesto que el ADN primero se origin en los virus como una forma modificada de
ARN para proteger el material gentico viral contra los mecanismos de defensa de la clula
infectada.
Los genomas celulares de ARN seran entonces transformados ms tarde en genomas de
ADN siguiendo el reclutamiento por las clulas de ARN de las enzimas virales para producir
y replicar el ADN, o por la toma de control de las clulas de ARN por virus de ADN que vivan
en un estado de portador
El principio bsico de la divisin celular y la herencia de membrana implica que todas las clulas
modernas se derivan de una sola clula.
Se establece claramente que LUCA (ltimo ancestro comn universal, Last Universal
Common Ancestor, LUCA) no debe confundirse con la primera clula, pero era el producto de
un largo perodo de evolucin. Siendo el ltimo medio de que LUCA fue precedida por una larga
sucesin de antiguos "antepasados".
No hay un consenso sobre la naturaleza de LUCA. Para algunos autores LUCA era un organismo
muy simple, incluso, posiblemente, acelular, mientras que otros consideran que LUCA fue una
bacteria de tipo moderna o incluso un eucariota primitiva con un ncleo.
La identificacin de un conjunto de genes presentes en Archaea, Bacteria y Eukarya ha dado lugar
a la definicin de un contenido mnimo de genes de LUCA.
El conjunto mnimo de protenas incluye un ncleo de protenas ribosomales, aminoacil ARNt
sintetasas y factores de traduccin (tanto para la iniciacin y la elongacin), de tal manera que el
aparato de traduccin ya estaba bien establecido en LUCA.

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4. Averige el significado de los siguientes trminos y explique sus caractersticas


principales:
Reino monera.
Incluye a las procariotas: Eubacterias y Archeabacterais.
En la clasificacin de los Dominios, aparecen dos grupos de Procariotas: Dominio Archaea,
que engloba a los organismos ms antiguos del Planeta. Dominio Bacteria, en el que se
encuentran la gran mayora de los organismos bacterianos actuales, tambin conocidos con
el nombre de Eubacterias.
Son organismos unicelulares y se encuentran en todos los ecosistemas.
Carecen de ncleo y tampoco presentan organelas en el citoplasma.
Reproduccin asexual: fisin binaria. Presentan mecanismos de transferencia de genes.
Presentan metabolismos muy variados que les permiten ocupar, prcticamente, todos los
hbitats terrestres y, aunque algunas producen graves enfermedades, su papel ecolgico
como descomponedores es fundamental: al degradar los cadveres y restos orgnicos de
otros seres vivos, liberan compuestos inorgnicos utilizables por los organismos auttrofos.
Este reciclado de nutrientes es bsico para que la vida siga existiendo.
Probablemente son los primeros organismos que surgieron en la tierra. Existen rastros fsiles
de hace 3.800 millones de aos.

Reino Protista.
Los protistas son organismos eucariotas que no pueden ser clasificadas como una planta,
animal, o un hongo.
En su mayora son unicelulares, pero algunos, como las algas, son pluricelulares. Las algas,
o "algas marinas", son protistas pluricelulares que proporciona alimentos, hbitat, y el oxgeno
para numerosos ecosistemas submarinos.
Los protistas mayormente unicelulares y por lo general se desplazan mediante cilios, flagelos,
o por mecanismos ameboides. Usualmente no tienen pared celular, aunque algunas formas
pueden tenerla.
Tienen orgnulos incluyendo un ncleo y pueden tener cloroplastos, por lo que algunos sern
verdes y otros no lo sern.
Son pequeos, aunque muchos son lo suficientemente grandes como para ser reconocido en
un microscopio de diseccin o incluso con una lupa.
Los nutrientes son adquiridos mediante la fotosntesis, la ingestin de otros organismos, o
ambos.
A pesar de que se asemejan a una planta las algas, no se clasifica en el Reino Plantae porque
carece de la complejidad celular de las clulas vegetales.
Los protistas poseen clulas eucariotas y no disponen de rganos o de tejidos diferenciados.

Reino Fungi.

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Los hongos son pluricelulares, con una pared celular, orgnulos, e incluyen un ncleo, pero
no tienen cloroplastos.
No tienen mecanismos de locomocin.
Los hongos varan en tamao desde tamaos microscpicos hasta muy grandes y visibles
sin microscopio.
Los nutrientes son adquiridos por absorcin. En su mayor parte, los hongos adquieren
nutrientes a partir de material en descomposicin.

Reino Plantae.
Son pluricelulares y la mayora no se mueven, aunque los gametos de algunas plantas se
desplazan mediante cilios o flagelos.
Tienen organelas incluyendo ncleo y cloroplastos.
Las paredes celulares estn presentes.
Los nutrientes son adquiridos por la fotosntesis (todos ellos requieren luz solar).

Reino Animal.
Los animales son pluricelulares, y se mueven con la ayuda de los cilios, flagelos, o los
rganos musculares a base de protenas contrctiles.
Tienen orgnulos, incluyendo un ncleo, pero no tienen cloroplastos ni paredes celulares.
Adquieren nutrientes por ingestin.
Reproduccin sexual

CLASIFICACIN DE LOS DOMINIOS CELULARES:

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Bacteria, Archea y Eukarya

Virus.
Partcula consistente en cido nucleico (ARN o ADN) encerrado en una cubierta proteica,
capaz de replicarse dentro de una clula husped y propagarse de clula a clula.
Prin.
Los priones son partculas infecciosas proteicas, que se forma cuando las protenas normales
se plieguen incorrectamente y aglutinan. El trmino prin (de las primeras letras de partcula
infecciosa proteica) fue propuesta (Prusiner 1982) para distinguir el patgeno infeccioso de
virus o viroides. Los priones se definieron como "pequeas partculas infecciosas
proteinceas que se resisten a la inactivacin por procedimientos que modifican los cidos
nucleicos".
Los priones ('partculas infecciosas proteinceas') son los agentes infecciosos no
convencionales que consisten en una molcula proteca prinica mal plegada (PrP); en su
estado mal plegado, las molculas se agregan entre s e imponen su estructura anmala en
las molculas de PrP benignos. Los priones actan como plantillas de corrupcin (semillas)
que incitan una reaccin en cadena de mal plegamiento y la agregacin de PrP. Los priones
crecen, se fragmentan y propagan, perturbando la funcin del sistema nervioso y en ltima
instancia causan la muerte del individuo afectado.
La protena prin anormal (PrPsc) tiene una abundancia de hojas beta.

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5. Microbiota humana: En que consiste. Investigue sobre la microbiota de la leche humana.


Microbiota: El colectivo de microorganismos que residen en o sobre un organismo.
Microbioma: Los genomas combinados de las distintas especies de una microbiota definida.
La leche materna es un fluido biolgico complejo que proporciona todos los requisitos
nutricionales para los primeros meses de vida, pero, adems, educa al sistema inmune del
lactante y confiere proteccin contra los patgenos. Estos efectos son el resultado de la accin
sinrgica de muchas molculas bioactivas, tales como citocinas, componentes celulares,
oligosacridos o lpidos. Aunque es bien conocido que la leche materna es rica en oligosacridos,
slo recientemente se ha aceptado que la leche humana tambin constituye una fuente de
bacterias comensales y probiticas que parece tener un papel importante en la colonizacin del
intestino y la modulacin del intestino infantil.
En los ltimos aos, los anlisis de la diversidad bacteriana de la leche humana han revelado
que este fluido biolgico es una fuente importante de estafilococos, estreptococos, bifidobacterias

UNA "MINI-CLAVE" PARA LOS CINCO REINOS


Supongamos que usted ve algo en el agua dulce que sin duda parece estar viviendo. Cmo se puede comenzar a determinar lo
que es? Aqu hay una clave (no del todo perfecta) que usted puede utilizar para ayudar a determinar el reino al que pertenece.

1. Es verde o tiene partes verdes?


S - ir a 2

No - ir a 3

2. Podra ser una planta o un protista, o una bacteria azul-verde. Asegrese de que el verde es realmente parte del organismo,
sin embargo. Un animal podra haber comido algo verde, por ejemplo.
Unicelular? ir a 6

Multicelular? Plantae. Busque paredes celulares, estructura interna. En el microscopio compuesto podra ser capaz de
ver los cloroplastos.

3. Podra ser un monera (bacterias), protistas, hongos, o animal.


Unicelular - ir a 4

Multicelulares (Busque estructura compleja o ramificacin, apndices) ir a 5

4. Podra ser un monera o un protista?. Puedes ver algn detalle dentro de la clula?
S - Protista. Usted debe ser capaz de ver al menos un ncleo y/o vacuola contrctil, y una forma definida. El movimiento
debe estar presente, con cilios, flagelos, o el movimiento ameboide. Los cilios o flagelos pueden ser difciles de ver.

No - Monera. En caso de ser bastante pequeo. Puede ser en forma de guiones cortos (varillas), pequeos puntos (cocos),
o curvado o espiral en forma. El ms grande de ellos que se encuentra comnmente en el agua dulce se llama Spirillum
volutans. Es en forma de espiral, y puede ser casi un milmetro de largo. Excepto por Spirillum, es muy difcil ver mneras
excepto en un microscopio compuesto con una iluminacin especial.

5. Animalia u hongos. Se est moviendo?


S - Animalia. El movimiento puede ser mediante cilios, flagelos, o complejo, que implica que las partes se contraen. La
estructura debe ser compleja. La actividad de alimentacin puede ser obvia.

No - Hongo. En caso de ser ramificado, filamentos incoloros. Puede tener algn tipo de cuerpo fructfero (las setas es un
tipo de hongo, no se olvide). Por lo general, unido a alguna pieza de materia en descomposicin - pueden formar un
recubrimiento difuso en o alrededor de un objeto. En el agua, algunas infecciones bacterianas de los peces y otros animales
y bacterias de cido lctico vivos para el intestino del beb. A diferencia de otras bacterias, stas
pueden ser confundidos con un hongo.
parecen ser adaptados de forma nica para residir en el tracto digestivo humano e interactuar
6. Lo ms probable Protista. Si consiste en largos filamentos verdosos, no ramificados sin estructura aparente en el interior, son
con nosotros en simbiosis desde el momento en que nacemos. Tradicionalmente se ha
bacterias azul-verde (a veces errneamente llamadas algas verde-azules), un Monera. La mayora de los protistas verdes son
considerado que selasmueven
flagelados, es decir, bacterias presentes
rpidamente en la leche
con un movimiento materna
en espiral. A menos que fueron
usted adquiridas
consiga que se por mera
detengan,
realmente no se puede ver los flagelos. Tenga cuidado con las colonias de protistas, sin embargo, como Volvox, que forma una
contaminacin de la piel
bola giratoria de clulas verdes. No se deje engaar pensando que es una planta.

Recuerde, cuanto ms se observa el organismo, mayor seguridad de que pueda ser. Muchos seres vivos tienen etapas que se
parecen a los miembros de otro Reino.
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(http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/studies/invertebrates/kingdoms.html)
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Sin embargo, se ha encontrado que los lactobacilos y enterococos aislados presentes en la leche
humana son genotpicamente diferente de los aislados en la piel dentro del mismo husped.
Adems, varios estudios sugieren la existencia de una microbiota mamaria durante la ltima
etapa del embarazo y la lactancia. Bacterias en vivo desde el intestino materno podran colonizar
la glndula mamaria a travs de una ruta endgena (la llamada va entero-mamaria), con clulas
dendrticas y macrfagos maternos.

(Adv Nutr 2014;5:779784.)

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SEMANA 3
SEMINARIO I-2
COMPOSICIN Y ORGANIZACIN MOLECULAR DE LA MEMBRANA CELULAR.

1. Las propiedades de una bicapa lipdica se determinan por las estructuras


de sus molculas de lpidos. Predecir las propiedades de las bicapas
lipdicas que resultaran si lo siguiente fuera cierto:

Las molculas de lpidos constituyen aproximadamente el 50% de la masa de la


mayora de las membranas de clulas animales, casi la totalidad restante son
protenas. Existen aproximadamente 5 106 molculas de lpidos en una zona
1m x 1 m de bicapa lipdica, o aproximadamente 109 molculas de lpidos en
la membrana plasmtica de una pequea clula animal.
(Molecular biology of the cell / Bruce Alberts, et. al. Sixth edition. 2015)
Las clulas se separan del mundo exterior mediante una estructura delgada y
frgil denominada membrana plasmtica que tiene un ancho de slo 5 a 10 m.
(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments / Gerald Karp, 7th Edition, 2013)

A. Los fosfolpidos slo tienen una cadena de hidrocarburo en lugar de dos.


Con una sola cola removida, el dimetro de la cabeza polar sera mucho mayor
que el de la cadena de hidrocarburos restante; por lo tanto, la forma de la
molcula se asemejara a un cono ms que un cilindro y tendera a formar
micelas en lugar de bicapas.

B. Las cadenas de hidrocarburos son ms cortas que lo normal, digamos de


unos 10 tomos de carbono de longitud.
Las cadenas de acilo graso son hidrocarburos hidrofbicos no ramificados
aproximadamente 16 a 22 carbonos de longitud.
(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments / Gerald Karp, 7th Edition, 2013)

Las bicapas formadas por lpidos con colas hidrocarbonadas cortas seran
mucho ms fluidas. Las bicapas tambin seran menos estables, ya que las
colas ms cortas seran menos hidrofbicas y, por lo tanto, las fuerzas que
impulsan la formacin de la bicapa se reduciran.
C. Todas las cadenas de hidrocarburos son saturadas.
Las bicapas formadas por lpidos con colas hidrocarbonadas saturadas seran
mucho menos fluidas. Considerando que una bicapa lipdica normal tiene la
viscosidad del aceite de oliva, una bicapa de lpidos hecho con colas de
hidrocarburos saturados tendra la consistencia de la grasa de tocino.

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D. Todas las cadenas de hidrocarburos son insaturados.


Las bicapas formadas por lpidos con colas de hidrocarburos insaturados seran
mucho ms fluidas. Adems, debido a que los lpidos estaran empaquetados
menos compactamente, habra ms espacios entre ellos y la bicapa sera ms
permeable a pequeas molculas solubles en agua.

E. La bicapa contiene una mezcla de dos tipos de molculas lipdicas, uno


con dos colas de hidrocarburos saturados y el otro con dos colas de
hidrocarburos insaturados.
Si los lpidos con dos colas
hidrocarbonadas saturadas fueron
completamente entre-mezclados con
lpidos que llevan dos colas de
hidrocarburos insaturados, la fluidez de
la membrana sera aproximadamente
normal. En tales bicapas, las molculas
de lpidos saturados tienden a
agregarse entre s, ya que pueden
empaquetarse con mucho ms fuerza y por lo
tanto formar parches con la fluidez muy
reducida. La bicapa por lo tanto, no tendra
propiedades uniformes sobre su superficie.

La mayora de los fosfolpidos de las


membranas normales tienen una cadena
saturada y otra cadena hidrocarbonada
insaturada para que no tiendan a separarse; Sin
embargo, los esfingolpidos a menudo tienen
cadenas largas de hidrocarburos saturados y
tienden a formar micro-dominios, denominados
balsas lipdicas (lipid rafts).
Las balsas lipdicas son ricas en esfingocina y colesterol. "Las balsas lipdicas
son dominios pequeos (10 a 200 m), heterogneos, de gran dinamismo,
enriquecidos de esterol y esfingolpidos que compartimentalizan los procesos
celulares. Las balsas pequeas a veces pueden ser estabilizadas para formar
plataformas ms grandes a travs de interacciones protena-protena y de las
interacciones lpido-protena "

(J Lipid Res. 2009 Apr; 50(Suppl): S323S328.)

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Cada molcula lipdica se une covalentemente a travs del


tomo de carbono final de una de sus cadenas de
hidrocarburos a una molcula de lpido en la monocapa
opuesta.
Si las colas hidrocarbonadas de los lpidos en las dos monocapas estn
covalentemente ligados, la bicapa tendra propiedades prcticamente
invariables. Cada molcula lipdica podra ahora abarcar toda la membrana,
con cada uno de sus dos grupos de cabeza expuestos en cada superficie.
Tales molculas de lpidos se encuentran realmente en las membranas de
bacterias termfilas, que pueden vivir a temperaturas prximas a la de la
ebullicin del agua. Las bicapas no se separan a temperaturas elevadas, como
las bicapas usuales; porque, las dos monocapas estn unidas covalentemente
en una sola membrana.

2. Debido a que caracterstica una porina (una protena presente en


bacterias y en la membrana externa mitocondrial) puede atravesar la
membrana celular? Seale adems la diferencia con una protena que
atraviesa la membrana con un hlice alfa.

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Aunque la hlice- es de lejos la forma ms comn


en el que una cadena polipeptdica atraviesa una
bicapa lipdica, las cadenas polipeptdicas de
algunas protenas transmembrana atraviesan la
bicapa lipdica como una hoja que se enrolla en
un cilindro, formando una estructura semejante a un
barril denominado barril .

Las porinas tienen 8 a 22


hojas- antiparalelas que
forman la estructura en
barril beta. Las cadenas
laterales de aminocidos
se orientan hacia el interior
del barril, y por lo tanto
revisten el canal acuoso
siendo en su mayora
hidroflicos, mientras que
en la parte externa del
barril, se orientan hacia el ncleo hidrofbico de la bicapa lipdica, regiones
exclusivamente hidrofbicas.
El ejemplo ms notable de una estructura de -barril (varias hoja-beta anti-paralelas
formando un cilindro) se encuentra en las protenas porinas, que forman poros grandes,
llenos de agua en las membranas externas de las bacterias, mitocondrias y cloroplastos.

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En una protena transmembrana con una estructura alfa-hlice, debido a que el agua
est ausente en el interior de la bicapa, los tomos que forman la columna vertebral son
impulsados para formar enlaces de hidrgeno uno con otro en el interior de la hlice.
Los enlaces de hidrgeno se maximizan si la forma
de la cadena del polipptido es el de una hlice alfa
regular, y as la gran mayora de los segmentos que
atraviesan la membrana son cadenas
polipeptdicas organizadas como hlices-alfa.
En estas hlices-alfa transmembrana, las cadenas
laterales hidrofbicas estn orientadas hacia la
parte externa de la hlice, donde entran en contacto
con las colas de los lpidos hidrofbicos, mientras
que los tomos en el interior de la hlice forman

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puentes de hidrgeno constituyendo el esqueleto polipeptdico y es una regin


hidroflica.

3. Ordene las molculas en la siguiente lista en funcin de su capacidad para


difundir a travs de una bicapa lipdica, empezando por la que atraviesa la
bicapa con mayor facilidad. Explique su orden.
a) Ca2++
b) CO2
c) Etanol
d) Glucosa
e) ARN
f) H2O

El orden es: CO2 (pequea y no polar) > etanol (pequea y ligeramente polar) >
H2O (pequea y polar) > glucosa (grande y polar) > Ca2 + (pequea y cargada) >
ARN (muy grande y muy cargada). Esta lista muestra claramente las dos
propiedades bsicas que rigen la capacidad de las molculas para difundir a
travs de una bicapa lipdica: el tamao (pequeo > grande) y la polaridad (no
polar > polar > cargado).

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Cuatro mecanismos bsicos por los que las molculas del soluto se
mueven a travs de membranas. Los tamaos relativos de las letras
indican las direcciones de los gradientes de concentracin.
(A) La difusin simple a travs de la bicapa, que procede siempre de mayor a
menor concentracin.
(B) La difusin simple a travs de un canal acuoso formado dentro de una
protena de membrana o un grupo de tales protenas. Al igual que en una, el
movimiento es siempre hacia abajo un gradiente de concentracin.
(C) La difusin facilitada en el que las molculas del soluto se unen
especficamente a una protena transportadora de membrana (un transporte
facilitado). Al igual que en A y B, el movimiento es siempre de mayor a menor
concentracin.
(D) El transporte activo por medio de una protena transportadora con un sitio
de unin especfico que se somete a un cambio en la afinidad impulsado con
energa liberada por un proceso exergnico, tal como la hidrlisis de ATP. El
movimiento se desarrolla en contra de un gradiente de concentracin.
(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments / Gerald Karp, 7th Edition, 2013)

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4. Describa las propiedades de las tres clases de protenas de membrana


(integral, perifrica y anclada a lpidos), cmo se diferencian unos de otros,
y la forma en que varan entre s.

Protenas integrales: Penetran en la bicapa lipdica. Son protenas transmembrana; es


decir, pasan completamente a travs de la bicapa lipdica y por lo tanto tienen dominios
que sobresalen de ambos lados extracelulares y citoplasmticos de la membrana.
Algunas protenas integrales tienen slo un segmento que atraviesa la membrana,
mientras que otros son multipaso. Los estudios de secuenciacin del genoma sugieren
que las protenas integrales constituyen el 20-30 por ciento de todas las protenas
codificadas.

Protenas perifricas: se asocian con la membrana por enlaces electrostticos dbiles.


Las protenas perifricas por lo general se pueden solubilizar por extraccin con
soluciones de sal de alta concentracin que debilitan los enlaces electrostticos que
sostienen a las protenas perifricas en una membrana. La distincin entre las protenas
integrales y perifricas es borrosa debido a que muchas protenas integrales de
membrana se componen de varios polipptidos, algunas que penetran en la bicapa
lipdica y otros que permanecen en la periferia.

Varios tipos de protenas de membrana anclados a lpidos pueden diferenciarse.


Numerosas protenas presentes en la cara externa de la membrana plasmtica estn
unidas a la membrana por un pequeo oligosacrido complejo unido a una molcula de
fosfatidilinositol que est incrustado en la cara externa de la bicapa lipdica. Las
protenas de membrana perifricas que contienen este tipo de enlace-glicosil
fosfatidilinositol se denominan protenas ancladas a GPI. Fueron descubiertas cuando
se demostr que ciertas protenas de membrana podran ser liberadas por una
fosfolipasa que especficamente reconoce y escinde los fosfolpidos que contienen
inositol.

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SEMANA 4
SEMINARIO I-3
CITOPLASMA, CITOESQUELETO, MATRIZ EXTRACELULAR

1. En una clula animal tpica, Cul de los siguientes compartimentos es el ms


grande? Qu compartimento est presente en mayor nmero? Fundamente su
respuesta.
a. Citosol.
b. Retculo endoplsmico.
c. Endosoma.
d. Aparato de Golgi.
e. Lisosoma.
f. Mitocondria.
g. Ncleo.
h. Peroxisoma.

El compartimiento ms grande en la clula es el citosol (A), que corresponde a


ms del 50% del volumen celular. Es el lugar donde tiene lugar la sntesis de
protenas y su degradacin. Adems es donde se desarrollan la mayora de las
reacciones del metabolismo intermediario celular, es decir, el elevado nmero de
reacciones mediante las cuales algunas molculas pequeas son degradadas y
otras; son sintetizadas proporcionando los elementos para la sntesis de
macromolculas. Aproximadamente la mitad del rea total de membrana de una
clula eucariota engloba los espacios labernticos del retculo endoplasmtico.
Los compartimiento ms pequeos en la clula son : lisosoma endosoma

Las mitocondrias (F) estn presentes en mayor nmero, usualmente miles por
cada clula.

El volumen relativo y nmero de organelas mayores cubiertas por membrana en un


hepatocito.
% del Nmero
Compartimiento intracelular volumen aproximado
celular total por clula
Citosol 54 1
Mitocondrias 22 1700
Retculo endoplsmico 12 1
Vesculas del Retculo Endoplsmico Rugoso 09
Vesculas del Retculo Endoplsmico Liso y Cisternas del Golgi 6
Ncleo 6 1
Aparato de Golgi 3 1
Peroxisomas 1 400
Lisosomas 1 300
Endosomas 1 200
Molecular biology of the cell / Bruce Alberts [et al.].-- 5th ed.
Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition.

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2. En cul de los siguientes tipos de clulas Usted espera una alta densidad de
filamentos intermedios citoplasmticos? Explique su respuesta.
a. Amoeba proteus (una ameba de vida libre).
b. Clula epitelial de la piel humana.
c. Clula muscular lisa en el tracto digestivo de un vertebrado.
d. Clula nerviosa en la mdula espinal de un ratn.
e. Espermatozoide humano.
f. Clula vegetal.

Las clulas que migran rpidamente de un lugar a otro, como las amebas (A) y
clulas espermticas (E), no necesitan filamentos intermedios en su citoplasma, ya
que no desarrollan o mantienen grandes fuerzas de traccin. Las clulas vegetales
(F) son empujadas y tiradas por las fuerzas del viento y el agua, pero se resisten a
estas fuerzas a travs de sus paredes celulares rgidas hechas a base de celulosa,
ms que por su citoesqueleto.
Las clulas epiteliales (B), clulas de msculo liso (C), y los largos axones de
las clulas nerviosas (D) son ricos en filamentos intermedios citoplasmticos,
que les impiden la rotura a medida que se estiran y comprimen por los movimientos
de los tejidos circundantes.

Organizacin de los filamentos intermedios dentro de la clula epitelial


(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments. 7 th Edition. Gerald Karp 2013)

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3. Cul de los siguientes cambios tiene lugar cuando el msculo esqueltico se


relajan?
a. La lnea M desaparece.
b. b. Discos Z se mueven y se alejan ms.
c. c. Los filamentos de actina se contraen.
d. d. Los filamentos de miosina se contraen.
e. e. Los sarcmeros se acortan.

REVISAR LA ESTRUCTURA DE LA FIBRA MUSCULAR

Los sarcmeros se acortan. Con la contraccin muscular, los discos Z se movilizan


acercndose unos con otros. Ninguno de los filamentos de actina ni filamentos de
miosina se contraen: estos filamentos se deslizan una sobre otra.

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(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments. 7 th Edition. Gerald Karp 2013)

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CONTRACCION MUSCULAR:
o Los filamentos delgados son regulados por la unin de cationes calcio a la
troponina C, y envuelve va el complejo de troponinas- el movimiento de la
tropomiosina hacia el surco del filamento delgado, removiendo el bloqueo
estrico que obstaculiza el enlazamiento de las cabezas de miosina a las
molculas de actina.
o Los filamentos delgados exhiben dos estados estructurales:
Estado desactivado, en el cual la tropomiosina bloquea el sitio de
enlazamiento de la miosina a las molculas de actina.
Estado activado en el cual la tropomiosina se mueve fuera del surco
descubriendo el sitio de enlazamiento de miosina.
o Al inicio del ciclo, la cabeza de la miosina, que carece de un nucletido unido,
se encuentra estrechamente unida al filamento de actina (estado I).
o La unin de ATP a la cabeza de la miosina, reduce la afinidad de la cabeza de
la miosina por la actina (estado II). La hidrlisis parcial del ATP (durante la cual
ADP y Pi permanecen unidos a la miosina), activa la cabeza de la miosina, la
que experimenta un cambio conformacional y se desplaza respecto del filamento
fino (estado III).
o La miosina activada contacta a una molcula de actina y se une a ella
producindose la liberacin de Pi (estado IV).
o Una vez unida a actina, la cabeza de la miosina experimenta un nuevo cambio
conformacional que se traduce en un desplazamiento del filamento fino y en la
liberacin de ADP (estado V).
o De esta manera, cada cabeza de miosina se desplaza hacia el extremo (+) del
filamento fino adyacente. Mientras la concentracin de Ca++ sea alta y exista
ATP disponible, los ciclos de formacin de puentes actina-miosina continan y
el sarcmero contina contrayndose.
o En ausencia de ATP, el complejo actina-miosina se estabiliza, fenmeno que
explica el "rigor mortis"

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(Molecular biology of the cell / Bruce Alberts, et.al. Sixth edition. 2015)

4. Las cadenas de polisacridos de glicosaminoglicanos se vinculan a las protenas


centrales especficas para formar los proteoglicanos de la lmina basal que se
encuentran altamente cargados negativamente. Cmo cree que estas cadenas
de polisacridos cargados negativamente ayudan a establecer un entorno
similar a un gel, hidratado alrededor de la clula? Cmo podran las
propiedades de estas molculas diferir si las cadenas de polisacridos se
encontraran sin carga?

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La alta densidad de cargas negativas de los componentes de polisacridos de


proteoglicanos provoca que las cadenas de
azcares se encuentren muy extendidas,
ocupando un amplio volumen y
proporcionando un entorno hidratado
similar a un gel alrededor de la clula.
Las cargas negativas atraen los iones
cargados positivamente, principalmente los
iones de sodio, que a su vez atraen a las
molculas de agua por smosis. En
ausencia de las cargas negativas, las
cadenas de azcar colapsaran en forma
de fibras o grnulos, alterando marcadamente las propiedades de la lmina basal.

La lmina basal consiste en una hoja


delgada resistente de la matriz
extracelular, compuesto
principalmente de un tipo
especializado de colgeno (colgeno
de tipo IV) y una protena llamada
laminina. La laminina proporciona
sitios adhesivos para las molculas
de integrina en las membranas
plasmticas basales de las clulas
epiteliales, y tiene por lo tanto una
funcin de vinculacin semejante a la
funcin de la fibronectina en otros tejidos conectivos

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MODELO DE LA ESTRUCTURA MOLECULAR DE LA LAMINA BASAL


(Molecular biology of the cell / Bruce Alberts, et.al. Sixth edition. 2015)

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SEMANA 5
SEMINARIO I-4
MOTILIDAD NO MUSCULAR. HUSO ACROMTICO

1. Cmo es posible que una misma vescula sea transportada a lo largo de


microtbulos y microfilamentos?

Varias miosinas no convencionales (incluyendo la miosina I, V, y VI) se asocian con


varios tipos de vesculas citoplasmticas y organelas. Algunas vesculas han mostrado
contener motores a base de microtbulos (kinesinas y/o dinena citoplsmica) y motores
a base de microfilamentos (miosinas no convencionales), los dos tipos de motores
pueden ser vinculados fsicamente entre s. El movimiento de las vesculas
membranosas y otros transportadores membranosos a lo largo de grandes distancias
dentro de las clulas animales se produce en los microtbulos. Sin embargo, una vez
que se acercan al final de los microtbulos, estas vesculas membranosas se considera
que cambian a pistas de microfilamentos para el movimiento local a travs de la periferia
celular rica en actina
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

La cooperacin entre los microtbulos y microfilamentos ha sido mejor estudiado en las


clulas pigmentadas. En los mamferos, los grnulos de pigmento (melanosomas) son
transportados en finos procesos perifricos de pigmento celular por una de las isoformas
de miosina: miosina Va. Los melanosomas son luego transferidos a los folculos
pilosos, donde se incorporan en un pelo en desarrollo. Los ratones que carecen de
actividad miosina Va son incapaces de transferir los melanosomas en los folculos
pilosos, causando que su pelaje tenga un color mucho ms claro. Los seres humanos
que carecen de un gen normal que codifica miosina Va sufren de una enfermedad rara
denominada sndrome Griscelli; estos individuos presentan el albinismo parcial (falta
de coloracin de la piel) y sufren otros sntomas que se cree estn relacionadas con
defectos en el transporte de vesculas.
En el ao 2000 se descubri que un subgrupo de pacientes portadores del sndrome de
Griscelli tena un gen normal miosina Va, pero careca de un gen funcional que codifica
una protena de membrana perifrica denominado RAB27A. La familia de las protenas
Rab son molculas que regulan el trfico de vesculas. Las protenas Rabs tambin
estn involucrados en la fijacin de motores basados en gen de miosina (y kinesina)
para la superficie de membrana
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

En contraste con los motores de miosina II, que trabajan en conjunto y se unen slo
transitoriamente a los filamentos de actina a fin de no interferirse unos con otros, la
miosina V se mueve continuamente, a lo largo de los filamentos de actina y sin dejar
de hacerlo. Las funciones de la Miosina V estn bien estudiados en la levadura
Saccharomyces cerevisiae, que se somete a un patrn estereotpico de crecimiento y
divisin denominada gemacin. Filamentos de actina en la clula madre en el punto

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hacia la gemacin, donde actina se encuentra en parches que se concentran donde el


crecimiento de la pared celular se lleva a cabo. Los motores Miosina V transportan una
amplia gama de cargas - incluyendo mRNA, retculo endoplsmico, y vesculas
secretorias - a lo largo de los filamentos de actina y en la gemacin.
Adems, la miosina V media en la particin correcta de orgnulos como las mitocondrias
y los peroxisomas entre las clulas madre y la hija
(Molecular biology of the cell / Bruce Alberts, et.al. Sixth edition. 2015)

Miosina V lleva el cargo a lo largo de los filamentos de actina.


(A) El brazo de palanca de la miosina V es largo, lo que le permite dar un paso ms
grande a lo largo de un filamento de actina de la miosina II
(B) La miosina V transporta carga y orgnulos a lo largo de los filamentos de actina, en
este ejemplo se mueve una mitocondria en el brote creciente de una clula de levadura.

(Molecular biology of the cell / Bruce Alberts, et.al. Sixth edition. 2015)

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Los roles contrastantes de motores basados en microtbulos y basados en


microfilamentos en el transporte intracelular.
La mayor parte del transporte de vesculas se cree que est mediada por los miembros
de las familias kinesina y dinena, que transportan su carga en distancias relativamente
largas.
Algunas vesculas tambin llevan motores de miosina, tales como la miosina Va, que
transportan su carga sobre los microfilamentos, incluyendo aquellos presentes en las
regiones perifricas de la clula (cortex celular). Los dos tipos de motores pueden actuar
de una manera cooperativa, como se ilustra aqu en el caso de una clula de pigmento
de la rana en el que los grnulos de pigmento se mueven hacia atrs y adelante dentro
de los procesos celulares extendidos. (AFTER X. WU ET AL., J. CELL BIOL. 143:1915, 1998; BY
COPYRIGHT PERMISSION OF THE ROCKEFELLER UNIVERSITY PRESS.)
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

RECORDAR QUE LOS MICROTBULOS Y LOS MICROFILAMENTOS TIENEN


FAMILIAS DE PROTENAS MOTOR:
Propiedades de los microtbulos, Filamentos intermedios y Microfilamentos

Karp, Biologa Celular y Molecular. 2010

2. Describa los pasos tomados por una clula de mamfero al arrastrarse sobre un
sustrato.

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Las secuencia repetitiva de las actividades que se produce cuando una clula se
arrastra sobre el substrato
Paso 1 Protrusin del borde anterior de la clula en forma de un lamelipodio.
Paso 2 Adherencia de la superficie ms baja del lamelipodio al sustrato, una unin
que est mediada por las integrinas que residen en la membrana plasmtica. La
clula utiliza esta unin para sujetar el sustrato.
Paso 3 Movimiento de la mayor parte de la clula hacia delante sobre el sitio de
unin, que permanece relativamente estacionario Este movimiento se consigue
mediante una fuerza (traccin) contrctil ejercida contra el sustrato.
Paso 4 Clula despus que las uniones con el sustrato se han cortado y la parte
posterior de la clula es tirada hacia delante.
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

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Queratocitos migratorias procedentes de epidermis de pescado. Micrografas


de luz
(A) queratocito en cultivo, tomas de unos 15 segundos de diferencia. Esta clula se est
moviendo a aproximadamente 15 micras/min.
(B) queratocitos visto por microscopa electrnica de barrido, que muestra su amplio,
lamellipodium plano y el cuerpo celular pequeo, incluyendo el ncleo, llevado por encima
el sustrato en la parte trasera.
(C) Distribucin de los filamentos del citoesqueleto en esta clula. Los filamentos de actina
(rojo) llenan el gran lamellipodium y son responsables de un rpido movimiento de la clula.
Los microtbulos (verde) y los filamentos intermedios (azul) se limitan a las regiones
cercanas al ncleo. (A y B, cortesa de Juliet Lee.)
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Un modelo de protrusin de la malla de actina en el borde anterior.


Dos momentos de tiempo durante el avance del lamellipodium estn ilustrados, con
las estructuras recin ensambladas en el punto de tiempo posterior se muestran en
un color ms claro. La nucleacin est mediada por el complejo Arp 2/3 en la parte
delantera. Los filamentos de actina recientemente nucleados estn unidos a los
lados de los filamentos preexistentes, principalmente en un ngulo de 70.
Los filamentos elongados, empujan la membrana plasmtica hacia adelante debido
a algn tipo de anclaje de la matriz posterior. A un ritmo constante, los filamentos de
actina del extremo ms se vuelven capsulados. Luego subunidades de actina recin
polimerizadas hidrolizan ATP unido en el enrejado de filamentos, los filamentos se
vuelven susceptibles a la despolimerizacin por la cofilina.
Este ciclo provoca una separacin espacial entre ensamblaje neto de la red frontal
y la red en desensamblaje en la parte trasera, por lo que la red de filamentos de
actina en su conjunto puede moverse hacia adelante, a pesar de que los filamentos
individuales dentro de ella permanecen estacionarios con respecto al sustrato.
No todas las actinas son desensambladas; por lo tanto, la actina en la parte trasera
del lamellipodium contribuye en etapas posteriores con la migracin, junto con
miosina.

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(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

3. La concentracin de actina en las clulas es 50 a 100 veces mayor que la


concentracin crtica observada para la actina pura en un tubo de ensayo.
Cmo es esto posible? Qu impide que las subunidades de actina en las
clulas se polimericen en filamentos? Por qu es VENTAJOSA para la clula
mantener un gran nmero de subunidades de actina?

Es habitual que la concentracin de monmero soluble oscila entre 50 a 200 M (2-


8 mg/ml), concentracin sorprendentemente elevada dada la baja concentracin
crtica observada para la actina pura en un tubo de ensayo (< 1 M). La actina
permanece soluble y no forma filamentos debido a que contiene protenas
especiales que se unen a los monmeros de actina e impiden su polimerizacin o la
hacen menos favorable. La timosina es la protena ms abundante. Los monmeros
de actina unidos a la timosina se encuentran en un estado cerrado, en el cual no
pueden asociarse ni con el extremo ms ni con el extremo menos de los filamentos
de actina y tampoco pueden hidrolizar o cambiar el nucletido que lleva unido.

En las clulas, la mayor parte de las subunidades de actina estn unidos a timosina,
que bloquea la actina en una forma que no puede hidrolizar su ATP unido y no puede
ser agregado a cualquier extremo de un filamento. La timosina reduce la
concentracin de subunidades de actina libre alrededor de la concentracin crtica.
Las subunidades de actina son reclutadas de este grupo inactivo por profilina, cuya
actividad es regulada de modo que la polimerizacin de la actina ocurre cuando y
donde sea necesario. La ventaja de tal disposicin es que la clula puede mantener
un gran nmero de subunidades para un crecimiento explosivo en los sitios y los
tiempos de su eleccin.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Fifth Edition, 2008)

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4. Cmo se estructura el huso acromtico? Cul es su funcin? Qu sucede


en una clula eucariote en interfase? Las clulas procariotas tienen huso
acromtico? Fundamente sus respuestas.

El centrosoma en una clula en interfase se duplica para formar


los dos polos de un huso mittico. En la mayora de las clulas
animales en interfase (G1, S, y G2), un par de centriolos (que
se muestra aqu como un par de barras de color verde oscuro)
se asocia con la matriz del centrosoma (verde claro), que
nuclea microtbulos en nacimiento. (El volumen de la matriz del
centrosoma se ha exagerado en este diagrama para mayor
claridad.)
La duplicacin del centrosoma comienza al inicio de la fase S y
se completa por el final de G2. Inicialmente, los dos
centrosomas permanecen juntos, pero, en la fase M temprana,
se separan, y cada nuclea microtbulos en nacimiento su
propio ster de microtbulos. Los centrosomas luego se
separan, y los microtbulos que interactan entre los dos ster
se alargan preferentemente para formar un huso mittico
bipolar, con un ster en cada polo. Cuando la envoltura nuclear
se rompe, los microtbulos del huso son capaces de interactuar
con los cromosomas duplicados.

(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

Los centrosomas (2 centriolos), microtbulos, protenas


motor: kinesina, dinena son estructuras propias de
clulas eucariotas. La mitosis y la meiosis son tipos de
divisin celular slo observada en clulas eucariotas, las
clulas procariontes se
reproducen por fisin binaria
donde no est involucrada la
formacin del huso acromtico
que participa en la segregacin
de los cromosomas.

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5. Resuma que sucede a nivel molecular en la enfermedad de los cilios inmviles


y que actividad se pierde a nivel celular.

La clula ciliada normal est compuesta por unas 250 protenas organizadas en
torno a un axonema o conjunto de microtbulos que se extienden desde el
citoplasma hasta el extremo final del cilio.
El cilio normal consiste en un par central de microtbulos rodeados por una vaina
y otros 9 dobletes externos formando la organizacin caracterstica 9+2
(AXONEMA).
Los complejos de dinena se asocian a los dobletes perifricos, los puentes de
nexina sostienen los dobletes perifricos entre s y los rayos radiales (radial
spoke) unen el par central con los perifricos.
Los microtbulos y sus protenas asociadas estn anclados en el citoplasma
apical de la clula por un complejo de 9 tripletes de microtbulos.

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Nature Reviews Molecular Cell Biology 14, 713726 (2013)

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La funcin de los cilios respiratorios es realizar un batido coordinado con una


frecuencia y patrn correctos para el aclaramiento de las secreciones y eliminacin
de los desechos de la va area

La discinesia ciliar primaria (DCP) es una enfermedad de herencia principalmente


autosmica recesiva, caracterizada por disfuncin de las clulas ciliadas presentes
en los tejidos respiratorio y gonadal, entre otros.
La prevalencia estimada por estudios radiogrficos y observaciones clnicas en la
etapa previa al microscopio electrnico es de 1/15.000-20.000 nacidos vivos. Segn
estos datos, la prevalencia aproximada de sndrome de Kartagener sera de
1/30.000 a 1/40.000, y el 50% de los casos de DCP presentaran situs inversus.
Sin embargo, trabajos recientes que basan el diagnstico en el estudio
ultraestructural ciliar calculan una cifra mayor de la estimada previamente,
situndola en 1/10.000 nacidos vivos1,2.
La DCP incluye un grupo de enfermedades en las que los cilios respiratorios son:
o inmviles (sndrome de inmotilidad ciliar),
o el movimiento ciliar es discintico e ineficaz (DCP) o
o no hay cilios (aplasia ciliar), este ltimo extremadamente infrecuente.
En 1976, Afzelius describi como origen del trastorno la ausencia de brazos de
dinena en los microtbulos de los cilios bronquiales y de los flagelos de los
espermatozoides.

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Existen clulas ciliadas mviles en el epitelio respiratorio (incluyendo los senos


paranasales y el odo medio), el epndimo del cerebro, los conductos deferentes y
ovricos, y el epiddimo, entre otras localizaciones, por lo que existe una gran
variabilidad fenotpica de esta patologa.
El trastorno de la motilidad de los cilios compromete el aclaramiento (limpieza)
mucociliar (que supone uno de los mecanismos de defensa de la va respiratoria),
lo que explica la mayor predisposicin de estos pacientes a desarrollar infecciones
respiratorias crnicas desde el nacimiento.
Este trastorno tambin afecta al flagelo del espermatozoide y a los cilios de la trompa
de Falopio, por lo que es comn la esterilidad en los varones y una fertilidad reducida
en las mujeres.
La ineficacia de los cilios nodales presentes de forma transitoria durante el desarrollo
embrionario hace que la asimetra de los rganos internos se disponga al azar, por
lo que aproximadamente el 50% de estos pacientes tienen un situs inversus total.
La DCP es un trastorno muy heterogneo en el que estn implicados mltiples genes
y protenas y que, por lo tanto, se manifiesta con una sintomatologa muy variable.
Actualmente se conocen al menos 10 genes relacionados con esta patologa. Sin
embargo, estas mutaciones solo pueden estudiarse en laboratorios especializados
y la mayora de los genes involucrados an no se han identificado, por lo que la
posibilidad de un diagnstico molecular parece todava lejana.
(Arch Bronconeumol. 2013;49(3):99104)

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SEMANA 6
SEMINARIO I-5
MITOCONDRIAS. ADN MITOCONDRIAL

1. Mencione las diferencias estructurales y funcionales entre la membrana


mitocondrial interna y externa. Compare las propiedades y la historia evolutiva
de las membranas mitocondriales interna y externa; el espacio inter-membrana
y la matriz mitocondrial.

Las mitocondrias ocupan 15 a 20 por ciento del volumen de un hepatocito promedio de


mamfero y contienen ms de un millar de protenas diferentes.

MEMBRANA MITOCONDRIAL EXTERNA

Cubre completamente la mitocondria, sirviendo como su lmite exterior.


Se compone de aproximadamente 50% en peso de lpidos y contiene una
mezcla de enzimas que participan en diversas actividades tales como la
oxidacin de la epinefrina, la degradacin de triptfano, y la elongacin de
cidos grasos.
La membrana mitocondrial externa se considera homloga a una membrana
externa presente como parte de la pared celular de ciertas clulas
bacterianas. Esto es debido a que contiene muchas molculas de porina,
una clase especial de protena de membrana de tipo barril que crea poros
acuosos travs de la membrana
Las porinas, son protenas integrales que tienen un canal interno
relativamente grande (por ejemplo, 2-3 m).
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

ESPACIO INTERMEMBRANA

Como consecuencia de la presencia de porinas en la membrana mitocondrial


externa, el espacio intermembrana (entre la membrana interna y externa)
tiene el mismo pH y la composicin inica que el citoplasma, y no hay
gradiente electroqumico a travs de la membrana externa.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

MEMBRANA MITOCONDRIAL EXTERNA

La membrana mitocondrial interna es una barrera contra la difusin a iones y


pequeas molculas, al igual que la membrana interna bacteriana.
Iones seleccionados, ms notablemente los protones y fosfato, as como
metabolitos esenciales, tales como ATP y ADP, puede pasar a travs de ella
por medio de protenas de transporte especiales.

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La membrana mitocondrial interna est altamente diferenciada en regiones


funcionalmente distintas con diferentes composiciones proteicas.
En la membrana mitocondrial interna, se considera que la regin de la
membrana lmite contiene la maquinaria para la importacin de protenas, la
nueva insercin en la membrana, y el ensamblaje de los complejos de la
cadena respiratoria.
La membrana mitocondrial interna forma una serie de hojas membranosas
invaginadas, denominadas crestas.
Las membranas de las crestas, que son continuas con la membrana lmite,
contienen la enzima ATP sintasa que produce la mayor parte de ATP de la
clula; tambin contienen los grandes complejos de protenas de la cadena
respiratoria el nombre dado a la cadena de transporte de electrones de la
mitocondria.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Es particularmente rica en protenas responsables de la importacin de


protenas mitocondriales.
Contiene ms de 100 polipptidos diferentes y tiene una muy alta proporcin
protena/lpido (ms de 3:1 en peso, que corresponde a aproximadamente
una molcula de protena por cada 15 fosfolpidos).
Prcticamente carece de colesterol y es rica en un fosfolpido inusual, la
cardiolipina (difosfatidilglicerol), que es una caracterstica de las membranas
citoplasmticas bacterianas, de donde probablemente la membrana
mitocondrial interna ha evolucionado. La cardiolipina juega un papel
importante en la facilitacin de la actividad de las protenas implicadas en la
sntesis de ATP.
La membrana mitocondrial interna es altamente impermeable; prcticamente
todas las molculas y los iones requieren transportadores especiales de
membrana para poder entrar a la matriz.
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

La cardiolipina se compone de dos unidades de fosfolipidos unidos


covalentemente, con un total de cuatro en lugar de las dos cadenas de cidos
grasos habituales.
La cardiolipina es producida solamente en la membrana interna mitocondrial,
donde interacta estrechamente con las protenas de membrana
involucradas en la fosforilacin oxidativa y el transporte ATP.
o En crestas mitocondriales, los dos grupos fosfato yuxtapuestos de la
cardiolipina pueden actuar como una trampa de protones locales en la
superficie de la membrana.

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La cardiolipina promueve curvatura en las membranas de lpidos


debido a su estructura cnica nica. (A) Estructura qumica de
fosfatidilcolina (PC). (B) Estructura qumica de cardiolipina (CL). (C)
La cardiolipina ejerce una presin lateral en una bicapa lipdica para
inducir una curvatura negativa.

o Se genera un gradiente de pH a travs de la membrana mitocondrial


interna, con un alto pH en la matriz (cerca de 8) y un pH ms bajo en
el espacio intermembrana. Puesto que los iones y pequeas
molculas equilibren libremente a travs de la membrana mitocondrial
externa, el pH en el espacio intermembrana es el mismo que en el
citosol (generalmente alrededor de pH 7,4).
o Se genera un gradiente de voltaje a travs de la membrana
mitocondrial interna, la creacin de un potencial de membrana con el
lado de la matriz negativa y el lado del espacio intermembrana
positivo.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

MATRIZ MITOCONDRIAL

o La matriz tiene una consistencia similar a un gel debido a la presencia


de una alta concentracin (hasta 500 mg/mL) de protenas solubles en
agua. Adems de una gran variedad de enzimas, la matriz
mitocondrial tambin contiene ribosomas (de tamao
considerablemente ms pequeo que los que se encuentran en el
citosol, son de probable origen bacteriano) y varias molculas de ADN
circulares (semejante al ADN bacteriano).
o Las mitocondrias poseen su propio material gentico y la maquinaria
para la fabricacin de sus propios ARN y protenas.
o Este ADN no cromosmico es importante porque codifica un pequeo
nmero de polipptidos mitocondriales (13 en humanos) que estn
estrechamente integrados en la membrana mitocondrial interna, junto
con polipptidos codificados por los genes que residen dentro del
ncleo. El ADN mitocondrial humano tambin codifica 2 ARN

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ribosmicos y 22 ARNt que se utilizan en la sntesis de protenas


dentro de la organela.
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

La matriz contiene el sistema gentico de la mitocondria, incluyendo


el ADN mitocondrial y los ribosomas. El ADN mitocondrial se organiza
en cuerpos compactos (los nucleoides) por las protenas de andamiaje
especiales que tambin funcionan como protenas reguladoras de la
transcripcin. El gran nmero de enzimas requeridas para el
mantenimiento del sistema de gentica mitocondrial, as como para
muchas otras reacciones esenciales que se describen a continuacin,
representa la concentracin muy alta de protenas en la matriz; en ms
de 500 mg / ml, esta concentracin es cercana a la de un cristal de
protena.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

ESPACIO INTERMEMBRANA

Las protenas del espacio intermembrana son mejor conocidas por su


papel en el inicio de la apoptosis.
(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 6th edition, 2010).

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2. La cadena respiratoria es relativamente inaccesible a la manipulacin


experimental en mitocondrias intactas. Despus de perturbar a la mitocondria
con ultrasonido, es posible aislar partculas sub-mitocondriales funcionales, las
que consistirn en crestas rotas que se han vuelto a sellar al revs en pequeas
vesculas cerradas. En estas vesculas los componentes que originalmente se
encontraban hacia la matriz mitocondrial estn ahora expuestas al medio
circundante. Cmo cree que una disposicin de este tipo podra ayudar en el
estudio del transporte de electrones y la sntesis de ATP?

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En la mitocondria intacta el NADH dona sus


electrones a la cadena respiratoria desde el
lado de la matriz de la membrana interna. As
mismo, el ATP es sintetizado a partir de ADP y
fosfato en el lado de la matriz de la membrana
interna. Con la mitocondria intacta es difcil para
un cientfico manipular las concentraciones de
estas pequeas molculas en la matriz debido
a que la membrana interna la encierra. Por el
contrario, en las partculas submitocondriales
con el lado de la matriz expuesta al entorno, es
fcil de aadir diferentes concentraciones de
NADH, ATP, ADP y fosfato (as como
inhibidores y donadores de electrones y
aceptores artificiales) y hacer un seguimiento
de las consecuencias para el transporte de
electrones y la sntesis de ATP.

3. De los cinco tipos de transportadores de electrones,


Quin tiene la masa molecular ms pequea? Cul tiene mayor
relacin entre tomos de hierro a electrones transportados? Cul
tiene un componente que se encuentra fuera de la bicapa lipdica?
Cules son capaces de aceptar protones y electrones y cules slo
electrones?

Quin tiene la masa molecular ms pequea?

La ubiquiona tiene un peso molecular de 0,8 Kd.


El citocromo c es el componente con menor peso molecular. El
citocromo c, solo tiene un grupo hemo y no est asociado a ninguna
otra molcula.

La cadena transportadora de electrones contiene cinco tipos de


transportadores de electrones unidas a la membrana: flavoprotenas,
citocromos, tomos de cobre, ubiquinona y protenas hierro-azufre.

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Con la excepcin de la ubiquinona, todos los centros redox dentro de


la cadena respiratoria que aceptan y donan electrones son grupos
prostticos, es decir, componentes sin aminocidos que estn
estrechamente asociados con las protenas.

a) Las flavoprotenas consisten en un polipptido unido firmemente


a uno de dos grupos prostticos relacionados, ya sea dinucletido
de flavina adenina (FAD) o flavina mononucletido (FMN). Los
grupos prostticos de flavoprotenas se derivan de riboflavina
(vitamina B2), y cada uno es capaz de aceptar y donar dos protones
y dos electrones. Los principales flavoprotenas de las mitocondrias
son NADH deshidrogenasa de la cadena transportadora de
electrones y succinato deshidrogenasa del ciclo de los ATC.
b) Los citocromos son protenas que contienen grupos prostticos
hem. El tomo de hierro del hem se somete a una transicin
reversible entre los estados de oxidacin Fe+3 y Fe+2, como
resultado de la aceptacin y la prdida de un solo electrn. Hay tres
tipos distintos de citocromos a, b, y c -presente en la cadena
transportadora de electrones- que difieren entre s por sustituciones
dentro del grupo hem.

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c) Los tres tomos de cobre, ubicados dentro de un mismo complejo


de protenas de la membrana mitocondrial interna, aceptan y donan
un electrn en tanto se van alternando entre los estados de
oxidacin Cu+2 y Cu+1.
d) La ubiquinona (UQ, o coenzima Q) es una molcula soluble en
lpidos que contiene una cadena hidrfoba larga compuesta por
unidades isoprenoides de cinco carbonos. Al igual que las
flavoprotenas, cada ubiquinona es capaz de aceptar y donar dos
electrones y dos protones. La molcula parcialmente reducida es
el radical libre semiubiquinona, y la molcula totalmente reducida
es el ubiquinol (UQH2). La UQ/UQH2 permanece dentro de la
bicapa lipdica de la membrana, donde es capaz de una rpida
difusin lateral.
e) Las protenas hierro-azufre son protenas que contienen hierro
en la que los tomos de hierro no se encuentran dentro de un grupo
hem, sino que estn vinculados a los iones de sulfuro inorgnicos
como parte de un ncleo de hierro-azufre.

Cul tiene mayor relacin entre tomos de hierro a electrones transportados?

Las propiedades de transporte de electrones de los complejos de


protena de membrana en la cadena respiratoria dependen de
cofactores portadores de electrones, la mayora de los cuales son
metales de transicin como el Fe, Cu, Ni y Mn, unidos a las protenas
en los complejos. Estos metales tienen propiedades especiales que
les permiten promover tanto la catlisis enzimtica y las reacciones de
transferencia de electrones.
Los citocromos slo pueden aceptar un electrn, mientras que el
mononucletido de flavina y quinonas pueden aceptar dos
electrones y dos molculas protones en reacciones sucesivas.
El ms sencillo de los transportadores de electrones de la cadena
respiratoria y el nico que no forma parte de una protena es una
quinona (denominada ubiquinona o coenzima Q). Una quinona (Q) es
una pequea molcula hidrofbica que est libre y es mvil a travs
de la bicapa lipdica y puede captar o ceder uno o dos electrones; al
reducirse, por cada electrn que transporta capta un protn del medio.

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Los centros ms comunes contienen dos o cuatro tomos de hierro y


azufre nombrados como centros ferrosulfurados: [2Fe-2S] y [4Fe-4S]
-se unen a la protena en los residuos de cistena.
A pesar de que un solo centro puede tener varios
tomos de hierro, todo el complejo es capaz de
aceptar y donar un solo electrn.
El potencial redox de un centro de hierro-azufre
depende de la hidrofobicidad y carga de los
residuos de aminocidos que componen su
medio ambiente local. Como grupo, las protenas
hierro-azufre tienen potenciales que varan de
aproximadamente -700 mV a aproximadamente
300 mV, correspondiente a una parte importante
del tramo sobre el cual se produce el transporte
de electrones. Ms de una docena de centros de hierro-azufre de
diferentes centros hierro-azufre han sido identificados dentro de la
mitocondria.

Cul tiene un componente que se encuentra fuera de la bicapa lipdica?

El citocromo c es una protena soluble en el espacio intermembrana.


La ubiquinona (coenzima Q10) est disuelta en la bicapa lipdica. Una
quinona (Q) es una pequea molcula hidrofbica que es libremente
mvil en la bicapa lipdica. Este transportador de electrones puede
aceptar o donar uno o dos electrones. Tras reduccin (nota que
reducen quinonas se llaman quinoles), recoge un protn del agua junto
con cada electrn.

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Los tres complejos enzimticos respiratorios, en el orden en que se


reciben electrones, son: (1) complejo NADH deshidrogenasa, (2)
citocromo c reductasa complejo, y (3) citocromo c oxidasa complejo.
Los tres complejos enzimticos respiratorios, en el orden en que se
reciben electrones, son: (1) complejo NADH deshidrogenasa, (2)
citocromo c reductasa complejo, y (3) citocromo c oxidasa complejo

Cules son capaces de aceptar protones y electrones y cules slo electrones?

Los citocromos slo pueden aceptar un electrn, mientras que el


mononucletido de flavina (FMN) y las quinonas pueden aceptar dos
electrones y dos protones en reacciones sucesivas. El dinucletido de
flavina adenina (FAD) difiere de FMN en que tiene un grupo de
adenosina unido al fosfato.

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Estructuras de tres tipos de transportadores de electrones en sus formas oxidados y reducidos. (a) FMN de
NADH deshidrogenasa, (b) el grupo hem del citocromo c, y (c) la ubiquinona (coenzima Q). Los grupos hem
de los diferentes citocromos de la cadena transportadora de electrones difieren en las sustituciones en los
anillos de porfirina (indicados por el sombreado azul) y el tipo de unin con la protena.
Los citocromos slo pueden aceptar un electrn, mientras que FMN y las quinonas pueden aceptar dos
electrones y dos protones en reacciones sucesivas, como se muestra. FAD difiere de FMN en que tiene un
grupo de adenosina unido al fosfato.

La F1F0-ATP sintasa es un complejo enzimtico encargado de proveer a la


clula la energa necesaria para realizar todos sus procesos vitales mediante
la sntesis de ATP, aunque tambin puede llevar a cabo la hidrlisis de ste,
por lo que al complejo tambin se le nombra F1F0-ATPasa. El nombre se
debe a que las subunidades pueden separarse en dos dominios estructurales
llamados F1 y F0 (1). El dominio F1 est compuesto por subunidades
solubles y es el dominio cataltico de la enzima, mientras que el F0 es el
dominio membranal. Ambos dominios estn unidos por un tallo central y por
un tallo perifrico.
4. Mencione las caractersticas del ADN mitocondrial que lo diferencian
del ADN nuclear y explique cmo se hereda.
Las mitocondrias contienen la nica fuente extranuclear de genes (en las
clulas animales). El ADN mitocondrial (ADNmt) es una doble cadena
circular, con 16 569 pares de bases que codifica 37 genes, incluyendo 13
polipptidos esenciales para el sistema de fosforilacin oxidativa, dos ARN
ribosomal (12S y 16S) y 22 tRNAs. Las protenas restantes necesarias para

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el metabolismo mitocondrial y el mantenimiento se sintetizan en el citosol y


se dirigen, agrupan e importan especficamente a su localizacin mitocondrial
correcta.
El genoma mitocondrial tiene caractersticas nicas que la distinguen del
genoma nuclear; es estrictamente de herencia materna y hay de varios
cientos a varios miles de copias dentro de una sola clula. El nmero de
copias presentes vara entre los diferentes tipos de clulas, dependiendo de
la demanda de energa dentro del tejido.
No tienen intrones y los genes tienen o bien ninguna o muy pocas bases no
codificantes entre ellos, y en la mayora de los casos los codones de
terminacin no estn presentes, pero se crean post-transcripcionalmente por
poliadenilacin. El bucle de desplazamiento (bucle D) es la nica regin
importante no codificante de la molcula y est formada por el
desplazamiento de las dos cadenas genmicas por una tercera cadena de
ADN.
J Pathol 2012; 226: 274286

Published by John Wiley & Sons, Ltd. www.pathsoc.org.uk www.thejournalofpathology.com

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5. Seale similitudes de los peroxisomas con las mitocondrias. Qu hace


nicos a los peroxisomas?
Los peroxisomas son vesculas simples, unidas a la membrana con un
dimetro de 0,1 a 1,0 m que puede contener un denso, ncleo cristalino de
las enzimas oxidativas.
Los peroxisomas (o microcuerpos) son orgnulos multifuncionales, que
contiene ms de 50 enzimas que intervienen en actividades tan diversas
como la oxidacin de cidos grasos de cadena muy larga (AGCML, aquellos
cuya cadena contiene tpicamente 24 a 26 tomos de carbono) y la sntesis
de plasmalgenos, que son una clase inusual de fosfolpidos en la que uno
de los cidos grasos est en relacin con glicerol mediante un enlace ter en
lugar de un enlace ster.
Los peroxisomas comparten varias propiedades con las mitocondrias: tanto
mitocondria y peroxisomas se forman por divisin de organelas
preexistentes, utilizando algunas de las mismas protenas. Ambos tipos de
organelas importan protenas preformadas desde el citosol y ambos se
dedican a tipos similares de metabolismo oxidativo. De hecho, al menos una
enzima, alanina/glioxilato aminotransferasa, se encuentra en las
mitocondrias de algunos mamferos (por ejemplo, gatos y perros) y en los
peroxisomas de otros mamferos (por ejemplo, conejos y seres humanos).
Estas organelas se denominaron "peroxisomas" porque son el sitio de
sntesis y la degradacin de perxido de hidrgeno (H2O2), un agente
oxidante altamente reactivo y txico. El perxido de hidrgeno es producido
por una serie de enzimas peroxisomales, incluyendo urato oxidasa, glicolato
oxidasa y oxidasas de aminocidos, que utilizan oxgeno molecular para
oxidar sus respectivos sustratos. El H2O2 generado en estas reacciones se

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descompone rpidamente por la enzima catalasa, que est presente en altas


concentraciones en estos orgnulos.
Los peroxisomas se encuentran en prcticamente todas las clulas
eucariotas y se definieron originalmente como orgnulos que contienen al
menos una oxidasa y uno catalasa para la produccin y descomposicin
respectiva del perxido de hidrgeno. Dependiendo del tipo de clula y el
medio ambiente, los peroxisomas tienen diversas funciones reguladas, el
ms notable de los cuales estn relacionados con el metabolismo de los
lpidos. Estas funciones estn integradas con los procesos en otros
compartimentos celulares, incluyendo los cloroplastos, mitocondrias y el
citosol, a travs de la existencia de vas metablicas compartidas y
coordinadas.
Los peroxisomas tienen diversas funciones travs de los reinos de la
naturaleza, que van desde el ms notable y altamente conservada (la -
oxidacin de los cidos grasos combinados con la degradacin de H2O2 por
la catalasa) a las funciones que son muy especializadas y slo se encuentra
en unos pocos organismos o tipos de clulas (tales como el metabolismo de
glicerol y el mantenimiento de la integridad celular).
Los peroxisomas tienen de 0,1-1 micras de dimetro y estn conformados
por las membranas individuales que encierran matrices densas que
contienen principalmente enzimas metablicas (sustratos y cofactores), que
a veces pueden formar ncleos cristaloides estructurados y electrodensos.
Los peroxisomas son generalmente esfricos, pero pueden cambiar su forma
y ser alargados o incluso forman retculos en algunos tipos de clulas y
entornos
Peroxisomes take shape
Jennifer J. Smith and John D. Aitchison
NATURE REVIEWS | MOLECULAR CELL BIOLOGY DECEMBER 2013 | VOLUME 14

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SEMANA 7
SEMINARIO I-6
LISOSOMAS. MUERTE CELULAR. APOPTOSIS Y NECROSIS

1. Describir los eventos que se producen durante la destruccin autofgica de una


mitocondria.

CONCEPTOS PREVIOS
Los lisosomas juegan un rol clave en el recambio de organelas, regulan la
destruccin de las organelas por s mismas y su reemplazo. Una mitocondria
tiene una vida media de 10 das
Las hidrolasas cidas son enzimas hidrolticas que son activas en
condiciones cidas.
Una H+ ATPasa en la membrana bombea H + hacia el interior del lisosoma,
manteniendo el lumen con un pH cido.
La bomba bomba H+ lisosomal pertenece a la familia de ATPasas tipo V y
tiene una arquitectura similar a la de las ATP sintasas de ATP (ATPasas tip-
F) mitocondriales y cloroplsticas, que convierten la energa acumulada en
los gradientes de H+ en ATP.
En contraste con estas enzimas, la ATPasa H+ vacuolar trabaja
exclusivamente a la inversa, bombeando
H+ dentro de la organela. Similares o
idnticas ATPasas tipo-V acidifican todas
las organelas endocticas y exocticas,
incluyendo lisosomas, endosomas,
algunos compartimentos del aparato de
Golgi y muchas vesculas de transporte y
vesculas secretoras. Adems de
proporcionar un entorno de pH bajo que es
adecuado para las reacciones que se
producen en el lumen del orgnulo (Lumen:
espacio interior de una estructura tubular), el
gradiente de H+ proporciona una fuente de
energa que impulsa el transporte de
pequeos metabolitos a travs de la
membrana de la organela.

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

AUTOFAGIA
La autofagia, una ruta catablica conservadas evolutivamente en las clulas
eucariotas, juega un papel importante en la respuesta al estrs y la
degradacin de los componentes citoslicos daados.
Hay tres tipos generales de autofagia que puede entregar materiales
intracelulares

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a los lisosomas para la degradacin: 1) macroautofagia, 2) microautofagia y


3) autofagia mediada por chaperonas.
Aunque la macroautofagia se considera principalmente un proceso de
captura de masa, la autofagia selectiva para degradar orgnulos daados o
en exceso, tales como las mitocondrias (mitofagia), peroxisomas
(micropexofagia y macropexofagia), retculo endoplsmico (ER;
reticulofagia), las partes del ncleo (microautofagia fragmentaria nuclear), e
incluso los ribosomas (ribofagia)

(Physiology 23:248-262, 2008)

LA AUTOFAGIA MITOCONDRIAL SE DENOMINA MITOFAGIA.

La organela es rodeada por una doble membrana que produce una estructura
denominada autofagosoma.
La membrana externa mitocondrial se fusiona con el lisosoma para
producir un autofagolisosoma en el cual la organela es degradada y los
productos de la degradacin se hacen disponibles para la clula.
En condiciones de ayuno grandes porciones de citosol son capturadas de
forma no selectiva en autofagolisosomas.
Los metabolitos derivados de la digestin del material capturado contribuyen
a la supervivencia celular cuando la disponibilidad de nutrientes externos es
limitada.
Se calcula que una mitocondria experimenta autofagia cada 10 minutos (ej.
Hepatocito).
Si la clula es deprivada de nutrientes, se observa un marcado incremento
en la autofagia.

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LA AUTOFAGIA SE DIVIDE EN 5 PROCESOS:

1. INDUCCIN por la activacin de molculas de sealizacin: Protena


quinasas que transmiten informacin sobre el estado metablico de la clula,
se activan y dan la seal a la maquinaria de autofagia.
2. La NUCLEACIN Y LA EXTENSIN DE UNA MEMBRANA de delimitacin
en forma de medialuna: vesculas de membrana, que se caracteriza por la
presencia de ATG9 (la nica protena de transmembrana que participa en el
proceso), son reclutados por un sitio de montaje, donde se nuclea la
formacin del autofagosoma. ATG9 no se incorpora en el autofagosoma: una
va de recuperacin debe quitarlo de la estructura de montaje.
3. El CIERRE DE LA MEMBRANA alrededor del objetivo (target: organela blanco)
para formar un autofagosoma de doble membrana se cierra hermticamente.
4. La FUSIN DEL AUTOFAGOSOMA CON LOS LISOSOMAS, es catalizada
por SNAREs.
5. La DIGESTIN de la membrana interna y el contenido luminal del
autofagosoma.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Las protenas SNARE (soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor


attachment protein receptor), juegan un papel central en la fusin de
membranas en la clula, y en particular en la exocitosis de las
vesculas sinpticas en los terminales nerviosos, mediando la fusin
de las vesculas con la membrana plasmtica para la liberacin de
neurotransmisores en la transmisin sinptica.
Los SNAREs neuronales consisten en las protenas syntaxin 1 y
SNAP-25 en la membrana plasmtica (t-SNARE), y la sinaptobrevina
(tambin llamada protena VAMP2) en la membrana vesicular (v-
SNARE). El complejo SNARE formado por estas tres protenas forma
un ramillete de cuatro hlices paralelas que se piensa que induce la
fusin de membranas por un proceso de trenzado en direccin a la
membrana, ejerciendo suficiente fuerza en la membrana para
sobrepasar una barrera energtica que se estima en >40 kBT.
http://carrionvazquez-lab.org/es/page.cfm?id=31#.V9Qn55h94dU (10/09/16)

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Los pasos generales de la autofagia de mamferos.


La autofagia engulle porciones del citosol a travs de tres pasos principales. La nucleacin induce la formacin
de una membrana aislada, que podra surgir de diferentes fuentes de membranas (el retculo endoplsmico, el
aparato de Golgi, la membrana plasmtica, la mitocondria) para formar el fagoforo el cual se elonga para formar
vesculas autofagosmicas de doble membrana. El autofagosoma puede secuestrar el material citoslico
incluyendo orgnulos senescentes como las mitocondrias, las protenas longevas o patgenos intracelulares, a
travs de autofagia selectiva independiente (para la simplificacin esquemtica, todos se represent con en un
solo autofagosoma). El autofagosoma finalmente se fusiona con los lisosomas durante la etapa de para formar
autolisosomas donde se produce la degradacin. Algunas de las protenas cruciales que intervienen en las
diferentes fases de la autofagia estn indicadas. Varios virus pueden inducir un flujo de autofagia completa,
como MeV o CHIKV, en tanto que otras pueden inhibir la maduracin del autofagosoma, como el VIH-1 y VHC,
a fin de mejorar su replicacin
(Front. Immunol., 17 January 2013)

(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).

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(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

2. Cules son algunas de las funciones de la apoptosis en la biologa de los


vertebrados?
Las clulas de un organismo multicelular son miembros de una comunidad
altamente organizada. El nmero de clulas en esta comunidad es altamente
regulado no simplemente por el control en la tasa de divisin celular, sino
tambin, por el control de la tasa de muerte celular.
(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).

La apoptosis es la base de una meticulosa eliminacin de clulas


potencialmente peligrosas, como las clulas inmunes autorreactivas, las
cuales atacan a las clulas propias o a las neuronas que no han logrado
hacer contacto con otras neuronas.

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La muerte celular programada tambin est involucrada en la defensa contra


la infeccin, las clulas infectadas por virus son selectivamente muertas en
respuesta a seales de muerte. Los virus a su vez, tienen mecanismos para
evadir las defensas del husped.
El fracaso de la apoptosis puede llevar a un crecimiento canceroso no
controlado.
Las protenas que previenen la muerte de clulas cancerosas, a su vez, son
posibles blancos para las drogas antineoplsicas.
(Molecular Cell Biology. Lodish, 7th Edition, 2013).

En la mayora de los casos, esta muerte celular programada se produce por


un proceso llamado apoptosis de la palabra griega que significa "caerse",
como las hojas de un rbol.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

LA ACTIVACIN DE CASPASAS DURANTE LA APOPTOSIS (ver figura siguiente).


Una caspasa iniciadora contiene un dominio de proteasa en su regin
carboxi-terminal y un pequeo dominio de interaccin de protena cerca de
su extremo amino terminal. Est compuesta inicialmente en una forma
inactiva, monomrica, a veces llamada procaspasa.
Las seales apoptticas desencadenan el ensamblaje de protenas
adaptadoras que transportan mltiples sitios de unin para el dominio amino-
terminal de la caspasa.
Al unirse a las protenas adaptadoras, las caspasas iniciadoras se dimerizan
y de ese modo se activan, lo que lleva a la escisin de un sitio especfico en
sus dominios proteasa.
Cada dominio de proteasa se reorganiza luego en una subunidad grande y
pequea.
En algunos casos (no mostrado), el dominio de unin del adaptador-caspasa
iniciadora tambin se escinde.
Las caspasas ejecutoras se forman inicialmente como dmeros inactivos.
Despus de la escisin en un sitio en el dominio de proteasa por una caspasa
iniciadora, el dmero caspasa ejecutora sufre un cambio conformacional
activndose.
Las caspasas ejecutoras luego se escinden (o sufren clivaje) en una variedad
de protenas claves, lo que lleva a la muerte controlada de la clula.

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(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

3. Describir los pasos que se producen cuando:

a. Una molcula de Factor de Necrosis Tumoral (TNF) se une a su


receptor y la eventual muerte de la clula.

Las protenas de sealizacin extracelular que se unen a los receptores de


muerte de la superficie celular activan la va extrnseca de la apoptosis.
Los receptores de muerte son protenas transmembrana que contienen un
dominio extracelular de unin a ligando, un nico dominio transmembrana, y
un dominio de muerte intracelular, que es requerido por los receptores para
activar el programa apopttico.
Los receptores son homotrmeros y pertenecen a la familia de receptores del
factor de necrosis tumoral (TNF), los cuales incluyen un receptor de TNF
por s mismo y el receptor de muerte Fas.
Los ligandos que activan los receptores de muerte son tambin
homotrmeros; que estn estructuralmente relacionados entre s y
pertenecen a la familia TNF de protenas seal.

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Un ejemplo bien conocido de cmo los receptores de muerte desencadenan la va


extrnseca de la apoptosis es la activacin de Fas en la superficie de una clula diana
por el ligando de Fas en la superficie de un asesino (citotxico) de linfocitos.

Al activarse por la unin del ligando de Fas, los dominios de muerte en las
colas citoslicas de los receptores de muerte Fas unen protenas
adaptadoras intracelulares, que a su vez se unen a caspasas iniciadoras
(caspasa-8 principalmente), formando un complejo sealizador inductor de
muerte (DISC).
Una vez dimerizadas y activadas en el DISC, las caspasas iniciadoras
escinden sus parejas y luego activan las caspasas ejecutoras posteriormente
para inducir la apoptosis.
o En algunas clulas, la va extrnseca recluta a la va apopttica
intrnseca para amplificar la cascada de caspasas y matar a la clula.
o Muchas clulas producen protenas inhibidoras que actan
restringiendo la va extrnseca.

Por ejemplo, algunas clulas producen la protena FLIP, que se asemeja a


una caspasa iniciadora, pero no tiene actividad de proteasa porque carece
de la cistena clave en el sitio activo. FLIP dimeriza con la caspasa-8 en el
DISC; Aunque la caspasa-8 parece ser activa en estos heterodmeros, no se
escinde en el sitio requerido para su activacin estable, y la seal apopttica
es bloqueada. Tales mecanismos inhibitorios ayudan a prevenir la activacin
inapropiada de la va extrnseca de la apoptosis.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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b. Una protena protena proapopttica Bcl-2 se une a la membrana


mitocondrial externa y el proceso de muerte celular.

Las clulas tambin pueden activar su programa de apoptosis desde dentro


de la clula, a menudo en respuesta a las tensiones, tales como dao del
ADN, o en respuesta a seales de desarrollo.
En clulas de vertebrados, estas respuestas se rigen por la va intrnseca, o
mitocondrial, que depende de la liberacin en el citosol de las protenas
mitocondriales que normalmente residen en el espacio intermembrana de
estos orgnulos

LA VA INTRNSECA DE LA APOPTOSIS (ver figura abajo)


Los estmulos apoptticos intracelulares hacen que la mitocondria libere
el citocromo c, que interacta con Apaf1.
Una protena clave en la va intrnseca es el citocromo c, un componente
hidrosoluble de la cadena de transporte de electrones mitocondrial.
Cuando se elimina en el citosol, adquiere una nueva funcin: se une a una
protena adaptadora llamada Apaf1 (factor de activacin - 1 de la proteasa
apopttica), causando que Apaf1 se oligomerice en un heptmero en forma
de rueda denominado apoptosoma.

La unin de citocromo c hace que Apaf1 se despliegue parcialmente,


exponiendo un dominio que interacta con el mismo dominio en otras
molculas Apaf1 activadas.
Las protenas Apaf1 del apoptosoma a continuacin reclutan la protena
caspasa-9 iniciadora, que se piensa que es activada por proximidad en el
apoptosoma, as como la caspasa-8 se activa en DISC. Las molculas de
caspasa-9 activadas luego activan las caspasas ejecutoras corriente
abajo para inducir la apoptosis.
Siete protenas Apaf1 activadas forman un gran complejo de anillo
llamado apoptosoma. Cada protena Apaf1 contiene un dominio de
reclutamiento de caspasas (CARD), y stas se agrupan por encima
del eje central del apoptosoma.

Las CARDs enlazan dominios similares en mltiples molculas de


caspasa-9, que son por lo tanto reclutadas en el apoptosoma y activadas.
El mecanismo de la caspasa-9 no es clara: probablemente se debe a
la dimerizacin y la escisin de las protenas caspasa 9 adyacentes,
pero tambin podra depender de las interacciones entre la caspasa-
9 y Apaf1.

Una vez activada, la caspasa-9 escinde y por lo tanto activa caspasas


ejecutoras corriente abajo.
Ntese que CARD est relacionado en estructura y funcin al dominio
efector de muerte de la caspasa-8. Algunos cientficos utilizan el
trmino "apoptosoma" para referirse al complejo que contiene la
caspasa-9.

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La va intrnseca de la apoptosis est estrechamente regulada para


asegurar que las clulas se suiciden slo cuando sea apropiado.

Una clase importante de los reguladores intracelulares de la va


intrnseca es la familia de protenas Bcl2, que, como la familia de las
caspasas, se ha conservado en la evolucin desde los gusanos a los
seres humanos; una protena humana Bcl2 por ejemplo, puede suprimir
la apoptosis cuando se expresa en el gusano Caenorhabditis elegans.
o Las protenas de la familia de mamferos Bcl2 regulan la va
intrnseca de la apoptosis principalmente por el control de la
liberacin de citocromo c y otras protenas mitocondriales
intermembrana en el citosol.
o Algunas protenas de la familia Bcl2 son protenas pro-apoptticas
y promueven la apoptosis al aumentar la liberacin, mientras que
otros son antiapopttica e inhiben la apoptosis mediante el bloqueo
de la liberacin.
o Las protenas pro-apoptticas y las protenas anti-apoptticas se
pueden unir entre s en varias combinaciones para formar
heterodmeros en la que las dos protenas inhiben la funcin de la
otra.
o El equilibrio entre las actividades de estas dos clases funcionales
de protenas de la familia Bcl2 determina en gran medida si una
clula de mamfero vive o muere por la va intrnseca de la
apoptosis.

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Las tres clases de protenas de la familia Bcl2. Tener en cuenta que el dominio
BH3 es el nico dominio BH compartida por todos los miembros de la familia
Bcl2; que media las interacciones directas entre los miembros de la familia pro-
apoptticas y miembros de la familia anti-apoptticas.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

4. Indaga sobre la necroptosis. En qu consiste? Cules seran sus funciones?

Durante muchos aos la apoptosis fue considerada como la nica forma


de muerte celular regulada (RCD), mientras que la necrosis fue vista como
un proceso de muerte celular accidental no regulada (ACD).
La evidencia gentica, bioqumica y funcional, y el descubrimiento de
inhibidores qumicos especficos de necrosis han redefinido este proceso
como una forma regulada molecularmente controlada de muerte celular.
La necrosis regulada incluye varias modalidades de muerte celular, tales
como:
o necroptosis,
o partanatos
o ferroptosis
o oxitosis
o necrosis dependiente de la transicin de permeabilidad
mitocondrial (MPT)
o piroptosis
o pironecrosis
o NETosis o ETosis, muerte celular asociada con la liberacin de
(neutrfilos) trampas extracelulares
La piroptosis y la necroptosis son las mejores formas caracterizadas de
necrosis regulada.
La piroptosis es una forma inflamatoria de muerte celular inducida por la
activacin del inflamasoma y tiene funciones importantes en la defensa
del husped y la inflamacin.

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La necroptosis, mediada por el receptor de interaccin de la protena


quinasa-3 (RIPK3) y su sustrato de linaje mixto semejante a quinasa
(MLKL), es la forma mejor caracterizada de necrosis regulada.
La apoptosis se considera generalmente como no inmunognica, basado
en el concepto de que el desarrollo la muerte celular programada, tales
como durante la seleccin de timocitos en el timo, no debe desencadenar
inflamacin.
Sin embargo, la muerte celular apopttica en que no est programada su
desarrollo indica lesin del tejido y debe ser detectada por el sistema
inmune para asegurar la regeneracin eficaz de tejidos y la defensa del
husped.
Varios estudios recientes apoyan un papel proinflamatorio de la
apoptosis. La apoptosis de las clulas cancerosas en respuesta a algunos
agentes quimioteraputicos ha demostrado ser altamente inmunognica,
contribuyendo con la respuesta a la terapia. Sin embargo, la muerte
celular apopttica en que no est programada su desarrollo indica lesin
del tejido y debe ser detectada por el sistema inmune para asegurar la
regeneracin eficaz de tejidos y la defensa del husped.
Varios estudios recientes apoyan un papel proinflamatorio de la
apoptosis. La apoptosis de las clulas cancerosas en respuesta a algunos
agentes quimioteraputicos ha demostrado ser altamente inmunognica,
contribuyendo con la respuesta a la terapia.
(Necroptosis and its role in inflammation, Manolis Pasparakis et. al. 15 JANUARY 2015 | VOL 517 | NATURE | 317)

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE LA APOPTOSIS Y LA NECROPTOSIS


Las clulas que mueren por apoptosis exhiben condensacin de la cromatina y se desmontan en
fragmentos envueltos con membrana que se eliminan rpidamente por clulas fagocticas. En las
clulas que mueren por rotura debida necroptosis, se piensa que liberan contenidos intracelulares
que pueden provocar una respuesta inmune innata de las clulas como los macrfagos,
fibroblastos y clulas endoteliales.

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En contraste con la apoptosis y piroptosis, necroptosis es una muerte


programada independiente de caspasas.
Necroptosis es una forma regulada de necrosis, con la ruptura de la
clula que muere y la liberacin de componentes intracelulares que
pueden desencadenar una respuesta inmune innata.
Los agonistas de los receptores Toll-like 3 y 4, el factor de necrosis
tumoral, ciertas infecciones virales o el receptor de clula T pueden
activar la necroptosis si se compromete la actividad de la proteasa
caspasa-8.
La sealizacin la necroptosis es modulada por la quinasa RIPK1 y
requiere la quinasa RIPK3 y la pseudokinase MLKL.
Cualquier deficiencia de RIPK3 o la inhibicin RIPK1 confiere
resistencia en varios modelos de enfermedad en animales lo que
sugiere que la inflamacin causada por necroptosis contribuye al dao
del tejido y que los inhibidores de estas quinasas podran tener un
potencial teraputico.
Los estudios recientes revelan una inesperada complejidad en la
regulacin de programas de muerte celular por RIPK1 y RIPK3 con la
posibilidad de que necroptosis no es sino un mecanismo por el que
estas quinasas promueven la inflamacin.
(Annu. Rev. Biochem. 2016. 85:4.14.21)

El proceso de necrosis regulada ahora se conoce como necroptosis o


necrosis programada.

Death-receptor control of regulated cell death.


(Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2014. 30:20.120.20)

5. Observe bien en las micrografas electrnicas que se muestran. Describa las


DIFERENCIAS entre la clula que muri por necrosis y la que muri por

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apoptosis. Cmo las imgenes confirman las diferencias entre los dos
procesos? Explique su respuesta.

NEURONA NECRTICA

La membrana plasmtica de la clula que muri por necrosis se


rompe; varias interrupciones claras son visibles, por ejemplo, a las 8,
9 y 12 horas.
El contenido de la clula, en su mayora membranosa y con restos del
citoesqueleto, se observa derramada en el entorno.
Se observan manchas suaves en el citosol, debido a que la mayora
de los componentes solubles se han perdido antes de la fijacin
celular.

NEURONA APOPTTICA

Una membrana intacta rodea la clula que sufri apoptosis, el citosol


est densamente teido, lo que indica una concentracin normal de
los componentes celulares.
El interior de la clula es notablemente diferente a una clula normal.
Particularmente caracterstico son las gotas grandes las cuales
extruyen o se vierten del ncleo, probablemente como resultado de la
ruptura de la lmina nuclear.
El citosol tambin contiene muchas vesculas grandes, rodeadas de
membrana de origen desconocido que normalmente no se ven en las
clulas sanas. Las imgenes confirman visualmente la nocin de que

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la necrosis implica la lisis celular, mientras que las clulas sometidas


a la apoptosis permanecen relativamente intactas hasta que son
fagocitadas y digeridas en el interior de una clula normal.
(Molecular biology of the cell, 5th edition. A problems approach/John Wilson & Tim Hunt. -- 5th ed.2008)

(Iatreia vol.23 N 2 Medelln Apr./June 2010)

67
SEMANA 9
SEMINARIO II-1
TRANSPORTE INTRACELULAR

1. Describa los pasos que se producen entre el momento en que un ribosoma se une a un
ARN mensajero que codifica una protena de secrecin y el momento en que una protena
abandona el Retculo Endoplsmico Rugoso (RER).

Todas las protenas de secrecin son sintetizadas por ribosomas citoslicos, el trfico
diverge en dos ramales principales. En cada una de las estaciones intermedias por las
que pasa la protena hasta su destino final, se realiza una decisin de s la protena se
queda retenida en ese compartimento o sigue hasta su destino final. En la mayora de
las ocasiones se necesita una seal determinada, pero tambin hay seales por defecto
(en ausencia de seal).

La hiptesis de la seal.
Una protena se dirige al Retculo Endoplasmtico (RE) mediante una secuencia de
seal, un tramo corto de aminocidos que, por lo general est en su amino terminal.
(Clulas. Lewin. 2da Edicin. 2011)

Una visin simplificada de la translocacin de protenas a travs de la membrana


del RE, como originalmente se propuso. Cuando la secuencia seal de RE emerge
del ribosoma, el ribosoma es dirigido a un
translocador sobre la membrana de RE que
forma un poro en la membrana a travs del
cual se transloca el polipptido. Una peptidasa
de seal est estrechamente asociada con el
translocador y realiza un recorte fuera de la
secuencia de seal durante la traduccin, la
protena madura se libera en el lumen del RE
inmediatamente despus de que se complete
su sntesis. El translocador est cerrado hasta
que el ribosoma se una, de manera que la
barrera de permeabilidad de la membrana del
RE es mantenida en todo momento.
USMP FMH Seminario de Biologa Celular y Molecular 2016 Solucionario

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Las protenas destinadas a ser secretadas (exocitosis) o a incorporarse en el RE, aparato


de Golgi, lisosomas, o membrana plasmtica son dirigidas inicialmente al RER.

Dos tipos de protenas se transfieren desde el citosol al RER:


a) Las protenas hidrosolubles son translocadas a travs de la membrana del RE
y son liberados en el lumen del RE. Las protenas hidrosolubles se destinan a la
secrecin (liberadas por exocitosis en la superficie celular) o para el lumen de
una organela del sistema de endomembranas. En las clulas de los mamferos, la
mayora de las protenas son transferidas al RER mientras estn siendo traducidas
por los ribosomas unidos a la membrana.

La sntesis del polipptido empieza en un ribosoma libre. Cuando la secuencia seal


(que se muestra en rojo) emerge del ribosoma, se une a la Partcula de Reconocimiento
Seal (SRP) (paso 1), que detiene la traduccin hasta que el complejo SRP-ribosoma-
cadena naciente pueda hacer contacto con la membrana del RE.
El complejo ribosoma-SRP se une con a un receptor de SRP situada dentro de la
membrana del RE (paso 2).
La fijacin de este complejo con el receptor de SRP es seguido por la liberacin de la SRP
y la asociacin del ribosoma con un translocon de la membrana del RE (paso 3).
Estos ltimos eventos estn acompaados por la hidrlisis recproca de las molculas de
GTP (no mostradas) asociadas a SRP y su receptor. En el modelo representado aqu, el
pptido seal se une entonces en el interior del translocon, desplazando el interruptor del
canal y permitiendo que el resto del polipptido se transloque a travs de la membrana
cotraduccionalmente (paso 4).
Posterior al paso del polipptido naciente hacia el lumen del RE, el pptido seal se
escinde mediante una protena de membrana (peptidasa de seal, no mostrada), y la
protena es plegada con la ayuda de chaperonas del RE, tales como Bip.
(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments / Gerald Karp 7th Edition 2013)

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b) Las potenciales protenas transmembrana slo se translocan parcialmente a


travs de la membrana del RER y se insertan en la membrana del RER.

Cmo una protena transmembrana de paso nico con una secuencia seal de RE
escindido est integrado en la membrana del RE?.
En esta protena, el proceso de translocacin co-traduccional se inicia por una
secuencia de seal de RE N-terminal (rojo) que funciona como una seal de inicio de
transferencia, abriendo el translocador como se muestra en la figura. Adems de esta
secuencia de transferencia de inicio, la protena tambin contiene una secuencia de
detencin de transferencia (naranja); cuando esta secuencia entra en el translocador e
interacta con un sitio de unin dentro del poro, el translocador se abre en la costura y se
descarga la protena lateralmente en la bicapa lipdica, donde la secuencia de parada de
transferencia permanece para anclar la protena en la membrana. (En esta figura los
ribosomas se han omitido para mayor claridad.)
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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2. Cmo logra una protena integral recin sintetizada insertarse en una membrana?

Todas estas protenas se dirigen inicialmente al RE por una secuencia seal de RE,
un segmento de ocho o ms aminocidos hidrfobos, que tambin est implicada en
el proceso de translocacin a travs de la membrana.
No todas las protenas producidas por los ribosomas unidos al RE se liberan en la luz
del RE. Algunas permanecen incrustadas en la membrana del RE como protenas
transmembrana. El proceso de translocacin de estas protenas es ms complicado
de lo que es para las protenas solubles, debido a que algunas partes de la cadena
del polipptido deben ser trasladadas por completo a travs de la bicapa lipdica,
mientras que otras partes permanecen fijas en la membrana.
o En el caso ms simple, la de una protena transmembrana con un solo
segmento que abarca la membrana, la secuencia seal N-terminal inicia la
translocacin como lo hace para una protena soluble.
o Pero el proceso de transferencia se detiene por una secuencia adicional de
aminocidos hidrofbicos, una secuencia de detencin de transferencia,
localizado a lo largo de la cadena polipeptdica.
o En este punto, el canal de translocacin libera la cadena polipeptdica en
crecimiento hacia los lados en la bicapa lipdica.
o La secuencia seal N-terminal se escinde, mientras que la secuencia de
detencin de transferencia permanece en la bicapa, atraviesa la membrana
mediante un segmento -helicoidal que ancla la protena en la membrana.
o Como resultado, la protena termina como una protena transmembrana de
paso nico insertado en la membrana con una orientacin de la N-terminal
definido en el lado luminal de la bicapa lipdica y el C-terminal en el lado
citoslico.
o Una vez insertada en la membrana, una protena transmembrana no cambia
su orientacin, que se conserva a lo largo de cualquier evento posterior de
gemacin y fusin.

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Una protena transmembrana de paso nico se mantiene en la bicapa


lipdica.

Una protena transmembrana de paso doble tiene una secuencia seal


de ER interna.

(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).

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3. Describa algunas de las maneras en que las organelas membranosas pueden mantener
sus composiciones nicas a pesar del continuo trfico de membranas y materiales que
se desplazan a travs de ellas.

Los estudios sugieren que las protenas se mantienen en una organela por una
combinacin de dos mecanismos:

RETENCIN DE MOLCULAS RESIDENTES que estn excluidas de las vesculas de


transporte.
La retencin puede basarse principalmente en las propiedades fsicas de la
protena Por ejemplo, las protenas solubles que forman parte de grandes
complejos o protenas de membrana con dominios transmembrana cortos no son
propensos a entrar en una vescula de transporte.
Muchas protenas son selectivamente retenidas en los compartimentos en donde
funcionan
Las protenas residentes de la membrana del RE, contienen seales que se unen
directamente a las cubiertas COPI y por lo tanto estn empaquetadas en vesculas
de transporte COPI recubiertos para la va retrgrada al RE.
La seal de recuperacin mejor caracterizado de este tipo consta de dos lisinas,
seguido por cualesquiera otros dos aminocidos, en el extremo C-terminal extrema
de la protena de membrana del ER.
Un mecanismo de retencin sugerido es que las protenas del RE se unen entre
s, formando as complejos que son demasiado grandes para entrar en vesculas
de transporte eficiente. Debido a que las protenas residentes RE estn presentes
en el RE a concentraciones muy altas (la estimacin es concentracin milimolar),
interacciones relativamente de baja afinidad seran suficientes para retener la

73
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mayor parte de las protenas en tales complejos. La agregacin de protenas que


funcionan en el mismo compartimiento es un mecanismo general que los
compartimentos utilizan para organizar y conservar sus protenas residentes.
Las enzimas del Golgi que funcionan juntas, por ejemplo, tambin se unen a uno
al otro y estn por lo tanto impedidas de entrar en vesculas de transporte que
salen del aparato de Golgi.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

RECUPERACIN DE LAS MOLCULAS "ESCAPADAS" de vuelta al compartimento en el que


residen habitualmente.
La va de Recuperacin de RE utiliza seales de clasificacin.
Se llama una secuencia KKXX, basada en el cdigo de aminocidos de una sola
letra.
CDIGO DE AMINOCIDOS DE UNA SOLA LETRA
Cdigo (1 letra) Cdigo (3 letras) Aminocido
A Ala Alanina
R Arg Arginina
N Asn Asparagina
D Asp Aspartato
C Cys Cistena
Q Gln Glutamina
E Glu cido glutmico
G Gly Glicina
H His Histidina
I Ile Isoleucina
L Leu Leucina
K Lys Lisina
M Met Metionina
F Phe Fenilalanina
P Pro Prolina
S Ser Serina
T Thr Treonina
W Trp Triptfano
Y Tyr Tirosina
V Val Valina

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Las protenas residentes de RE solubles, tales como BiP, tambin contienen una
breve seal de recuperacin de RE en su extremo C-terminal, pero es diferente:
se compone de una Lys-Asp-Glu-Leu o una secuencia similar. Si esta seal
(llamada la secuencia KDEL) se elimina de BiP por ingeniera gentica, la
protena es secretada lentamente de la clula. Si la seal se transfiere a una
protena que normalmente se secreta, la protena ser devuelta ahora de manera
eficiente al RE donde se acumular.
La va de la recuperacin KDEL explica slo en parte cmo se mantienen las
protenas residentes del RE en el RE. Como se mencion, las clulas que
expresan las protenas residentes modificadas genticamente del RE, donde la
secuencia KDEL se ha eliminado experimentalmente, secretan estas protenas.
Pero la tasa de secrecin es mucho ms lenta que para una protena secretora
normal.
Parece que un mecanismo que es independiente de la seal KDEL normalmente
retiene las protenas residentes RE y que slo las protenas residentes que
escapan a este mecanismo de retencin son capturadas y se devuelve a travs
del receptor KDEL.
La va de recuperacin para regresar protenas escapadas de nuevo al RE
depende de las seales de recuperacin de RE. Las protenas de membrana RE
residentes, por ejemplo, contienen seales que se unen directamente a cubiertas
COPI y por lo tanto se empaquetan en vesculas de transporte COPI recubiertos
para la entrega retrgrada de RE. La seal de recuperacin mejor caracterizada
de este tipo consta de dos lisinas, seguido de cualquier otros dos aminocidos, en
el extremo C-terminal de la protena de membrana del RE.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

4. Cmo son dirigidas las protenas recin sintetizadas a determinados compartimentos


subcelulares especficos? Averige: cmo una protena despus de su sntesis en los
polirribosomas llega al interior de la matriz mitocondrial.?
La seal de seleccin en una protena es un tramo continuo de secuencia de
aminocidos, tpicamente de 15-60 aminocidos de longitud. Esta secuencia
seal es a menudo (pero no siempre) retirada de la protena sintetizada una vez
que ha sido clasificada.

75
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Las secuencias seal son necesarias y suficientes para dirigir una protena a un
determinado destino.

Las protenas precursoras mitocondriales se despliegan durante la importacin (A) Una


mitocondria tiene una membrana exterior e interior, ambas deben ser cruzadas por una protena
precursora mitocondrial para entrar en la organela (B) Para iniciar el transporte, la secuencia de
seal mitocondrial en una protena precursora mitocondrial es reconocida por un receptor en la
membrana mitocondrial externa. Este receptor se asocia con una protena translocadora. El
complejo receptor, protena precursora, y translocador difunde lateralmente en la membrana
externa hasta que encuentre una segunda protena translocadora en la membrana interna Los
dos traslocadores transportan la protena a travs de ambas membranas (exterior e interior), la
protena es deplegada en el proceso. La secuencia seal se escinde finalmente por una peptidasa
seal en la matriz mitocondrial. Las protenas son importadas en cloroplastos por un mecanismo
similar. Las protenas chaperonas ayudan a tirar de la protena a travs de las membranas y
ayudan a que se repliegue y no es mostrada en el grfico.
(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).

5. Qu determina la especificidad de la interaccin entre una vescula de transporte y el


compartimento de la membrana con la que se va a fundir? Cmo son las protenas
SNARE involucrados en el proceso de fusin de membranas?

Una vez que una vescula de transporte ha alcanzado su objetivo, debe reconocer
y acoplarse con su organela especfica. Slo entonces puede fusionarse la
membrana de la vescula con la membrana diana y efectuar la descarga vesicular.
La impresionante especificidad del transporte vesicular sugiere que cada tipo de
vescula de transporte en la clula muestra marcadores moleculares en la
superficie que identifican la vescula segn su origen y la carga. Estos marcadores
deben ser reconocidos por los receptores complementarios en la membrana diana
apropiada, incluyendo la membrana plasmtica.
El proceso de identificacin depende de una diversa familia de GTPasas
monomricas llamadas protenas Rab.
Las protenas Rab especficas sobre la superficie de cada tipo de vescula son
reconocidas por las correspondientes protenas de anclaje en la superficie
citoslica de la membrana diana.
Cada organela y cada tipo de vescula de transporte lleva una combinacin nica
de protenas Rab, que sirven como marcadores moleculares para cada tipo de
membrana.

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El sistema de codificacin Rab y la inmovilizacin de las protenas ayudan a


garantizar que las vesculas de transporte se fusionen slo con la membrana
correcta.
El reconocimiento adicional es proporcionado por una familia de protenas
transmembrana llamadas SNAREs Una vez que la protena de anclaje ha
capturado una vescula tomando su protena Rab, SNAREs en la vescula (llamado
vSNARE) interactuan con SNAREs complementarias en la membrana diana
(llamado tSNARE), acoplando firmemente la vescula en su lugar.
Una vez que una vescula de transporte se ha fijado a su membrana destino, libera
su carga despus de la fusin de membranas.
La fusin de membranas requiere atraer las bicapas a menos de 1,5 nanmetros,
una al lado de la otra, para que puedan fusionarse. Cuando las membranas estn
en tan estrecha aposicin, los lpidos pueden fluir desde una bicapa a la otra.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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SEMANA 10
SEMINARIO II-2

MOLCULAS DE RELACIN CELULAR

1. Seala las funciones de cada una de las estructuras mencionadas en la siguiente tabla
relacionando las caractersticas estructurales de la molcula y la funcin que cumplen:

Unin celular Estructura molecular Funcin / ej. tejido


(seale la organizacin de los componentes)

Tight junction Principales protenas Las uniones estrechas (TJ) se


transmembrana: claudinas. encuentran en el extremo apical del
Las claudinas son esenciales complejo de unin entre las clulas
(unin estrecha, para la formacin y funcin de epiteliales adyacentes.
zonulae occludens) las uniones estrechas. Mantiene las clulas estrechamente
La claudina, es la ms juntas cerca de la membrana apical,
importante para el montaje y sellando el espacio entre las clulas y
la estructura de las cadenas previniendo as el escape de molculas
de cierre. a travs del epitelio.
La ocludina es una protena Las uniones estrechas tambin estn
relacionada que tiene el papel presentes entre las clulas endoteliales
menos crtico para determinar que recubren las paredes de los
la permeabilidad de las Tight capilares.
junction (TJ) Estas uniones son particularmente
Ocludina y claudina estn evidentes en el cerebro donde ayudan a
presentes juntas dentro las formar la barrera hematoenceflica, que
fibrillas lineales de un TJ impide el paso de sustancias desde el
Los extremos amino y torrente sanguneo al cerebro.
carboxilo de estas protenas
estn en el lado citoplsmico
de la membrana, donde
interactan con grandes
protenas de andamiaje que
organizan los filamentos de
sellado y enlazan la unin
estrecha con el citoesqueleto
de actina.
Al menos 24 claudinas
diferentes han sido
identificados, y las diferencias
en la distribucin de estas
protenas pueden explicar las
diferencias selectivas en la
permeabilidad de las TJ.
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Un modelo de una unin estrecha (tight junction).


(A) Filamentos que mantienen el sellado de membranas plasmticas adyacentes. Los hilos estn
compuestos de protenas transmembrana que hacen contacto a travs del espacio intercelular y crean un
sello. (B) La composicin molecular de una cadena de sellado. Los principales componentes extracelulares
de la unin estrecha son miembros de una familia de protenas con cuatro dominios transmembrana.
Una de estas protenas, claudina, es el ms importante para el montaje y la estructura de las hebras de
sellado, mientras que la protena relacionada ocludina tiene el papel menos crtico de la determinacin de
permeabilidad de las uniones. Los dos extremos de estas protenas estn en el lado citoplasmtico de la
membrana, donde interactan con grandes protenas de andamiaje que organizan las hebras de sellado y
enlazan la unin estrecha con el citoesqueleto de actina.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Unin celular Estructura molecular Funcin / ej. tejido


(seale la organizacin de los componentes)

Gap junction Conexinas Cerca del extremo basal de las clulas


Protenas de las uniones de estn las uniones que forman canales,
hendidura predominantes en que crean conductos que unen los
(unin de hendidura, los vertebrados, con 21 citoplasmas de las clulas adyacentes.
unin comunicante) isoformas en humanos. Permite el paso de pequeas molculas
Protenas transmembrana de solubles en agua de clula a clula.
cuatro pasos, seis de las cuales Las Gap junctions tienen un poro de
se ensamblan para formar una aproximadamente 1,4 m, lo que permite
hemicanal o conexn. el intercambio de iones inorgnicos y
otras molculas pequeas solubles en
Conexn agua, pero no de macromolculas tales
Cuando los conexones en las como protenas o cidos nucleicos.
membranas plasmticas de dos El cierre del canal est probablemente
clulas en contacto estn provocado principalmente por la
alineadas, forman un canal fosforilacin de las subunidades de
acuoso continuo que conecta conexina.
los dos interiores celulares. El cierre tambin puede ser provocado
Una unin comunicante se por cambios en el de voltaje a travs de
compone de muchos pares de la unin o por concentraciones
dichos conexones en paralelo, anormalmente alta de Ca+2 citoslicos.
formando una especie de tamiz Este acoplamiento elctrico a travs de
molecular. las uniones comunicantes tiene un
Gap junctions en diferentes propsito evidente en los tejidos que
tejidos pueden tener diferentes contienen clulas elctricamente
propiedades, ya que se forman excitables: los potenciales de accin
a partir de diferentes pueden propagarse rpidamente de una
combinaciones de conexinas,

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creando canales que difieren en clula a otra, sin el retraso que se


la permeabilidad y la produce en las sinapsis qumicas.
regulacin. En los vertebrados, el acoplamiento
La mayora de los tipos elctrico a travs de uniones
celulares expresan ms de un comunicantes sincroniza las
tipo de conexina, y dos contracciones de clulas musculares del
protenas conexinas diferentes corazn, as como los de las clulas
pueden ensamblar en una musculares lisas responsables de los
conexn heteromrico, con sus movimientos peristlticos del intestino.
propias propiedades distintas.
Adems, las clulas
adyacentes que expresan
diferentes conexinas pueden
formar canales intercelulares en
el que los dos hemiconexones
alineados son diferentes

Uniones gap.
(A) Un dibujo de las membranas plasmticas de interaccin de dos clulas adyacentes conectadas por
uniones comunicantes. Cada bicapa lipdica se muestra como un par de lminas rojas. Protenas de
ensamblaje denominadas conexones (verde), cada uno de los cuales est formado por seis subunidades
de conexinas, que penetran en las bicapas lipdicas yuxtapuestas. Dos conexones se unen a travs del
espacio intercelular para formar un canal acuoso continuo que conecta las dos clulas. (B) La organizacin
de conexinas en conexones y de los conexones en canales intercelulares. Los conexones pueden ser
canales homomricos o heteromricos, y los canales intercelulares puede ser homotipicos o heterotpicos.
(C) La estructura de alta resolucin de un canal de hendidura homomrico, determinado por cristalografa
de rayos X de la conexina humana. En esta vista, estamos mirando hacia abajo en el poro, formado a partir
de seis subunidades de conexina. La estructura ilustra las caractersticas generales del canal y sugiere un
tamao de poro de aproximadamente 1,4 m, como se predijo a partir de estudios de permeabilidad GAP-
unin con molculas de varios tamaos.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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Unin celular Estructura molecular Funcin / ej. tejido


(seale la organizacin de los componentes)

Desmosoma Protena de adhesin Desmosomas son estructuralmente


transmembrana: cadherinas similares a las uniones adherentes, pero
no clsicas (desmogleina, contienen cadherinas especializadas que
Es una unin de anclaje
desmocollina) enlazan con filamentos intermedios en
clula a clula Ligando extracelular: lugar de los filamentos de actina. Su
Desmogleina y desmocolina funcin principal es proporcionar
en la clula cercana resistencia mecnica.
Acoplamiento al Conecta filamentos intermedios en una
citoesqueleto intracelular: clula a los de la siguiente clula.
filamentos intermedios Estn presentes en los epitelios de los
Protenas adaptadoras vertebrados maduros y son
intracelulares: Plakoglobina particularmente abundantes en los
(-catenina), plakofilina, tejidos que estn sujetos a altos niveles
de estrs mecnico, tales como msculo
desmoplakina

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cardaco y la epidermis, el epitelio que


forma la capa externa de la piel.
Funcionan como estructuras adhesivas y
como complejos Ancla filamentos
intermedios de una clula a la matriz
extracelular de transduccin de seal.

Unin celular Estructura molecular Funcin / ej. tejido


(seale la organizacin de los componentes)

Hemidesmosoma Protena de adhesin: 64 Ancla filamentos intermedios de una


clula a la matriz extracelular.
Integrina, colgeno tipo XVII
Proporcionan estabilidad estructural a
Es una unin de anclaje Ligando extracelular:
los epitelios.
clula a matriz protenas de la matriz
extracelular. Se encuentran en la superficie basal de
extracelular clulas epiteliales, donde se enlazan la
Acoplamiento al
matriz extracelular a la red de filamentos
citoesqueleto intracelular:
intermedios por medio de receptores
filamentos intermedios
transmembrana.
Protenas adaptadoras
intracelulares: Plectin,
BP230

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Los hemidesmosomas se conectan con la membrana basal, que consta de la lmina


basal y una red de fibras de colgeno.
(Lewins cells. 3rd ed. 2015)

Unin celular Estructura molecular Funcin / ej. tejido


(seale la organizacin de los componentes)

Adherens junction Protena de adhesin Conecta haz de filamentos de actina en


transmembrana: cadherinas una clula con la siguiente clula
(unin adherente)
clsicas
Ligando extracelular: Desempean una funcin importante
Es una unin de anclaje cadherina clsica en clula durante el desarrollo al controlar la
clula a clula cercana fuerza de adhesin clula a clula y al
proporcionar un mecanismo para el
Acoplamiento al
reconocimiento clula a clula
citoesqueleto intracelular:
especfico.
microfilamentos
Protenas adaptadoras
intracelulares: -catenin, -
catenin, plakoglobin (-
catenin), p120-catenin,
vinculin

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2. Se requiere una fuerza de unos 20 piconewtons (pN) para tirar de una protena
transmembrana como P-selectina de una bicapa lipdica pura. Para tirar de una molcula
de P-selectina fuera de la membrana plasmtica se requiere ms de 110 pN. Por qu
crees que se necesita mucha ms fuerza para tirar de P-selectina fuera de la membrana
plasmtica que fuera de una bicapa lipdica?

CONSIDERACIONES PREVIAS:

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Las selectinas comprenden una familia de glicoprotenas integrales de membrana


que reconocen y se unen a una disposicin particular de azcares en los
oligosacridos que se proyectan desde las superficies de otras clulas.
El nombre de esta clase de receptores de la superficie celular se deriva de la
palabra "lectina", un trmino general para un compuesto que se une a los grupos
de hidratos de carbono especficos.
Las selectinas poseen un pequeo dominio citoplasmtico, un solo dominio que
abarca la membrana, y un segmento extracelular grande que consta de un nmero
de mdulos separados, incluyendo un dominio ms externo que acta como la
lectina.

Existen tres selectinas conocidas:


E-selectina, presente en las
clulas endoteliales activadas;
P-selectina, presente en las
plaquetas y clulas endoteliales
que se han activado localmente
por una respuesta inflamatoria;
L-selectina, presente en los
leucocitos.

Las tres selectinas reconocen


una agrupacin particular de azcares que se encuentran en los extremos de las
cadenas de carbohidratos de algunas glicoprotenas complejas.
La unin de selectinas a sus ligandos de carbohidratos requiere calcio.
La fuerza adicional requerida para remover la P-selectina de la membrana
plasmtica refleja su adhesin a otras protenas en el lado citoplsmico de la
membrana.

POR QU CREES QUE SE NECESITA MUCHA MS FUERZA PARA TIRAR DE P-


SELECTINA FUERA DE LA MEMBRANA PLASMTICA QUE FUERA DE UNA BICAPA
LIPDICA?
Para eliminar la P-selectina de una bicapa se requiere solamente superar las
interacciones hidrofbicas con los lpidos de la bicapa.
Para removerla de la membrana plasmtica se requiere, adems, que todos los
enlaces en el lado citoplasmticos sean rotos. (En caso que se pregunte: se
necesita una fuerza de 10.000 pN para romper un enlace carbono-carbono.)

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En general, todas las protenas


transmembrana interactan mediante su
dominio citoslico con molculas localizadas
en el citosol, especialmente con protenas del
citoesqueleto. Esta interaccin incrementa la
unin de la protena transmembrana a la
membrana celular de tal modo que su
extraccin requerir el ejercer una mayor
fuerza.

En el caso especfico de la selectina P, el


extremo carboxiloterminal de la protena
interacta con protenas de anclaje a
filamentos de actina.

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Una ilustracin de la detencin rodante de las selectinas. Recuadro: un modelo de


organizacin estructural de selectinas y unin de un ligando de leucocito.
(Lewins cells. 3rd ed. 2015)

3. Contraste los papeles del colgeno y proteoglicanos en el espacio extracelular.


COLGENO
Los colgenos comprenden una familia de glicoprotenas fibrosas que estn
presentes slo en las matrices extracelulares.
Los colgenos se encuentran en todo el reino animal y se caracterizan por su alta
resistencia a la traccin, es decir, su resistencia a las fuerzas de traccin. Se
estima que una fibra de colgeno de 1 mm de dimetro es capaz de suspender un
peso de 10 kg (22 libras) sin romperse.
El colgeno es la protena ms abundante en el cuerpo humano (que constituye
ms de 25 por ciento de todas las protenas).
El colgeno es producido principalmente por los fibroblastos, las clulas que se
encuentran en varios tipos de tejidos conectivos, y tambin por clulas de msculo
liso y clulas epiteliales.
Se han identificado 27 tipos diferentes de colgeno humano. Cada tipo de
colgeno est restringido a determinados lugares dentro del cuerpo, pero dos o
ms tipos diferentes a menudo estn presentes juntos en la misma matriz
extracelular.
Todas las molculas de colgeno son trmeros compuestos por tres cadenas de
polipptidos, denominadas -cadenas.
En una parte de su longitud, las tres cadenas de polipptidos de una molcula de
colgeno se enrollan uno alrededor del otro formando una nica estructura triple
hlice.
Las cadenas de las molculas de colgeno contienen grandes cantidades de
prolina, y muchos de los residuos de prolina (y lisina) son hidroxilados despus de
la sntesis del polipptido. Los aminocidos hidroxilados son importantes en el
mantenimiento de la estabilidad de la triple hlice mediante la formacin de
enlaces de hidrgeno entre las cadenas componentes.

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PROTEOGLICANOS
Las membranas basales y otras matrices extracelulares suelen contener grandes
cantidades de un tipo distintivo de complejo protena-polisacrido llamado
proteoglicano.
Un proteoglicano consiste en una molcula de protena ncleo a la que las
cadenas de glicosaminoglicanos (GAGs) se unen covalentemente. Cada cadena
de glicosaminoglicano se compone de un disacrido de repeticin; es decir, que
tiene la estructura -ABABA-, donde A y B representan dos azcares diferentes.
Los GAGs son muy cidos debido a la presencia de ambos grupos sulfato y
carboxilo unidos a los anillos de azcar.
Debido a las cargas negativas presentes en los GAGs sulfatados, los
proteoglicanos se unen un gran nmero de cationes, que a su vez se unen un gran
nmero de molculas de agua.
Como resultado, los proteoglicanos forman un gel poroso, hidratado que llena el
espacio extracelular como material de embalaje y resistente a las fuerzas de
aplastamiento (compresin).
Esta propiedad complementa la de las molculas de colgeno adyacentes, que
resisten fuerzas de traccin y proporcionan un andamio para los proteoglicanos.
Juntos, colgenos y proteoglicanos ofrecen al cartlago y a otras matrices
extracelulares fuerza y resistencia a la deformacin.
La matriz extracelular del hueso adems se compone de colgeno y
proteoglicanos, pero se endurece mediante impregnacin con sales de fosfato de
calcio.

Resumen de estructuras de proteoglucano. Todos los proteoglucanos tienen cadenas GAG


fijas a una protena central. Los proteoglucanos son secretados o estn fijos a membranas
celulares mediante un dominio central que abarca la membrana o por medio de un ancla
glucosilfosfatidilinositol fija a la protena central.
(Lewins cells. 3rd ed. 2015)

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Los GAG se clasifican de acuerdo con el tipo de disacrido repetitivo que contienen. Los
grupos sulfato estn aadidos en las posiciones puestas de relieve en los disacridos.
(Lewins cells. 3rd ed. 2015)

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CMO LA FIBRONECTINA Y LAMININA CONTRIBUYEN AL DESARROLLO


EMBRIONARIO?

El desarrollo se caracteriza por las olas de migracin celular durante la cual


diferentes clulas siguen diferentes rutas de una parte del embrin a otro.
La migracin de clulas es guiada por protenas, tales como la fibronectina,
contenidas dentro del paisaje molecular a travs de la cual pasan.
o Por ejemplo, las clulas de la cresta neural, que migran fuera del sistema
nervioso en desarrollo a prcticamente todas las partes del embrin,
atraviesan vas ricas en fibrillas compuestas de molculas de fibronectina
interconectadas.

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Las lamininas son una familia de glicoprotenas extracelulares que constan de tres
cadenas polipeptdicas diferentes unidos por enlaces disulfuro y organizados en
una molcula semejante a una cruz con tres brazos cortos y un brazo largo.
o Al menos 15 diferentes lamininas han sido identificadas.
Al igual que la fibronectina, la laminina extracelular puede influenciar gran medida
el potencial de una clula para la migracin, el crecimiento y la diferenciacin. Por
ejemplo, las lamininas desempean un papel fundamental en la migracin de
clulas germinales primordiales.
Estas clulas se encuentran en el saco vitelino, que se encuentra fuera del propio
embrin, y luego migran a travs del torrente sanguneo de los tejidos y embriones
a la gnada en desarrollo, donde finalmente dan lugar a los espermatozoides o los
vulos.
Durante su migracin, las clulas germinales primordiales atraviesan superficies
que son particularmente ricas en laminina.
Los estudios indican que las clulas germinales primordiales poseen una protena
de la superficie celular que se adhiere fuertemente a una de las subunidades de
la molcula de laminina

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Fibronectina

Un modelo del andamio de la membrana basal. Las membranas basales contienen dos molculas
formando una red, de colgeno IV (rosa), y laminina (verde), que est indicado por las molculas en
forma de cruz engrosadas. Las redes de colgeno y lamininas estn conectadas por molculas de
entactina (prpura)

4. Explique qu sucede a nivel molecular cuando un leucocito migra desde el interior de un


vaso sanguneo hacia el espacio intercelular.

Los leucocitos dejan el espacio vascular a travs de los siguientes eventos:


o Marginacin y rodamiento
o Adhesin y transmigracin
o Quimiotaxis y activacin
Las citocinas liberadas por lesin activan las clulas endoteliales de las vnulas e
inducen la expresin superficial de P-selectina, la cual interacta con
glicoprotenas leucocitarias (PSGL-1++).
Como resultado de dicha interaccin los leucocitos ruedan a lo largo del endotelio
formando uniones en el frente de avance y rompindolas en la retaguardia.
La L-selectina expresada en la superficie de los leucocitos y la E-selectina
expresada por las clulas endoteliales activadas participan tambin en el proceso
de rodamiento a travs de la interaccin con otros ligandos glicosilados.

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SEMANA 12
SEMINARIO II-3

RECEPCIN CELULAR. MECANISMOS MOLECULARES.

1. Las clulas se comunican de maneras que se asemejan a la comunicacin humana.


Decida cul de las siguientes formas de comunicacin humana son anlogas a la
comunicacin autocrina, paracrina, endocrina, y la sealizacin sinptica de las clulas,
explique:
a. Una conversacin telefnica.
b. Hablar con personas durante una fiesta.
c. Un anuncio en la radio.
d. Hablar consigo mismo

Las clulas pueden detectar seales tanto qumicas como fsicas. Las seales fsicas por lo
general se convierten en seales qumicas a nivel del receptor

Comunicacin
Comunicacin Explicacin
humana
Autocrina Hablar consigo La clula que produce el mensaje expresa receptores en su
mismo superficie capaces de responder a ese mensajero.
En algunos casos, las clulas pueden responder a los
mediadores locales que ellas mismos producen.
En consecuencia, las clulas que liberan el mensaje se
estimularn (o inhibirn) a s mismas
Paracrina Hablar con Las molculas mensajeras viajan slo distancias cortas a
personas travs del espacio extracelular a las clulas que se encuentran
durante una en las proximidades de la clula que genera el mensaje.
fiesta En lugar de entrar en el torrente sanguneo, las molculas de
seal difunden localmente a travs del fluido extracelular, que
queda en la vecindad de la clula que la secreta.
Actan como mediadores locales en las clulas cercanas.
Muchas de las molculas seal que regulan la inflamacin en el
sitio de una infeccin o el control de la proliferacin celular en
la curacin de heridas funcionan de esta manera.
Las molculas mensajeras paracrinas generalmente estn
limitadas en su capacidad para viajar por todo el cuerpo, ya
que son inherentemente inestables, o son degradados por las
enzimas, o se unen a la matriz extracelular.
Endocrina Un anuncio en Las molculas mensajeras alcanzan sus clulas diana por
la radio medio del paso a travs del torrente sanguneo.
Los mensajeros endocrinos tambin se denominan hormonas,
y por lo general actan sobre las clulas diana localizadas en
sitios distantes en el cuerpo
Las molculas de sealizacin extracelular utilizadas de esta
manera se denominan hormonas, y, en los animales, las
clulas que producen hormonas se llaman clulas endocrinas.
En los organismos multicelulares, el estilo ms "pblico" de la
comunicacin de clula a clula implica transmitir la seal a lo
largo de todo el cuerpo mediante la secrecin en el torrente
sanguneo de un animal o la savia de la planta.
Sealizacin Una Al igual que las clulas endocrinas, las clulas nerviosas
sinptica conversacin (neuronas) pueden transmitir mensajes a travs de largas
telefnica distancias.
En el caso de la sealizacin neuronal, un mensaje no se
difunde ampliamente, pero en su lugar se entrega rpida y
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especficamente a las clulas diana individuales a travs de


lneas privadas (nervios).
Para conseguir una mayor rapidez de propagacin el axn est
envuelto por una capa aislante, la vaina de mielina, que
facilita que la velocidad del impulso nervioso alcance los 120
m/s.
En el extremo del axn neuronal la vaina desaparece y el
impulso elctrico se encuentra con la sinapsis, una hendidura
que debe salvar para pasar o no a la siguiente clula.
Al llegar el impulso elctrico al final del axn, estimula la
liberacin a la hendidura sinptica de las sustancias qumicas
elaboradas en el interior de la neurona, llamadas
neurotransmisores, que son las que contienen la
informacin que trasmite la neurona. Existen diferentes tipos
de neurotransmisores y cada neurona est especializada en
sintetizar un determinado tipo.
(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).
(Clulas. Lewin. 2da edicin.2012)
(Cell and Molecular Biology. Concepts and Experiments. Gerald Karp. 7th edition. 2013)
(https://neuropediatra.org/2014/06/04/sinapsis-neuronal/)

(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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2. Qu entiende por transduccin de la seal? Seale ejemplos.

Transduccin de seal celular:


Proceso de detectar estmulos externos y transmitir la informacin inherente a blancos
intracelulares.
El proceso global en el que la informacin transportada por molculas mensajeras
extracelulares se traduce en cambios que ocurren dentro de una clula se conoce
como la transduccin de seales.

Las seales transmitidas a lo largo de las vas de sealizacin en ltima instancia


llegan a protenas diana que participan en procesos celulares bsicos.

Dependiendo del tipo de clula y el mensaje, la respuesta iniciada por la protena


diana puede implicar un cambio en la expresin gnica, una alteracin de la actividad
de las enzimas metablicas, una reconfiguracin del citoesqueleto, un aumento o
disminucin en la movilidad celular, un cambio en permeabilidad a los iones, la
activacin de la sntesis de ADN, o incluso la muerte de la clula.
Prcticamente todas las actividades donde participa una clula est regulado por
seales que se originan en la superficie celular.

Ejemplos:
Receptores acoplados a protenas G (GPCR)
o Una gran familia de receptores que contienen siete -hlices
transmembrana.
o Promueven la activacin de protenas de unin a GRTP heterotrimricas
llamadas protenas G, que se asocian con la cara interna de la membrana
plasmtica y transmiten seales hacia mltiples protenas intracelulares.

(http://1.bp.blogspot.com/-PK7YlKuJEoA/Un5ZLygSjrI/AAAAAAAAHhc/gh4DfstAndc/s1600/%25C3%259Cbersicht+GPCR+Liganden.png)

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(http://4.bp.blogspot.com/-zfuM9lBDo4Y/UHLVdZ7mSgI/AAAAAAAAC5Y/7RP7gsvuDgs/s1600/%C3%9Cbersicht+Effekt+G%C2%B4Proteine.jpg)

http://www.nature.com/nrc/journal/v7/n2/images/nrc2069-f1.jpg

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(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Receptor de protenas tirosina quinasas (RTK)


o Representan una segunda clase de receptores que han evolucionado para
traducir la presencia de molculas mensajeras extracelulares en cambios
en el interior de la clula.

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o Usualmente son dmeros de protenas que abarcan la membrana una sola


vez, que fosforilan sus sustratos intracelulares y, as, cambian la forma de
las protenas blanco y la funcin de las mismas.
o Las protena cinasas a menudo contienen dominios de interaccin con
protena que organizan complejos de protenas emisoras de seales sobre
la monocapa citoslica de la membrana celular.

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

(http://www.vi.cl/gepe/12-05.jpg)

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

Otras enzimas que atraviesan una sola vez la membrana, como la guanil ciclasa,
tienen una estructura general similar a las protena cinasas receptoras pero
diferentes actividades enzimticas.
La adenil ciclasa cataliza la conversin de ATP en 3:5-AMT cclico, que se usa
para propagar la seal.
La guanil ciclasa cataliza la conversin de GTP en 3:5-GMT cclico, que se usa
para propagar la seal.

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Fosfoprotena fosfatasas
o Revierten el efecto de las protena cinasas al eliminar los grupos fosforilo
aadidos por estas ltimas.

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Canales activados por ligando


o Representan una tercera clase de receptores de superficie celular que se
unen a ligandos extracelulares.
o Las subunidades cambian su conformacin y su orientacin relativa para
permitir el flujo inico a travs de un poro central.

Receptores de hormonas esteroides


o Funcionan como factores de transcripcin regulados por ligando.
o Las hormonas esteroides difunden a travs de la membrana plasmtica y
se unen a sus receptores, que estn presentes en el citoplasma.
o La unin de la hormona produce un cambio conformacional que hace que
el complejo hormona-receptor se mueva hacia el ncleo y se una a los

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elementos presentes en los promotores o potenciadores de genes


sensibles a hormonas.
o Esta interaccin da lugar a un aumento o disminucin en la tasa de
transcripcin del gen.

Existe una serie de otros tipos de receptores que actan por mecanismos nicos.
Algunos de estos receptores, por ejemplo, los receptores de clula B o T que estn
implicadas en la respuesta a antgenos extraos, se asocian con molculas de
sealizacin conocidas como las protena-tirosina quinasas citoplasmticas.

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3. Cmo el uso de una cascada de reaccin resulta en la amplificacin de una seal?


Cmo aumenta las posibilidades de regulacin metablica?

Los receptores rara vez actan de manera directa sobre los procesos
intracelulares que finalmente regulan.
Los receptores inician una secuencia de eventos reguladores que comprenden
protenas intermediarias y molculas pequeas.
El uso de vas de emisin de seales de mltiples pasos permite a las clulas
amplificar seales, ajustar la cintica de emisin de seales, insertar puntos de
control, integrar seales mltiples, y mandar seales a distintos efectores.
Las vas ramificadas otorgan a las clulas la capacidad para integrar mltiples
seales entrantes, y dirigir informacin hacia los puntos de control correctos. La
ramificacin puede ser convergente, con regulacin de puntos terminales
comunes por seales mltiples, o divergente, con ramificacin de una va nica
para controlar ms de un proceso.

(Clulas. Lewin. 2da edicin.2012)

Las molculas sealizadoras intracelulares de gran tamao son protenas


sealizadoras intracelulares, que participan en la liberacin de la seal dentro de
la clula generando pequeos mediadores intracelulares o activando la protena
sealizadora o efectora siguiente de la va.
Estas protenas forman una red funcional en la que cada protena colabora en el
procesamiento de la seal de una u otra de las siguientes maneras, de forma que
difunden la influencia de la seal por toda la clula.

(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

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Las entradas de estas redes son los receptores que captan las seales del exterior
y que suelen tener un dominio extracelular, un dominio transmembrana y un
dominio intracelular.
Estos receptores pueden unir molculas especficas llamadas ligandos solubles o
interactuar con otros receptores de membrana de otras clulas.
Muchos receptores al unir su ligando cambian la conformacin de su porcin
intracelular que se activa.
Esta activacin puede realizar un cambio qumico especfico (frecuentemente
fosforilacin) sobre alguna protena intracelular.
Una vez fosforilada la protena, sta tiene capacidad para modificar (fosforilar) a
otras protenas que a su vez modifican a otras y as sucesivamente.
Estas cascadas de sealizacin se entrecruzan unas con otras dibujando unas
complejas redes que son capaces de integrar la informacin de los estmulos y
estados externos e internos.
En estas cascadas de sealizacin se suele producir un proceso de amplificacin
de la seal ya que cada elemento activa a ms de uno, y segn avanzamos de
nivel puede haber ms elementos involucrados.
Para limitar en el tiempo la accin de la seal y preparar la red para detectar
nuevos estmulos se necesita que acten las fosfatasas que retiran el fsforo de
las quinasas inactivndolas.
Un fino equilibrio entre la accin de quinasas y fosfatasas es clave en las redes de
fosforilacin.
( http://medmol.es/temas/70/ )

Las clulas diana pueden utilizar una gran variedad de mecanismos intracelulares,
incluyendo los circuitos de retroalimentacin, para ajustar la forma en la que
responden a seales extracelulares.
Los circuitos de retroalimentacin positiva pueden ayudar a la clula a responder de
forma todo o nada a un incremento gradual en la concentracin de una seal
extracelular o a convertir una seal de corta duracin en una respuesta de larga
duracin o incluso irreversible.
La retroalimentacin negativa retrasada permite a la clula desensibilizarse a una
molcula seal, lo cual posibilita responder a pequeas variaciones de la
concentracin de la molcula seal en un amplio rango de concentraciones.
(Molecular Biology of the Cell / Bruce Alberts [et al.].-- 5th ed. 2008).

4. Cul es el mecanismo de la formacin del segundo mensajero Inositol tri-fosfato (IP3)?


Cul es la relacin entre la formacin de IP3 y una elevacin de calcio intracelular?
Cmo es que la concentracin calcio inico (Ca+2) del citosol se mantiene a un nivel tan
bajo? Cmo afecta el cambio de concentracin calcio inico en respuesta a los
estmulos?
Dos pequeas molculas mensajeras se producen cuando un fosfolpido inositol de
membrana es hidrolizado por la fosfolipasa C activada.
El inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) difunde a travs del citosol y desencadena la
liberacin de Ca+2 desde el RE mediante la unin y la apertura de canales de Ca+2
especiales en la membrana del RE.
El gran gradiente electroqumico para Ca+2 a travs de esta membrana hace que el
Ca+2 salga precipitadamente del RE hacia el citosol.

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El diacilglicerol permanece en la membrana plasmtica y, junto con Ca+2, ayuda a


activar la enzima protena quinasa C (PKC), que es reclutada desde el citosol a la
cara citoslica de la membrana plasmtica.
La PKC fosforila su propio conjunto de protenas intracelulares, propagando an
ms la seal. Al comienzo de la va, tanto la subunidad y la subunidad de la
protena Gq T estn implicados en la activacin de la fosfolipasa C.

(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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El Ca+2 tiene un papel muy importante y generalizado como un mensajero intracelular.


Un aumento de la concentracin citoslica de Ca+2 libre es provocada por muchos
tipos de estmulos celulares, no slo las que actan a travs de los GPCRs
(Receptores acoplados a Protena G).
Cuando un espermatozoide fecunda un vulo, por ejemplo, se abren canales de Ca+2,
y el consiguiente aumento de Ca+2 citoslico activa al vulo para empezar el
desarrollo; para las clulas musculares, una seal nerviosa provoca un aumento de
Ca+2 citoslico que inicia la contraccin muscular; y en muchas clulas secretoras,
incluyendo las clulas nerviosas, el Ca+2 desencadena la secrecin.
El Ca+2 estimula todas estas respuestas al unirse e influir en la actividad de diversas
protenas que responden al Ca+2 .
(Essential cell biology / Bruce Alberts [and seven others]. -- Fourth edition. 2014).

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(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

(Cell and Molecular Biology Concepts and Experiments Gerald Karp 7th edition, 2013).

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5. Los receptores nucleares tienen un sitio de unin para una molcula seal y para una
secuencia de ADN. Cmo es posible que receptores nucleares idnticos en diferentes
clulas puedan activar genes diferentes cuando se unen a una misma molcula seal?

Varias molculas pequeas e hidrofbicas difunden de forma directa a travs de la


membrana plasmtica de las clulas diana y se unen a protenas receptoras
intracelulares que son protenas reguladoras de genes.
Estas molculas seal incluyen las hormonas esteroideas, las hormonas tiroideas, los
retinoides y la vitamina A.
Las respuestas a las hormonas esteroideas y tiroideas, a la vitamina D y a los
retinoides estn determinadas tanto por la naturaleza de la clula diana como por la
naturaleza de la molcula seal.
A pesar de que diferentes tipos celulares tengan receptores intracelulares idnticos,
el conjunto de genes que regula el receptor es diferente en cada tipo celular. Ello es
debido a que generalmente, para que se active la transcripcin de cada gen eucariota,
es necesaria la unin de ms de un tipo de protena reguladora.
Por ello, un receptor intracelular puede activar un gen slo si se produce la
combinacin adecuada de otras protenas reguladoras de la expresin gnica, siendo
algunas de ellas especficas del tipo celular.
(Molecular Biology of the Cell / Bruce Alberts [et al.].-- 5th ed. 2008).

Varias pequeas, molculas hidrofbicas de sealizacin se difunden directamente a


travs de la membrana plasmtica de las clulas diana y se unen a receptores
intracelulares que son reguladores de la transcripcin. Estas molculas seal incluyen
hormonas esteroideas, hormonas tiroideas, los retinoides, y vitamina D. Aunque
difieren mucho entre s, tanto en su estructura qumica y la funcin, todos actan por
un mecanismo similar.
Se unen a sus respectivas protenas receptoras intracelulares y alteran la capacidad
de estas protenas para controlar la transcripcin de genes especficos. Por lo tanto,
estas protenas sirven como receptores intracelulares y como efectores intracelulares
para la seal.
Todos los receptores estn estructuralmente relacionados con la gran superfamilia de
receptores nucleares. Muchos miembros de la familia han sido identificados por
secuenciacin del ADN solamente, y su ligando an no se conoce; por lo tanto, se
denominan como los receptores nucleares hurfanos, y constituyen grandes
fracciones de los receptores nucleares codificados en los genomas de los seres
humanos, Drosophila, y el nematodo C. elegans. Algunos receptores nucleares de
mamferos estn regulados por metabolitos intracelulares ms que por molculas de
sealizacin secretadas; los receptores de proliferacin de peroxisoma activados
(PPARs), por ejemplo, se unen a metabolitos de lpidos intracelulares y regulan la
transcripcin de genes implicados en el metabolismo de los lpidos y la diferenciacin
de clulas adipososas. Es probable que los receptores nucleares de hormonas
evolucionaron a partir de tales receptores de metabolitos intracelulares, lo que
ayudara a explicar su localizacin intracelular.
Todos los receptores nucleares se unen a secuencias especficas de ADN adyacentes
a los genes que el ligando regula. Algunos de los receptores, tales como los de
cortisol, se localizan principalmente en el citosol y entrar en el ncleo slo despus
de la unin al ligando; otros, tales como los receptores tiroideos y los receptores de
retinoides, se unen al ADN en el ncleo, incluso en ausencia de ligando. En cualquier
caso, los receptores inactivos estn generalmente ligados a complejos de protenas

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inhibidoras. La unin del ligando altera la conformacin de la protena del receptor,


haciendo que el complejo inhibidor se disocie, mientras que tambin hace que el
receptor se una a las protenas coactivadoras que estimulan la transcripcin de genes.
En otros casos, sin embargo, la unin del ligando al receptor nuclear inhibe la
transcripcin: algunos receptores de hormonas tiroideas, por ejemplo, actan como
activadores transcripcionales en ausencia de la hormona y se convierten en su
represores transcripcionales cuando se une la hormona.
(Molecular Biology of The Cell. Bruce Alberts. Sixth Edition, 2015)

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