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EFECTO DE LA INTENSIDAD Y CALIDAD DE LUZ

EN EL DESARROLLO DE POBLACIONES DE
BACTERIAS FOTOTR~FICASVERDES DEL AZUFRE
EN UNA COLUMNA EXPERIMENTAL DE LABORATORIO
I.V. Pibernat y C.A. Abella
Instituto de Ecología Acuática y Departamento de Biología. Facultad de Ciencias Experimentales y de la Salud.
Universidad de Girona. P1. Hospital, 6, E-17071 GIRONA.

Keywords: competence, actinic light filter, Chlorobium limicola, C . phaeobacteroides, ecophysiology.

ABSTRACT

EFFECT OF LIGTH QUALITY AND INTENSITY ON THE GROWTH OF GREEN SULFUR BACTERIA
IN AN EXPERIMENTAL COLUMN
This study was made using two experimental semicolumns of 130 cm long. One semicolumn was used as control and the
other with an actinic light filter. Both semicolumns were equipped with a temperature control of water and a system to
introduce sulphide in the bottom layers of the water column. Hence the laboratory column represents an ecosystem similar
to the water column of many lakes, and allows the study of competence between C . limicola and C . phaeobacteroides,
species of Green Sulphur-bacteria in relation to controlled light conditions.
The main difference between both semicolumns was the incident light. Every one were illuminated from above using a lamp of 40
W with an incident radiation of 30.3 pE m-2S-' The other semicolumn had an actinic light filter of I M CuSO, between the lamp and the
water column. The initial radiation measured was 5.1 pE m-2S-'.
The quality and intensity of light from both columns determine the differential growth of Green Sulphur bacterial populations. The
ligth intensity could determine the high concentration of photosynthetic pigments in the control semicolumn (550 pg/l Bclor-c and e)
in relation to 325 pg/l Bclor-c and e measured in the semicolumn with actinic filter. In the column with actinic filter the brown
population of C. phaeobacteroides was enriched 10 cm above in the water column (90 cm depth) than the control semicolurnn where
the plate of bacterial population was situated at 100 cm depth showing the effect of higher ligth intensity.

condiciones no limitantes d e luz (VAN GEMERDEN,
1981, 1987).
La luz es la fuente de energía para las bacterias fototró- En este estudio se cuantifica la importancia de la ilumi-
ficas del azufre. La intensidad de luz determina el número nación en el desarrollo de poblaciones de Clorobiáceas,
de fotones que llegan a una determinada profundidad en Chlorobium limicola y C . phaeobacteroides en una colum-
una columna de agua; mientras que la calidad de luz de- na experimental de laboratorio. Se focaliza en el estudio
pende del espectro de luz. Es la calidad de luz quien con- de: (1) -el efecto de la calidad y intensidad de la luz en re-
diciona la energía de los fotones y facilita la excitación de lación a la competencia entre poblaciones de Chlorobium
las moléculas de bacterioclorofila y pigmentos accesorios limicola y C . phaeobacteroides y (2) -determinar el efecto
de la fotosíntesis (KIRK, 1979). La radiación solar y la ecofisiológico producido por diferencias de iluminación
iluminación presente en determinadas capas anaeróbicas en las poblaciones de bacterias verdes del azufre.
de lagos ha sido relacionada con la presencia de las bacte-
rias fototróficas del azufre (ABELLA, 1982; VILA, 1992).
La concentración de poblaciones de bacterias fototróficas
del azufre depende de la concentración de sulfhídrico en El estudio se ha realizado en una columna de laborato-

Limnética, 10 (1): 137-142(1994)
O Asociación Española de Limnología, Madrid. Spain

pero ha sido modi- ficada con la finalidad de obtener dos semicolumnas. SINOS (1 982). El filtro actínico presenta un espectro más es- trecho que comprende longitudes de onda entre 450 y 600 nm. Ambas semicolumnas fueron llenadas con medio de culti- vo Pfennig (pH 6. El PAR inicial medido es de 5 .100.Spectral distribution of ligth in both semicolumns used in this work. El pH fue medido con pHmeter Crison8 5 0 6 y el potencial de óxido-reducción FIGURA 1. La concentración de sulfhídrico se ha medido utilizando el método del azul de metileno (PACHMAYER. Esta columna experimental ha sido descrita pre- viamente por PIBERNAT et al.Representación de los espectros medidos en la bombilla de 40 W (A). FIGURE 2. phaeobacteroides al ini- cio del estudio (Fig 1).. (1992).7 lux.Schematic representation of the experimental column used in this work. La iluminación se ha realizado con una bombilla de 40 W si- tuada 25 cm por encima de la columna. iluminación que recibía la columna control y la columna con filtro actínico de luz (B).. (IM) mientras que la otra mitad ha sido utilizada como control. de 500 a 1100 nm. . l pE m-2s ' y la intensi- dad de luz de 88.7) para bacterias fototróficas y se ha inoculado un volumen determinado de una mezcla al 50% entre cultivos de C. Espectro de la luz a través del filtro actínico (CuS04) El espectro de luz de la bombilla de 40 W utilizada para este estudio (Fig 2) manifesta un enriquecimiento en la FIGURA 2. cuantificados utilizando el método descrito por MONTE- FIGURE 1. Los pigmentos estudio. banda del infrarrojo. A una mitad de la columna se ha colocado un filtro actínico de CuSO. Se divide la columna en dos mitades para poder disponer de fotosintéticos y la concentración de azufre (S") han sido una de control. lirnicola y C .3 pE m S-' con una intensidad de luz de 817 lux.Esquema de las semicolumnas utilizadas para el presente con un electrodo de Pt Metrom 6. La temperatura y conductividad del agua han sido medi- das con un termómetro T-637 y conductivímetro 523 Cri- s o n 8 respectivamente. La intensidad de luz ha sido medi- da utilizando un luxómetro Megatron. El PAR inicial- mente medido es 30.0401. 1960)...rio de 130 cm de largo por 11 de diámetro dividida en dos Espectro de la bombilla de 40 W mitades.

: senta la relación espacio-temporal de la concentración de Conc. la concentración de C. En la semicolumna con filtro de azufre en condiciones naturales son la calidad e intensidad luz (Fig 5b) se observa un enriquecimiento de Bchlor-e de luz y la concentración de sulfhídrico.Relación entre el porcentaje relativo entre C. senta una alta concentración (400 pg/l) al inicio del El desarrollo de las poblaciones de bacterias fototrófi. Para calcular el porcentaje entre poblaciones de Chloro- bium limicola y C.icterio- clorofila elc. limicola = 100 . Finalmente. phaeo. phaeobacteroides en la se- micolumna control y en la semicolumna con filtro. 5c y 5d se representa la relación espacio-tem- semicolumnas.(% C. phaeobacteroides) cando la concentración de C. la s e l o c a l i z a e n t r e l o s 80 y 90 c m d e p r o f u n d i d a d c o n v a - .. pigmentos fotosintéticos en ambas columnas.Relation between percentage of C. E n l a Fig. filtro y control. control) a lo largo del estudio. pigmentos fotosintéticos de ambas poblaciones. FIGURA 4.Time course of sulfide concentration in both semicolumns. estudio entre los 70 y 100 cm de profundidad en la semi- cas del azufre se ha medido en base a las concentraciones columna control. phaeobacte- roides y C. La máxima concentración se presenta al inicio centración de poblaciones de bacterias fototróficas del del estudio con 150 pg/l.190-0.Representación espacio-temporal de la concentración de torio. se han mantenido constantes los niveles de H. En la semicolumna filtro. bacteroides) La Bchlor-e se representa en las Figuras 5a y 5b indi- % C.. 5 s e repre. La máxima concentración de H2S medi. los 150 pg/l de Bchlor-c. se estabiliza la población en de pigmentos fotosintéticos.S en ambas En la Fig. limlcola con la relación entre la concentración de b. phaeobacteroideslC. Bchlor-e/Bchlor-c = 0. fundidad. No se observan diferencias importantes para determinar un crecimiento diferencial de las poblaciones de Cloro- m e n t o ~fotosintéticos al mezclar ambas poblaciones. bacterio- clorofila-e y c con un r 2 de 0. En este estudio se entre los 80 y 100 cm de profundidad con máximo anali- pretende determinar el efecto de la iluminación por lo que zado al final del estudio de 125 pg/l. Se ma- RESULTADOS nifiesta una disminución a lo largo de todo el estudio en la semicolumna control con plate entre 85 y 110 c m de pro- Los dos parámetros que determinan la presencia y con. limicola and Bchl elc concentration. limico- c y c l o r o b a c t e n o p a r a C. poral de la concentración de Bchlor-c en las semicolum- senta en la Fig 4. En la Fig 3 se representa la recta de calibracion ob.. La relación utilizada se basa en la concentración de los FIGURE 4. O Columna control L H2S (*M)& 50 =f T Columna filtro L % C. phaeobacteroides and C.lirnicola FIGURA 3. biáceas. sulfiídrico medido en ambas semicolumnas (columna filtro y columna tenida a partir de la relación entre concentraciones de pig. limicola pre- da es de 750 pM. FIGURE 3.009 (% C. La concentración de sulfhídrico s e repre. limicola. phaeobacteroides. phaeobacteroides en la columna se ha Tiempo (dias) realizado una recta de calibración con cultivos de labora. La concentración de C. Bchlor-e y isorenierateno pa.9789.. nas. ra determinar presencia de C. y Bchlor.

. En la Fig. phaeobacteroides y Bclor -c a C. Bclor-e representa a C. Esta característica obliga a las poblaciones FIGURA 6. Se observa una mayor concentración de azufre elemental en la co. En la columna control. 6 se representa la relación espacio-temporal de la concentración de S o en las columnas control y filtro.. Columna con filtro C. El So producido por la fotosíntesis de estas po- J so(~s/mi& blaciones y por la oxidación química del sulfhídrico. . limicola. el máximo es de O Columna con Iikro 6 pg/ml. trcnior-e (pgiij p ..Time-depth distribution of bactenochlorophyll concentration in both semicolumns.Time course representationof elemental sulfur (So) concentration mea- la Bclor-e está alrededor de los 725 nm fuera del límite sured in column-control (upper) and column with actinic filter (bottom par).oiumna control o . vés de los sistemas de carotenos. FIGURE 5. -t- . sedi- .. El plate en esta columna se b estrecha en una zona comprendida entre los 70 y los 85 50 5 ' cm de profundidad. . mientras que FIGURE 6. . . los valores obtenidos son inferiores. Fig. La absorbancia in vivo lumna control a lo largo de todo el estudio. la iluminación se caracteriza por un enriquecimiento en la banda del infrarrojo del espectro de O 10 20 30 40 emisión siendo esta luz rápidamente absorbida por la co- Tiempo (días) lumna de agua... O Columna control so (lrqtml) J lores de 200 pg/l de Bchlor-c. mientras que las representaciones 5b y 5d perte- necen a la columna con filtro actínico. En nuestro estudio.. 5 4 menta al fondo de la columna al no haber ningún sistema de agitación.Representación espacio-temporal de la concentración de azufre ele- mental (S") medido en ambas $emicolumnas. I Bchlor-e (pg/l& 50 100 5b Bchlor c ( ~ g f l ) Bchlor-c (pg/l) i n n -1 II Tiempo (días) FIGURA 5. la máxima concentración medida es de 7 pg/ml de So localizada en el fondo de la columna al inicio del estudio. mientras que en la columna con fil- tro.la control (superior) y la con filtro ac- de bacterias fotosintéticas del azufre a captar la luz a tra- tínico (inferior).Representación espacio-temporal de la concentración de pigmentos fotosintéticos.. 5a y 5c representan el comportamiento de ambas poblaciones en la columna de control.. de la bacterioclorofila-c está en los 745 nm. a .

phaeobacteroides 1 C. limicola. el porcentaje se mantiene alrededor del 50% entre ambas po- blaciones. limicola O 50 100 50 50 50 50 50 50 100 Columna control: % C. Se observa que en la columna control. C.Time-depth representation of C. El dos han sido obtenidos. phaeoliacteroides percentage in the mixed population in both semicolumns. en base a la recta de calibración (ver Material roides (473-524 nm) se encuentra en la zona media del es- y Métodos) utilizando los pigmentos fotosintéticos. así se mantienen los 100 cm de profundidad. Estos resulta. phaeo- dio en ambas semicolumnas experimentales. mientras que ximo porcentaje de la población de C. bacteroides frente a la población verde de C. limicola a lo largo del estu. phaeobacteroides el máximo de concentración del clorobacteno (C. mientras que en la columna con filtro se manifiesta un enriquecimiento de la población de C. favorece el crecimiento de la población marrón. lirnicola O 50 100 50 50 50 50 50 50 100 FIGURA 7. FIGURE 7. phaeobacteroides / C..7 % en la columna con filtro localizado a los 77 cm La intensidad de luz en la columna control es un 20 % de profundidad. phaeobacte- laboratorio. C. Columna con filtro: % C. En la columna control se mantiene en un superior lo cual permite el crecimiento en competencia 50. limicola en las semicolumnas control y con filtro actínico. 7 se representa el porcentaje de la población el espectro de emisión en la columna con filtro actínico de C. In the column with actinic fil- ter the percentage increases in relation to control. phaeobacteroides y C .Representación espacio-temporal del porcentaje relativo de la población de C. Los resultados obtenidos indicarían que la reducción en En la Fig. pectro de luz que atraviesa el filtro actínico. . limicola. es 67.2 % de C. phaeobacteroides (zona tramada) en relación a C. phaeobacteroides. phaeobacteroides con máximo localizado a por el sulfhídrico de las dos poblaciones. del espectro de luz que deja pasar el filtro actínico. previa calibración con cultivos de máximo de absorbancia del isorenierateno. El má.. en un porcentaje del 50% las dos.

Thesis. 1982. Por lo que la VAN GEMERDEN. Thesis. phaeohacteroi. C . (1992). Ph. 47 (2): 13-27. . 1991. hetically Active Radiation in some south-eastern austra- drico y por las longitudes de onda capaces de poner en lian waters. VILA. 17: 55-62. D . VAN GEMERDEN. Munich Univ. GARCÍA-GIL. Microorganismes planctonics fotosin- mación acerca del espectro de luz por el que compiten tétics i composició espectral de la llum a la zona lacustre ambas poblaciones de bacterias Clorobiáceas. media máximo Bchlor-c (cm) 85 94 458 nm) se localiza en la zona extremo del espectro de luz .Summary of the characters studied in both columns (control and with actinic filter) in relation to growth of green sulfur bacteria. El filtro actínico. ensis. Ph.T. Univ. limlcola (días) 7. X.. Microbiol. Freshwater Res. actividad fotosintética se localize unos 10 cm por enci. producción So (cm) 85. Coexistence of Chloro- calidad de luz (y no la intensidad de luz) en nuestro sis. la iluminación parece determinar el crecimiento dife. Scientia gerundensis.4 49. H. en condiciones naturales.2 Porcentaje medio población C.. funcionamiento el sistema fotosintético. Inst. 1982). Tesina Licenciatura. Girona. media máximo Bchlor-e (cm) 90 90 Prof. Acta Academica Abo- en el laboratorio con la utilización de la fibra óptica co. ABELLA.A. bium and Chromatium in a Sulphide Limited Continuous tema experimental en el que la concentración de sulfhí. Competition between mina el enriquecimiento de una determinada población Purple Sulphur bacteria and Green Sulphur bacteria. D. E. Mar. J . L . rencial entre poblaciones de Clorobiáceas. 1960. El filtro actí. KIRK. En la tabla 1 se representa el resumen de las caracte.. Parametres físics i químics. limicola y C . phaebacteroides (%) 67. Arch. J. 30: 81-91. Descripció d'un model experimental de co- nada con la menor intensidad de luz en esta columna de lumna d e Winogradsky. & ABELLA.. D. C. Dinámica pohlacional compara- rísticas analizadas en el presente estudio... Culture. Universitat Autónoma de relación a C . Con este trabajo se aporta más información en relación a la ausencia de poblaciones de C . Un estudio más detallado of sulfide. Características Filtro Control Porcentaje medio población C.3 Tiempo generación C.. nectada a un espectrorradiómetro nos daría más infor. La intensidad de luz no tiene este Barcelona. phaeohacteroides (días) 13 9.TABLA I. 1980. Ph. La concentración de So es PIBERNAT . H. es quien deter. V . A . actúa co. limicola en dicho la- go de Banyoles ( ~ i r o n a ) .7 50. Ecofisiologia de la fotosinte- nico favorece la población de C.. Spectral distribution of Photosynt- des se produce en relación a la concentración de sulfhí. ma en la columna de agua. mo una columna de agua de características parecidas a la columna de agua del lago de Banyoles (VILA. La competencia entre C. La calidad de da de bacterias fotosintéticas planctónicas. 1992. phaeobacteroides en sis hacteriana. agua.O 100 Tiempo generación C. de Banyoles. carácter discriminatorio pero una reducción del 20% en PACHMAYR. Vorkomnien und Bestimmung von la intensidad de luz inicial favorece que el máximo de Schwefelverhindungen in Mineralwasser. BIBLIOGRAFIA que atraviesa el filtro. Role de bacterias verdes del azufre. Aquatica.. 1979. MONTESINOS... Ecolog. J.Resumen de las características estudiadas entre la columna control y la columna con filtro de luz en relación al desarrollo de Clorobiáceas. media máx. inferior en la columna con filtro posiblemente relacio. drico no es limitante para su desarrollo. Aust.. TABLE 1. 129: 32-34. 1981. sulfur and polysulfides. Thesis. limicola. 1987.9 29 Prof. limicola (%) 32.O. Universitat Autónoma de Barcelona.s Prof.