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FACULTAD DE QUMICA

UNIVERSIDAD
AUTNOMA DE
YUCATAN

MANUAL DE PRACTICAS
DE LABORATORIO DE QUIMICA
FORENSE Y LEGAL

M. en C. Jos Alfredo De la Fuente Ortegn


UNIVERSIDAD AUTNOMA DE YUCATAN
FACULTAD DE QUMICA
LABORATORIO DE QUMICA FORENSE Y LEGAL

PRCTICA 1
TCNICAS COLORIMTRICAS PARA LA DETERMINACIN DE DROGAS
DE ABUSO

INTRODUCCIN

Cuando las personas hablan acerca de las drogas, por lo general se


refieren a sustancias naturales, semi o totalmente sintticas que afectan al
sistema nervioso central y son ingeridas con la intencin de lograr un cambio
en la conciencia y/o por una experiencia. De acuerdo al efecto que tiene la
droga en el sistema nervioso central, stas pueden clasificarse como
estimulantes, depresoras y alucingenas.

Ms extendidas, como el alcohol y la nicotina, la gama de sustancias


psicoactivas disponibles desde los aos 60, ha aumentado considerablemente.
La mayora de estas sustancias, se desarrollaron como frmacos y fueron
clasificadas como ilegales por los pases industrializados de occidente. En la
actualidad, el cannabis es la droga ilcita comnmente ms usada,
especialmente entre los jvenes. El consumo de drogas de diseo como
anfetaminas, MDMA (xtasis) y cocana se ha mantenido tambin muy alto.
La anfetamina es similar en trminos de su composicin qumica a la
estructura humana de los neurotransmisores adrenalina y dopamina, y es
capaz de reducir en una persona la fatiga, la necesidad de dormir, frena el
apetito y reduce el umbral de la agresin. El MDMA (xtasis") usualmente se
toma en forma de pastillas, produce cambios en el estado de nimo y tambin
reduce el hambre, la sed y el cansancio; su uso extendido en fiestas y
discotecas es debido en parte a su capacidad para intensificar sensaciones. El
efecto estimulante y de desinhibicin que provoca la cocana induce a la gente
a seguir consumiendo esta droga hasta el punto que psicolgicamente llegan a
depender de ella; es tpico de esta clase de drogas la necesidad que crea de ir
aumentando la dosis. Los productos del cannabis (hachs, marihuana)
contienen el ingrediente activo delta-9-tetrahidrocannabinol (9- THC) y
conllevan profundos cambios en el pensamiento y en el comportamiento,
aunque stos pueden ser percibidos de forma distinta dependiendo de la
persona y del momento del consumo. En particular las benzodiazepinas, que
son utilizadas como somnferos y tranquilizantes para disipar los temores y
mejorar el estado de nimo, son a menudo utilizadas en dosis muy altas
durante un largo periodo de tiempo.

Las pruebas colorimtricas y de precipitacin permiten dar informacin


cualitativa y rpida sobre la presencia o ausencia de las sustancias activas
sobre una gama amplia de muestras.

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OBJETIVO
Realizar ensayos colorimtricos y de precipitacin sobre diversas
sustancias para la identificacin presuntiva de sustancias activas de acuerdo
a su composicin qumica y poder clasificarlas infiriendo el efecto que podra
causar sobre el sistema nervioso central.

MATERIALES
Tubos de ensaye
Pipetas de transferencia
Aplicadores de madera
Esptula
Frascos gotero
Matraces volumtricos
Vidrios de reloj
Probetas
Vasos de precipitados
Frascos goteros y frascos mbar
Placas porta objetos
Guantes desechables

REACTIVOS
Subnitrato de bismuto
cido ntrico
Yoduro de potasio
Vainillina
Acetaldehdo
Etanol
Cloroformo
Nitrato de cobalto
Nitrito de sodio
cido sulfrico
Vanadato de amonio
Formaldehdo
cido clorhdrico
Nitrato de cobalto
Isopropilamina
Carbonato de sodio
Nitroprusiato de sodio
Nitrato de potasio
Sulfato de cobre
Piridina

MUESTRAS
Caf
Tabaco
Medicamentos en presentacin de comprimidos
Polvo para hornear
Azcar glass

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PROCEDIMIENTO
Preparacin de reactivos
Dragendorff
Disolver 8 g de subnitrato de bismuto en 20 mL de HNO 3 10 N (de
densidad 1.18; se prepara mezclando 20 mL de cido ntrico concentrado
con 50 mL de agua destilada). Vaciar la solucin sobre otra que contiene
22.7 g de KI en la menor cantidad posible de agua (20- 25 mL). Dejar en
reposo para decantar el KNO3, separar y diluir a 100 mL.

Duquenois
Disolver 2 g de vainillina y 0.3 mL de acetaldehdo en 100 mL de etanol.
Guardar en frasco oscuro.

Liebermann
Disolver 1 g de nitrito de sodio en 10 mL de cido sulfrico (realizar en
fro y bajo campana, libera humos marrones).

Marquis
Mezclar 1 mL de solucin de formaldehdo con 9 mL de cido sulfrico
concentrado. Preparar antes de ser empleado.

Parry Koppanyi
Solucin A. Preparar una solicin de nitrato cobaltoso al 1% en metanol.
Solucin B. Preparar una solucin de isopropilamina al 5% en metanol.

Simon
Solucin A. Preparar una solucin acuosa de carbonato sdico al 20%.
Solucin B. Preparar una solucin etanlica de acetaldehdo al 50%.
Solucin C. Preparar una solucin acuosa de nitroprusiato de sodio al
1%.

Tiocianato de Cobalto
Disolver 6 g de nitrato de cobalto y 18 g de tiocianato de potasio en 100
mL de agua.

Zwikker
Mezclar 40 mL de una solucin de sulfato de cobre al 10% con 1 mL de
piridina y aforar a 100 mL con agua.

Anlisis de muestras

Dragendorff
Para aminas y alcaloides.
Agregar 0.5 mL de reactivo a la muestra y calentar en bao mara
durante 3 minutos.

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Duquenois
Para Cannabis Sativa.
Realizar una extraccin con 1 mL de la solucin etanlica de vainillina y
agregar 1 mL de cido clorhdrico concentrado. Despus de la aparicin de
un color azul/violeta, realizar una extraccin con cloroformo.

Liebermann
Para anfetaminas.
Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o
dos gotas si se trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo de
Liebermann

Marquis
Para anfetaminas y opiceos
Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o
dos gotas si se trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo de
Marquis.

Parry-Koppanyi
Para barbituratos.
Agregar la solucin de nitrato cobaltoso a unas gotas del extracto en
placa. Agregar una gota de solucin de isopropilamina.

Simon
Para anfetaminas.
Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o
dos gotas si se trata de un lquido) sobre una placa y agregar una gota de la
solucin A (nitroprusitato y acetaldehdo). Agregar a continuacin una gota
de la solucin B (solucin de carbonato de sodio).

Tiocianato de cobalto
Para cocana.
Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a 2 mg de polvo o una o
dos gotas si se trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo de
Tiocianato de cobalto.

Zwikker.
Para barbituratos
Agregar 0.5 mL de la solucin de sulfato de cobre a una fraccin del
residuo de la muestra o a 0.5 mL del extracto en un tubo de ensayo.
Incorporar igual volumen de solucin clorofrmica de piridina.

INTERPRETACION DE RESULTADOS
Dragendorff. Origina precipitados de color naranjarojo con los
alcaloides.
Duquenois. La aparicin de una coloracin azul/violeta en la fase
orgnica indica la presencia de Cannabis sativa.

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Liebermann. La aparicin de un colorrojo-naranja indica presencia
de anfetaminas.
Marquis. La aparicin de un color rojo oscuro a morado indica la
presencia de herona; la aparicin de un color amarillo-rosado indica la
presencia de metadona; la aparicin de un color marrn oscuro indica la
presencia de anfertaminas; la presencia de una coloracin prpura a negro
o azul indican la presencia de MDMA.
Parry-Koppanyi. Frente a este reactivo, la aparicin de una
coloracin violeta indica la presencia de barbituratos.
Simon. Produce un color azul la metanfetamina y otras aminas
secundarias. La anfetamina y otras aminas primarias producen un color
rosado que cambia lentamente a rojo cereza. Este ensayo puede utilizarse
para diferenciar la metanfetamina de la anfetamina.
Tiocianato de cobalto. La presencia de cocana produce una
coloracin azul.
Zwikker. Frente a este reactivo, la aparicin de una coloracin rojo
violeta indica la presencia de barbituratos.

REFERENCIAS
Flanagan, R.J.; Braithwaite, R.A.; S.S. Brown, S.S.; B. Widdop, B.; de
Wolff, F.A. Basic Analytical Toxicology. 1995. World Health Organization

Stewart, C.P.; Stolman, A. 1960.Toxicology, Mechanisms and


Analytical Methods. Academic Press, New York and London. Volumen I y II

Walllace Hayes A. 2001. Principles and Methods of Toxicology. Cuarta


edicin. Ed. Taylor & Francis. USA

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LABORATORIO DE QUMICA FORENSE Y LEGAL

PRCTICA 2
IDENTIFICACION DE RESIDUOS DE DISPARO 1: DERIVADOS
NITRADOS

INTRODUCCIN

Al accionar un arma de fuego se produce una explosin,


provocando que la plvora que se encuentra en el interior del cartucho
deflagre (arda rpidamente). La energa que esto produce expulsa a la bala
fuera del arma con una gran cantidad de plvora combusta e incombusta.
Este calor que se ha producido provoca tambin que los componentes
inorgnicos e inorgnicos del fulminante vaporicen, los que con la posterior
expansin y enfriamiento se recondensan en forma de gotas generando
productos que se conocen colectivamente como "residuos generados por
disparar un arma de fuego.

Estos residuos que se generan por la deflagracin del arma, pueden


dirigirse en dos sentidos o tambin conocidos como conos de deflagracin
anterior y posterior.

Los residuos orgnicos que se producen en el cono de deflagracin


anterior se depositan en pequeas cantidades, si la distancia del disparo no
en muy grande, en la piel y ropa y de la persona que lo recibe.

Estos residuos son utilizados en criminalstica para estimar la


distancia de disparo e identificar si un orificio fue producido por un disparo
de arma de fuego.

Los nitratos son productos derivados de la oxidacin de los grupos


nitro presentes en las plvoras, utilizndose para ello una reaccin
especfica sumamente sensible, basado en una solucin de difenilamina en
medio sulfrico, el que pone de manifiesto la presencia de restos de nitratos
mediante la formacin de un color azul caracterstico. Debemos destacar
que esta prueba no es especfica para determinar productos provenientes de
la degradacin de la plvora, ya que existen en el medio ambiente, una
gran cantidad de sustancias que contienen nitratos

Los nitritos son productos de la degradacin de los nitratos y de los


grupos nitrogenados de los nitroderivados orgnicos, tal como la
nitrocelulosa, ampliamente utilizada con el nombre de Plvora sin humo o
Plvora inoxidante, con la que se cargan la totalidad de los cartuchos
modernos

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OBJETIVO
Identificar residuos nitrados depositados alrededor del orificio de
entrada del proyectil, las heridas, objetos y superficies provocadas por
armas de fuego. Esta prueba se basa en la reaccin sobre los nitritos y
nitratos resultantes de la deflagracin de la plvora.

MATERIALES
Telas limpias estriles y libres de apresto
Agua destilada
Pipetas de transferencia
Tubo de ensayo de vidrio
Aplicadores de madera
Guantes
Placas portaobjetos
Tijeras
Gradilla

REACTIVOS
A. DETERMINACION DE NITRATOS
Difenilamina
cido sulfrico

B. DETERMINACION DE NITRITOS
Agua destilada
Solucin de nitrito de potasio 0.01 M.
Acido sulfanlico
Alfa-naftilamina

Prepararacin
Solucin A (cido sulfanlico en cido actico)
Disolver 0,5 g de cido sulfanlico en 30 mL de cido actico glacial y
120 mL de agua destilada. Filtrar si es necesario (guardar en
refrigeracin).
Solucin B (-naftilamina en cido actico)
Disolver 0,1 g de N-1-naftiletilendiamina en 120 mL de agua destilada
calentando, enfriar, agregar 30 mL de cido actico glacial y filtrar
(guardar en refrigeracin).

Si cualquiera de las soluciones se torna colorida, agitar con 0,5 g de zinc en


polvo y filtrar

TOMA DE MUESTRA
En caso de que la sospecha de residuos nitrados se encuentre en una
prenda, a esta se le cortaran dos fragmentos cercanos al orificio problema,
y otros dos en un rea lejana de este como un blanco de muestra.
Si se trata de superficies como orificios en paredes, puertas, vehculos etc.,
la muestra se levanta humedeciendo un fragmento de tela de algodn libre
de almidn o un hisopo con agua destilada, el cual se frotar alrededor y
dentro del orificio sospechoso. De igual manera otra tela o hisopo sobre la
misma superficie, pero a cierta distancia de la zona sospechosa.

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CONTROLES
Control negativo: se humedecer una tela con agua destilada, de
preferencia la misma usada en la toma de la muestra
Control positivo: se impregnar una tela con una solucin de nitrito de
potasio 0.01 M.

PROCEDIMIENTO
A. DETERMINACIN DE NITRATOS
1. Colocar y marcar las placas porta objetos de la siguiente manera:
a. Control negativo
b. Control positivo
c. Muestra
d. Blanco de muestra
2. Colocar una tela de control negativo en la placa as marcada.
3. Colocar una tela de control positivo en la placa as marcada
4. Colocar la muestra en la placa as marcada
5. Colocar el blanco de muestra en la placa as marcada
6. Preparar la solucin de Lungen: En un tubo de ensayo de vidrio con
capacidad de 3 mL se le depositar en el fondo una pizca de
difenilamina y agregar 1 ml de cido sulfrico; se mezcla con la
pipeta de trasferencia para disolver los cristales.
7. Agregar una gota de la solucin anterior a cada una de las placas
marcadas como control negativo, positivo, muestra y blanco de
muestra.
8. Observar el cambio de color en cada placa.

B. DETERMINACIN DE NITRITOS
1. Colocar y marcar las placas porta objetos de la siguiente manera:
a. Control negativo
b. Control positivo
c. Muestra
d. Blanco de muestra (opcional; en caso de ser necesario)
2. Colocar una tela de control negativo en la placa as marcada.
3. Colocar una tela de control positivo en la placa as marcada
4. Colocar la muestra en la placa as marcada
5. Colocar el blanco de muestra en la placa as marcada (opcional; en
caso de ser necesario)
6. . Agregar una gota de la solucin A en cada una de las placas
marcadas como control negativo, positivo, muestra y blanco de
muestra.
7. Agregar una gota de la solucin B en cada una de las placas
marcadas como control negativo, positivo, muestra y blanco de
muestra.
8. Observar el cambio de color en cada placa.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

A. IDENTIFICACION DE NITRATOS
POSITIVA: La formacin inmediata de un color azul intenso sobre la tela
indica una reaccin positiva a nitratos.

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NEGATIVA: Si la tela se oscurece, pero no aparece dicha coloracin, se
considera negativa lo que indica que no se encuentran nitratos en las telas.

B. IDENTIFICACION DE NITRITOS
POSITIVA: La formacin de un color rojo sobre la tela indica una reaccin
positiva a la presencia de nitritos
NEGATIVA. S la tela queda de color rosa o fucsia la prueba es negativa a la
presencia de nitritos.

REFERENCIAS

Moreno Gonzlez Rafael, Balstica Forense. 1999. edit. Porra

NORMA Oficial Mexicana NOM-122-SSA1-1994

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PRCTICA 3
IDENTIFICACION DE RESIDUOS DE DISPARO 2: RODIZONATO DE
SODIO

INTRODUCCIN

Cuando se dispara un arma de fuego, la mano de quien lo hace


puede resultar maculada por gases y derivados nitrados provenientes de
la deflagracin de la plvora, bario, antimonio y plomo.

En base a lo anterior la prueba de rodizonato de sodio tiene


como finalidad, identificar el bario y plomo que pudieran haber
maculado la mano de quien dispar, tal identificacin es posible en
virtud de la coloracin que resulta de la reaccin qumica entre la
sustancia de referencia y los elementos sealados, que son parte
integrante de los cartuchos, a saber: plomo del proyectil, bario del
fulminante.

La prueba se basa en una reaccin qumica del plomo y bario con el


acido rodiznico que en medio cido, da un cambio de color. El color inicial
del rodizonato es prpura amarillento. Si desaparece la coloracin
amarillenta de rodizonato y cambia a una rosa-marrn, la prueba es
significativa para bario. Si queda un color rojo escarlata, la prueba es
significativa para plomo. Si no se observa ningn cambio de coloracin, la
prueba es negativa.

OBJETIVO
Identificar si una persona dispar un arma de fuego o si estuvo en
contacto con ella, mediante procedimientos qumicos previamente
analizados en el laboratorio de qumica legal.

MATERIALES
Placas de vidrio
Pipetas de transferencia
Aplicadores de madera
Matraz aforado 100 mL
Microscopio estereoscpico
Tela de algodn libre de aprsto de aproximadamente 2 x 2 cm
Balanza analtica
Frascos de gotero de vidrio mbar
Tubos de ensaye de 13 x 100
Tijeras
Guantes

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REACTIVOS
Solucin acuosa de acido ntrico al 5%
Solucin buffer pH 2.79
a. Bitartrato de sodio 1.9 g
b. cido tartrico 1.5 g
Agua destilada 100 mL
Solucin acuosa de Rodizonato de sodio al 0.2 % (20 miligramos de
acido rodizonico en 10 mL de agua destilada) preparar diariamente y
cuidar de la luz.

PROCEDIMIENTO
1. Humedecer las telas en solucin de HNO3 al 5%.Tomar la muestra
frotando la tela en el rea de inters (2/5 partes de la mano, parte
dorsal y palmar, izquierda y derecha, cada una con tela diferente).
Sujetar firmemente la mano en estudio, apoyndose en la zona de la
mano a la altura del dedo anular y meique.
2. Si la tela se va a embalar, doblarla con la parte de la muestra hacia
adentro.
3. Se pasan las telas en orden ascendente (de la punta de los dedos
hacia la mueca) para arrastrar todo lo que se pueda haber
depositado en la mano, abriendo los poros ya que ah se pudieran
alojar los residuos de disparo, se deslizaran en los cuatro bordes de
la tela.
4. Ya que los cuatros trapos han sido ocupados correctamente, se
procede a aplicar la solucin buffer. Ya que esta solucin asegura que
la reaccin se lleve a cabo en un pH controlado, colocando dos gotas
de la solucin buffer en cada trapo, que han sido puestas en pedazos
de vidrio etiquetadas correctamente.
5. Ya que se encuentran puestas en las placas de vidrio debidamente
marcados se le agregan gotas de la solucin de rodizonato de sodio a
cada tela, cubrindola, no sumergindola y se les lleva al microscopio
para saber si la prueba sali positiva o negativa a la reaccin con el
rodizonato de sodio.
6. Se lleva al microscopio para su observacin.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS


Si al desaparecer la coloracin amarillenta de la solucin de rodizonato de
sodio, la tela es observada al microscopio o bien a simple vista, si se
aprecian partculas de coloracin rosa marrn, prueba positiva en bario, si
son color rojo escarlata positiva en plomo, si es una mezcla de los dos
colores anteriores, positivo en bario y plomo.
Si no hay ninguno de estos colores prueba negativa.

REFERENCIAS

Moreno Gonzlez Rafael, Balstica Forense, 1999. edit. Porra

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PRCTICA 4
IDENTIFICACION DE RESIDUOS DE DISPARO 3: PRUEBA DE
WALKER

INTRODUCCIN

Al accionar un arma de fuego se produce una explosin,


provocando que la plvora que se encuentra en el interior del cartucho
deflagre (arda rpidamente). La energa que esto produce expulsa a la bala
fuera del arma con una gran cantidad de plvora combusta e incombusta.
Este calor que se ha producido provoca tambin que los componentes
inorgnicos e inorgnicos del fulminante vaporicen, los que con la posterior
expansin y enfriamiento se recondensan en forma de gotas generando
productos que se conocen colectivamente como "residuos generados por
disparar un arma de fuego.

Estos residuos que se generan por la deflagracin del arma, pueden


dirigirse en dos sentidos o tambin conocidos como conos de deflagracin
anterior y posterior.

Los residuos que se producen en el cono de deflagracin anterior se


depositan en pequeas cantidades, si la distancia del disparo no en muy
grande, en la piel y ropa y de la persona que lo recibe.

Estos residuos son utilizados en criminalstica para estimar la


distancia de disparo e identificar si un orificio fue producido por un disparo
de arma de fuego.

Al producirse un disparo con arma de fuego se desprenden, como


resultado de la deflagracin de la plvora, derivados nitrogenados nitrito
de potasio entre otros- provenientes del nitrato de potasio; por lo tanto el
nitrito de potasio despus de un disparo prximo, queda depositado
alrededor del orificio de entrada del proyectil. Este compuesto qumico es
identificado mediante la reaccin qumica que se desarrolla sobre una hoja
de papel fotogrfico, el cual fue tratado con una solucin de alfa-naftilamina
y acido sulfanlico, y posteriormente sometido a la accin del acido actico
para formar el cido nitroso y la sal de potasio correspondiente. Obteniendo
como resultado que los nitritos se transformen en cido nitroso formando
un diazo compuesto de color anaranjado.

OBJETIVO
Identificar nitritos en ropas, desprendidas a raz de la deflagracin de
plvora y localizadas alrededor del orificio de entrada del proyectil de arma
de fuego, a fin de terminar si el disparo fue prximo o a una distancia tal
que no permita la maculacin de la plvora.

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MATERIALES
Papel fotogrfico azo o kodabromide, grados 2 o 3.
Papel filtro de preferencia tamao carta
Gasa del tamao de una hoja oficio
Papel cebolla tamao oficio
Guantes
Lpiz de grafito
Cinta adhesiva masquin u otra
Plancha
Campana de extraccin
Cubrebocas
Algodn
Aspersores
Tijeras

REACTIVOS
cido sulfanlico 0.5% disuelto en agua destilada
-naftilamina al 0.5% disuelto en metanol
cido actico 25% disuelto en agua destilada
Agua destilada

PROCEDIMIENTO
A. SENSIBILIZACION DEL PAPEL FOTOGRFICO
El papel fotogrfico se desensibiliza en una solucin de hiposulfito,
durante tres minutos; despus se lava durante tres minutos con agua
destilada, y finalmente se deja secar.

A continuacin, se procede aplicar sobre superficie gelatinosa del papel


fotogrfico tres capas con un algodn embebido de acido sulfanlico, en tres
direcciones diferentes: horizontal, vertical y en diagonal.

Una vez que esta se ha secado se aplica la solucin de -naftilamina de


la misma forma que el acido: con un algodn embebido de alfa-naftilamina,
en tres direcciones diferentes: horizontal, vertical y en diagonal.
En esta forma queda preparado el papel fotogrfico, momentos antes
de efectuar la prueba.

B. TRATAMIENTO DEL PAPEL FILTRO


Aplicar sobre superficie del papel filtro tres capas con ayuda de un
aspersor rociar acido sulfanlico, en tres direcciones diferentes: horizontal,
vertical y en diagonal.
Una vez que esta se ha secado se aplica la solucin de alfa-naftilamina
de la misma forma que el acido sulfanilico: con un ayuda de un aspersor
rociar -naftilamina, en tres direcciones diferentes: horizontal, vertical y en
diagonal.

PROCEDIMIENTO
1. Sobre una mesa de trabajo de preferencia de acero inoxidable, se
coloca el papel fotogrfico o papel filtro (fijarlo con cinta adhesiva) con
la superficie gelatinosa hacia arriba.

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2. Ubicar el orificio de la prenda, y el rea problema se pone sobre la
superficie gelatinosa del papel fotogrfico (fijar la tela).
3. Con un lpiz de grafito se marca en el papel fotogrfico el orificio de la
prenda.
4. Dos lienzos de gasa se humedecen con la solucin de cido actico, y
se colocan sobre la prenda.
5. Se coloca una o dos hoja de papel cebolla sobre el lienzo humedecido.
6. Con la plancha previamente caliente (sin quemar) se presiona el papel
cebolla por aproximadamente 5 a 10 minutos. Se repite esta presin en
toda la prenda sin arrastrar la plancha, se levanta y se coloca en otra
zona, sin repetir alguna de preferencia.
7. Una vez cubierta toda el rea de la prenda, se procede a retirar con
cuidado todos y cada uno de los objetos que se fueron colocados sobre
el papel fotogrfico.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS


POSITIVA: La prueba se considera positiva cuando se observan en el papel
fotogrfico o en el papel filtro puntos de color rojizo-rosado, las cuales
varan en tamao, numero y distribucin, segn la distancia a la que se
haya realizado el disparo
NEGATIVA. No se observarn puntos.

REFERENCIAS

Moreno Gonzlez, Rafael, Balstica Forense, 1999. edit. Porra

Bernal Morales, Ernesto; Tesis: Investigacin por Electroforesis


Capilar, de Residuos Generados por Disparar un Arma De Fuego.
2005. UNAM.

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PRCTICA 5
MANCHAS DE SANGRE SEGN SU MECANISMO DE PRODUCCION

INTRODUCCIN

A travs del estudio meticuloso de las imgenes sanguneas se podr


obtener una informacin precisa de la forma en que se han producido los
hechos. Se podr determinar posicin de la vctima y del agresor, los
movimientos realizados en el sitio de suceso, caractersticas del
traumatismo y violencia empleada, intensidad del traumatismo, arma
empleada, movimientos ejecutados con ella, incluso sealar
aproximadamente o descartar al autor del delito.

Las manchas sanguneas constituyen la base del estudio de la


hematologa forense reconstructora, que estudia su mecanismo de
produccin, forma, extensin, situacin, cantidad y orientacin, tamao,
color, aspecto.

La clasificacin de manchas sanguneas se basa en su mecanismo de


produccin.
Manchas de sangre por contacto: Se producen por el contacto directo
de la fuente productora y el soporte.
Manchas de sangre por escurrimiento: La sangre se desliza por el
soporte impermeable, desde la fuente productora (herida).
Manchas de sangre por proyeccin: Se producen cuando la sangre es
proyectada en forma ms o menos violenta sobre el soporte.
Manchas de sangre por goteo de altura: Se produce al caer la gota de
sangunea desde la fuente productora hasta el soporte, impulsada por
la fuerza de gravedad.

OBJETIVO
Conocer la forma y caractersticas fsicas de las manchas de sangre segn
su mecanismo de produccin.

MATERIALES
Sangre animal o pintura de consistencia viscosa de color rojo
Papel estraza
Papel opalina
Cinta adhesiva
Cartulina
Guantes
Pipetas de transferencia
Regla o flexmetro
Transbordador
Lpiz o pluma

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Tubos de ensayo
PROCEDIMIENTO
1. En un pliego de cartulina o dos, dejar caer gotas de sangre o pintura a
diferentes alturas de forma perpendicular. Identificar cada una de ellas.
5 cm 60 cm
15 cm 1m
30 cm 2m

2. En un pliego de cartulina o dos, dejar caer gotas de sangre o pintura a


diferentes ngulos. Identificar cada una de ellas.
45 15
35 5
25

3. En un rea tapizada (paredes y piso) ejecutar movimientos de


proyeccin con la pintura hacia el papel. (ubicar un plano de
sustentacin e identificar cada una de ellas)
De abajo hacia arriba
De arriba hacia abajo
De izquierda a derecha
De derecha a izquierda

4. En un rea tapizada (paredes y piso) de 7 metros de largo ejecutar


movimientos de (ubicar un plano de sustentacin e identificar cada una
de ellas)
Caminar lento
Caminar constante
Correr

5. En un pliego de cartulina o dos, realizar manchas de contacto. Identificar


cada una de ellas.
dedos
mano
embarradura
limpiadura

Observa cada una de las manchas obtenidas en situacin


En el inciso 1, mide el dimetro obtenido; tomar nota de los resultados
En el inciso 2, medir el dimetro y largo de la mancha; tomar nota de los
resultados
En el inciso 3, observar el tipo de mancha que se produce, describirla y
determinar la direccin del movimiento; tomar nota de los resultados
En el inciso 4, observar las manchas que se producen a diferentes
velocidades; tomar nota de los resultados
En el inciso 5, observar las manchas que se producen en los diferentes
contactos; tomar nota de los resultados
Escribir los resultados y comentarios finales en su bitcora.

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REFERENCIAS

Rubn H. Silva S.; GUIA DE APOYO ACADEMICO 4; INGENIERIA EN


CRIMINALISTICA I. 2005

Rocio V. Euan P.; IMPORTANCIA DE LA QUMICA LEGAL EN LA


FORMACIN DEL QUIMICO FARMACETICO BILOGO. Universidad
De Campeche. 1995.

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PRCTICA 6
RASTROS DE SANGRE

INTRODUCCIN

El estudio forense de las manchas de sangre plantea dos cuestiones


importantes, el reconstructivo y el identificativo, se tomar como punto
central de estudio en esta prctica el rea de la hematologa identificativa,
que es la rama de la hematologa forense que se ocupa de identificar
sangre.

La localizacin de sangre en el lugar de hechos es visible; sin


embargo (en ocasiones esta no es visible a simple vista) otras veces no hay
visibilidad a simple vista, por lo que es necesario utilizar (otras tcnicas
para hacerlas visibles, utilizando reactivos especficos para ello, que se
basan en la interaccin de la hb de la sangre con sustancias especificas que
crean luminiscencias, haciendo resaltar estas manchas latentes) las
caractersticas tcnicas basadas en la emisin de luz del reactivo empleado
al entrar en contacto con la sangre.

Los procedimientos empleados estn destinados a investigar si es sangre,


su especie de origen, y en lo posible su individualizacin. En el trabajo
policial, frecuentemente se solicita determinar, manchas sospechosas de
sangre, en los delitos contra las personas.

2.1. IDENTIFICACION DE SANGRE OCULTA EN EL LUGAR DE HECHOS


Este anlisis es indicado para la investigacin presuntiva de sangre
(algunas tcnicas utilizadas confirman la identificacin de sangre humana) a
niveles trazas y es aplicable en levantamientos de superficies extensas
donde presumiblemente las manchas de sangre han sido lavadas para
borrar evidencia.

OBJETIVO
Utilizar la tcnica de hemascein para la identificacin de sangre
latente en el lugar de hechos.

MATERIALES
Lmparas de UV con una longitud de onda de 415-480nm.
Lentes o pantallas de color naranja o amarillo intenso con filtro
Dos fragmento de block o ladrillo de cermica (diferentes superficies)
Refrigerador
Sangre humana
Sangre de animal

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REACTIVOS
Reactivo de Hemascein
Agua destilada

PROCEDIMIENTO:
1. En una superficie embarrar sangre dejarla unos 10 o 15 minutos.
2. Transcurrido el tiempo limpiar la superficie dejar secar
3. Esparcir a una distancia de aproximadamente 30 cm el reactivo de
hemascein, con ayuda de un aspesor.
4. Ponerse los lentes o usar las pantallas de color naranja o amarillo
intenso con filtro
5. Usar la lmpara UV
6. Observar la coloracin y formas de las manchas

2.2. MANCHAS DE SANGRE SECA


En las manchas de sangre seca, las clulas se han roto y por lo tanto
las pruebas de aglutinacin directa no son posibles; sin embargo, los
antgenos del sistema ABO no se desnaturalizan rpidamente por la
sequedad y en este sistema sobreviven algn tiempo y conservan la
capacidad de combinarse con anticuerpos especficos. La formacin de estos
compuestos antgeno-anticuerpo son la base de todos los mtodos
empleados en la deteccin de antgenos en el estroma de las clulas rojas
de las manchas de sangre seca.

Siguiendo el protocolo recomendado para el levantamiento de


muestras en el lugar de los hechos, la muestra es remitida al laboratorio de
hepatologa donde se somete a una serie de anlisis para determinar su
naturaleza y origen. Una vez que se haya determinado si es sangre humana
no queda ms que su individualizacin.
Un proceso de individualizacin podra ser el conocer a que grupo
pertenece, para ello se sigue con una tcnica especial para manchas de
sangre seca, conocida como absorcin-elucin.

OBJETIVO
Determinar el grupo sanguneo en sangre seca que se encuentra
impregnada en prendas de vestir o sobre la superficie de ob jetos
relacionados con algn hecho de sangre.

MATERIALES
Tubos de ensayo de 10 X 75
Tubos de ensayo de 13 x 100
Pipetas de transferencia
Tijeras
Aplicadores de madera
Guantes desechables
Tela estril y sin apresto, de algodn
Telas manchadas con sangre conocida de tipo A y B (controles)
Gradillas para tubos de ensayo de 10 x 75
Bao mara a temperatura constante fijarla a 57 C
Centrfuga

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Refrigerador
REACTIVOS
Sueros hemoclasificadores anti-A, anti-B
Solucin fisiolgica, fra y a temperatura ambiente
Metanol

Preparacin de los antisueros:


Los sueros anti-A y anti-B, se diluyen de la siguiente manera: a 1.0
ml. de antisuero, se aaden 4 ml. de solucin fisiolgica. Dilucin 1:5.
Preparacin de los Controles A y B:
En telas limpias y libres de apresto, verter sangre conocida tipo A o tipo
B, dejarla secar, fijarla en metanol por 30 min.

PROCEDIMIENTO
La prueba de rastreo hemtico consta de tres etapas: la primera se basa
en una prueba presuntiva para identificar sangre (que no se hace en esta
prctica), la segunda para determinar el origen de la sangre y la tercera
para determinar el grupo sanguneo en sangre seca del sistema ABO.

Toma de la muestra
1. A una tela limpia se le agregan unas gotas de solucin salina.
2. Para levantar la muestra de la superficie donde se encuentre
absorberla con solucin salina en pequeos trozos de tela de
algodn de color blanco, sin apresto y esterilizada, impregnado no
frotar. En caso que la muestra se encuentre en una fibra solo se corta
un fragmento de aprox. 2 x 2 cm
3. En el primer caso se deja secar. En caso que haya sido cortada y este
seca, se procede directo con el siguiente paso. S e corta un
fragmento para determinar el origen de la sangre y el resto de la tela
se fija (paso 4).
4. Fijar las manchas de sangre impregnadas en la tela, cubrindolas
con metanol cuando menos durante 15 minutos. Despus de ese
tiempo eliminar el metanol totalmente

Procedimiento para la determinar el origen de la sangre


1. Cortar un fragmento de la tela muestra/ hisopo muestra
2. Colocar el fragmento cortado en la solucin buffer que viene en el kit
3. Dejar reposar de 5 a 10 minutos
4. Transcurrido el tiempo requerido agitar en el vortex, o bien
fuertemente con la mano por un tiempo aproximado de un minuto
5. Colocar una gota de la solucin anterior en el pozo de muestra del
dispositivo de muestra
6. Esperar la aparicin de los resultados
7. Solo en caso de ser un resultado positivo se contina con el siguiente
paso

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
POSITIVO. Si hay dos lneas de color rosa, uno en la zona de pruebas "T" y
en la zona de control "C", el resultado de la prueba es positiva, e indica que
el nivel de hemoglobina humana es igual o superior 0.05 g/mL.

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NEGATIVO. Si slo hay una lnea de color rosa (en la zona de control "C"), el
resultado de la prueba es negativo. Esto puede indicar que no est presente
la hemoglobina humana igual o superior 0.05 g/mL.
INVALIDA. si no existe la lnea rosa visible en el rea de control C, la
prueba es inconcluyente. repita la prueba y reexamine el procedimiento con
cuidado

Positiva Negativa Invalida

Procedimiento para la determinar el grupo sanguneo del sistema ABO en


sangre seca.

1.Cortar dos fragmentos de cada tela impregnada con sangre


problema, blanco negativo, control A, B y O, que medirn 3 mm
cuadrados, aproximadamente, y colocar cada recorte en los tubos
necesarios.

Obsrvese en el diagrama siguiente como las hileras horizontales de


la gradilla se marcarn: anti-A y anti-B, en cada una de ellas, y en
la columna correspondiente la muestra, el blanco y los controles A, B
y O respectivamente, requisito sin el cual la tcnica carece de
validez.

Problema= p Control A= Control B= Control O=


a b 0

Anti B pB aB bB 0B

Anti A pA aA bA 0A

2. Agregar a cada tubo de la hilera anti-A, dos gotas de suero anti-A;


a los de la hilera B, suero anti-B (de dilucin 1:5)
3. Dejar en refrigeracin durante toda la noche (16 a 24 horas) a
4C
4. Lavar con solucin salina fra (procurar que la solucin siempre este
fra) 6 veces o hasta obtener una solucin clara e incolora
5. En el ltimo lavado verificar que las telitas queden sumergidas en
aproximadamente dos gotas de solucin salina
6. Colocar la gradilla en el bao mara a 57C durante 15 minutos
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7. Preparar una solucin de paquete globular al 2% (es un
aproximado)
8. Sacar cuidadosamente los trozos de tela con un aplicador de madera,
diferente para cada tubo
9. Agregar dos gotas de glbulos lavados al 2%: Del grupo A en los
tubos de la hilera anti-A, del grupo B en los tubos de la hilera
anti-B (problemas, blanco negativo y controles)
10.Centrifugar durante dos minutos a 3,400 revoluciones por minuto.
11.Observar si existe, o no, aglutinacin.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Si hay aglutinacin en el tubo problema de la hilera anti-A,
marcada como aA, el grupo corresponder al A.
Si hay aglutinacin en el tubo problema de la hilera anti-B,
marcada como bB, el grupo corresponder al B
Si hay aglutinacin en los tubos problema marcados: aA y bB, el
grupo de la muestra analizada corresponder al AB
Si no hay aglutinacin en los tubos problema marcados: aA y bB,
el grupo sanguneo corresponder al O

Menciona cul es el origen de tu muestra.


Explica el fundamento qumico de esta tcnica.
Qu problemas percibiste?
Afecta la cantidad de la muestra al resultado final de la tcnica?
Cul es la sensibilidad de esta tcnica?
Anota tus resultados, observaciones y comentario finales en tu bitcora

REFERENCIAS

Martha Franco de A; HEMATOLOGA FORENSE 3 ed., Editorial Porra,


Mxico, 1999

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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE YUCATAN
FACULTAD DE QUMICA
LABORATORIO DE QUMICA FORENSE Y LEGAL

PRCTICA 7
GRUPO SECRETOR

INTRODUCCIN

La presencia del gen secretor en los antgenos ABO en lquidos es


controlada por el gen secretor "Se" el cual regula la formacin de
sustancia H en las secreciones y en el plasma. De esta manera una persona
es secretora cuando los antgenos de su grupo sanguneo estn presentes
en sus fluidos corporales y secreciones, como la saliva, el mucus intestinal o
de las cavidades respiratorias, el semen, lagrimas. Se sabe que un 80% de
la poblacin caucsica es secretor de las sustancias del grupo sanguneo. Un
no-secretor no segrega el antgeno de su grupo en sus fluidos.

El estado secretor confiere la capacidad de expresar antgenos del


sistema ABO solubles, que pueden ser detectados por medio de tcnicas que
produzcan la inhibicin de la hemoaglutinacin.

OBJETIVO
El alumno aprender a identificar el estado secretor de las sustancias
de grupo sanguneo en muestras biolgicas de origen forense.

MATERIALES
Tubos de ensaye de 10 x 75
Tubos de 13 x 65
Pipetas automticas (micropipetas), de 50, 150, 200250 L
Papel parafilm
Gradilla
Tijeras
Aplicadores de madera

REACTIVOS
Sueros hemoclasificadores anti-A, anti-B
Solucin fisiolgica a temperatura ambiente

MUESTRAS BIOLGICAS
Sangre lquida reciente del grupo "A " y "B"
Saliva reciente grupo "A", "B", y "O"
Muestra problema

PROCEDIMIENTO:
A. Preparacin de las soluciones, control y muestra.
Preparacin de los antisueros:
Dilucin 1:5. 1 mL de anitsuero (anti-A y anti-B), se diluyen en 4 mL
de solucin fisiolgica.

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Preparacin de la suspensin de glbulos rojos
Realizar una solucin de glbulos rojos del grupo sanguneo "A" y "B" al
2%

Preparacin de los controles


CONTROL "A"
Marcar tubos de ensaye como CA (muestra control A)
Aadir 150 L de solucin fisiolgica
Aadir 50 L de saliva del grupo A

CONTROL "B"
Marcar tubos de ensaye como CB (muestra control B)
Aadir 150 L de solucin fisiolgica
Aadir 50 L de saliva del grupo B

CONTROL "O"
Marcar tubos de ensaye como CO (muestra control O)
Aadir 150 L de solucin fisiolgica
Aadir 50 L de saliva del grupo O

Preparacin de la muestra problema


Marcar los tubos de ensaye segn el nmero de muestras a analizar
como Mx (x=nmero de muestra)
Cortar un fragmento de la muestra (en el caso de los hisopos utilizar
toda la muestra), y colocarlo en un tubo de ensayo que le corresponda
(Mx)
Agregar 200 L de solucin fisiolgica (en el caso de los hisopos agregar
250 L)
Macerar la muestra con la ayuda de un aplicador de madera
Retirar el fragmento de muestra

PROCEDIMIENTO
1. Rotular los tubos de ensayo como se muestra en el cuadro:

MxB aB bB oB

MxA aA bA oA

M= muestra problema
x=nmero de muestra
a,b,o= Son las muestras con grupos conocidos
A= antisuero A B= antisuero B

2. Agregar 50 L de la solucin CA a los tubos


marcados como aA y aB
3. Agregar 50 L de la solucin CB a los tubos
marcados como bA y bB

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4. Agregar 50 L de la solucin CO a los tubos
marcados como oA y oB
5. Agregar 50 L de la solucin Mx a los tubos
marcados como M x A y Mx B
50 L = Mx 50 L=CA 50 L=CB 50 L=CO

MxB aB bB oB

MxA aA bA oA

6. Agregar 20 L de la dilucin 1:5 de


hemoclasificador anti-"A" a los controles y a las muestras que fueron
marcados como aA, bA, oA, MxA
7. Agregar 20 L de la dilucin 1:5 de
hemoclasificador anti-"B" a los controles y a las muestras que fueron
marcados como aB, bB, oB, MxB.

20 L Anti-B MxB aB bB oB

20 L Anti-A MxA aA bA oA

8. Agregar 20 L de la solucin al 2% de GR A, a
los controles y a las muestras que fueron marcados como aA, bA, oA,
MxA
9. Agregar 20 L de la solucin al 2% de GR B a los
controles y a las muestras que fueron marcados como aB, bB, oB, MxB.

20 L de GR 2% B MxB aB bB oB

20 L de GR 2% A MxA aA bA oA

10. Agitar todos los tubos de ensayo manualmente por 5


minutos
11. Centrifugar a 3000 RPM durante 3 minutos

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS


Presencia de aglutinacin= +
Ausencia de aglutinacin=

SECRETOR DE GRUPO
A B
SANGUNEO

+ + "O"
+ "A"
+ "B"
"AB" Pgina 26

+ + NO SECRETOR
REFERENCIAS

Shao s., Wang H., Chai S. y u L 2005. Research progress on


helicobacter pylori outer membrane proteine. World Journal of
gastroenterology, 11 (20): 3011-3013

Franco de Ambriz Martha., Hematologa forense y otras tcnicas


serolgicas. 2002. edit. Porrua

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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE YUCATAN
FACULTAD DE QUMICA
LABORATORIO DE QUMICA FORENSE Y LEGAL

PRCTICA 8
IDENTIFICACIN DE SEMEN CON FINES FORENSES

INTRODUCCIN

Siempre que se comete un delito ocurre un intercambio de


materiales entre el sospecho, la vctima y la escena del crimen.
Estos constituyen la evidencia que todo investigador tiene que
recolectar mediante una serie de procedimientos sistemticos. Toda
prueba o indicio es importante, pero aquellas que contribuyen a la
reconstruccin de los hechos y a la identificacin del sospechoso
tienen un valor incalculable para el descubrimiento de la verdad y el
cumplimiento de la justicia. Entre las distintas piezas de evidencia
material que se pueden encontrar en una escena estn los fluidos
corporales, principalmente sangre, semen o saliva.

Las muestras obtenidas como evidencias de las "manchas de semen"


se debern emplear para:
1. Identificar fosfatasa cida como prueba presuntiva de
presencia de semen
2. Identificacin de antgeno prosttico especfico como prueba
confirmatoria.
3. Examen microscpico con objeto de visualizar espermatozoides
tambin como prueba confirmatoria.

FOSFATASA ACIDA: su deteccin se basa en una reaccin cromtica de la


enzima fosfatasa cida, la cual se encuentra presente abundantemente en la
secrecin prosttica masculina, con una concentracin promedio de 2500
UKA/mL, otras especies o secreciones biolgicas podrn tener has 5 UKA/mL.
La Fosfatasa cida es una enzima que es secretada por la glndula
prosttica en el fluido seminal. Estas concentraciones en el lquido seminal
son 400 veces ms altas que las que se encuentran en otro fluido del
cuerpo. Esta presencia puede ser fcilmente detectada cuando entra en
contacto con una solucin cida de alfa naftil fosfato de sodio y el tinte
azul rpido B.

PROTEINA p30: se trata de una glicoprotena que se encuentra presente en


las clulas epiteliales de los ductos de la glndula prosttica. Es una
sustancia indicativa nicamente de semen humano y se encuentra presente
en concentraciones de 200,000 A 5,500,000 ng/ml. Su determinacin se
realiza por medio de tcnicas inmunocromatogrficas, cuya sensibilidad esta
por arriba de los 4ng/ml. (puede detectar diluciones de 1 en un milln)

EXAMEN MICROSCPICO: para determinar sin duda que una mancha es de


semen, se deber visualizar al menos un espermatozoide completo con el

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microscopio ptico. Existen mltiples colorante que ponen de manifiesto la
presencia de clulas espermticas.
OBJETIVO
Conocer la metodologa utilizada en la investigacin de manchas
sospechosas a semen y seleccionar la alternativa idnea para la tincin y
diagnstico citolgico del espermatozoide acorde a las exigencias y
condiciones actuales de la qumica en funcin de contribuir a la
administracin de justicia en presuntas vctimas de delitos sexuales.

MATERIALES
Tubos de ensaye
Pipetas de transferencia
Papel filtro
Gradilla
Tijeras limpias
Torundas de alcohol
Aplicadores de madera
Placas porta objetos
Guantes desechables
Hisopos
Microscopio ptico
Reloj temporizador
Vrtex
Centrifuga

REACTIVOS
Kit de Fosfatasa cida
Kit de inmunoensayo para la determinacin del antgeno prosttico
especfico (protena p30)
Tincin con Rojo rpido nuclear

MUESTRAS BIOLGICAS
Hisopos contaminados con material seminal como control
Muestra problema
Otras muestras para comparar falsos positivos

PROCEDIMIENTO
A. DETERMINACIN DE FOSFATASA CIDA
Preparacin del reactivo (ampollas)
1. Tomar la ampolla etiquetada como S1 y romperla; esta ampolla
contiene el qumico seco para el reactivo.
2. Tomar la ampolla etiquetada como S2 y romperla (asegurarse de
que el reactivo no est dentro de la cabeza de la ampolla).
3. Tomar la ampolla etiquetada como S3 y romperla (asegurarse de
que el reactivo no est dentro de la cabeza de la ampolla).
4. Utilizar una pipeta desechable para evacuar los lquidos de la
ampollas S2 y S3 y depositarlos en la ampolla S1.
5. Mezclar la suspensin en la ampolla S1 usando una pipeta, hasta
que se disuelva completamente el componente slido.
6. Extraer la mezcla con la misma pipeta, usndola como aplicador.

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7. Humedecer con agua destilada una pieza de papel filtro de tamao
considerable
8. Poner en contacto el papel filtro sobre la mancha durante pocos
segundos pero si la tela es tipo lana, entonces, tendr que estar en
contacto por ms tiempo.
9. Aplicar el reactivo preparado directamente sobre el papel filtro y
observar el color purpura caracterstico.

INTERPRETACION DE RESULTADOS
POSITIVA. S el fluido seminal est presente, se observar un color intenso,
iniciar dbil pero se ir intensificando en pocos segundos.

B. DETERMINACIN DEL ANTGENO ESPECFICO (p30)


1. Cortar un fragmento de la tela muestra/ hisopo muestra.
2. Colocar el fragmento cortado en la solucin buffer que viene en el kit.
3. Dejar reposar de 5 a 10 minutos.
4. Transcurrido el tiempo requerido agitar en el vrtex, o bien
fuertemente con la mano por un tiempo aproximado de un minuto.
5. Colocar una gota de la solucin anterior en el pozo de muestra del
dispositivo de muestra.
6. Esperar la aparicin de los resultados.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
POSITIVO. Si hay dos lneas, uno en la zona de pruebas "T" y en la zona de
control "C", el resultado de la prueba es positiva, e indica que el nivel de
p30 es igual o superior a 4 ng/mL.
NEGATIVO. Si slo hay una lnea de color rosa (en la zona de control "C"), el
resultado de la prueba es negativo. Esto puede indicar que no est presente
o que el nivel de p30 est por debajo o 4 ng/ml.
INVALIDA. si no existe la lnea rosa visible en el rea de control C, la
prueba es inconcluyente. Repita la prueba y reexamine el procedimiento con
cuidado

Positiva Negativa Invalida

C. DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE CLULAS ESPEMATICAS


(EXAMEN MICROSCPICO)
Reactivo colorante rojo rpido nuclear
100 mL de agua destilada caliente
0.5 de rojo rpido
Sulfato de aluminio 2.5

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1. Cortar un fragmento de la tela problema y del hisopo con el
control positivo.
2. Sumergir cada uno en un mililitro aproximadamente de solucin
fisiolgica o en su caso agua destilada (el tamao del corte
depende del tamao de rea donde se encuentre la mancha
sospechosa, si es en una persona viva o cadver, con el hisopo
que se obtuvo de las reas genitales realizar el frotis en el
momento de la toma).
3. Humedecer ligeramente la tela o hisopo con la muestra
sospechosa e impregnar el portaobjetos con ella.
4. Cubrir el frotis preparado con el colorante.
5. Dejarlo actuar durante 30 minutos.
6. Retirar el colorante y lavar con agua.
7. Observar al microscopio con objetivo 40x.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Las cabezas de los espermatozoides se observarn coloreadas en su
ncleo de un color rosa carmes.

REFERENCIAS

Prieto Solla, Lourdes; Manual de Biologa Forense, comisara


General de la Polica Cientfica. 2000

Franco de Ambriz Martha., Hematologa forense y otras tcnicas


serolgicas. 2002. edit. Porra

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