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Bacterias

entomopatgenas

Hilda Gmez Ramirez


Hgomez @senasa.gob.pe
Las primeras infecciones fueron reportadas
por Pasteur en 1870.
En 1911, se aisl por primera vez Bacillus
thuringiensis de Anagasta khueniella
En 1921, se reportaron las infecciones
lechosas en el escarabajo japons Popillia
japonica.
En 1940, se determinaron a las especies
Bacillus popilliae y B. lentimorbus
Bacillus thuringiensis

Es una bacteria esporulante Gram +. Presenta


un cristal parasporal de forma bipiramidal,
romboide, cuadrada o amorfa de naturaleza
proteca que es el responsable de la capacidad
insecticida y presenta una toxicidad muy variada
en dependencia del tipo de cristal que presenta.
Son utilizados ampliamente , siendo una
alternativa para el control efectivo de plagas,
ocupando la mayor parte del mercado mundial
de biopesticidas.
Son biodegradables y de uso seguro para
vertebrados y medio ambiente.
Espora y cristal proteico
Accin biolgica

Acta contra larvas de varias especies de


lepidpteros y no tiene efecto contra huevos,
pupas y adultos.
Los productos formulados a base de B.
thuringiensis actan por ingestin, pero no
tienen accin por contacto.
En el lapso de 12 horas una sola espora puede
producir casi 70 billones de nuevas bacterias
que compiten con el insecto por los nutrientes
presentes causando un debilitamiento total que
lo lleva a su muerte.
Mecanismos de accin

Por ingestin
En el pH alcalino del intestino del insecto el
cristal parasporal libera la toxina que se
asocia a puntos especficos de la membrana
intestinal formando poros que rompen la
pared del intestino, ocurriendo una alteracin
del balance inico.
Cese de la alimentacin.
Septicemia y muerte
Fuente INTA
Espectro de actividad de Bt
Mas de 200 especies de lepidpteros al estado de larvas han
mostrado sensibilidad en diferentes grados.
Puede utilizarse con seguridad en la mayora de los cultivos
donde el ataque de larvas de lepidpteros contituyen un
problema serio. No presenta riesgos de fitotoxicidad, ni
alteran o influyen en aspecto, color o aroma de los vegetales
tratados.
Bajo condiciones de campo, la duracin de la actividad de
estos productos es normalmente 4 a 10 das.
No presenta efectos nocivos para artrpodos benficos
debido a especificidad contra larvas de lepidpteros, siendo
una gran ventaja en programas de proteccin donde se
necesite una alta poblacin de insectos benficos para
combatir otras infestaciones de plagas.
Clasificacin
Presentan dos tipos de -endotoxinas: las protenas Cry y las
protenas Cyt. A la fecha se han clonado y secuenciado 166
diferentes genes cry y 16 diferentes genes cyt. La primera
clasificacin de las -endotoxinas se bas en la especificidad de
la actividad insecticida.
Principales grupo se gees Cry en B. thutingiensis:
Cry I actividad contra insectos lepidpteros
Cry II protenas ms pequeas, con actividad contra lepidpteros
y dpteros
Cry III protenas activas contra insectos colepteros
CryIV activas contra insectos dpteros
CryV y CryVI activas hacia nemtodos
Nomenclatura actual:
Cry1, Cry2 y Cry9, protenas toxicas a
lepidpteros
Cry3,Cry7 y Cry8, toxinas activas contra
colepteros
Cry1B y Cry1I, con actividad dual
Cry5, Cry12, Cry13 y Cry14, con actividad
nematicida
Cry2, Cry4, Cry10, Cry11, Cry16 Cry19 y las Cyt
son txicas a dpteros
Protena Cry, cualquier protena paraesporal
de Bt que muestre un efecto txico hacia
algn organismo
Protena Cyt, denotan a las proteinas
paraesporales de Bt que muestran actividad
hemoltica o tengan similitud a la secuencia
de las toxinas Cyt
Toxicologa

En ningn caso se ha observado


infeccin, irritacin, sensibilizacin o
alergia, y tampoco muerte atribuible a
esta bacteria por si misma o a los
componentes de su formulacin.
Es importante destacar que si se han
observado casos de aparicin de
individuos resistentes a la delta
endotoxina cuando se efectuaron
tratamientos repetidos.
Bacillus thuringiensis
Transmisin
Ingestin oral de esporas
Vectores: parasitoides y depredadores

Sntomas y susceptibilidades
Diferentes especies de lepidpteros presentan diferentes
susceptibilidades a combinaciones del cristal y esporas de Bt,
conjuntas o por separado, presentndose las siguientes
respuestas:
Tipo I: parlisis general y muerte en 1 a 7 horas despus de la
ingestin.
Tipo II: no se presenta parlisis general, pero el insecto muere a
las 2 a 4 horas despus de la ingestin.
Tipo III: susceptibilidad a combinaciones de cristal y esporas
Tipo IV: Lepidpteros no susceptibles
Variedades de Bt
Bacillus thuringiensis var. aizawai.
Usado generalmente para el control de lepidteros, como
Spodoptera frugiperda en maiz.
Bacillus thuringiensis var. israelensis.
Para el control de dpteros (mosquitos).
Bacillus thuringiensis var. kurstaqui.
Para el control de lepidpteros.
Bacillus thuringiensis var. tenebrionis.
Para el control de Colepteros.
Otras especies de Bacillus.
Bacillus popilliae and Bacillus lentimorbus
Los escarabajos muertos por estas bacterias, toman un color
blanquecino, siendo conocidas como enfermedades lechosas.
Fuente INTA
Sntomas

Cese de la alimentacin
Parlisis del intestino
Vmito
Diarrea
Parlisis total
Muerte
Larvas presentan color negro caracterstico
de infeccin por Bt.
Bacillus thuringiensis var. israelensis
(Bti)

Se caracteriza por ser una bacteria que produce


un cristal parasporal que contiene cuatro
protenas txicas, Cry 4A (135kDa), Cry4B (125
kDa), Cry11A (65kDa) y Cyt1Aa (28 kDa) (2); las
tres primeras producen daos a nivel de las
clulas del epitelio del intestino medio de los
insectos susceptibles, mientras que la cuarta
toxina Cyt es responsable de actividad citoltica
aun no especfica
Bacillus sphaericus

Produce una inclusin cristalina, la cual est dentro del


esporangio y es codificada por dos genes, los cuales han sido
clonados y secuenciados, de este material gentico se dedujo en
primer instancia los tamaos moleculares de las dos protenas
componentes de 41.9 y 51.4 kDa. Ambos polipptidos se
requieren para ejercer su accin. La toxina producida por este
microorganismo tiene diferente rango de especificidad de
hospedero, ya que es principalmente txica para las larvas de
Culex y Anopheles, en menor potencia para Aedes; sin embargo,
B. sphaericus tiene el beneficio de mayor persistencia en el
ambiente, debido a su capacidad de reciclarse en el agua donde
se aplica, al reproducirse en los cadveres de las larvas
afectadas e infectar otras. B. sphaericus ha sido usada desde
1987.
Bacillus popilliae
La bacteria ms exitosa y estudiada contra larvas de escarabajos,
incluyendo Phyllophaga, para la cual se ha confirmando su condicin
de parsito obligado. Esta bacteria forma esporas muy resistentes a las
condiciones adversas del ambiente, que le confieren una ventaja como
agente de control biolgico. Esta caracterstica tambin asegura que la
bacteria formulada ser estable y almacenable por periodos
prolongados.
La enfermedad causada por B. popilliae, es conocida como
enfermedad lechosa y ocurre solamente en scarabeidos. Las larvas
enfermas se reconocen por su color blanco lechosos causado por la
proliferacin de esporas refractarias en la hemolinfa, lo cual se observa
a travs de la cutcula transparente de los ltimos segmentos
abdominales. El diagnostico se puede confirmar perforando la cpsula
ceflica con un alfiler, lo que permite que salga una gota de hemolinfa
con apariencia de leche en las larvas enfermas o transparente
amarillenta en las larvas sanas.
Produccin
Diseo de medios de cultivo
1) que sus componentes sean fcil de manejar o que no
requieran pretratamiento
2) que permitan optimizar el crecimiento de la bacteria sin
afectar negativamente la calidad de la delta-endotoxina
3) que sean baratos y abundantes
4) Fcil adquisicin en la localidad
Es importante sealar que una formula basada en la
combinacin de nutrientes para una variedad de Bth, no
necesariamente es adecuada para otra variedad, por lo que la
calidad de la delta-endotoxina depende tanto del medio de
cultivo como del aislado de Bth utilizado
Variables a considerar

Temperatura ptima de crecimiento de Bt oscila


entre los 28 y 32C;
La cantidad de oxigeno suministrado a la bacteria,
La velocidad de agitacin para asegurar un
suministro de oxgeno adecuado en el medio de
cultivo y evitar la acumulacin del calor y evitar la
inhibicin o reduccin de la calidad txica de los
cristales;
pH inicial ptimo de entre 6.8-7.2 ya que al oxidar
los carbohidratos produce cidos orgnicos, lo que
se soluciona con neutralizacin con lcali