UNIVERIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
CARRERA DE INGENIERIA QUIMICA
Zoraida Batioja Caicedo, Paul Rizzo Parrales
Zoraida.batiojac@ug.edu.ec; Paul.rizzop@ug.edu.ec

Fecha: 13/02/2017 Practica N°12 paralelo 4 “D” N°mesa: 4 (f)

1. TEMA: CROMATOGRAFÍA

2. RESUMEN

La palabra cromatografía significa literalmente “escribir en colores”, ya que cuando fue
desarrollada, los componentes separados eran colorantes. Se trata de una técnica o
método físico de separación de dos o más solutos presentes en una mezcla basada en la
velocidad de desplazamiento de los mismos. En ella participan dos fases, una móvil
(líquida o gaseosa) y otra estacionaria (sólida o líquida).Por ende esta práctica se basa en
utilizar un método en específico usando papel filtro, en este caso se usara papel bon y
indicadores como; rojo de metilo, anaranjado de metilo, azul de metileno y una mezcla de
los tres anteriores (muestra problema) como colorantes, todos ellos sumerguidos en
pequeñas cantidades en distintas muestras de agua, etanol y agua con etanol. Por ende
esta práctica se centrar en la comprensión y asimilación de los fundamentos básico-
teóricos de este procedimiento físico, así como de su metodología, tipos y uso en la
química analítica. Luego de realizar la parte práctica se procederá a realizar la parte
teórica, mediante fórmulas se procederá a calcular la velocidad con la cual el papel bom
absorberá el agua y la disolución de agua con etanol en función del tiempo transcurrido.

3. MARCO TEORICO

Todas las cromatografías denominadas en columna se caracterizan por tener una fase
estacionaria que se encuentra dentro de una columna de vidrio de 5 a 30 mm de diámetro
por la que se hace pasar una fase móvil líquida o gaseosa que estará en permanente
movimiento. Según la afinidad de las moléculas por la fase móvil o la estacionaria, éstas
se separaran. Después de cada cromatografía se puede obtener información del
cromatograma tanto cualitativa (para identificar los distintos compuestos de la mezcla)
como cuantitativa (para poder obtener la cantidad y composición de las sustancias
separadas). Las fases estacionarias pueden ser de materiales muy distintos, existen
derivados de dextranos (sefadex), derivados de agarosa, poliacrilamida, esferas de vidrio,
sílice, etc. Existen distintos tipos de cromatografía en columna: Cromatografía de
intercambio iónico: se basa en la afinidad de los iones en solución por los sitios de

Zoraida Batioja Caicedo
Paul Rizzo Parrales 4-“D”

plástico o vidrio.2007. la temperatura y el tipo de Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” . la fase estacionaria es una capa de partículas de unos milímetros de espesor. el tipo de fase estacionaria. La naturaleza actual de las interacciones de unión hidrofóbica asume que la interacción de unión es el resultado de un efecto entrópico favorable. el grado de organización de la estructura de agua disminuye con un favorable aumento de entropía en el sistema(Consden. Otra vez. Después de aplicar el analito cerca de la parte inferior de la placa seca. Cromatografía de afinidad: se fundamenta en la especificidad de algunas macromoléculas biológicas. mientras que en la cromatografía en columna las muestras se analizan individualmente. Las condiciones iniciales de unión de la fase móvil usadas en la cromatografía de fase reversa son acuosas lo cual indica un grado alto de estructuras de agua organizadas alrededor de las moléculas de soluto y el ligando inmovilizado. fijadas sobre un soporte sólido generalmente de aluminio. Cromatografía de fase reversa: el mecanismo de separación depende de interacciones hidrofóbicas entre las moléculas de soluto en la fase móvil y el ligando hidrofóbico inmovilizado en la fase estacionaria.polaridad opuesta que se encuentran en la fase estacionaria. La ventaja principal de la TLC es que se analizan simultáneamente la muestra y el patrón. Cromatografía de partición: la fase estacionaria es un líquido soportado en un sólido inerte. A medida que el soluto se une al ligando hidrofóbico inmovilizado disminuye el área hidrofóbica expuesta hacia el disolvente. Así. GLC). CROMATOGRAFÍA PLANA La mayoría de los principios que se aplican para la cromatografía en columna se aplican también a la cromatografía en superficie plana. Cromatografía de adsorción: se basa principalmente en las diferencias en la afinidad relativa de los compuestos por el sólido utilizado como fase estacionaria. el disolvente empieza a producir la separación. Cromatografía de exclusión: Se basa en la habilidad de materiales de porosidad controlada para separar los componentes de una mezcla de acuerdo al tamaño y forma de las moléculas. La cromatografía de gases (GC) y de alta resolución (HPLC) son técnicas de partición ampliamente empleadas. Las separaciones obtenidas se determinan casi exclusivamente por interacciones polares. ( Van Deemter. Giddings. siendo la fase estacionaria más polar que la fase móvil. 2008). Cromatografía en capa fina (TLC) Para la cromatografía en capa fina (TLC). Gordon y Martin . 2008). la fase móvil puede ser un líquido (cromatografía de partición líquido-líquido) o un gas (cromatografía de partición gas-líquido. El valor de Rf depende de las mismas condiciones experimentales que el valor de K de la cromatografía en columna: la composición de la fase móvil. La cromatografía en papel es un tipo de cromatografía de partición en la cual la fase estacionaria es una capa de agua adsorbida en una hoja de papel.

MATERIALES Vaso de precipitación de 100ml. Existen instrumentos para determinar directamente la fluorescencia y/o color de las manchas en la placa.-1 recorrido de los colorantes Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” . lápiz. Jiménez Sánchez Augusta.  Determinar mediante cromatografía la separación de los componentes de mezclas de acuerdo a la diferencia de propiedades. pipeta. como la fluorescamina para aminas. vidrio de reloj Reactivos: Etanol. Augusta DATOS Cromatografía de papel Tabla. También podemos observar el color de los compuestos después de reaccionar con reactivos específicos para grupos o metales.compuestos separados. Cromatografía en papel En este caso. papel bon. anaranjado de metilo. Ing. el soporte y fase estacionaria es papel. agua. Los instrumentos deben ser capaces de cuantificar la medida sobre el área total de la mancha. muestra problema (mezcla de rojo de metilo. PROCEDIMIENTO Referencias El procedimiento esta explicado de acuerdo al pre-informe de laboratorio de química analítica enviado por Ing. Los lugares en los que reside el soluto aparecen como manchas oscuras. regla. (Martin y Synge. rojo de metilo. 2007). OBJETIVOS ESPECIFICOS  Hallar mediante cálculos la relación existente entre la distancia recorrida por un compuesto y la recorrida por el disolvente en el mismo tiempo. El papel que normalmente se utiliza es de celulosa. OBJETIVOS GENERAL  Adquirir conocimientos necesarios de cromatografía y de los diferentes métodos además de sus diferentes aplicaciones empleadas en química analítica . 4. propipeta. azul de metileno. tijera. rociados sobre la placa. 2017 PRACTICA-NO-12. anaranjado de metilo y azul de metileno).

3cm)  Azul de metileno 0 cm Rf = =0 0.5 2.3593 0.256 s Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” .4 etanol 4.256 s  Naranja de metilo 0 cm Rf = =0 0.256 s  Mezcla del colorante 0.7695 0.3 5. Muestra Mezcla de los Azul de Anaranjado Rojo de metilo colorantes metileno de metilo (cm) (cm) (cm) (cm) Agua 0.197 0 0 0.8059 d D 6.7014 0.-2 factor de retardo de las muestras FACTOR DE RETARDO Muestra Mezcla de los Azul metileno Anaranjado de Rojo de colores (cm) (cm) metilo (cm) metilo (cm) Agua 0.2 6.197 cm Rf = =0.256 cm Rf = =1 0.7031 0.7 s Agua (distancia recorrida:0.7695 0 0 1 Agua-Etanol 0.7 2.4 6.256 s  Rojo de metilo 0.4 cm RfC = = =0.3 5.7 Tabla.8059 1 RESULTADOS Factor de recorrido de la muestra de etanol con referencia al colorante naranja metilo distancia recorrida por el compuest o Rf = distancia recorrida por eldisolvente d C 5.3432 0.256 Agua-Etanol 4.8125 1 etanol 0.

7 cm Rf = =0.4 s  Mezcla del colorante (muestra problema) 4. y el Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” .4 cm Rf = =0. podemos analizar mediante el tiempo obtenido tanto en la solución de agua . en la mezcla de los colores se obtuvo 0.3432 6. etanol y agua con etanol.7 s  Mezcla del colorante 4.8125 6.5 cm Rf = =0.7 s  Rojo de metilo 6.4 s  Anaranjado de metilo 5.4cm)  Azul de metileno 2.4 s Etanol (distancia recorrida:6. en el caso del azul de metileno fue 0.3 cm Rf = =0.7cm)  Azul de metileno 2.3593 6.7014 6.7031 6.3 cm Rf = =0.4 s  Rojo de metilo 6.7 s  Anaranjado de metilo 5.7695.7 cm Rf = =1 6. Por ende se obtuvo los siguientes resultados.2 cm Rf = =0. para la muestra de agua el rojo de metilo dio 1 cm sabiendo que el Rf se calcula con la distancia recorrida por el compuesto dividido para la distancia del solvente.4 cm Rf = =1 6.Etanol-Agua (distancia recorrida:6.8059 6.7 s ANALISIS DE LOS RESULTADOS Al concluir la práctica y obtener datos.

mientras que en la muestra agua etanol el anaranjado metilo predomino con 0. ya que este no puede ser más grande que el vaso y mucho menos tocar las paredes de mismo.  Theodore L. RECOMENDACIONES  Tomar muy en cuenta la longitud del papel a utilizar .7014. quimica book.  La percepción de una cromatografía sobre el papel como una autentica y pura participación entre fases liquidas inmisibles y bien diferenciadas no es correcta puesto que el agua misma puede ser utilizada como eluyente . muestra problema (mezcla de los colores) se obtuvo 0.7031.pdf  Society. azul de metilo 0. E. quimica la ciencia central.8125.como resultado obtuvimos que en las tres muestra el resultado mayor arrojo el agua además de la mezcla de colores . TEXAS: pearson.  El uso de cualquier tipo de esfero en función de remplazar al lápiz es considerado un error sistemático ya que el mismo contiene un tipo de tinta que luego con la absorción del papel intervendrá con los colorantes (indicadores) y por ende se tendrá un error al momento de realizar los cálculos.3432. C. el término polaridad posee una doble aceptación que se debe aclarar para que no se confunda con la polaridad en términos de momentos dipolar. rojo de metilo 1. rojo de metilo 1. azul de metilo 0. naranja de metilo0. el colocarlos por debajo o por encima de la misma será tomado como un error mecánico ya que la línea trazada actúa como punto de partida para posteriormente calcular la velocidad de absorción de la misma. (2004). aparecen una serie de fracciones o manchas cuya intensidad y superficie varía con la cantidad de muestra aplicada.8125 CONCLUSIONES  Tras pocos minutos de exposición.azul de metilo 0. el alcohol subirá por las paredes del papel y la práctica será fallida. BIBLIOGRAFIA  file:///C:/Users/MARIA/Downloads/Dialnet- UnaExperienciaSencillaConFundamentosComplejos-2510362.8055. H. en la muestra etanol mezcla de los colores se obtuvo 0. A.  Los indicadores son colocados de acuerdo a su línea de partida. naranja de metilo0. La siguiente muestra fue agua-etanol. (2005). Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” . ya que al momento de colocar el alcohol y los indicadores (que actuaran como colorantes). new york: Reverte.3593. Brown.  En cromatografía.

Manual de practica quimica analitica. J. 1" ediccion Universidad Autonoma Metro Politana Mexico. Mexico: Printed in Mexico. (2013).  Vega anilaelisa. D.  Verde. C. ANEXOS Zoraida Batioja Caicedo Paul Rizzo Parrales 4-“D” . (2003). V. La Teoria y la practica ene l Laboratorio de quimica Analitica .