KONSENTRASI HAMBAT MINIMAL (KHM) DAN

KONSENTRASI BUNUH MINIMAL (KBM) EKSTRAK DAUN
PEPAYA (Carica papaya L.) TERHADAP BAKTERI
Enterococcus faecalis

PROPOSAL SKRIPSI

Oleh:

LEDY ANA ZULFATUNNADIROH
021211131042

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2015
KONSENTRASI HAMBAT MINIMAL (KHM) DAN
KONSENTRASI BUNUH MINIMAL (KBM) EKSTRAK
DAUN PEPAYA (Carica papaya L.) TERHADAP
BAKTERI Enterococcus faecalis

PROPOSAL SKRIPSI

Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Menyelesaikan
Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Airlangga Surabaya

Oleh :
LEDY ANA ZULFATUNNADIROH
NIM. 021211131042

Menyetujui

Pembimbing Utama Pembimbing Serta

Nanik Zubaidah, drg., M.Kes., Sp. KG (K) Prof. Dr. Mandojo Rukmo, drg., MSc., Sp. KG (K)
NIP. 195812071988032001 NIP. 195006171978021002

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2015
UCAPAN TERIMA KASIH

Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, atas segala rahmat dan

hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal penelitian ini.

Menyadari penyusunan pra proposal ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak,

maka pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih

kepada:

1. M. Rulianto, drg., MS., Sp.KG(K) selaku Kepala Departemen Konservasi Gigi

yang telah memberikan ijin dalam pembuatan pra proposal.

2. Nanik Zubaidah, drg., Sp.KG(K)., M.Kes selaku pembimbing utama yang

selalu memberikan bimbingan, masukan, dan arahan selama penyusunan pra

proposal.

3. Prof. Dr. Mandojo Rukmo, drg., Sp.KG(K)., M.Sc selaku pembimbing serta

yang turut memberikan bimbingan, masukan, dan arahan selama penyusunan

pra proposal.

4. Terima kasih tak terhingga kepada kedua orang tua saya tersayang serta kakak

saya yang telah memberikan doa, semangat, dan dukungan yang tiada henti.

Akhir kata, semoga Tuhan Yang Maha Esa senantiasa melimpahkan

karunia-Nya dan membalas segala amal budi serta kebaikan pihak-pihak yang telah

membantu penulis dalam penyusunan proposal penelitian ini dan semoga dapat

memberikan manfaat bagi masyarakat dan rekan yang membaca.

Surabaya, 06 Juli 2015

Penulis

iii
DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL. ............................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN. ................................................................................. ii

UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................................. iii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... iv

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ v

BAB 1. PENDAHULUAN ................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang .......................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ..................................................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian....................................................................................... 5

1.4 Manfaat Penelitian..................................................................................... 5

1.4.1 Manfaat Teoritis ............................................................................... 5

1.4.2 Manfaat Aplikatif ............................................................................. 5

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 6

2.1 Irigasi Saluran Akar .................................................................................. 6

2.2 Carica papaya Linn. .................................................................................. 7

2.2.1 Taksonomi dan Morfologi ................................................................ 7

2.2.2 Kandungan Kimia Daun Carica papaya L. ...................................... 9

2.3 Antibakteri ................................................................................................. 14

2.4 Enterococcus faecalis ................................................................................ 15

2.5 Uji Daya Antibakteri ................................................................................. 17

BAB 3. KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS PENELITIAN ......... 20

3.1 Kerangka Konseptual ................................................................................ 20

3.2 Uraian Kerangka Konseptual .................................................................... 21

iv
3.3 Hipotesis Penelitian ................................................................................... 23

BAB 4. METODE PENELITIAN ...................................................................... 24

4.1 Jenis Penelitian .......................................................................................... 24

4.2 Rancangan Penelitian ................................................................................ 24

4.3 Sampel Penelitian dan Besar Sampel ........................................................ 24

4.3.1 Sampel Penelitian ............................................................................. 24

4.3.2 Besar Sampel .................................................................................... 24

4.4 Variabel Penelitian .................................................................................... 25

4.4.1 Variabel Bebas ................................................................................. 25

4.4.2 Variabel Terikat ................................................................................ 25

4.4.3 Variabel Terkendali .......................................................................... 25

4.5 Definisi Operasional Variabel ................................................................... 25

4.6 Alat dan Bahan .......................................................................................... 26

4.6.1 Bahan ................................................................................................ 26

4.6.2 Alat ................................................................................................... 27

4.7 Lokasi dan Waktu Penelitian..................................................................... 27

4.8 Prosedur Penelitian .................................................................................... 27

4.8.1 Persiapan Pembuatan Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya L.) .... 27

4.8.2 Persiapan Bakteri .............................................................................. 28

4.8.3 Penentuan Konsentrasi Hambat Minimal (KHM dan Konsentrasi
Bunuh Minimal (KBM) Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya L.)
terhadap Pertumbuhan Enterococcus faecalis ................................. 28

4.8.4 Pengamatan Pertumbuhan Bakteri Enterococcus faecalis ............... 30

4.9 Analisis Data ............................................................................................. 31

4.10 Alur Penelitian........................................................................................... 32

v
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 33

JADWAL PENELITIAN ...................................................................................... 36

RANCANGAN BIAYA PENELITIAN ............................................................... 37

ANALISIS FITOKIMIA ....................................................................................... 38

vi
DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Pohon Carica papaya ....................................................................... 8

Gambar 2.2 Struktur kimia senyawa alkaloid karpain .......................................... 10

Gambar 2.3 Struktur kimia senyawa flavonoid (myricetin, kaemferol, dan quercetin
............................................................................................................................... 11

Gambar 2.4 Struktur kimia senyawa tannin terkondensasi ................................... 11

Gambar 2.5 Struktur kimia enzim papain ............................................................. 13

Gambar 2.6 Metode dilusi pada broth yang menunjukkan KHM dan KBM ........ 19

vii
BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Perawatan saluran akar merupakan salah satu tindakan dari perawatan

endodontik, yang bertujuan untuk mengeliminasi bakteri dan mencegah bakteri

masuk lebih dalam ke sistem saluran akar. Kesuksesan perawatan saluran akar ini

tergantung dari penentuan diagnosa dan rencana perawatan yang tepat, penerapan

pengetahuan anatomi dan morfologi gigi, serta pelaksanaan preparasi, sterilisasi,

dan pengisian saluran akar (Torabinejad et al., 2009). Preparasi saluran akar

meliputi tindakan pembersihan dan pembentukan saluran akar (cleaning and

shaping). Cleaning adalah tindakan pengambilan dan pembersihan seluruh jaringan

nekrotik yang dapat memberi kesempatan tumbuhnya kuman, sedangkan shaping

adalah tindakan pembentukan saluran akar untuk persiapan pengisian (Garg dan

Garg, 2010).

Tindakan preparasi saluran akar selalu diikuti irigasi saluran akar yang

berfungsi sebagai pelumas, melarutkan jaringan organik maupun anorganik,

mempunyai sifat antibakteri, tidak toksik, dan mempunyai tegangan permukaan

yang rendah. Eliminasi mikroorganisme dalam saluran akar yang terinfeksi secara

langsung mempengaruhi hasil dari perawatan endodontik. Infeksi bakteri anaerob

yang persisten telah dilaporkan sebagai penyebab kegagalan perawatan endodontik

(Ismail et al., 2014; Torabinejad et al., 2009).

Beberapa larutan irigasi sintetik telah direkomendasikan sebagai larutan

irigasi saluran akar, yaitu sodium hypochlorite (NaOCl), chlorhexidine (CHX),

EDTA, citric acid, MTAD, dan larutan phosphoric acid (Gomes et al., 2013). Saat

1
2

ini telah dikembangkan beberapa bahan herbal atau alami sebagai bahan irigasi

saluran akar karena potensi efek samping yang sering ditimbulkan oleh larutan

irigasi sintetik. Bahan herbal telah digunakan dalam praktik dokter gigi dan medis

selama ribuan tahun dan telah menjadi popular saat ini karena memiliki sifat

aktivitas antimikroba yang tinggi, biokompatibilitas, anti-inflamasi, dan anti-

oksidan (Pujar dan Makandar, 2011).

Beberapa bahan herbal telah dilakukan penelitian sebagai alternatif bahan

irigasi saluran akar. Garg et al. (2014) telah melakukan penelitian aktifitas

antibakteri jus mengkudu (Morinda citrifolia) terhadap Enterococcus faecalis, dan

efektif pada konsentrasi 6%. Selain itu, penelitian yang dilakukan oleh Prasad et al.

(2014) membuktikan bahwa ekstrak lidah buaya (Aloe vera) efektif terhadap

Enterococcus faecalis dengan nilai KHM 1,88%. Salah satu bahan herbal yang

mulai dikembangkan saat ini adalah daun pepaya (Carica papaya L.). Carica

papaya termasuk dalam famili Caricaceae, dan beberapa jenis Caricaceae telah

digunakan sebagai obat terhadap berbagai penyakit (Baskaran et al., 2012).

Tumbuhan pepaya (Carica papaya L.) merupakan sumber nutrisi dan

mudah ditemukan karena tersedia sepanjang tahun. Selain itu, juga tersedia tiga

antioksidan yang kuat, seperti Vitamin C, Vitamin A, dan Vitamin E, serta terdapat

dua komponen aktif yaitu kimopapain dan papain. Beberapa penelitian telah

dilakukan untuk mengevaluasi aktivitas biologi beberapa bagian dari Carica

papaya L., antara lain buah, tunas, daun, kulit, biji, akar, dan getah. (Baskaran et

al., 2012; Aruljothi, 2014).

Daun pepaya mengandung banyak komponen aktif yang dapat

meningkatkan antioksidan dalam darah dan mengurangi tingkat peroksidasi lipid.
3

Skrining fitokimia pada daun pepaya menunjukkan adanya alkaloid, karbohidrat,

saponin, glikosida, protein dan asam amino, phytosterol, senyawa fenol, flavonoid,

terpinoid, steroid, serta tanin. Senyawa aktif tersebut yang berperan sebagai

antimikroba adalah alkaloid, flavonoid, saponin, senyawa fenol, steroid, dan tanin

(Baskaran et al., 2012; Tewari et al., 2014). Selain itu, daun pepaya mengandung

senyawa kimia karpain, yang merupakan zat yang dapat membunuh

mikroorganisme pengganggu fungsi pencernaan (Aruljothi, 2014). Kuantitatif

skrining fitokimia pada daun pepaya yang telah dilakukan Bamisaye et al. (2013)

menunjukkan tanin (0,001%), flavonoid (0,013%), saponin (0,022%), fenol

(0,011%), steroid (0,004%), dan alkaloid (0,019%).

Penelitian yang telah banyak dilakukan membuktikan bahwa ekstrak daun

pepaya memiliki aktivitas antibakteri yang signifikan terhadap bakteri Gram negatif

maupun Gram positif. Penelitian yang dilakukan Rahman et al. (2011)

membuktikan bahwa ekstrak daun pepaya efektif terhadap Escherichia coli (Gram

negatif) dan Bacillus subtilis (Gram positif) sebagai antibakteri dengan Konsentrasi

Hambat Minimal (KHM) 5 mg/mL.

Aktivitas antibakteri diperlukan untuk mengurangi jumlah dan mencegah

pertumbuhan kembali mikroorganisme bakteri. Mikroorganisme yang tersisa

setelah dilakukan preparasi dan desinfeksi pada saluran akar mempunyai kontribusi

yang signifikan terhadap kegagalan perawatan endodontik. Mikroba penyebab

infeksi endodontik primer dan sekunder telah diteliti secara luas, meskipun agen

etiologi utama masih belum diketahui secara pasti (Torabinejad, et al., 2009; Endo

et al., 2014). Menurut Ozon et al. (2012), infeksi endodontik lebih kompleks

daripada yang telah dilaporkan sebelumnya, dengan lebih dari 600 takson bakteri
4

yang berhubungan dengan infeksi pada saluran akar. Telah terbukti bahwa bakteri

Enterococci, khususnya Enterococcus faecalis menyebabkan infeksi endodontik

primer dan sekunder (Lins, 2013).

Enterococcus faecalis terdeteksi sekitar 77% dari kasus yang resisten

terhadap terapi. Enterococcus faecalis merupakan bakteri fakultatif anaerob gram

positif cocci dan sering kali ditemukan pada perawatan endodontik yang gagal serta

merupakan salah satu bakteri yang memiliki ketahanan atau resisten terhadap

beberapa antibiotik, seperti rifampisin, tetrasiklin, doksisiklin, eritromisin, dan

azitromisin ( Heyder, 2013; Lins et al., 2013; Endo et al., 2014).

Enterococcus faecalis sering diisolasi dari pulpa yang terinfeksi dan infeksi

persisten pasca perawatan endodontik. Jenis mikroorganisme ini mempunyai

kemampuan berpenetrasi ke dalam tubuli dentin dan bertahan hidup di saluran akar

tanpa adanya dukungan dari bakteri lainnya, dan dapat bertahan hidup pada

lingkungan keras dengan pH 9,6 dan konsentrasi garam yang ekstrim. Selain itu,

mikroorganisme ini dapat hidup pada suhu antara 10 sampai 45oC dan dapat

bertahan pada suhu 60 oC dalam 30 menit. (Valera et al., 2013; John et al., 2015).

Berdasarkan uraian di atas, diketahui bahwa daun pepaya memiliki

kandungan yang bersifat antibakteri. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian

untuk mengetahui Konsentrasi Hambat Minimal (KHM) dan Konsentrasi Bunuh

Minimal (KBM) ekstrak daun papaya (Carica papaya L.) terhadap Enterococcus

faecalis karena belum ada penelitian sebelumnya yang meneliti konsentrasi

minimal ekstrak daun papaya yang dapat menghambat pertumbuhan dan

membunuh Enterococcus faecalis.
5

1.2 Rumusan Masalah

Dari latar belakang di atas dapat dirumuskan masalah sebagai berikut :

berapakah Konsentrasi Hambat Minimal (KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minmal

(KBM) ekstrak daun pepaya (Carica papaya L.) terhadap Enterococcus faecalis?

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui daya antibakteri ekstrak daun papaya terhadap

Enterococcus faecalis.

1.3.2 Tujuan Khusus

Untuk mengetahui Konsentrasi Hambat Minimal (KHM) dan Konsentrasi

Bunuh Minimal (KBM) ekstrak daun pepaya terhadap bakteri Enterococcus

faecalis.

1.4 Manfaat Penelitian

14.1 Manfaat Teoritis

Sebagai informasi ilmiah yang diharapkan memperluas wawasan mengenai

daya antibakteri ekstrak daun pepaya (Carica papaya L.) terhadap bakteri

Enterococcus faecalis.

1.4.2 Manfaat Aplikatif

Sebagai dasar untuk melakukan penelitian lebih lanjut penggunaan daun

papaya (Carica papaya L.) yang bersifat sebagai antibakteri dalam bidang

kedokteran gigi.