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1 PRUEBAS GENERALES PARA AMINOACIDOS Y PROTEINAS


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Nombres E-mail
Alexander Gil Campo alexandergilcampo@unicauca.edu.co
Yolima Hurtado Yacumal Yolihurtado92@hotmail.com
Kerly Escalante Yiseth_9702Qhotmail.com
3 Biorgnica, Ingeniera Agropecuaria, Facultad de ciencias agrarias, Universidad del Cauca
4 Grupo No: #4
5 Fecha de realizacin de la prctica: 25/09/2014
6 Fecha de entrega de informe: 02/10/2014
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8 1. RESUMEN
9 Introduccin:
10 Las proteinas son uno de los principales componentes de todas nuestras celulas. los
11 aminocidos(compuestos orgnicos) son los ladrillos de contruccion de la proteinas. Los
12 aminocidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento qumico.
13 la sintesis de las proteinas ocurren mediante la union entre si de las cadenas de aminocidos. los
14 distintos aminocidos imparten diferentes comportamientos quimicos en la estructura de las
15 proteinas.
16 Debido a la presencia de diferentes aminocidos en las uniones peptdicas las protenas
17 reaccionan con una variedad de compuestos formando productos coloreados.
18 Existen reacciones de coloracin que son especficas para aminocidos de esas protenas y son
19 importantes tanto para la deteccin como para el dopaje de aminocidos y protenas.
20 Existen tambin reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas
21 las protenas como grupos amino o uniones peptdicas (ninhidrina y biuret).
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23 Resultados: las pruebas y el reconocimiento en la prctica al ser positivas indicaban un cambio de
24 color o una reaccin esto se podra dar por la desnaturalizacin de la protena o lo aminocidos que
25 la componen dependiendo tambin del reactivo.
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27 Conclusin: mediante las pruebas realizadas en laboratorio, se logr identificar la presencia de
28 aminocidos; las protenas estn constituidas por aminocidos, por lo cual estos mtodos se basan
29 en el reconocimiento de estos, en diferentes muestras.
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31 RESULTADOS
Hopkins-

PRUEBA Xantoproteica Biuret Ninhidrina cole Ehrlich

Albumina + + violeta + - + rojo

Gelatina - + violeta - - + rojo

Urea - + violeta - - - amarillo

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.


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Fenilalanina + - + - - amarillo

Asparagina - - + - - amarillo

Glicina - - + - - amarillo

Histidina - + violeta + - + rojo

Agua - - - - - amarillo

Triptfano + + + naranja + rojo

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2 3. ANALISIS DE RESULTADOS
3 Prueba Xantoproteica: Los compuestos que presentan bencenos sustituidos (con grupos unidos
4 al anillo bencnico), al reaccionar con el cido ntrico concentrado forman compuestos nitrados de
5 color amarillo, el cual se intensifica en medio alcalino.De los resultados obtenidos presentados en
6 la Tabla 1 las muestras que tuvieron error experimental fueron: Glicina, Asparagina y Gelatina,
7 puesto que al no tener en su estructura anillos aromtico, no se debe presentar la coloracin
8 amarilla.
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10 El aminocido fenilalanina tambin tiene en su estructura un anillo aromtico pero no est
11 activado, por lo tanto el proceso de nitracin no se da fcilmente y no se puede percibir entonces
12 la coloracin amarilla.
13 Las muestras de Triptfano, Histidina y Albumina al reaccionar con HNO3 y las gotas de solucin
14 al 40% de NaOH reaccionaron de forma correcta y el resultado obtenido fue igual al terico. El
15 agua no presento tincin alguna puesto que su composicin no presenta ningn tipo de aminocido
16 presente estructuralmente.
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18 Prueba Biuret: Es un mtodo general para la determinacin de protenas o pptidos. Se basa en la
19 reaccin del sulfato de cobre con compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos, en un
20 medio alcalino. El producto es un complejo color violeta cuya intensidad de color depende de la
21 cantidad de enlaces peptdicos presentes.
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23 Los resultados obtenidos, indican que la Albumina, la Gelatina. histidina y la Urea presentan
24 enlaces peptdicos por lo que se observ un color violeta, esto confirma lo establecido en la teora.
25 Las dems muestras en excepcin con la Asparagina al igual que la glicina,histidinay triptfano,
26 que al el no tener enlaces peptdicos sus resultados fueron los esperados (no coloracin violeta).
27 La prueba con el triptfano no la realizo el grupo al que le corresponda, por esta razn no se obtuvo
28 un resultado
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30 Prueba de Ninhidrina: Esta reaccin es bastante importante, pues es universalmente empleada
31 para detectar cualitativamente y cuantitativamente a los aminocidos. Para los aminocidos estas
32 es la nica reaccin de color, verdaderamente importante. La Ninhidirna es una agente oxidante
33 1 de los grupos alfa-amino, liberando amoniaco, CO2 y el correspondiente aldehdo, as como la
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1 forma reducida de la Ninhidrina. Una coloracin violeta determina positiva la prueba y para este
2 caso tambin un color Vino tinto la determinara como positiva. En esta prueba se obtienen los
3 resultados esperados para casi todas las muestras en excepcin para la Urea, la gelatina y el agua
4 ya que a diferencia de las dems muestras estas no es un alfa- aminocido Ej. Glicina,Asparagina,
5 Triptfano, Fenilalanina,Albumina, Histidina y Alanina(contienen alfa-amino), ni tampoco
6 contiene alfa- aminocidos (Ej. Gelatina).
7 El resultado para la muestra de Agua confirma que esta no contiene alfa- aminocidos.
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9 Prueba Hopkins cole: Los derivados indol dan productos de condensacin cuando se tratan con
10 aldehdos aromticos en presencia de cido sulfrico o clorhdrico. El aminocido triptfano
11 contiene un grupo indol y por eso la reaccin es especfica para triptfano. El resultado positivo de
12 esta prueba se puede evidenciar con el anillo indolico que degrada el aminocido triptfano a
13 Indol produciendo compuestos de color rojizo-anaranjado.
14 Los resultados obtenidos para esta prueba resultado son correctos ya que en ninguna muestra a
15 excepcin del Triptfano hay presencia de este, todas las dems muestras estn libres en su
16 estructura de este aminocido (Triptfano) por ende dio un resultado (rojizo-anaranjado).
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18 Prueba de Ehrlich: La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la cadena
19 lateral de los aminocidos se puede identificar mediante la reaccin con cido sulfanlico y nitrito
20 de Sodio por formacin de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo as detectar la
21 presencia de Histidina libres o formando pptidos y protenas.
22 El resultado positivo de esta prueba se puede evidenciar con un color rojo o Vino tinto.
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24 Los resultados se interpretan as: las muestras de Urea, Agua, Glicina, y Fenilalanina (contiene
25 anillo aromtico bencnico) tuvieron resultados correctos (negativos) ya que ninguna de estas
26 muestras contiene anillos aromticos fenlicos y/o nitrogenados.
27 Las muestra de Gelatina y albumina tambin arrojaron un resultado correcto (presento color rojo o
28 Vino tinto) ya que este si contiene anillos fenlicos y/o nitrogenados. Por el contrario de las
29 muestras de Histidina (contiene anillo aromtico nitrogenado),y Triptfano (contiene anillo
30 aromtico nitrogenado) se obtuvieron resultados positivos. Finalmente la muestra de Asparagina
31 tambin arrojo un resultado negativo, ya que presento una coloracin amarillenta cuando
32 verdaderamente al este aminocido no tener ningn anillo aromtico fenlicos y/o nitrogenado en
33 su estructura no tena por qu presentar dicho cambio de color.
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36 4. CONCLUSIONES
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38 Existen diferentes pruebas para la identificacin de protenas y aminocidos que permiten
39 establecer un resultado positivo o negativo de acuerdo a las caractersticas y composicin
40 de cada una de ellas, evidenciado en coloraciones, presencia de anillos, etc. Se establecieron
41 las caractersticas de estas pruebas para la identificacin cualitativa de sustancias que
42 pueden contener aminocidos, protenas o pptidos. Y cuando se usan varias pruebas en la
43 muestra, se pueden determinar ciertas sustancias en especfico.
44 Muchos resultados no dieron a los esperados (tericos) pero se pudo deber a la
45 contaminacin de las muestras o la contaminacin de los equipos (tubos de ensayo).
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
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1 Se pudo determinar que todos los anlisis se hicieron de manera cualitativa y que para poder
2 Hacerlo de manera cuantitativa se requiere de la ayuda de otros mtodos por ejemplo:
3 Espectrofotomtricos.
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5 PREGUNTAS PRELIMINARES
6 1) cual es la reaccin de un alfa-aminoacido y ninhidrina?
7 2) cual es la reaccin con el reactivo de biuret?
8 3) Que protenas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
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10 DESARROLLO
11 1) El grupo alfa-amino de los aminocidos forma complejos coloreados con la ninhidrina:
12 violeta. violeta
13 azuloso en la mayora de los aminocidos cuyo grupo amino es primario.
14 2) La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la
15 presencia
16 del enlace peptdico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminocidos.
17 Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una
18 sustancia
19 compleja denominada Biuret.
20 3) La reaccin de Hopkins-Cole, tambin conocida como reaccin de Adamkiewiczs, es
21 una prueba estndar para el triptfano y para las protenas que contienen triptfano. La
22 solucin que se va a examinar se mezcla con cido glioxlico y se agrega cido sulfrico
23 concentrado. Un anillo entre violeta y rojo en la unin de los dos lquidos indica que la
24 reaccin es positiva.
25 5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
26 1) Indicar los nombres y las estructuras de al menos 2 B-aminocidos.
27 2) Cules son los aminocidos denominados esenciales para el organismo
28 humano.
29 3) Consultar las frases S y R de los reactivos a manipular en la prctica.
30 4) Cules son las fichas de seguridad de los reactivos a manejar en la prctica.
31 Desarrollo:
32 Beta-Alanina:
33 El grupo amino est unido al segundo carbono a partir del grupo carboxilo.

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35 2) Cuando un alimento contiene protenas con todos los aminocidos esenciales, se dice
36 que son de alta o de buena calidad, aunque en realidad la calidad de cada uno de los
37 aminocidos contenidos no cambia. Combinaciones de alimentos que suman los
38 aminocidos esenciales

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2 AMINOCIDOS ESENCIALES:

3 Isoleucina: Junto con la L-Leucina y la hormona del crecimiento intervienen en la


4 formacin y reparacin del tejido muscular.

5 Leucina: Junto con la L-Isoleucina y la hormona del crecimiento (HG), interviene con la
6 formacin y reparacin del tejido muscular.

7 Lisina: Es uno de los ms importantes aminocidos porque, en asociacin con varios


8 aminocidos ms, interviene en diversas funciones, incluyendo el crecimiento, reparacin
9 de tejidos, anticuerpos del sistema inmunolgico y sntesis de hormonas.

10 Metionina: Colabora en la sntesis de protenas y constituye el principal limitante en las


11 protenas de la dieta. El aminocido limitante, determina el porcentaje de alimento que va
12 a utilizarse a nivel celular.

13 Fenilalanina: Interviene en la produccin del colgeno, fundamentalmente en la


14 estructura de la piel y el tejido conectivo, y tambin en la formacin de diversas neuro-
15 hormonas.

16 Triptfano: Est implicado en el crecimiento y en la produccin hormonal, especialmente


17 en la funcin de las glndulas de secrecin adrenal. Tambin interviene, en la sntesis de
18 la serotonina, neuro-hormona involucrada en la relajacin y el sueo.

19 Treonina: Junto con la con la L-Metionina y el cido Asprtico, ayuda al hgado en sus
20 funciones generales de desintoxicacin.

21 Valina: Estimula el crecimiento y reparacin de los tejidos, el mantenimiento de diversos


22 sistemas y balance de nitrgeno.

23 Debemos recordar que, debido a la crtica relacin entre los diversos aminocidos y los
24 aminocidos limitantes presentes en cualquier alimento. Solo una proporcin
25 relativamente pequea de aminocidos de cada alimento pasa a formar parte de las
26 protenas del organismo. El resto se usa como fuente de energa o se convierte en grasa
27 si no debe de usarse inmediatamente.

28 4) las frases S y R de los reactivos.

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6 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
7 1. VEJAR EVA IRMA. Prcticas de Bioqumica Descriptiva. Editorial UniSon. 2005.
8 Pag 169.
9 2. GIRALDO GERMAN ANTONIO. Laboratorio de Bioqumica: Una visin prctica.
10 24 Universidad del Quindo. 2010. Pag 97
11 Libro
12 3. Mataix verdu, J, Protenas(capitulo 5),hergon 2002.Pag 96
13
14 4. http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-content/uploads/2010/08/TP-
15 Proteinas-generalidades.pdf , Fecha de visita: 01/10/1014
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17 5. http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Fichero
18 s/301a400/nspn0363.pdf, Fecha de visita: 01/10/1014
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2 ECUACIONES DE LAS REACCIONES
3 ALBUMINA FENILALALINA
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7 GELATINA UREA

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