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Ritmos leucocitarios en caninos

Nelsa Widenhorn, María C. Scaglione, Ezequiel N. Giordano, Antonio Sartore, Raúl D.
Cerutti
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Litoral. Proyecto CAI+D 2006: Ritmos
biológicos en caninos y su sincronización con el ambiente Email: mcscagli@fcv.unl.edu.ar

Introducción: Los ritmos biológicos no constituyen un fenómeno casual ni un seguimiento pasivo de las
condiciones ambientales, sino que forman parte de una adaptación al entorno que es fundamental para la
supervivencia de las especies. Actualmente se admite que la ritmicidad es una propiedad fundamental de
todos los organismos, regulada por el reloj biológico. La endogeneidad de los ritmos proporciona a la
especie una capacidad predictiva, que le permite organizar recursos y actividades antes de que sean
necesarios. Se encuentran afectados por los llamados sincronizadores, que incluyen tanto a factores
ambientales externos, como a hábitos de vida. El reconocimiento de una estructura temporal en las
células sanguíneas, resulta valioso para la investigación y la exploración clínica. El objetivo del presente
trabajo fue estudiar las variaciones cronobiológicas leucocitarias en caninos, determinando su ritmicidad y
su dependencia a fenómenos ambientales o al reloj interno.
Materiales y métodos: La fase experimental del presente trabajo se llevó a cabo en el Hospital de
Clínica de la Facultad de Ciencias Veterinarias de Universidad Nacional del Litoral, durante Septiembre
de 2007. Con el fin de analizar las variaciones cronobiológicas leucocitarias, determinar si se ajustan a
ritmos diarios y si estos son una respuesta a fenómenos ambientales cíclicos, en cuyo caso lo
consideraríamos de origen exógeno, o bien, si son generados por el organismo mismo, se considerarían
de origen endógeno, se utilizaron seis caninos, clínicamente sanos, de peso similares (comprendido
entre 15 y 20 kg.). Los animales fueron sometidos a dos muestreos, en el primero (A) los animales
estuvieron sujetos a la variación natural del ciclo luz-oscuridad (LO 12:12), en el segundo (B) los mismos
se sometieron a condiciones ambientales constantes (LO 24:00), 19 + 1 ºC , 50 + 10 humedad relativa.
Durante toda la fase experimental los caninos dispusieron de alimento balanceado y agua ad libitum. En
cada muestreo, a cada animal, se le extrajo durante un período de 24 h y a intervalos de 2 horas, 12
muestras de sangre de 1,5 ml cada una. Las muestras fueron analizadas inmediatamente con un
contador hematológico (Arcus) para cuantificar los leucocitos. Por tratarse de animales que fueron
muestreados en diferentes horarios, se utilizó el análisis de la varianza (ANOVA) para muestras
repetidas, mediante la opción REPEATED del procedimiento GLM (General Lineal Model). El modelo
estadístico fue el siguiente: Yijk = m + [H]i + [A]j + eijk
Donde: Yijk = variable dependiente, m = media general, [H]i = efecto hora del día (i = 12 : 0, 2, 4, 6, 8, 10,
12, 14, 16, 18, 20 y 22 hs), [A]j = efecto individual del animal (l = 6), eijk = error residual del modelo.
El modelo para el ajuste de datos a una función cosenoidal fue el siguiente: y i = A0 + A1 * Cos (w * t + Ф)
Donde: yi: = es el valor del i-ésimo punto de la serie de datos de N puntos; A 0 = mesor; A1 = amplitud;
w = frecuencia angular; t = tiempo expresado en hora y Ф = acrofase.
Resultados y discusión: Los resultados del ANOVA ponen de manifiesto que tanto el modelo como los
factores animal y hora del día resultaron significativos (p< 0,05) en ambos fotoperíodos. Los niveles
cuantificados para leucocitos concuerdan con los rangos fisiológicos de 6-17 cel x 10 9/l (Meyer y Harvey
2000), 6-12 cel x 109/l (Coppo, 2001). La aplicación de un ajuste no lineal de una función coseno a los
datos de la concentración leucocitaria registrada en caninos sujetos a diferentes fotoperíodos arroja los
resultados observados en la tabla 1.

Tabla 1. Parámetros estadísticos que expresan los modelos rítmicos de niveles leucocitarios de caninos
sujetos a diferentes períodos de ciclo luz-oscuridad (LO 10:14 y LO 24:00).
Fotoperiodo L/O Modelo: [GB] = A0 + A1*Cos (w*t + ) R
12:12 [GB] = 8,500 + 1,021 * Cos (0,041 * time + 17:36) 0,75
24:00 [GB] = 9,775 + 0,982 * Cos (0,038 * time + 14:37) 0,65
A0; A1= cel x 109/l; w=1/h; t=h; Φ=h; r: coeficiente de correlación del modelo

Los valores de los períodos (T) se calcularon teniendo en cuenta las frecuencias (W) de la Tabla 1,
evidenciando que las variaciones en la concentración de leucocitos se ajustan a un ritmo diario, con
períodos de 24:01 h (LO10:14) y 26:10 h (LO 24:00). A partir de los parámetros rítmicos descriptos en
Tabla 1 se construyó la Figura 1 donde se visualizan las medias de la concentración leucocitaria

Clin Exp Immunol. responde a la característica rítmica individual que presenta cada subtipo. R. Esto sugiere un ajuste del período de sus oscilaciones al ciclo ambiental más importante que es la alternancia día/noche. (1997). Tabla 1). Hai T. Endoh. C. Inter-Médica. R. Ed.C. Ed. como ha sido demostrado en diversos estudios en humanos (Hermida y col. 110(3): 500– 508. D. Maruyama. pp 327-343.HorasLa variación diaria del número total de glóbulosHoras blancos.. Abo.R. J. Scaglione. A. La amplitud y la acrofase observada en ambas situaciones mostraron gran similitud. Buenos Aires. 385.C. Minagawa. GBlancos (celx109/l) GBlancos (celx109/l) A B En la bibliografía disponible sobre caninos.. Ed. respondiendo a la expresión de relojes biológicos endógenos. S. Dunken. En ausencia de señales externas de luz (condiciones controladas). (2000).. Tada. los cuales muestran diferentes comportamientos rítmicos (Suzuki y col.D.. 1986) y en bovinos (Cerutti y col. Circadian rhythm of leucocytes and lymphocyte subsets and its possible correlation with the function of the autonomic nervous system.56-97 Suzuki. Interpretación y diagnóstico. p. J. K. Reale L. Hatakeyama. El ritmo circadiano en la cuenta leucocitaria es altamente reproducible. con gran variabilidad entre sujetos. D.75 y 0.J y Harvey. Golombek.. T... Coppo. Tarquini B. In: Halberg F. 2006).. queda por determinar cual es la causa de esta variación. K. la ritmicidad biológica para los glóbulos blancos siguió expresándose si bien el período se volvió ligeramente diferente de aquel exhibido en condiciones naturales. M.. así como también las curvas ajustadas mediante el modelo cosenoidal. El área gris indica las horas de oscuridad. Halberg. J. En lo que respecta a los coeficientes de concordancia (R. Referencias: Cerutti. H. 212–217. M. Moroda. Fisiología Comparada del Medio Interno.(1997). Serial white blood cell counts and chronotherapy according to highest values (macrophases) or by model characteristics (acrophases). 37(Number 5):451-454.W. Argentina. esto lleva al estudio de la interacción entre los núcleos supraquiasmáticos. Meyer.C.A. eds. y Langevin. 1. En: Cronobiología: principios y aplicaciones. M.. Hermida. Estos valores en sistemas biológicos revelan un adecuado ajuste alcanzado mediante la aplicación del modelo no lineal.. . Universidad de Buenos Aires. existen trabajos referentes a variables hematológicas. 1997). Florencia. pero no se han encontrado estudios cronobiológicos donde se describa el comportamiento rítmico de las variables sanguíneas. Tarabla. Fig.. y Moreno. S. Buenos Aires. pp. En Tabla 1 y Figura 1 se pone en evidencia que la variación rítmica observada en los niveles leucocitarios de caninos en condiciones naturales presenta una frecuencia diaria. Istituto Italiano di Medicina Sociale.D. Ritmo de la concentración leucocitaria en caninos sometidos a ciclo luz oscuridad 12:12 (A) 24:00 (B) y curvas ajustadas mediante el modelo cosenoidal (línea continua). T. October 2006. el sistema inmune y el sistema endócrino. Pp. (2001). (1986). T. Tsukahara. Toyabe.. Marques. Adaptación temporal. 289–290. Conclusiones: Los resultados aquí presentados muestran que las concentraciones leucocitarias presentan ritmicidad diaria que responden a mecanismos endógenos de medición del tiempo.. para los caninos sujetos a diferentes períodos de ciclo luz-oscuridad A (LO 12:12) y B (LO 24:00). F. ISSN 0929-1016 Biological Rhythm Research. Chronobiologic Approach to Social Medicine (Aspetti Medico-Sociali della Cronobiologia). se han obtenido valores comprendidos entre 0.determinadas en este trabajo en función Hora. S... T.D. Biological rhythm of leukocyte concentrations in calves under natural conditions. Boggio. Italia.A.65.El laboratorio en medicina veterinaria..