Prctica # 12 ITESM, campus

Qro.
Academia de Qumica
Depto. de Ciencias Bsicas

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE FSFORO EN

BEBIDAS DE COLA

Objetivos

1. Conocer los componentes de un espectrofotmetro.

2. Aprender a manejar el espectrofotmetro.
3. Determinar espectrofotomtricamente el contenido de fsforo en un refresco de cola,
utilizando el mtodo de fosfomolibdato.
4. Aplicar las leyes de la espectrofotometra en el clculo de la concentracin de una
muestra problema.
5. Aprender a elaborar e interpretar las curvas de calibracin.

Materiales

Equipo o material Reactivos

1 Espectrofotmetro 0.0273 g Fosfato dicido de potasio (KH 2PO4)
9 matraces de aforacin de 50 mL 0.7800 Molibdato de amonio
3 pipetas de 5 mL 1.056 g cido ascrbico
1 pipeta de 1 mL 11 mL de H2SO4 concentrado
6 celdas para espectrofotmetro Agua desionizada
2 vasos de precipitado de 50 mL
Piceta Insumos que debe traer el alumno
(INDISPENSABLE PARA PODER REALIZAR
LA PRCTICA)
Papel de arroz Refresco de cola, ponerse de acuerdo para traer
diferentes marcas.
1 agitador magntico con magneto NOTA: El equipo deber desgasificar el refresco
un da antes de la prctica (destapndolo y
agitndolo contnuamente hasta eliminar el gas).
1 probeta de 25 mL
1 propipeta de 2mL
1 propipeta de 5mL
1 incubadora con termmetro
Todo el material utilizado debe lavarse
previamente con agua destilada. No
emplear jabn para su limpieza.

Soluciones

IMPORTANTE: ANTES DE PREPARAR CUALQUIERA DE LAS SOLUCIONES, SE DEBER

ENJUAGAR PERFECTAMENTE TODOS LOS MATRACES CON AGUA DESTILADA CON EL FIN DE
ELIMINAR CUALQUIER RESIDUO DE JABN.

Solucin stock de P2O5

Pesar 0.1915 g de KH2PO4 seco. Disolver con agua desionizada y aforar a 1000 mL. Esta solucin
contiene 100 ppm de P2O5.
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Solucin de trabajo
Diluir la solucin anterior a una concentracin final de 20 ppm de P 2O5
Solucin reductora
Se compone de tres reactivos: a) 0.7800 g de molibdato de amonio en 39 mL de agua; b) 1.056 g de
cido ascrbico en 60 mL de agua; c) 11 mL de H 2SO4 concentrado en 125 mL de agua. Mezclar a, b y c,
y aforar a 250 mL con agua desionizada.

INTRODUCCION

Mxico es el primer lugar per cpita en consumo de refresco en el mundo. En general, se piensa que los
refrescos de cola son bebidas relativamente inofensivas y que un excesivo consumo de estos productos
no causa ms dao que caries dental y aumento de peso debido al alto contenido de azcar. Sin
embargo, los daos pueden ir ms all. Adems de azcar, un refresco de cola tiene cido fosfrico,
cafena y nuez de cola, y estos elementos pueden llegar a causar diferentes trastornos al organismo. El
fsforo est ntimamente relacionado con el calcio tanto en la nutricin humana como en la absorcin de
este mineral. Un aporte alto de fsforo impide la absorcin de calcio y aumenta la cantidad de hormona
paratiroidea, la cual puede disminuir la formacin de huesos (Faras, 1988).

ESPECTROFOTOMETRIA Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una

muestra, en funcin de la longitud de onda. Cada componente de la solucin tiene su patrn de absorcin
de luz caracterstico. Comparando la longitud de onda y la intensidad del mximo de absorcin de luz de
una muestra versus soluciones estndar, es posible determinar la concentracin de componentes
disueltos en la muestra.
Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de laboratorio son varias: es rpida,
precisa, verstil, fcil de usar y eficiente en costo. Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y
versatilidad en los ltimos aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables en un
laboratorio de qumica analtica.

Para la determinacin de fsforo la reaccin es la siguiente:

7H3PO4 + 12(NH4)6Mo7O24 4H2O 7(NH4)3(PO4(MoO3 )12) + 51NH4 + + 51OH- + 33H2O

El complejo de fosfomolibdato tiene una mezcla de Mo +5 y Mo+6, su composicin es indefinida. Este

complejo es reducido a un compuesto azul soluble cuya absorbancia es medida
espectrofotomtricamente a una longitud de onda de 830 nm y es proporcional a la cantidad de fsforo
presente en la muestra, como agente reductor se utiliza el cido ascrbico.

Procedimiento

a) Preparacin de la curva de calibracin.

Preparar (preparar) 6 estndares en matraces de aforacin de 50 mL correspondientes a 0.4, 0.8, 1.2, 1.6
y 2 ppm. Para ello, aadir a cada matraz 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mL respectivamente de solucin de trabajo, 20 mL de
solucin reductora y aforar a 50 mL con agua destilada.
Incubar durante 45 minutos a 50C. Despus del tiempo de incubacin leer la absorbancia a 830 nm
empleando el blanco en la calibracin del equipo (corresponde al de 0 mL).
Elabora una tabla para determinar la curva de calibracin Tabla 1 (en resultados)

b) Preparacin de la muestra
Tomar 1 mL de refresco desgasificado y aforar a 50 mL. De esta solucin tomar 5 mL, agregarle 20 mL de
solucin reductora y aforar a 50 mL con agua destilada. Incubar durante 45 minutos a 50 C. Despus del
tiempo de incubacin leer la absorbancia a 830 nm frente al blanco (corresponde al de 0 mL). Anotar la
absorbancia obtenida en la tabla 1.
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Entregue a su instructor los siguientes datos:

Nombre Matrcula
_____________________________ _____________
_____________________________ _____________
_____________________________ _____________

1. Tabla 1. Curva de Calibracin para determinacin de fsforo

Concentracin Absorbancia
en ppm P2O5 a 830 nm
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
Refresco

2. Hacer la grfica en Excel para la curva de calibracin usando la concentracin en ppm de P 2O5 en
las abscisas y la Absorbancia en el eje de las ordenadas. Obtener la ecuacin de la recta, calcular
el coeficiente de correlacin (r), y emitir juicios respecto al valor obtenido.

3. Calcular la concentracin del P 2O5 en el refresco:

a) Interpolando en la grfica
b) Usando la ecuacin de la grfica obtenida

4. Determinar el contenido de fsforo presente en el refresco, toma en cuenta la dilucin realizada

y el factor estequiomtrico para transformar P 2O5 en P.

__________________________
Firma de la Maestra
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Cuestionario

1. Definir cada uno de los siguientes trminos:

a) Absorbancia
b) Transmitancia
c) Absortividad molar
d) Longitud de paso ptico
e) Longitud de mxima absorcin.
f) Curva de calibracin

2. Dibuja un diagrama esquemtico de un espectrofotmetro indicando cada una de sus

partes y realiza una breve descripcin de su funcin.

3. Enuncia las siguientes leyes de la espectrofotometra.

a) La Ley de Bouguer.
b) La Ley de Beer.
c) La Leyes fundamentales de la espectrofotometra

4. Qu tipo de soluciones no cumplen la Ley de Lambert- Beer?

5. Qu es una curva de calibracin y para qu sirve?
6. Por qu es importante el preparar un blanco para esta prueba?
7. Cul es la razn de que la longitud de onda que se selecciona en el espectrofotmetro
sea de 820 nm?
8. Explique la razn de lo siguientes cuidados que se deben tener con la celda del
especrofotmetro:
a. Limpiarla con papel arroz antes de introducirla al equipo
b. Llenarla hasta un volumen determinado
c. Escurrir perfectamente la celda antes de emplearla nuevamente.
d. No usar escobilln al lavarla
e. No emplear jabn en su limpieza.
f. Tener cuidado de que coincida la marca de la celda con la del
espectrofotmetro.

9. Cules pueden ser las posibles fuentes de error en las determinaciones

espectrofotomtricas?

10. Calcular el ndice de absortividad molar ( para el P2O5 usando la grfica

11. Qu problemas tendra con los resultados de la curva de calibracin si no dejo resposar
las muestras el tiempo indicado por la tcnica? Qu pasa si los dejo mas tiempo que el que
me indica?
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