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GROHMANN - TACNA
EXPERIMENTO 21
CURSO:
Microbiologia
DOCENTE:
CDIGO:
2015 178025
CICLO:
TACNA PER
2016
Deteccin de parsitos
protozoarios transmitidos
por el agua
General
Enfermedades entricas Protozoarias se transmiten por va fecal-oral,
ambientalmente por las etapas de oocyst y quiste de Cryptosporidium y Giardia,
respectivamente. Son transmitidos muchas veces tomando agua y travs de
lugares recreacionales donde haya contacto con el agua (piscinas) y agua
potable con las aguas superficiales.
Giardia
La Giardia es un protozoario flagelado caracterizado por un ciclo de vida que
implica 2 estados el de quiste y de un Trofozoito. La Giardia habita en heces de
animales y humanos, se le encuentra ms a menudo en forma de quiste ya que
es su forma ms resistente, cada quiste viable que se ingiere produce dos
trofozoitos flagelados que se adhieren a clulas epiteliales del duodeno y del
yeyuno. Los quistes pueden sobrevivir en agua durante dos meses a 8 C y son
ms resistentes al cloro que bacterias y las Entamoeba histolytica. Sin embargo,
son altamente vulnerables a la desecacin y temperaturas superiores a 50 C.
El quiste tiene forma de baln de futbol americano con un promedio de 8 12mm
de longitud por 7 10mm de ancho. Contiene estructuras internas, especficas
a la Giardia, llamado cuerpos mediana y un axostillo que se utilizan para un
resultado que da positivo cuando se quiere identificar al quiste.
Cryptosporidium
Cryptosporidium es un parsito coccidian protozoario que desarrolla en el epitelio
gstrico o intestinal de la mucosa en los mamferos. A diferencia de Giardia, tiene
un ciclo de vida relativamente complicado que implica etapas sexuales y
asexuales. Produce un medio ambiente estable ooquistes que despus de la
ingestin excystation, liberando 4 esporozoitos que inician entonces una
infeccin intracelular en las clulas epiteliales del tracto gastrointestinal. El
esporozoito distingue en un trofozoito que sufre multiplicacin asexual tipo
formulario meronts y, a continuacin, merozoitos que pueden infectar nuevas
clulas. Merozoitos de tipo II meronts producen microametocytes y
macrogametocytes que se someten a reproduccin sexual para formar los
ooquistes. Los ooquistes luego se excretan en las heces. Los ooquistes son muy
resistentes a la comn desinfectantes, incluso ms que Giardia. Son ms
pequeos que Giardia, siendo de 4 a 6mm de dimetro y forma redonda. Ganado
y otros animales pueden servir como reservorios de Cryptosporidium.
Entamoeba Histolytica
El ciclo de vida de la Entamoeba Histolytica se caracteriza por tres fases:
trofozoito, precyst y cyst, el quiste es la etapa contagiosa. La fase de quiste es
resistente, pero no puede soportar temperaturas superiores a 50 C, luz solar o
exposicin prolongada a desinfectantes. Las tres etapas del organismo pueden
encontrarse en las heces de personas infectadas. A diferencia de Giardia y
Cryptosporidium, los seres humanos y primates subhumanos son los embalses
slo de E.histolytica.Aspectos de la microbiologa de los principales parsitos
protozoos transmitidos por el agua que ocurre se comparan en la tabla 21-1.
Cryptosporidium Entamoeba Giardia
10
() =
0.5
Separacin inmunomagntica
Algas y otras partculas suspendidas (arcillas, suelo) tambin se concentran
junto a los ooquistes y quistes que pueden interferir con su observacin bajo el
microscopio. Para separar los ooquistes/quistes, se utiliza la separacin
inmunomagntica. Esto implica la adicin de bolas magnticas que estn
recubiertos con anticuerpos especficos contra los quistes y ooquistes.
La coloracin
Para ayudar en la deteccin de quistes de Giardia y ooquistes de
Cryptosporidium, el uso de microscopio directo immunouorescent utilizando
anticuerpos monoclonales es de uso frecuente cuando concentra el examen
ambiental. Isotiocianato de fluorescena (FITC) es conjugado a anticuerpos y
microscopia de epiuorescente utilizado para la deteccin final. Se considera una
caracterstica uorescence de verde alrededor del quiste u ooquistes.
Un control positivo y negativo tambin debe ser preparado cada vez que se
realiza la tincin. Una gota de reactivo de deteccin y una gota de Contratincin
reactivo se aade a cada pocillo que contenga la muestra.
21.3 PROCEDIMIENTOS
Materiales
Ooquistes de Cryptosporidium
Microscopio
21.5 REFERENCIAS
Rose, J.B., Gerba, C.P., and Jakubowski, W. (1991) Survey of potable water
supplies for Cryptosporidium and Giardia. Environmental Science and Technology
25, 13931400.