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ESCUELA POLITÉCNICA DEL EJÉRCITO

DEPARTAAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA
INFORME DE LABORATORIO
PRACTICA N° 6

Nombre : Stephania Susana Almeida Aguilar
Nivel : I Semestre - 4942
Fecha : 15/06/2013

I. TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
Identificación morfológica y clasificación de bacterias por tinción Gram a partir de muestras
de flora normal y ambiente.

II. OBJETIVOS:
 Identificar morfológicamente y clasificar bacterias según tinción diferencial: Gram, a
partir de muestras fáciles de obtener (dientes, fosas nasales y superficies del
laboratorio).
 Tomar correctamente un frotis con la muestra seleccionada.
 Aplicar metodología de fijación bacteriana en el frotis con su respectiva muestra.
 Emplear correctamente colorantes, reactivos y materiales para fijación y tinción
bacteriana, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
 Manipular correctamente el microscopio óptico de campo claro, respetando normas
universales.

III. INTRODUCCIÓN:
La bacterias son microorganismos unicelulares, procariotas, esto quiere decir que su
material genético se encuentra disperso por el núcleo al contrario que los organismos
eucariotas cuyo material genético se encuentra protegido por una capa lipídica que los aísla
del citoplasma.
Las bacterias pasan por ser los organismos más abundantes del planeta
encontrándose en todos los ecosistemas incluso en aquellos que no dependen de la energía
del Sol como las fumarolas submarinas. Tal es la adaptación de las bacterias al medio que
las rodeas que se han encontrado bacterias hasta en los residuos nucleares.

Las bacterias fueron observadas por primera vez por Anton van Leeuwenhoek
utilizando el microscopio que el mismo diseño, pero fue Pasteur el primero en ver la
importancia de las bacterias en los procesos biológicos, desechando así la teoría errónea de
la generación espontánea.

Las bacterias son organismos con una gran variedad de formas que van de las
esféricas hasta las espirilo (con forma de muelle). Además las bacterias son capaces de
formar colonias. Según su forma las bacterias las podemos clasificar como:

 Coco, con forma esférica.
 Bacilo, con forma de bastón.
 Vibrio, con forma coma.
 Espirilo, con forma helicoidal.

cuidando de no sobrecalentarla.  Las bacterias según su forma se clasifican en: cocos. Aplicar sobre la muestra. 5. PROCEDIMIENTO: Toma. MATERIALES E INSUMOS:  Placa portaobjetos  Mecheros de alcohol  Pipetas desechables  Papel especial para limpieza de microscopio  Algodón  Papel toalla  Mascarillas  Guantes  Palillos de dientes  Hisopos de madera  Picetas con agua destilada VI. frotis y fijación de muestras 1. zapatos. si es necesario añadir una gota de agua destilada. pasando la placa portaobjetos varias veces por la llama azul del mechero. piso. con forma de tirabuzón. lugol-cetona y safranina)  Alcohol industrial  Aceite de inmersión  Agua destilada VII. V. Fijar la muestra al calor. Depositar la placa con la muestra previamente fijada sobre la bandeja para tinciones. Aplicar el segundo reactivo de la tinción Gram: Lugol. Lavar con piceta de agua destilada. lavabos (pasar varias veces el hisopo sobre la superficie seleccionada). 4. Con hisopo estéril tomar muestras de las fosas nasales o de la faringe. 3. para eliminar el exceso de lugol. Con un palillo estéril proceder a tomar una muestra de entre los dientes. 3. cubriendo la muestra por 1 minuto. Con un hisopo estéril tomar muestras de superficies como mesones. Espiroquetas. IV. Hacer un frotis y expandir la muestra tomada sobre una placa portaobjetos. . cubriendo toda la muestra. espirilos. el primer reactivo de la tinción Gram: cristal violeta. Lavar con piceta de agua destilada. vibrios. 2. 4. HIPÓTESIS:  Las bacterias representan el tipo de organismo más abundante de nuestro planeta. 5. Tinción Gram 1. bacilos. ventanas. para eliminar el exceso de Cristal violeta. baños. REACTIVOS:  Reactivos para tinción Gram: (Cristal violeta. 2.  Espiroqueta. durante 1 minuto.

Enjuagar la muestra con piceta de agua destilada. Aplicar el colorante de constaste: Safranina. RESULTADOS: Bacterias (cocos) Lente 100x Tinción Gram Bacterias (bacilos) Lente 100x Tinción Gram . 11. 8. Identificar la morfología de las bacterias presentes y clasificarlas según tinción Gram. 10. cubriendo la muestra durante unos segundos y eliminarlo. Observar la placa en el microscopio con el lente 100x. Lavar con piceta de agua destilada. Secar la placa a la llama azul del mechero. 7. durante 30 segundos. repetir este proceso las veces que sean necesarias hasta que deje de salir el color violeta. 6. 12. VIII. Aplicar decolorante (alcohol-cetona). 9. cubriendo la muestra.

Berg.  Las bacterias son organismos procariotas.. X.  Las bacterias son perjudiciales al organismo de los seres vivos. Barnes. Guillermo Raspall para su libro. (2001).pdf  Curtis. W. Cirugía Maxilo-Facial. Enfermedades Infecciosas. (2008).es/wp- content/uploads/downloads/2011/11/Pr%C3%A1ctica-2. (2008). afirmadas y comprobadas. de http://www. vibrios. varias infecciones de tipo respiratorio a pesar que la flora bacteriana normal está compuesto por cocos Gram positivos anaerobios (Restrepo.. XI. China: Mc Graw-Hill.  Curtis. Chile: RIL Editores. 2003).  Durante la observación no se encontró cocos Gram negativos ya que estos se encuentran presentes en enfermedades graves como lo afirma Ledermann (2007) “Si no se encuentra bacterias del tipo coco Gram negativo la razón es que estas bacterias son altamente infecciosas produciendo enfermedades como gonorrea (gonococo) y meningitis (meningococo)”. Argentina: Editorial Medica Panamericana. L.. A. E. DISCUSIÓN:  Se puede identificar en las muestras tomadas de entre los espacios dentales y de la mucosa nasal la presencia de una gran variedad de cocos Gram positivos (color violeta).IX. A. Colegio Internacional Lope de Vega..  estrepo. S.juanluismorales. H. S. De acuerdo a un estudio realizado y tomado por el Dr.  Solomon.  Ledermann. CONCLUSIONES:  Las bacterias representan el tipo de organismo más abundante de nuestro planeta. A. Schnek..-Bacterias. Barnes. H. & Martin. M. Schnek.  Las hipótesis planteadas son verdaderas. Recuperado el 15 de Junio de 2013. espirilos. Espiroquetas. & Massarini. G. las bacterias del tipo coco Gram positivos son causantes en un 85% de enfermedades ontogénicas (Raspall. Una historia personal de las bacterias. D. Colombia: Corporación para Investigaciones Biológicas. Argentina: Editorial Medica Panamericana. además son de suma importancia en diversos campos biológicos. bacilos.. España: Editorial Médica Panamericana. así mismo. Biología. Curtis Biología. (2008). J.  Las bacterias según su forma se clasifican en: cocos. (2007). Curtis Biología. (200). 2001). & Massarini. (2003). REFERENCIAS:  Jiménes. .. A.  R Raspall. A..