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IMPACTO DE LA PRUEBA QTPCR EN TIEMPO REAL EN EL SEGUIMIENTO DE

LOS PACIENTES EN TRATAMIENTO PARA LEUCEMIA MIELOCITICA CRONICA


EN EL INSTITUTO ONCOLOGICO DOCTOR HERIBERTO PIETER AGOSTO 2016
ENERO 2017
Dionis Jess Gonzlez Musseb, * Jadiel Nova
Vsquez, * Rosa Haydee Vasallo Veras, **
Rubn Daro Pimentel. **
En este estudio se destac que la fatiga
fue la manifestacin clnica que ms
RESUMEN predomin en los pacientes. Todos los
Se present un estudio observacional, pacientes tenan diagnstico de Leucemia
descriptivo y transversal, de recoleccin Mieloide Crnica, a los cuales se les realiz
prospectiva que se llev a cabo en el instituto un breve interrogatorio acompaado de,
de oncologa Dr. Heriberto Pieter (IOHP), hemograma, qumica sangunea y la prueba
Santo Domingo, Repblica Dominicana. QTPCR, lo cual fue la base de los resultados
El universo estuvo conformado por 10 obtenidos.
pacientes, que fueron los pacientes a los que Un total de 8 pacientes estaba siendo
tuvimos acceso con diagnstico de leucemia tratado con imatinib y un total de 2 pacientes
mieloctica crnica que asistan al IOHP con con hidroxiurea. De los 8 pacientes tratados
fines de realizarse la prueba de QTPCR con imatinib, 3 pacientes mantenan niveles
durante el periodo de agosto del 2016 hasta de QTPCR mayor de 10 por ciento en la
enero del 2017. primera evaluacin, y niveles entre 1 y 10 por
De los 10 pacientes, 6 procedan de ciento en la segunda evaluacin, este fue el
Santo Domingo, el resto era procedente de, cambio ms significativo reflejado en esta
Azua, Bani, Barahona y Hato Mayor. De los investigacin, llegando a alcanzar una
10 pacientes, 4 pertenecan al sexo respuesta al tratamiento optima solo 1 de
masculino, donde el menor tena 11 aos y estos 3 pacientes. Los 2 pacientes que se
el mayor tena 43 aos; por otro lado, 6 encontraban en tratamiento con hidroxiurea
pacientes pertenecan al sexo femenino no reportaron disminucin significativa en los
donde el menor tena 16 aos y el mayor niveles de QTPCR en la segunda
tena 49 aos. evaluacin.

Se reflejaron cambios en los niveles de


*Medico General
**Asesores QTPCR en el 100 por ciento de los

1
pacientes, aunque solo en 30 por ciento de was 16 years old and the oldest was 49 years
estos se evidencio un cambio significativo. old.
In this study, it was emphasized that
Palabras claves: BCR-ABL, Leucemia, fatigue was the most common clinical
QTPCR, hidroxiurea, imatinib. manifestation in between the 10 patients. All
patients were diagnosed with Chronic
ABSTRACT Myeloid Leukemia, to whom it was
The analysis of hematological performed a brief interrogation,
malignancies has been associated with the accompanied by blood count, blood
molecular analysis of chromosomal chemistry test and the QTPCR.
abnormalities, which highlights that there are 8 patients were treated with imatinib and
rearrangements of genes involved in these 2 patients were treated with hydroxyurea. 3
pathologies. The polymerase chain reaction out of the 8 patients treated with imatinib had
(PCR) is a tool used to detect the genetic QTPCR levels above 10 percent on the first
affections in these cases, which allows us to evaluation, and between 1 and 10 percent on
carry out a better follow-up of these the second evaluation, this was the most
diseases. In chronic myeloid leukemia, a t (9; significant change reflected in this study, but
22) (q34; q11) translocation is highlighted, only 1 out of these 3 patients presented an
and this results in a gene called BCR-ABL. optimal treatment response. The 2 patients
Real-time PCR detects the BCR-ABL gene, who were treated with hydroxyurea, did not
which helps us to effectively monitor these report any significant variation on their
patients. QTPCR levels in the second evaluation.
We report the results of 10 patients Changes in QTPCR levels were reflected
diagnosed with chronic myeloid leukemia, in 100 percent of the patients, although only
who attended IOHP (Instituto Oncolgico Dr. 30 percent of these patients showed
Heriberto Pieter) with the purpose of being significant changes.
monitored with QTPCR, this was performed
between August 2016 and January 2017. Keywords: BCR-ABL, hematological,
Out of the 10 patients, 6 resided in Santo QTPCR, hydroxyurea, imatinib.
Domingo, the rest of them resided in Azua,
Bani, Barahona and Hato Mayor. 4 of them INTRODUCCIN
were male, where the youngest was 11 years Los adelantos logrados en la
old and the oldest was 43 years old; and 6 comprensin de la biologa molecular en
patients were female where the youngest
la leucemia estn comenzando a

2
proporcionar un conocimiento ms exitosa como sucede en la PCR punto
completo de la complejidad molecular de final.3
la leucemia para fines diagnsticos, de Actualmente, la PCR en tiempo real es
clasificacin, teraputicos y del el mtodo ms sensible para detectar y
monitoreo de los resultados clnicos. 1 cuantificar los cidos nucleicos. Aun
La Leucemia Mieloide Crnica (LMC) teniendo una cantidad muy pequea de
es un trastorno de clulas madres templado, el sistema garantiza una alta
mieloides con una estimada ocurrencia sensibilidad, especificidad y eficiencia.
anual de 2-3 casos por cada 100.000 Una de sus aplicaciones ms usadas es
personas por ao.2 para cuantificar cambios muy pequeos
El defecto molecular causal es el gen en la expresin gnica mediante la
BCR-ABL codificado por el cromosoma deteccin de los niveles del ARNm
Philadelphia (Ph).2 procedente de clulas o tejidos.3
El principio de la tcnica y el trmino La tcnica molecular de la
en tiempo real hacen referencia a que la transcriptasa reversa, es considerada
deteccin de los productos amplificados como exacta por el hecho de hacer uso
sucede en cada ciclo de la reaccin. Por de la tecnologa del ADN, que permite
su parte, el trmino cuantitativo hace caracterizar los transcriptos formados
referencia a que es posible cuantificar la por las translocaciones
cantidad de ADN en la muestra, a desencadenantes de las leucemias,
diferencia de la PCR punto final donde como son los puntos de ruptura en las
no es posible detectar en tiempo real ni regiones de los genes BCR y ABL, los
cuantificar la secuencia de ADN. cuales estn asociados a la presentacin
Precisamente, estas ltimas dos clnica de la LMC y la LLA. Este
caractersticas representan grandes diagnstico de mayor precisin,
ventajas de la PCR en tiempo real, ya determina la estructura y composicin de
que el producto de amplificacin es las protenas por fusin de genes
monitoreado conforme transcurre la producidos por los distintos rearreglos
reaccin, sin que haya la necesidad de genmicos y, por tanto, el fenotipo de la
que sea manipulado en un gel de leucemia.4
agarosa para conocer si la reaccin fue La eficacia de imatinib y de todos los
inhibidores de la tirosin quinasa se ha

3
definido mediante la medicin de los MATERIAL Y MTODOS
niveles de transcripcin del gen BCR- Se trat de un estudio observacional,
ABL para evaluar la enfermedad mnima descriptivo y transversal, de recoleccin
residual en los pacientes que han prospectiva de datos, con el objetivo de
alcanzado una respuesta citogentica determinar el impacto de la prueba QT-
completa.2 PCR en el seguimiento de los pacientes
En trminos de la respuesta al tratados para Leucemia Mielocitica
tratamiento, se ha informado que este Crnica que fueron evaluados en el
inhibidor de quinasa BCR-ABL produce Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter
una respuesta hematolgica completa Agosto 2016 hasta Enero 2017.
en el 98% de los pacientes en tres El universo estuvo constituido por
meses, mientras que una respuesta pacientes con diagnstico de LMC.
citogentica completa se produce en 12 La muestra estuvo representada por
meses de seguimiento en el 87% de los aquellos pacientes que se realizaron la
pacientes recin diagnosticados con prueba QTPCR.
LMC en fase crnica, as como 40 a 60%
de los pacientes en la fase tarda de la Criterios de inclusin.
fase crnica.2 Pacientes con diagnstico de
El seguimiento molecular de los LMC con resultados de la prueba
niveles de transcripcin del gen BCR- QT-PCR.
ABL por reaccin en cadena de la No se discrimin edad.
polimerasa con transcripcin inversa No se discrimin sexo.
cuantitativa (QT-PCR) durante el
tratamiento, es la herramienta ms eficaz Criterios de exclusin.
para la evaluacin de los resultados y Pacientes sin diagnstico de
evaluar el riesgo de recada, la cual LMC.
constituye la columna vertebral de Pacientes que no se realizaron la
monitoreo de LMC en varios centros en prueba QT-PCR.
todo el mundo.2

4
Instrumento de recoleccin de datos. Cuadro 3. Resultados obtenidos de la
La recoleccin de la informacin se PCR Fatiga Enero. Instituto Oncolgico
realiz mediante un formulario Dr. Heriberto Pieter, Agosto 2016
conformado por diversos acpites los Enero 2017.
cuales contenan, datos
sociodemogrficos, encuestas, estudios
de laboratorio y resultado del BCR-ABL.
Resultados.

RESULTADOS.

Cuadro 1. Resultados obtenidos de la Cuadro 4. Resultados obtenidos de la


PCR en ambas evaluaciones. Instituto PCR Prdida de peso Octubre. Instituto
Oncologico Dr. Heriberto Pieter, Agosto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017. 2016 Enero 2017.

Cuadro 5. Resultados Obtenidos de la


Cuadro 2. Resultados obtenidos de la
PCR Prdida de peso Enero. Instituto
PCR Fatiga Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.
2016 Enero 2017.

5
Cuadro 6. Resultados obtenidos de la
PCR Tratamiento Actual Octubre.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

Cuadro 9. Resultados obtenidos de la


PCR Tiempo de tratamiento Enero.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.
Cuadro 7. Resultados obtenidos de la
PCR Tratamiento Actual Enero.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

Cuadro 10. Resultados obtenidos de la


PCR Esplenomegalia Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
Cuadro 8. Resultados obtenidos de la 2016 Enero 2017.
PCR Tiempo de tratamiento Octubre.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

6
Cuadro 11. Resultados obtenidos de la
PCR Esplenomegalia Enero. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 14. Resultados obtenidos de la


PCR Fases Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 12. Resultados obtenidos de la


PCR Leucocitos Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 15. Resultados obtenidos de la


PCR Fases Enero. Instituto Oncolgico
Dr. Heriberto Pieter, Agosto 2016
Enero 2017.

Cuadro 13. Resultados obtenidos de la


PCR Leucocitos Enero. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

7
Cuadro 16. Resultados obtenidos de la resultado de la PCR, todos estaban en
PCR Plaquetas Octubre. Instituto tratamiento con imatinib. Por otro lado, el
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto 20 por ciento de pacientes que
2016 Enero 2017. permaneci con valores de PCR mayor a
10 por ciento estaban en tratamiento con
hidroxiurea.
Los pacientes que reflejaron el cambio
ms significativo en sus niveles de PCR
fueron aquellos que tenan un menor
tiempo de diagnstico.
Hubo un 40 por ciento de los pacientes
que presento esplenomegalia al
momento de la primera evaluacin,
Cuadro 17. Resultados obtenidos de la porcentaje que permaneci sin
PCR Plaquetas Enero. Instituto variaciones al momento de la segunda
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto evaluacin, a pesar de que hubo
2016 Enero 2017. disminucin en los valores de PCR.
En cuanto al resultado del diferencial
de leucocitos, es importante destacar la
amplia disminucin que hubo en el nivel
de los basfilos, siendo la media al
momento de su primera evaluacin de
1.81 por ciento y esta disminuir a tan solo
0.7 por ciento al momento de la segunda
DISCUSIN evaluacin.
Conociendo la importancia de la
Al momento de comparar el trombocitosis y la trombocitopenia en los
tratamiento de nuestros pacientes con el pacientes con leucemia mieloide crnica,
resultado de la PCR, es de importancia es necesario mencionar los resultados
mencionar que del 30 por ciento de obtenidos que describen estas
pacientes que tuvo mejora en el condiciones; haciendo hincapi en que el

8
70 por ciento de nuestros pacientes se refirieron no presentarla en su segunda
mantuvo dentro de los parmetros evaluacin.
normales de plaquetas en ambas
evaluaciones, pero no es menos cierto REFERENCIAS
que, en el 30 por ciento restante
hubieron variaciones en los valores 1. Derveaux S, Vandesompele Jo,
plaquetarios, observndose que en la Hellemans Jan. how to do
primera evaluacin un 20 por ciento de succesful gene expression
los pacientes se encontraba con analysis using real-time PCR,
trombocitopenia y solo un 10 por ciento 2010; 227-230.
se encontraba con trombocitosis, 2. Moumen A, Dehbi H, Kottwitz D,
resultados que varan al momento de la El Amrani M, Bouchoutrouch N, El
segunda evaluacin y se presenta un 20 Hadi H et al. Quantitative real-time
por ciento de los pacientes con polymerase chain reaction as an
trombocitosis y solo un 10 por ciento con efficient molecular tool for
trombocitopenia. detecting minimal residual
Al momento de darle seguimiento a un disease in Moroccan chronic
paciente con leucemia, se debe tomar en myeloid leukemia patients.
cuenta que la fatiga y la prdida de peso Genetics and Molecular
son caractersticas clnicas de Research. 2015;14(1):1044-1055.
importancia, nuestros pacientes no 3. Tamay de Dios L, Ibarra C,
fueron la excepcin y fueron evaluados Velasquillo C, Fundamentos de la
tambin segn estas dos caractersticas reaccin en cadena de la
clnicas; un 42.8 por ciento de los polimerasa (PCR) y de la PCR en
pacientes que presentaron fatiga en su tiempo real, Investigacin en
primera evaluacin refirieron ya no discapacidad, Vol. 2, Nm. 2,
presentarla en su segunda evaluacin, Mayo-Agosto 2013 pp70-78.
de la misma manera hubo un 50% de los 4. Jimnez-Arce G, Carrillo J,
pacientes que presentaron prdida de Chvez M, Jimnez R, Vargas M,
peso en su primera evaluacin que Campos L, De La Guardia A,
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