UNIVERSIDAD DEL SINU

DETERMINACION DE PROTEINAS

PRESENTADO POR:

ELVIA PEATE HIDALGO

MARIA JOSE FUENTES GALLEGO

FRAY DE JESUS NARVAEZ

JAIRO ANDRES PINILLA

SANDRA MARTINEZ

PRESENTADO A:

Dra. ALICIA HUMANEZ

Introduccin

Marco terico

Objetivos

Materiales

Procedimiento

Cuestionario

Conclusin

Bibliografa
INTRODUCCIN

El trmino "protena proviene de la palabra griega proteos, que significa primero.

Las protenas son los compuestos bioqumicos ms abundantes en los seres
vivos. Son verdaderamente especiales por ser las sustancias centrales en casi
todos los procesos biolgicos. A primera vista podra pensarse en las protenas
como polmeros lineales de aminocidos unidos entre s por medio de enlaces
peptdicos. Sin embargo, la secuencia lineal de aminocidos puede adoptar
mltiples conformaciones en el espacio. La estructura primaria viene determinada
por la secuencia de aminocidos en la cadena proteica, es decir, el nmero de
aminocidos presentes y el orden en que estn enlazados. La conformacin
espacial de una protena se analiza en trminos de estructura secundaria y
estructura terciaria. La estructura secundaria es el plegamiento que la estructura
primaria adopta gracias a la formacin de puentes de hidrgeno entre los tomos
que forman el enlace peptdico. La estructura terciaria, en cambio, se refiere a la
disposicin tridimensional de todos los tomos que componen la protena.
Presentan numerosas funciones. Por ejemplo, casi todas las enzimas estn
compuestas de estructuras proteicas. Las enzimas son los catalizadores que
permiten que ocurran casi todas las reacciones qumicas en los seres vivos. La
vida, como la conocemos no sera posible sin las enzimas. Junto con los lpidos,
las protenas son los componentes estructurales de las membranas celulares. Las
protenas de las membranas ayudan a transportar sustancias a travs de la doble
capa lipdica y trabajan como sitios receptores de los neurotransmisores y de las
hormonas. Las protenas son responsables del soporte estructural y del
movimiento del cuerpo humano. El tejido conectivo est compuesto de fibras
proteicas fuertes que ayudan a unir la piel y el hueso. Los tejidos musculares
estn compuestos de protenas que se contraen; los huesos se mueven por
msculos que se contraen. Otras funciones de las protenas incluyen el transporte
y almacenamiento de iones y molculas; por ejemplo, transportar el oxgeno de los
pulmones a las clulas(hemoglobina). Numerosas hormonas, agentes de
comunicacin qumica, son estructuras proteicas. Una de las lneas de defensa
ms importantes contra los agentes infecciosos son las protenas denominadas
inmunoglobulinas
MARCO TEORICO

Son macromolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. por la

cantidad de formas que pueden tomar. Las protenas desempean un papel
fundamental en los seres vivos y son las biomolculas ms verstiles y ms
diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que
destacan la enzimtica, hormonal, transportadora (hemoglobina), defensiva
(anticuerpos), estructural (colgeno), etc. Las protenas de todo ser vivo estn
determinadas genticamente, es decir, la informacin gentica (genes) determinan
qu protenas tendr un individuo. Las protenas son digeridas a travs de la
digestin que comienza en el estmago. Las protenas son digeridas en
polipptidos ms pequeos, por las enzimas conocidas como proteasas, para
proveer de aminocidos al organismo, incluyendo los aminocidos esenciales que
el organismo no puede sintetizar. Adems de su rol en la sntesis de protenas, los
aminocidos tambin son una importante fuente nutricional del nitrgeno. Las
protenas, como los carbohidratos, contienen 4 kcal por gramo opuesto a los
lpidos los cuales contienen nueve kilocaloras y los alcoholes los cuales contienen
7 kcal. Las protenas pueden ser convertidas en carbohidratos a travs de un
proceso llamado gluconeognesis

DIGESTIN DE PROTENAS: La digestin de las protenas se inicia tpicamente

en el estmago cuando el pepsinogeno es convertido a pepsina por la accin del
cido clorhdrico, y contina por la accin de la tripsina y la quimo tripsina en el
intestino. Las protenas de la dieta, son degradadas hasta aminocidos y sus
derivados, y estos son absorbidos por el tracto gastrointestinal

FUENTES DE PROTENAS: Las fuentes dietticas de protenas incluyen carne,

huevos, granos, legumbres y productos lcteos tales como leche y queso. Las
fuentes animales de protenas poseen los 20 aminocidos. Las fuentes vegetales
son deficientes en aminocidos y se dice que sus protenas son incompletas.
OBJEITVO

1. Determinar cualitativamente la presencia de protenas en una muestra

biolgica
2. Demostrar que las protenas pueden desnaturalizarse
Materiales

- Clara de huevo
- Leche
- Hidrxido de sodio al 20%
- Sulfato de cobre al 1%
- Jamn
- Semillas de papaya
- cido actico
- Goteros
- Tubos de ensayo

dnnn
PROCEDIMIENTO

a) REACCION DE BIURET

1. Rotular los tubos

2. Colocar 1ml de muestra en cada tubo de ensayo
3. Aadir 1ml de hidrxido de sodio al 20 %
4. Agitar suavemente
5. Aadir 5ml de sulfato de cobre al 1 %
6. Observar el cambio de coloracin

En esta imagen podemos observar que la clara de huevo dio un violeta mas fuerte
debido a la cantidad de protenas que esta posee.

En la leche observamos un violeta con menor tincin esto se da debido a la menor

cantidad de protenas que esta posee

En la clara de huevo encontramos la lactosa y en la clara de huevo encontramos

la ovoalbmina
En esta muestra no aplicamos reactivo de biuret solo porque este est constituido
por hidrxido de sodio y sulfato de cobre, la mescla nos da como resultado
reactivo de biuret

b) DESNATURALIZACION PROTEICA

1. rotular los tubos

2. colocar un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo y en otro

leche

3. aadir 5 gotas de cido actico

4. calentar el tubo al mechero

5. observar el cambio de coloracin

Clara de huevo leche

A estas dos sustancias le agregamos acido actico este tiene como funcin
cambiar el ph de las dos sustancias. Es por eso que observamos que la leche se
corta , se forman grumos y pierde su caracterstica liquida. Esto se da debido a la
perdida de sus estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria; estas se pierden
porque estn formadas por enlaces covalentes de forma tridimensional

- Estos enlaces se rompen con cambios con cambios bruscos de

temperatura y de ph. Con la clara de huevo adems de agregarle acido de
actico lo llevamos a 80 grados de temperaturas la clara se cbula y pierde
su estructura liquida
 - c ) Efecto de las enzimas sobre las protenas
1. Colocar en un mortero 10 semillas de papaya con un poco de agua , muele
las
2. En otro mortero muela 2 gr de jamn con un poco de agua
3. Rotula el tubo colocar un tubo de ensayo 2ml de lquido del decantado del
jamn agregue 4 gotas del reactivo de biuret agite y anote el color
4. Rotula el tubo. Coloca en un tubo de ensayo 2ml de lquido del de cantado
de jamn y 2ml de lquido del decantado de papaya, deje reposar por 25
minutos, transcurrido este tiempo agregue 4 gotas de reactivo de biuret
agite y anote el color

En esta muestra podemos observar nuestro paso numero 1 que fue triturar el
jamon y las semillas de papaya, luego le aadimos agua a las dos muestras y por
ultimo filtramos para obtener el extracto
Observamos que la muestra de jamn esta de color rosado con menor tincin

Debido a la presencia de polipectidos de cadena corta estos se presentan en muy

mnima cantidad

Observamos el jamn con extracto de papa ( papana) esta tiene como funcin
degradar las protenas rompiendo enlaces peptdicos por eso lo dejamos 25 min
en bao de mara para que los aminocidos estn disponibles, le agregamos 1 ml
de hidrxido de sodio y 5 gotas de biuret

Este experimento fue echo con el fin dar una tincin violeta a la muestra del jamn
pero esta no se dio debido a la cantidad de grasas y procesos que lo componen

CUESTINARIO

1.indique las principales caractersticas estructurales y funcionales de las

protenas

R/ Las protenas adquieren una estructura que, a veces, resulta muy compleja.
Esto es debido a las cargas que tienen los radicales de los aminocidos y a la
rigidez del enlace peptdico. Las cargas que posean esos radicales generan unas
propiedades en las protenas. La estructura de las protenas nos sirve para
confeccionar una clasificacin de estas complejas molculas. Tambin, la
estructura es la responsable de generar determinadas funciones que son
esenciales para los seres vivos.

Estructura de las protenas: La estructura de las protenas se puede estudiar

desde 4 niveles de complejidad, que son la estructura primaria, la estructura
secundaria, la estructura terciaria y la estructura cuaternaria.

2. seale la importancia de la estructura primaria, secundaria terciaria y

cuaternaria, en la determinacin de las propiedades funcionales de las protenas

R// Estructura primaria: hace referencia a la secuencia de aminocidos que la

componen, ordenados desde el primer aminocido hasta el ltimo. El primer
aminocido tiene siempre libre el grupo amina, por lo que se le da el nombre de
aminocido n-terminal. El ltimo aminocido siempre tiene libre el grupo carboxilo,
por lo que se denomina aminocido c-terminal.

Para determinar la secuencia no basta con saber los aminocidos que componen
la molcula; hay que determinar la posicin exacta que ocupa cada aminocido.

La estructura primaria determina las dems estructuras de la protena.

R// Estructura secundaria: es un nivel de organizacin que adquiere la molcula,

dependiendo de cmo sea la secuencia de aminocidos que la componen. La
rigidez del enlace peptdico, la capacidad de giro de los enlaces establecidos con
el carbono asimtrico y la interaccin de los radicales de los aminocidos con la
disolucin en la que se encuentra, lleva a plegar la molcula sobre s misma. Las
conformaciones resultantes pueden ser la estructura en:

Hlice: Es una estructura helicoidal dextrgira, es decir, que las vueltas de la

hlice giran hacia la derecha. Adquieren esta conformacin protenas que poseen
elevado nmero de aminocidos con radicales grande o hidrfilos, ya que las
cargas interactan con las molculas de agua que la rodean

Laminar: Tambin se denomina hoja plegada o lmina plegada. Es una estructura

en forma de zig-zag, forzada por la rigidez del enlace peptdico y la a polaridad de
los radicales de los aminocidos que componen la molcula. Se estabiliza creando
puentes de Hidrgeno entre distintas zonas de la misma molcula, doblando su
estructura. De este modo adquiere esa forma plegada.

Hlice de colgeno: Es una estructura helicoidal, formada por hlices ms abiertas

y rgidas que en la estructura de a-hlice. Esto es debido a la existencia de gran
nmero de aminocidos Prolina e Hidroxiprolina. Estos aminocidos tienen una
estructura ciclada, en forma de anillo, formando una estructura, tambin rgida, en
el carbono asimtrico, lo que le imposibilita girar.

R// Estructura terciaria: es la forma que manifiesta en el espacio una protena.

Depende de la estructura de los niveles de organizacin inferiores. Puede ser una
conformacin redondeada y compacta, adquiriendo un aspecto globular. Tambin
puede ser una estructura fibrosa y alargada. La conformacin espacial de la
protena condiciona su funcin biolgica. Las protenas con forma globular reciben
el nombre de esfero protenas. Las protenas con forma filamentosa reciben el
nombre de escleroprotenas.

R// Estructura cuaternaria: Cuando varias protenas se unen entre s, forman una
organizacin superior, denominada estructura cuaternaria. Cada protena
componente de la asociacin, conserva su estructura terciaria. La unin se realiza
mediante gran nmero de enlaces dbiles, como puentes de Hidrgeno o
interacciones hidrofbicas.

3. Cul es el fundamento de la reaccin de biuret?

La reaccin de BIURET es un mtodo que detecta la presencia de compuestos

con dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las protenas y
pptidos cortos.

El reactivo del biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los
enlaces del pptido y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia,
tornndose VIOLETA. Mientras ms cantidad de protena est presente en la
solucin, ms oscuro es el color.

4cules son las patologas relacionadas con el aumento o disminucin de

protenas a nivel plasmtico?

R//La hiperproteinemia es la concentracin elevada de alguna (albumina o

globulina) de las protenas plasmticas, mas no indica alteraciones de las
cantidades absolutas de protenas sanguneas. El aumento de las protenas es
relativo, cuando el incremento se debe a una hemoconcentracin (Aumento en el
nmero de hemates) provocada por una deshidratacin; o absoluto, s aumentan
las protenas totales por incremento de las sntesis de globulinas. Esta elevacin
de las globulinas en general se observa, en estados de defensa contra agentes
infecciosos, en procesos inflamatorios crnicos, en patologas imnunomediadas
como la artritis reumatoide o el Lupus eritematoso sistmico, o como resultado de
una vacunacin.

*La albmina es una protena que se encuentra en gran proporcin en el plasma

sanguneo, siendo la principal protena de la sangre, y una de las ms abundantes
en el hgado

*Las globulinas son un grupo de protenas insolubles en agua, solubles en

disoluciones salinas, que se encuentran en todos los animales y vegetales

*.Son los elementos formes ms numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno

de sus principales componentes, y su funcin es transportar el oxgeno hacia los
diferentes tejidos del cuerpo.

CONCLUSION

La prctica fue titulado "determinacin de protena" la misma que tuvo como

objetivo lograr el reconocimiento e importancia de las protenas, durante el
desarrollo de la prctica se explic que la protena se le reconoce mediante el
reactivo de biuret, el cual permite reconocer la protena. una vez que se
identificaron algunas protenas quedo claro las funciones y la importancia de las
protenas y finalmente concluyo en que la protena tiene cuatro niveles en su
estructura.
PALABRAS CLAVE: biuret, reconocimiento, protena, solubilidad.

BIBLIOGRAFIA

http://www.grupo-selecta.com/notasdeaplicaciones/analisis-alimentarios-y-de-
aguas-nutritional-and-water-analysis/determinacion-de-proteinas-por-el-metodo-
de-kjeldahl-kjeldahl-method-for-protein-determination/

http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/contenidos16.ht
m
http://www.monografias.com/trabajos93/reconocimiento-proteinas/reconocimiento-
proteinas.shtml