Regulación de la

expresión génica
VOG MSc.

La expresión de genes en diversos tejidos
permite la adaptación a condiciones variables
de ingesta alimenticia o del ambiente

 La expresión de genes en respuesta a cambios
en el estado nutricional y cambios en el
ambiente son eventos bien caracterizados en
Procariontes.
 •Células únicas son capaces de ajustar sus
capacidades metabólicas en respuesta a
variaciones en la administración de nutrientes
o a cambios ambientales en el medio de
cultivo.
 •En organismo multi-celulares, el control de
la expresión génica difiere en varios aspecto
con respecto a como opera una célula única e
involucra complejas interacciones
hormonales, factores neurales y
nutricionales.

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Dogma de la biología molecular Flujo de Información en la Célula .

.  La expresión génica es controlada en varios punto desde la secuencia de DNA a la síntesis de proteínas. En este proceso se generan moléculas biológicamente funcionales tales como Proteínas o RNA.Expresión Génica  El proceso por el cual la información de los genes es convertida dentro de estructuras con funciones celulares.

DNA Síntesis de Proteínas:
Cuatro estados

 Transcripción
 Procesamiento del RNA
 Traducción
 Procesamiento Post-transduccional

Expresión Génica

El ADN

Francis Harry Compton
Crick y James Dewey
Watson en 1953

que se encuentran como ya hemos visto en el cromosoma de la célula. . ADN  Formado por genes: fragmentos cortos de ADN. ya sea una bacteria o una manzana se localizan en las moléculas de ADN. que consiste en la diferente ordenación de cuatro unidades químicas denominadas bases nucleotídicas.  Estas instrucciones están ordenadas en base a un código genético. que contiene la inform  Las instrucciones para formar cualquier ser vivo.

Estructura básica Nucleósidos y nucleótidos .

Componentes .

Los ácidos nucleicos .

ADN .

ADN y ARN .

ARN: tipos .

GEN: Trozo de ADN capaz de codificar una proteína .

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Proceso .

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com/watch?v=gG7uCskUOrA .https://www.youtube.

Genes (frases) .Bases Nitrogenadas (letras) 2. Codones (palabras) 3.Gen: Trozo de ADN que codifica a una proteína 1.

La expresión de genes es diferente entre procariontes y eucariontes Procariontes  –Organelos sin membrana (sin nucleo)  –Organismos mas primitivos  –Solo un cromosoma circular Eucariontes  –Organelos unidos a membranas (especializados en funciones –nucleo. cloroplasto)  –Cromosomas están en pares y no es circular . mitocondria.

Comparación del número de genes en una simple bacteria con el número de genes en un humano. .

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.Transcripción génica Transcripción Síntesis de un RNA que es complementario a una de las hebras de DNA.

Transcripción RNA  Hebra simple  La Timina es reemplazada por Uracilo tRNA  Lleva un código de 3 bases que codifican para un aminoácido específico. .

 RNA polimerasas de eucariotes: existen tres diferentes RNA polimerasas:  RNA pol I: Transcribe los RNA ribosomales (excepto el 5S)  RNA pol II: Transcribe los precursores de los mRNAs que codifican para proteínas y micro RNAs  RNA pol III: Transcribe RNA ribosomales 5S. copiando una hebra de DNA (templado). G con C. catalizan la unión de nucleótidos trifosfato para originar una cadena de nucleótidos monofosfato. y bloquea la síntesis de todos los RNA. La rifampicina inhibe a la RNA pol. .  RNA polimerasa de Procariotes: Una enzima única cataliza la síntesis de todos los RNA. los tRNA y otros RNA pequeños. RNA Polimerasas  Enzimas de diferente tipo involucradas en la síntesis de RNA. de acuerdo a las reglas de la complementariedad de bases: A con U.

La transcripción está dividida en tres faces .

Iniciación  La unión de la polimerasa causa un desenrrollamiento de la doble hebra de DNA lo cual expone al menos 12 bases del templado  Esto es seguido por la iniciación de la síntesis de RNA en este punto de partida.  Después de que el primer nucleotido está en su lugar. la polimerasa une un segundo nucleotido al primero formando el enlace fosfodiester inicial en la cadena de RNA .  La RNA polimerasa comienza a construir la hebra de RNA. esta ensambla los ribonucleotidos trifosfato.

Elongación  La RNA polimerasa dirige la unión secuencial de ribonucleotidos para ir alargando la hebra de RNA en la dirección 5’ al 3’. Este proceso es repetido hasta que el RNA alcanza el largo deseado .  Cada ribonucleotido es insertado dentro de la hebra de RNA que está en crecimiento.

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El resultado es que el RNA se disocia desde la RNA pol y el DNA detiene la transcripción. . Señal de término .  En eucariontes el producto se conoce como RNA inmaduro o pre-mRNA. Estos trabajan en conjunto con la RNA pol para reducir la unión del producto de RNA y la hebra de DNA templado.Terminación  Terminadores al final de los genes.

El mRNA de eucariontes es modificado en su extremo 5’ Necesario para: •El proceso normal de traducción del ARN •Mantener estabilidad del mRNA •Para el reconocimiento y el acceso apropiado del ribosoma .

de modo que se puede sintetizar mayor cantidad de proteína . y aumenta su vida media en el citosol.El mRNA de eucariontes presenta poli adenilación en su extremo 3’ Esta cola de poliA protege al mRNA frente a la degradación.

.Edición del mRNA  En procariontes el transcrito de mRNA va directo a los ribosomas del citoplasma  En eucariontes el transcrito de mRNA “fresco” en el núcleo es de alrededor de 5000 nucleótidos de largo  Cuando este mismo mRNA es usado para la traducción en el ribosoma es de solo 1000 nucleótidos de largo  El mRNA ha sido editado  Las partes que son conservadas para la expresión de genes son llamadas EXONES (exons = expressed)  Las partes que son editadas (por snRNP moléculas) son llamadas INTRONES.

Síntesis de proteínas .

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Solo algunas regiones del DNA codifican para proteínas .

.Tipos de RNA  RNA mensajero (mRNA) <5%  RNA Ribosomal (rRNA) Sobre 80%  RNA Transferencia (tRNA) Cerca de15%  En eucariontes pequeñas ribonucleoproteinas (snRNP).

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Traducción .

pero el código actualmente hace un mayor número de tripletes? . CC. CU etc)  •Si tripletes de bases representan cada aminoácido. esto podría ser capaz de producir  4 x 4 x 4 = 64 combinaciones Estas son suficientes combinaciones para codificar 20 aminoácidos. G y U)  •Si un par de bases representa cada aminoácido esto sería capaz de producir  4 x 4 = 16 combinaciones. AC.Código genético: Cuántas combinaciones??  •Si una base representa 1 aminoácido esto sólo sería capaz de producir 4 diferentes combinaciones. CA. (AA. (A. C. CG. AG. AU.

de forma que un determinado aminoácido puede estar codificado por más de un triplete.El código genético es degenerado: existen más tripletes o codones que aminoácidos. .

El marco de lectura define la secuencia de la proteína producida a partir del mRNA .

Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG. La unión se produce entre el codón del ARNm y el anticodón del ARNt que transporta la metionina (Met) . que codifica el principio de la proteína. Se les une entonces el complejo formado por el ARNt- metionina (Met).

La región del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln se le llama región aminoacil (A) . la glutamima (Gln)[ARNt-Gln] se sitúa enfrente del codón correspondiente (CAA). El complejo ARNt-aminoácido 2.Elongación I: A continuación se une la subunidad mayor a la menor completándose el ribosoma.

Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y el grupo amino del segundo aminoácido. la glutamina (Gln) .

se trata del un codón de finalización o de stop . la arginina (Arg). El ARNm se desplaza a la 6ª posición.Elongación III: Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido. Liberación del ARNt de la leucina (Leu).

Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm .Finalización I: Liberación del péptido o proteína.

Finalización II: Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del hialoplasma .

Niveles de Control de la Expresión génica en Eucariontes .

Regulación del procesamiento del RNA .

. Requieren de un grupo de proteínas. los factores generales de transcripción.  El ensamble de los factores de transcripción permite varios niveles de regulación para acelerar o frenar la iniciación de la transcripción por medio de proteínas reguladoras. que deben ensamblarse al promotor para que se inicie la transcripción.  Muchas de estas proteínas reguladoras pueden actuar unidas al DNA a miles de nucleótidos de distancia del promotor que influencian.Regulación de la transcripción en eucariontes:  RNA polimerasas no pueden iniciar transcripción por sí solas.

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acetilación.Modificaciones de histonas se extiende. fosforilación. induce compactación de la cromatina e induce represión masiva de la actividad transcripcional  Modificaciones post transduccionales: Metilación. ubiquitinación Patrones específicos de modificaciones de las histonas están presentes en diferentes tipos de células → juegan un papel clave en la determinación de la identidad celular  •Silenciamiento de genes: metilación de lisina  •Activación de genes: acetilación de lisina Patrones específicos de modificaciones de las histonas están presentes en diferentes tipos de células → juegan un papel clave en la determinación de la identidad celular .

es heredable .Metilación del DNA modula negativamente la actividad transcripcional.

.  •Ello generalmente por que las modificaciones covalentes de DNA pueden ser perpetuadas.Epigenética  •Corresponde la perpetuación de diferencias en la expresión de uno o mas genes sin generar un cambio en la secuencia del DNA. ello genera diferentes propiedades en la expresión de genes.

¿Qué son las modificaciones post- traduccionales ?  •Modificaciones en las proteínas una vez ha terminado su síntesis.  •Se han descrito más de 100 modificaciones postraduccionales. .

Ejemplos de modificaiones post- traduccionales .

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 Microarray . Transcriptasa reversa: se aisla el RNA total y se transcribe a cDNA. Se amplifica la señal a partir del cDNA mediante el uso de partidores específicos para un gen.  2.Cómo cuantificar los niveles de expresión de un gen? •Cuantificando los niveles de mRNA  RT-PCR  Transcripción reversa acoplada a PCR  Es un método sensible para detección de mRNA  Involucra 2 pasos:  1.

o mas estable el cDNA. .Qué es un Microarray?  Se conocen como chip de DNA  Permiten determinar de forma simultánea los niveles de transcripción para cada gen en un genoma (expresión génica).  Microarray de expresión detecta mRNA.