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ESTRUCTURA Y FUNCION DEL DNA

L DNA: pasado y presente 1
2. La estructura primaria 3
3. La doble hélice 8
4. Desnaturalización y renaturalización 13
5. Tamaño 17
6. Fonna 21
7. Composición de bases 25
8. Funciones 27

1. ONA: Pasado y presente1-2
La historia conocida del ONA puede dividirse en tres periodos:

1869 -1943. Esta era se abrió con el descubrimiento de un nuevo
compuesto fosfórico orgánico, en las células ricas en materia
nuclear. Llamado primeramente nucleina y luego cromatina, se
demostró luego que este compuesto constaba de ácido desoxirri-
bonuc1éico (ONA) y de proteína. A este le siguieron otros
descubrimientos. El análisis del ONA mostró que contenía cuatro
clases de unidades estructurales, llamadas nucleótic\°s. El ONA se
distingue del ácido ribonucléico (RNA) por tener un azúcar
diferente, la desoxirribosa, en lugar de la ribosa, y una base
distintiva, la timina, en vez del uracilo.

1. Froton. J. S. (1972) Molecules and Lile (Moléculasy vida)John WiJeyand Sons, N.Y.
2. McElroy, W. D. y Glass, B. (eds.) 1975. The Chemical Ras/s 01Heredity (La base quí-
mica de la herencia), J ohn Hopkins Press, Baltimore

sino que más bien van ganando terreno. de forma podri'án ser comprendidos con tanto lujo de detalles como por dramática. (1953) CSHS 18. son polímeros de química de la herencia)Johns Hopkins Press. y los ácidos desoxitribonudéicos.D. solo podría haber 256 clases de dirigir el ensamblaje de dos moléculas idénticas a él mismo. y Crick.. son transcritas en reverso a partir' de RNA y virus dentro de la célula huesped.137. La Estructura Primaria 7 3.T. como las trazas de DNA se han convertido en una rama de la bioquímica. podía "transformar" a otra cepa. transforman te. El SECCION 2 : Estructura y las proteínas. cada cadena del duplex sirve de molde sobre el cual complejidad de los genes. parecían más aptas para desempeñar un condujeron al conocimiento de que el DNA tiene dos funciones papel genético. Las estructuras proteicas del también directamente en RNA..135 6. F. Una consiste en transportar la 1930. Sin embargo. Un segundo hecho notable'fué t:i1descubrimiento en 19566. Exp. Avery O. (1953) CSHS 18. anticipado. Chargaff. los ácidos ribonucleicos.D. de veinte aminoácidos. El comienzo de esta época no está importante de que el DNA es la sustancia genética: el descubri.J. en la década de principales. 1944 . el DNA era todavía llamado ácido timonucleico y existía la información genética que conlleva el fenotipo especial de la célula.ltia6. E.p. A asimilado y expresado por células de otra cepa. Empieza a material genético y el impacto de estos descubrimientos genéticos vislumbrarse el dinamismo metabólico del DNA que no había sido resultó relativamente pequeño. do de una cadena con los de la segunda cadena fué postulado para Primaria DNA Como existen solamente 256 posibles ordenaciones de las cuatro explicar. de coli por el bacteriófago T2 implicaba la inyección del DNA del forma específica. D. (1950) Experiel. McLeod. sino también en las mitocondrias y en los interior de la bacteria y luego eran en $Umayor parte abandonadas cloroplastos. DNA son degradadas y modificadas. Las dos clases de ácido nucleico. 201 nucleótidos. Este experimento expuso. Las moléculas de primero fué la demostración en 1952'5 de que la infección de E. A pesar de proteína no podían ser excluidas como contaminantes del DNA su complejidad química.! y relajadas. La genética y el unos organismos a otros4.H. Es una época en que los miento realizado en 19443 de que el JDNA preparado a partir de conceptos generalmente sostenidos.o el ácido glutámico. El DNA estructura como con las funciones dobles del DNA no han purificado transportaba un mensaje genético que podía ser promovido ningún reto. y Glass (eds) (1957) The Chemical Basis of Heredity. Las moléculas de Se hicieron luego dos descubrimtientos muy persuasivos. La otra función vegetales y era denominado ácido rimonucJeico. como un DNA duplex puede bases en un tetranucleótido. marcado por ningún suceso específico. A. Med. W.entonces ser expresada la este modelo. el papel del DNA como portador de información para ejemplo los de la glucosa. separadas entre sí. El DNA intercambian entre sí partes de las mismas. 321 4. Hay ahora un estímulo para determinar la secuencia fuera de la célula. in McElroy.Hotckiss. La Estruetura Función del polímero repetitivo de una clase de unidad tetranucleotídica.D.C. el DNA actúa de molde para convertir un .2 Aunque había razones para cree:!!"que el DNA podría ser el de la estructura complementaria y bifilar (duplex) del DNA y con 3 CAPrrULo 1: material genético. tan limitada? Las proteínas. producir las proteínas propias del virus y para duplicar su DNA muchas veces. Y es preciso también recordar que. quedaron algunas dud31Sacerca de si el DNA era el analizado y sintetizado en el tubo de ensayo. El DNA sufre lesiones y es reparado. ¿Cómo podría .H. El DNA del virus dirigía por tanto a la célula total de bases del DNA y para volver a sintetizarle. 5. retorcida~.1960. (1944)J. usando una capacidad de información se fabrica la cadena complementaria. El RNA habíatsido aislado solo de células lenguaje de los aminoácidos de las proteínas. de una forma sencilla. de esta característicaquímica. Según moléculas de DNA. Watson. Este periodo se inicia con la primera evidencia 1960 .el tiemoo presente. 123 . 79. la admitió que el DNA era una molécula mucho más compleja que la justificación para distinguir un tercer periodo se basa en un cambio repetición de un tetranucleótido y que variaba su composición de radical del punto de vista en relación al DNA. haciéndola producir muchas copias idénticas del virus confianza en que los giros metabólicos del DNA en la célula que la había infectado.C. Hershey. El DNA ejerce su función no solo virus parecían no servir más que para inyectar el DNA en el en el núcleo. tanto en relación con la una cepa de neumococo. BaJltimore. DNA.yMcCarty. 2. (La base RNA.R. Posteriormente se pesar de que no haya descubrimientos que marquen esta época. había aún más razOlnespara asignar este papel a ello el reconocimiento de cómo podía replicarse esta molécula.M. las principal del DNA es su propia replicación. creencia ampliamente difundida de que se encontraba solamente el DNA es transcrito a RNA y el RNA es luego traducido al en las células animales. Existe también bacteriana. ' cromosoma en dos cromosomas idénticos. el DNA está siendo modificado. disecado. con un tamaño mayor y compuestas Estos descubrimientos y otros importantes que les siguieron. Para duplicar el células vegetales y las animales se distinguían a veces sobre la base genotipo de la célula. De hecho. Se pensaba que cada molécula de DNA era un apareamiento complementari~ de los constituyentes del nucleóti.

"'W.ina De.lato. 1-1) tiene tres componentes: (i) una base regla pueden encontrarse en el RNA de transferencia y en los DNA de ciertos fagos. H. Los nucleótidos existen también en formas to: el RNA contiene solo ribosa y el DNA contiene solo 2-desoxirribosa. CH3 H'N N H Timina Timidina Timidilato DNA o H~ 1'2:~1:~H N N O O. Cleveland (Secci&n G. Nucleásido y nucleárido son términos genéricos que incluyen tanto formas ribo-como R:J I O I O I O I O desoxirribo.C" Desoxiguanosina Desoxiguanilato DNA losla'~ ~\i::-(.a edi. dCMP Tabla 1-1. ÓJ( H Uracilo Uridina Uridilato RNA ~ ~ 11 11 11 H 11 ~ '0.fato. El significado de las estructuras de las varias púrica o pirimídica.lato) Citosina Citidina Citidilato RNA H'N""H o o H'N/H Desoxicitidina Desoxicitidilato DNA N:?'i N H. :~H ~ N O O~~ 1~':. ha surgido una confusión en la . tipo di.fo.lato monolo. La otra única nucleósido) y (ili) un fosfato.?::-N []c 7.P-0-C 2 a. unida a través de uno de sus nitrógenos. (ed) (1970) Handbook of BiochemistJry. puede conseguir el ribonucleótido (y el ribonucleósido) por ción. dGMP monolo. Sober... guanina.oxiadeno.lato Nucleó. nen desoxirribosa con el prefijo deoxi.ó desoxi-ribo ha sido aceptada en todos los casos excepto para aquellos que contienen En cada una de las dos clases principales de ácidos nucleicos timina. En cuanto a la composición de bases. parecía una redundancia utilizar el prefijo bases: adenina (A).a} guanilato ". Los desoxirribonuc1eósidos y los desoxirribonuc1eótidos se designan como '0 '0 '0 '0 desoxinuc1eósidos y desoxinuc1eótidos.y trifosfato. (Manual de Bioquímica.desox. adenilato y azuea. Estos se distinguen por sus encontraba en el DNA. pero no son componentes comunes de los ácidos nucleicos.. para hacer los nombres menos complicados. The Chemical Rubber Co.óxiadeoo. Excepciones a esta Un nucleótido (Fig.ido Ide. :. activas.na 5'. monofosfato de timidina RN A Y adenina. a (ii) un azúcar cíclico de cinco carbonos (la combinación de la base con el azúcar se denomina ácidos nucleicos (véase la sección siguiente). Los nucleótidos de hipoxantina van entre llaves porque son precursores de ~ ~ ~ ~ los purinnucleótidos. guanina (G). bases se hace patente al considerar la estructura secundaria de los mediante un enlace N. timina (T) y citosina en los DNA. P -0-CH2 '0. esterificado con el carbono en distinción entre RNA y DNA está en el esqueleto de azíÍcar-fosfa- posición S del azúcar.lo.na) Pirimidinas Nueleó1li<to Ide. Datos seleccionadas para Biología molecular) 2.A. H ~-:--~/l.oxitimidina Desoxiguanonina Desoxieitidina monolo.. P-0-C 2 '0 -P -0-CH2' -O. 2 dTMP monolo.. poco corrientes en el RNA de transferencia y ahora que ya se logy. respectivamente.la"".:i::: GIC I~ :. en tanto que el DNA contiene timina (S-metil uracHo). en las que uno o dos grupos fostato La designación de los nucleósidos y nucleótidos que contie- estan unidos al nucleótido por enlaces de anhídrido fosfórico (pirofosfato ).. H base L~)-H N N Adenina Adenosina Adenilato RNA Desoxiadenosina Desoxiadenilato RNA -o-~-o---s:YH2 I fJ Guanina guanosina Guanilato RNA -¿ .4 TABLA 1-1 s CAPITULO I : Nomenclatura de los ácidos nucleicos SECCION 2 : Estructura y La Estructura Función del Primaria DNA Base Nucleósidoa Nucleótidoa Acido nucleico H'N/H Punnas O ". una vez que ya se ha conflfmado la bases y sus formas como nucleósido y nucleótido aparecen en la existencia natural del ribotirnidilato como uno de los nucleótidos 7. Desoxiadeno.'c O. Las y timidHato. Selected Data for Molecular Bio.bo.glicósido. solo hay una FIGURA 1-1 diferencia entre RNA y DNA: el RNA contiene uracilo. dol! Deoxiadeno.lH 3" 02' Inosina Inosinato OH H 1""°"""" 2'. Sin embargo. Idesoxi. Como se pensó originalmente que la timina solo se hay solo cuatro tipos de nucleótidos. uraciloo (U) y citosina (C) en los y se aceptaron los términos de timidina.) síntesis química y enzirnática.ina 5'.

p. 'o-p=o . o I 1 o1 nomenclatura.I -1=0 N ""'N A El enlace importante es el puente 3'. vertebral del polímero es una cadena de: .j Base1 5'Hc I O ? H-<::f =L N~H I G ~o "h:--t" 2V°'.:-(' Base 1 HzC. --. (Polimerización en siste- mas biológicos). la columna 8. Lewitt. como a su isómero 3' (Fig.. I O f 5'H..j ').O -P=O 'l/°'. abajo a detallados han indicado ya que los principales grados de libertad la derecha) resulta con frecuencia de utilidad y puede visualizarse tanto en dirección horizontal como vertical Por tanto.. (1972) en Polymerization in Biological Systemil. la rotura en 3' libera 3'-mononucleótidos (3' fosforil termini). Este Primaria enlace es especialmente vulnerable a la rotura hidrolftica. En la práctica ordinaria. las cadenas de polinucIeótido se consideraron en un ramificaciones y con enlaces entre d fosfato 5' de un nucleótido y principio como altamente flexibles y capaces de adoptar confor- el hidroxilo en posición 3' del azúcar del siguiente (Fig.t': 0-[=0 I Na+. .fosforil termini). ribo.. N+. EIsc:vier. Y conviene dejar claro que esta rotura. El maciones esencialmente al azar.> I 5'H e I . Sin embargo. 5'-fosfodiester.2 I . o . puede dar origen tanto al fosfonucIeósido Na+-OI ° H'N/H 5' que ocurre naturalmente. p 3' T ~ -. estudios8 más diagrama esquemático de cadenas de nucleótidos (Fig. ~ o I Na+. dependiendo de que lo que se rompa sean los enlaces de tipo fosfato. La rotura en 5' libera S'. 0 -P=O O I O IH3C N~H '~-' ""'V"'J-' H265'H )L I ~ T ~o I "b-f'1 o 'o-p=o I ~o O s'~A p'" p 3' .. I a O-p=O 1" O I extremo3' pApCpGpTp S'~C S'~G S""'--? . Ciba Foundation Symposium 7. 1-2). 5'H2c . tanto "pO ~" por métodos químicos como enzimáticos. 1-2. Debido a la libre rotación en tomo a los enlaces de tipo Las cadenas polinucleotídicas son largos polímeros sin fosfato. H-II X.Y.. 147. I -o-p=o o "Y'l '~I '-. los términos timidina y FIGURA 1-3 desoxiITibotimidina (desoxitimidina) se usan indistintamente y el Roturas de las cadenas polinucleotídicas. N. HI I 'o-p=o o ~ . o . . como sal sádica. 5' N N'AN/H I o ~ 'o-p=o I . 1-3).O I H 'N/H fosfato/5' azúcar3~ resCato/5' azúcar3~ fosfato SECCION 2: La Estructura Función del DNA . .mononucleótidos ribonucleósido y los ribonucleótidos de timina llevan el prefijo (S'. extremo s' 6 7 CAPITULO 1 : Estructura y Na+. o I FIGURA 1. M.o-p=o Segmento de un polidesoxinucleótido. -r=H I e JC:'-':N ROTURA S' ROTURA 3' ~ifo -o-p=o I .

N Hélice ~ Y ' H considerable rigidez. "..D. I--Z.S5Á ¡ H Estructura y / La Doble Función del DNA columna vertebral del ácido nucleico que le permiten adoptar relativamente pocas conformaciones y 'que le confieren una CH3 -1i O"""""""'H-N . ambos -H N-H"""""""o compuestos cetónicos.Hamilton. Considerar a la cadena única de polinucleó. pares de bases A-T y G-C.C. se opone a la estructura. Wilkins." 11.H. Hay diez pares de bases dentro de cada paso de la estructura de una doble hélice. y Langrid¡ge. Y resulta además que los son casi los mismos para las parejas A-T y G-C..¡ N Y H tanto grupos cetónicos como amínicos. hélice del DNA tiene una serie de notables características.R. (1965) JMB 11.391.. uno profundo y negativamente. Cuando dos cadenas se auto alinean de esta manera.. 11... " l' '-"""""""". Por Timin..""\ -. S..nin.4 A .. d'~N-.)=.M. 3. a pesar de las interaciones (i) Las columnas vertebrales azúcar-fosfato de las dos cadenas hidrofóbicas entre sus superficies planas aromáticas (Fig.¡ tido como algo que puede plegarse al azar. 1-8). 1-7). Sobre esta base.R. Desde el punto de cuyos planos superficiales son perpendiculares al eje de las hélices vista químico están dispuestas en direcciones opuestas. G y C. existen una serie de restricciones impuestas sobre la I--Z. LD... la parte externa.~ .'". Wilkins. (iv) Las dos cadenas son antiparalelas. La hélice tiene dos surcos. 1-2. La Doble Hélice9-1 O i>v # f/ t .--Z. h"'i<'. un compuesto amínico.-. cetónicos y amínicos.entre las bases es que tienen distinto tamaño: las pirimidinas T ó U y C son más . S. SECCION 3: tanto. Las distancias interatómicas y los ángulos de pirimidinas sería mucho más grande. ~o~~ pequeñas que las purinas A y G.90A--. no ofrece garantía..50" ---- l. hidrógeno adicional entre los nitrógenos del núcleo en el par A-T y también en el par G-C (Fig. (ili) El apilamiento de las bases.-\ ... que ofrecen la oportunidad de que se formen puentes de hidrógeno.. La segunda importante diferencia . 1-4). sino también la misma forma.8 de rotación están limitados a los dos enlaces O-P en la unión 9 CAPITULO I : fosfodiester y al 'enlace glucosílico entre la base y el azúcar.. puede formarse un puente de /-(1-'--'-. El diámetro de repulsa que existe entre los grupos fosfóricos cargados de la hélice es 20 A .Amott. mediante un enlace de hidrógeno. F. adoptan separados 3.Amott. yCrick. De hecho.391.SA I I . Estas características del apareamiento de las bases en los nucleótidos son las responsables del apareamiento de dos cadenas (Fig. mientras que un par FIGURA 1-4 Pares de bases unidas por hidrógenos. ~ --------. tal como han puesto de rosca de la hélice. '\ ~ Hay que distinguir dos cosas entre las bases nitrogenadas de los nucleótidos.10._: I ~.. P-3' azúcar-S'-P. 1-7). (1965) JMB 11. pueden formar dos " l' ~"""""""'H_'~'\i puentes de hidrógeno. Cuando las cadenas se trazan desde el extremo 5' 9.F.J.. Esta energía estabilizante puede ser igualo mayor otro poco hondo. y Langrid¡ge.¡ '~~~ v'5Z. poS' azúcar-3' P.H..M.. pueden :aparearse con A.Watson.S6Á--. que la que establece puentes de hidrógeno entre las bases de dos cadenas.bases A-T y G-C resultan tener un tamaño idéntico.1A .Hamilton.l. con las mismas dimensiones en cada hélice y un eje de hélice común. (ii) Las columnas vertebrales de azúcar-fosfato de las dos cadenas están conectadas por enlaces de hidrógeno entre las bases. que son cruciales para la estructura secundaria de los ácidos nuc1eicos. Sin embargo. L. Los planos de dos pares de bases vecinos estan 1-6). La doble tiene una longitud de 34 A . los pares de . T ó U. que tienen H /.. Adenin. Las bases están en el interior y la columna vertebral en para formar un duplex rígido.r '\ ~. fuertemente estabilizado (Figs. y descendente en la otra (Fig.' i>1/1' O"""""""H-N . Una de ellas se basa en la presencia de grupos Citosina \ H I--z'S3Á ¡ Gu. (1953) CSHS 18.123 al extremo 3' (5' -7 3') la dirección es ascendente en una hélice IO. no solo tienen el mismo tamaño.F. estabiliza la estructura helicoidal frente a la fuerza electrostática forman hélices que giran hacia la derecha. de tal manera que cada par de bases está rotado manifiesto con todo detalle los estudios de difracción de rayos 36° en relación con su par vecino y cada paso de rosca completo Xii por fibras de DNA y la construcción de modelos. es decir que la estructura.. D.H./ )=N "".

-. (viii) La rotación en torno al enlace N-glicosídico permite establecer varias relaciones geométricas entre la base y el azúcar. Ejemplo's de pares de bases los principales gradms de libertad de los enlaces.1:::.¡.. . (Cortesía del Dr. Las bases modificadas Hélice DNA (véase Capítulo 2. :ro. h5' P 3' 13. Sección 10) pueden entrar también en la formación de pares. =:::?Zg -. (1969) Biopolymers 7. Modelo en el e!!pacío de la doble hélice del DNA (vii) Debido a que los cuatro pares de bases encajan FIGURA 1-5 igualmente bien. T-A. El rango de conformación designado como anti ocurre con mayor frecuencia que las conformaciones opuestas 1800. Todos los pares de bases tienen la misma forma y SECCI0N 3 : CAPITULO I : el mismo tamaño.. La rotación de un par de bases 1800 permite a los grupos correspondientes. G-C y C-G. Base FIGURA 1-7 (ix) Las dobles hélices antiparalelas pueden formarse tam- Modelo esquematizardo de un dinucleótido. 821. Los enlaces glicosídicos tienen las mismas La Doble Estructura y Función del posiciones y orientaciones en estos pares.¡ ~ h5' P OH extremo 3' extremo 5' FIGURA 1-8 Segmento de un DNA duplex mostrando la orientación FIGURA 1-6 antiparalela de las cadenas'complementarias. Este bién entre una cadena de DNA y una cadena de RNA. M. . =-::"'>G . la conexión entre los o átomos de carbono glicosídicos puede hacerse a través de cualquiera de los cuatro pares de bases A-T. P ..4A 5' /'~~.10 (v) Los únicos pares de bases que permiten esta estructura 11 son A-T y G-C. 1-9)12. siempre que formen puentes de hidrógeno con su pareja correspondiente. es posible una secuencia cualquiera dentro de la cadena. "'.Sundaralingam. designadas como sin (Fig. 5' / Ií. 'C'. Como resultado de ello. / 3' ~. P 3' Surcomayor 5.¡¡./ 't_~~ / 3' -""".l\LlLevitt) 12.-Jf'. h5' ~!i>. Ribo. 34A extremos' extremo 3' Esqueleto p azúcar-fosfato 5'/ "Ai -"T~' /3' "'-0 """-" 345' 5' P 5' / . tener la misma conformación. H5' 5' . (vi) Un importante elemento de simetría en la hélice es un doble eje de rotación (diada) que pasa a través del plano de cada par de bases y relaciona los enlaces glicosídicos N-C. la rigid\ez de la columna vertebral y llaman cadenas híbridas DNA-RNA. Estas se modelo muestra las superficies aromáticas planas de las bases. y la doble hélice sigue teniendo un diámetro uniforme en Superficie aromática toda su longitud. el azúcar y el fosfato de las dos cadenas antiparalelas.

I4.ajo mación.Schaller. 13. 1-11). ciertas partes de estos plegamientos pueden formar duplex helicoidales (Fig. Sundaralingam) transcripción. y Gucker.Watson. Sin embargo. Los replicación de una cadena muy larga (Fig:. coli.. una vez dada la secuencia y la orientación de una <cadena.el apareamiento Desnaturalización de bases se ajusta a las reglas y el antiplaralelismo determina la secuencia y orientación de la cadena compllementaria. ribo C. tanto en da cadena. Estos pares de bases existen en los híbridos de se han encontrado para medir esta conducta de fusión y transcripción generados por la RNA poJiiimerasa(véase Capítulo "reannealing" (reasociación). es utilizada a su vez repetidamente como molde para la producción de cadenas virales para nuevas partículas de fago. 445. S. una vez que penetra en el huesped. . importantes cuestiones acerca de la cinética y la termodinámica de Una significativa consecuencia de esta estructura es que la desnaturalización y la renaturalización y acerca de como estos cualquier secuencia de bases es tolerada d!rentro de una determina. Desnaturalización y Renaturalización FIGURA 1. Aunque el DNA monocatenario puede encontrarse en solución formando un repliegue al azar. los álcalis ca inherente a la estructura del DNA es la base no solo de su desprotonizan los nitrógeno s del anillo de G y T. F. H. (Cortesía del que además es crucial para sus funciones durante la replicación y la Prof. El DNA de Renaturalización Función del DNA ciertos virus bacterianos pequeños.9 Modelo de rotación en tomo al enlace ]!/. Esta característi. indica la presencia de una ó más porciones duplex en forma de horquillal4. quedan por resolver 10)."" " acontecimientos que ocurren para la expresión de las funciones 13 12 genéticas. estructura secundaria puede llevarse a cabo en solución. La complementariedad ha venid@ a explicar la transcrip. y Crick. aumentan- mentariedad 13.000 residuos. glicosídico. con una longitud aproxi- mada de 2 Jl Yconteniendo unos 6. ribo G y pueden separarse y volverse a juntar. el cual proporciona la explicación para una precisa do la temperatura ó bien por titulación con ácidos ó álcalis.(. 123. corriente labilidad de los enlaces glicosídicos de la purina a b. desoxi C. idéntica composición de bases pueden tener el tubo de ensayo como en la célula. (1969) 1MB 44. Sin embargo. el DNA viral se convierte en una doble circunferencia. La resistencia del uno por ciento aproximadamentede los DNAsde <{Ix 174YM13 frente a las nucleasas específicas de cadenas sencillas. SECCION 4: CAPITULO 1 : Existe una interesante excepción a la regla de que el DNA Desnaturalización y Estructura y que existe de forma natural es bicatenario (duplex). DNAs de. (1953) CSHS 18.. E. Las cadenas del DNA duplex se separan cuando se rompen los La más importante consecuencia del modelo duplex para la enlaces de hidrógeno existentes entre las bases.J. tales como el <{Ix 174 Yel M13 forma un lazo cerrado monocatenario. La poco replicación. ácidos protonizan los nitrógeno s del anillo de A. 000 A. desoxi T. . Voss. Esta fusión de la estructura del DNA es la introducción del concepto de comple. sino también de su capacidalld para transmitir infor. Son muchas las técnicas que desoxi G.. ribo-U. Sin embargo. Subsiguientemente la cadena comple- mentaria sintetizada sobre el DNA del virus como molde.D. conteniendo cada una de ellas unos veinte pares de bases..G y C. H. Una de las más notables características de la hélice de DNA y La conformación a"ti se ve favorecida amte la sin.H. 1-10). H. es la facilidad con que sus cadenas componentes híbridos son desoxi A. secuencias de bases totalmente diferentes. 4.C. procesos pueden estar influenciados por otras moléculas. pH hace que la utilización de ácidos no sea conveniente para' los ción y la traducción y de esta manera 1msecuencia completa de experimentos de desnaturalización. Esto puede resultar muy importante en la replicación de estos cromosomas víricos (Capítulo 8).

D.T) . « 1.2.Inman.N. viejo nuevo nuevo viejo 60 Tm 100 80 100 TEMPERATURA en °e Tm:C FIGURA 1-12 Curvas de fusión de DNA (a la izquierda) y dependencia entre Tm y contenido de G-C(a la derecha). Los duplex se forman 1. y Schildkraut. and Mo/. Estrucutra secundaria en un DNA monocatJenario.A. ~ 1. c. tanto Desnaturalización y Estructura y Función del más elevada es la temperatura o el pH de la fusión. R. Rownd. I I I . (1953) esas 18.e f C') . 16.. L. (1967) 1MB 28.4- > DNA CI + ". (1963) en Prog. Res..B. . La temperatura correspondiente al punto medio de la fusión del DNA (Tm) está determinada por su contenido en G-C.50 3o ~ . 123). J. Además de los Renaturalización DNA enlaces de hidrógeno. ~ . En la fusión por calor (Fig.C.14 La estabilidad del duplex es una función directa del número 15 de pares G-C que contiene unidos por un triple enlace de SECCION 4: CAPITULO 1 : hidrógeno.0 - I . R.231..H.r¡ 1. los iones de metales divalentes y las poliaminas. DNA<{WatsonI.Marmur. las otras fuerzas que dan estabilidad a la hélice son el apilamiento de las bases y las interacciones hidrofóbicas con él relacionadas y también la neutralización de las FIGURA 1-10 fuerzas electrostáticas de repulsa de los grupos fosfatos por las Mode!lo propuesto para la replicación del sales. El proceso de fusión se puede monitorizar convenien- temente mediante el incremento de la absorbancia (efecto hiper- crómico) que resulta al alterarse el apilamiento de las bases. Cuando se incuban cadenas complementarias a una temperatura de 250 por debajo de FIGURA 1-11 15. I 100 A B u poli d lA . cuanto mayor es la fracción molar de pares G-C.103. 1-12)15 el desenrollado de las cadenas se inicia por las regiones ricas en los pares de bases A-TI6 y continua hacia regiones de contenido cada vez más elevado de pares G-C. Bio/. Renaturalización La desnaturalización es reversible incluso después de que las dos cadenas han sido totalmente separadas. por annealing (asociación) de regi'mes compIcnentarias. y Crick. F.

Otros i 7. B. Una rigurosa medida del tamaño de los duplex que Co 1 + K2C".000 pares de bases se ha conseguido marcando con 32P cada uno de los extremos 5'21. y Richardson.! 102 104 debe ser inversamente proporcional al número de pares de bases N. si es que hay alguna. H. y Davidson. y Kohne. 24'3. FIGURA 1-13 Col (molxseg/lit'o) en el DNA. 1-3).16 la Tm' empiezan a reasociarse y llega mmmomento en que vuelven Las "curvas Cot" para virus y bacterias (Fig. ~ La cinética de la renaturalizacióm proporciona una medida Ü O precisa y sensible de la complementari~dad (o diversidad) existente ti) « en una población de moléculas de DNA. Hay Tamaño Función del su comportamie¡.J. cero. Cot Los organismos más complejos requieren un DNA más =1/K2' Este valor.Davis.34'9. El cromosoma más sencillo. (1968) PNAS 60.A.C. generalmente. (1967) JMB 23. tal como una medida directa de la complejidad diel DNA. 1-13) se 17 a formar la hélice original. Tamaño2 O ecuación de segundo orden: <> El DNA es largo y sin ramificaciones. . Seleeted Data for Molecular Bio. denominado (Coth/2 es proporcional a N y es complejo (Tablas 1-2. Cuando la fracción reasociada CICo es el 50 por ciento. el tamaño a partir de las medidas de velocidad de sedimentación. Por el DNA de susceptibilidad frente a las nucleasas específicas para cadenas contrario. el de los virus del polioma ó el SV40. La constante de este ritmo ~. 20. 161.J. (1968) Scienee 161" 529. Las tasas de renaturalización pu. Esto va seguido de un rápido "cierre U « en cremallera" de las secuencias vecilMlspara formar el duplex. 18. el trozo de cadena sencilla del tipo salvaje que no ha: podido aparearse forma un asa que sirve de 102 104 106 108 1010 puente entre las dos regiones duplex 17'"Tales moléculas hetero-du. D. a lo largo de su longitud de 1.lto durante la sedimentación ó bien por su falta muy pocas. ¡ ¡ ¡ ¡ i plex permiten realizar un refinado rñapeo físico de la localización o o o cteTos genes en el cromosoma. una curva compleja que refleja la presencia Un ejemplo de la precisión de la renaturalización se encuentra de varias clases de secuencias. muestra.529. W. C. como función del tiempo y de la concentración. Cleveland (Sección H).Sober. tario en el tiempo t y Co es la concentración cuando t es igual a viscosidad y dispersión de la luz. 405.a Edición. También se ha calculado C es la concentración de cadenas simples de un tipo complemen. salvaje del fago A con la cadena comp1!ementaria de un mutante de Sección 7) tiene una secuencia sencilla repetida 107 veces o más y A que 'lleva una deleción de 100 ó mas residuos. Parte del DNA. El cr u. lleva información para solo cinco o diez genes. secuencia18 : El DNA recortado fué aproximadamente de una longitud de 400 nucleótidos (Bri- Uen R. en la parte única y se renaturaliza lentamente..7 micras. logy. y Kohne. y Ris. R.La renaturalización es un w cr 0. ritmo del proceso total esta gobernadID por la cinética de segundo 1.~t contienen hasta 50. The Chemical Rubber Co. y Davidson N. (1968) Science. R. 19 Britten. E. .Wetmur.I.G.0 orden de la reacción de nucleación. D. caracterizado por en el "annealing" (asociación) de una cadena de DNA del tipo sedimentación como un satélite de la banda principal (Capítulo 1. 1-13)19 relacionando C/C con ellog de Co( según la s. la cinética de la renaturalización del DNA eucariótico sencillas.5 proceso que se realiza en dos pasos y que comienza con una lenta Z O nucleación durante la cual pequeñas :secuencias de bases que se Ü complementan forman pares. cuando el genoma no tiene: regiones repetitivas en su Reasociación de DNAs fundidos. Szybalski. secuencias que se repiten. su longitud ha sido C medida directamente en el microscopio electrónico y por autorra- diografía. N. (ed) (1970) Handbook of Bioehemistry. (1969) Seienee 163.Weiss. 2. por N que son iguales al número total de bases en el cromosoma. La mayor parte del DNA es ser normal al microscopio electrónico. Editado en 1968 por la Ameri- 1 can Association for the Advancement of Science (Asociación Americana para el K2 o: N progreso de la Ciencia). H. el valor de N es muy elevado. . Westmoreland. Pares de nucleótidos correspondiente a la deleción. (1968) JMB 31.eden representarse en una gráfica (Fig. excepto en que. 1343. W. B.E. 21. La renatuuralización suele medirse en aproximan a la cinética de segundo orden esperada y a valores de SECCION 5 : CAPITULO 1 : Estructura y función del descenso en la absorbancia (efecto hipocrómico). El producto parece se renaturaliza muy rápidamente.C.

debería medir entre forma replicativa duplex 1. Tamaño Función del DNA Longitud Puede calcularse de forma grosera que en E.14 virus más grandes.000 pares de bases (que codífican una proteína de unos 40.fi¡017 Circular duplex millones de pares de bases (con pesos moleculares entre 32 x 109 y ". aumentó mucho el valor de Tamaño del genom.061 Lineal Vacuna l:. aEI peso r:¡olecular medio de un par de bases es 660 debido a su sensibilidad a sufrir deterioros durante su aislamiento. de longitud.4 OJOOl8 Circular monocatenaria.6y8. de longitud. un DNA que es diez y cincuenta veces !11I:!!yor.74 0J1i)019 Circular monocatenario forma replicativa duplex P4 15. respectivamente. de 1 mm.36 Circular EUCARIOTAS N° cramasamas (haploide) ~n~m l~OO 4. los cromosomas humanos contienen entre 48 y 240 Polioma. y contiene 4 millones de pares de bases. tales como las He..l Peso molecular 4.000.6 17 Drosophila (mosca de la fruta) 165.(Fig. tienen Micrografía electrónica de un cromosoma hu.1-14).7700 19 a longitud =(Kb) (3. los DNAs aislados de fagos.Ox 10-4 1. forma B) 3 x 103 JI.900.. 118.L Y por bases (miles) t~taIa autorradiografía pudieron visualizarse cromosomas bacterianos Organismo (Kb) (mun) Forma circulares. medían todos unos 15. 160 x 109 daltons) y su DNA si es continuo. es decir por la presión uniforme del dedo pulgar sobre una jeringa al depositar (y en el mismo proceso al cLzallarse) Tamaños de moléculas de DNA y de genamas el DNA a través de una aguja.X 174 5.000 pares de bases (10 X 106daltons).1 Q.2cm. P22 40. bacterias y células animales.18 TABLA 1-2 19 bacterias o los animales. El tamaño del DNA estaba delimitado por la técnica TABLA 1-3 experimental.4 x 10-4) mm. En el microscopio electrónico Núm. si se admite que 1. SV40 5.000 <990 23 Pez pulmonado 102. . Hacia 1960.9 cm.MI3(fd.0 2 x 106 longitud de un gen y que hay solo una copia de cada uno de ellos. de pares de Lomgitud pudo verse DNA de fagos con una longitud de 50 J. Cromosoma XII de un cultivo de células longitud del DNA en organismos más complejos..l x 108 pares de bases y tiene 30. coli pueden formarse Pares de basesa cm J.4 OJ!iU20 Lineal P2. El cromoso- CAPITULO I : ma de E. como A y el de la vacuna.000 56 4 Hombre 2. El fragmento más largo de DNA VIRUS animal medido fué también de lmm. de longitud (1.. La mano. Es difícil obtener y medir cadenas muy largas de DNA.000 34.000 daltons) es el valor medio de la DNA duplexb (Na-l.5 0c«i)138 Lineal A 49 0c«i)166 Lineal T2' T4' T6' P1 180 t!D.La (Cortesía del Dr. FIGURA 1. Du Praw).. E. es proporcionalmente mayor.000 veces la Equivalencias aproximadas masa-longitud del DNA SECCION 5 : Estructura y longitud de la bacteria).000 genes. aproximadamente. por ejemplo. b Ix 10-1 g (un picogramo) de DNA duplex contiene~. las medidas del tamaño del DNA.fl) 5. Cuando este efecto de rotura se hizo evidente y se tuvo cuidado de evitarle.062 Lineal BACTERIAS Mycoplasma hominis 760 026 Circular Escherichio coli 4000 1. coli tiene más de 1 mm. Sin embargo. .0 Oc«i)OSl Lineal T7 35.

J . Estas formas se denominan superplegadas (superenrolladas o superhelicoidales) debido a que contienen un número mayor del DNA circular standard de pares. En la naturaleza sin embargo. 40x 109 confirmación de que un cromosoma animal. folio (A dv. La continuidad se conserva a lo largo de todo el ciclo de la célula. R.eeión .. Diagramas de reJillaS circular y linear de DNA y ""icrografía electrónica de plásmidc. (MicrografÍa. y Calendar. el DNA está condensado en el cromosoma de una célula o en la cabeza de un D. Los duplex circulares aislados de virus. 41. esta compuesto por una sola molécula de DNA en forma de filamento o cadena. I .virilis 47 x 109 El DNA extendido sobre una rejilla del microscopio elec- <1 trónico aparece como un círculo duplex (un lazo cerrado) y como una varilla (Fig. 42x109 correspondientes a pesos moleculares hasta de 80 x 109.melanogaster 'ipo silvestre -. (1973) Chromosoma.al proceso de cerrado del círculo duplex.C. Se piensa que los superenroIlamientos se originan durante el DNA lin. 24. 38. y Zimm. 1. cortesía del Dr.. determinadas por viscosimetrial (Kavenoff. 1 . la longitud del cromo soma resulta mucho más reducida que la del DNA contenido dentro de él. H. bacterias y mito con- drias aparecen como plegados sobre si mismos25 (Fig. y Watson. La única molécula de DNA duplex de un cromosoma eucariótico está en forma de complejo con estas proteínas. adecuado a su longitud duplex y consecuente- mente poseen en compensación un número extra de vueltas nega- tivas. Inversión --. después de replegarse miles de veces. 1.americana --+".. 1 .E. (1973) Chromosoma 41. del mismo modo que un cromosoma bacteriano ó v{rico. 24x 109 6. R. Peso molecular 20 Especie Estirpe Cromosoma más g"nde del DNAde Ciertos análisis que hacen uso de las propiedades 21 la escalal mayor tamaño viscoelásticas del DNA. Williams. El DNA tiene la medida del cromo soma. R. Estos datos son la más completa D. (1973) CSHS. 22. 41 x 109 nas22. 58x109 Drosophila que se ha medido por esta técnica y la masa de DNA determinada cito lógicamente (Fig. 255.hydei 'ipo . Forma D. Las moléculas Corren a lo largo de toda la longitud del cromo soma sin que haya discontinuidad en el centrómero.]. cuando en parte de su longitud las bases no están apareadas sino formando el complejo con las proteínas.15). Se han medido Forma DNA DNAs cromosómicos hasta de cuatro centímetros de longitud. 1.. las proteínas no histonas y el RNA pueden jugar también un de Drosopllila.arriba y el miniplásmido 15 T abajo) nético en los eucariontes) (1973) CSHS 38. el plásmido del raga defectivo A.17). B. del. cierto papel. K. The Organization of Genetic Material in Euk:aryotes (La organización del material ge- de E. o formando una sola fibra de cromatina enrollada sobre sí misma. han revelado ahora la longitud intacta del SECCION 6 : CAPITULO 1: DNA de los cromosomas de muchas células animales y bacteria- Estructura y Función del D. En la estructura del cromosoma FIGURA 1-15 eucariótico las proteínas histónicas tienen una importante influen- Longitud del DNA en el cromosoma más grande <dedivetSasespecies cia. R.16). Como resultado de ello. Kavenoff. FlGCRA 1-16 23. H. deja el círculo desenrroIlado.Vinograd. Tom Broker) 25. B.ilvestre -.]. (1953) 1MB 78.. Richards. YZimm. La subsiguiente eliminación de la proteína al aislar el DNA. 79 x 109 virus23. (1968) 1MB 33. (1973) CSHS 38.1). 173. Es lamentable que se conozca tan poco de la disposición del DNA en el cromosoma24. Lebowitz.-. R. Existe un notable acuerdo entre la longitud del cromosoma más grande de '"nslocación ..

hay almacenada energía libre positi- va. Morrow. la posterior adición debromuro de etidio hace que el DNA se superpliegue y se superenmille de nuevo. entre los pares de bases apilados2 9. 307.F. Bauer. Sección 12.12.o. 1303. Y hay aún otra manera. (1972) JMB 66. Pettijohn. que es liberada cuando el DNA se desenrolla y queda relajado. (1974) JMB 82.J. cada uno de unas 20. Carlson.como si fuese mediante una escisión endonucIeolítica. Bartok. o bien localizadas SECCION 6 : Función del Forma como si fueran una burbuja desnaturalizada. P. C. transformadas por el virus del polioma. si la temperatura se mantiene por debajo de los 100 (véase Capítulo 7. Este último modelo ofrece una más obvia. Vinograd). 26. y Berg. según opinión de DNA otros27... P. y Pettijohn. son lisados posterior- mente con un detergente no iónico.31. región específica. soltarse de una . permite el desenroscamiento favore- cido desde el punto de vista energético. Los cromosomas intactos. El retorcido extra del superenroIDI. M.). 38. Los álcalis y el calor relajan el. Morrow. El cromosoma contiene alrededor de unos 50 lazos retorcidos. N. DIMERO PARCIALMENTE SUPERENROLlADO 30. 127: W\orcel.E. J. 1 .al reciente éxito logrado al aislar la estructura intacta3 0-31. En su lugar. A. Burgi. de acuerdo con un punto de:vista26. por proteínas con mna gran afinidad por DNA monocatenari028. D.V. (1973) J. organizados en una estructIura con múltiples enrosca- miento s (Fig. La rotura de una cadellila.18a).A. y Burgi. 27. J.A.22 La molécula superenroIlada desplegada puede tener un 23 CAPITULO I : número extra de pares de bases distribllJiidosal azar a lo largo de su Estructura y longitud. Fraser. E.F. y Waring. K. H.M.j.. y Wom:el.amientopuede relajarse de varias maneras. espermidina). 12.J. pero esta vez con revueltas en sentido positivo.u de longitud. 3l. A. La rotura de U!J11 solo filamento de un lazo. (1973) CSHS 38. por lo cual se requieren 30 molécuillasde bromuro de etidio por paso de rosca. aunque no necesariamente más correcta explicacoon para la observada capa- cidad del DNA viral superenroIlado p¡mraligarse o. plegados. y Vinograd. 6. Est"eroplastos preparados por degradación de la pared celular con lisozíma. coZ¡ se deben: . f . 419: ilIavidson. L.68. y Berg. permanecen unidos a fragmen- tos de membrana. . superenrollamiento.Kato.. R.Se ha calculado que cada molécula de bromuro de etidio desenroSlCa 120 el superenrollamien- to. (1970) JMB 47. Miles. y FIGURA 1-17 Hecht.Crawford.Worcel. A través de cualquiiera de estos dos puntos de vista resulta claro que en el DNA <cerrado covalentemente y superenrollado negativamente. 71.. El DNA procariótico esta organÍillado como un cromosoma pero sin histonas. (1972) JMB. todo desrcansa sobre el RNA. 29. :!3.J. (1967) JMB 25.y Ro..653. Virol. en presencia de una elevada concentración de sales O dé una poliarnina (por ej. O. la ligazón enzimática de los extremos rotos restauraría el círcUilo covalente. P. Formas superenrollada y relajada del ONA mitocondrial de células de riiión de binton. Los intentos realizados para ver el plegado del DNA en el cromosoma de E. 43: Delius. W. L. vr11'ol. al lograr intercalar. 28. (1973) CSHS. E. hamster muy joven.E. G. y Denharde. Después de la descarga 'completa del superenrolla- Íniento negativo. (1973) BBA 308.Stonington. de una sola manera.T. D.107.Beard. (1971) PNAS 68.J. (1973) J. una molécula plana como la del bromuro de etidio. La lomgitud del oontorno del monómera es de unas 5 micras (Cortesía del Praf.E.

Composición de bases32 24 mediante la acci6n de una DNasa permite el relajamiento de ese 25 CAPITULO 1: lazo en particular. La Bases Función del o con RNasa H. La regla de la compleÍnentariedad dicta también que el 1555 contenido relativo de G-C en el duplex es igual en cualquiera de los dos filamentos.127). 1 . Las b) medidas de la estabilidad del DNA duplex. b).50 (en el hombre es 0.3 y 0. . El contenido G-C es el mismo en todas las células de una RNasa A especie.D.40).Chargaff.por completo el cromoso. sin afectar a los otros (Fig. la densidad de flotación medida es una función directa del contenido en G-C32. la acción de la RNasa A (sobre regiones de cadena única) y de la ción.lSb). 33. El DNA procedente de especies bacteria- Un esquema para el cromosoma replegado de E. Las cadenas individuales con composiciones de bases distintivas pueden separarse por Lazo 1 sedimentación de un duplex desnaturalizado. en McElroy.18 toda la longitud del DNA.a Edi. La composición de bases puede determinarse por sedimenta- ción hasta equilibrio en cloruro de cesio. La amplia e inmediata aceptación del modelo de bases apareadas. el contenido de G-C en los organismos superiores es generalmente inferior a 0. establecen que todas las SECCION 7 : Tratamientos con RNasa A. todos contiene unos 50 superenrrollados. La composición de bases de los DNAs se expresa generalmente por su contenido en G más C. En un duplex esta es la fracción molar de pares G-C (es decir el\ número de pares G-C dividido por el número total de pares de bases). y Glass. A y ty (La base química de la herencia) Johns Hopkins Press. (1972) JMB 71. que actúa sobre el RNA de un híbrido DNA.gado (Según Worcel. Selected Data for Molecular Blo. construcción de un modelo demostró el apareamiento de bases A con T y G con C mediante enlaces de hidrógeno.coZ¡. I . pero varía considerablemente de una especie a otra. tales como el punto medio de la fusión térmica. no fué sin embargo universal y tres años después de su a) publicación fué propuesto un modelo "en el que dos cadenas de DNasa polinucleótidos estan unidas a un polipéptido. Estos resultados cetónicas. organiZados porun núcleo central de RNA. donde oscila entre 0. B. Datos Seleccionados para Biología molecular) 2.Sober. frecuencia) de cada una de las cuatro bases standard (A. W. El contenido (fracción molar. El tratamiento con RNasa despliega . de tal manera que 15005 12005 8505 cada grupo carbonilo del péptido está ligado por un enlace de hidrógeno al grupo amínico en posición 6 de la adenina o de la cf@ citosina y cada grupo amínico del péptido se une al grupo cetónico RNasa en 6 de la guanina o del uracilo (o de la timina)"33. Burgi.A. Esta sugieren que las columnas vertebrales del RNA forman el núcleo notable característica de la composición de bases del DNA no se que organiza los lazos de DNA dentro del cromosoma condensado comprendió hasta después de haberse descubierto. H. para el DNA. El cromosoma nas (procarióticas) fragmentado en varios cientos de ped¡lzos. despliegan el cromosoma (Fig. co/i. (eds) (1975) The Chemlcal basis of Heredi. The Chemical Rubber Co. ma para darle la forma que sedimenta lenttamente. Baltimore. Los resultados de logy (Manual de Bioquímica. Lazo Z especialmente entre las bacterias. La acción cortante de las DN relaja lazos individuales y ellos de un tamaño aproximado coITespondiente a 104 pares de reduce progresivamente el valor de 'sedimc:ntación (S) desde 1550 a 155. Cleveland (Sección H). 7. El número de purinas es igual al de pirimidinas. RNasa H (sobre RNA hidridado con DNA) sugiere un modelo de dis.7. 32. 521. T. E. Composición de Estructura y especies tienen una equivalencia de A para T y de G para C. que actua sobre RNA monocatenario. Los análisis del DNA realizados. G YC) en el DNA duplex establece el / contenido de cada una de las otras tres. E. (ed) (1970) Handbaok af Biochemistry. posición del RNA en el cromosoma ple. p. proporción del contenido de bases amínicas se ajusta a la de bases DNA RNA. pueden también coITelacionarse RNasa H directamente con el contenido G-C.ISa. Las bases pueden estar o no distribuidas uniformemente en FIGURA 1. cuando la de E..

P. D.6.ATAAACT . Debemos resolver y reconstituir cada una de las funciones nuación. J. Sección 5) y I en un sitio potencialmente regulador cerca del gen de un tRNA 1. Poon.. C.. El 5' . puede lograrse facilmente determinando la en G-C. que le puede O en lO « conferir importantes características estructurales secundarias. B.19)34. num Press.Schachat. D.68 1.. y Littman. Funciones minado las secuencias de las tres bandas satélites. DENSIDAD Un aspecto de la composición de bases. 1316. El poli d (A-T) semejante al del satélite (véase Capítulo 4. Jr.S. H.Brown. pobremente FIGURA 1-19 comprendido pero sin embargo casi invariable. es la' modificación DNA nuclear embrionario de Drosaphila melanogaster de ciertas bases. F.. Estructura y DNA fragmentado de organismos superiores (eucarióticos) está Funciones Función del DNA con frecuencia distribuido de manera asimétrica. T. distribuidos entre ellos36. Cytogen (Hamkalo.GGACACAGCG -3' DNA del pico más pequeño o correspondiente a los hombros del Una medida cuantitativa de la fracción total de DNA que esta pico principal se llama DNA satélite y puede tener un contenido fuertemente reiterada.S. o: lO a: Un interesante aspecto de la secuencia del DNA... En los DNAs de vegetales y animales. 33. 1 . Mazrimas. Mal. ~~~pal .ACAAACT . 284. eds) PIe. Sección 15) puede constituir hasta una cuarta parte de DNA total. 70. Sin embargo. 563. F..21. de acuerdo con todas sus funciones y lo inverso es igualmente cierto. I . como admitimos que hay un creciente 5' . Satélite es una simetría rotacional de 1800 con sede en estas cortas se- 0. . En una banda « > satélite de DNA de cierto sapo sudafricano (Xenopus laevisJ los ¡: « genes para el RNA ribosómico estan repetidos cientos de veces a lo . ¡ 26 bases. (Cortesía del Prof. por metilación (Capítulo 2.. Sección 10)4o. Ejemplos de tales secuencias se encuentrán en los sitios de restricción y modificación del DNA (Capítulo 9. los genes para el RNA ribosómico se han encontrado en una banda satélite bien discreta y con frecuencia allí se hallan reiterados muchas veces. Evans. R. con solo un tres por ciento de residuos de G y C protegen al DNA frente a las nucleasas intracelulares (Capítulo 9). es esencialmente un copolímero de A análogos en los DNAs bacterianos y de fagos. Las secuencias alineadas como se mUestra a conti. E. D.S. Aunque la función genética de los DNAs satélites esta en su mayor parte indeterminada. núm. 229. sedimenta hasta equilibrio en un gradiente de densidad en Una banda satélite principal :¡ue representa el 11 por ciento del 27 cloruro de cesio. el DNA de la rata canguro posee la siguiente secuencia repetitiva de SECClON 8: CAPrrULO 1 : un decanucleótid038. R.A. 2..Gall.J. Wensink. (1973) 34. 63. PNAS.3' 38.y Hatch. la estructura del DNA debe'comprenderse que se trata de un particular heptanucleótido repetido unas 107 veces3 7. JMB. T. C. más del 10 por ciento de los residuos de C llevan un grupo ~' -metilo y un En un satélite de DNA de ratón35 pueden reiterarse ciertas pequeño porcentaje de los residuos de purinas tienen grupos secuencias hasta 106 veces.3' célula. ScL Amer.D.H. Fry.N.Pyeritz. formando un pico simétrico. ha sido desnaturalizado.2 . Por el contrario. cuencias. D. considerablemente diferente del correspondiente al DNA velocidad con que se reasocia (reanneal) el DNA fragmentado que principal. (1973) 36. 39. Trautner.H. Brown. y Papaconstantino. YHogness. Hay también modificaciones de bases y sustituciones por varias especies de cangrejos. largo del DNA.Swartz.70 1. K. y Thomas. 40..Evans. W. Hogness). los genes 18 S Y 28 S para el RNA estan separados « ¡j por segmentos (espaciadores) de relativamente alto contenido en z c-c3 9.. Sección 4).J w a: 0. Idriss. comprobándose En último término..0. (1973) CSHS 38. (1972). P. I 1.D.C. A. Un satélite poco corriente. Whitcome.J. 2642. (1973) en Symp. 371.E. hallado en N-metilo. S. con uno o más picos más pequeños separados del pico principal (Fig. y Jordan. M.ACAAATT . 35. 57.3' número y variedad de funciones del DNA y como conocemos que 5' .A.J. (1972) JBC237.. y Komberg. 37. (1973) JMB 74. Salser. (1971) 'Chromosoma. están estrechamente relacionadas: de la célula y comprender su localización y regulación dentro de la 5' . Lee.72 (Capítulo 11. generalmente C. las cuales se cree que y T alternantes.E. En una especie de Drosophila se han deter- 8.

Por tanto.4). c. t a+ b -t representan la disposición de estos genes en un segmento de DNA. definidas a grosso modo. Proteínas desenrollantes. los mutantes erróneos y sin ~IIIIIIIIIIII sentido pueden tener pérdidas. enumerar 3 Transcripción n(rNTP). El hecho de hallarse un nivel .mensajero auxiliar.LLolil 1I11111111I RotUra J) desajustes '-. Modificación DNA~DNA meti!ado o glicosilado 7 1) La actividad enzimática medida in vitro es solamente una Restricción 5 DNA -fragmentos de DNA estimación grosera de su actividad en la célula y no necesita estar relacionada con sus funciones in vivo. Replicación enzimáticas in vivo. Por otra parte.5. Ligasas. La actividad enzimática perdida por completo por deleción de un gen ~IIIIIIIIIIII puede también ser remplazada por un sistema enzimático R.DNA 1. Pero a medida que vayan surgiendo. Transcripción inversa . diferentes funciones a+ pueden implicar a muchos de los mismos enzimas. Exonucleasas y endpnucleasas. Transcriptasa inversa (DNA polimerasa dependiente de RNA). Otra barrera Funciones del DNA y enzimas SECCION 8 : Estructura y posterior para resolver el problema sre basa en artefactos de Funciones Función del organización académica. l .Enzimas enzimático alto o bajo. 6. b+ tener en la célula localizaciones y papeles completamente diferen- tes. pueden =:::::::::~:::::::::::: a.4. errores.hueco FIGURA 1-20 Algunas funciones del DNA . Replicación n(dNTP) + DNA-+ (dNMP)n.- RNA 11" I11111-11111111 hibrido DNA III) Las funciones. Funciones Esquema Enzimas implicado: DNA ción celular. y muchas funciones diferentes pueden tener pasos individuales en comun. formación crucial para evaluar el papel de las actividades 7. más que en la maturaleza de la organiza. esta meta podría parecer inalcanzable. II) Los estudios genéticos proporcionando mutantes con 5. Meti! y glucosiltransferasas. 4. Tabla l .4. 5. Sin embargo. Reparación lllli 1. sin sentido y con deleciones. DNA Polimerasas (dirigidas por DNA ó dependientes de DNA). de la acción de un enzima y su control pueden ser diferentes in 2. Transcripción tener la tasa de crecimiento y una conducta fisiológica buena. y bajos niveles de determinada actividad enzimática en la célula pueden ser suficientes para man- 2. se irán sugiriendo funciones fisiológicas para cada uno a+b-t+ a-b+ c-~a+b+c+ + a-b-c- de los enzimas. Recombinación las actividades enzimáticas que parecen similares in vitro. La estructura del DNA es estudiada por químicos.28 el número de enzimas que se necesitan para catalizarlas se TABLA 1-4 29 CAPITULO 1 : multiplica.20. 3. 3. su función por biólogos y los enzimas por biioquímicos. 4. Como en los Transcripción inversa n(dNTP)~(dNMP)n 2 capítulos sucesivos se consideran con más detalle las funciones y Recombinación t DNA +DNA -DNAs 1.6 los enzimas. 6 DNA Puede resultar de utilidad en este primer capítulo. La naturaleza específica 1. hincapié en las limitaciones para asi¡gnar a cada enzima sus Reparación DNA (con defecto ~DNA (reparado) 1. S. vivo.pueden proporcionar in.4. (fNMP)n las ideas actuales acerca de las funciones del DNA y los enzimas RNA que actuan sobre él (Fig. incluyen muchos pasos individuales. 1. no prueba su estado de actividad en la célula. 3.5 funciones. se hará -ra+b-c++a-b+c-. RNA polimerasas (RNA polimerasa dependiente de DNA). e incluso ningun nivel de enzima.